Name: murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm
Uploaded: 2019-08-24T15:00:00
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この研究は、AHAサイエンティスト開発助成金14SDG18730000(M.S.)、NIH K08 HL098560(G.A.)およびRO1 HL081629(G.R.U.)助成金によって支援されました。このプロジェクトは、研究と教育のための胸部外科財団(TSFRE)研究助成金(PI:G.アイラワディ)によって支援されました。コンテンツは著者の責任のみであり、必ずしもNHLBIまたはTSFREの見解を表すものではありません。アンソニー・ヘリングとシンディ・ドドソンの知識と技術的専門知識に感謝します。

動物プロトコルは、バージニア大学の施設動物管理および使用委員会(No.3634)によって承認されました。
1. 麻酔と挿管の誘導
<ol><li>呼吸が目に見えて遅くなるまで、8-10週齢の雄C57BL/6マウスを5%のイソルランと酸素混合物の連続的な流れを持つ閉じたチャンバーに置きます。 注:マウスの異なる株、性別および年齢は、実験プロトコルに応じて使用することができる。雌...

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	<li>Coady, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+appropriate+size+criterion+for+resection+of+thoracic+aortic+aneurysms.">What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).</li><li>Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm:+A+comprehensive+review.">Abdominal aortic aneurysm: A comprehensive review.</a> Experimental and Clinical Cardiology. 16 (1), 11-15 (2011).</li><li>Bickerstaff, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thoracic+aortic+aneurysms:+a+population-based+study.">Thoracic aortic aneurysms: a population-based study.</a> Surgery. 92 (6), 1103-1108 (1982).</li><li>Cheng, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+aortic+repair+versus+open+surgical+repair+for+descending+thoracic+aortic+disease+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+comparative+studies.">Endovascular aortic repair versus open surgical repair for descending thoracic aortic disease a systematic review and meta-analysis of comparative studies.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (10), 986-1001 (2010).</li><li>Walsh, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+stenting+versus+open+surgery+for+thoracic+aortic+disease:+systematic+review+and+meta-analysis+of+perioperative+results.">Endovascular stenting versus open surgery for thoracic aortic disease: systematic review and meta-analysis of perioperative results.</a> Journal of Vascular Surgery. 47 (5), 1094-1098 (2008).</li><li>Absi, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+patterns+of+gene+expression+distinguishing+ascending+aortic+aneurysms+from+abdominal+aortic+aneurysms:+complementary+DNA+expression+profiling+in+the+molecular+characterization+of+aortic+disease.">Altered patterns of gene expression distinguishing ascending aortic aneurysms from abdominal aortic aneurysms: complementary DNA expression profiling in the molecular characterization of aortic disease.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 126 (2), 344-357 (2003).</li><li>Ailawadi, G., Eliason, J. L., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+concepts+in+the+pathogenesis+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Current concepts in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Vascular Surgery. 38 (3), 584-588 (2003).</li><li>Ikonomidis, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">A murine model of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Surgical Research. 115 (1), 157-163 (2003).</li><li>Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+promotes+atherosclerotic+lesions+and+aneurysms+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1605-1612 (2000).</li><li>Trachet, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending+Aortic+Aneurysm+in+Angiotensin+II-Infused+Mice:+Formation,+Progression,+and+the+Role+of+Focal+Dissections.">Ascending Aortic Aneurysm in Angiotensin II-Infused Mice: Formation, Progression, and the Role of Focal Dissections.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (4), 673-681 (2016).</li><li>Johnston, W. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+interleukin-1beta+decreases+aneurysm+formation+and+progression+in+a+novel+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">Inhibition of interleukin-1beta decreases aneurysm formation and progression in a novel model of thoracic aortic aneurysms.</a> Circulation. 130 (11), 51-59 (2014).</li><li>Pope, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+Receptor+Inhibition+Prevents+Descending+Thoracic+Aortic+Aneurysm+Formation.">Interleukin-6 Receptor Inhibition Prevents Descending Thoracic Aortic Aneurysm Formation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 100 (5), 1620-1626 (2015).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Ailawadi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nonintrinsic+regional+basis+for+increased+infrarenal+aortic+MMP-9+expression+and+activity.">A nonintrinsic regional basis for increased infrarenal aortic MMP-9 expression and activity.</a> Journal of Vascular Surgery. 37 (5), 1059-1066 (2003).</li><li>Ruddy, J. M., Jones, J. A., Spinale, F. G., Ikonomidis, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+heterogeneity+within+the+aorta:+relevance+to+aneurysm+disease.">Regional heterogeneity within the aorta: relevance to aneurysm disease.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 136 (5), 1123-1130 (2008).</li><li>Trigueros-Motos, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryological-origin-dependent+differences+in+homeobox+expression+in+adult+aorta:+role+in+regional+phenotypic+variability+and+regulation+of+NF-kappaB+activity.">Embryological-origin-dependent differences in homeobox expression in adult aorta: role in regional phenotypic variability and regulation of NF-kappaB activity.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33 (6), 1248-1256 (2013).</li><li>Lu, G. S. G., Davis, J. P., Schaheen, B., Downs, E., Roy, R. J., Ailawadi, G., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+chronic+advanced+staged+abdominal+aortic+aneurysm+murine+model.">A novel chronic advanced staged abdominal aortic aneurysm murine model.</a> Journal of Vascular Surgery. 66 (1), 232-242 (2017).</li></ol>

胸部および腹部大動脈は、細胞的および発生的に異なり、動脈瘤疾患14、15、16に関連する。したがって、TAAを研究するための特定の動物モデルが必要である。他のマウスdTAAモデルは8が公開されているが、我々は本当に動脈瘤(50%以上の膨張)と考えることができる下降胸部大動脈拡張を作成する唯一のモ?...

この方法の目的は、大動脈瘤形成中の胸部大動脈下のマウスの発達、病態生理学、および構造変化を研究することである。我々のモデルは、それによって様々な遺伝的および薬理学的阻害剤の試験を可能にするマウスの胸部大動脈瘤(dTAA)を誘導する再現性と一貫性のある方法を提供する。この研究は、dTAA疾患を有するヒトの生存可能な治療戦略に翻訳することができる薬物および遺伝子治療を同定するのに役立つ。
dTAAは、胸部大動脈の壁が弱くなり、引き裂いたり破裂したりすると臨界直径に達するまで時間の経過とともに拡張する場合に形成される。臨床的には、dTAAは沈黙の中で進行することができ、大動脈壁の構造が歪むまでサイズが大きくなりますが、最終的には失敗し、致命的な結果をもたらします。関連して、症状は通常、動脈瘤が危険なサイズ(100-150%膨張)に達し、解剖または破裂のリスクが高い場合にのみ発症する1、2。dTAA破裂は、ほぼ普遍的に致命的な3であり、選択的外科的修復は有意な罹患率4、5を運ぶ。さらに、ほとんどの患者は、外科的修復6、7の前に約5年間大動脈瘤の診断を運ぶ。このウィンドウは、非外科的に介入する都合の良い時間を表します。したがって、dTAAの進行を治療または遅らせる医療療法が必要であり、動脈瘤研究の分野に大きな進歩を表すだろう。dTAA病因の不完全な理解のため、現在利用可能なdTAAの治療法はありません。
過去20年間、いくつかのdTAA動物モデルが開発されましたが、これらのモデルはそれぞれ私たち自身とは異なり、堅牢な動脈瘤を生み出しませんでした。私たちの最も類似したマウスdTAAモデルは、大リモコンのアドベンティシアにCaCl2の直接適用を含むイコノミディスら8によって開発されました。私たちのモデルは、イコノミディスによって定められた技術の多くから適応されたが、私たちのモデルは3つの別々の方法でユニークです。まず、我々のモデルでは、大器はCaCl2暴露の15分間と比較して、3〜5分間局所エラスターゼにさらされる。第二に、大動脈拡張は、CaCl2モデルにおける16週と比較して、2週間で起こる。最後に、我々のモデルは、CaCl2アプリケーションによって生成される20-30%の大動脈拡張と比較して、一貫して約100%の拡張の動脈瘤を生成します(これは、大動脈の増加として定義されているように、本当に動脈瘤とは考えられません)直径 >50%)アンジオテンシンIIの注入で強い動脈瘤を形成するApo Eノックアウトマウスのような動脈瘤形成の他の非外科的マウスモデルがある。しかしながら、これらのマウスは、下降胸部大動脈9、10において特に動脈瘤ではなく、上腎または上昇胸部大動脈瘤を発症する。
このプロトコルの合理的な方法は、マウスモデルでdTAAを研究するためのシンプルで安価な、時間の適切な方法を持つことです。マウスモデルは、他の血管疾患に影響を与えることがわかった多くの遺伝的および細胞特異的ノックアウトを利用するユニークな機会を提供します。当社の特定のTAAモデルの使用は好評を得ており、それを利用した実験は、インパクトの大きなジャーナル11,12に掲載されています。この時点で、モデルは、腹部大動脈瘤(AAA)マウスモデルに有意な影響を及ぼした遺伝的および薬理学的治療を調査するために使用されてきた。しかし、当研究室ではdTAAモデルの利用が拡大しており、ヒトの標的治療として利用できるdTAA形成に特有の標的を見つけています。
このモデルはマウスのマイクロ外科機能がある実験室のために最も適している。技術的には困難ですが、以前の手術経験のない研究者でも一貫して実行できます。マウスの外科経験のない研究者のためにモデルはおよそ20の手術セッション(またはおよそ50のマウス)で習得することができる。以前の外科経験を持つ研究者のために、モデルは5つの手術セッション(およそ20マウス)で習得することができる。私たちは、高品質のビデオで、習得する時間をさらに減らすことができると信じています。熟練が達成された後、処置は外科のための35分および終末収穫のための20分で完了することができる。私達の実験室の外科医は5-10%の手術の死亡率と1日あたり10-12の完全な外科を完了できる。死亡の最も一般的な原因は、解剖中に胸部、麻酔毒性、または大動脈の裂傷に入ると肺損傷である。dTAAの研究に加えて、このモデルはまた胸部の他の介入を研究する研究者のための胸部大器および肺のヒラムへの安全で、容易なアクセスのためのガイドとして役立つ。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:761px;" width="760">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Angiocatheter (22G)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Used for ET Tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Dumont Tweezers; Pattern #7 x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-4982</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Graefe Tissue Forceps</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Harms Forceps x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Intracardiac Needle Holder; Extra Delicate; Carbide Jaws; 7&#34; Length</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-7800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;KL 1500 LED Light Source</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">150-400</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;M205A Dissction Microscope</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">CH 94-35</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Iris Scissors, 11cm, Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:161px;">500216-G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Metal Clip board</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Use with the Mouse Retractor Set&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Mouse Retractor Set</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;">SURGI-5001</td>
			<td style="width:167px;">Need 2 short and 1 tall fixators</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:243px;">Mouse Ventilator MiniVent Type 845, 115 V, Power Supply with US Connector</td>
			<td style="width:191px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">73-0043</td>
			<td style="width:167px;">MiniVent Ventilator for Mice (Model 845), Single Animal, Volume Controlled</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:191px;">Elastase from porcine pancreas</td>
			<td style="width:161px;">E0258-50MG</td>
			<td style="width:167px;">Can be purchased in various size bottles</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:191px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:161px;">18000-00</td>
			<td style="width:167px;">Recommend using rechargable AA batteries</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Spring Scissors, 10.5cm</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right" style="width:161px;">14127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Steril Swabs (Sponges)</td>
			<td style="width:191px;">Sugi</td>
			<td align="right" style="width:161px;">31603</td>
			<td style="width:167px;">Can be cut to size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Surgi Suite Surgical Platform</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Attach to clip board&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Tech IV Isoflurane Vap</td>
			<td style="width:191px;">Jorgensen&#160;Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:161px;">J0561A</td>
			<td style="width:167px;">Anesthesia vaporizer&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm

疾病対策センターによると、大動脈瘤(AA)は1999年から2016年にかけて、すべての人種と性別で主要な死因と考えられていました。動脈瘤は、進行性の弱体化と大動脈の最終的な膨張の結果として形成され、重大な直径に達すると破裂または裂傷する可能性がある。胸部の下降大動脈瘤の動脈瘤は、下降胸部大動脈瘤(dTAA)と呼ばれ、米国における動脈瘤症例の大部分を構成する。含まれていないdTAA破裂はほとんど普遍的に致死的であり、選択的修復は罹患率および死亡率が高い。我々のモデルの目的は、dTAAの病態生理学を解明し、成長を止めるか、dTAAのサイズを小さくする分子標的を探すことを、具体的にdTAAを研究することです。胸部病理を正確に研究するマウスモデルを有することにより、標的治療を開発してdTAAを特異的に試験することができる。この方法は、外科的暴露後の外マウス大動脈壁に直接ブタ膵臓エラスターゼ(PPE)を配置する上に基づいている。これは、大動脈壁を弱め、数週間から数ヶ月にわたって動脈瘤形成を可能にする破壊的で炎症性反応を作成します。マウスモデルには限界がありますが、dTAAモデルは予測可能なサイズの堅牢な動脈瘤を生成します。さらに、このモデルは、dTAAの成長を停止したり、破裂を防ぐことができる遺伝的および医薬的標的をテストするために使用することができる。ヒト患者では、このような介入は動脈瘤破裂を避け、外科的介入が困難な場合に役立つ可能性がある。

我々のプロトコルの適用は生理食べ物の制御と比較されるマウスの強いdTAAで起因する。開発されたTAAは、形状がフシフォームであり、大通りの処理部(図1および図2)11でのみ発生する。図2は、組織収穫時のビデオマイクロメトリー測定の例を示す。方程式 1 を使用すると、この例では大動脈拡張が 130% です?...

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Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

我々は、マウスにおいて一貫して堅牢な下降胸部大動脈瘤を誘導する外科的プロトコルを説明する。この手順は、左胸部切読術、胸部大動脈暴露、および大動脈壁上のブタ膵臓エラスターゼに浸したスポンジの配置を含む。

局所エラスターゼ誘発下下胸部大動脈瘤のマウス外科モデル

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

このプロトコルはマウスの一貫したサイズおよび位置の強い胸部大動脈瘤を作り出すことができるし、マウスの胸部への安全なアクセスのためのガイドとして役立つ。このプロトコルは、他のモデルと比較して合理的な時間をかけてマウスで胸部大動脈瘤を産生するための簡単で一貫した方法です。8〜10週齢の雄c57黒6マウスで適切なレベルの沈着を確認した後、マウスを右横型の褥瘡の位置に置き、前足が鼻に合わせるように右腕をロストリーにテープで貼ります。尾を引いて右腕と尾の間に緊張線を作り、背骨の延長を生み出し、左足を自然な位置にテープで貼ります。その後、ロールガーゼの上に左腕を腹腹腔にテープで貼ります。手順を開始する前に、バリカンを使用して左肩から左腹部まで左脇腹を剃ります。コットンチップアプリケーターを使用して最初のベタダイン溶液をブラッシングし、次に手術部位で70%エタノールを磨きます。皮膚が乾燥したら、動物の上に無菌ドレープを置きます。ヘモトラックスの中間点で2センチメートルの横切開を行い、手持ちの電気コーサリーを使用して、肋骨が見えるまで筋肉層を分割します。10~15倍の倍率の下で、リブ間の2ミリメートルの部分を直接焼灼し、焼灼部分を通して胸膜空間に解剖するために、リブ空間に生理食いした細かい綿チップアプリケーターを使用します。生理用水性を加えた3本の2ミリメートルスポンジを胸郭に入れ、肺を崩壊させる。その後、横隔膜が腹腔内に見え、切開がパラスピナスの筋肉から数ミリメートル離れるまで、はさみを使用して開口切開術を広げます。大大通を露出させるために、胸部レトラクターを胸部切開部に入れ、肺の表面からスポンジを慎重に取り除きます。生理布地で肺を覆い、6本4ミリメートルのスポンジで端がロストリーとコードを指し示し、スポンジに広く平らな肺レトラクターを置きます。次に、下降胸部大動脈が露出するまでレトラクタ腹通りを静かにスライドさせ、7番鉗子を使用して大動脈から約5ミリメートルの結合組織と脂肪を解剖する。エラスターゼを適用するには、まず、マイクロピペットを使用して、1ミリメートルのスポンジで0.5を1ミリメートルのスポンジで12マイクロリットルのブタ膵臓エラスターゼで飽和させ、大動脈の露出した表面にスポンジを置きます。3〜5分後、番号7鉗子を使用してエラスターゼスポンジを取り外し、肺リトラクタを取り外します。胸腔を約1ミリリットルの滅菌生理食塩水で灌漑する。肺スポンジを取り出し、残りの生理的灌漑を吸収するために2/2インチのガーゼを巻いて使用します。リブレトラクタを取り外し、3つの中断された6oh非吸収性縫合糸で肋骨を処分し、縫合糸を縛らずに各縫合糸の緩い結び目を結びます。肺を再膨張させた後、縫合糸を結び、ランニング5oh吸収性編組縫合糸で筋肉層を再近似します。7〜10の中断5oh非吸収性縫合糸で皮膚を閉じます。その後、完全な債務まで動物を監視します。適切な実験終点では、はさみを使用して、腹腔に入らないので、左側面から中央腹部に皮膚の内側を切開する。背側左脇腹から左肩に皮膚を切開し、腋窩から胸骨まで90度の角度で切開します。焼灼器を使用して、マウスの腹側に向かって皮膚のフラップを解剖して左の眼窩を露出させ、ハサミを使用して腹側から下側方向に左肋骨に沿って腹部に入り、左横隔膜の下側を露出させます。ダイヤフラムの最も外側の端が開かない場合は、最も外側の端に横隔膜を切開します。この穴に焼灼の先端を置き、肋骨マージンからxiphoidプロセスに横隔膜を焼灼し、湿った細かい先端の綿チップアプリケーターを使用して、肺を任意の癒着から胸壁に静かに解放します。肺が邪魔にならないようにしながら、電気焼灼器を使用して肋骨と胸壁を肋骨と胸壁を最初の肋骨まで、後ろ線から腋窩半ばまで切り取りますが、大口から少なくとも2ミリメートルです。最初の肋骨の上縁に沿って切り、胸郭を露出させるために腹通から肋骨のケージを反射する。肺にレトラクターを置き、内側を引っ張ります。横隔膜にリトラクターまたは生理食音を濡らしたガーゼを置き、できるだけ大高を露出させるために尾を描きます。乾燥した綿先端のアプリケーターを使用して、大動脈瘤と影響を受けない遠位セグメントから接着を取り除き、ビデオミクロメトリーを使用して、影響を受けない制御セグメントの直径とエラスターゼ処理動脈瘤の最も広い部分を測定します。大間を収穫するには、治療されたセグメントに遠位するだけで傷ついて容器をつかみ、はさみを使って鉗子に遠位を切ります。大動脈を脊柱から解剖し、治療したセグメントに近位の血管を切り取って動脈瘤組織を取り除く。次に、結核注射器と針を用いて、大動脈腔を生理食音で洗浄し、計画下流実験分析に従って試料を処理する。開発された胸部動脈瘤は、形状がフシフォームとして、大動脈上の処理部分にのみ発生する。この代表的なビデオミクロメトリー測定では、大動脈拡張は組織収穫時に130%であると判断した。実際、エラスターゼ処理マウスは、対照野生型マウスと比較して14日目に観察された最大拡張を用いて3日目、7日目、14日目、21日目の治療後に大動脈拡張の有意な増加を示す。組織学的分析は、野生型動脈瘤が薄く断片化したエラスチン繊維を有することを明らかにした。マクロファージおよびインタールキン1-β発現の増加に伴う平滑筋細胞染色も少ない。ネズミの肺は非常に繊細であり、傷害は通常致命的である。胸への最初のエントリで細心の注意を払って、生理的に濡れたスポンジで肺を操作するだけです。このモデルは、下降性胸部大動脈瘤の病因におけるインタールキン1ベータおよびインタールキン6の役割と、それらの遮断がこれらの動脈瘤の非外科的管理を促進する方法を解明するのに役立った。

Research

JoVE Journal

Medicine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

血管内大動脈瘤の修復の新しいマウスモデル

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

脊髄虚血再灌流のマウスモデルにおいて胸部大動脈閉塞によって再現可能対麻痺

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

左前下の動脈の結紮を通して心筋虚血再灌流傷害のマウスモデル

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

マウスを用いた胃食道逆流の外科モデル

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

マウス左前方降順（LAD）冠動脈結紮：心筋梗塞のための改善と簡略化されたモデル

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

外ヴァーサ栄養血管の血流をブロックすることにより腹部の大動脈瘤の齧歯動物モデルの作成

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

弁温存大動脈の大動脈弁再置換術の標準化された技術のルート交換

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Aortopathy β-アミノプロピオニ トリルによる大動脈瘤と解離のマウスモデルでのマイクロ CT 定量分析

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

マウス脳動脈瘤のサイズを調べるために胸部、腹部の大動脈の超音波断層像

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを用いたマウス心筋梗塞モデル

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...