Name: murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm
Uploaded: 2019-08-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

이 작품은 AHA 과학자 개발 보조금 14SDG18730000 (M.S.), NIH K08 HL098560 (G.A.) 및 RO1 HL081629 (G.R.U.) 보조금에 의해 지원되었다. 이 프로젝트는 연구 및 교육을위한 흉부 수술 재단에 의해 지원되었다 (TSFRE) 연구 보조금 (PI: G. Ailawadi). 콘텐츠는 전적으로 저자의 책임이며 반드시 NHLBI 또는 TSFRE의 견해를 나타내는 것은 아닙니다. 우리는 그들의 지식과 기술 적 전문 지식에 대한 앤서니 청어와 신디 도슨 에게 감사드립니다.

동물 프로토콜은 버지니아 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회 (No. 3634)에 의해 승인되었습니다.
1. 마취 및 삽관의 유도
<ol><li>8-10주 된 수컷 C57BL/6 마우스를 5% 이소플루란과 산소 혼합물의 연속 흐름이 있는 밀폐된 챔버에 넣고 호흡이 눈에 띄게 느려질 때까지 5분 동안 하십시오. 참고: 실험 프로토콜에 따라 다른 균주, 성별 및 생쥐의 나이를 사용할 수 있습니다. 암컷 마?...

<ol>
	<li>Coady, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+appropriate+size+criterion+for+resection+of+thoracic+aortic+aneurysms.">What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).</li><li>Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm:+A+comprehensive+review.">Abdominal aortic aneurysm: A comprehensive review.</a> Experimental and Clinical Cardiology. 16 (1), 11-15 (2011).</li><li>Bickerstaff, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thoracic+aortic+aneurysms:+a+population-based+study.">Thoracic aortic aneurysms: a population-based study.</a> Surgery. 92 (6), 1103-1108 (1982).</li><li>Cheng, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+aortic+repair+versus+open+surgical+repair+for+descending+thoracic+aortic+disease+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+comparative+studies.">Endovascular aortic repair versus open surgical repair for descending thoracic aortic disease a systematic review and meta-analysis of comparative studies.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (10), 986-1001 (2010).</li><li>Walsh, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+stenting+versus+open+surgery+for+thoracic+aortic+disease:+systematic+review+and+meta-analysis+of+perioperative+results.">Endovascular stenting versus open surgery for thoracic aortic disease: systematic review and meta-analysis of perioperative results.</a> Journal of Vascular Surgery. 47 (5), 1094-1098 (2008).</li><li>Absi, T. 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R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+concepts+in+the+pathogenesis+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Current concepts in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Vascular Surgery. 38 (3), 584-588 (2003).</li><li>Ikonomidis, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">A murine model of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Surgical Research. 115 (1), 157-163 (2003).</li><li>Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+promotes+atherosclerotic+lesions+and+aneurysms+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1605-1612 (2000).</li><li>Trachet, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending+Aortic+Aneurysm+in+Angiotensin+II-Infused+Mice:+Formation,+Progression,+and+the+Role+of+Focal+Dissections.">Ascending Aortic Aneurysm in Angiotensin II-Infused Mice: Formation, Progression, and the Role of Focal Dissections.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (4), 673-681 (2016).</li><li>Johnston, W. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+interleukin-1beta+decreases+aneurysm+formation+and+progression+in+a+novel+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">Inhibition of interleukin-1beta decreases aneurysm formation and progression in a novel model of thoracic aortic aneurysms.</a> Circulation. 130 (11), 51-59 (2014).</li><li>Pope, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+Receptor+Inhibition+Prevents+Descending+Thoracic+Aortic+Aneurysm+Formation.">Interleukin-6 Receptor Inhibition Prevents Descending Thoracic Aortic Aneurysm Formation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 100 (5), 1620-1626 (2015).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Ailawadi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nonintrinsic+regional+basis+for+increased+infrarenal+aortic+MMP-9+expression+and+activity.">A nonintrinsic regional basis for increased infrarenal aortic MMP-9 expression and activity.</a> Journal of Vascular Surgery. 37 (5), 1059-1066 (2003).</li><li>Ruddy, J. M., Jones, J. A., Spinale, F. G., Ikonomidis, J. 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P., Schaheen, B., Downs, E., Roy, R. J., Ailawadi, G., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+chronic+advanced+staged+abdominal+aortic+aneurysm+murine+model.">A novel chronic advanced staged abdominal aortic aneurysm murine model.</a> Journal of Vascular Surgery. 66 (1), 232-242 (2017).</li></ol>

흉부 및 복부 대동맥은 세포적으로 배아적으로 구별되며, 이는 동맥류 질환14,15,16과관련이 있다. 따라서 TAA를 연구하기 위한 특정 동물 모델이 필요합니다. 다른 murine dTAA 모델이8에 게시되었지만, 우리의 진정한 동맥류 (50 % 이상 팽창)로 간주 될 수있는 내림차순 흉부 대동맥 팽창을 만들 수있는 유일한 모델...

이 방법의 목적은 대동맥류 형성 동안 유방 내림차순 흉부 대동맥의 발달, 병리생리학 및 구조적 변화를 연구하는 것입니다. 우리의 모형은 다양한 유전과 약리학 억제제의 시험을 허용하는 마우스에 있는 흉부 대동맥류 (dTAA)를 유도하는 재현가능하고 일관된 방법을 제안합니다. 이 일은 dTAA 질병을 가진 인간을 위한 실행 가능한 처리 전략으로 번역될 수 있던 약 과 유전자 치료를 확인하는 것을 도울 수 있습니다.
dTAA는 흉부 대동맥의 벽이 약해지고 찢어지거나 파열될 때 임계 직경에 도달할 때까지 시간이 지남에 따라 팽창할 때 형성됩니다. 임상적으로, dTAA는 대동맥 벽의 구조가 너무 왜곡되어 결국 실패할 때까지 크기가 증가하여 치명적인 결과를 초래할 수 있습니다. 이와 관련하여, 증상은 일반적으로 동맥류가 위험한 크기 (100-150 % 팽창)에 도달하고 해부 또는 파열위험이높은 경우에만 발생합니다 1,2. dTAA 파열은 거의보편적으로 치명적인 3, 및 선택 외과 수리는 상당한 사망률을 운반4,5. 게다가, 대부분의 환자는 외과 수선6,7의앞에 대략 5 년 동안 대동맥류의 진단을 전송합니다. 이 창은 비수술적으로 개입할 수 있는 적절한 시간을 나타냅니다. 따라서, dTAA의 치료 또는 느린 진행을 치료 하는 의료 치료 필요 하 고 동맥 류 연구의 분야에 중요 한 발전을 나타낼 것 이다. dTAA 병인의 불완전한 이해 때문에 현재 유효한 dTAA를 위한 아무 의학 처리도 없습니다.
지난 20 년 동안, 몇몇 dTAA 동물 모형은 개발되었습니다, 그러나 이 모형의 각각은 우리 자신과 구별되고 튼튼한 동맥류를 생성하지 않았습니다. 우리와 가장 유사한 뮤린 dTAA 모델은 대강절에 CaCl 2의 직접 적용을 포함하는 Ikonomidis 등8에의해 개발되었다. 우리의 모델은 이코노미디스에 의해 명시된 많은 기술에서 적응되었지만, 우리의 모델은 세 가지 방법으로 독특합니다. 첫째, 우리의 모델에서 대류는 CaCl2 노출의 15 분에 비해 3-5 분 동안 국소 엘라스타제에 노출됩니다. 둘째, 대동맥 팽창은 CaCl2 모델에서 16 주에 비해 2 주 에서 발생합니다. 마지막으로, 우리의 모델은 지속적으로 약 100 % 팽창의 동맥류를 생산,CaCl에 의해 생성 된 20-30 %의 대동맥 팽창에 비해 (이는 진정으로 동맥류로 정의 될 수 없다 대동맥의 증가로 정의 직경 >50%). angiotensin II의 주입으로 강력한 동맥류를 형성하는 Apo E 녹아웃 마우스와 같은 동맥류 형성의 그밖 비 수술 뮤린 모형이 있습니다. 그러나, 이들 마우스는 내림차순 흉부 대동맥9,10에서특별히 동맥류보다는 상신또는 오름차순 흉부 대동맥류를 개발한다.
이 프로토콜에 대한 합리적 은 murine 모델에서 dTAA를 연구하는 간단하고 저렴하고 시간에 적합한 방법을 가지는 것입니다. 마우스 모형은 그밖 혈관 질병에 있는 충격이 있기 위하여 찾아낸 많은 유전과 세포 특정 녹아웃을 이용하는 유일한 기회를 제공합니다. 우리의 특정 TAA 모델의 사용은 잘 수신되었으며 이를 활용한 실험은 고충격 저널11,12에게재되었습니다. 이 시점까지, 모델은 복부 대동맥류(AAA) 뮤린 모델에 상당한 영향을 미쳤던 가능한 유전적 및 약리학적 치료를 조사하는데 사용되어 왔다; 그러나, 우리의 실험실은 dTAA 모형의 사용을 확장했기 때문에, 우리는 인간에 있는 표적으로 한 치료로 이용될 수 있던 dTAA 대형에 유일한 표적을 찾아내고 있습니다.
이 모델은 뮤린 마이크로 수술 기능이 있는 실험실에 가장 적합합니다. 그것은 기술적으로 도전, 그것은 심지어 이전 수술 경험이 없는 연구원에 의해 일관 되 게 실행할 수 있습니다. 뮤린 수술 경험이없는 연구원의 경우 모델은 약 20 회의 수술 세션 (또는 약 50 마우스)에서 마스터 할 수 있습니다. 이전 수술 경험이있는 연구원의 경우, 모델은 5 회의 수술 세션 (약 20 마우스)에서 마스터 할 수 있습니다. 우리는 고품질의 비디오로 숙달 시간을 더 줄일 수 있다고 믿습니다. 숙련도가 달성되면 수술시 35분, 말기 수확을 위해 20분 안에 수술을 완료할 수 있습니다. 우리 실험실의 외과 의사는 하루에 10-12 번의 전체 수술을 완료 할 수 있으며 수술 사망률은 5-10 %입니다. 사망의 가장 흔한 원인은 가슴에 입력시 폐 부상, 마취 독성, 또는 해부 동안 대동맥의 눈물. dTAA 연구 이외에, 이 모형은 또한 가슴에 있는 그밖 내정간섭을 공부하는 연구원을 위한 흉부 대흉 및 폐 hilum에 안전하고 쉬운 접근을 위한 가이드역할을 합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:761px;" width="760">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Angiocatheter (22G)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Used for ET Tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Dumont Tweezers; Pattern #7 x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-4982</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Graefe Tissue Forceps</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Harms Forceps x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Intracardiac Needle Holder; Extra Delicate; Carbide Jaws; 7&#34; Length</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-7800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;KL 1500 LED Light Source</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">150-400</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;M205A Dissction Microscope</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">CH 94-35</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Iris Scissors, 11cm, Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:161px;">500216-G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Metal Clip board</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Use with the Mouse Retractor Set&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Mouse Retractor Set</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;">SURGI-5001</td>
			<td style="width:167px;">Need 2 short and 1 tall fixators</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:243px;">Mouse Ventilator MiniVent Type 845, 115 V, Power Supply with US Connector</td>
			<td style="width:191px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">73-0043</td>
			<td style="width:167px;">MiniVent Ventilator for Mice (Model 845), Single Animal, Volume Controlled</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:191px;">Elastase from porcine pancreas</td>
			<td style="width:161px;">E0258-50MG</td>
			<td style="width:167px;">Can be purchased in various size bottles</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:191px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:161px;">18000-00</td>
			<td style="width:167px;">Recommend using rechargable AA batteries</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Spring Scissors, 10.5cm</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right" style="width:161px;">14127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Steril Swabs (Sponges)</td>
			<td style="width:191px;">Sugi</td>
			<td align="right" style="width:161px;">31603</td>
			<td style="width:167px;">Can be cut to size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Surgi Suite Surgical Platform</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Attach to clip board&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Tech IV Isoflurane Vap</td>
			<td style="width:191px;">Jorgensen&#160;Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:161px;">J0561A</td>
			<td style="width:167px;">Anesthesia vaporizer&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm

질병 통제 센터에 따르면, 대동맥류 (AA)는 1999-2016년의 모든 인종과 남녀 모두에서 주요 사망 원인으로 간주되었습니다. 동맥류는 임계 직경에 도달하면 파열되거나 찢어질 수 있는 대동맥의 점진적인 약화 및 최종 팽창의 결과로 형성됩니다. 가슴에 내림차순 대동맥의 동맥류, 하강 흉부 대동맥류라고 (dTAA), 미국에서 동맥류 케이스의 큰 비율을 구성. 포함되지 않은 dTAA 파열은 거의 보편적으로 치명적이며, 선택적 수리는 사망률과 사망률이 높습니다. 우리의 모형의 목적은 dTAA를 구체적으로 공부하고, dTAA의 병리생리학을 해명하고 성장을 중단하거나 dTAA의 크기를 감소시키기 위하여 분자 표적을 검색하는 것입니다. 흉부 병리학을 정확하게 연구하는 뮤린 모델을 가함으로써, 표적 치료법은 dTAA를 구체적으로 시험하기 위해 개발될 수 있다. 이 방법은 외과 적 노출 후 외부 뮤린 대동맥 벽에 직접 돼지 췌장 엘라스타제 (PPE)의 배치를 기반으로합니다. 이것은 대동맥 벽을 약화시키고 몇 주에서 몇 달에 걸쳐 동맥류 형성을 허용하는 파괴적이고 선동적인 반응을 일으킵니다. 뮤린 모델은 한계가 있지만, 우리의 dTAA 모델은 예측 가능한 크기의 강력한 동맥류를 생성합니다. 더욱이, 이 모형은 dTAA 성장을 체포하거나 파열을 방지할 수 있는 유전과 약제학적 표적을 시험하기 위하여 이용될 수 있습니다. 인간 적인 환자에서는, 이와 같은 내정간섭은 동맥류 파열, 및 어려운 외과 적 개입을 피하는 것을 도울 수 있었습니다.

우리의 프로토콜의 응용 은 식염수 컨트롤에 비해 마우스에서 강력한 dTAA 결과. 개발된 TAA는 대불의 처리된 부분에서만 발생하며 형태가 퍼지포름(도1 및 도2)11이다. 도 2는 조직 수확시 비디오 미세 측정 측정의 예를 나타낸다. 방정식 1을 사용하면 이 예제에서 대동맥 팽창이 130%입니다.
John...

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Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

우리는 마우스에 있는 강력한 내림차순 흉부 대동맥류를 일관되게 유도하는 외과 프로토콜을 기술합니다. 절차는 왼쪽 흉부 절제술, 흉부 대동맥 노출, 대동맥 벽에 돼지 췌장 엘라스타제에 담근 스폰지의 배치를 포함한다.

국소 엘라스타아제의 뮤린 외과 모델은 내림차순 흉부 대동맥류를 유도

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

이 프로토콜은 마우스의 일관된 크기와 위치의 견고한 흉부 대동맥류를 생성 할 수 있으며 뮤린 가슴에 안전하게 접근할 수있는 가이드 역할을합니다. 이 프로토콜은 다른 모델에 비해 합리적인 시간 동안 마우스에서 흉부 대동맥류를 생산하는 간단하고 일관된 방법입니다. 8-10주 된 남성 c57 블랙 6 마우스에서 적절한 수준의 체싱을 확인한 후 마우스를 오른쪽 측면 디큐비투스 위치에 놓고 오른쪽 팔을 로지프를 테이프로 테이프하여 앞발이 코와 일치하도록 합니다.꼬리를 caudally 당겨 오른팔과 꼬리 사이의 긴장 라인을 만들어 척추의 연장을 생성하고 왼쪽 다리를 자연스러운 위치에 테이프로 놓습니다. 그런 다음 왼쪽 팔을 압연 거즈 위에 테이프로 붙인다. 절차를 시작하기 전에 클리퍼를 사용하여 왼쪽 어깨에서 왼쪽 복부까지 왼쪽 측면을 면도합니다.면 팁 어플리케이터를 사용하여 첫 번째 베타다인 용액을 브러시한 다음 수술 부위에 70% 에탄올을 브러시합니다. 피부가 건조하면 멸균 커튼을 동물 위에 놓습니다. 헤모토락스의 중간점에서 2센티미터 측면 절개를 하고 핸드 헬드 전기카우터를 사용하여 갈비뼈가 보일 때까지 근육 층을 나눕니다.10 x 에서 15배 배율 하에서, 갈비뼈 사이에 2밀리미터 부분을 직접 소생시키고, 소작 부분을 통해 흉막 공간으로 해부하기 위해 갈비뼈 공간에 식염수 의 젖은 미세한 면 팁 어플리케이터를 사용합니다. 식염수에 젖은, 3 x 2 밀리미터 스폰지를 흉부에 넣고 폐붕괴를 돕습니다. 그런 다음, 횡격막이 통풍구가 보이고 절개가 파라피누스 근육에서 몇 밀리미터 떨어져 날 때까지 토라코토미를 넓히기 위해 가위를 사용합니다.대마를 노출하려면 갈비뼈 리트랙터를 흉부 절개에 넣고 폐 표면에서 스폰지를 조심스럽게 제거하십시오. 식염수로 폐를 덮고, 6-4밀리미터 스폰지로 끝을 가리키며, 끝은 장미빛과 소굴을 가리키며 스폰지에 넓고 평평한 폐 리트랙터를 놓습니다. 그런 다음, 내림차순 흉부 대동맥이 노출될 때까지 반사트랙터를 부드럽게 밀어 내고 7번 집게를 사용하여 대동맥으로부터 결합 조직과 지방의 약 5밀리미터 부분을 해부한다.엘라스타제를 적용하려면 먼저 마이크로파이프를 사용하여 12마이크로리터의 돼지 췌장 엘라스타아제로 0.5%의 1밀리미터 스폰지를 포화시키고 대동맥의 노출된 표면에 스폰지를 놓습니다. 3~5분 후에 는 7번 의 집게를 사용하여 엘라스테아제 스폰지를 제거하고 폐 방사기를 제거합니다. 멸균 식염수의 밀리리터의 약 절반으로 가슴 구멍을 관개합니다.폐 스폰지를 제거하고 나머지 식염수 관개를 흡수하기 위해 2-2 인치 크기의 거즈 조각을 사용합니다. 갈비뼈 리트랙터를 제거하고 세 개의 중단 된 6-oh 비 흡수 봉합사로 갈비뼈를 분해하고 봉합사를 묶지 않고 각 봉합사에 느슨한 매듭을 묶습니다. 폐를 다시 팽창 한 후 봉합사를 묶고 5 오 흡수 가능한 편조 봉합사로 근육 층을 다시 상사합니다.7-10으로 피부를 닫아 5-oh 비 흡수성 봉합사. 그런 다음, 전체 recumncy까지 동물을 모니터링할 수 있습니다. 적절한 실험적 종점에서 가위를 사용하여 왼쪽 측면에서 중앙 복부까지 내체로 피부를 절개하고 복막에 들어가지 않도록 주의하십시오.등쪽 왼쪽 측면에서 왼쪽 어깨에서 왼쪽 어깨에 피부를 절개하고 축실라를 통해 흉골까지 90도 각도로 절개를 합니다. 소생을 사용하여, 왼쪽 hemothorax를 노출마우스의 복부 측면쪽으로 피부 플랩을 해부하고 좌측 횡격막의 밑면을 노출하는 복부에서 복부에 좌측 비용 여백을 따라 복부를 입력하는 가위를 사용합니다. 다이어프램의 측면 가장 가장자리가 열리지 않으면 다이어프램을 가장 측면 가장자리에서 절개합니다.이 구멍에 소의 끝을 놓고, 희생마진에서 시포이드 공정까지 다이어프램을 소거하고 젖은 미세 한 면 팁 어플리케이터를 사용하여 유착에서 가슴 벽에 대한 폐를 부드럽게 풀어냅니다. 폐가 방해가 되지 않도록 하는 동안, 전기 카우터를 사용하여 늑골 여백에서 첫 번째 갈비뼈, 등쪽에서 중간 축삭선까지 갈비뼈와 가슴 벽을 잘라내고 대동맥에서 적어도 2밀리미터 떨어진 곳에 있습니다. 첫 번째 리브의 우수한 여백을 따라 잘라 헤모토락스를 노출하기 위해 통풍이 잘되는 리브 케이지를 반사합니다.폐에 리트랙터를 놓고 내측으로 당깁니다. 횡격막에 리트랙터 또는 식염수 젖은 거즈를 놓고 가능한 한 많은 대어타를 노출하기 위해 caudally 그립니다. 건조한 면 기울어진 어플리케이터를 사용하여 대동맥류및 영향을 받지 않는 단류 세그먼트에서 유착을 제거하고 비디오 마이크로메트리를 사용하여 영향을 받지 않는 제어 세그먼트의 직경과 엘라스타제 처리 동맥류의 가장 넓은 부분을 측정합니다.대자를 수확하려면, 처리 된 세그먼트에 단지 해저 집게 를 해치기와 용기를 잡고 집게에 탈경을 잘라 가위를 사용합니다. 척수에서 대동맥을 해부하고 동맥류 조직을 제거하기 위해 처리된 세그먼트로 혈관 근위를 절단합니다. 이어서, 결핵 주사기와 바늘을 사용하여, 대동맥 루멘을 식염수로 세척하고 계획된 다운스트림 실험 분석에 따라 시료를 처리한다.개발된 흉부 동맥류는 모양의 fusiform로 발생하며 대동맥의 처리된 부위에서만 발생합니다. 본 대표적인 비디오 미세메트리 측정에서, 대동맥 팽창은 조직 수확시 130%로 결정되었다. 실제로, 형 엘라스타제 처리된 마우스는 대조군 야생형 마우스에 비해 14일째에 관찰된 최대 팽창을 통해 3일, 7일, 14, 및 21의 후처리에서 대동맥 팽창에 현대한 증가를 나타낸다.조직학적 분석에 따르면 야생형 동맥류에는 얇고 단편화된 엘라스틴 섬유가 있습니다. 또한 대식세포및 인터루킨 원베타 발현의 증가로 덜 매끄러운 근육 세포 염색이 있다. 뮤린 폐는 매우 섬세하며 부상은 일반적으로 치명적입니다.가슴에 처음 들어가는 것만으로도 최대한주의를 기울여 식염수로 젖은 스폰지로 폐를 조작하십시오. 이 모델은 내림차순 흉대 대동맥류의 병인에서 인터루킨 원 베타 및 인터루킨 6의 역할을 해명하고 봉쇄가 이러한 동맥류의 비 수술 관리를 용이하게 할 수있는 방법을 설명하는 데 도움이되었습니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

혈관 동맥류 수리의 새로운 쥐과 모델

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

연구

의학

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

척수 허혈 - 재관류의 생쥐 모델에서 흉부 대동맥 폐색에 의해 재생산 할 하반신 마비

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

왼쪽 앞쪽에 내림차순 동맥의 결찰을 통해 심근 허혈 - 재관류 손상의 생쥐 모델

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

마우스와 위식도 역류의 외과 모델

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

쥐 왼쪽 앞쪽에 내림차순 (LAD) 관상 동맥 결찰 : 심근 경색에 대한 개선 및 단순화 된 모델

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Adventitial 바사 Vasorum 관류를 차단 하 여 복 부 대동맥 동맥 류의 설치류 모델의 생성

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

대동맥 밸브 밸브 스페어링 대동맥에 다시 주입의 표준화 된 기술 루트 교체

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Β-aminopropionitrile-유도 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 Aortopathy의 양적 마이크로 CT 분석

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

흉부 및 복 부 대동맥 동맥 류 크기를 결정 하는 쥐에서의 초음파 이미징

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

왼쪽 전방 내림차순 관상 동맥의 영구 결찰을 사용하는 뮤린 심근 경색 모델

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...