Name: murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm
Uploaded: 2019-08-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

Эта работа была поддержана AHA Scientist Development Grant 14SDG18730000 (M.S.), NIH K08 HL098560 (G.A.) и RO1 HL081629 (G.R.U.) грантами. Этот проект был поддержан Торакальной хирургии Фонд исследований и образования (TSFRE) научно-исследовательский грант (PI: Г. Ailawadi). Содержание является исключительно ответственностью авторов и не обязательно отражает мнение NHLBI или TSFRE. Мы благодарим Энтони Херринга и Синди Додсон за их знания и технический опыт.

Протоколы о животных были одобрены Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Университета Вирджинии (No 3634).
1. Индукция анестезии и интубации
<ol><li>Поместите 8-10-недельного мужчину C57BL/6 мышь в закрытой камере с непрерывным потоком 5% изофлуран и кислоро...

<ol>
	<li>Coady, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+appropriate+size+criterion+for+resection+of+thoracic+aortic+aneurysms.">What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).</li><li>Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm:+A+comprehensive+review.">Abdominal aortic aneurysm: A comprehensive review.</a> Experimental and Clinical Cardiology. 16 (1), 11-15 (2011).</li><li>Bickerstaff, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thoracic+aortic+aneurysms:+a+population-based+study.">Thoracic aortic aneurysms: a population-based study.</a> Surgery. 92 (6), 1103-1108 (1982).</li><li>Cheng, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+aortic+repair+versus+open+surgical+repair+for+descending+thoracic+aortic+disease+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+comparative+studies.">Endovascular aortic repair versus open surgical repair for descending thoracic aortic disease a systematic review and meta-analysis of comparative studies.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (10), 986-1001 (2010).</li><li>Walsh, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+stenting+versus+open+surgery+for+thoracic+aortic+disease:+systematic+review+and+meta-analysis+of+perioperative+results.">Endovascular stenting versus open surgery for thoracic aortic disease: systematic review and meta-analysis of perioperative results.</a> Journal of Vascular Surgery. 47 (5), 1094-1098 (2008).</li><li>Absi, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+patterns+of+gene+expression+distinguishing+ascending+aortic+aneurysms+from+abdominal+aortic+aneurysms:+complementary+DNA+expression+profiling+in+the+molecular+characterization+of+aortic+disease.">Altered patterns of gene expression distinguishing ascending aortic aneurysms from abdominal aortic aneurysms: complementary DNA expression profiling in the molecular characterization of aortic disease.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 126 (2), 344-357 (2003).</li><li>Ailawadi, G., Eliason, J. L., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+concepts+in+the+pathogenesis+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Current concepts in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Vascular Surgery. 38 (3), 584-588 (2003).</li><li>Ikonomidis, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">A murine model of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Surgical Research. 115 (1), 157-163 (2003).</li><li>Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+promotes+atherosclerotic+lesions+and+aneurysms+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1605-1612 (2000).</li><li>Trachet, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending+Aortic+Aneurysm+in+Angiotensin+II-Infused+Mice:+Formation,+Progression,+and+the+Role+of+Focal+Dissections.">Ascending Aortic Aneurysm in Angiotensin II-Infused Mice: Formation, Progression, and the Role of Focal Dissections.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (4), 673-681 (2016).</li><li>Johnston, W. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+interleukin-1beta+decreases+aneurysm+formation+and+progression+in+a+novel+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">Inhibition of interleukin-1beta decreases aneurysm formation and progression in a novel model of thoracic aortic aneurysms.</a> Circulation. 130 (11), 51-59 (2014).</li><li>Pope, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+Receptor+Inhibition+Prevents+Descending+Thoracic+Aortic+Aneurysm+Formation.">Interleukin-6 Receptor Inhibition Prevents Descending Thoracic Aortic Aneurysm Formation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 100 (5), 1620-1626 (2015).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Ailawadi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nonintrinsic+regional+basis+for+increased+infrarenal+aortic+MMP-9+expression+and+activity.">A nonintrinsic regional basis for increased infrarenal aortic MMP-9 expression and activity.</a> Journal of Vascular Surgery. 37 (5), 1059-1066 (2003).</li><li>Ruddy, J. M., Jones, J. A., Spinale, F. G., Ikonomidis, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+heterogeneity+within+the+aorta:+relevance+to+aneurysm+disease.">Regional heterogeneity within the aorta: relevance to aneurysm disease.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 136 (5), 1123-1130 (2008).</li><li>Trigueros-Motos, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryological-origin-dependent+differences+in+homeobox+expression+in+adult+aorta:+role+in+regional+phenotypic+variability+and+regulation+of+NF-kappaB+activity.">Embryological-origin-dependent differences in homeobox expression in adult aorta: role in regional phenotypic variability and regulation of NF-kappaB activity.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33 (6), 1248-1256 (2013).</li><li>Lu, G. S. G., Davis, J. P., Schaheen, B., Downs, E., Roy, R. J., Ailawadi, G., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+chronic+advanced+staged+abdominal+aortic+aneurysm+murine+model.">A novel chronic advanced staged abdominal aortic aneurysm murine model.</a> Journal of Vascular Surgery. 66 (1), 232-242 (2017).</li></ol>

Торакальная и брюшная аорта клеточно и эмбрионально отличаются, что имеет отношение к аневризмальной болезни14,15,16. Поэтому необходима конкретная модель животных для изучения TAA. Хотя другие модели murine dTAA были опубликованы8,</su...

Целью данного метода является изучение развития, патофизиологии и структурных изменений в моринической нисходящей грудной аорте во время формирования аневризмы аорты. Наша модель предлагает воспроизводимый и последовательный метод индуцирования аневризмы грудной аорты (dTAA) у мышей, что позволяет для тестирования различных генетических и фармакологических ингибиторов. Эта работа может помочь определить наркотики и генной терапии, которые могут быть переведены на жизнеспособную стратегию лечения для людей с болезнью dTAA.
dTAAs форме, когда стенка грудной аорты становится ослабленным и охватывает с течением времени до достижения критического диаметра, когда разрыв или разрыв может произойти. Клинически, dTAA может прогрессировать в тишине, увеличивая в размере до тех пор пока структура стены аорты не будет настолько искажена что она окончательно терпит неудачу, с катастрофическими последствиями. Что касается, симптомы обычно развиваются только тогда, когда аневризма достигла опасного размера (100-150% расширение) и находится на высоком риске для вскрытия или разрыв1,2. разрыв dTAA почти повсеместно смертельной3, и факультативного хирургического ремонта несет значительную заболеваемость4,5. Кроме того, большинство пациентов переносят диагноз аневризмы аортыв течение примерно 5 лет до хирургического ремонта 6,7. Это окно представляет собой подходящее время для вмешательства без хирургического вмешательства. Таким образом, медицинские методы лечения или медленного прогрессирования dTAA необходимы и будет представлять собой значительный прогресс в области исследований аневризмы. В настоящее время нет доступных медицинских процедур для dTAA, главным образом из-за неполного понимания патогенеза dTAA.
За последние 20 лет было разработано несколько моделей dTAA животных, но каждая из этих моделей отличалась от наших собственных и не производила надежных аневризм. Модель murine dTAA, наиболее похожая на нашу, быларазработана компанией Ikonomidis et al. 8, которая включает в себя прямое применение CaCl2 к адвенитии аорты. Хотя наша модель была адаптирована из многих методов, изложенных Ikonomidis, наша модель уникальна в трех отдельных направлениях. Во-первых, в нашей модели аорта подвергается воздействию актуальных эластаза в течение 3-5 минут, по сравнению с 15 минут CaCl2 воздействия. Во-вторых, расширение аорты происходит в 2 недели, по сравнению с 16 недель в модели CaCl 2. Наконец, наша модель последовательно производит аневризмы примерно 100% расширения, по сравнению с аорты расширения 20-30% производства CaCl2 приложения (которые не могут быть действительно считаются аневризмы, поскольку они определяются как увеличение аорты диаметра 50%). Существуют и другие нехирургические модерации образования аневризмы, такие как мышь Apo E knockout, которые образуют надежные аневризмы с настоем ангиотензина II. Тем не менее, эти мыши развиваются над-почечной или восходящей грудной аортальной аневризмы, а не аневризмы конкретно в нисходящей грудной аорты9,10.
Рациональным для этого протокола является простой, недорогой, и время подходящий способ изучения dTAA в модели мурин. Мышь модель предоставляет уникальную возможность использовать многие генетические и клеточных нокаутов, которые были найдены, чтобы быть impactful в других сосудистых заболеваний. Использование нашей конкретной модели TAA была хорошо принята и эксперименты с ее использованием были опубликованы в высокоэффективных журналах11,12. К этому моменту модель использовалась для исследования возможных генетических и фармакологических методов лечения, которые оказали значительное влияние на моделя брюшной аневризмы аорты (AAA); однако, поскольку наша лаборатория расширила использование модели dTAA, мы находим цели, уникальные для формирования dTAA, которые могут быть использованы в качестве целевой терапии у людей.
Эта модель наиболее подходит для лабораторий, которые имеют микрохирургические возможности мурина. Хотя это технически сложной задачей, она может быть выполнена последовательно даже исследователями без предварительного хирургического опыта. Для исследователя, не опыт работы с хирургическим опытом, модель может быть освоена примерно в 20 оперативных сеансах (или примерно в 50 мышах). Для исследователя с опытом работы с хирургическим вмешательством, модель может быть освоена в 5 оперативных сессий (примерно 20 мышей). Мы считаем, что с высококачественным видео, время для освоения может быть еще больше сокращена. После достижения квалификации, процедура может быть завершена в течение 35 минут для операции, и 20 минут для конечного урожая. Хирурги в нашей лаборатории могут выполнять 10-12 полных операций в день, с оперативной смертности 5-10%. Наиболее распространенной причиной смертности является повреждение легких при поступлении в грудь, анестетик токсичность или разрыв аорты во время вскрытия. В дополнение к исследованиям dTAA, эта модель также служит в качестве руководства для безопасного и легкого доступа к грудной аорты и легких hilum для исследователей, изучающих другие вмешательства в груди.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:761px;" width="760">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Angiocatheter (22G)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Used for ET Tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Dumont Tweezers; Pattern #7 x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-4982</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Graefe Tissue Forceps</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Harms Forceps x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Intracardiac Needle Holder; Extra Delicate; Carbide Jaws; 7&#34; Length</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-7800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;KL 1500 LED Light Source</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">150-400</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;M205A Dissction Microscope</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">CH 94-35</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Iris Scissors, 11cm, Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:161px;">500216-G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Metal Clip board</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Use with the Mouse Retractor Set&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Mouse Retractor Set</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;">SURGI-5001</td>
			<td style="width:167px;">Need 2 short and 1 tall fixators</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:243px;">Mouse Ventilator MiniVent Type 845, 115 V, Power Supply with US Connector</td>
			<td style="width:191px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">73-0043</td>
			<td style="width:167px;">MiniVent Ventilator for Mice (Model 845), Single Animal, Volume Controlled</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:191px;">Elastase from porcine pancreas</td>
			<td style="width:161px;">E0258-50MG</td>
			<td style="width:167px;">Can be purchased in various size bottles</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:191px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:161px;">18000-00</td>
			<td style="width:167px;">Recommend using rechargable AA batteries</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Spring Scissors, 10.5cm</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right" style="width:161px;">14127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Steril Swabs (Sponges)</td>
			<td style="width:191px;">Sugi</td>
			<td align="right" style="width:161px;">31603</td>
			<td style="width:167px;">Can be cut to size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Surgi Suite Surgical Platform</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Attach to clip board&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Tech IV Isoflurane Vap</td>
			<td style="width:191px;">Jorgensen&#160;Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:161px;">J0561A</td>
			<td style="width:167px;">Anesthesia vaporizer&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm

По данным Центра по контролю заболеваний, аневризмы аорты (АА) считались основной причиной смерти во всех расах и обоих полов в 1999-2016 годах. Аневризма образуется в результате постепенного ослабления и возможного расширения аорты, которая может разрываться или разрываться, как только она достигает критического диаметра. Аневризмы нисходящей аорты в груди, называемые нисходящей аневризма миорфизма грудной аорты (dTAA), составляют большую долю случаев аневризмы в Соединенных Штатах. Несдержанный разрыв dTAA почти повсеместно летальный, и факультативное ремонт имеет высокий уровень заболеваемости и смертности. Целью нашей модели является изучение dTAA специально, чтобы выяснить патофизиологию dTAA и искать молекулярные цели, чтобы остановить рост или уменьшить размер dTAA. Имея модель мурин для изучения грудной патологии точно, целевые терапии могут быть разработаны специально для тестирования dTAA. Метод основан на размещении свиной поджелудочной эластаза (СИЗ) непосредственно на внешней стенке морины после хирургического воздействия. Это создает разрушительную и воспалительную реакцию, которая ослабляет стенку аорты и позволяет образование аневризмы в течение нескольких недель до нескольких месяцев. Хотя модели murine обладают ограничениями, наша модель dTAA производит надежные аневризмы предсказуемого размера. Кроме того, эта модель может быть использована для тестирования генетических и фармацевтических целей, которые могут остановить рост dTAA или предотвратить разрыв. У пациентов с людьми подобные вмешательства могут помочь избежать разрыва аневризмы и сложного хирургического вмешательства.

Применение нашего протокола приводит к надежному dTAA у мышей по сравнению с сольным управлением. Разработанные TAAs являются fusiform в форме и происходят только в обработанной части аорты(Рисунок 1 и Рисунок 2)11. На рисунке 2 показа?...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

Мы описываем хирургический протокол, чтобы последовательно индуцировать надежные нисходящие аневризмы грудной аорты у мышей. Процедура включает в себя левую торакотомию, воздействие грудной аорты и размещение губки, пропитанной свиной эластазой поджелудочной железы на стенке аорты.

Murine Хирургическая модель Томатная Эластаза индуцированной спуск торакальной аортальной аневризмы

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Этот протокол способен производить надежные аневризмы грудной аорты последовательного размера и расположения у мышей и служит в качестве руководства для безопасного доступа к груди мурина. Этот протокол является простым, последовательным методом для производства аневризм грудной аорты у мышей в течение разумного количества времени по сравнению с другими моделями. После подтверждения соответствующего уровня седации в восемь-десятинедельный мужчина c57 черный шесть мыши, поместите мышь в правом боковом положении decubitus и ленты правой рукой rostrally так передняя лапа находится в соответствии с носом.Потяните хвост caudally создать линию напряжения между правой рукой и хвостом, производя расширение позвоночника, и ленты левой ногой в его естественном положении. Затем заклейте левую руку венралью, перекатив марлю. Перед началом процедуры используйте клиперы для бритья левого фланга от левого плеча до левого живота.Используйте хлопчатобумажный аппликатор, чтобы почистить первый бетадиновый раствор, затем 70% этанола над хирургическим участком. Когда кожа высохнет, поместите стерильную драпировку над животным. Сделайте двухсантиметровый боковой разрез в середине гемоторакса и используйте ручную электрокаутерию, чтобы разделить мышечные слои до тех пор, пока ребра не будут видны.Под 10 до 15x увеличение, непосредственно прижигать двухмиллиметровую часть между ребрами и использовать солевой мокрый, тонкий хлопок наконечником аппликатора в пространстве ребра для того, чтобы вскрыть в плевральном пространстве через прижигаемой части. Поместите солевой мокрый, три на два миллиметра губки в грудную клетку, чтобы помочь коллапс легких. Затем используйте ножницы, чтобы расширить торакотомию до тех пор, пока диафрагма не будет видна вентрали и разрез в нескольких миллиметрах от мышц параспина dorsally.Чтобы разоблачить аорту, поместите ретраберные ретракторы в разрез торакотомии и тщательно удалите губку с поверхности легких. Обложка легких с солевым раствором, шесть на четыре миллиметра губки с концами указывая rostrally и caudally и место широкий, плоский ретрактор легких на губку. Затем аккуратно сдвиньте втягивающий вентрали до тех пор, пока нисходящая торакальная аорта не будет выставлена, и используйте типсы номер семь, чтобы вскрыть примерно пятимиллиметровый участок соединительной ткани и жира из аорты.Для применения эластазы, во-первых, используйте микропайпт, чтобы насытить 0,5 на один миллиметр губкой с 12 микролитров свиной поджелудочной эластазы и поместить губку на открытой поверхности аорты. Через три-пять минут, используйте номер семь типсов, чтобы удалить губку эластазы и удалить ретрактор легких. Орошают грудную полость примерно половиной миллилитров стерильного солевого раствора.Удалите легочную губку и используйте свернутый кусок марли два на два дюйма, чтобы поглотить оставшееся солевое орошение. Удалите ребра втягивающиеся и свергнуть ребра с тремя прерванными шесть-о не-поглощаемых швов, связывая свободный узел в каждом шве, не связывая швы вниз. После повторного перефляции легких, связать швы и повторного непосредственно мышечных слоев с работает пять-о абсорбируемых плетеные швы.Закройте кожу с 7 до 10 прервано пять-о не-поглощаемых швов. Затем следите за животным до полной лежачих времени. В соответствующей экспериментальной конце точки, используйте ножницы, чтобы incise кожи medially от левого фланга до центрального живота, заботясь, чтобы не войти в брюшной полости.Инциз кожи от спинного левого фланга rostrally к левому плечу и сделать разрез под углом 90 градусов через подмыгу к грудине. Используя прижигание, вскрыть лоскут кожи к брюшной аспект мыши подвергать левый hemothorax и использовать ножницы, чтобы войти в живот вдоль левой стоимости маржи от брюшной до спинного направления подвергать нижней части левой диафрагмы. Если боковой самый край диафрагмы не открывается, инцизуате диафрагму на ее самом боковом краю.Размещение кончика прижига в этом отверстии, прижигать диафрагму от стоимости маржи к процессу xiphoid и использовать влажный, тонко наконечником хлопка наконечником аппликатор мягко освободить легкие от любых спаек на груди стенки. Обеспечивая легких в сторону, использовать электрокаутерии, чтобы прорезать ребра и грудную стенку от стоимости маржи до первого ребра, спинной до средней подмышки линии, но по крайней мере два миллиметра от аорты. Вырезать вдоль верхнего края первого ребра и отражают грудной клетки вентриальной подвергать hemothorax.Поместите втягиватели на легкое и потяните medially. Поместите втягиваемую или соленую марлю на диафрагму и нарисуйте caudally, чтобы разоблачить как можно больше аорты. Используйте сухой, хлопчатобумажный аппликатор, чтобы удалить любые спайки из аневризмы аорты и незатронутый дистальный сегмент и использовать видео микрометрию для измерения диаметра незатронутого сегмента управления и наиболее широкой части аневризмы, обработанной эластазой.Для сбора урожая аорты, схватить сосуд с вредом миппы просто дистальный к обработанной сегмента и использовать ножницы, чтобы сократить дисталь к типсам. Вскрыть аорту от позвоночника и сократить сосуд проксимальный для обработанного сегмента для удаления аневризмальной ткани. Затем, используя шприц-туберкулин и иглу, вымойте аорты люменом с солевым раствором и обработать образец в соответствии с запланированным вниз по течению экспериментального анализа.Разработанные грудные аневризмы как фузиформы в форме и происходят только в обработанной части на аорте. В этом репрезентативном измерении микрометрии видео, расширение аорты было определено, чтобы быть 130%при сборе тканей. Действительно, в то время как тип elastase лечение мышей демонстрируют значительное увеличение аортального расширения в дни три, семь, 14 и 21 после лечения с максимальным расширением наблюдается в день 14 по сравнению с контролем диких мышей типа.Гистологический анализ показывает, что аневризмы дикого типа имеют эластиновые волокна, тонкие и фрагментированные. Существует также менее гладкой мышечной клетки окрашивания с увеличением макрофагов и интерлукина одной бета-выражения. Мурин легких является чрезвычайно деликатным, и травмы, как правило, со смертельным исходом.Примите максимальную осторожность с первоначальным входом в грудь и только манипулировать легких с солевыми губками. Эта модель помогла выяснить роль интерлукина одной бета и интерлукина шесть в патогенеза нисходящей грудной аневризмы аорты и как их блокада может облегчить нехирургическое управление этих аневризм.

Research

JoVE Journal

Medicine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Новый мышиной модели эндоваскулярной аневризмы аорты

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Воспроизводимость Параплегия по торакальной окклюзии аорты в мышиной модели спинного мозга ишемии

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Мышиной модели ишемии миокарда-реперфузии через перевязки левой передней нисходящей артерии

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

Хирургические Модели гастроэзофагеальной рефлюксной с мышами

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Мышиная левая передняя нисход (ЛАД) аортокоронарное Лигирование: Улучшенная и Простая модель инфаркт миокард

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Создание грызунов модели аневризмы брюшной аорты, блокируя Adventitial Vasa свое перфузии

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

Стандартного метода повторного имплантации аортальный клапан для клапана щадящие аорты корень замена

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Количественный анализ микро CT Aortopathy в мышиной модели β-aminopropionitrile индуцированной аневризмы аорты и рассечение

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

УЗИ в мышей, чтобы определить размеры аневризмы грудной и брюшной аорты

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Модель инфаркта миокарда С использованием постоянной лиги циферблат левой передней спусковой коронарной артерии

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...