Name: murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm
Uploaded: 2019-08-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

Bu çalışma AHA Scientist Development Grant 14SDG18730000 (Yüksek Lisans), NIH K08 HL098560 (G.A.) ve RO1 HL081629 (G.R.U.) hibeleri ile desteklenmiştir. Bu proje Torasik Cerrahi Araştırma ve Eğitim Vakfı (TSFRE) Araştırma Bursu (PI: G. Ailawadi) tarafından desteklenmiştir. İçerik sadece yazarların sorumluluğundadır ve MUTLAKA NHLBI veya TSFRE görüşlerini temsil etmez. Anthony Herring ve Cindy Dodson'a bilgi ve teknik uzmanlıkları için teşekkür ederiz.

Hayvan protokolleri Virginia Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (No. 3634) tarafından onaylanmıştır.
1. Anestezi indüksiyonu ve entübasyon
<ol><li>8-10 haftalık erkek C57BL/6 fareyi kapalı bir odaya %5 izofluran ve oksijen karışımı ile solunumlar gözle görülür şekilde yavaşlayıncaya kadar 5 dakika boyunca yerleştirin. NOT: Deneysel protokole bağlı olarak farelerin farklı suşları, cinsiyetleri ve yaşları kullanılabilir. Dişi farelerin en...

<ol>
	<li>Coady, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+appropriate+size+criterion+for+resection+of+thoracic+aortic+aneurysms.">What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).</li><li>Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm:+A+comprehensive+review.">Abdominal aortic aneurysm: A comprehensive review.</a> Experimental and Clinical Cardiology. 16 (1), 11-15 (2011).</li><li>Bickerstaff, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thoracic+aortic+aneurysms:+a+population-based+study.">Thoracic aortic aneurysms: a population-based study.</a> Surgery. 92 (6), 1103-1108 (1982).</li><li>Cheng, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+aortic+repair+versus+open+surgical+repair+for+descending+thoracic+aortic+disease+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+comparative+studies.">Endovascular aortic repair versus open surgical repair for descending thoracic aortic disease a systematic review and meta-analysis of comparative studies.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (10), 986-1001 (2010).</li><li>Walsh, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+stenting+versus+open+surgery+for+thoracic+aortic+disease:+systematic+review+and+meta-analysis+of+perioperative+results.">Endovascular stenting versus open surgery for thoracic aortic disease: systematic review and meta-analysis of perioperative results.</a> Journal of Vascular Surgery. 47 (5), 1094-1098 (2008).</li><li>Absi, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+patterns+of+gene+expression+distinguishing+ascending+aortic+aneurysms+from+abdominal+aortic+aneurysms:+complementary+DNA+expression+profiling+in+the+molecular+characterization+of+aortic+disease.">Altered patterns of gene expression distinguishing ascending aortic aneurysms from abdominal aortic aneurysms: complementary DNA expression profiling in the molecular characterization of aortic disease.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 126 (2), 344-357 (2003).</li><li>Ailawadi, G., Eliason, J. L., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+concepts+in+the+pathogenesis+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Current concepts in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Vascular Surgery. 38 (3), 584-588 (2003).</li><li>Ikonomidis, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">A murine model of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Surgical Research. 115 (1), 157-163 (2003).</li><li>Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+promotes+atherosclerotic+lesions+and+aneurysms+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1605-1612 (2000).</li><li>Trachet, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending+Aortic+Aneurysm+in+Angiotensin+II-Infused+Mice:+Formation,+Progression,+and+the+Role+of+Focal+Dissections.">Ascending Aortic Aneurysm in Angiotensin II-Infused Mice: Formation, Progression, and the Role of Focal Dissections.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (4), 673-681 (2016).</li><li>Johnston, W. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+interleukin-1beta+decreases+aneurysm+formation+and+progression+in+a+novel+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">Inhibition of interleukin-1beta decreases aneurysm formation and progression in a novel model of thoracic aortic aneurysms.</a> Circulation. 130 (11), 51-59 (2014).</li><li>Pope, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+Receptor+Inhibition+Prevents+Descending+Thoracic+Aortic+Aneurysm+Formation.">Interleukin-6 Receptor Inhibition Prevents Descending Thoracic Aortic Aneurysm Formation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 100 (5), 1620-1626 (2015).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Ailawadi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nonintrinsic+regional+basis+for+increased+infrarenal+aortic+MMP-9+expression+and+activity.">A nonintrinsic regional basis for increased infrarenal aortic MMP-9 expression and activity.</a> Journal of Vascular Surgery. 37 (5), 1059-1066 (2003).</li><li>Ruddy, J. M., Jones, J. A., Spinale, F. G., Ikonomidis, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+heterogeneity+within+the+aorta:+relevance+to+aneurysm+disease.">Regional heterogeneity within the aorta: relevance to aneurysm disease.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 136 (5), 1123-1130 (2008).</li><li>Trigueros-Motos, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryological-origin-dependent+differences+in+homeobox+expression+in+adult+aorta:+role+in+regional+phenotypic+variability+and+regulation+of+NF-kappaB+activity.">Embryological-origin-dependent differences in homeobox expression in adult aorta: role in regional phenotypic variability and regulation of NF-kappaB activity.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33 (6), 1248-1256 (2013).</li><li>Lu, G. S. G., Davis, J. P., Schaheen, B., Downs, E., Roy, R. J., Ailawadi, G., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+chronic+advanced+staged+abdominal+aortic+aneurysm+murine+model.">A novel chronic advanced staged abdominal aortic aneurysm murine model.</a> Journal of Vascular Surgery. 66 (1), 232-242 (2017).</li></ol>

Torasik ve abdominal aort hücresel ve embriyolojik olarak farklı, hangi anevrizmal hastalık ile ilgili14,15,16. Bu nedenle, TAA çalışmak için belirli bir hayvan modeli gereklidir. Diğer murine dTAA modelleri8yayınlanmış olmasına rağmen , bizim gerçekten anevrizmal olarak kabul edilebilir inen torasik aort dilatasyonu oluşturmak için tek modeldir (üzerinde 50% dilatasyon). Ayrıca, bizim m...

Bu yöntemin amacı aort anevrizması oluşumu sırasında inen torasik aortun gelişimi, patofizyolojisi ve yapısal değişikliklerini incelemektir. Modelimiz farelerde torasik aort anevrizmalarını (dTAA) indüklemek için tekrarlanabilir ve tutarlı bir yöntem sunarak çeşitli genetik ve farmakolojik inhibitörlerin test edilmesine olanak sağlamaktadır. Bu çalışma, dTAA hastalığı olan insanlar için uygulanabilir bir tedavi stratejisine çevrilebilecek ilaçların ve gen terapilerinin belirlenmesine yardımcı olabilir.
torasik aort duvarı zayıfladığında ve zaman içinde genişlediğinde yırtılma veya yırtılma meydana geldiğinde kritik bir çapa ulaşıncaya kadar dTA'lar oluşur. Klinik olarak, dTAA sessizlik içinde ilerleyebilir, aort duvarının yapısı o kadar bozulmuş ki sonunda başarısız olana kadar boyutu artmaktadır, yıkıcı sonuçlara yol açabilir. Bununla ilgili olarak, semptomlar genellikle sadece anevrizma tehlikeli bir boyuta ulaştığında gelişir (100-150% genişleme) ve diseksiyon veya rüptür için yüksek risk altındadır1,2. dTAA rüptürü neredeyse evrensel olarak ölümcüldür 3, ve elektif cerrahi onarım önemli morbidite taşır4,5. Ayrıca, çoğu hasta cerrahionarım6 ,7önce yaklaşık 5 yıl boyunca bir aort anevrizması tanısı taşımak . Bu pencere, cerrahi olmayan müdahale için uygun bir zamanı temsil eder. Bu nedenle, dTAA'nın tedavisi veya yavaş ilerlemesi için tıbbi tedavilere ihtiyaç duyulmaktadır ve anevrizma araştırmaları alanında önemli bir ilerleme yitirmeolacaktır. Şu anda dTAA patogenezinin eksik anlaşılması nedeniyle dTAA için tıbbi tedavi bulunmamaktadır.
Son 20 yıl içinde, birkaç dTAA hayvan modelleri geliştirilmiştir, ancak bu modellerin her biri bizimkinden farklı ydı ve sağlam anevrizmalar üretmedi. Bizimkine en çok benzeyen bir murine dTAA modeli, CaCl 2'nin aort adventisine doğrudan uygulanmasını içeren Ikonomidis ve ark.8tarafından geliştirilmiştir. Modelimiz Ikonomidis tarafından belirlenen tekniklerin çoğundan uyarlanmış olsa da, modelimiz üç ayrı şekilde benzersizdir. İlk olarak, modelimizde aort 3-5 dakika topikal elastaza maruz kalır, CaCl2 pozlama 15 dakika ile karşılaştırıldığında. İkinci olarak, aort genişlemesi 2 hafta içinde oluşur, CaCl 16 hafta ile karşılaştırıldığında2 model. Son olarak, modelimiz sürekli olarak yaklaşık %100 dilatasyon anevrizmaları üretir, CaCl2 uygulaması tarafından üretilen %20-30 aort dilatasyonlarına göre (aort artışı olarak tanımlandıkları için gerçekten anevrizma olarak kabul edilemezler). çapı >%50). Anevrizma oluşumunun diğer cerrahi olmayan murine modelleri vardır, Apo E nakavt fare gibi, anjiyotensin infüzyonu ile sağlam anevrizmalar oluşturan II. Ancak, bu fareler özellikle alçalan torasik aort9,10anevrizma yerine supra-renal veya yükselen torasik aort anevrizmaları geliştirmek .
Bu protokol için rasyonel basit, ucuz ve bir murine modelinde dTAA çalışma için uygun bir yol olmasıdır. Fare modeli diğer damar hastalıklarında etkili olduğu tespit edilmiştir birçok genetik ve hücreye özgü nakavt kullanmak için eşsiz bir fırsat sağlar. Bizim özel TAA modelinin kullanımı iyi kabul edilmiş ve deneyler yüksek etkili dergilerde yayınlanmıştır11,12. Bu noktada, model abdominal aort anevrizması (AAA) mürin modellerinde önemli bir etkiye sahip olası genetik ve farmakolojik tedavileri araştırmak için kullanılmıştır; ancak laboratuvarımız dTAA modelinin kullanımını genişlettikçe, insanlarda hedefli tedaviler olarak kullanılabilecek dTAA oluşumuna özgü hedefler buluyoruz.
Bu model en çok murine mikro-cerrahi yetenekleri olan laboratuvarlar için uygundur. Teknik olarak zor olsa da, daha önce hiçbir cerrahi deneyimi olmayan araştırmacılar tarafından bile sürekli olarak yürütülebilir. Hiçbir murine cerrahi deneyimi olan bir araştırmacı için model yaklaşık 20 ameliyat seans (veya yaklaşık 50 fare) hakim olabilir. Önceki cerrahi deneyimi olan araştırmacı için, model 5 ameliyat seanslarında (yaklaşık 20 fare) hakim olabilir. Biz yüksek kaliteli bir video ile, ustalık için zaman daha da azaltılabilir inanıyoruz. Yeterlilik sağlandıktan sonra ameliyat için 35 dakika, terminal hasat için 20 dakika içinde işlem tamamlanabilir. Laboratuvarımızdaki cerrahlar günde 10-12 tam ameliyat yapabilirler ve ameliyat mortalite oranı %5-10'dur. Mortalitenin en sık nedeni göğüse girişte akciğer hasarı, anestezik toksisite veya diseksiyon sırasında aort un yırtılmasıdır. DTAA araştırmaek, bu model aynı zamanda göğüs diğer müdahaleler ilerleyen araştırmacılar için torasik aort ve akciğer hilum güvenli ve kolay erişim için bir rehber olarak hizmet vermektedir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:761px;" width="760">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Angiocatheter (22G)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Used for ET Tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Dumont Tweezers; Pattern #7 x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-4982</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Graefe Tissue Forceps</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Harms Forceps x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Intracardiac Needle Holder; Extra Delicate; Carbide Jaws; 7&#34; Length</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-7800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;KL 1500 LED Light Source</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">150-400</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;M205A Dissction Microscope</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">CH 94-35</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Iris Scissors, 11cm, Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:161px;">500216-G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Metal Clip board</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Use with the Mouse Retractor Set&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Mouse Retractor Set</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;">SURGI-5001</td>
			<td style="width:167px;">Need 2 short and 1 tall fixators</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:243px;">Mouse Ventilator MiniVent Type 845, 115 V, Power Supply with US Connector</td>
			<td style="width:191px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">73-0043</td>
			<td style="width:167px;">MiniVent Ventilator for Mice (Model 845), Single Animal, Volume Controlled</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:191px;">Elastase from porcine pancreas</td>
			<td style="width:161px;">E0258-50MG</td>
			<td style="width:167px;">Can be purchased in various size bottles</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:191px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:161px;">18000-00</td>
			<td style="width:167px;">Recommend using rechargable AA batteries</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Spring Scissors, 10.5cm</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right" style="width:161px;">14127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Steril Swabs (Sponges)</td>
			<td style="width:191px;">Sugi</td>
			<td align="right" style="width:161px;">31603</td>
			<td style="width:167px;">Can be cut to size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Surgi Suite Surgical Platform</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Attach to clip board&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Tech IV Isoflurane Vap</td>
			<td style="width:191px;">Jorgensen&#160;Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:161px;">J0561A</td>
			<td style="width:167px;">Anesthesia vaporizer&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm

Hastalık Kontrol Merkezi'ne göre, 1999-2016 yılları arasında tüm ırklarda ve her iki cinste de aort anevrizmaları (AAs) önde gelen ölüm nedeni olarak kabul edildi. Anevrizma, kritik bir çapa ulaştığında yırtılma veya yırtılma yapabilen aortun ilerleyici zayıflaması ve nihai genişlemesi sonucu oluşur. Göğüste alçalan aort anevrizmaları, inen torasik aort anevrizmaları denir (dTAA), Amerika Birleşik Devletleri'nde anevrizma vakalarının büyük bir kısmını oluşturan. Kontrolsüz dTAA rüptürü neredeyse evrensel olarak ölümcüldür ve elektif onarım yüksek oranda morbidite ve mortaliteye sahiptir. Modelimizin amacı özellikle dTAA'yı incelemek, dTAA'nın patofizyolojisini açıklamak ve büyümeyi durdurmak veya dTAA'nın boyutunu küçültmek için moleküler hedefler aramaktır. Torasik patolojiyi tam olarak incelemek için bir murine modeline sahip olarak özellikle dTAA'yı test etmek için hedefli tedaviler geliştirilebilir. Yöntem, cerrahi maruziyet sonrası domuz pankreatik elastazın (PPE) doğrudan dış mürin aort duvarına yerleştirilmesine dayanmaktadır. Bu yıkıcı ve inflamatuar reaksiyon oluşturur, hangi aort duvarı zayıflatır ve aylara haftalar boyunca anevrizma oluşumunu sağlar. Murine modelleri sınırlamalara sahip olsa da, dTAA modelimiz öngörülebilir boyutta sağlam anevrizmalar üretir. Ayrıca, bu model dTAA büyümesini durdurabilecek veya yırtılmayı önleyebilecek genetik ve farmasötik hedefleri test etmek için kullanılabilir. İnsan hastalarda, bu gibi müdahaleler anevrizma rüptürü ve zor cerrahi müdahale önlemeye yardımcı olabilir.

Protokolümüzün uygulanması, farelerde tuzlu kontrollere kıyasla sağlam dTAA ile sonuçlanır. Geliştirilen TAA'lar fusiform şeklindedir ve sadece aortun tedavi edilen kısmında görülür (Şekil 1 ve Şekil 2)11. Şekil 2 doku hasat bir video mikrometri ölçüm bir örnek gösterir. Denklem 1'i kullanarak, aort genişlemesi bu örnekte %130'dur.
Johnston ve ark.<sup clas...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

Farelerde sürekli olarak alçalan torasik aort anevrizmalarını tetikleyen bir cerrahi protokol uyguluyoruz. Prosedür sol torakotomi içerir, torasik aort maruzkalma, ve aort duvarında domuz pankreas elastaz batırılmış bir sünger yerleştirme.

Topikal Elastaz Indüklenen İndüklenen Torasik Aort Anevrizması Murine Cerrahi Modeli

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Bu protokol farelerde tutarlı boyut ve yer sağlam torasik aort anevrizmaları üretme yeteneğine sahiptir ve murin göğsüne güvenli erişim için bir rehber olarak hizmet vermektedir. Bu protokol, diğer modellere göre makul bir süre içinde farelerde torasik aort anevrizmaları üretmek için basit ve tutarlı bir yöntemdir. Sekiz ila 10 haftalık erkek c57 siyah altı farede uygun bir sedasyon seviyesini doğruladıktan sonra, fareyi sağ lateral dekübitus pozisyonuna yerleştirin ve ön patinin burunla aynı hizada olması için sağ kol rostrally'yi bantlayın.Sağ kol ve kuyruk arasında gerginlik bir çizgi oluşturmak için kuyruk caudally çekin, omurgauzantısı üreten, ve doğal pozisyonda sol bacak bant. Sonra, sol kol ventrally haddelenmiş gazlı bez üzerinde bant. İşleme başlamadan önce sol omzundan sol sol adadan sol kanadı tıraş etmek için makas kullanın.İlk betadyne çözeltisini fırçalamak için pamuk uçlu aplikatör kullanın, sonra cerrahi alan üzerinde %70 etanol. Cilt kuruduğunda, hayvanın üzerine steril bir örtü yerleştirin. Hemothoraks orta noktasında iki santimetre lateral kesi yapmak ve kaburga görünür olana kadar kas tabakalarını bölmek için el elektrokoter kullanın.10 ila 15x büyütme altında, doğrudan kaburga arasında iki milimetrelik bir kısmını katuterize ve koterize kısmı ile plevral alana incelemek için kaburga alanında tuzlu ıslak, ince pamuk uçlu aplikatör kullanın. Akciğeri çökertmek için toraksa tuzlu, üçer iki milimetrelik bir sünger yerleştirin. Daha sonra, diyafram görünür ventrally ve kesi paraspinus kasları dorsally birkaç milimetre uzakta olana kadar torakotomi genişletmek için makas kullanın.Aortu ortaya çıkarmak için, torakotomi kesi içine kaburga retractors yerleştirin ve dikkatle akciğer yüzeyinden sünger çıkarın. Bir tuzlu ıslak, uçları rostrally ve caudally işaret ile altı dört milimetrelik sünger ile akciğer kapak ve sünger üzerinde geniş, düz akciğer retractor yerleştirin. Daha sonra, azalan torasik aort maruz kalana kadar retraktör ventrally doğru kaydırın ve aort bağ dokusu ve yağ yaklaşık beş milimetrelik bir bölümünü incelemek için yedi numaralı forceps kullanın.Elastaz uygulamak için, ilk olarak, domuz pankreas elastaz 12 mikrolitre ile bir milimetre sünger 0,5 doymuş ve aort maruz yüzeye sünger yerleştirmek için bir mikropipet kullanın. Üç ila beş dakika sonra, elastaz süngeri çıkarmak ve akciğer retraktörünü çıkarmak için yedi numaralı forceps kullanın. Steril salin mililitre yaklaşık yarım ile göğüs boşluğu sulamak.Akciğer süngeri çıkarın ve kalan tuzlu sulama emmek için gazlı bez bir haddelenmiş iki inç parça kullanın. Kaburga retractors çıkarın ve üç kesilen altı-oh olmayan emültürler ile kaburga degifi, dikişleri aşağı bağlamadan her dikiş gevşek bir düğüm bağlama. Akciğer ilerlettikten sonra, dikişleri bağlayın ve çalışan beş-oh emilebilir örgülü dikiş ile kas tabakalarını yeniden approximate.7-10 kesilen beş-oh olmayan emdirilebilir dikişler ile cildi kapatın. Sonra, tam recumbency kadar hayvan izlemek. Uygun deneysel bitiş noktasında, periton girmemeye dikkat ederek, sol kanattan merkezi karın için orta derecede deri eğim makas kullanın.Dorsal sol kanadından sol omzuna doğru deri eğim ve sternum axilla ile 90 derecelik bir açıyla bir kesi yapmak. Kateter kullanarak, sol hemothoraks ortaya çıkarmak için farenin ventral yönü doğru deri flep incelemek ve sol diyafram alt ortaya çıkarmak için dorsal yönden ventral sol costal marjı boyunca karın girmek için makas kullanın. Diyaframın lateral-en kenarı açılmıyorsa, diyaframı en lateral kenarına doğru eğin.Bu deliğe kateterucuucu ucu yerleştirerek, ksifoid sürecine costal marjı diyafram cauterize ve hafifçe göğüs duvarına herhangi bir yapışma akciğer serbest etmek için nemli, ince uçlu pamuk uçlu aplikatör kullanın. Akciğer in yolunun dışında olduğundan emin olurken, ilk kaburga maliyet marjı kaburga ve göğüs duvarı ile kesmek için elektrokoter kullanın, orta aksiller çizgi ye dorsal, ama aort en az iki milimetre. İlk kaburga nın üstün kenarı boyunca kesin ve hemothoraks ortaya çıkarmak için göğüs kafesi ventrally yansıtır.Akciğer üzerine retractors yerleştirin ve medially çekin. Diyafram üzerine bir retraktör veya tuzlu ıslak gazlı bez yerleştirin ve mümkün olduğunca aort kadar ortaya çıkarmak için caudally çizin. Aort anevrizması ve etkilenmemiş distal segmentteki yapışıklıkları gidermek için kuru, pamuk uçlu aplikatör kullanın ve etkilenmemiş kontrol segmentinin çapını ve elastaz ile tedavi edilen anevrizmanın en geniş kısmını ölçmek için video mikrometrisini kullanın.Aort hasat için, tedavi segmentine sadece distal sadece distal ve forceps distal kesmek için makas kullanın zararları ile damar kavramak. Omurilik kapalı aort diseksiyon ve anevrizmal doku kaldırmak için tedavi segmentine damar proksimal kesti. Daha sonra, bir tüberkülin şırınga ve iğne kullanarak, aort lülesini tuzlu su yla yıkayın ve numuneyi planlanan aşağı deneysel analize göre işlayın.Formda fusiform olarak geliştirilen torasik anevrizmalar ve sadece aort üzerinde tedavi kısmında meydana gelir. Bu temsili video mikrometri ölçümünde doku hasatında aort genişlemesi %130 olarak saptandı. Nitekim, tip elastaz tedavi fareler gün üç, yedi, 14 ve 21 post-tedavi de aort genişlemesi önemli bir artış sergilerken maksimal dilatasyon gün 14 kontrol vahşi tip fareler ile karşılaştırıldığında gözlenen.Histolojik analizler yabani tip anevrizmaların ince ve parçalanmış elastin liflerine sahip olduğunu ortaya koymaktadır. Makrofaj ve interlukin tek beta ekspresyonunda artış ile daha az düz kas hücresi boyama da vardır. Minten akciğeri son derece hassastır ve yaralanma genellikle ölümcüldür.Göğüs içine ilk giriş ile son derece dikkatli alın ve sadece tuzlu ıslak sünger ile akciğer işlemek. Bu model, inen torasik aort anevrizmalarının patogenezinde interlukin bir-beta ve interlukin altının rolünün ve ablukalarının bu anevrizmaların cerrahi olmayan yönetimini nasıl kolaylaştırabileceğini niçin açıklığa kavuşturmaya yardımcı olmuştur.

Research

JoVE Journal

Medicine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovasküler Aort Anevrizma Onarımı Yeni Bir murin Modeli

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Spinal Kord İskemi-reperfüzyon bir Mürin Modelinde Torasik Aort Tıkanıklığı tarafından tekrarlanabilir Parapleji

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

Fare ile Gastroözofageal Reflü Cerrahi Modelleri

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Kemirgen Sol Ön İnen (LAD) koroner arter ligasyonu: Miyokard İnfarktüsü Yönelik Gelişmiş ve Basitleştirilmiş Modeli

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Abdominal aort anevrizması Adventitial Vasa Vasorum perfüzyon engelleyerek kemirgen bir Model oluşturulması

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

Aort kapak yeniden implantasyon Vana-tutumlu aort için standart tekniği kök değiştirme

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Aortopathy aort anevrizması β-aminopropionitrile-indüklenen ve diseksiyon, fare modeli nicel mikro-CT Analizi

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

Torasik ve Abdominal aort anevrizması boyutlarını belirlemek farelerde ultrason görüntüleme

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Sol Anterior İnen Koroner Arterin Kalıcı Ligasyonu ile Murine Miyokard Enfarktüsü Modeli

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...