Name: single synapse indicators of glutamate release and uptake in acute brain slices from normal and huntington mice
Uploaded: 2020-03-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Single Synapse Indicators of Glutamate Release and Uptake in Acute Brain Slices from Normal and Huntington Mice at JoVE.com

עבודה זו נתמכת על ידי CHDI (A-12467), קרן המחקר הגרמני (Exc 257/1 ו DFG פרויקט-ID 327654276 – SFB 1315) ו הפנים קרנות מחקר של Charité. אנו מודים לקיי. '.. ', אוניברסיטת לונדון, ו-N. Helassa, אוניברסיטת ליברפול, עבור iGluu פלמיד ודיונים רבים ומועילים. ד. בליטות ושונהר סיפקו סיוע טכני מעולה.

כל העבודה בוצעה בהתאם להנחיות האיחוד האירופי 2010/63/האיחוד האירופי לניסויים בבעלי חיים ונרשמה במשרד ברלין להגנת הבריאות ובטיחות טכנית (G0233/14 ו-G0218/17).
הערה: הקלטות מסוג Q175 פראי (WT) ו הטרוזיטים (HETs) ניתן לבצע בכל גיל ומין. כאן למדנו זכרים ונקבות בגיל של 51 עד 76 שבועות.
<p class="jove_...

הניסויים משפיעים על עניין כללי-סינפסה והפסד אפשרי במהלך ניוון שולי, ואנו מתארים גישה חדשה לזיהוי סינפסות מושפעות בפרוסות מוח חדות מבני האדם (> 1). ניצול המאפיינים הקינטית המשופרים של חיישן גלוטמט שהוצג לאחרונה iGluu הניסויים להאיר את היחסים בין גלוטמט שחרור הסינפטית וספיגת באופן שלא הי...

ההשפעה היחסית של כל מסוף סינפטית השייכת ל"קשר יוניטרית" (כלומר, הקשר בין 2 תאי עצב) מוערך בדרך כלל על ידי השפעתו על החלק הראשוני של תא העצב הפוסט-סינפטית1,2. הקלטות סומטיים ו/או דנדריטים מנוירונים פוסט-סינפטיות מייצגות את הנפוצים ביותר, עד כה, גם האמצעים היצרניים ביותר להבהרת עיבוד מידע בפרספקטיבה מלמעלה-למטה או אנכית3,4,5. עם זאת, הנוכחות של אסטרוציטים עם נפרדת שלהם (במכרסמים) שטחים לא חופפים עשויים לתרום פרספקטיבה אופקית המבוססת על מנגנונים מקומיים של חילופי אותות, אינטגרציה וסנכרון באתרי סינפטיות6,7,8,9,10.
כי ידוע כי משחק אסטרוליה, באופן כללי, תפקיד מרכזי בפתוגנזה של מחלה נוירוניווניות11,12 , בפרט, תפקיד תחזוקה ופלסטיות של glutamatergic סינפסות13,14,15,16, זה אפשרי כי שינויים בביצועי סינפטית להתפתח בהתאם למצב של astroglia באזור היעד המשותף של סיבי כלי לימפה עם מוצא מגוון. כדי להמשיך לחקור את היעד-/astroglia-נגזרות מנגנונים התקינה המקומית בריאות ומחלות, יש צורך להעריך הסינפסות בודדים. הגישה הנוכחית עבדה כדי להעריך את מגוון של שחרור גלוטמט פונקציונלי ומחווני הסיווג להגדיר קריטריונים שעשויים לשמש כדי לזהות תפקוד לקוי (או התאושש) הסינפסות באזורים המוח הקשורות ביותר ליזום תנועה (כלומר, קודם כל בקליפת המנוע והסטריאטום).
לסטריאטום חסרה נוירונים glutamatergic פנימיים. לפיכך, קל יחסית לזהות glutamatergic היסודות של המקור. האחרון מקורם בעיקר בתלמוס המדיאלי ובקליפת המוח (ראה17,18,19,20 לעוד). הסינפסות Corticostriatal נוצרות על ידי אקסונים של נוירונים מיניים מקומי בשכבות קורטיקלית 2/3 ו 5. האקסונים טופס דו-telencephalic (IT) התקשרויות או התקשרויות התחברות דרך מערכת סיבים כי יותר מקבל יותר מהווה את מערכת הפירמידה (PT). יש עוד הציע כי זה-ו-PT-type מסופים שונים במאפייני השחרור שלהם בגודל21,22. לאור הנתונים האלה, אפשר גם לצפות כמה הבדלים בטיפול של גלוטמט.
הסטריאטום הוא אזור המוח המושפע ביותר במחלת הנטינגטון (HD)5. HD האדם הוא חמור חמורה הפרעת ניווניות תורשתית. מודל העכבר Q175 מציע הזדמנות לחקור את בסיס הסלולר של הצורה ההיפוקינטית-נוקשה של HD, מצב שיש הרבה במשותף עם parkinsonism. החל מגיל של כ 1 שנה, הומוזיציטים Q175 עכברים (HOM) התערוכה סימנים של היפוקיסיה, כפי שנחשף על ידי מדידת הזמן שהושקע ללא תנועה בשדה פתוח23. הניסויים הנוכחיים עם עכברים Q175 הטרוזיציטים (HET) אישרו את המנוע הקודם שנצפה ב HOM ו, בנוסף, הראה כי המוטוריים הנצפים היו מלווים על ידי רמה מופחתת של מרגש האסטרוציטי של חומצה אמינית הנשא 2 חלבון (EAAT2) בסביבה הקרובה של corticostriatal מסופים סינפטית24. ולכן יש היפותזה כי גרעון ספיגה של גלוטמט astrocytic יכול להוביל לתפקוד או אפילו אובדן של הסינפסות בהתאמה25,26.
כאן, אנו מתארים גישה חדשה המאפשרת אחד כדי להעריך את הסיווג בודד גלוטמט ביחס לכמות הנוירוטרנסמיטר שוחרר. חיישן גלוטמט חדש iGluu היה ביטא corticostriatal הנוירונים ביניים. הוא פותח על ידי קאטאלין Török27 ומייצג שינוי של הגבוהה ביותר הציג בעבר מאוד אהדה אבל החיישן גלוטמט איטי iGluSnFR28. שני החיישנים הם נגזרים של חלבון הפלורסנט הירוק המשופר (EGFP). לתכונות ספקטרליות וקינטית, ראו הלאסה ואח '27. בקצרה, iGluu הוא חיישן בעלי זיקה נמוכה עם קינטיקה מהירה של הפעלה, ולכן במיוחד מתאים גם כדי לחקור את הסיווג גלוטמט ב גלוטמט-שחרור מסופים סינפטית. קבוע זמן הדיסוציאציה של iGluu נקבע במתקן שנעצר, אשרהנחה את ערך הטאו של 2.1 אלפיות הראשונה ב-20 ° c, אך 0.68 מילישניות בטמפרטורה של 34 ° צ'27. מסופים בודדים שייפר בדקה ב 34 ° c עם סריקת לייזר ספירלה באזור CA1 של היפוסופקאית בתרבויות organotypic תחת מיקרוסקופ 2-פוטון הציג קבוע זמן ממוצע של ריקבון של 2.7 ms.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Stereo microsope</td>
			<td>WPI</td>
			<td>PZMIII</td>
			<td>Precision Stereo Zoom Binocular Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic frame</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51500D</td>
			<td>Digital Lab New Standard stereotaxic frame</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High speed drill equipment</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>514439V</td>
			<td>Foredom K1070 cromoter Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection system</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>53311</td>
			<td>Quintessential Stereotaxic Injector (QSI)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe 5 &#181;l</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>87930</td>
			<td>75RN Syr (26s/51/2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser positioning system</td>
			<td>Rapp OptoElectronic</td>
			<td>UGA-40</td>
			<td>UGA-40</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue laser for iGluu excitation</td>
			<td>Rapp OptoElectronic</td>
			<td>DL-473-020-S</td>
			<td>473 nm laser</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichroic mirror for 473 nm</td>
			<td>Rapp OptoElectronic</td>
			<td>ROE TB-355-405-473</td>
			<td>Dichroic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1P upright microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>000000-1066-600</td>
			<td>Axioskop 2 FS Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective 63x/1.0</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>421480-9900</td>
			<td>W Plan-Apochromat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x objective</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>44-00-20</td>
			<td>Achroplan 4x/0,10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichroic mirror for iGluu</td>
			<td>Omega optical</td>
			<td>XF2030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Emission filter for iGluu</td>
			<td>Omega optical</td>
			<td>XF3086</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichroic mirror</td>
			<td>Omega optical</td>
			<td>QMAX_DI580LP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Emission filter for autofluorescence subtr.</td>
			<td>Omega optical</td>
			<td>QMAX EM600-650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sCMOS camera</td>
			<td>Andor</td>
			<td>ZYLA4.2PCL10</td>
			<td>ZYLA 4.2MP Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acqusition software</td>
			<td>Andor</td>
			<td>4.30.30034.0</td>
			<td>Solis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AD/DA converter</td>
			<td>HEKA Elektronik</td>
			<td>895035</td>
			<td>InstruTECH LIH8+8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aquisition software</td>
			<td>HEKA Elektronik</td>
			<td>895153</td>
			<td>TIDA5.25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode positioning system</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>MPC-200</td>
			<td>Micromanipulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical stimulator</td>
			<td>Charite workshops</td>
			<td>STIM-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slicer</td>
			<td>Leica</td>
			<td>VT1200 S</td>
			<td>Vibrotome</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brown/Flaming-type puller</td>
			<td>Sutter Instr</td>
			<td>SU-P1000</td>
			<td>P-1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass tubes for injection pipettes</td>
			<td>WPI</td>
			<td>1B100F3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass tubes forstimulation pipettes</td>
			<td>WPI</td>
			<td>R100-F3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetrodotoxin</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab120054</td>
			<td>TTX</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iGluu plasmid</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>106122</td>
			<td>pCI-syn-iGluu</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q175 mice</td>
			<td>Jackson Lab</td>
			<td>27410</td>
			<td>Z-Q175-KI</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

single synapse indicators of glutamate release and uptake in acute brain slices from normal and huntington mice

הסינפסות הן יחידות פונקציונליות מאוד הפועלות באופן עצמאי אחד על השני. ב מחלת הנטינגטון (HD) ואחרים הפרעות ניווניות, עצמאות זו עלולה להיות בסכנה עקב הסיווג גלוטמט מספיק וכתוצאה מכך לשפוך ולשפוך את ההשפעות. כיסוי astrocytic משתנה של מסופי טרום סינפטיות ו/או שדוניים הדנדריטי, כמו גם גודל מופחת של אשכולות הטרנספורטר גלוטמט ב גלוטמט שחרור אתרים היו מעורבים בפתוגנזה של מחלות וכתוצאה מכך הסימפטומים של dys-/היפרקינססיa. עם זאת, המנגנונים המובילים את התפקוד של הסינפסות glutamatergic ב-HD אינם מובנים היטב. שיפור והחלה של הדמיה סינפסה הצלחנו להשיג נתונים ששפוך אור חדש על המנגנון מסכל את החניכה של תנועות. כאן, אנו מתארים את האלמנטים העיקריים של גישה זולה יחסית כדי להשיג החלטה סינפסה באמצעות החדש מקודד גנטית חיישן מהיר במיוחד iGluu, אופטיקה שדה רחב, מדעי ה-CMOS (scmos) מצלמה, 473 ננומטר לייזר ומערכת מיצוב לייזר כדי להעריך את המצב של סינפסות corticostriatal בפרוסות חריפה מן הגיל מטרואנטים גלוטמט נבנו מפיקסלים בודדים או מרובים כדי לקבל הערכות של i) שחרור גלוטמט מבוסס על העלאת המקסימלית של הריכוז גלוטמט [לגלו] ליד האזור הפעיל ii) ספיגת גלוטמט משתקף בזמן קבוע של ריקבון (טאוד) של perisynaptic [לגלו]. הבדלים מונחים על גודל בוטון ודפוסי מנוגדים של הפלסטיות לטווח קצר שימשו כקריטריונים לזיהוי של מסופים corticostriatal כשייכים לintratelencephalic (IT) או המסלול בדרכי במערכת (PT). באמצעות שיטות אלה, גילינו כי בעכברי HD סימפטומטי ~ 40% מסוג PT-type corticostriatal הציגו סיווג גלוטמט מספיק, הרומז כי הסינפסות האלה עשויים להיות בסיכון לנזק מרגש. התוצאות להדגיש את התועלת של TauD כמו סמנים של סינפסות תפקוד בעכברים הנטינגטון עם פנוטיפ היפוקינטית.

זיהוי של שני סוגים של corticostriatal glutamatergic אריאוזים IT ו-PT afferents מקורם שכבה 2/3 ו 5, בהתאמה, והתצוגה ההפרש הדיפרנציאליות ודפוסי הסיום בתוך השצלעות והצלעות (מסופי IT בלבד) סטריאטום. עדיין מעט ידוע על המאפיינים של שחרור גלוטמט ואת הסיווג תחת תנאי הפעלה חוזרים כפי שנצפו במהלך החניכה של תנועו?...

Watch this Scientific Journal Video about Single Synapse Indicators of Glutamate Release and Uptake in Acute Brain Slices from Normal and Huntington Mice at JoVE.com

Single Synapse Indicators of Glutamate Release and Uptake in Acute Brain Slices from Normal and Huntington Mice

אנו מציגים פרוטוקול כדי להעריך את האיזון בין שחרור גלוטמט לבין הסיווג ב corticostriatal glutamatergic בודד בפרוסות חריפה מעכברים למבוגרים. פרוטוקול זה משתמש חיישן פלורסנט iGluu עבור זיהוי גלוטמט, מצלמה scmos עבור רכישת אותות והתקן עבור תאורה לייזר מוקד.

בודד סינפסה אינדיקטורים של גלוטמט שחרור ספיגה בפרוסות המוח חריפה מעכברים נורמלי הנטינגטון

Synapses are highly compartmentalized functional units that operate independently on each other. In Huntington&#39;s disease (HD) and other ...

הדמיה ברזולוציה גבוהה של סינפסות בודדות המבטאות חיישן גלוטמט מהיר מאפשרת זיהוי של חוסר התאמה מקומי בין שחרור משדר לקליטה. במקרה של מחלה, שיטה זו יכולה לשמש כדי לזהות סינפסות מתפקדות. לתיקון שפעת אוטומטית, ראשית, מניחים פרוסת מוח מהעכבר המעניין בתא ההקלטה של מיקרוסקופ חד-פוטוני.להטביע את הפרוסה בנוזל השדרתי מחומצן ומלאכותי ולהשתמש במטרה טבילת מים 20x כדי לאתר את הסטריאטום הגבי. תקן את הפרוסות עם רשת ניילון על נבל פלטינה כדי למזער את תנועת הרקמה, ולעבור למטרה 63x מים טבילה. באמצעות מסנן מעבר גבוה ב 510 ננומטר, לרכוש תמונה של autofluorescent ו גלוטמט חיישן מבנים חיוביים יחד.באמצעות מסנן מעבר גבוה ב 600 ננומטר, לרכוש תמונה שנייה של מבנים autofluorescent לבד. להגדרת הטווח, השתמשו ביתרונות הממוצעים של 10 הפיקסלים הבהירים ביותר ו-10 הפיקסלים הכהים ביותר כדי לשנות את קנה המידה של התמונות האדומות והצהובות. לאחר מכן, בצע חיסור של התמונה הצהובה פחות אדומה ו שנה את קנה מידה של התמונה המחסה כדי ליצור קובץ TIFF סטנדרטי של 8 סיביות להדמיה נוחה של בטון העניין.כדי לבצע חיפוש אחר בוטונים מגיבים, אתה צריך מיקרופיגט זכוכית מתאים לגירוי חשמלי. השתמש מושך micropipette לייצר פיפטים גירוי נימי זכוכית borosilicate עם קטרים קצה פנימי של כמיקרומטר אחד. כדי לבדוק אם יש שחרור תלוי בפעולה של גלוטמט מקבוצה של בוטונים מועמדים, בחר הגדלה של פי 63 ומסנן פליטת ננומטר 510.טען את התמונה המופחתת כדי לאפשר מיקום של אלקטרודה גירוי זכוכית ליד דליות פלואורסצנטי, הימנעות הקרבה של אקסונים נוספים. באיזו שונות הקשורה להקצאה או הקצאה מקסימלית בתוך חלק עמוק יותר של הפרוסה. מניחים את אלקטרודה גירוי ליד bouton של עניין לכבות את האור, כמו ההקלטות חייב להתבצע בחושך מוחלט.לאחר מכן, הפעל את מערכת יישומי האמבטיה הרב-ערוצית, כאשר ערוץ אחד מספק את פתרון האמבטיה הסטנדרטי ואת הערוצים האחרים המספקים את החוסמים הדרושים של ערוצי היונים, המשגרים או קולטני הממברנה, כולל tetrototoxin כדי לחסום את הדור הפוטנציאלי של הפעולה. לשלוט על הזרימה באתר ההקלטה ולהדליק את ממריץ כדי לספק פולסים זרם depolarizing של 2 עד 10 microamps כדי פיפטה גירוי. השחרור מופעל כעת על ידי זרם סידן ישיר דרך תעלות מגודרות מתח.כדי לדמיין את שחרור הגלוטמט בסיווג, באמצעות המיקרוסקופ X, כונני Y, מקם את בוטון החיישן החיובי של חיישן הגלוטמט שנבדק קרוב למרכז שדה התצוגה. לאחר עצירת הרכישה, לחץ על התמונה עם לחצן העכבר השמאלי כדי לקבוע את מיקום X, Y של מרכז בטון מנוחה. הקואורדינטות X, Y של סמן קבוצה יוצגו.באמצעות נתוני הכיול, לחשב את הקואורדינטות של האתר שבו קרן הלייזר צריך להישלח לגירוש של פלואורסצנטיות חיישן גלוטמט באמצעות הנוסחאות כפי שצוין. כדי ליצור רצף של נקודה אחת בתוכנת בקרת הלייזר, בחר נקודה בתיבה הוסף לרצף בדף הרצף של תוכנת בקרת הלייזר והגדר את הריצות ואת השהיית הריצה לאפס, ואת הרצף לפעול ב- TLL. לאחר מכן, לחץ על התחל רצף.בתוכנת בקרת המצלמה, בחר את פרמטרי ההדמיה המתאימים ובחר הפעלה חיצונית עבור מצב הגורם המפעיל. לחץ על קח אות בתוכנת בקרת המצלמה. לאחר מכן, ליזום את פרוטוקול הניסוי שנקבע עבור מכשיר ההדק, וליישם את ניסוי פרוטוקול הניסוי עם ציר הזמן המתאים, כך המצלמה תרכוש 400 מסגרות עם תדר 2.48 קילוהרץ במהלך ניסוי אחד, עם תדר הרץ 0.1 או חזרה נמוכה יותר.כדי לזהות סינפסות פתולוגיות, הפעל את שגרות הגובה וחשב את עוצמת הפלואורסצנטיות, הממוצע וסטיית התקן עבור אזור העניין הנבחר במנוחה. קבע וצור את האזור שנכבש על-ידי פיקסלים בעוצמת פלואורסצנטיות במנוחה גדולה מה הממוצע בתוספת שלוש סטיות תקן, וקבע קוטר וירטואלי במיקרונים בהנחה של צורה מעגלית של אזור סף על-שיח. התווה את עוצמת הפלואורסצנטיות כנגד הזמן, כהבדל בין ערך עוצמת הפלואורסצנטיות בפועל לבין ערך עוצמת הפלואורסצנציה במנוחה חלקי ערך עוצמת הפלואורסצנטיות במנוחה.לקבוע את משרעת השיא של תגובת הפלואורסצנטיות. בצע התאמה מונו-אקספוננציאלית לריקבון מהשיא של תגובת הפלואורסצנטיות, וקבע את קבוע הזמן של ריקבון, TauD. כדי להעריך את משרעת מקסימלית בסינאפזה נתון, בחר את הפיקסל עם השינוי הגבוה ביותר בעוצמת הפלואורסצנטיות, שהוא האינדיקטור הטוב ביותר לעומס הגלוטמט המוצג למכונות האישור של הסינפסה.הדמיה סינפסה אחת יכולה לשמש לזיהוי שתי מחלקות של סינפסות קורטיקוסטריאטרליות באמצעות הקריטריונים גודל יחס הדופק מזווג. במרווחי גירוי של 20 עד 50 אלפיות שנייה, המסופים הבין-אנטרופאליים הקטנים יותר מועדים לדיכאון דופק מזווג, בעוד שמסופי המתיחה הפירמידליים הגדולים יותר הראו הנחיית דופק מזווגת. בדיקות על התנהגות מוטורית המבוצעת על עכברים ועכברים מסוג פראי המבטאת פנוטיפ הנטינגטון, חושפות קורלציה חיובית משמעותית בין התוצאות שהתקבלו עבור הנתיב הכולל לרוץ בשדה הפתוח, ואת הצעד על השהיה.יתר על כן, דימות גלוטמט סינפסה יחיד מראה כי עכברי הנטינגטון סימפטומטיים הציגו גירעון במהירות של ריקבון גלוטמט juxtasynpatic כפי שבא לידי ביטוי בערכי TauD של תגובות גלוטמט לגירוי סינפסה יחיד. בבעלי חיים מסוג בר, הארכה כזו נצפתה רק לאחר היישום של מעכב סלקטיבי, שאינו ניתן להעברה של ספיגת גלוטמט. הערכת ההסתברות להתרחשות של ערך TauD נתון בפרוסות מעכברים מסוג בר, ועכברים המבטאים את הסימפטומים של מחלת הנטינגטון, גילה כי בבעלי חיים מסוג בר, TauD אף פעם לא עולה על 15 אלפיות שנייה.עם זאת, במחלת הנטינגטון הסימפטומטית, 40% מהסינאפסות מציגות ערכי טאוד בין 16 ל-58 אלפיות שנייה, למרות נטייה לירידה בכמות הגלוטמט המשוחרר. לכן, TauD עשוי להיחשב סמן ביולוגי עבור סינפסות מתפקדות במחלת הנטינגטון, והוא עשוי לשמש עוד יותר כדי לאמת התאוששות תפקודית בניסויים מיקוד הובלת גלוטמט אסטרוציטים. פרוטוקול זה עבור ניטור גלוטמט בסינאפסות קורטיקוסטריאט בודדות עשוי לעזור להבהיר את התפקיד של חוסר ספיגת גלוטמט בפתוגנזה של מחלה נוירודגנרטיבית.הדמיה סינפסה אחת שימושית במיוחד לחקר אתרים טרום סינפטיים של סינפסות סינפסות סינפסה.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology

הכנת פרוסות בהיפוקמפוס של חולדות חריפה העכברים הטרנסגניים לחקר שינויים Synaptic במהלך ההזדקנות עמילואיד פתולוגיה

The rodent hippocampal slice preparation is perhaps the most broadly used tool for investigating mammalian synaptic function and plasticity. The ...

GABA-activated Single-channel and Tonic Currents in Rat Brain Slices

GABA המופעל זרמים ערוץ בודד וטוניק פרוסות המוח עכברוש

The GABAA channels are present in all neurons and are located both at synapses and outside of synapses where they generate phasic and tonic currents, ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

קלטות אלקטרו כפולות של תגובות Astroglial ועצביות עוררו-synaptically בפרוסות ביפוקמפוס חריפות

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo electroporation ואחרי הלידה וזמן לשגות הדמיה של neuroblast הגירה בעכבר חריפה פרוסות המוח

The subventricular zone (SVZ) is one of the main neurogenic niches in the postnatal brain. Here, neural progenitors proliferate and give rise to ...

Electrophysiological and Morphological Characterization of Neuronal Microcircuits in Acute Brain Slices Using Paired Patch-Clamp Recordings

אלקטרו ומורפולוגי אפיון של שבבים עצביים במוח חריף Slices שימוש מותאם Patch-קלאמפ הקלטות

The combination of patch clamp recordings from two (or more) synaptically coupled neurons (paired recordings) in acute brain slice preparations with ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

הכנת פרוסות המוח חריפה באמצעות אופטימיזציה N-מתיל-D-שיטת שחזור מגן glucamine

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

הקלטה הפלסטיות הסינפטית בפרוסות בהיפוקמפוס חריפה, בהשתתפות של מיחזור - בנפח מצומצם, זלוף- ומערכת ועלייתו-סוג תא

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Evaluation of Synapse Density in Hippocampal Rodent Brain Slices

הערכה של צפיפות סינפסה פרוסות המוח מכרסמים בהיפוקמפוס

In the brain, synapses are specialized junctions between neurons, determining the strength and spread of neuronal signaling. The number of synapses is ...

Whole-cell Currents Induced by Puff Application of GABA in Brain Slices

זרמים שלמים-תא המושרה על ידי יישום עלים של GABA במוח פרוסות

Pharmacological administration is commonly used when conducting whole-cell patch-clamp recording in brain slices. One of the best methods of drug ...

Evaluation of Hemisphere Lateralization with Bilateral Local Field Potential Recording in Secondary Motor Cortex of Mice

הערכה של החצי הכדור השני עם הקלטה הפוטנציאלי השדה המקומי בקליפת המנוע המשני של עכברים

This article demonstrates complete, detailed procedures for both in vivo bilateral recording and analysis of local field potential (LFP) in the cortical ...