Name: single synapse indicators of glutamate release and uptake in acute brain slices from normal and huntington mice
Uploaded: 2020-03-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Single Synapse Indicators of Glutamate Release and Uptake in Acute Brain Slices from Normal and Huntington Mice at JoVE.com

Detta arbete stöddes av CHDI (A-12467), Den tyska forskningsstiftelsen (Exc 257/1 och DFG Project-ID 327654276 – SFB 1315) och intramural forskningsfonder i Charité. Vi tackar K. Török, St George's, University of London, och N. Helassa, University of Liverpool, för iGluu plasmid och många hjälpsamma diskussioner. D. Betances och A. Schönherr gav utmärkt teknisk hjälp.

Allt arbete har utförts i enlighet med EU-direktiv 2010/63/EU för djurförsök och registrerades vid Kontoret för skydd av marknaden för hälsa och teknisk säkerhet (G0233/14 och G0218/17).
OBS: Inspelningar från Q175 wild-type (WT) och heterozygotes (HETs) kan utföras i alla åldrar och kön. Här studerade vi män och kvinnor vid en ålder av 51 till 76 veckor.
1. Injektion av glutamatsensorn iGluu för uttryck i Korticostriatal A...

Experimenten handlar om en fråga av allmänt intresse – synapsberoende och dess eventuella förlust under neurodegeneration, och vi beskriver en ny metod för att identifiera drabbade synapser i akuta hjärnskivor från äldre (>1 år) möss. Dra nytta av de förbättrade kinetiska egenskaperna hos den nyligen introducerade glutamat sensor iGluu experimenten belysa förhållandet mellan synaptisk glutamat release och upptag på ett sätt som inte har varit möjligt tidigare.
Påv...

Den relativa effekten av varje synaptisk terminal som tillhör en "enhetlig anslutning" (dvs. sambandet mellan 2 nervceller) bedöms vanligtvis av dess påverkan på det ursprungliga segmentet av den postsynaptiska neuron1,2. Somatiska och/eller dendritiska inspelningar från postsynaptiska nervceller representerar de vanligaste och hittills också det mest produktiva sättet att klargöra informationsbehandling under ett uppifrån och ner eller vertikalt perspektiv3,4,5. Förekomsten av astrocyter med deras diskreta och (hos gnagare) icke-överlappande territorier kan dock bidra med ett horisontellt perspektiv som bygger på lokala mekanismer för signalutbyte, integration och synkronisering vid synaptiska platser6,7,8,99,10.
Eftersom det är känt att astroglia spelar, i allmänhet, en viktig roll i patogenesen vid neurodegenerativ sjukdom11,12 och i synnerhet en roll i underhåll och plasticitet av glutamaterga synapser13,14,1515,16, är det tänkbart att förändringar i synaptisk prestanda utvecklas i enlighet med tillståndet av astrocyter i det gemensamma målområdet för afferent fibrer med olika ursprung. För att ytterligare utforska de mål-/astroglia-härledda lokala regleringsmekanismerna vid hälsa och sjukdom är det nödvändigt att utvärdera enskilda synapser. Den nuvarande metoden utarbetades för att uppskatta utbudet av funktionella glutamat release och clearance indikatorer och att definiera kriterier som kan användas för att identifiera dysfunktionella (eller återvunna) synapser i hjärnan områden som är närmast relaterade till rörelse inledande (dvs. först och främst i motor cortex och dorsala striatum).
Striatum saknar inneboende glutamatergic nervceller. Därför är det relativt lätt att identifiera glutamaterga afferents av extrastriatal ursprung. Den senare har mestadels sitt ursprung i den mediala talamus och i hjärnbarken (se17,18,19,20 för mer). Korticostriatal synapser bildas av axoner av pyramidala nervceller lokaliserade i när lager 2/3 och 5. Respektive axoner bildar bilaterala anslutningar inom telencephalic (IT) eller ensidiga anslutningar via ett fibersystem som mer caudally utgör pyramidala tarmkanalen (PT). Det har vidare föreslagits att TERMINALER av IT- och PT-typ skiljer sig åt i sina utgivningsegenskaper och storlek21,,22. Med tanke på dessa uppgifter kan man också förvänta sig vissa skillnader i hanteringen av glutamat.
Striatum är det mest drabbade hjärnområdet vid Huntingtons sjukdom (HS)5. Human Hd är en allvarlig genetiskt ärftlig neurodegenerativ sjukdom. Q175 musmodellen erbjuder en möjlighet att undersöka den cellulära grunden för den hypokinetiska styva formen av HS, ett tillstånd som har mycket gemensamt med parkinsonism. Från en ålder av ca 1 år, homozygotQ175 möss (HOM) uppvisar tecken på hypokinesi, vilket framgår av att mäta den tid som tillbringas utan rörelse i ett öppet fält23. De nuvarande experimenten med heterozygotq175 möss (HET) bekräftade de tidigare motorunderskott som observerats i HOM och visade dessutom att de observerade motorunderskotten åtföljdes av en reducerad nivå av astrocytic excitatoriska aminosyratransportören 2 protein (EAAT2) i omedelbar närhet av korticostriatal synaptiska terminaler24. Det har därför varit en hypotes om att ett underskott i astrocytic glutamat upptag kan leda till dysfunktion eller till och med förlust av respektive synapser25,26.
Här beskriver vi en ny metod som gör det möjligt för en att utvärdera enstaka synaps glutamat clearance i förhållande till mängden av den frigjorda signalsubstansen. Den nya glutamat sensor iGluu uttrycktes i korticostriatal pyramidal nervceller. Det har utvecklats av Katalin Török27 och representerar en ändring av den tidigare introducerade hög-affinitet men långsam glutamat sensor iGluSnFR28. Båda sensorerna är derivat av det förstärkta gröna fluorescerande proteinet (EGFP). För spektrala och kinetiska egenskaper, se Helassa et al.27. Kort, iGluu är en låg affinitet sensor med snabb de-aktivering kinetik och därför särskilt väl lämpad att studera glutamat clearance på glutamat-släppa synaptiska terminaler. Dissociationstidskonstanten för iGluu fastställdes i en stoppad flödesanordning, vilket gjorde en Tauav värde på 2,1 ms vid 20 °C, men 0,68 ms när extrapoleras till en temperatur på 34 °C27. Single Schaffer säkerheter terminaler sonderade vid 34 °C med spiral laser scanning i CA1 regionen organotypic hippocampus kulturer under en 2-fotonmikroskop uppvisade en genomsnittlig tid konstant av förfall på 2,7 ms.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Stereo microsope</td>
			<td>WPI</td>
			<td>PZMIII</td>
			<td>Precision Stereo Zoom Binocular Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic frame</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51500D</td>
			<td>Digital Lab New Standard stereotaxic frame</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High speed drill equipment</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>514439V</td>
			<td>Foredom K1070 cromoter Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection system</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>53311</td>
			<td>Quintessential Stereotaxic Injector (QSI)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe 5 &#181;l</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>87930</td>
			<td>75RN Syr (26s/51/2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser positioning system</td>
			<td>Rapp OptoElectronic</td>
			<td>UGA-40</td>
			<td>UGA-40</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue laser for iGluu excitation</td>
			<td>Rapp OptoElectronic</td>
			<td>DL-473-020-S</td>
			<td>473 nm laser</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichroic mirror for 473 nm</td>
			<td>Rapp OptoElectronic</td>
			<td>ROE TB-355-405-473</td>
			<td>Dichroic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1P upright microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>000000-1066-600</td>
			<td>Axioskop 2 FS Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective 63x/1.0</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>421480-9900</td>
			<td>W Plan-Apochromat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x objective</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>44-00-20</td>
			<td>Achroplan 4x/0,10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichroic mirror for iGluu</td>
			<td>Omega optical</td>
			<td>XF2030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Emission filter for iGluu</td>
			<td>Omega optical</td>
			<td>XF3086</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichroic mirror</td>
			<td>Omega optical</td>
			<td>QMAX_DI580LP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Emission filter for autofluorescence subtr.</td>
			<td>Omega optical</td>
			<td>QMAX EM600-650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sCMOS camera</td>
			<td>Andor</td>
			<td>ZYLA4.2PCL10</td>
			<td>ZYLA 4.2MP Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acqusition software</td>
			<td>Andor</td>
			<td>4.30.30034.0</td>
			<td>Solis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AD/DA converter</td>
			<td>HEKA Elektronik</td>
			<td>895035</td>
			<td>InstruTECH LIH8+8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aquisition software</td>
			<td>HEKA Elektronik</td>
			<td>895153</td>
			<td>TIDA5.25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode positioning system</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>MPC-200</td>
			<td>Micromanipulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical stimulator</td>
			<td>Charite workshops</td>
			<td>STIM-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slicer</td>
			<td>Leica</td>
			<td>VT1200 S</td>
			<td>Vibrotome</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brown/Flaming-type puller</td>
			<td>Sutter Instr</td>
			<td>SU-P1000</td>
			<td>P-1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass tubes for injection pipettes</td>
			<td>WPI</td>
			<td>1B100F3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass tubes forstimulation pipettes</td>
			<td>WPI</td>
			<td>R100-F3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetrodotoxin</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab120054</td>
			<td>TTX</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iGluu plasmid</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>106122</td>
			<td>pCI-syn-iGluu</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q175 mice</td>
			<td>Jackson Lab</td>
			<td>27410</td>
			<td>Z-Q175-KI</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

single synapse indicators of glutamate release and uptake in acute brain slices from normal and huntington mice

Synapser är mycket uppdelade funktionella enheter som fungerar oberoende av varandra. Vid Huntingtons sjukdom (HS) och andra neurodegenerativa sjukdomar kan detta oberoende äventyras på grund av otillräcklig glutamat clearance och de resulterande spridnings- och utspillningseffekterna. Förändrad astrocytisk täckning av presynaptiska terminaler och/eller dendritiska ryggar samt en minskad storlek på glutamat transportör kluster på glutamat release platser har varit inblandad i patogenesen vid sjukdomar som resulterar i symtom på dys-/hyperkinesi. Men de mekanismer som leder till dysfunktion av glutamaterga synapser i HS är inte väl förstådda. Förbättra och tillämpa synapse imaging vi har fått data sprider nytt ljus över de mekanismer som hindrar inledandet av rörelser. Här beskriver vi de viktigaste inslagen i en relativt billig metod för att uppnå en enda synaps upplösning genom att använda den nya genetiskt kodade ultrasnabba glutamat sensor iGluu, wide-field optik, en vetenskaplig CMOS (sCMOS) kamera, en 473 nm laser och en laser positioneringssystem för att utvärdera tillståndet för korticostriatal synapser i akuta skivor från ålder lämpliga friska eller sjuka möss. Glutamat transienter konstruerades från enstaka eller flera pixlar för att få uppskattningar av i) glutamat release baserat på den maximala höjden av glutamat koncentrationen [Glu] bredvid den aktiva zonen och ii) glutamat upptag som återspeglas i tidkonstanten av förfall (TauD) av perisynaptic [Glu]. Skillnader i vilande bouton storlek och kontrasterande mönster av kortsiktiga plasticitet fungerat som kriterier för identifiering av korticostriatal terminaler som tillhör intratelencephalic (IT) eller pyramidala tarmkanalen (PT) väg. Med hjälp av dessa metoder upptäckte vi att i symptomatiska HS möss ~ 40% av PT-typ korticostriatal synapser uppvisade otillräcklig glutamat clearance, vilket tyder på att dessa synapser kan vara i riskzonen för excitotoxic skador. Resultaten understryker taud:s användbarhet som biomarkör för dysfunktionella synapser hos Huntington-möss med en hypokinetisk fenotyp.

Identifiering av två typer av korticostriatal glutamatergic varicosities IT- och PT-afferents har sitt ursprung i lager 2/3 respektive 5, och uppvisar differentialförgreningar och termineringsmönster i den ensidiga och kontralaterala (endast IT-terminaler) striatum. Fortfarande lite är känt om egenskaperna hos glutamat release och clearance under repetitiva aktiveringsförhållanden som observerats under inledandet av rörelser, men det är väl dokumenterat att respektive glutamat-släppa varico...

Watch this Scientific Journal Video about Single Synapse Indicators of Glutamate Release and Uptake in Acute Brain Slices from Normal and Huntington Mice at JoVE.com

Single Synapse Indicators of Glutamate Release and Uptake in Acute Brain Slices from Normal and Huntington Mice

Vi presenterar ett protokoll för att utvärdera balansen mellan glutamat release och clearance vid enstaka korticostriatal glutamatergic synapser i akuta skivor från vuxna möss. Detta protokoll använder fluorescerande sensor iGluu för glutamat upptäckt, en sCMOS-kamera för signalförvärv och en enhet för fokal laserbelysning.

Enda synaps indikatorer på glutamat release och upptag i akut hjärnskivor från normala och Huntington Möss

Synapses are highly compartmentalized functional units that operate independently on each other. In Huntington&#39;s disease (HD) and other ...

Högupplöst bildbehandling av enstaka synapser som uttrycker en snabb glutamatsensor möjliggör en detektering av lokal obalans mellan sändare release och upptag. När det gäller sjukdom kan denna metod användas för att identifiera dysfunktionella synapser. För autofluorescenskorrigering, placera först en hjärnskiva från musen av intresse i inspelningskammaren av ett fotonmikroskop.Submerge skivan i syresatt, konstgjord cerebrospinalvätska och använda 20x vatten-nedsänkning mål att lokalisera dorsala striatum. Fixa skivorna med ett nylongaller på en platinaharpa för att minimera vävnadsrörelsen och byt till 63x-vattenbadsmålet. Med hjälp av ett högpassfilter vid 510 nanometer, förvärva en bild av den autofluorescerande och glutamat sensor positiva strukturer tillsammans.Med hjälp av ett högpassfilter vid 600 nanometer, skaffa en andra bild av de autofluorescerande strukturerna ensam. Om du vill definiera området använder du de medelintensiteter som de 10 ljusaste och 10 mörkaste pixlarna ger när du vill skala de röda och gula bilderna. Sedan utför en subtraktion av den gula minus röda bilden och skala om den subtraherade bilden för att generera en vanlig 8-bitars TIFF-fil för bekväm visualisering av bouton av intresse.För att göra en sökning efter responsiva boutons behöver du en lämplig mikropipette av glas för elektrisk stimulering. Använd en mikropipette puller för att producera stimuleringspipetter från borosilikatglas kapillärer med inre spetsdiametrar på cirka en mikrometer. För att undersöka för åtgärdspotential beroende frisättning av glutamat från en uppsättning kandidat boutons, välj en 63x förstoring och en 510 nanometer utsläppsfilter.Ladda den subtraherade bilden för att tillåta placering av en glasstimuleringselektrod bredvid en fluorescerande varicositet, undvika närheten till ytterligare axoner. I vad varicosities associerade med en maximal bifurkation eller allokering inom djupare del av segmentet. Placera stimuleringselektroden nära bouton av intresse och släck ljuset, eftersom inspelningarna måste utföras i fullständigt mörker.Sedan slår du på flerkanalsbad applikationssystemet, med en kanal leverera standard badlösningen och de andra kanalerna leverera nödvändiga blockerare av jonkanaler, transportörer, eller membranreceptorer, inklusive tetrototoxin för att blockera åtgärder potentiella generering. Styr flödet på platsen för inspelningen och slå på stimulatorn för att leverera depolariserande strömpulser på två till 10 mikroamar till stimuleringspipetten. Utgåvan aktiveras nu genom direkt kalciumtillströmning genom spänningsgrindkanaler.För att visualisera glutamatfrisättning i clearance, med hjälp av mikroskopet X, Y-enheter, placera den testade glutamatsensorns positiva bouton nära viewfield-centret. Efter att ha stoppat förvärvet, klicka på bilden med vänster musknapp för att bestämma X, Y position av vilande bouton centrum. Den X, Y koordinater av den inställda markören kommer att visas.Beräkna med hjälp av kalibreringsdata koordinaterna för den plats där laserstrålen ska skickas för excitation av glutamatsensorns fluorescens med hjälp av formlerna enligt angivan. Om du vill skapa en enpunktssekvens i laserkontrollprogramvaran väljer du punkt i rutan Lägg till i sekvens på sekvenssidan för laserkontrollprogramvaran och ställer in körningen och körfördröjningen till noll, och sekvensen som ska köras vid TLL. Klicka sedan på startsekvens.I programvaran för kamerakontroll väljer du lämpliga bildtagningsparametrar och väljer extern start för utlösningsläget. Klicka på ta signal i programvaran kamerakontroll. Initiera sedan det experimentella protokoll som fastställts för utlösarenheten och implementera försöksförsöket för experimentella protokoll med lämplig tidslinje, så att kameran kommer att förvärva 400 bildrutor med en frekvens på 2,48 kilohertz under en försök, med en 0,1 hertz eller lägre repetitionsfrekvens.För att identifiera patologiska synapser, slå på höjdrutinerna och beräkna fluorescensintensiteten, medelvärdet och standardavvikelsen för den valda intresseregionen i vila. Bestäm och rutan området upptas av pixlar med en fluorescens intensitet i vila större än medelvärdet plus tre standardavvikelser, och bestämma en virtuell diameter i mikrometer förutsatt en cirkulär form av den översta tröskelområdet. Plotta fluorescensintensiteten mot tiden, eftersom skillnaden mellan det faktiska fluorescensintensitetsvärdet och fluorescensintensitetsvärdet i vila dividerat med fluorescensintensitetsvärdet i vila.Bestäm toppamplituden för fluorescenssvaret. Utför en monoexponential montering för sönderfallet från toppen av fluorescens svaret, och bestämma tidskonstanten av förfall, TauD. För att uppskatta maximal amplituden vid en given synaps väljer du pixeln med den högsta förändringen i fluorescensintensitet, vilket är den bästa indikatorn för glutamatbelastningen som presenteras för synapsens clearancemaskineri.Enkel synaps imaging kan användas för att identifiera två klasser av corticostriatal synapser med hjälp av storlek och paras puls förhållandet kriterier. Vid stimulans intervall 20 till 50 millisekunder, de mindre interenterochephalic terminalerna är benägna att parade puls depression, medan de större pyramidal tract terminaler visade parade puls underlättande. Tester på motoriskt beteende som utförs på möss av vildtyp och möss som uttrycker en Huntington-fenotyp, avslöjar en signifikant positiv coorelation mellan de resultat som erhållits för den totala banan som körs i det öppna fältet och steget över latens.Vidare visar enstaka synapse glutamat imaging att symptomatiskt Huntington möss uppvisade ett underskott i hastigheten på juxtasynpatisk glutamat förfall som återspeglas i TauD värdena av glutamat svaren på enda synaps stimulering. Hos djur av vild typ observerades sådan förlängning först efter applicering av en selektiv, icke transportabel hämmare av glutamatupptag. Utvärdering av sannolikheten för förekomst av ett givet TauD-värde i skivor från möss av vildtyp, och möss som uttrycker symptomen på Huntingtons sjukdom, visade att hos vilda djur överstiger TauD aldrig 15 millisekunder.Vid symptomatisk Huntingtons sjukdom uppvisar dock 40%av synapserna TauD-värden mellan 16 och 58 millisekunder, trots en tendens till en minskning av mängden frisläppt glutamat. Därför kan TauD betraktas som en biomarkör för dysfunktionella synapser vid Huntingtons sjukdom, och kan vidare användas för att verifiera funktionell återhämtning i experiment som riktar sig mot astrocytisk glutamattransport. Detta protokoll för glutamat övervakning vid enskilda corticostriatal synapses kan bidra till att klargöra rollen av glutamat upptag brist i patogenesen vid neurodegenerativa sjukdom.Enda synaps imaging är särskilt användbart för att utforska pre-synaptiska platser av retande synapser.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology

Beredning av akut hippocampus Skivor från råttor och transgena möss för studier av Synaptic Förändringar under åldrandet och Amyloid patologi

The rodent hippocampal slice preparation is perhaps the most broadly used tool for investigating mammalian synaptic function and plasticity. The ...

GABA-activated Single-channel and Tonic Currents in Rat Brain Slices

GABA-aktiverade Single-kanal och Tonic Strömmar i skivor Rat Brain

The GABAA channels are present in all neurons and are located both at synapses and outside of synapses where they generate phasic and tonic currents, ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dubbla Elektrofysiologiska Inspelningar av synaptiskt-framkallade astrogliala och neuronala svar i akut hippocampus skivor

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal elektroporation och Time-lapse avbildning av neuroblast migration i mus Akut hjärnan skivor

The subventricular zone (SVZ) is one of the main neurogenic niches in the postnatal brain. Here, neural progenitors proliferate and give rise to ...

Electrophysiological and Morphological Characterization of Neuronal Microcircuits in Acute Brain Slices Using Paired Patch-Clamp Recordings

Elektro och morfologisk karakterisering av neurala Microcircuits i akut hjärnan skivor Använda Kopplade Patch-Clamp Inspelningar

The combination of patch clamp recordings from two (or more) synaptically coupled neurons (paired recordings) in acute brain slice preparations with ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Beredning av akut hjärnskada skivor använder en optimerad N-metyl-D-glucamine skyddande återställningsmetod

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

Inspelning synaptisk plasticitet i akut Hippocampus skivor underhålls i en små volymer återvinning - Perfusion- och nedsänkning-typ kammaresystem

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Evaluation of Synapse Density in Hippocampal Rodent Brain Slices

Utvärdering av synaps densitet i hippocampus gnagare hjärnan skivor

In the brain, synapses are specialized junctions between neurons, determining the strength and spread of neuronal signaling. The number of synapses is ...

Whole-cell Currents Induced by Puff Application of GABA in Brain Slices

Hela-cell strömmar induceras av Puff tillämpningen av GABA i hjärnan skivor

Pharmacological administration is commonly used when conducting whole-cell patch-clamp recording in brain slices. One of the best methods of drug ...

Evaluation of Hemisphere Lateralization with Bilateral Local Field Potential Recording in Secondary Motor Cortex of Mice

Utvärdering av halvklot lateralization med bilateral lokal sätter in potentiell inspelning i sekundär motorisk cortex av möss

This article demonstrates complete, detailed procedures for both in vivo bilateral recording and analysis of local field potential (LFP) in the cortical ...