Name: establishment of a severe dry eye model using complete dacryoadenectomy in rabbits
Uploaded: 2020-01-08T13:00:00
Duration: 7 min 43 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits at JoVE.com

We erkennen de financiële steun van een gerichte onderzoeksmogelijkheden verlening van de Stony Brook University School of Medicine en een onderzoeksbeurs van Medicon Pharmaceuticals, Inc., Setauket, NY. We danken Michele McTernan voor redactionele ondersteuning.

Alle studies met gewervelde dieren werden voltooid in overeenstemming met en naleving van alle relevante regelgevende en institutionele richtlijnen. Alle studies werden goedgekeurd door de institutioneel beoordelings Raad van Stony Brook University en uitgevoerd in overeenstemming met de verklaring van de vereniging voor onderzoek in visie en oogheelkunde (ARVO) voor het gebruik van dieren in oogheelkundige en Vision onderzoek.
1. dieren en huisvesting
<ol><li>Gebruik Nieuw-Zeelandse witte (NZW) konijnen met een gewicht van 2 − 3 kg.</li>
	<li>Huis konijnen individueel in een streng gecontroleerde omgeving: temperatuur (65 ± 5 °F), vochtigheid (45 ± 5%), en verlichting (12 h aan/uit cyclus). Opmerking: als gevolg van agressief gedrag dat vaak wordt tentoongesteld tussen konijnen die zijn ondergebracht in een groep, houdt u dieren in individuele kooien om onbedoelde oogletsel te voorkomen.</li>
	<li>Geef konijnen onbeperkte toegang tot standaard konijn Chow en water.</li>
	<li>Voorzie geen andere voedings enrichments om onbedoelde vitamine A-suppletie te voorkomen die van invloed kan zijn op het droge oog.</li>
	<li>Acclimate konijnen ten minste twee weken voor de opname van de parameters.</li>
</ol>2. verwijdering van het nictitating-membraan
Opmerking: voor de eenvoud wordt de techniek voor het rechteroog hieronder beschreven. Voltooi deze procedure op een identieke manier op het linker oog.
<ol><li>Verwijder het nictitating-membraan bilateraal tijdens de acclimatieperiode (meestal de eerste week).</li>
	<li>Plaats konijn in een passend formaat fixining tas.</li>
	<li>Dien een subcutane injectie van Acepromazine (1 mg/kg) over de schouders toe met behulp van een spuit van 1 CC en een naald van 26 G om het konijn te sedateren. Het eindpunt voor deze milde sedatie is wanneer het dier een ontspannen hoofdpositie behoudt zonder normale scan bewegingen en de oren zijn niet meer volledig rechtop.</li>
	<li>Gebruik een micro pipet en breng 25 μL conserveringsmiddelen vrij lidocaïne (1%) naar het oog. Plaats een draaddeksel speculum tussen de oogleden.</li>
	<li>Pak het nictitating membraan op zijn Apex met 0,3 Tang (of gelijkwaardig) en trek het over het hoorbare oppervlak. Injecteer 1% lidocaïne met 1:100000 epinefrine in de subconjunctivale ruimte van de nictitating membraan met behulp van een 26 G naald. Injecteer ongeveer 0,3 mL om een bescheiden-sized bleb te vormen over het nictitating membraan. Injectievolumes van meer dan 1 mL zijn goed binnen een veilig doseringsbereik voor konijnen (2 − 4 mg/kg).</li>
	<li>Verwijder de draad speculum. Wacht ongeveer 5 minuten voor de lidocaïne en adrenaline te activeren. Voer gedurende deze periode dezelfde procedure uit in het collega-oog.</li>
	<li>Vervang de draad deksel speculum. Pak en verleng het nictitating-membraan over het corneale oppervlak met behulp van de 0,3-Tang. Snijd het membraan op de basis met tenotomie schaar of gelijkwaardig. Opmerking: bloeden is meestal minimaal, maar houd een hoge temperatuur accu cauterisatie unit in de buurt en gebruik zo nodig om bloeden te minimaliseren. Directe druk over de snij basis van het nictitating-membraan kan ook worden gebruikt om kleine bloedingen te stoppen als deze zich voordoen.</li>
	<li>Verwijder het draad deksel speculum. Plaats actuele antibioticum zalf (neomycine, Polymyxine, bacitracine en hydrocortison) over het corneale oppervlak.</li>
	<li>Een identieke procedure uit te voeren naar het collega-oog zoals aangegeven in het protocol.</li>
	<li>Plaats de dieren terug in afzonderlijke kooien en laat ze gedurende ten minste één week genezen, of totdat het conjunctivale oppervlak volledig is genezen vanuit klinisch oogpunt, voordat u verdere testen of interventies uitvoert. Opmerking: volledige klinische genezing wordt aangegeven door een gebrek aan zwelling, injectie of afscheiding uit de conjunctivale oppervlakken. Dieren moeten hun ogen normaal open houden, zonder de aanwezigheid van beschermende ptose.</li>
</ol>3. meting van droge ogen parameters en verzameling van scheurmonsters
<ol><li>Meet de volgende parameters, afhankelijk van het experimentele Protocol: scheur osmolariteit, Tear break-up tijd, Schirmer's Tear test, en Rose Bengal kleuring. Voer ze uit zoals eerder beschreven12, met een team van ten minste twee onderzoekers. Opmerking: een team van ten minste twee onderzoekers zorgt voor de efficiënte meting van grotere groepen dieren (6 of meer) rond dezelfde klok tijd, waardoor mogelijke circadiane variatie geen invloed heeft op de resultaten.</li>
</ol>4. chirurgische voorbereiding en anesthesie
<ol><li>Licht bezadigd dieren geplaatst in een fixatie zakje met subcutane Acepromazine zoals hierboven (1 mg/kg).</li>
	<li>Verwijder alle vacht op het gezicht en het rugoppervlak van de schedel om de chirurgische monumenten te visualiseren.<ol>
<li>Trim vacht met snij scharen die rest fijn bont achterlaten met een lengte van ongeveer 1 mm (Figuur 4A, links).</li>
		<li>Verwijder alle overblijvende vacht met behulp van milde onthardings crème volgens de instructies van de fabrikant (Figuur 4A, rechts).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Markeer chirurgische incisie sites met een chirurgische pen.<ol>
<li>Identificeer de incisieplaats over de posterieure incisure door het toepassen van mediale druk op de aardbol waardoor een kleine buiging te ontwikkelen in de huid over de posterieure incisure van verzakking van de oslg.</li>
		<li>Maak een lineaire 2 cm-markering in de voorste/achterste richting op de huid over het rugoppervlak van de schedel direct over deze plaats met een chirurgische markerings stift.</li>
		<li>Bij het plannen van de incisie voor het verwijderen van de ILG, Markeer een lange, curvilinelaire lijn rond het oog (1 cm van de inferieure en temporele deksel marge) die zich uitstrekt van de achterste (temporele) baan naar de voorste (mediale) Canthus. Zorg ervoor dat de markering zich uitstrekt langs de achterste baan tot het niveau van de mediale Canthus of gewoon superieur is aan deze (Figuur 4B). In sommige dissecties, de incisies te verwijderen van de OSLG en de ILG zal worden aangesloten. Opmerking: Markeer beide banen op dit moment bij het uitvoeren van bilaterale chirurgie.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Trim een pleister van bont 2 tot 3 cm breed met scharen over het laterale oppervlak van elke dij om plaatsing van een monopolaire cauterie plaat toe te staan.<ol>
<li>Breng ultrasone gel aan om goed elektrisch contact te garanderen met de monollaire cauterie plaat.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Plaats een 25 G intraveneuze (IV) katheter in een van de marginale aders van het oor om zo nodig medicatie of vocht te toedienen.</li>
	<li>Geef subcutaan xylazine (1 mg/kg) en I.V. ketamine (15 mg/kg) voor de initiële inductie van anesthesie (via de I.V.-toegang). Opmerking: als het konijn van tevoren met Acepromazine voldoende wordt verdoofd om het in stap 2,3 beschreven eindpunt te behouden, gebruik dan een gasmasker sedatie met Isofluraan als alternatief.</li>
	<li>Plaats een larynxmasker luchtweg gehouden op zijn plaats met behulp van een elastische band of string te beveiligen en onderhouden van de luchtweg.<ol>
<li>Sluit het masker aan op de anesthesie machine met zuurstof stroom ingesteld op 1 L/min.</li>
		<li>Stel de Isofluraan op 5% in eerste instantie en vervolgens verminderen als getolereerd op basis van het niveau van dierlijke sedatie.</li>
		<li>Houd Isofluraan op of boven 2% tot de laatste wondsluiting. Opmerking: Evalueer het niveau van sedatie door monitoring van de ademhalingsfrequentie en bewegingen als reactie op chirurgische of pijnlijke stimuli. Verhoog de diepte van de anesthesie als de ademhalingsfrequentie stijgt boven 10 ademhalingen per minuut, als het konijn begint te kauwen op de luchtwegen Maintainer, of als er bewegingen in reactie op pijnlijke stimuli worden waargenomen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Monitor Pulse oximetrie, capnografie, bloeddruk, rectale lichaamstemperatuur en hartslag met behulp van een Multi-parameter bewakings apparaat of andere geschikte apparaten.<ol>
<li>Bewaak Vitals continu tijdens de procedure en noteer elke 10 tot 15 minuten.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Plaats het konijn op de operatiekamer (of) tafel over een verwarmingspad om hypothermie te voorkomen. Kantel de tafel in een omgekeerde Trendelenburg positie bij ongeveer 30 ° om bloedingen te minimaliseren.</li>
	<li>Bereid het chirurgische gebied met een Povidon-jodiumoplossing verdund tot half-sterkte met steriel water en draperen om een steriel veld te behouden.</li>
</ol>5. volledige chirurgische dacryoadenectomie
Opmerking: de volledige chirurgische dacryoadenectomie, zoals hierin beschreven, werd gedaan met behulp van 0,3 weefsel Tang, tenotomie schaar, niet-getande weefsel Tang en schaar. Deze instrumenten kunnen worden afgewisseld met soortgelijke instrumenten die dezelfde functie vervullen op basis van de voorkeur van de chirurg.
<ol><li>Verwijder eerst de OSLG.<ol>
<li>Infiltreren de incisie sites (chirurgische markering pen lijnen en bovenste posterieure deksel) met een 50:50 mengsel van 2% lidocaïne met 1:100000 epinefrine en 0,5% de met behulp van een 5 CC spuit met een 30 G naald (Figuur 5a). Opmerking: spuit en naald grootte zijn niet kritisch.</li>
		<li>Gebruik een Colorado naald aangesloten op een elektrochirurgische eenheid te maken van de huid incisies langs de chirurgische markeringen. De instellingen kunnen variëren afhankelijk van de klinische respons en zijn meestal tussen de 10 en 15 eenheden voor zowel knippen als coagulatie (Figuur 5B).</li>
		<li>Breng tegengestelde spanning over de huid incisie om de weefsels te scheiden en bloot de onderliggende frontoscutularis spiervezels.</li>
		<li>Breng mediale druk op de wereld om de visualisatie van de OSLG te helpen, gezien als uitpuilende weefsel gelegen net mediaal of diep naar de frontoscutularis spiervezels. Indien nodig, verplaats deze spiervezels naar de zijkant om de onderliggende incisure bloot te leggen.</li>
		<li>Met getande Tang (0,3) en capsulotomie-schaar wordt de vezelige capsule voorzichtig teruggetrokken en gesneden, boven de OSLG. De OSLG heeft meestal een bleke bruine kleur (Figuur 5C).</li>
		<li>Gebruik de getande of niet-getande Tang, pak het OSLG klierweefsel en trek het voorzichtig uit door de superieure snijkracht met behulp van een "hand-over-hand" techniek. Snijd kleine, vezelige bands met behulp van capsulotomie schaar om de klier vrij te maken van zijn positie in de baan (Figuur 5D). Opmerking: als de OSLG klierweefsel wordt verwijderd, het zal beginnen te Coalesce in een grote buis-achtige structuur (hoofd excretie kanaal).</li>
		<li>Wanneer de klier is verwijderd zo volledig mogelijk, gebruik royale cauterie met de Colorado naald te maken weefsel char, afkappen van de klier binnen het snijpunt zo diep mogelijk. Dit zal later dienen als een bevestigende oriëntatiepunt tijdens het verwijderen van de PSLG.</li>
	</ol></li>
	<li>Verwijder de PSLG.<ol>
<li>Evert het bovenste ooglid met behulp van een met katoen getipt applicator. Het bolachtige uiteinde van de PSLG is meestal gemakkelijk zichtbaar. Opmerking: in sommige anatomische dissecties kan het mogelijk zijn om de belangrijkste uitscheidings buis te visualiseren als een bleke lineaire structuur van ongeveer 1 of 2 mm breed.</li>
		<li>Neem contact op met de PSLG met getande Tang (0,3) en trek het van het ooglid aan terwijl u de capsulotomie-schaar gebruikt om de basis ervan te scheiden van de onderliggende Tarsus (Figuur 6A).</li>
		<li>Regelmatige bloeding met het monopolaire cauterie.</li>
		<li>Breng continue tractie op het afgescheiden weefsel aan om een weefsel vlak voor dissectie te behouden. Hierdoor kan het hoofd uitscheidingskanaal van de SLG ook worden verwijderd (Figuur 6B). Opmerking: als het dissectie wordt uitgevoerd, zal het meestal doorgaan naar de superieure orbitale rand, waar het mogelijk is om de oormerken achtergelaten te zien van het verwijderen van de meer superieure en mediaal gelegen OSLG.</li>
	</ol></li>
	<li>Resect de ILG.<ol>
<li>Laat minstens 5 minuten toe om de plaatselijke verdoving in werking te laten gaan.</li>
		<li>De huid, de depressieve spier van de inferieure palpebra, het zygomaticolabiale deel van de zygomatische spier en orbicularis spier met de Colorado micro dissectie naald, scheiden als voor de OSLG in punt 5,1.</li>
		<li>Onderhouden van hemostase met de monopolaire cauterie.</li>
		<li>Als de incisie dieper door de huid markering wordt gedragen, zoekt u de glans van een fasciaal vlak over het zygomatisch bot of oppervlakkige deel van de spier van de kauw. Op dit punt, handhaven van het weefsel vlak en dragen het bovenzijde naar de orbitale rand met behulp van de Colorado naald voor het snijden (Figuur 7A). Opmerking: voor het identificeren van de ILG is het het gemakkelijkst om dit deel van de dissectie uit te voeren over het hoofd van de ILG, dat typisch inferieur is aan de voorste limbus van het oog.</li>
		<li>Na het identificeren en gebeuren van de capsule rond de ILG, identificeren van de Tan weefsel van de ILG. Alleen het voorste gedeelte van de ILG-kop zal zichtbaar zijn (Figuur 7B). Echter, het hoofd kan worden gevolgd mediaal als het passeert onder de zygomatische boog en overgangen in de staart (Figuur 7C).</li>
		<li>Gebruik tenotomie-schaar om het orbitale septum te knippen langs de inferieure rand die het achterste deel van de ILG-staart bloot. Zodra het weefsel vlak is geïdentificeerd, verlengt u de dissectie posteriorly langs de gehele incisie lijn (Figuur 7D). Opmerking: het kanaal van de ILG passeert door de lagere vezelgebonden bindweefsels om de inferieure conjunctivale ruimte in het temporele aspect van het deksel in te voeren. Aan de achterste rand kan de staart van de ILG verschillende anatomische configuraties hebben. Soms eindigt het inferieur aan de achterste (laterale) Canthus, terwijl in andere dissecties het meer bovenzijde rond de stoffelijke baan uitbreidt.</li>
		<li>Gebruik uiterste zorgvuldigheid om onbedoelde schade aan de bloedtoevoer te voorkomen, die de ILG ontvangt van takken van de halsslagader. De bloedtoevoer kan worden gezien tijdens dit deel van de sectie (Figuur 7E).</li>
		<li>In gevallen waar de staart eindigt onder de achterste (laterale) Canthus, kan het nodig zijn om het temporale gedeelte van de frontoscutular spier te doorsnijdt om de staart van de ILG, die langs het zygomatische bot ligt bloot te leggen.</li>
		<li>Nadat de hele ILG is geïsoleerd en blootgesteld, verwijder deze. Door zijn grote omvang is het vaak de voorkeur om de klier in tweeën te knippen met een schaar en het hoofd los van de staart te verwijderen.</li>
		<li>Ga heel voorzichtig te werk bij het verwijderen van het hoofd van de ILG, omdat het direct grenst aan een grote veneuze sinus in de baan. Hoewel bloeden uit deze structuur tijdens chirurgische resecties is niet opgetreden, hebben voldoende hemostatische hulpmiddelen aanwezig om dit risico te beperken.</li>
		<li>Na verwijdering van alle klierweefsel, sluit het diepe bindweefsel vlak met meerdere onderbroken 5-0 ethyleen tereftalaathechtingen. Sluit de oppervlakkige spieren en de huid met een running 6-0 polyglactin 910 hechtmiddel (Figuur 7F) met behulp van 0,3 weefsel Tang en een naald bestuurder.</li>
	</ol></li>
</ol>6. postprocedurele zorg
<ol><li>Undrape de dieren en reinig de chirurgische plaatsen met steriel water.</li>
	<li>Pas actueel oftalmisch antibioticum en steroïde zalf (neomycine, Polymyxine, bacitracine, en hydrocortison) aan de incisies. Doorgaan met deze toepassing twee keer per dag voor 2 dagen.</li>
	<li>Geef een subcutane injectie van 20 mL normale zoutoplossing over de schouderbladen met een 26 G naald.</li>
	<li>Geef subcutane buprenorfine 0,01 mg/kg of ketoprofen 3 mg/kg voor pijnbestrijding met behulp van een 1 cc spuit en 30 G naald. Opmerking: dieren moeten terugkeren naar hun normale inname en activiteiten binnen 1 − 2 dagen. Konijnen moeten ten minste wekelijks worden geëvalueerd op klinische verschijnselen van infectie, zoals blijkt uit progressieve zwelling, pijn, erytheem, calor of etterende afscheiding over de incisie-sites. Dieren moeten ook worden nageleefd om ervoor te zorgen dat ze niet beginnen te krabben de incisie plaatsen/hecht lijnen. Het trimmen van alle klauwen voorafgaand aan dacryoadenectomie kan in dit verband nuttig zijn. Als krassen op de incisie lijnen wordt waargenomen, kunnen standaard beschermende halsbanden worden gebruikt om zelfverwonding te voorkomen.</li>
	<li>Omgekeerde de anesthesie.<ol>
<li>Verwijder de luchtwegen onderhouder nadat het dier reageert op stimuli en begint te spontaan kauwen weergeven, maar voordat de luchtvracht schip kan worden beschadigd.</li>
		<li>Bewaak dieren gedurende ongeveer 1 − 2 uur of totdat ze volledig zijn hersteld van anesthesie, zoals blijkt uit spontane bewegingen in hun kooien.</li>
		<li>Beoordeel dieren op pijn en behandel ze op gepaste wijze.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Laat dieren gedurende ten minste 1 week na de operatie herstellen voordat er klinische maatregelen van DED worden gedaan.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Gillan, W. D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tear+biochemistry:+A+review.">Tear biochemistry: A review.</a> South African Optometrist. 69 (2), 100-106 (2010).</li><li>Conrady, C. D., Joos, Z. P., Patel, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review:+The+Lacrimal+Gland+and+Its+Role+in+Dry+Eye.">Review: The Lacrimal Gland and Its Role in Dry Eye.</a> Journal of Ophthalmology. 2016, 7542929 (2016).</li><li>Schechter, J. E., Warren, D. W., Mircheff, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lacrimal+gland+is+a+lacrimal+gland,+but+rodents'+and+rabbits'+are+not+human.">A lacrimal gland is a lacrimal gland, but rodents' and rabbits' are not human.</a> Ocular Surface. 8 (3), 111-134 (2010).</li><li>Shinomiya, K., Ueta, M., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+dry+eye+mouse+model+produced+by+exorbital+and+intraorbital+lacrimal+gland+excision.">A new dry eye mouse model produced by exorbital and intraorbital lacrimal gland excision.</a> Scientific Reports. 8 (1), 1483 (2018).</li><li>Bhattacharya, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tear+Production+After+Bilateral+Main+Lacrimal+Gland+Resection+in+Rabbits.">Tear Production After Bilateral Main Lacrimal Gland Resection in Rabbits.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (13), 7774-7783 (2015).</li><li>Chen, Z. Y., Liang, Q. F., Yu, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+rabbit+model+for+keratoconjunctivitis+sicca.">Establishment of a rabbit model for keratoconjunctivitis sicca.</a> Cornea. 30 (9), 1024-1029 (2011).</li><li>Li, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+the+mild,+moderate+and+severe+dry+eye+models+using+three+methods+in+rabbits.">Establishment of the mild, moderate and severe dry eye models using three methods in rabbits.</a> BioMed Central Ophthalmology. 13, 50 (2013).</li><li>Honkanen, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+New+Rabbit+Model+of+Chronic+Dry+Eye+Disease+Induced+by+Complete+Surgical+Dacryoadenectomy.">A New Rabbit Model of Chronic Dry Eye Disease Induced by Complete Surgical Dacryoadenectomy.</a> Current Eye Research. , 1-10 (2019).</li><li>Nisha, S., Deepak, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Insight+Into+Ophthalmic+Drug+Delivery+System.">An Insight Into Ophthalmic Drug Delivery System.</a> International Journal of Pharmaceutical Studies and Research. 3 (2), 9-13 (2012).</li><li>Davis, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Anatomy+and+Histology+of+the+Eye+and+Orbit+of+the+Rabbit.">The Anatomy and Histology of the Eye and Orbit of the Rabbit.</a> Transactions of the American Ophthalmological Society. 27, (1929).</li><li>Popesko, P., Rajitova, V., Horak, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rabbit+-+Guinea+Pig.">Rabbit - Guinea Pig.</a> A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals. 1, (1992).</li><li>Honkanen, R. A., Huang, L., Rigas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rabbit+model+of+aqueous-deficient+dry+eye+disease+induced+by+concanavalin+A+injection+into+the+lacrimal+glands:+Application+to+drug+efficacy+studies.">A rabbit model of aqueous-deficient dry eye disease induced by concanavalin A injection into the lacrimal glands: Application to drug efficacy studies.</a> Journal of Visualized Experiments. , e59631 (2019).</li><li>Wei, Y., Asbell, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+core+mechanism+of+dry+eye+disease+is+inflammation.">The core mechanism of dry eye disease is inflammation.</a> Eye &amp; Contact Lens. 40 (4), 248-256 (2014).</li><li>Pflugfelder, S. C., de Paiva, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Pathophysiology+of+Dry+Eye+Disease:+What+We+Know+and+Future+Directions+for+Research.">The Pathophysiology of Dry Eye Disease: What We Know and Future Directions for Research.</a> Ophthalmology. 124 (11S), S4-S13 (2017).</li><li>Gilbard, J. P., Rossi, S. R., Gray, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rabbit+model+for+keratoconjunctivitis+sicca.">A new rabbit model for keratoconjunctivitis sicca.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 28 (2), 225-228 (1987).</li><li>Odaka, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+retinol+palmitate+eye+drops+for+dry+eye+in+rabbits+with+lacrimal+gland+resection.">Efficacy of retinol palmitate eye drops for dry eye in rabbits with lacrimal gland resection.</a> Clinical Ophthalmology. 6, 1585-1593 (2012).</li><li>Toshida, H., Nguyen, D. H., Beuerman, R. W., Murakami, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+novel+dry+eye+model:+preganglionic+parasympathetic+denervation+in+rabbit.">Evaluation of novel dry eye model: preganglionic parasympathetic denervation in rabbit.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 48 (10), 4468-4475 (2007).</li><li>Burgalassi, S., Panichi, L., Chetoni, P., Saettone, M. F., Boldrini, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+simple+dry+eye+model+in+the+albino+rabbit+and+evaluation+of+some+tear+substitutes.">Development of a simple dry eye model in the albino rabbit and evaluation of some tear substitutes.</a> Ophthalmic Research. 31 (3), 229-235 (1999).</li><li>Xiong, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rabbit+dry+eye+model+induced+by+topical+medication+of+a+preservative+benzalkonium+chloride.">A rabbit dry eye model induced by topical medication of a preservative benzalkonium chloride.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 49 (5), 1850-1856 (2008).</li><li>Shiue, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+modulation+of+fluid+secretion+in+the+pigmented+rabbit+conjunctiva.">Pharmacological modulation of fluid secretion in the pigmented rabbit conjunctiva.</a> Life Science. 66 (7), 105 (2000).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rabbit+conjunctival+epithelium+transports+fluid,+and+P2Y2(2)+receptor+agonists+stimulate+Cl(-)+and+fluid+secretion.">Rabbit conjunctival epithelium transports fluid, and P2Y2(2) receptor agonists stimulate Cl(-) and fluid secretion.</a> American Journal of Physiology: Cell Physiology. 281 (2), C595-C602 (2001).</li><li>Dartt, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+mucin+and+fluid+secretion+by+conjunctival+epithelial+cells.">Regulation of mucin and fluid secretion by conjunctival epithelial cells.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 21 (6), 555-576 (2002).</li></ol>

De auteurs verklaren geen concurrerende belangen, met uitzondering van BR, die een eigen vermogenspositie heeft in Medicon Pharmaceuticals, Inc. en APIs Therapeutics, LLC; en LH, een medewerker van Medicon Pharmaceuticals, Inc. met een eigen vermogenspositie in APIs Therapeutics, LLC.

DED is ingedeeld in twee belangrijke groepen op basis van het effect op de stabiliteit van de scheur film: waterige deficiënte (verminderde productie van de waterige component van de traanfilm; ~ 20% van de DED) en verdampings (verhoogde verdamping van de traanfilm; ~ 50% van DED). Ongeveer 30% van de patiënten vertonen een bewijs van beide (gemengd). Ontsteking is het kern mechanisme van DED waaraan de diverse etiologieën13,14convergeren. Onze methode modellen waterige-deficiënte.
Zoals eerder vermeld, zijn belangrijke eerste stappen bij het reproduceren van onze methode een waardering van de fijne punten van de anatomie van de orbitale traanklieren (LGs) van het konijn en het vermijden van verwarring door gevarieerde en soms conflicterende anatomische terminologie. De anatomische Atlas van Popesko et al.11 is zeer grondig. Voor degenen die minder comfortabel zijn met de anatomie van het konijn, biedt een dissectie van de obductie monsters een gemakkelijke vertrouwdheid met deze structuren en helpt ze hun chirurgische verwijdering in levende specimens.
Een kritisch advies over huisvesting en acclimatiëring is gegeven in onze begeleidende publicatie12. Hetzelfde artikel presenteert ook nuttige opmerkingen voor het aszeggen van de parameters van DED gebruikt in beide methoden.
In tegenstelling tot de vorige methode12, vereist deze een hoger niveau van chirurgische vaardigheid vanwege de mate en meer invasieve aard van de technieken die nodig zijn om de lgs te verwijderen. Het grootste risico tijdens deze resecties is een catastrofale bloeding veroorzaakt door het inwonden van grote bloedvaten die zich in de nabijheid van de LGs bevinden, zoals takken van de halsslagader. Dit wordt vermeden door elke LG en zijn marges binnen het chirurgische veld adequaat te visualiseren. Tot slot, overijverige verwijdering van het nictitating membraan kan leiden tot de verzakking van de Harderian klier, die scheuren film beoordeling kan verstoren.
Zorg moet worden genomen om de hoeveelheid conjunctivale verstoring te minimaliseren met de verwijdering van de PSLG, een nieuw aspect van onze methode dat de reproduceerbaarheid verbetert en de ernst van de DED verbetert. Het is verrassend eenvoudig om het dissectie vlak te vestigen en het terug te voeren naar de superieure orbitale richel, zolang de tractie op de weefsels wordt uitgeoefend. Het is geruststellend om de oormerken van de afkapping van de OSLG te kunnen zien; ze bevestigen de volledige verwijdering van de belangrijkste excretie kanaal van de klier.
Het verwijderen van de ILG in zijn geheel presenteert ook uitdagingen. Isoleer eerst het hoofd van de klier, want dit is het eenvoudigste deel om te visualiseren. Het hele hoofd van het klierweefsel scheidt gemakkelijk van de omringende weefsels; echter, enige zorg moet worden gebruikt om schade aan de grote veneuze sinus, die mediaal aan het hoofd van de ILG ligt te voorkomen. De staart van de ILG kan vervolgens worden opgevolgd als het onder het zygomatische bot passeert. De meerderheid van de staart is gemakkelijk te isoleren. Het meest posterieure aspect van de staart kan echter een grotere uitdaging blijken te zijn vanwege de variabele anatomie en de nabijheid van een middelgrote tak van de carotis. Zorgvuldige dissectie moet toelaten dat alle marges van de ILG duidelijk worden gezien, waardoor de volledige verwijdering ervan wordt vergemakkelijkt. De onderzoeker moet bereid zijn om de dissectie meer superieur te dragen in gevallen waar de staart van de klier eindigt onder de laterale Canthus, zoals uitgelegd in de eerdere bespreking van de anatomie van de traanklieren. Van de nota, de auteurs hebben nooit in staat geweest om een deel van de OSLG te identificeren bij het ontleden van de ILG door een kromlijnige incisie langs de stoffelijke en inferieure wereldbol. Hoewel dit technisch mogelijk kan zijn, draagt die chirurgische aanpak een te hoog risico voor ernstige bloedingen. Het naderen van de OSLG door de posterieure incisure blijkt veel veiliger.
Het uitscheidingskanaal van de ILG kan door middel van het inferieure fasciale vlak worden gezien als het in de onderste conjunctivale fornix overgaat. Af en toe worden hier ook kleine door van klierweefsel gezien en kunnen ze zorgvuldig worden verwijderd.
Het is zeer nuttig om de volgorde van LG resectie zoals hier gepresenteerd. Als de ILG eerst wordt verwijderd, wordt de isolatie van de OSLG technisch veel moeilijker. De belangrijkste reden is dat, na verwijdering van de ILG, de OSLG niet gemakkelijk kan worden verzakte en daardoor geïdentificeerd.
Een belangrijk voordeel van ons model is dat het "modulair" kan zijn. Met andere woorden, de mate van DED geïnduceerd door dacryoadenectomie kan worden gekalibreerd om experimentele behoeften te serveren. Bijvoorbeeld, resectie van alle LGs zou leiden tot maximale DED, maar resectie van alleen de SLG zou veroorzaken de mildste vorm van DED en resectie van alleen de ILG zou genereren ziekte van intermediaire ernst.
Onze aanpak, die het verschillende pathofysiologisch voorval van verminderde scheur productie samengeeft, biedt extra voordelen ten opzichte van reeds gerapporteerde methoden. Kort, geen andere chirurgische model geëlimineerd scheur productie door alle orbitale lgs5,6,7,15,16; waaronder parasympathische denervatie van de lgs17, en farmacologische onderdrukking van scheur productie18,19, met de laatste twee hebben hun afwijkend effecten als belangrijke medeoprichters. Ten slotte minimaliseert dit model de belangrijkste onderzoeker afhankelijke bias, namelijk de onvolledige resectie van de LGs, omdat de chirurgische techniek hun volledige visualisatie biedt; Dit wordt geholpen door het feit dat er geen hemostase, anders dan cauterie, vereist is.
De onderzoeker moet Cognizant zijn dat volledige resectie van alle orbitale LGs geen volledige afwezigheid van tranen genereert en, bijvoorbeeld, de Tear testwaarden van Schirmer die bij nul naderen, mogen niet worden verwacht. Dit is te wijten aan het feit dat er altijd andere bronnen van scheur vloeistof zoals de accessoirelgs van wolfring en Krause en plasma lekkage van conjunctivale vaten20,21,22. Vanuit een experimenteel oogpunt moet dit gezien worden als een positief aspect van de methode omdat het het oogoppervlak handhaaft; complete xeroftalmie zou volledig vernietigen het hoornvlies ontkende het nut van het model. Daarnaast biedt dit model in zijn huidige uitvoeringsvorm een uitstekende gelegenheid om dergelijke compenserende mechanismen en vloeistoftransport over deze kleinere compartimenten te bestuderen.
Tot slot, hier gepresenteerd zijn de bijzonderheden van een roman en veelzijdige methode van het induceren van waterige-deficiënte die zich leent voor de studie van scheur fysiologie, de pathogenese van DED en de studie van therapeutische middelen wordt ontwikkeld voor deze indicatie.

Tranen zijn nodig voor de bescherming van het oogoppervlak en voor het onderhoud van de optische eigenschappen van het hoornvlies. Ze bestaan uit drie lagen: een binnenste mucine-coating, een middelste waterige component en een lipide-overlay1. De mucine-laag wordt voornamelijk geproduceerd in beker cellen van het bindvlies, de waterige component voornamelijk in de traanklieren (lgs), en de lipidenlaag voornamelijk in de meibomische klieren1,2. De orbitale LGs zijn de belangrijkste bron voor de waterige component van tranen en voor veel van de eiwitten die het oppervlak beschermen tegen bacteriële aanval3. Oculaire oppervlakte ziekten ontstaan wanneer de waterige traanproductie lager is dan een kritisch niveau, waardoor de epitheliale oppervlakken van het oog van de waterige component en cruciale scheur bestanddelen, waaronder groeifactoren, lysozym en lactoferrin, worden ontnomen. In gevallen van verminderde traanproductie door de LGs ondergaan de conjunctivale en cornea weefsels aanpassingen om de veranderde omgeving te compenseren.
Het begrijpen van de bijdrage van de scheur component afgeleid van de orbitale LGs en de compenserende mechanismen van het oogoppervlak wanneer dit ontbreekt, beïnvloedt onze waardering van de Fysiologie en pathofysiologie van het voorste segment van het oog en, meer in het algemeen, van gezondheid en ziekte in de hele wereld. De experimentele aanpak van deze kwesties vereist een informatief diermodel. Daarom hebben verschillende groepen geprobeerd om diermodellen te ontwikkelen waarin de orbitale LGs worden verwijderd, waardoor de beoordeling van de rol van tranen in de ooggezondheid wordt vergemakkelijkt. Een dergelijk model werd onlangs gerapporteerd voor de muis4. Het konijn biedt echter veel duidelijke voordelen ten opzichte van knaagdieren modellen, met inbegrip van soortgelijke anatomische en histologische structuren van de LG, en misschien nog belangrijker, vergelijkbare grootte en oppervlakte van het hoornvlies en conjunctivale weefsels in vergelijking met hun menselijke tegenhangers3.
Creatie van waterige deficiënte droge ogen ziekte (DED) door chirurgische resectie van LG weefsel bij konijnen is niet nieuw. Talrijke rapporten beschrijven resectie van LG weefsels met wisselend succes weerspiegeld in variabele veranderingen in de scheur productie gemeten door de schirmer's Tear test5,6,7,8. Een grondig begrip van de relevante anatomie van het konijn en duidelijkheid over de anatomische terminologie zijn zeer nuttig bij het reproduceren van deze methode. Hieronder vindt u een grondig overzicht van beide.
Anatomie van de traanklieren
Het konijn heeft twee orbitale LGs: de grotere inferieure LG (ILG) en de kleinere superieure LG (SLG; Figuur 1). De ILG strekt zich uit langs het minderwaardige en posterieure aspect van de orbitale rand. Met uitzondering van de variabele grootte, heeft het voorste deel van de ILG een vrij uniforme bolvormige verschijning die kan worden gezien als een knobbel in de huid onder de aardbol (Figuur 2). Vanwege zijn karakteristieke verschijning ten opzichte van de rest van de klier, wordt het aangeduid als het "hoofd" van de ILG. Een deel van het hoofd wikkelt rond en ligt op het buitenoppervlak van het zygomatische bot. Dit dient als een nuttige oriëntatiepunt op ultrasone biomicroscopie om injecties in de ILG te begeleiden. De rest van het hoofd bevindt zich meer mediaal9 in de baan.
Vanwege het karakteristieke uiterlijk van het overgebleven deel van de ILG, dat lang en dun is, wordt dit segment de "staart" genoemd. De staart loopt langs de onderste rand van de orbitale, van het hoofd van de ILG naar de orbitale rand waar het eindigt met variabele anatomie aan de inferieure en achterste orbitale rand (Figuur 3A). De staart ligt diep (mediaal) aan het zygomatisch bot, gescheiden van de orbitale inhoud door een fasciale band voor het grootste deel van zijn loop, totdat het de achterste rand van de baan bereikt, waar het zich opnieuw uitstrekt over het buitenoppervlak van het zygomatische bot. De ILG ontvangt zijn bloedtoevoer uit takken van de halsslagader.
De SLG heeft twee componenten analoog aan de mens. Een daarvan is de palpebrale superieure LG (PSLG), die zich in het bovenste posterieure ooglid mediale aan de tarsale plaat bevindt. Het lijkt bolbaar van aard en heeft talrijke punctata openingen die waterige scheur vloeistof afvoeren die gemakkelijker te zien is wanneer bedekt met 2% fluoresceïne (Figuur 3B).
De tweede is de orbitale superieure LG (OSLG), woonachtig in een mediale positie in de superieure baan (Figuur 3C). Vanwege zijn positie in de buurt van de middellijn van de schedel, is het onmogelijk geweest om het met succes te identificeren met behulp van externe chirurgische benaderingen van de temporale of inferieure baan. In verse obductie monsters of chirurgische gevallen kan deze klier worden doorgeproteseerd door de posterieure incisure gelegen in het rugoppervlak van de schedel wanneer zachte mediale druk wordt uitgeoefend op de aardbol. Verzakking van dit klierweefsel kan worden gedocumenteerd met ultrasone biomicroscopie.
De PSLG en OSLG zijn aaneengesloten structuren. De oslg is een tubuloalveolaire structuur waarvan de ductale architectuur stoffelijke in de belangrijkste excretie kanaal. Dit kanaal passeert onder de supra-orbitale Ridge en loopt in de bovenste deksel weefsels eindigend in de PSLG. Langs het uitscheidingskanaal is het klierweefsel in overeenstemming met de oorspronkelijke beschrijvingen van Davis geïdentificeerd10 (Figuur 3D).
Een opmerking over terminologie
Uitstekende en uitgebreide anatomische beschrijvingen gebruiken ook verschillende terminologie. De klassieke orbitale anatomie van Davis definieert alleen een bovenste en onderste LG10. Echter, zijn beschrijving van de bovenste LG duidelijk details van de porties meer specifiek gedefinieerd hier als de PSLG en OSLG, terwijl zijn beschrijving van de lagere LG Details van de porties gedefinieerd hier als het hoofd en de staart van de ILG. Een recentere en grondige anatomische Atlas11 definieert deze weefsels als de zygomatische klier en het accessoire LG. De term "traanklier" wordt hier gebruikt om de bovengenoemde PSLG en OSLG te omvatten. Deze terminologie is beter geschikt voor het reproduceren van deze methode zonder onnodige verwarring.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>acepromazine, Aceproinj</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td>NDC11695-0079-8</td>
			<td>0.1ml/kg subcutaneously injection for rabbit sedation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anesthesia vaporizer</td>
			<td>VetEquip, Pleasanton, CA</td>
			<td>Item # 911103</td>
			<td>Protocol 4.8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>animal restraining bag</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td>Jorvet J0170</td>
			<td>Use appropriately sized bag.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bupivacaine, 0.5%</td>
			<td>Hospira Inc, Lake Forest IL</td>
			<td>NDC: 0409-1162-02</td>
			<td>Mixed 50:50 with 2% lidocaine with 1:100,000 epinephrine for infiltration of incision sites, protocol 5.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>buprenorphine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td></td>
			<td>0.01 mg/kg, for postprocedural care, 6.1.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cautery unit, high-temperature, battery-powered</td>
			<td>Medline Industries Inc, Northfield, IL</td>
			<td>REF ESCT001</td>
			<td>Keep on hand in case of bleeding, protocol 2.7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clipper, Wahl Mini Arco</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td>No. 022573</td>
			<td>Cordless shears for fur removal, protocol 4.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Colorado needle</td>
			<td>Stryker Craniomaxillofacial, Kalamazoo, MI</td>
			<td>N103A</td>
			<td>Use with electrosurgical unit to make incisions, protocol 5.1 &#38; 5.3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrosurgical unit with monopolar cautery plate</td>
			<td>Valleylab, Boulder, CO</td>
			<td>Force FXc</td>
			<td>Use with electrosurgical unit to make incisions, protocol 5.1 &#38; 5.3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescein, Ak-Fluor 10%</td>
			<td>AKRON, Lake Forest, IL</td>
			<td>NDC17478-253</td>
			<td>Dilute to 0.2% with PBS to measure TBUT, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>foceps, curved dressing</td>
			<td>Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ</td>
			<td>Storz E1406</td>
			<td>delicate serrated dressing forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps, 0.3</td>
			<td>Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ</td>
			<td>ET6319</td>
			<td>For removal of nictating membrane, protocol 2.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps, Bishop Harmon</td>
			<td>Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ</td>
			<td>E1500-C</td>
			<td>Use toothed forceps for dacryoadenectomy, protocol 5.1 &#38; 5.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair remover lotion, Nair</td>
			<td>Widely available</td>
			<td>Softening Baby oil</td>
			<td>Dipilitory cream for sensitive skin, protocol 4.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td>29405</td>
			<td>Possible alternative sedation, protocol 4.7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IV catheter, Terumo Surflo ETFE 24-gauge</td>
			<td>Terumo, Tokyo, Japan; available from Fisher Sci., VWR, McKesson, etc.</td>
			<td>SR-OX2419CA</td>
			<td>25-gauge for smaller rabbits; protocol 4.6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td>NDC 11695-0701-1; NADA 200-055</td>
			<td>15 mg/kg, protocol 4.7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketoprofen</td>
			<td>Hospira, Inc., Lake Forest, IL</td>
			<td></td>
			<td>3 mg/kg, for postprocedural care, 6.1.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laryngeal mask airway</td>
			<td>Docsinnovent Ltd, London, UK</td>
			<td>Vgel R3</td>
			<td>Protocol 4.8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lid speculum, wire</td>
			<td>Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ</td>
			<td>Barraquer SUH01</td>
			<td>For removal of nictating membrane, protocol 2.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lidocaine 2% with epinephrine 1:100,000; 50:50 mixture</td>
			<td>Hospira Inc, Lake Forest IL</td>
			<td>NDC 0409-3182-02</td>
			<td>Pre-treat before removal of nictating membranes, protocol 2.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lidocaine, preservative-free</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td>L5647</td>
			<td>1% in PBS for anesthesia agent, for application to eye, protocol 2.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micropipette</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>Research Plus 100 uL</td>
			<td>For application of preservative-free lidocaine to eye, protocol 2.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micropipette tips</td>
			<td>World Wide Medical Products</td>
			<td>41071052</td>
			<td>For application of preservative-free lidocaine to eye, protocol 2.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>monitoring device, multi-parameter</td>
			<td>SurgiVet, Waukesha, WI</td>
			<td>V9201</td>
			<td>For monitoring of vitals, protocol 4.9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle, 26-gauge</td>
			<td>BD, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>REF 305115</td>
			<td>For injection of lidocaine/epinephrine, protocol 2.3 &#38; 2.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle, 30-gauge</td>
			<td>BD, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>REF 305106</td>
			<td>For infiltration of incision sites; syringe and needle size are not critical, protocol 5.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>osmolarity tips</td>
			<td>TearLab Corp., San Diego, CA</td>
			<td>#100003 REV R</td>
			<td>Measure tear osmolarity measurement of dry eye parameters, protocol 3.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>osmometer, TearLab</td>
			<td>TearLab Corp., San Diego, CA</td>
			<td>Model#200000W REV A</td>
			<td>Measure tear osmolarity, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>povidone-iodine solution</td>
			<td>Medline Industries Inc, Northfield, IL</td>
			<td>PVP Prep Solution, NDC: 53329-939-04, REF MDS 093944</td>
			<td>To maintain sterile field, protocol 4.11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rabbit, New Zealand White</td>
			<td>Charles River Labs, Waltham, MA (NZW)</td>
			<td>2-3 kg</td>
			<td>Research animals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rose bengal stain</td>
			<td>Amcon Laboratories Inc., St. Louis, MO</td>
			<td>NDC51801-004-40</td>
			<td>1% in PBS, for staining the ocular surface, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saline, normal</td>
			<td>B. Braun Medical, Irvine, CA</td>
			<td>REF R5200-01</td>
			<td>For postprocedural care, protocol 6.1.3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schirmer Tear Test strips</td>
			<td>Eaglevision, Katena products. Denville, NJ</td>
			<td>AX13613</td>
			<td>Measure tear production, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scissors, Vannas</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical, San Francisco, CA</td>
			<td>Miltex 2-130</td>
			<td>Capsulotomy scissors for dacryoadenectomy, protocol 5.1 &#38; 5.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scissors, Westcott tenotomy</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical, San Francisco, CA</td>
			<td>Miltex 18-1480</td>
			<td>For removal of nictating membrane, protocol 2.7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sedation gas mask</td>
			<td>DRE Veterinary, Louisville, KY</td>
			<td>#1381</td>
			<td>Possible alternative sedation, protocol 4.7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical marking pen</td>
			<td>Medical Action Industries, Arden, ND</td>
			<td>REF 115</td>
			<td>Protocol 4.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sutures, 5-0 Mersilene</td>
			<td>Ethicon US, LLC</td>
			<td></td>
			<td>Ethylene terephthalate sutures, used for deep connective tissue closure, protocol 5.3.11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sutures, Vicryl 6-0</td>
			<td>Ethicon US, LLC</td>
			<td></td>
			<td>Polyglactin 910 sutures, used for superficial muscle and skin closure, protocol 5.3.11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringe, 1 cc</td>
			<td>BD, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>ref 309659</td>
			<td>For injection of lidocaine/epinephrine, protocol 2.3 &#38; 2.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringe, 5 cc</td>
			<td>BD, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>REF 309603</td>
			<td>For infiltration of incision sites; syringe and needle size are not critical, protocol 5.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue forceps, 0.8mm Graefe</td>
			<td>Roboz Surgical Store, Gaithersburg, MD</td>
			<td>RS-5150</td>
			<td>Curved Weck forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>topical antibiotic ointment (neomycin, polymyxin, bacitracin, and hydrocortisone)</td>
			<td>Bausch and Lomb, Tampa, FL</td>
			<td>NDC 24208-785-55</td>
			<td>Applied after removal of nictating membrane, protocol 2.8, and for postprocedural care, protocol 6.1.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ultrasound gel</td>
			<td>Parker Laboratories, Inc., Fairfield, NJ</td>
			<td>Aquasonic 100</td>
			<td>To ensure electrical contact with monopolar cautery plate, protocol 4.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td>NADA: 139-236</td>
			<td>1 mg/kg, protocol 4.7</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment of a severe dry eye model using complete dacryoadenectomy in rabbits

Droge ogen ziekte (DED) is een complexe ziekte met meerdere etiologieën en variabele symptomen, met een oculaire oppervlakte ontsteking als de belangrijkste pathofysiologisch stap. Ondanks vooruitgang in ons begrip van DED, blijven er aanzienlijke kennislacunes bestaan. Voorschotten zijn deels beperkt vanwege het gebrek aan informatieve diermodellen. De auteurs onlangs gemeld op een methode van DED geïnduceerd door het injecteren van alle orbitale traanklier (LG) weefsels met de lectine concanavalin A. Hier rapporteren we een nieuw model van waterige-deficiënte DED op basis van de chirurgische resectie van alle orbitale LG (dacryoadenectomie) weefsels. Beide methoden gebruiken konijnen vanwege hun gelijkenis met menselijke ogen in termen van de grootte en structuur van het oogoppervlak. Een week na verwijdering van de nictitating membraan, de orbitale superieure LG werd chirurgisch verwijderd onder anesthesie, gevolgd door verwijdering van de ooglid superieure LG, en ten slotte verwijdering van de inferieure LG. dacryoadenectomie geïnduceerde ernstige, bewezen door een duidelijke reductie van de scheur tijd test en de scheur test van Schirmer, en significant toegenomen scheur osmolariteit en Rose Bengal kleuring. Dacryoadenectomie-geïnduceerde DED duurde ten minste acht weken. Er waren geen complicaties en dieren getolereerd de procedure goed. De techniek kan relatief gemakkelijk worden beheerst door mensen met adequate chirurgische ervaring en waardering van de relevante konijnen anatomie. Aangezien dit model de kenmerken van de menselijke waterige deficiënt samenvult, is het geschikt voor studies van oculaire oppervlakte homeostase, DED, en kandidaat-Therapeutics.

De volledige dacryoadenectomie-methode die hier wordt beschreven, werd uitgevoerd op 8 dieren. Het vereist een gematigde graad van chirurgische vaardigheid. Chirurgische tijd gemiddeld ongeveer 2,2 h voor bilaterale chirurgie, met uitzondering van de verwijdering van de nictitating membraan, die afzonderlijk werd gedaan en vereist < 10 minuten. Er waren geen dodelijke ongelukken of intraoperatieve complicaties en geen konijn vereiste hemostatische hulp anders dan bescheiden cauterie.
Onze chirurgische aanpak heeft met succes het droge oog in alle ogen geïnduceerd. Dit werd bevestigd door een panel van klinische en laboratorium markers van DED (tabel 1). Tijdens de 8 weken van observatie, de gemiddelde TBUT werd onderdrukt door meer dan 75% van de preoperatieve niveaus (p < 0,0001 voor alle tijdspunten). Evenzo daalde de scheur test van de Schirmer met ongeveer 50%, nog in de 8 weken van observatie; het toonde geen trend voor herstel tijdens de follow-up periode. Postoperatief toonde scheur osmolariteit een stijging van 10% consistent met DED, gedurende ten minste 8 weken na de operatief. Rose Bengal kleuring van het hoornvlies ook verhoogd en niet tekenen van herstel vertonen tijdens de 8 weken van follow-up (Figuur 8). Alle ogen die een volledige dacryoadenectomie ondergaan toonden een duidelijke afname van de celaantallen van de Goblet en epitheliale veranderingen consistent met droge ogen (conjunctivale impression cytologie).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60126/60126fig1.jpg"> Figuur 1: konijn lacrimale klier anatomie (rechter oog). De orbitale superieure traanklier (OSLG) bestaat uit een groter orbitaal deel en een kleinere palpebrale component. De grotere inferieure traanklier (ILG) bestaat uit de voorste/hoofd en posterieure/staart porties. Coördinaat assen tonen de terminologie die wordt gebruikt voor alle beschrijvingen van de oriëntatie die in de tekst wordt gebruikt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60126/60126fig1alarge.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60126/60126fig2.jpg"> Figuur 2: plaats van het hoofd van de ILG. De laterale weergave van het rechter gezicht na verwijdering van de vacht. Een buiging in de huid contour (aangegeven door dikke pijlen) inferieur aan de voorste baan geeft de locatie aan van het hoofd van de ILG dat op het buitenoppervlak van het zygomatische bot op deze plaats ligt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60126/60126fig2alarge.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60126/60126fig3.jpg"> Figuur 3: de orbitale traanklieren. A) de rechter inferieure traanklier (ILG) na kleuring met Evans Blue Dye toont de nabijheid van de staart van de ILG (rode pijl) gewoon mediaal naar het zygomatische bot (zwarte pijl) en inferieur aan de aardbol. B) de productie van scheuren uit de palpebrale superieure traanklier (PSLG). Timelapse-Foto's genomen na topische toepassing van 2% fluorescein. Waterige vloeistof afkomstig van de pslg verdunt de aanvankelijk donker blauwe of zwarte fluoresceïne kleurstof draaien het fel geel groen (vergelijkbaar met Seidel testen). C) positie van de ORBITALE SLG (oslg) in de schedel van het konijn, gelegen dicht bij de middellijn van de schedel (gestippelde lijn) binnen de posterieure incisure (pijl). Evans Blue Dye werd geïnjecteerd in de OSLG en palpebrale superieure traanklier. D) histologie sectie door het hoofd uitscheidingskanaal van de OSLG omgeven door een kleine hoeveelheid klierweefsel (Arrow) wordt gezien in deze histopathologische dwarsdoorsnede gekleurd met HEMA oxylin en eosine kleurstoffen genomen door het achterste (temporele) aspect van het bovenste rechter ooglid. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60126/60126fig3large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60126/60126fig4.jpg"> Figuur 4: voorbereiding van de chirurgische plaats. (A) linker paneel: verwijdering van lange vacht met scharen. Alle resterende fijne vacht wordt vervolgens verwijderd met een milde onthardings crème. Bovenste rechter paneel: laatste verschijning na volledige vacht verwijdering die het mogelijk maakt voor chirurgische markering en hoge kwaliteit echografie van de ILG worden uitgevoerd. B) er worden geschikte chirurgische markeringen van de rechter periorbitale regio getoond; in dit voorbeeld, de incisies te verwijderen van de oslg en ILG zijn verbonden aan een lange kromlijnige incisie te maken. De locatie van de posterieure incisure wordt aangegeven door een kleine hash-markering op de curvilinelaire incisie site markering (pijl). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60126/60126fig4large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60126/60126fig5.jpg"> Figuur 5: verwijdering van de OSLG. (A) chirurgische sites worden geïnfiltreerd met verdoving met behulp van een 50:50-combinatie van 2% lidocaïne met 1:100000 epinefrine en 0,5% bupivacaine, die in de bovenste deksel en langs de incisie lijnen wordt geïnjecteerd om ongemak tijdens de procedure te minimaliseren. B) een Colorado-micro dissectie naald wordt gebruikt om de huid en oppervlakkige spier lagen langs de vooraf gemarkeerde locaties van de chirurgische incisie te verdrijven. Zachte tractie over de wond wordt toegepast om het dissectie vlak te helpen creëren. De kleine lokaliseren brandwonden (pijl) werden gemaakt met de Colorado naald op gelijke afstand punten langs de incisie lijn om optimaal te helpen de weefsels tijdens de wondsluiting. C) de OSLG wordt blootgesteld nadat de weefsels zijn gemobiliseerd (Arrow). De capsule van de klier is ingesneden. De oslg kan worden verzakte door het toepassen van mediale druk op de aardbol vergemakkelijken van de verwijdering ervan. D) de Tang wordt gebruikt om de OSLG in te schakelen en voorzichtig uit zijn diepere positie in de baan te verwijderen door de posterieure incisure. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60126/60126fig5large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60126/60126fig6.jpg"> Figuur 6: verwijdering van de palpebrale superieure traanklier (PSLG) en excretie kanaal. A) na de eversie van het bovenste ooglid wordt het bolachtige deel van het PSLG met een tang verteerd en met een schaar uit de Tarsus gedissneden. De tractie op de PSLG met een tang is cruciaal voor het behoud van het chirurgische vlak. B) de dissectie van het PSLG en het hoofd traan kanaal worden overheerst naar de orbitale rand met behulp van scherpe dissectie en continue tractie op de klier en duct weefsels om het juiste chirurgische vlak te behouden. Het dissectie moet overgaan tot het punt waar de OSLG werd verwijderd. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60126/60126fig6large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60126/60126fig7.jpg"> Figuur 7: verwijdering van de ILG. A) de huid en de oppervlakkige spier massa worden ingesneden totdat het fasciale vlak boven het zygomatische bot of het oppervlakkige deel van de spier van de kauw is bereikt. Het hoofd van de ILG is meestal duidelijk zichtbaar als een kleine bobbel onder de voorste limbus. B) de vezelloze capsule van de ILG wordt ingesneden met een schaar die de ILG bloot maakt. Zodra de capsule is ingesneden, kunnen de diepere delen van de klier gemakkelijk worden verwijderd. C) het meest externe gedeelte van de ILG-kop dat op het zygomatische bot ligt, is blootgesteld en weerspiegeld in anterieure waaruit het onderliggende zygomatische bot blijkt. D) insnijding van het orbitale septum langs de onderste rand onthult de staart van de ILG. E) een tak van de uitwendige halsslagader voedt de staart van de ILG (pijl). F) uiterlijk na de afsluiting van huid incisies na volledige dacryoadenectomie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60126/60126fig7large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60126/60126fig8.jpg"> Figuur 8: Rose-Bengaalse kleuring van het corneale oppervlak. Externe foto met prominente kleuring, meest opvallende op het nasale Kwadrant. Alle ogen ondergaan volledige dacryoadenectomie ontwikkelde soortgelijke veranderingen die duidelijk waren door 1 week na de operatie en persistent gemaakt voor ten minste 6 weken. De lichtreflex van de ring flits toont vervorming van een droog oculair oppervlak waaruit blijkt hoe droog oog een negatief effect kan hebben op het zicht. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60126/60126fig8large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="2">Dacryoadenectomie</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="2">gemiddelde ± SEM; n = 16 ogen</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Basislijn</td>
			<td>Week 2</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">Break-up tijd scheur, s</td>
			<td rowspan="2">60,0 ± 0,0</td>
			<td>4,5 ± 1,2</td>
		</tr>
<tr>
<td>p < 0,0001</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">Scheur osmolariteit, mOsm</td>
			<td rowspan="2">291,2 ± 3,7</td>
			<td>315,3 ± 5,5</td>
		</tr>
<tr>
<td>p = 0,001</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">Schirmer scheur test, mm</td>
			<td rowspan="2">18,3 ± 1,3</td>
			<td>10,5 ± 1,6</td>
		</tr>
<tr>
<td>p = 0,0006</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">Rose Bengal, gemodificeerde NEI-Score</td>
			<td rowspan="2">0,0 ± 0,0</td>
			<td>4,28 ± 0,6</td>
		</tr>
<tr>
<td>p < 0,0001</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="3">Bediend VS. Baseline: Dacryoadenectomie: tbut, p < 0,0001; scheur osmolariteit, p < 0,001; Schirmer-scheur test, p < 0,0006); en Rose Bengal.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabel 1: droge ogen parameters op postoperatieve week 2.

Watch this Scientific Journal Video about Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits at JoVE.com

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

Een nieuwe aanpak wordt gepresenteerd voor het opwekken van chronische droge ogen ziekte bij konijnen door chirurgisch verwijderen van alle orbitale traanklieren. Deze methode, die verschilt van de eerder gerapporteerde, produceert een stabiel, reproduceerbaar model van waterige deficiënte droge ogen dat goed geschikt is voor het bestuderen van scheur fysiologie en pathofysiologie en oculaire therapieën.

Oprichting van een ernstig droog Oogmodel met volledige Dacryoadenectomie bij konijnen

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

Onze veilige, reproduceerbare methode voor een volledige dacryoadenectomie bij konijnen creëert een consistente toestand van waterige deficiënte droge ogen die nuttig is voor het bestuderen van de fysiologie van de ziekte en de werkzaamheid van therapeutische interventies. Verwijdering van de superieure orbitale en palpebrale traanklieren verbetert aanzienlijk de consistentie en ernst van het geïnduceerde droge oog en beperkt de compenserende veranderingen in scheurproductie tot de oculaire oppervlakteweefsels. Lacrimale klierweefsels die in het orbitale compartiment liggen, voegen zich bij aan een grote vasculaire structuur.Vertrouwdheid met de anatomie zal grote hulp verwijderen en helpen voorkomen dat chirurgische complicaties. Verwijdering van de traanklier systeem is een matig complexe techniek waarbij meerdere incisie locaties en chirurgische vlakken, die het best visueel wordt aangetoond. Begin met het bilateraal verwijderen van het nictiterende membraan.Gebruik een micropippette om 25 microliter conserveermiddelvrij 1%Lidocaïne op het oog aan te brengen en steek een dekselspectulum tussen de oogleden. Pak het nictiterende membraan aan de top met 0,3 tangen en trek het over het hoornvliesoppervlak. Injecteer vervolgens ongeveer 0,3 milliliter van 1%Lidocaïne met één tot 100.000 Epinephrinum in de subconjuctival ruimte, met behulp van een 26-meter naald.Dit zal een bescheiden smet bleb over de nictitating membraan vormen. Verwijder het draadspectulum en wacht ongeveer vijf minuten tot het Lidocaïne en de Epinephrinum van kracht worden. Voer ondertussen dezelfde procedure uit aan het andere oog.Wanneer u klaar bent, vervang u het draadspectulum, grijp en breidt u het nictiterende membraan over het hoornvliesoppervlak uit met de tangen en snijdt u het membraan aan de basis door met een tenotomy-schaar. Verwijder het draadspeulum en plaats actuele antibioticazalf over het hoornvliesoppervlak. Om de orbitale superieure traanklier, of OSLG te verwijderen, infiltreren de incisie sites met een 50 tot 50 mengsel van 2%Lidocaïne en een tot 100, 000 Epinephrinum met 0,5% buikbeen.Gebruik vervolgens een Colorado-naald die is aangesloten op een elektrochirurgische eenheid om de huidincisies langs de chirurgische markeringen te maken. Typische instellingen zijn tussen de 10 en 15 eenheden voor zowel knippen als stolling, maar kunnen variëren, afhankelijk van de klinische respons. Breng tegenspanning over de huidincisie aan om de weefsels te scheiden en de onderliggende frontoscutularis spiervezels bloot te stellen.Breng vervolgens mediale druk op de aardbol uit om de visualisatie van de OSLG te helpen, die wordt gezien als uitpuilende weefsels die zich slechts mediaal of diep aan de frontoscutularis spiervezels bevinden. Indien nodig, verplaats de spiervezels naar de zijkant om de onderliggende incisure bloot te stellen, en gebruik getande tang met capsulotomie schaar om voorzichtig in te trekken en snijd de vezelige capsule over de OSLG. Met behulp van tangen, pak de OSLG klier weefsel en voorzichtig trek het door de superieure incisure met behulp van een hand-over-hand techniek.Snijd kleine vezelige banden met de capsulotomie schaar om de klier te bevrijden van zijn positie in de baan. Wanneer de klier is verwijderd, gebruik royale cautery met de Colorado naald om weefsel char te maken, truncating de klier binnen de incisure zo diep mogelijk. Dit zal later dienen als een bevestigend oriëntatiepunt tijdens de verwijdering van de palpebral superieure traanklier, of PSLG.Om de PSLG te verwijderen, evert het bovenste ooglid met een katoen-getipt applicator, die de bolvormige einde van de PSLG zichtbaar zal maken. Schakel de PSLG met getande tangen in en trek deze uit het ooglidoppervlak terwijl u capsulotomieschaar gebruikt om rond de basis te snijden en deze te scheiden van de onderliggende tarsus. Controle matige bloeden met de monopolaire cautery.Breng continue tractie op het gescheiden weefsel vlak voor dissectie, waardoor de belangrijkste uitscheidingskanaal van de superieure traanklier, of SLG, worden verwijderd, ook. Om de grotere inferieure traanklier, of ILG, gebruik maken van de Colorado microdisseratie naald te snijden en scheiden van de huid, de depressor spier van de inferieure palpebra, de zygomatische of labiale deel van de zygomatische spier, en de orbicularis spier. Onderhoud hemostase met de monopolaire cautery.Als de incisie dieper door de huidmarkering wordt gedragen, zoekt u naar de glans van een fasciaal vlak over het jukbeen of het oppervlakkige deel van de masseterspier. Op dit punt, onderhoud het weefsel vlak en draag het superieur naar de orbitale rand. Identificeer en snij de capsule rond de ILG in en identificeer vervolgens het bruine weefsel van de ILG.Alleen het voorste gedeelte van de ILG-kop zal zichtbaar zijn, maar het kan mediaal worden gevolgd als het onder de zygomatische boog passeert en overgaat in de staart. Gebruik tenotomie schaar om de orbitale septum snijden langs de inferieure rand, het blootstellen van de meer achterste gedeelte van de ILG staart. Zodra het weefsel vlak is geïdentificeerd, strek de dissectie achterste lijk langs de gehele incisie lijn.Gebruik extreme zorg om de bloedtoevoer die de ILG ontvangt van takken van de halsslagader niet te beschadigen. Zodra de hele ILG is blootgesteld, verwijder het. Als de staart eindigt onder de achterste canthus, zie het manuscript voor excisie richtingen.Vanwege het grote formaat kan het beter zijn om de klier doormidden te snijden en de kop apart van de staart te verwijderen. Nadat de klier is verwijderd, sluit u het diepe bindweefselvlak met meerdere onderbroken 5-0 ethyleenterraftalaathechtingen. Sluit vervolgens de oppervlakkige spieren en huid met een rennende 6-0 polyglactim 910 hechting met behulp van 0,3 weefsel tangen en een naald driver.Deze chirurgische aanpak is met succes gebruikt om droge oogziekte te induceren, die werd bevestigd met een panel van klinische en laboratoriummarkers. Tijdens de acht weken van observatie werd de gemiddelde scheurbreuktijd onderdrukt door meer dan 75% van de preoperatieve niveaus. Ook de schirmer scheurtest daalde met ongeveer 50%en de scheur osmolarity steeg met 10%, wat overeenkomt met droge oogziekte.Volledige chirurgische resectie is het gemakkelijkst als de superieure orbitale traanklier eerst wordt verwijderd. Het is belangrijk om alle lacrimale klierweefselmarges volledig bloot te leggen.

Research

JoVE Journal

Medicine

Mouse Complete Stasis Model of Inferior Vena Cava Thrombosis

Muis Compleet Stasis Model van Inferior Vena Cava trombose

Venous thromboembolism (VTE) includes both deep vein thrombosis (DVT) and pulmonary embolism (PE).  In the United States (U.S.), the high morbidity and ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Een Kneuzing Model van Severe ruggenmergletsel bij ratten

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

A Step by Step Protocol for Subretinal Surgery in Rabbits

Een Step by Step Protocol voor Subretinal Surgery in Rabbits

Age related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa, and other RPE related diseases are the most common causes for irreversible loss of vision in ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

Punctie-geïnduceerde Iris Neovascularization als een muismodel van Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Intense Pulsed Light for the Treatment of Dry Eye Owing to Meibomian Gland Dysfunction

Intense Pulsed Light voor de behandeling van droge ogen als gevolg van Meibomian klier dysfunctie

Dry eye disease (DED) is an increasingly common condition and one of the most common complaints of patients. The vast majority of DED is caused by the ...

Severe Burn Injury in a Swine Model for Clinical Dressing Assessment

Ernstige Burn schade in een varkens-Model voor de evaluatie van de klinische Dressing

Wound healing is a dynamic repair process and is the most complex biological process in human life. In response to burn injury, alterations in biological ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrische Contractility meting van de muis mesenterische slagader met behulp van draad Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies

Een konijn model van waterige-deficiënte droge oogziekte geïnduceerd door Concanavalin Een injectie in de lacrimal klieren: Toepassing op drug werkzaamheid Studies

Dry eye disease (DED), a multifactorial inflammatory disease of the ocular surface, affects 1 in 6 humans worldwide with staggering implications for ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

Een porcine Corneale endotheliale orgel cultuur model met behulp van splitsen Corneale knoppen

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...

Establishment of a Mouse Severe Acute Pancreatitis Model using Retrograde Injection of Sodium Taurocholate into the Biliopancreatic Duct

Vaststelling van een muis ernstig acuut pancreatitismodel met behulp van retrograde injectie van natrium taurocholaat in het biliopancreatische kanaal

The prevalence of acute pancreatitis (AP), especially severe acute pancreatitis (SAP), is increasing in younger age groups annually. However, there is a ...