Name: a ferret model of inflammation-sensitized late preterm hypoxic-ischemic brain injury
Uploaded: 2019-11-19T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Ferret Model of Inflammation-sensitized Late Preterm Hypoxic-ischemic Brain Injury at JoVE.com

تم تمويل تطوير النموذج بيل وميليندا غيتس المؤسسة ، فضلا عن المعاهد القومية للصحة منحه 5R21NS093154-02 (NICHD).

وقد أجريت الإجراءات وفقا لدليل المعاهد القومية للصحة لرعاية واستخدام المختبرات الحيوانية وكجزء من البروتوكول المعتمد من قبل لجنه الرعاية والاستخدام المؤسسي للحيوانات في جامعه واشنطن.
1. الاعداد وأداره LPS
ملاحظه: راجع الشكل 1 للجدول ا...

<ol>
	<li>Martin, J. A., Hamilton, B. E., Osterman, M. J. K., Driscoll, A. K., Drake, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Births:+Final+Data+for+2017.">Births: Final Data for 2017.</a> National Vital Statistics Report. 67 (8), 1-49 (2018).</li><li>Vanhaesebrouck, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EPIBEL+study:+outcomes+to+discharge+from+hospital+for+extremely+preterm+infants+in+Belgium.">The EPIBEL study: outcomes to discharge from hospital for extremely preterm infants in Belgium.</a> Pediatrics. 114 (3), 663-675 (2004).</li><li>Raju, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Term+Healthcare+Outcomes+of+Preterm+Birth:+An+Executive+Summary+of+a+Conference+Sponsored+by+the+National+Institutes+of+Health.">Long-Term Healthcare Outcomes of Preterm Birth: An Executive Summary of a Conference Sponsored by the National Institutes of Health.</a> Journal of Pediatrics. , (2016).</li><li>Raju, T. N. K., Buist, A. S., Blaisdell, C. J., Moxey-Mims, M., Saigal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adults+born+preterm:+a+review+of+general+health+and+system-specific+outcomes.">Adults born preterm: a review of general health and system-specific outcomes.</a> Acta Paediatrica. 106 (9), 1409-1437 (2017).</li><li>Bennet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+inflammation+and+impaired+development+of+the+preterm+brain.">Chronic inflammation and impaired development of the preterm brain.</a> Journal of Reproductive Immunology. 125, 45-55 (2018).</li><li>Reich, B., Hoeber, D., Bendix, I., Felderhoff-Mueser, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperoxia+and+the+Immature+Brain.">Hyperoxia and the Immature Brain.</a> Developmental Neuroscience. 38 (5), 311-330 (2016).</li><li>Galinsky, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+interactions+between+hypoxia-ischemia+and+inflammation+in+preterm+brain+injury.">Complex interactions between hypoxia-ischemia and inflammation in preterm brain injury.</a> Developmental Medicine &amp; Child Neurology. 60 (2), 126-133 (2018).</li><li>Empie, K., Rangarajan, V., Juul, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+the+ferret+a+suitable+species+for+studying+perinatal+brain+injury.">Is the ferret a suitable species for studying perinatal brain injury.</a> International Journal of Developlemental Neuroscience. 45, 2-10 (2015).</li><li>Snyder, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+white+matter,+toll-like+receptor+expression,+and+motor+skills+in+the+neonatal+ferret.">Ontogeny of white matter, toll-like receptor expression, and motor skills in the neonatal ferret.</a> International Journal of Developlemental Neuroscience. , (2018).</li><li>Schwerin, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progression+of+histopathological+and+behavioral+abnormalities+following+mild+traumatic+brain+injury+in+the+male+ferret.">Progression of histopathological and behavioral abnormalities following mild traumatic brain injury in the male ferret.</a> Journal of Neuroscience Research. 96 (4), 556-572 (2018).</li><li>Rafaels, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+injury+risk+from+primary+blast.">Brain injury risk from primary blast.</a> Journal of Trauma and Acute Care Surgery. 73 (4), 895-901 (2012).</li><li>Wood, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Ferret+Model+of+Encephalopathy+of+Prematurity.">A Ferret Model of Encephalopathy of Prematurity.</a> Developlemental Neuroscience. , (2019).</li><li>Barnette, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+Brain+Development+in+the+Ferret+via+Magnetic+Resonance+Imaging.">Characterization of Brain Development in the Ferret via Magnetic Resonance Imaging.</a> Pediatric Research. 66 (1), 80-84 (2009).</li><li>Kroenke, C. D., Mills, B. D., Olavarria, J. F., Neil, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology and Diseases of the Ferret. , (2014).</li><li>Eklind, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+endotoxin+sensitizes+the+immature+brain+to+hypoxic--ischaemic+injury.">Bacterial endotoxin sensitizes the immature brain to hypoxic--ischaemic injury.</a> European Journal of Neuroscience. 13 (6), 1101-1106 (2001).</li><li>Falck, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+Systemic+Inflammation+Induces+Inflammatory+Reactions+and+Brain+Apoptosis+in+a+Pathogen-Specific+Manner.">Neonatal Systemic Inflammation Induces Inflammatory Reactions and Brain Apoptosis in a Pathogen-Specific Manner.</a> Neonatology. 113 (3), 212-220 (2018).</li><li>Osredkar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermia+Does+Not+Reverse+Cellular+Responses+Caused+by+Lipopolysaccharide+in+Neonatal+Hypoxic-Ischaemic+Brain+Injury.">Hypothermia Does Not Reverse Cellular Responses Caused by Lipopolysaccharide in Neonatal Hypoxic-Ischaemic Brain Injury.</a> Developmental Neuroscience. 37 (4-5), 390-397 (2015).</li><li>Nakata, M., Itou, T., Sakai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+inflammatory+cytokines+expression+in+peripheral+blood+mononuclear+cells+of+the+ferret+(Mustela+putorius+furo)+using+real-time+PCR.">Quantitative analysis of inflammatory cytokines expression in peripheral blood mononuclear cells of the ferret (Mustela putorius furo) using real-time PCR.</a> Veterinary Immunology and Immunopathology. 130 (1-2), 88-91 (2009).</li><li>Christensson, M., Garwicz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+postnatal+motor+development+in+ferrets:+ontogenetic+and+comparative+perspectives.">Time course of postnatal motor development in ferrets: ontogenetic and comparative perspectives.</a> Behavioral Brain Research. 158 (2), 231-242 (2005).</li><li>Li, Y., Dugyala, S. R., Ptacek, T. S., Gilmore, J. H., Frohlich, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+Immune+Activation+Alters+Adult+Behavior,+Gut+Microbiome+and+Juvenile+Brain+Oscillations+in+Ferrets.">Maternal Immune Activation Alters Adult Behavior, Gut Microbiome and Juvenile Brain Oscillations in Ferrets.</a> eNeuro. 5 (5), (2018).</li><li>Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+immaturity+on+hypoxic-ischemic+brain+damage+in+the+rat.">The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat.</a> Annals of Neurolology. 9 (2), 131-141 (1981).</li></ol>

ونظرا لأوجه التشابه المادية والتنموية المشتركة بين الدماغ النمس والدماغ البشري ، فان النمس يستخدم بشكل متزايد لنمذجة إصابات الدماغ البالغة والتنموية. 8،9،10،11،12. ومع ذلك ، تشير البحوث حتى الآن إلى ان ...

هناك حاجه مستمرة لنماذج الحيوانية الكبيرة التي تعكس الفيزيولوجيا المرضية من قبل النضج ونقص الأكسجين في فتره ما قبل الولادة-نقص التروية التي يمكن اختبار التدخلات العلاجية للرضع. في 2017 ، 9.93 ٪ من الرضع 382,726 ولدوا في الولايات المتحدة ولدوا الخدج ، و 84 ٪ من هؤلاء الرضع ولدوا بين 32 و 36 أسابيع من الحمل1. في الأطفال الخدج ، يكون التعرض للعدوى أو التهابات في الولادة أمرا شائعا ، حيث يمكن للتنشيط المناعي للأمهات بسبب مسببات الامراض الفيروسية أو البكتيرية ان يبدا المخاض قبل الأوان. بعد الولادة ، يتعرض الرضع الخدج لخطر الاصابه بالإنتان المبكر أو المتاخر2. وكثيرا ما يعاني الأطفال الخدج أيضا فترات من نقص الأكسجين ، وانخفاض ضغط الدم ، وفرط الأكسجين بسبب نظامهم القلبي الرئوي غير الناضج ، وارتفاع توتر الأوكسجين في الجو بالنسبة لأولئك الذين يعانون من الرحم ، والتعرض الضموري. بالاضافه إلى ذلك ، في الخدج ، الدفاعات المضادة للاكسده غير ناضجه3 والعوامل الموالية لابوتوتيك طبيعيا اوبريجولاتيد4. يؤدي الاكسده وموت الخلايا إلى تنشيط الجهاز المناعي والتهاب العصبي. ويعتقد ان هذه العوامل مجتمعه للمساهمة في النمو والضعف الفسيولوجي للدماغ, ويؤدي إلى أو تفاقم اعتلال الدماغ المرتبطة بالنتائج التنموية الفقيرة في الخدج5,6,7.
نظرا لأوجه التشابه المادية والتنموية ان الدماغ النمس سهم مع الدماغ البشري ، والنمس هو الأنواع الجذابة التي لنموذج أصابه الدماغ8،9،10،11،12. وكذلك المرشحون المثاليون لنمذجة الدماغ البشري قبل الأوان ، لأنهم يولدون العقول المصابة بالشيخوخة ويطورون الادمغه المهبلية ، والتي توفر نافذه لفضح الدماغ النامي إلى الإهانات التي تحاكي الأطفال الذين يولدون قبل الأوان. عند الولادة ، ونمو الدماغ النمس يشبه الجنين 13 أسبوعا الإنسان ، مع يوم بعد الولادة (P) 17 مجموعات تعتبر مساويه للرضع في 32-36 أسابيع من الحمل13.
وقد نشرت مجموعتنا مؤخرا نموذجا من الخدج للغاية (< 28 أسبوعا الحمل) أصابه في الدماغ النمس P10 من خلال الجمع بين الحساسية التهابيه مع القولونية الليبوكوليساكاريد (lps) مع التعرض اللاحق لنقص الأكسجين و فرط التاكسج 12. في البروتوكول التالي ، نقوم الآن بوصف نموذج الخداج المتاخر في النمس P17 ، حيث يتبع التحسس LPS بنقص التروية الدماغية الثنائية ، ونقص الأكسجين ، و hyperoxia. وهذا يؤدي إلى أصابه أكثر شده في مجموعه فرعيه من الكائنات ، وأكثر دقه نماذج التفاعل المعقد للالتهابات لفترات طويلة ، نقص التروية ، نقص الأكسجين ، والاكسده التي تعاني منها في عدد من الخدج الذين يصابون باصابه في الدماغ.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:775px;" width="775">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">80% Oxygen</td>
			<td style="width:196px;">Praxair</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">9% Oxygen</td>
			<td>Praxair</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent benchtop protector</td>
			<td style="width:196px;">Kimtech</td>
			<td align="right" style="width:136px;">7546</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Automated catwalk</td>
			<td style="width:196px;">Noldus</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Betadine surgical scrub</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Bupivacaine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-888-9382</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Buprenorphine</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Calipers</td>
			<td style="width:196px;">SRA Measurement Products</td>
			<td style="width:136px;">ME-CAL-FP-200</td>
			<td>200mm range, .01 mm resolution</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cotton Gauze Sponge</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22028556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Curved fine hemostat</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Curved forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Curved suture-tying hemostat</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ethovision tracking software</td>
			<td style="width:196px;">Noldus</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Eye Lubricant</td>
			<td>Rugby</td>
			<td>NDC 0536-1970-72</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ferrets (Mustela putorius furo)</td>
			<td style="width:196px;">Marshall Biosciences</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td>Outbred (no specific strain)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Formalin</td>
			<td style="width:196px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:136px;">SF100-4</td>
			<td>10% (Phosphate Buffer/Certified)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hair Clippers</td>
			<td>Conair</td>
			<td>GMT175N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Insulin Syringes</td>
			<td>BD</td>
			<td>329461</td>
			<td>0.3 cc 3 mm 31G</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>66794-017-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lidocaine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-808-8202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">LPS</td>
			<td>List Biological</td>
			<td>LPS Ultrapure #423</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Oxygen sensor</td>
			<td>BW Gas Alert</td>
			<td>GAXT-X-DL-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pentobarbital</td>
			<td style="width:196px;"></td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Plastic chamber</td>
			<td>Tellfresh</td>
			<td align="right">1960</td>
			<td>10L; 373x270x135mm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Saline Solution, 0.9%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>RL-4492</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scalpel blade</td>
			<td>Integra Miltex</td>
			<td>297</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scalpel handle</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500236</td>
			<td>#3, 13cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sterile suture</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18020-50</td>
			<td>Braided Silk, 5/0</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical clip applicator</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical clip remover</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12023-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical drapes</td>
			<td>Medline Unidrape</td>
			<td>VET3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical gloves</td>
			<td>Ansell Perry Inc</td>
			<td>5785004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surigical clips</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12022-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Thermometer (rectal)</td>
			<td>YSI</td>
			<td>Precision 4000A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Thermometer (water)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-648-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Umbilical tape</td>
			<td>Grafco</td>
			<td>3031</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Water bath</td>
			<td style="width:196px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:136px;">TSCOL19</td>
			<td>19L</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a ferret model of inflammation-sensitized late preterm hypoxic-ischemic brain injury

هناك حاجه مستمرة للنماذج ذات الصلة سريريا من العدوى في فتره ما قبل الولادة ونقص الأكسجين-نقص التروية (HI) التي لاختبار التدخلات العلاجية للرضع مع المضاعفات العصبية من قبل النضج. وتعد الشركات المرشحة المثالية لنمذجة الدماغ البشري قبل الأوان ، لأنها تولد العقول الحية وتطور الادمغه المهبلية بعد الولادة. عند الولادة ، ونمو الدماغ النمس يشبه الجنين 13 أسبوعا الإنسان ، مع يوم بعد الولادة (P) 17 مجموعات تعتبر مساويه للرضع في الحمل 32-36 أسبوعا. نحن وصف نموذج الاصابه في النمس P17 ، حيث يتبع أداره عديد السكاريد الثنائية نقص التروية الدماغية ، نقص الأكسجين ، و hyperoxia. يحاكي هذا التفاعل المعقد بين التهابات المطولة ، ونقص التروية ، ونقص الأكسجين ، والاكسده التي يعاني منها عدد من الولدان الذين يصابون بإصابات دماغيه. تعرض الماشية المصابة مجموعه من شده الاصابه الاجماليه ، مع التغيرات المورفولوجية في الدماغ بما في ذلك تضييق الجيروسكوبات القشرية المتعددة والكبريت المصاحب. كما تظهر الإصابات التي أصيب بها المصابون تباطؤ النمو المنعكس ، وسرعه إبطا وأكثر تنوعا في التنقل في المنصة اليه ، وانخفاض الاستكشاف في حقل مفتوح. يوفر هذا النموذج منصة لاختبار العلاجات المفترضة للرضع المصابين باعتلال الدماغ حديثي الولادة المرتبطة بالتهاب ومرحبا ، ودراسة أليات الاصابه التي تؤثر علي التنمية القشرية ، والتحقيق في المسارات التي توفر المرونة في غير متاثر الحيوانية.

من 34 (ن = 18 الذكور, ن = 16 إناث) الحيوانية من سته الصغار المعرضين للاهانه, ثمانيه الماشية (24%; n = 4 الذكور, ن = 4 الإناث) في المجموعة المصابة توفي خلال فتره نقص الأكسجين الثاني (ن = 5), خلال أداره درجه الحرارة (ن = 2) في المجموعة المصابة ، تسعه من 26 ناج (35%) إصابات إجماليه ظاهره. وأصيبت خمسه من الماشية (ن = 5 ?...

Watch this Scientific Journal Video about A Ferret Model of Inflammation-sensitized Late Preterm Hypoxic-ischemic Brain Injury at JoVE.com

A Ferret Model of Inflammation-sensitized Late Preterm Hypoxic-ischemic Brain Injury

يصف الأسلوب التهاب--حساسية نقص الأكسجين--الدماغية وإصابات الدماغ فرط الاكسده في النمس P17 لنمذجة التفاعل المعقد بين التهاب المطول وإصابات المخ المؤكسدة التي تعاني منها في عدد من الرضع الخدج الراحل.

نموذج النمس من التهاب-حساسة في وقت متاخر الخدج-أصابه الدماغ الدماغية

There is an ongoing need for clinically relevant models of perinatal infection and hypoxia-ischemia (HI) in which to test therapeutic interventions for ...

هذا البروتوكول مهم لأنه يقدم النموذج الأول للالتهابات التي تُوعية إصابات الدماغ المبكرة في النمس التي تؤدي إلى إصابة كبيرة ومستمرة. هذه التقنية تنطوي على شتائم طويلة التي تتضمن العديد من المحفزات والآليات الكيميائية الحيوية يعتقد أن تسهم في أنواع إصابات الدماغ ينظر في الرضع الإنسان الخدج. إثبات إجراء قياس الدماغ سيكون كايلي كوري، عالمة أبحاث في مختبرنا وأوليفيا وايت، طالبة جامعية.ثلاثين دقيقة قبل بدء الجراحة، وإدارة ثلاثة ملليغرام لكل كيلوغرام LPS IP إلى مجموعات في مجموعة الإصابات وحجم مماثل من المالحة العقيمة من ثلاثة ميكرولترات لكل غرام للسيطرة على الحيوانات. قبل البدء في الإجراء ، استخدم مقصات الحيوانات الصغيرة لإزالة جميع الشعر على منطقة الرقبة البطنية من النمس في نمط مستطيل ، مع الحرص على تجنب نكتس الجلد أو توليد طفح حراري. إدارة التخدير الموضعي للمنطقة الحليقة وتطهير الجلد مع ثلاث مسحات بالتناوب من اليود povidone والإيثانول 70 في المئة.بعد التأكد من مستوى مناسب من التخصير بواسطة قرصة إصبع قدم، تغطية الحيوان مع عقيمة، قطع الستائر التي تعرض منطقة الرقبة. لثنائية ربط الشريان السباتي، استخدام واحد عدد عشرة شفرة مشرط لجعل شق خط الوسط 1.5 سنتيمتر في وسط الرقبة واستخدام الهيموستات غرامة ملقط المنحنية لتشريح حادة وصولا الى الشريان السباتي الأيسر. تشريح الشريان المكشوف بعيدا عن حزمة neurovascular المرتبطة بها.واستخدام زوج من ملقط ناعم منحني لتمرير طول عشرة سنتيمترات من خياطة معقمة 5/0 من الحرير تحت الشريان. قطع خياطة في النصف وربط بشكل آمن كلا أطوال خياطة لligate الشريان، وترك ما لا يقل عن اثنين ملليمتر بين العقدة. قم باستئصال الشريان السباتي الأيسر بين الغرز، مع الحرص على ترك العصب سليمًا وتكرار التشريح على اليمين.منعكس ligate الشريان السباتي الأيمن مع واحد معقمة 1/8 بوصة ربطة عنق السرة. و أغلق الجرح بمقاطع الجلد الجراحية ثم، السماح للحيوان لاسترداد في حمام الماء درجة حرارة تسيطر لمدة ثلاثين دقيقة على الأقل مع الرصد قبل نقص الأكسجة.بالنسبة لعلاج نقص الأكسجة المتتابعة وفرط التأكسج ونقص الأكسجة ، ضع الحيوانات في مجموعة الإصابات في غرفة محكمة داخل حمام مائي. مراقبة باستمرار تركيز الأكسجين داخل الغرفة، فضلا عن درجة حرارة المستقيم في واحد على الأقل الحارس. قم بتدفق الغرفة مع 9 في المائة من الأوكسجين المرطب و 91 في المائة من النيتروجين والحفاظ على معدل تدفق من ثلاثة إلى خمسة لترات في الدقيقة الواحدة، اعتمادا على حجم الغرفة.مرة واحدة في تركيز الأوكسجين في الغرفة قد وصلت إلى تسعة في المئة، مواصلة التسليم لمدة ثلاثين دقيقة. في نهاية معالجة نقص الأكسجة، قم بتبديل إمدادات الغاز إلى 80٪ من الأكسجين المرطب و20 بالمائة من النيتروجين. بعد ثلاثين دقيقة من فرط التأكسج، وفتح الغرفة للسماح لها للوصول إلى أكثر سرعة normoxia، عن طريق اكويريبرات مع الهواء الغرفة، قبل ختم الغرفة وشطف مع الأكسجين المرطب تسعة في المئة مرة أخرى.مراقبة باستمرار جميع الحيوانات خلال هذه الجولة الثانية من نقص الأكسجة، مع العلم أي الحيوانات التي تعرض بطء التنفس. مرة واحدة في تركيز الأكسجين في الغرفة قد وصلت إلى تسعة في المئة ، ومواصلة علاج نقص الأكسجة لمدة ثلاثين دقيقة. في نهاية العلاج، تستخدم ملقط منحنية لتحديد وفك الشريط السري من الشريان السباتي الأيمن.إعادة غلق الجرح مع مقاطع الجلد الجراحية. ثم العودة إلى جميع مجموعات جيل لمدة 60 دقيقة للتمريض والانتعاش. في نهاية فترة النقاهة، إعادة الحيوانات المصابة إلى حمامات المياه في 37 إلى 40 درجة مئوية لمدة ست ساعات، وتعديل درجة حرارة المياه حسب الحاجة، للحفاظ على درجات حرارة المستقيم من 36 إلى 37 درجة مئوية.ثم، عودة مجموعات إلى جيل لهم مرة أخرى. بعد حصاد الدماغ والتهيّم عند نقطة النهاية التجريبية المناسبة، ضع نصائح الفرجار الإلكتروني على الجوانب الظهرية والبينيترالية لكل دماغ لقياس ارتفاع كل دماغ مصاب وغير مصاب. ضع نصائح الفرجر في الأجزاء الأكثر جانبية من الفصوص الصدغية لقياس عرض كل دماغ ووزن كل دماغ.استخدام الفرجر لقياس الشق الطولي، كل من sulci من بداية ونهاية الجزء الأكثر تميزا من sulcus المقابلة، وجميع من gyri من أوسع جانب من كل جروس المقابلة. ثم ضع طرف واحد من الفرجر في النقطة الخلفية الأكثر من الشق الطولي والجزء الآخر من الفرجار في الجزء الخلفي من المخيخ لقياس كمية المخيخ المعرضة. من بين 34 حيواناً من ستة نفايات تعرضت للإهانة في هذه الدراسة، تعرضت خمسة لإصابة متوسطة وأربعة إصابة خطيرة.مع زيادة الإصابة ، لوحظ تضييق الجيرويري في الفصوص الصدغية و / أو القذالي ، مع تقصير sulcul المرتبط به وتوسيع الشق الطولي والمناطق الأكبر من فقدان الأنسجة الكيسية في الحيوانات الأكثر إصابة. خلال فترة الاختبار المنعكة، تعرض الحيوانات المصابة وقتًا أبطأ للتدوير في مهمة geotaxis السلبية. وقت أبطأ لتدوير بعيدا عن الحافة في مهمة كليف النفور وأبطأ وقت إلى اليمين.في المنصة، تظهر الحيوانات المصابة متوسط سرعة مماثل للضوابط ولكنها تظهر درجة أكبر بكثير من اختلاف السرعة خلال كل شوط. المسافة المعدلة للوزن بين الكفوف والكفوف الخلفية أكبر بكثير في الحيوانات المصابة ، مع ضغط أقل يتم بذله لكل منطقة مخلب وحدة ، من خلال الكفوف الأربعة. في المجال مفتوحة، والحيوانات المصابة تغطية أقل المسافة الإجمالية، ووقف أكثر تواترا وقضاء وقت أطول بكثير في وسط الميدان وأقل من الوقت في الزوايا.هنا، يمكن ملاحظة خرائط الحرارة التمثيلية للسيطرة والحيوانات المصابة. الحرص على تشريح بعيدا الشريان من العصب المصاحب والسماح لأقصى وقت ممكن نقص الأكسجة. هذه الخطوات سوف تضمن أن غالبية الحيوانات البقاء على قيد الحياة، في حين أن الإصابة أيضا.بعد هذا الإجراء، يمكن تقييم أي نتائج بيوكيميائية أو مرضية أو سلوكية، بما في ذلك التقييمات التي تقتصر عادة على نماذج القوارض من إصابات الدماغ.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Lateral Fluid Percussion: Model of Traumatic Brain Injury in Mice

الوحشي قرع السائل : نموذج لإصابات في الدماغ لدى الفئران

Traumatic brain injury (TBI) research has attained renewed momentum due to the increasing awareness of head injuries, which result in morbidity and ...

Preterm EEG: A Multimodal Neurophysiological Protocol

الخدج EEG: بروتوكول المتعدد الوسائط العصبية

Since its introduction in early 1950s, electroencephalography (EEG) has been widely used in the neonatal intensive care units (NICU) for assessment and ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

ل<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; يسببها الليزر اصابات الحبل الشوكي نموذج لتقييم آليات محور عصبي تنكس في الوقت الحقيقي

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

طريقة لإلحاق رئيس مقفلة إصابات الدماغ في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Traumatic brain injury (TBI) affects millions of people each year, causing impairment of physical, cognitive, and behavioral functions and death. Studies ...

Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration

الظهرية جذر حقن العقدة وظهري الجذر سحق إصابة نموذجا لالحسية أكسون التجديد

Achieving axon regeneration after nervous system injury is a challenging task. As different parts of the central nervous system (CNS) differ from each ...

Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury

تقييم السلوك العصبي في نموذج ماوس لإصابة في الدماغ التاكسج الدماغية حديثي الولادة

We performed unilateral carotid artery occlusion on CD-1 mice to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of neonatal HI ...

A Novel In Vitro Model of Blast Traumatic Brain Injury

A Novel In Vitro Model of Blast Traumatic Brain Injury

نموذج رواية في المختبر للانفجار إصابات الدماغ الرضية

Traumatic brain injury is a leading cause of death and disability in military and civilian populations. Blast traumatic brain injury results from the ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

آثار Neurotrauma الناجمة عن الانفجار على القوارض المضغوط الأوسط الشرايين الدماغية

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Murine Model of Controlled Cortical Impact for the Induction of Traumatic Brain Injury

نموذج مورين من تأثير القشرية التي تسيطر عليها للتحريض من إصابات الدماغ الصادمة

The Centers for Disease Control and Injury Prevention estimate that almost 2 million people sustain a traumatic brain injury (TBI) every year in the ...

Electromagnetic Controlled Closed-Head Model of Mild Traumatic Brain Injury in Mice

نموذج مغلق الرأس يتم التحكم فيه كهرومغناطيسيا لإصابات الدماغ الرضحية الخفيفة في الفئران

Highly reproducible animal models of traumatic brain injury (TBI), with well-defined pathologies, are needed for testing therapeutic interventions and ...