Name: a ferret model of inflammation-sensitized late preterm hypoxic-ischemic brain injury
Uploaded: 2019-11-19T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Ferret Model of Inflammation-sensitized Late Preterm Hypoxic-ischemic Brain Injury at JoVE.com

मॉडल के विकास के वित्त पोषित बिल और मेलिंडा गेट्स फाउंडेशन, साथ ही एनआईएच अनुदान 5R21NS093154-02 (NICHD) द्वारा किया गया था ।

प्रक्रियाओं की देखभाल और प्रयोगशाला जानवरों के उपयोग के लिए NIH गाइड के अनुसार और वाशिंगटन संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति के विश्वविद्यालय द्वारा एक अनुमोदित प्रोटोकॉल के भाग के रूप में किया गया ।</...

<ol>
	<li>Martin, J. A., Hamilton, B. E., Osterman, M. J. K., Driscoll, A. K., Drake, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Births:+Final+Data+for+2017.">Births: Final Data for 2017.</a> National Vital Statistics Report. 67 (8), 1-49 (2018).</li><li>Vanhaesebrouck, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EPIBEL+study:+outcomes+to+discharge+from+hospital+for+extremely+preterm+infants+in+Belgium.">The EPIBEL study: outcomes to discharge from hospital for extremely preterm infants in Belgium.</a> Pediatrics. 114 (3), 663-675 (2004).</li><li>Raju, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Term+Healthcare+Outcomes+of+Preterm+Birth:+An+Executive+Summary+of+a+Conference+Sponsored+by+the+National+Institutes+of+Health.">Long-Term Healthcare Outcomes of Preterm Birth: An Executive Summary of a Conference Sponsored by the National Institutes of Health.</a> Journal of Pediatrics. , (2016).</li><li>Raju, T. N. K., Buist, A. S., Blaisdell, C. J., Moxey-Mims, M., Saigal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adults+born+preterm:+a+review+of+general+health+and+system-specific+outcomes.">Adults born preterm: a review of general health and system-specific outcomes.</a> Acta Paediatrica. 106 (9), 1409-1437 (2017).</li><li>Bennet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+inflammation+and+impaired+development+of+the+preterm+brain.">Chronic inflammation and impaired development of the preterm brain.</a> Journal of Reproductive Immunology. 125, 45-55 (2018).</li><li>Reich, B., Hoeber, D., Bendix, I., Felderhoff-Mueser, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperoxia+and+the+Immature+Brain.">Hyperoxia and the Immature Brain.</a> Developmental Neuroscience. 38 (5), 311-330 (2016).</li><li>Galinsky, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+interactions+between+hypoxia-ischemia+and+inflammation+in+preterm+brain+injury.">Complex interactions between hypoxia-ischemia and inflammation in preterm brain injury.</a> Developmental Medicine &amp; Child Neurology. 60 (2), 126-133 (2018).</li><li>Empie, K., Rangarajan, V., Juul, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+the+ferret+a+suitable+species+for+studying+perinatal+brain+injury.">Is the ferret a suitable species for studying perinatal brain injury.</a> International Journal of Developlemental Neuroscience. 45, 2-10 (2015).</li><li>Snyder, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+white+matter,+toll-like+receptor+expression,+and+motor+skills+in+the+neonatal+ferret.">Ontogeny of white matter, toll-like receptor expression, and motor skills in the neonatal ferret.</a> International Journal of Developlemental Neuroscience. , (2018).</li><li>Schwerin, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progression+of+histopathological+and+behavioral+abnormalities+following+mild+traumatic+brain+injury+in+the+male+ferret.">Progression of histopathological and behavioral abnormalities following mild traumatic brain injury in the male ferret.</a> Journal of Neuroscience Research. 96 (4), 556-572 (2018).</li><li>Rafaels, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+injury+risk+from+primary+blast.">Brain injury risk from primary blast.</a> Journal of Trauma and Acute Care Surgery. 73 (4), 895-901 (2012).</li><li>Wood, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Ferret+Model+of+Encephalopathy+of+Prematurity.">A Ferret Model of Encephalopathy of Prematurity.</a> Developlemental Neuroscience. , (2019).</li><li>Barnette, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+Brain+Development+in+the+Ferret+via+Magnetic+Resonance+Imaging.">Characterization of Brain Development in the Ferret via Magnetic Resonance Imaging.</a> Pediatric Research. 66 (1), 80-84 (2009).</li><li>Kroenke, C. D., Mills, B. D., Olavarria, J. F., Neil, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology and Diseases of the Ferret. , (2014).</li><li>Eklind, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+endotoxin+sensitizes+the+immature+brain+to+hypoxic--ischaemic+injury.">Bacterial endotoxin sensitizes the immature brain to hypoxic--ischaemic injury.</a> European Journal of Neuroscience. 13 (6), 1101-1106 (2001).</li><li>Falck, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+Systemic+Inflammation+Induces+Inflammatory+Reactions+and+Brain+Apoptosis+in+a+Pathogen-Specific+Manner.">Neonatal Systemic Inflammation Induces Inflammatory Reactions and Brain Apoptosis in a Pathogen-Specific Manner.</a> Neonatology. 113 (3), 212-220 (2018).</li><li>Osredkar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermia+Does+Not+Reverse+Cellular+Responses+Caused+by+Lipopolysaccharide+in+Neonatal+Hypoxic-Ischaemic+Brain+Injury.">Hypothermia Does Not Reverse Cellular Responses Caused by Lipopolysaccharide in Neonatal Hypoxic-Ischaemic Brain Injury.</a> Developmental Neuroscience. 37 (4-5), 390-397 (2015).</li><li>Nakata, M., Itou, T., Sakai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+inflammatory+cytokines+expression+in+peripheral+blood+mononuclear+cells+of+the+ferret+(Mustela+putorius+furo)+using+real-time+PCR.">Quantitative analysis of inflammatory cytokines expression in peripheral blood mononuclear cells of the ferret (Mustela putorius furo) using real-time PCR.</a> Veterinary Immunology and Immunopathology. 130 (1-2), 88-91 (2009).</li><li>Christensson, M., Garwicz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+postnatal+motor+development+in+ferrets:+ontogenetic+and+comparative+perspectives.">Time course of postnatal motor development in ferrets: ontogenetic and comparative perspectives.</a> Behavioral Brain Research. 158 (2), 231-242 (2005).</li><li>Li, Y., Dugyala, S. R., Ptacek, T. S., Gilmore, J. H., Frohlich, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+Immune+Activation+Alters+Adult+Behavior,+Gut+Microbiome+and+Juvenile+Brain+Oscillations+in+Ferrets.">Maternal Immune Activation Alters Adult Behavior, Gut Microbiome and Juvenile Brain Oscillations in Ferrets.</a> eNeuro. 5 (5), (2018).</li><li>Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+immaturity+on+hypoxic-ischemic+brain+damage+in+the+rat.">The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat.</a> Annals of Neurolology. 9 (2), 131-141 (1981).</li></ol>

फेरेट मस्तिष्क और मानव मस्तिष्क के बीच साझा शारीरिक और विकासात्मक समानताओं के कारण, फेरेट तेजी से वयस्क और विकासात्मक मस्तिष्क चोट दोनों मॉडल के लिए इस्तेमाल किया जा रहा है । 8,9...

बड़े पशु मॉडलों की निरंतर आवश्यकता है जो प्रीमैच्योरिटी और प्रसवकालीन हाइपोक्सिया-इस्केमिया के रोगविज्ञान को प्रतिबिंबित करते हैं जिसमें शिशुओं के लिए चिकित्सीय हस्तक्षेपों का परीक्षण किया जा सकता है। 2017 में, संयुक्त राज्य अमेरिका में पैदा हुए 382,726 शिशुओं में से 9.93% अपरिपक्व पैदा हुए थे, और इनमें से 84% शिशुओं का जन्म 32 और 36 सप्ताह के गर्भ1के बीच हुआ था। समय से पहले शिशुओं में, संक्रमण या सूजन के लिए प्रसवकालीन संपर्क आम है, जहां वायरल या बैक्टीरियल रोगजनकों के कारण मातृ प्रतिरक्षा सक्रियण अपरिपक्व श्रम शुरू कर सकता है। प्रसवोत्तर, अपरिपक्व शिशुओं को जल्दी या देर से शुरू सेप्सिस2का उच्च जोखिम होता है। अपरिपक्व शिशुओं को भी अक्सर हाइपोक्सिया, हाइपोटेंशन और हाइपरऑक्सिया की अवधि का अनुभव होता है क्योंकि उनके अपरिपक्व कार्डियोरेस्पिरेटरी सिस्टम, गर्भाशय में अनुभवी लोगों के सापेक्ष वातावरण में ऑक्सीजन तनाव बढ़ा या फिर इट्रो, और आयट्रोजेनिक एक्सपोजर। इसके अतिरिक्त, अपरिपक्व शिशुओं में, एंटीऑक्सीडेंट सुरक्षा अपरिपक्व3 और समर्थक अपोप्टोटिक कारक स्वाभाविक रूप से अपरेचित4हैं । ऑक्सीडेटिव तनाव और कोशिका मृत्यु प्रतिरक्षा प्रणाली और न्यूरोसूजन की सक्रियता का कारण बनती है। इन संयुक्त कारकों को मस्तिष्क की विकासात्मक और शारीरिक भेद्यता में योगदान करने के लिए सोचा जाता है, और अपरिपक्व शिशुओं5,6,7में खराब विकासात्मक परिणामों से जुड़े एन्सेफेलोपैथी का परिणाम हैयाबढ़ा देता है।
मानव मस्तिष्क के साथ फेरेट मस्तिष्क के शेयरों की शारीरिक और विकासात्मक समानताओं के कारण, फेरेट एक आकर्षक प्रजाति है जिसमें मस्तिष्क की चोट8,9,10,11,12को मॉडल करना है। Ferrets भी अपरिपक्व मानव मस्तिष्क मॉडल के लिए आदर्श उंमीदवार हैं, के रूप में वे वंशानुगत पैदा होते है और gyrencephalic दिमाग का विकास प्रसवोत्तर, जो एक खिड़की है जिसमें विकासशील मस्तिष्क अपमान है कि अपरिपक्व पैदा शिशुओं द्वारा अनुभवी उन लोगों की नकल करने के लिए बेनकाब प्रदान करता है । जन्म के समय, फेरेट मस्तिष्क विकास 13 सप्ताह के मानव भ्रूण के समान है, जिसमें प्रसवोत्तर दिन (पी) 17 किट को गर्भ13के 32-36 सप्ताह में शिशु के बराबर माना जाता है।
हमारे समूह ने हाल ही में हाइपोक्सिया और हाइपरऑक्सिया12के बाद के एक्सपोजर के साथ एस्चेरिचिया कोलाई लिपोपॉलीसैक्राइड (एलपीएस) के साथ भड़काऊ संवेदीकरण के संयोजन से P10 फेरेट में बेहद अपरिपक्व (<28 सप्ताह के गर्भ) मस्तिष्क की चोट का एक मॉडल प्रकाशित किया है । निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, अब हम P17 फेरेट में एक देर से अपरिपक्व मॉडल का वर्णन करते हैं, जहां एलपीएस संवेदीकरण द्विपक्षीय मस्तिष्क इस्केमिया, हाइपोक्सिया और हाइपरऑक्सिया द्वारा पीछा किया जाता है। यह जानवरों के सबसेट में अधिक गंभीर चोट के परिणामस्वरूप होता है, और मस्तिष्क की चोट विकसित करने वाले कई अपरिपक्व शिशुओं में अनुभवी लंबे समय तक सूजन, इस्केमिया, हाइपोक्सिया और ऑक्सीडेटिव तनाव की जटिल बातचीत को अधिक बारीकी से मॉडल करता है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:775px;" width="775">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">80% Oxygen</td>
			<td style="width:196px;">Praxair</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">9% Oxygen</td>
			<td>Praxair</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent benchtop protector</td>
			<td style="width:196px;">Kimtech</td>
			<td align="right" style="width:136px;">7546</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Automated catwalk</td>
			<td style="width:196px;">Noldus</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Betadine surgical scrub</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Bupivacaine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-888-9382</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Buprenorphine</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Calipers</td>
			<td style="width:196px;">SRA Measurement Products</td>
			<td style="width:136px;">ME-CAL-FP-200</td>
			<td>200mm range, .01 mm resolution</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cotton Gauze Sponge</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22028556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Curved fine hemostat</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Curved forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Curved suture-tying hemostat</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ethovision tracking software</td>
			<td style="width:196px;">Noldus</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Eye Lubricant</td>
			<td>Rugby</td>
			<td>NDC 0536-1970-72</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ferrets (Mustela putorius furo)</td>
			<td style="width:196px;">Marshall Biosciences</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td>Outbred (no specific strain)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Formalin</td>
			<td style="width:196px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:136px;">SF100-4</td>
			<td>10% (Phosphate Buffer/Certified)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hair Clippers</td>
			<td>Conair</td>
			<td>GMT175N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Insulin Syringes</td>
			<td>BD</td>
			<td>329461</td>
			<td>0.3 cc 3 mm 31G</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>66794-017-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lidocaine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-808-8202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">LPS</td>
			<td>List Biological</td>
			<td>LPS Ultrapure #423</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Oxygen sensor</td>
			<td>BW Gas Alert</td>
			<td>GAXT-X-DL-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pentobarbital</td>
			<td style="width:196px;"></td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Plastic chamber</td>
			<td>Tellfresh</td>
			<td align="right">1960</td>
			<td>10L; 373x270x135mm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Saline Solution, 0.9%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>RL-4492</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scalpel blade</td>
			<td>Integra Miltex</td>
			<td>297</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scalpel handle</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500236</td>
			<td>#3, 13cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sterile suture</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18020-50</td>
			<td>Braided Silk, 5/0</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical clip applicator</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical clip remover</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12023-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical drapes</td>
			<td>Medline Unidrape</td>
			<td>VET3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical gloves</td>
			<td>Ansell Perry Inc</td>
			<td>5785004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surigical clips</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12022-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Thermometer (rectal)</td>
			<td>YSI</td>
			<td>Precision 4000A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Thermometer (water)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-648-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Umbilical tape</td>
			<td>Grafco</td>
			<td>3031</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Water bath</td>
			<td style="width:196px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:136px;">TSCOL19</td>
			<td>19L</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a ferret model of inflammation-sensitized late preterm hypoxic-ischemic brain injury

प्रसवकालीन संक्रमण और हाइपोक्सिया-इस्केमिया (एचआई) के चिकित्सकीय रूप से प्रासंगिक मॉडलों की चल रही आवश्यकता है जिसमें प्रीमैच्योरके न्यूरोलॉजिकल सीक्वेला के साथ शिशुओं के लिए चिकित्सीय हस्तक्षेपों का परीक्षण किया जा सके। फेरेट्स अपरिपक्व मानव मस्तिष्क मॉडलिंग के लिए आदर्श उम्मीदवार हैं, क्योंकि वे लिसेसेन्सेफेलिक पैदा होते हैं और प्रसवोत्तर दिमाग विकसित करते हैं। जन्म के समय, फेरेट मस्तिष्क विकास 13 सप्ताह के मानव भ्रूण के समान है, प्रसवोत्तर दिन (पी) 17 किट के साथ 32-36 सप्ताह के गर्भ में एक शिशु के बराबर माना जाता है । हम P17 फेरेट में एक चोट मॉडल का वर्णन करते हैं, जहां लिपोपॉलीसैक्राइड प्रशासन के बाद द्विपक्षीय सेरेब्रल इस्केमिया, हाइपोक्सिया और हाइपरऑक्सिया होते हैं। यह मस्तिष्क की चोट विकसित करने वाले कई नवजातों में अनुभवी लंबे समय तक सूजन, इस्केमिया, हाइपोक्सिया और ऑक्सीडेटिव तनाव की जटिल बातचीत का अनुकरण करता है। घायल जानवरों में कई कॉर्टिकल गायरी और संबद्ध सल्सी को कम करने सहित मस्तिष्क में रूपात्मक परिवर्तन के साथ सकल चोट की गंभीरता की एक श्रृंखला प्रदर्शित होती है। घायल जानवरों को भी धीमा पलटा विकास, धीमी और एक स्वचालित कैटवॉक में लोकोमोशन की अधिक चर गति दिखाने के लिए, और एक खुले क्षेत्र में अंवेषण में कमी आई । यह मॉडल एक मंच प्रदान करता है जिसमें सूजन और एचआई से जुड़े नवजात एन्सेफेलोपैथी वाले शिशुओं के लिए ख्यात उपचारों का परीक्षण करने के लिए, चोट के अध्ययन तंत्र जो कॉर्टिकल विकास को प्रभावित करते हैं, और उन रास्तों की जांच करते हैं जो लचीलापन प्रदान करते हैं अप्रभावित जानवर।

34 में से (n = 18 पुरुषों, n = 16 महिलाओं) छह अपमान के संपर्क में कूड़े से जानवरों, आठ जानवरों (24%; n = 4 पुरुषों, n = 4 महिलाओं) घायल समूह में दूसरी हाइपोक्सिया अवधि के दौरान मर गया (एन = 5), तापमान प्रबंधन के दौरान (n = 2), या रात भ?...

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A Ferret Model of Inflammation-sensitized Late Preterm Hypoxic-ischemic Brain Injury

विधि P17 फेरेट में सूजन से संवेदनशील हाइपोक्सिक-इस्कीमिक और हाइपरऑक्सिक मस्तिष्क की चोट का वर्णन करती है ताकि कई देर से अपरिपक्व शिशुओं में अनुभवी लंबे समय तक सूजन और ऑक्सीडेटिव मस्तिष्क की चोट के बीच जटिल बातचीत को मॉडल किया जा सके।

सूजन से संवेदनशील देर से अपरिपक्व हाइपोक्सिक-इस्कीमिक ब्रेन इंजरी का फेरेट मॉडल

There is an ongoing need for clinically relevant models of perinatal infection and hypoxia-ischemia (HI) in which to test therapeutic interventions for ...

यह प्रोटोकॉल महत्वपूर्ण है क्योंकि यह फेरेट्स में समय से पहले मस्तिष्क की चोट को संवेदनशील सूजन का पहला मॉडल प्रदान करता है जिसके परिणामस्वरूप महत्वपूर्ण और निरंतर चोट होती है। इस तकनीक में एक लंबे समय तक अपमान शामिल है जिसमें कई ट्रिगर्स और जैव रासायनिक तंत्र शामिल हैं जो समय से पहले मानव शिशुओं में देखी गई मस्तिष्क चोटों के प्रकारों में योगदान करने के लिए सोचा जाता है। मस्तिष्क माप प्रक्रिया का प्रदर्शन काइली Corry, हमारी प्रयोगशाला में एक अनुसंधान वैज्ञानिक और ओलिविया व्हाइट, एक स्नातक छात्र होगा ।सर्जरी शुरू करने से पहले तीस मिनट, चोट समूह में किट के लिए प्रति किलोग्राम एलपीएस आईपी तीन मिलीग्राम प्रशासन और पशुओं को नियंत्रित करने के लिए प्रति ग्राम तीन माइक्रोलीटर के बाँझ खारा की एक समकक्ष मात्रा । प्रक्रिया शुरू करने से पहले, एक आयताकार पैटर्न में फेरेट के वेंट्रल गर्दन क्षेत्र पर बालों के सभी को हटाने के लिए छोटे पशु क़ैंची का उपयोग करें, त्वचा को निकिंग या गर्मी के दाने पैदा करने से बचने के लिए ध्यान रखना। मुंडा क्षेत्र के लिए स्थानीय संज्ञाहरण प्रशासन और povidone आयोडीन और सत्तर प्रतिशत इथेनॉल के तीन बारी झाड़ू के साथ त्वचा कीटाणुरहित।पंजे चुटकी द्वारा sedation के एक उपयुक्त स्तर की पुष्टि करने के बाद, बाँझ, डिस्पोजेबल बाहर पर्दे कि गर्दन क्षेत्र का पर्दाफाश के साथ जानवर को कवर । द्विपक्षीय कैरोटिड धमनी लिगेशन के लिए, गर्दन के केंद्र में 1.5 सेंटीमीटर मिडलाइन चीरा बनाने के लिए एक एकल उपयोग संख्या दस स्केलपेल ब्लेड का उपयोग करें और बाएं कैरोटिड धमनी के लिए स्पष्ट रूप से विच्छेदन करने के लिए ठीक हीमोस्टेट और घुमावदार संदंश का उपयोग करें। उजागर धमनी को संबंधित न्यूरोवैस्कुलर बंडल से दूर विच्छेदन करें।और धमनी के नीचे बाँझ 5/0 रेशम सीवन की एक पाश दस सेंटीमीटर लंबाई पारित करने के लिए घुमावदार ठीक संदंश की एक जोड़ी का उपयोग करें । सीवन को आधे में काट लें और धमनी को लिगेट करने के लिए सीवन की दोनों लंबाई को सुरक्षित रूप से बांधें, जिससे समुद्री मील के बीच कम से कम दो मिलीमीटर की बारिश हो सके। टांके के बीच बाएं कैरोटिड धमनी को पार करें, तंत्रिका को बरकरार छोड़ने और दाईं ओर विच्छेदन दोहराने का ख्याल रखें।एक बाँझ 1/8 इंच नाभि टाई के साथ सही कैरोटिड धमनी को रिवर्सी रूप से लिगेट करें। और सर्जिकल त्वचा क्लिप के साथ घाव बंद करो। फिर, जानवर को हाइपोक्सिया से पहले निगरानी के साथ कम से कम तीस मिनट के लिए तापमान नियंत्रित पानी स्नान में ठीक होने दें।अनुक्रमिक हाइपोक्सिया, हाइपरऑक्सिया और हाइपोक्सिया उपचार के लिए, चोट समूह में जानवरों को पानी के स्नान के भीतर एक एयरटाइट कक्ष में रखें। लगातार कक्ष के भीतर ऑक्सीजन एकाग्रता की निगरानी करें, साथ ही कम से कम एक प्रहरी जानवर में गुदा के तापमान की भी निगरानी करें। नौ प्रतिशत ऑक्सीजन और ९१ प्रतिशत नाइट्रोजन के साथ चैंबर फ्लश और प्रति मिनट तीन से पांच लीटर की प्रवाह दर बनाए रखने, चैंबर आकार के आधार पर ।एक बार चैंबर में ऑक्सीजन की एकाग्रता नौ प्रतिशत तक पहुंच गई है, तीस मिनट के लिए वितरण जारी रखें । हाइपोक्सिया उपचार के अंत में, गैस की आपूर्ति को ८० प्रतिशत आर्द्र ऑक्सीजन और 20 प्रतिशत नाइट्रोजन में स्विच करें । हाइपरऑक्सिया के तीस मिनट के बाद, कक्ष को सील करने और नौ प्रतिशत आर्द्र ऑक्सीजन के साथ फिर से फ्लश करने से पहले, कमरे की हवा के साथ संतुलन बनाकर, इसे और अधिक तेजी से नॉर्मोक्सिया तक पहुंचने की अनुमति देने के लिए कक्ष खोलें।लगातार हाइपोक्सिया के इस दूसरे दौर के दौरान जानवरों के सभी की निगरानी, किसी भी जानवर है कि ब्रैडीपनिया प्रदर्शित करने पर ध्यान दे रही है । एक बार चैंबर में ऑक्सीजन की एकाग्रता नौ प्रतिशत तक पहुंच गई है, तीस मिनट के लिए हाइपोक्सिया उपचार जारी रखें । उपचार के अंत में, सही कैरोटिड धमनी से गर्भनाल टेप की पहचान करने और उसे खोलने के लिए घुमावदार संदंश का उपयोग किया।सर्जिकल त्वचा क्लिप के साथ घाव को फिर से बंद करें। फिर नर्सिंग और वसूली के लिए 60 मिनट के लिए जिल्स के लिए किट के सभी वापस। वसूली की अवधि के अंत में, घायल जानवरों को छह घंटे के लिए ३७ से ४० डिग्री सेल्सियस पर पानी स्नान करने के लिए वापस, जरूरत के रूप में पानी के तापमान का समायोजन, ३६ से ३७ डिग्री सेल्सियस के गुदा तापमान को बनाए रखने के लिए ।फिर, उनके जिल्स को फिर से किट वापस करें। उचित प्रायोगिक अंत बिंदु पर मस्तिष्क फसल और निर्धारण के बाद, प्रत्येक घायल और गैर-घायल मस्तिष्क की ऊंचाई को मापने के लिए प्रत्येक मस्तिष्क के पृष्ठीय और वेंट्रल पहलुओं पर एक इलेक्ट्रॉनिक कैलिपर के सुझाव रखें। प्रत्येक मस्तिष्क की चौड़ाई को मापने और प्रत्येक मस्तिष्क का वजन करने के लिए शंख पालि के सबसे पार्श्व भागों पर कैलिपर के सुझावों को रखें।देशांतर विखंडन को मापने के लिए कैलिपर का उपयोग करें, संबंधित सल्कस के सबसे अलग हिस्से की शुरुआत और अंत से सभी सल्सी, और प्रत्येक संबंधित जाइरस के व्यापक पहलू से सभी जाइरी। फिर, कैलिपर के एक टिप को देशांतर फिशर के सबसे पीछे के बिंदु पर रखें और कैलिपर के दूसरे सिरे को सेरिबैलम के सबसे पीछे के हिस्से में रखें ताकि उजागर सेरिबैलम की मात्रा को माप सके। इस अध्ययन में अपमान के संपर्क में आए छह साहित्यकारों से ३४ जानवरों में से पांच जानवरों को मामूली चोट आई थी और चार जानवरों को गंभीर चोट आई थी ।बढ़ती चोट के साथ, लौकिक और/या ऑक्सीपिटल लोब्स में जाइरी को संकुचित करने के साथ सबसे गंभीर रूप से घायल जानवरों में देशांतर विखंडनीय दरार और सिस्टिक ऊतक हानि के बड़े क्षेत्रों को छोटा करने और चौड़ा करने के साथ मनाया जाता है । पलटा परीक्षण अवधि में, घायल जानवर नकारात्मक जियोटैक्सिस कार्य में घुमाने के लिए धीमी समय प्रदर्शित करते हैं। एक धीमी समय के लिए चट्टान घृणा कार्य में किनारे से दूर घुमाने और सही करने के लिए एक धीमी समय ।कैटवॉक में, घायल जानवरों को नियंत्रित करने के लिए एक समान औसत गति का प्रदर्शन लेकिन प्रत्येक रन के दौरान गति भिन्नता का एक काफी अधिक डिग्री प्रदर्शित करते हैं । पंजे और हिंद पंजे के बीच वजन समायोजित दूरी घायल जानवरों में काफी अधिक है, चार पंजे के माध्यम से प्रति इकाई पंजा क्षेत्र में कम दबाव डालती है। खुले मैदान में, घायल जानवर कम कुल दूरी को कवर करते हैं, अधिक बार रुकते हैं और मैदान के केंद्र में काफी अधिक समय बिताते हैं और कोनों में कम समय बिताते हैं।यहां, नियंत्रण और घायल जानवरों के प्रतिनिधि हीट मैप्स देखे जा सकते हैं। साथ तंत्रिका से धमनी को दूर करने और अधिकतम संभव हाइपोक्सिया समय की अनुमति देने का ध्यान रखें। ये कदम यह सुनिश्चित करेंगे कि अधिकांश जानवर जीवित रहें, जबकि चोट को भी बनाए रखते हैं।इस प्रक्रिया के बाद, किसी भी जैव रासायनिक, रोग या व्यवहार परिणामों का आकलन किया जा सकता है, जिसमें आकलन शामिल हैं जो आम तौर पर मस्तिष्क की चोट के कृंतक मॉडल तक सीमित होते हैं।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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