Name: immunohistochemistry test for the lyssavirus antigen detection from formalin-fixed tissues
Uploaded: 2021-10-26T13:00:00
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我们感谢实验室成员、流行病学家以及公共卫生部门的附属机构向疾病控制和预防中心提交样本。本报告的结论和结论是作者的，不一定代表疾病控制和预防中心的官方立场。使用商号和商业来源仅供识别，并不意味着得到疾病控制和预防中心的认可。

虽然在正式固定组织上执行了 IHC 协议，如果存在，这些组织会灭活 RABV，但应正确遵循适当的生物安全协议。所有生物安全程序均见微生物和生物医学实验室（BMBL）第5版（https://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/index.htm）中的生物安全程序，包括佩戴适当的个人防护设备（PPE），以及如第12版所述的疫苗接种要求。此外，应适当遏制和处理危险化学品（如甲醛、AEC 和二甲苯）（例...

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	<li>Rupprecht, C., Kuzmin, I., Meslin, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lyssaviruses+and+rabies:+current+conundrums,+concerns,+contradictions+and+controversies.">Lyssaviruses and rabies: current conundrums, concerns, contradictions and controversies.</a> F1000Research. 6, 184 (2017).</li><li>Fooks, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+status+of+rabies+and+prospects+for+elimination.">Current status of rabies and prospects for elimination.</a> Lancet. 384 (9951), 1389-1399 (2014).</li><li>Finke, S., Brzozka, K., Conzelmann, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+fluorescence-labeled+rabies+virus:+enhanced+green+fluorescent+protein-tagged+phosphoprotein+P+supports+virus+gene+expression+and+formation+of+infectious+particles.">Tracking fluorescence-labeled rabies virus: enhanced green fluorescent protein-tagged phosphoprotein P supports virus gene expression and formation of infectious particles.</a> Journal of Virology. 78 (22), 12333-12343 (2004).</li><li>WHO. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=WHO+Expert+Consulation+on+Rabies,+Third+Report.">WHO Expert Consulation on Rabies, Third Report.</a> WHO Technical Report Series. 1012, 1 (2018).</li><li>Goldwasser, R. A., Kissling, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+antibody+staining+of+street+and+fixed+rabies+virus+antigens.">Fluorescent antibody staining of street and fixed rabies virus antigens.</a> Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. 98 (2), 219-223 (1958).</li><li>Lembo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+direct,+rapid+immunohistochemical+test+for+rabies+diagnosis.">Evaluation of a direct, rapid immunohistochemical test for rabies diagnosis.</a> Emerging Infectious Diseases. 12 (2), 310-313 (2006).</li><li>Fekadu, M., Greer, P. W., Chandler, F. W., Sanderlin, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+avidin-biotin+peroxidase+system+to+detect+rabies+antigen+in+formalin-fixed+paraffin-embedded+tissues.">Use of the avidin-biotin peroxidase system to detect rabies antigen in formalin-fixed paraffin-embedded tissues.</a> Journal of Virological Methods. 19 (2), 91-96 (1988).</li><li>Hamir, A. N., Moser, G., Rupprecht, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+five+year+(1985-1989)+retrospective+study+of+equine+neurological+diseases+with+special+reference+to+rabies.">A five year (1985-1989) retrospective study of equine neurological diseases with special reference to rabies.</a> Journal of Comparative Pathology. 106 (4), 411-421 (1992).</li><li>Inoue, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-reactive+antigenicity+of+nucleoproteins+of+lyssaviruses+recognized+by+a+monospecific+antirabies+virus+nucleoprotein+antiserum+on+paraffin+sections+of+formalin-fixed+tissues.">Cross-reactive antigenicity of nucleoproteins of lyssaviruses recognized by a monospecific antirabies virus nucleoprotein antiserum on paraffin sections of formalin-fixed tissues.</a> Pathology International. 53 (8), 525-533 (2003).</li><li>Webster, J. D., Miller, M. A., Dusold, D., Ramos-Vara, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+prolonged+formalin+fixation+on+diagnostic+immunohistochemistry+in+domestic+animals.">Effects of prolonged formalin fixation on diagnostic immunohistochemistry in domestic animals.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 57 (8), 753-761 (2009).</li><li>Feiden, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+staining+of+rabies+virus+antigen+with+monoclonal+and+polyclonal+antibodies+in+paraffin+tissue+sections.">Immunohistochemical staining of rabies virus antigen with monoclonal and polyclonal antibodies in paraffin tissue sections.</a> Zentralblatt fur Veterinarmedizin Reihe B. 35 (4), 247-255 (1988).</li><li>Manning, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+rabies+prevention--United+States,+2008:+recommendations+of+the+Advisory+Committee+on+Immunization+Practices.">Human rabies prevention--United States, 2008: recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices.</a> Morbidity and Mortality Weekly Reports Recommendations and Reports. 57, 1-28 (2008).</li><li>WHO. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory techniques in rabies. 1, 67-72 (2018).</li><li>Patrick, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Rabies+Surveillance+Using+a+Direct+Rapid+Immunohistochemical+Test.">Enhanced Rabies Surveillance Using a Direct Rapid Immunohistochemical Test.</a> Journal of Visualized Experiments. (146), (2019).</li><li>Whitfield, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+of+the+fluorescent+antibody+test+for+rabies+diagnosis+in+fresh+and+formalin-fixed+brain+tissue+specimens.">A comparative study of the fluorescent antibody test for rabies diagnosis in fresh and formalin-fixed brain tissue specimens.</a> Journal of Virology Methods. 95 (1-2), 145-151 (2001).</li><li>WHO. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Diagnostic procedures for antigen detection. , (2016).</li><li>Jarvis, J. A., Franke, M. A., Davis, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rabies+direct+fluorescent+antibody+test+does+not+inactivate+rabies+or+eastern+equine+encephalitis+viruses.">Rabies direct fluorescent antibody test does not inactivate rabies or eastern equine encephalitis viruses.</a> Journal of Virology Methods. 234, 52-53 (2016).</li></ol>

由于症状发病后狂犬病死亡率高，对疑似动物的RABV感染诊断对于适当的暴露后预防治疗极为关键。狂犬病的诊断主要取决于使用新鲜或冷冻组织的DFA、DRIT和基于PCR的技术。对于正式固定组织的测试，IHC 测试为 RABV 抗原的敏感和特定检测提供了替代方法。虽然固定在甲醛中的组织由于侧链（如交叉链接）的改变而稳定了蛋白质，但样品需要在抗原检测之前进行处理。在本协议中，通过蛋白酶（例?...

狂犬病是由属于利萨病毒1属的负感RNA病毒引起的急性渐进性脑炎。近99%的人类死亡是由狂犬病病毒（RABV）感染引起的，狂犬病病毒是该属的类型成员，由狗2传播。疑似动物的狂犬病诊断依赖于在脑组织3中与基因组RNA（核蛋白复合物，RNP）复合体中检测抗原（主要是病毒编码核蛋白，N蛋白）。直接荧光抗体（DFA）检测的抗原被认为是狂犬病诊断的黄金标准。该方法利用新鲜或新鲜的冷冻脑物质，在幻灯片上的触摸印象，固定在丙酮，染色使用商业上可用的荧光异氰酸酯（FITC）标记单克隆或多克隆抗体（mAbs/pAbs），并通过荧光显微镜5读取。DFA 测试对于新鲜脑组织中的狂犬病抗原检测是快速、敏感和特定的。最近，一种直接的快速免疫化学测试（DRIT），改良免疫造血（IHC）技术，被证明表现出类似的敏感性DFA，但提供了光显微镜的可视化6的优势。虽然 DRIT 中使用的检测方法与 IHC 类似，但初始步骤利用新鲜或冷冻组织生成样品的触摸印象，然后固定在形式素中。
IHC是一种广泛使用的技术，用于确定组织学变化和检测蛋白质使用特定抗体在正式固定组织嵌入石蜡块。IHC是组织7部分狂犬病抗原检测的既定替代测试。IHC已特别用于诊断出现神经系统疾病的回顾性病例，以确定狂犬病的负担8。石蜡嵌入的正式固定组织保存蛋白质进行检测，即使几年后储存在环境温度9。形式素处理通过交叉连接和改变氨基酸侧链来改变蛋白质，这可能使表位不再对抗体10产生反应。虽然狂犬病抗原检测的IHC测试涉及mAbs或pAbs，后者是有利的，因为多个表位和不同的利沙病毒可以检测11。
IHC 所涉及的标准步骤是组织正式固定、嵌入石蜡块、组织分割、去帕拉芬化和水化、表位恢复、对初级和二级抗体的反应，以及使用染色基板开发。这份手稿详细描述了狂犬病诊断方案。对于狂犬病抗原检测，使用美国疾病控制和预防中心 （CDC） 在佐治亚州亚特兰大产生的带有 RABV （pAbs） 的鼠血清，并结合生物镀金化抗鼠二级抗体进行免疫。生物素化腹肌通过添加链球菌素-马萝卜过氧化酶（HRP）复合物（HRP）来检测，然后通过氨基-乙基卡巴佐尔基质进行颜色开发来检测。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3% hydrogen peroxide</td>
			<td>Pharamacy brands</td>
			<td></td>
			<td>Off the shelf 3% H2O2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-Amino-9-ethylcarbazole (AEC)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A6926</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetate Buffer pH 5.2</td>
			<td>Poly Scientific R&#38;D Corp.</td>
			<td>s140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buffered Formalin 10% Phosphate Buffered</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SF100-4</td>
			<td>Certified</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slips Corning</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-553-471</td>
			<td>24 X 50 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 190 Proof</td>
			<td>Pharmco-AAPER</td>
			<td>111000190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 200 Proof</td>
			<td>Pharmco-AAPER</td>
			<td>111000200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gill&#39;s hematoxylin formulation #2</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>CS401-1D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HistoMark Biotin-Streptavidin Peroxidase Kit</td>
			<td>seracare</td>
			<td>71-00-18</td>
			<td>Mouse Primary Antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImmunoHistoMount</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>i1161</td>
			<td>Mounting media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N, Dimethyl formamide GR</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>D119</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline&#160;</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>RR14440.01</td>
			<td>01M, pH 7.2 (pH 7.2-7.6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plan-APOCHROMAT 40X/0.95 Objective</td>
			<td>Multiple vendors</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plan-APOCHROMATIC 20X/0.75 Objective</td>
			<td>Multiple vendors</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pronase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>53702</td>
			<td>Protease, Streptomyces griseus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scott&#39;s Tap Water&#160;</td>
			<td>Poly Scientific R&#38;D Corp.</td>
			<td>s1887</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek Slide stain set</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>50-294-72</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TWEEN-80&#160;</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P1754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>X3S-4</td>
			<td>Histological Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss Axioplan 2 imaging - microscope</td>
			<td>Multiple vendors</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

immunohistochemistry test for the lyssavirus antigen detection from formalin-fixed tissues

狂犬病的主要诊断方式之一是在受感染的组织样本中检测病毒核糖核蛋白（RNP）复合物（抗原）。虽然直接荧光抗体 （DFA） 测试或直接快速免疫组织化学测试 （DRIT） 最常用于抗原检测，但两项测试都需要新鲜和/或冷冻组织，以便在使用抗原检测之前在幻灯片上留下印象。如果样品被收集并固定在正式素中，则两种测试都不是抗原检测的最佳方法，但是，在嵌入石蜡块和切片后，常规免疫造血术 （IHC） 可以进行测试。使用这种IHC方法，组织被抗狂犬病抗体染色，部分被去帕拉芬化，抗原通过部分蛋白解或其他方法检索，并孵育为一级和二级抗体。抗原使用马萝卜过氧化酶/氨基乙基卡巴佐尔染色，并用血氧素进行反污，以便使用光显微镜进行可视化。除了特定的抗原检测外，形式固定还具有其他优势，如确定组织学变化、放宽标本储存和运输条件（在环境温度下）、检测追溯性病例的能力以及通过灭活感染剂提高生物安全性。

图2 显示了不同脑组织检测中阳性和阴性对照样本的代表性IHC染色结果。 图2A、D、G 表示阳性样本为200倍， 图2B、E、H 对应放大400倍。 图2A-C 对应脑力： 图2D-F 对应小脑细胞和普金耶细胞： 图2<...

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Immunohistochemistry Test for the Lyssavirus Antigen Detection from Formalin-Fixed Tissues

在这里，我们提出了一个免疫造血测试协议，用于检测狂犬病病毒抗原，作为正式固定组织的替代诊断测试。

从正式固定组织检测利沙病毒抗原的免疫化学测试

One of the primary diagnostic modalities for rabies is the detection of viral ribonucleoprotein (RNP) complex (antigen) in the infected tissue samples. ...

用于免疫造血和诊断组织病理学的组织通常固定在10%磷酸盐缓冲剂中。在固定在甲醛中的脑组织中检测狂犬病病毒抗原提出了独特的挑战，IHC检测已被证明是狂犬病病毒抗原检测的一种敏感而具体的方法。活检或其他检测方法的主要优点是可以检测出与组织和细胞形态相关的抗原。通过 IHC，大脑和非脑组织中狂犬病抗原的本地化提供了无法通过常规血氧林和 Eosin 染色部分获得的其他信息。狂犬病诊断测试对于在接触狂犬病病毒的人类中开始接触后预防非常重要。IHC 是对正式固定组织最常见的检测之一。与特定的抗体，它可以用于检测各自的病原体。要开始此程序，将三到五毫米的脑组织片，在尸检后收集，放入10%缓冲的甲醛溶液中24至72小时。记录大致的组织重量、组织类型和形式素的体积。将组织放入 70% 乙醇中，以便在正式固定后和加工前将组织储存更长时间。标本固定后，解剖组织以包括重要的大脑区域，如脑系统、小脑或海马的横截面。每个，削减到三到五毫米厚度。将纸巾放入处理盒式磁带中。处理石蜡渗透的组织盒。把它们嵌入石蜡块中，并把它们切成微原子。首先设置文本协议图 1 中概述的染色盘。每道菜都装满250毫升的预制溶液。要准备 AEC 基板库存溶液，请使用玻璃移液器将 AEC 的一片 20 毫克的片剂溶解在 5 毫升 N、N-二甲基甲酰胺中。要准备蛋白酶库存溶液，请将 7 毫克蛋白酶溶解在 200 毫升 PBS 中。要准备冲洗缓冲器，添加 100 毫升 Tween 80 至 990 毫升 PBS，并混合好，形成 PBT-T 的同质溶液。使用微原子，制作一个五微米的石蜡部分。将水浴部分加载在摄氏38度的水浴上，并将其收集到玻璃滑梯上。用耐试剂笔标记幻灯片。将滑梯放在托盘上，在 55 到 60 摄氏度的烤箱中熔化一小时。然后，从烤箱中取出幻灯片，并立即将其脱光，每次使用 3 次连续 5 分钟的二甲苯冲洗。在此之后，按照文本协议中所述，通过连续浸入中将乙醇稀释到去离子水中，对幻灯片上的部分进行补水。用蛋白酶处理滑梯30分钟进行蛋白酶抗原检索，然后用PBS-T冲洗滑梯10分钟，用3%过氧化氢处理10分钟。在此之后，再次用 PBS-T 清洗幻灯片 10 分钟。首先，从缓冲器中取出一个滑梯，确保一次只处理一个滑动，而其他滑动仍被淹没，并用纸巾从组织部分周围擦去多余的缓冲器。将滑梯放入湿度室，在室温下用普通山羊血清孵育15分钟。接下来，在室温下用最佳的预定稀释原发性抗狂犬病抗体和负控制抗体在湿度室中孵化滑梯60分钟，中间不洗。在此之后，用 PBS-T 清洗滑梯 10 分钟，并在室温下用生物色素抗体在湿度室中孵育 15 分钟。再次用 PBS-T 清洗幻灯片 10 分钟。在室温下用条状隔板和 HRB 复合物孵育滑梯和湿度室 15 分钟，并清洗 PBS-T 10 分钟。然后，在室温下与 AEC 在湿度室中孵育 10 分钟。在去离子水中清洗滑梯10分钟，与吉尔的血氧化物对冲，用去离子水稀释一到二，两分钟。在此之后，通过将滑梯浸入去离子水中冲洗，冲洗多余的血氧林。在斯科特的自来水中冲洗滑梯 30 秒，在电离水中洗 10 分钟。一次取下一个滑梯，并安装它们与水溶性安装介质。然后，使用光显微镜读取幻灯片。在这项研究中，一种免疫细胞化学测试被证明用于检测狂犬病病毒抗原，作为正式固定组织的替代诊断测试。这里显示了不同脑组织中正负对照样本的代表性免疫细胞化学染色结果，包括脑系统、小脑细胞和纯金细胞以及海马。品红色染色，通过使用AEC基板对蓝色反染色背景表示颜色发展，是由于抗体对狂犬病抗原的反应。免疫造血术的阳性结果与组织部分的品红色染色相对应。细胞质内含物和不同尺寸的颗粒内含物的染色表明样本对RABV感染呈阳性反应。样本被视为阴性，如果没有特定的红色染色或只有蓝色背景，由于血氧林，被观察到。除了阳性染色外，内含物的分布还可以间接量化样本中狂犬病抗原的水平，这可能与组织样本的病毒载量相对应。无论分布水平如何，任何特定的污渍都会将样品分类为 RABV 抗原检测阳性。组织应充分固定在正式素中，并避免在此过程中冻结组织。狂犬病抗原由IHC检测到，然后分子技术可以在石蜡部分进行，根据RNA序列信息确定莱莎病毒变异。像二甲苯和甲醛这样的试剂应该用烟气罩处理。在处理 AEC 时应小心谨慎，因为它是致癌物质。

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Detection of Infectious Virus from Field-collected Mosquitoes by Vero Cell Culture Assay

从现场收集到的蚊子传染病毒Vero细胞培养法检测

Mosquitoes transmit a number of distinct viruses including important human pathogens such as West Nile virus, dengue virus, and chickungunya virus. Many ...

科研

免疫与感染

Diagnosing Pulmonary Tuberculosis with the Xpert MTB/RIF Test

Xpert山地车/ RIF测试与诊断肺结核

Tuberculosis (TB) due to Mycobacterium tuberculosis (MTB) remains a major public health issue: the infection affects up to one third of the world ...

A Novel Microdissection Approach to Recovering Mycobacterium tuberculosis Specific Transcripts from Formalin Fixed Paraffin Embedded Lung Granulomas

A Novel Microdissection Approach to Recovering Mycobacterium tuberculosis Specific Transcripts from Formalin Fixed Paraffin Embedded Lung Granulomas

Microdissection has been used for the examination of tissues at DNA, RNA, and protein levels for over a decade. Laser capture microscopy (LCM) is the most ...

Detection of Human Leukocyte Antigen Biomarkers in Breast Cancer Utilizing Label-free Biosensor Technology

在乳腺癌检测人类白细胞抗原生物标志物的利用无标记生物传感技术

According to the American Cancer Society, more than 200,000 women will be diagnosed with invasive breast cancer each year and approximately 40,000 will ...

Isolation of Leukocytes from the Murine Tissues at the Maternal-Fetal Interface

从小鼠组织在母胎界面分离白细胞

Immune tolerance in pregnancy requires that the immune system of the mother undergoes distinctive changes in order to accept and nurture the developing ...

Nasal Wipes for Influenza A Virus Detection and Isolation from Swine

鼻湿巾从猪流感病毒检测和​​隔离

Surveillance for influenza A viruses in swine is critical to human and animal health because influenza A virus rapidly evolves in swine populations and ...

Generation of Two-color Antigen Microarrays for the Simultaneous Detection of IgG and IgM Autoantibodies

双色抗原微阵列产生的IgG和IgM自身抗体的同时检测

Autoantibodies, which are antibodies against self-antigens, are present in many disease states and can serve as markers for disease activity. The levels ...

Detection and Enrichment of Rare Antigen-specific B Cells for Analysis of Phenotype and Function

检测和罕见富集抗原特异性B细胞的表型和功能分析

B cells reactive with a specific antigen usually occur at a frequency of &lt;0.05% of lymphocytes. For decades researchers have sought methods to isolate ...

Isolation, Characterization, and Purification of Macrophages from Tissues Affected by Obesity-related Inflammation

受肥胖相关炎症组织的巨噬细胞的分离、鉴定和纯化

Obesity promotes a chronic inflammatory state that is largely mediated by tissue-resident macrophages as well as monocyte-derived macrophages. ...

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

在体内应用免疫模型检测抗原特异性 T 细胞细胞功能的试验

Current methodologies for antigen-specific killing are limited to in vitro use or utilized in infectious disease models. However, there is not a protocol ...