Name: nest building behavior as an early indicator of behavioral deficits in mice
Uploaded: 2019-10-19T14:00:00
Duration: 6 min 11 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nest Building Behavior as an Early Indicator of Behavioral Deficits in Mice at JoVE.com

We willen Kevin Quant, Mario Martinez en Edwin Portillo bedanken voor het scoren van nesten, Rachel Barkey, voor het assisteren bij de voorbereiding van het filmen, en Stephen Lippi en Deborah Neely voor het proeflezen van dit manuscript. We willen ook het departement psychologie bedanken voor het dekken van de kosten van kooien voor dit experiment, en de verzorgers van het Krasnow Institute voor hun steun.

Alle procedures werden goedgekeurd door de George Mason University institutionele Dierenzorg en gebruik Comité en zijn in overeenstemming met de richtlijnen die zijn uiteengezet door de beoordeling en accreditatie van laboratoriumdieren zorg.
1. dieren en overwegingen voorafgaand aan de beoordeling
<ol><li>Gebruik voor dit protocol Adult, 9-12-month-old C57BL/6J (n = 10) (stock # 000664) wild type muizen en ApoE E4 muizen (n = 11) van een hemizygoot J20 (Stock #006293) x homozygoot apoe E4 (Stock #012307) kruis.</li>
	<li>In de woonkamer, groep-huis muizen met littermates van hetzelfde geslacht met passende verrijking (bijvoorbeeld, voor dit protocol, muizen werden voorzien van een loopwiel, iglo, en een klein nylon kauw speelgoed). Groep-huis 4-6 vrouwelijke muizen, en 4 mannetjes in een 356 mm L x 485 mm W x 218 mm H huis kooi. Opmerking: onderzoekers kunnen overwegen om strategieën voorafgaand aan en/of na het nesten te implementeren om kooi-mate agressie te voorkomen wanneer muizen opnieuw worden geïntroduceerd na het nesten van proeven. Dergelijke strategieën kunnen omvatten, maar zijn niet beperkt tot, dagelijkse behandeling voorafgaand aan gedragstesten om muizen beter te acclimeren tijdens gedragstesten, onderzoekers en personeel van de veehouderij19, scheiden en individueel huisvesting agressieve muizen, of het verminderen van het aantal muizen in de homecage20, afhankelijk van de ernst van de in-kooi gevechten, waargenomen wonden21, enz.</li>
</ol>2. kamer en nest opstelling
<ol><li>Zorg ervoor dat elke muis vier tests voltooit (1 materiaal per proef). Randomiseren van de volgorde van het nesten van materiaal voor elke muis om te voorkomen dat een order effect.</li>
	<li>Maak de kooien klaar in een aparte testruimte. Registreer omgevingscondities (bijv. 22,2 – 22,3 °C, 45-47% luchtvochtigheid, licht op 9:00 AM – 9:00 PM) zodat ze consistent zijn in verschillende proeven en identiek zijn aan de woonkamer. Geef voedsel en water ad libitum.<ol>
<li>Wijs elke muis een willekeurig identificatienummer (ID) of letter toe. Bevestig de willekeurige identificatiekaart aan een kooi van 29,2 x 18,4 cm.</li>
		<li>Noteer de originele dierlijke ID/tag en andere noodzakelijke identificatie in een kolonie record om ervoor te zorgen dat assistenten en veeteelt personeel blind blijven voor de omstandigheden.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Willekeurig de plaatsing van de kooi in de testruimte zodanig dat wild type en transgene muizen niet ongepast gescheiden zijn (d.w.z. aan tegenoverliggende zijden van de kamer, op aparte planken, enz.).</li>
	<li>Bereid het nest materiaal voor door de bodem van de kooi voldoende te bedekken. Gebruik ongeveer 100 g drooggewicht ronde beddengoed voor vierkante, twist, en versnipperd papier proeven, en ongeveer 100 g van de zachte COB beddengoed voor de zachte COB trial.</li>
	<li>Als u een bekerglas gebruikt om het nest materiaal te dispergeren, vult u het bekerglas niet meer dan 100 ml met ronde bedding of zachte COB bedden.</li>
	<li>Plaats het eerste nest materiaal in de sequentie voordat je de muis in de kooi introduceert. Dit protocol wordt gebruikt (1) een enkel geperst katoenen vierkant, (2) een enkele papieren twist, (3) 100g zachte COB bedding alleen (d.w.z. geen extra strooisel of nest materiaal toegevoegd), en (4) 2,5 g schoon (geen inkt), versnipperd wit printer papier gesneden in 5-7cm strips. De nest materialen dispergeren zoals weergegeven in Figuur 1 (baseline).</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60139/60139fig1v3.jpg"> Figuur 1: kooi opstelling voor elk materiaal. Alle muizen voltooiden één proef met elk type materiaal voor een totaal van vier proeven. Corncob bedding bekleed de gehele bodem van de kooien met een papieren twist, een geperst katoenen vierkant en versnipperd papier. Zachte COB beddengoed was gelijkmatig verspreid over de kooi om muizen aan te moedigen om de kleine katoenen pleinen van de Corncob scheiden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60139/60139fig1v3large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
3. het nesten van een proef
<ol><li>Begin de eerste broedende proef op hetzelfde tijdstip van de dag aan het begin van de licht cyclus (bijv. 9:00 AM).</li>
	<li>Breng de homecage met de muizen in de testruimte. Verwijder elke muis van de homecage en plaats deze in de toegewezen nest kooi met het materiaal dat al in de kooi is geplaatst. Retourneer de homecages naar de woonkamer.</li>
	<li>Laat muizen 1 proef voor 24 uur ongestoord voltooien.</li>
	<li>24 uur na aanvang van de eerste proef, keert u terug naar de testkamer.</li>
	<li>Verwijder voorzichtig de deksel van de kooi en foto van het nest van elke muis, het vastleggen van de toegewezen ID in de foto en het minimaliseren van het uiterlijk van alle materialen buiten de kooi. Opmerking: wacht totdat de muis uit het nest is verwijderd voordat je hem uit de kooi probeert te verwijderen. Het wordt sterk aanbevolen om het nest te fotograferen terwijl de muis in de kooi zit, maar van het nest. Als u probeert de muis uit de kooi te verwijderen voordat u fotografekt, kan dit ertoe leiden dat de muis wordt opgeschimpeld, waardoor het geneste materiaal op de bovenkant wordt verplaatst en wordt dispergeren.</li>
	<li>Haal de muis voorzichtig uit de nest kooi en plaats deze in een tijdelijke kooi. Gooi het strooisel en alle nest materialen weg, vervang het strooisel en geef het volgende nest materiaal in de sequentie en breng de muis terug naar de nest kooi.</li>
	<li>Herhaal zo nodig om scores te verkrijgen voor alle 4 proeven. Het wordt aanbevolen om versnipperd papier en de bijbehorende scoring criteria te gebruiken, hoewel onderzoekers wellicht geïnteresseerd zijn in het gebruik van de alternatieve materialen die in dit protocol worden besproken.</li>
	<li>Als alle proeven zijn voltooid, keert u muizen terug naar hun huis kooien. Observeer de muizen op mogelijke agressieve gedragingen. Agressie kan optreden bij oudere wild type mannetjes. Opmerking: voor de toepassing van dit protocol werden muizen eenmaal getest op een leeftijd van ongeveer 9 – 12 maanden. Nesten moet worden uitgevoerd op verschillende leeftijden (d.w.z., op een vroegere leeftijd, afhankelijk van de gekozen stam, voorafgaand aan het begin van fenotypische eigenschappen) om de afname van de broedcapaciteit in de tijd te documenteren en de waarschijnlijke causatieve rol van neurodegeneratie aantonen.</li>
</ol>4. scoren en beoordelen van de betrouwbaarheid van de Inter-Rater
<ol><li>Geef voor elk nest materiaal basislijn afbeeldingen aan ten minste 2 personen die blind zijn voor de studie. Hoewel dit niet vereist is, moet u ervoor zorgen dat de scorers bekend zijn met het concept van nesten. Geef bij het trainen van scorers een reeks voorbeeld nesten (bijvoorbeeld Figuur 2 voor versnipperd papier) om de scorers vertrouwd te maken met elk type materiaal (indien van toepassing) en de scoringscriteria.<ol>
<li>Evalueer elk nest op een schaal van 1 – 5 met behulp van de volgende schaal informatie (aangepast uit diaken, 2006)2. Zie Figuur 2 als voorbeeld scoren met versnipperd papier.</li>
		<li>Wijs een Score van 1 toe wanneer het geraspte papier of de kleine vierkantjes verspreid bleven in de kooi, of het katoenen vierkant of de twist onaangeroerd bleef;</li>
		<li>Wijs een Score van 2 toe wanneer een deel van het materiaal in een nest werd geconstrueerd, maar meer dan 50% van het materiaal werd niet gebruikt voor de bouw van het nest (d.w.z. verstrooid gebleven of de meerderheid van het oorspronkelijke materiaal bleef onaangeroerd);</li>
		<li>Wijs een Score van 3 toe wanneer een merkbare nest werd gebouwd, maar er waren nog verschillende stukken verspreid;</li>
		<li>Wijs een Score van 4 toe toen bijna al het materiaal voor het nest werd gebruikt, maar er bleven weinig stukken materiaal verspreid of in de buurt van het nest;</li>
		<li>Wijs een Score van 5 toe wanneer al het materiaal is gebruikt om een herkenbaar nest te maken. Opmerking: scorers moeten pauzes nemen en de basislijn Foto's herzien om vermoeidheid en bias tijdens de scorings procedure te voorkomen. Scorers moeten geen scores met elkaar bespreken om bias te voorkomen. Scorers moeten de scores bespreken nadat het scoren is voltooid of als verdere discussie nodig is om de scores te wijzigen, waardoor problemen met de intraclass correlaties (ICC) kunnen worden opgelost. Intraclass correlaties wordt uitgevoerd met behulp van de stappen in paragraaf 4,2.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60139/60139fig2.jpg"> Figuur 2: voorbeeld van scoren met behulp van de criteria voor versnipperd papier, het voorkeurs materiaal. Van links naar rechts: 1 – het geraspte papier bleef onaangeroerd; 2 – een deel van het papier werd in een nest gebouwd, maar de meeste stukken bleven verstrooid; 3 – er werd een merkbare nest gebouwd, maar er waren nog verschillende stukken verspreid; 4 – de meeste stukken werden gebruikt voor het nest, maar sommige stukken waren verspreid in de buurt van het nest; 5 – alle stukken werden gebruikt om het nest te maken. Merk op dat in de Foto's het toegewezen nummer van het dier wordt getoond om onblindering te voorkomen. De kleur van de kaart is willekeurig. Onderzoekers moeten toestaan dat de muis in de kooi blijft om te voorkomen dat de muis wordt ontgaan, wat het nest mogelijk kan verspreiden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60139/60139fig2large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<ol start="2"><li>Verzamel en voer scores in en formatteren van het gegevensbestand, zodat de scores van elke scorer voor elk materiaal in afzonderlijke kolommen staan. Opmerking: als u aanvullend bestand 1gebruikt, houd er dan rekening mee dat het coderings script voor deze analyse gratis, open source software (bijv. IRR -pakket in rstudio)22,23vereist. Het script verwijdert kopteksten en onderwerpen variabelen (dat wil zeggen, de bovenste rij en dierlijke Id's) voor het uitvoeren van de intraclass correlatie (ICC). Voer het script uit om een tweeweg, overeenkomst, gemiddelden metingen ICC door het markeren van de afgebakende sectie van de code en het raken van CTRL + ENTER of Command + Enter.</li>
	<li>Vergelijk het ICC met de bestaande criteria24,25,26. De ICC-waarden boven 0,80 komen meestal overeen met een sterke betrouwbaarheid van de Inter-Rater, waarbij scores op een bepaald tijdstip kunnen worden berekend (aanvullend bestand 2).</li>
	<li>Gebruik dezelfde ICC-criteria voor de betrouwbaarheid van intra-Rater, die voor de eerste keer van belang kunnen zijn voor degenen die scoren. Let op: scorers moeten dezelfde gefotografeerde nesten scoren binnen een week na de initiële beoordeling. Ga voorzichtig te werk met gemiddeldengegevens wanneer ICC laag is, omdat dit gegevens kan scheeftrekken of null-bevindingen oplevert. Als de ICC-waarden laag zijn, kan er (1) extra training voor scorers nodig zijn, (2) misschien moeten scorers hun redenering voor nest scores bespreken, (3) een andere onafhankelijke beoordelaar kan nodig zijn om een vonnis te vragen met betrekking tot de scores, of (4) intra-Rater de betrouwbaarheid moet mogelijk worden beoordeeld. Als de betrouwbaarheid van de intra-Rater slecht is, kan een aanvullende opleiding of een andere scorer nodig zijn.</li>
</ol>5. statistische overwegingen
<ol><li>Zo nodig statistische analyses uit te voeren. Voor gegevens die niet in strijd zijn met normaliteits veronderstellingen maar meerdere materialen gebruiken voor elke muis (d.w.z. een binnen-subjecten effect), gebruikt u een gemengde variantieanalyse (ANOVA).<ol>
<li>Als u codes gebruikt als aanvullende bestanden, download dan extra add-on pakketten die zijn gespecificeerd in het script27,28,29,30.</li>
		<li>Als u een gemengde ANOVA uitvoert met behulp van het meegeleverde script, voert u het script uit om alle breedformaat-gegevensbestanden om te zetten in lange-opmaak (d.w.z. in plaats van variabelen die over kolommen worden herhaald, converteert u de cellen om te herhalen in rijen). Een voorbeeld van een gegevensbestand is opgenomen in dit manuscript om te laten zien hoe u een gegevensbestand converteert van breedbeeld naar lang formaat.</li>
		<li>De gemengde ANOVA uitvoeren, zoals gespecificeerd in het script. Houd er rekening mee dat als de test van de bolheid van Mauchly wordt geschonden, de correctie factoren zoals de Greenhouse-Geisser-correctie worden toegepast.</li>
		<li>Voer alle noodzakelijke posthoc-tests uit om de verschillen tussen factoren met meer dan 2 niveaus te onderzoeken, zoals gespecificeerd in het coderings script. Voer in dit voorbeeld Bonferroni posthoc tests uit om de verschillende soorten nest materiaal te vergelijken. Opmerking: als u slechts één nest materiaal gebruikt, neemt u geen factor binnen de onderwerpen op. Bij het verzamelen van gegevens op meerdere tijdstippen, echter, nemen deze herhaalde maatregelen alsof niveaus van een binnen-subjecten factor. Opmerking: in sommige gevallen, wild type muizen kunnen hebben perfecte scores en dus zal vertonen een plafond effect, leidt tot een niet-normale verdeling2. Overweeg geschikte statistische tests (bijvoorbeeld niet-parametrische tests met alternatieve maatregelen van centrale neiging en dispersie), normalisatie methoden of robuuste benaderingen (gemengde-effect modellering voor herhaalde metingen) bij het analyseren van gegevens.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Torres-Lista, V., Gimenez-Llorta, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impairment+of+nesting+behavior+in+3cTg-AD+mice.">Impairment of nesting behavior in 3cTg-AD mice.</a> Behavioural Brain Research. 247, 153-157 (2013).</li><li>Deacon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+nest+building+in+mice.">Assessing nest building in mice.</a> Nature Protocols. 1 (3), 1117-1119 (2006).</li><li>Hess, E., Petrovich, S., Goodwin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+Parental+Behavior+in+Japanese+Quail.">Induction of Parental Behavior in Japanese Quail.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 90 (3), 244-251 (1976).</li><li>Deacon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+cytotoxic+lesion+effects+on+species-typical+behaviors+in+mice.">Hippocampal cytotoxic lesion effects on species-typical behaviors in mice.</a> Behavioural Brain Research. 132, 203-213 (2002).</li><li>Deacon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+medial+prefrontal+cortex+cytotoxic+lesions+in+mice.">Effects of medial prefrontal cortex cytotoxic lesions in mice.</a> Behavioural Brain Research. 139, 139-155 (2003).</li><li>Gaskill, B. N., Karas, A. Z., Garner, J. P., Pritchett-Corning, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nest+building+as+an+indicator+of+health+and+welfare+in+laboratory+mice.">Nest building as an indicator of health and welfare in laboratory mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (82), 51012 (2013).</li><li>Mayeux, R., Stern, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+Alzheimer+Disease.">Epidemiology of Alzheimer Disease.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 2 (8), 006239 (2012).</li><li>Boggs, K. N., Kakalec, P. A., Smith, M. L., Howell, S. N., Flinn, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+wheel+running+behavior+is+altered+in+an+APP/E4+mouse+model+of+late+onset+Alzheimer's+disease.">Circadian wheel running behavior is altered in an APP/E4 mouse model of late onset Alzheimer's disease.</a> Physiology and Behavior. 182, 137-142 (2017).</li><li>Graybeal, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+ApoE+&#949;4+alters+circadian+rhythm+activity,+IL-1&#946;,+and+GFAP+in+CRND8+mice.">Human ApoE &#949;4 alters circadian rhythm activity, IL-1&#946;, and GFAP in CRND8 mice.</a> Journal of Alzheimer's Disease. 43 (3), 823-834 (2015).</li><li>Leng, Y., Musiek, E. S., Hu, K., Cappuccio, F. P., Yaffe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+between+circadian+rhythms+and+neurodegenerative+diseases.">Association between circadian rhythms and neurodegenerative diseases.</a> The Lancet Neurology. 18 (3), 307-318 (2019).</li><li>Zhou, L., Gao, Q., Nie, M., Gu, J. L., Hao, W., Wang, L., Cao, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degeneration+and+energy+shortage+in+the+suprachiasmatic+nucleus+underlie+the+circadian+rhythm+disturbance+in+ApoE-/-+mice:+Implications+for+Alzheimer's+disease.">Degeneration and energy shortage in the suprachiasmatic nucleus underlie the circadian rhythm disturbance in ApoE-/- mice: Implications for Alzheimer's disease.</a> Scientific Reports. 6, 36335 (2016).</li><li>Deacon, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+and+-independent+behavioral+deficits+in+Tg2576+mice.">Age-dependent and -independent behavioral deficits in Tg2576 mice.</a> Behavioural Brain Research. 189, 126-138 (2008).</li><li>Filali, M., Lalonde, R., Riverst, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+and+non-cognitive+behaviors+in+an+APPswe/PS1+begenic+model+of+Alzheimer's+disease.">Cognitive and non-cognitive behaviors in an APPswe/PS1 begenic model of Alzheimer's disease.</a> Genes, Brain and Behavior. 8, 143-148 (2009).</li><li>Robinson-Junker, A., Morin, A., Protchett-Corning, K., Gaskill, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sorting+it+out:+Bedding+particle+size+and+nesting+material+processing+method+affects+nest+complexity.">Sorting it out: Bedding particle size and nesting material processing method affects nest complexity.</a> Laboratory Animals. 51 (2), 170-180 (2017).</li><li>Martin, T., Balser, S., Young, G., Lewis, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cost+and+effectiveness+of+commercially+available+nesting+substrates+for+Deer+Mice+(Peromyscus+maniculatus).">Cost and effectiveness of commercially available nesting substrates for Deer Mice (Peromyscus maniculatus).</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 55 (4), 412-418 (2016).</li><li>Crossland, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caring+for+Peromyscus+spp.+in+research+environments.">Caring for Peromyscus spp. in research environments.</a> Lab Animal. 43 (5), 162-166 (2014).</li><li>Eisenberg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+the+Behavior+of+Peromyscus+maniculatus+gambelii+and+Peromyscus+californicus+parasiticus.">Studies on the Behavior of Peromyscus maniculatus gambelii and Peromyscus californicus parasiticus.</a> Behaviour. 19 (3), 177-207 (1962).</li><li>Joyner, C. P., Myrick, L. C., Crossland, J. P., Dawson, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deer+mice+as+laboratory+animals.">Deer mice as laboratory animals.</a> ILAR Journal. 39 (4), 322-330 (1998).</li><li>Neely, C., Lane, C., Torres, J., Flinn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effect+of+gentle+handling+on+depressive-like+behavior+in+adult+male+mice:+Considerations+for+human+and+rodent+interactions+in+the+laboratory.">The Effect of gentle handling on depressive-like behavior in adult male mice: Considerations for human and rodent interactions in the laboratory.</a> Behavioural Neurology. , 2976014 (2018).</li><li>Van Loo, P. L., Mol, J. A., Koolhaas, J. M., Van Zutphen, B. F., Baumans, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+aggression+in+male+mice:+Influence+of+group+size+and+cage+size.">Modulation of aggression in male mice: Influence of group size and cage size.</a> Physiology &amp; Behavior. 72 (5), 675-683 (2001).</li><li>Kappel, S., Hawkins, P., Mendl, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=To+group+or+not+to+group?+Good+practice+for+housing+male+laboratory+mice.">To group or not to group? Good practice for housing male laboratory mice.</a> Animals. 7 (12), 88 (2017).</li><li>Cicchetti, D. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines,+criteria,+and+rules+of+thumb+for+evaluating+normed+and+standardized+assessment+instruments+in+psychology.">Guidelines, criteria, and rules of thumb for evaluating normed and standardized assessment instruments in psychology.</a> Psychological Assessment. 6 (4), 284-290 (1994).</li><li>Hallgren, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computing+inter-rater+reliability+for+observational+data:+An+overview+and+tutorial.">Computing inter-rater reliability for observational data: An overview and tutorial.</a> Tutorials in Quantitative Methods for Psychology. 8 (1), 23-34 (2012).</li><li>McGraw, K. O., Wong, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forming+inferences+about+some+intraclass+correlation+coefficients.">Forming inferences about some intraclass correlation coefficients.</a> Psychological Methods. 1 (1), 30-46 (1996).</li><li>. ggsignif: Significance Brackets for 'ggplot2'. R package version 0.5.0 Available from: <a target="_blank" href="https://CRAN.R-project.org/package=ggsignif">https://CRAN.R-project.org/package=ggsignif</a> (2019)</li><li>. ez: Easy Analysis and Visualization of Factorial Experiments. R package version 4.4-0 Available from: <a target="_blank" href="https://CRAN.R-project.org/package=ez">https://CRAN.R-project.org/package=ez</a> (2016)</li><li>Lenth, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Least-Squares+Means:+The+R+Package+lsmeans.">Least-Squares Means: The R Package lsmeans.</a> Journal of Statistical Software. 69 (1), 1-33 (2016).</li><li>Wickham, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ggplot2: Elegant Graphics for Data Analysis. , (2016).</li><li>Craven, K. M., Kochen, W. R., Hernandez, C. M., Flinn, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zinc+exacerbates+tau+pathology+in+a+tau+mouse+model.">Zinc exacerbates tau pathology in a tau mouse model.</a> Journal of Alzheimer's Disease. 64, 617-630 (2018).</li><li>Lippi, S. L., Smith, M. L., Flinn, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+hAPP/htau+mouse+model+of+Alzheimer's+Disease:+Inclusion+of+APP+with+tau+exacerbates+behavioral+deficits+and+zinc+administration+heightens+tangle+pathology.">A novel hAPP/htau mouse model of Alzheimer's Disease: Inclusion of APP with tau exacerbates behavioral deficits and zinc administration heightens tangle pathology.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 10, 382 (2018).</li><li>Hess, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Home+improvement:+C57BL/6J+mice+given+more+naturalistic+nesting+materials+build+better+nests.">Home improvement: C57BL/6J mice given more naturalistic nesting materials build better nests.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 47 (6), 25-31 (2008).</li><li>Jirkof, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burrowing+and+nest+building+behavior+as+indicators+of+well-being+in+mice.">Burrowing and nest building behavior as indicators of well-being in mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. 234, 139-146 (2014).</li><li>Van Oortmerssen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+significance,+genetics+and+evolutionary+origin+of+variability+in+behaviour+within+and+between+strains+of+mice+(Mus+musculus).+A+behavior+genetic+study.">Biological significance, genetics and evolutionary origin of variability in behaviour within and between strains of mice (Mus musculus). A behavior genetic study.</a> Behaviour. 38 (1), 1-92 (1971).</li></ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Nesten is een evolutionair belangrijk knaagdier gedrag en is gebruikt om de activiteit van het dagelijks leven en algemeen welzijn in muizen2te beoordelen. Het gemak om de test uit te voeren, de betrouwbaarheid en de gelaats geldigheid maken het nesten een praktische aanvulling op veel gedragstesten zoals Burrowing, circadiane ritme en verzorging. Maar, als nesten wordt meer algemeen gebruikt in het laboratorium, de verschillende combinaties te voeren, kwantificeren, en interpreteren van nesten toenemen. Als zodanig is verder onderzoek nodig om de beste methodologisch en praktisch gezonde procedures voor het nesten te onderzoeken, zodat de geldigheid en betrouwbaarheid van de test niet worden opgeofferd voor kosten, tijd van testen en andere procedures die de test last verminderen .
De kwaliteit van nest-gebouwen is inderdaad gevoelig voor het aanwezige type beddengoed en genotype. Over het algemeen bouwden wild type muizen significant betere nesten in vergelijking met APOE E4-muizen, ongeacht het nest materiaal; zowel wild type-als APOE E4-muizen bouwen echter aanzienlijk hogere kwaliteit nesten uit versnipperd papier in vergelijking met de drie andere geneste materialen. Andere studies bieden bevestigende bewijzen met betrekking tot het geraspte papier: muizen bouwden complexere nesten uit versnipperde papier stroken dan met geperste katoenen vierkantjes, weefsel en Aspen beddengoed33. Bovendien zijn nesten vervaardigd uit versnipperde papier stroken kwalitatief geëvalueerd als meer "naturalistisch" dan die gemaakt van andere materialen, die worden gekenmerkt door de vorm van het nest zelf en de hoogte van de wanden rond de nest holte in om een koepel te vormen6,33. Als zodanig is de selectie van het juiste materiaal voor deze assay van cruciaal belang om het natuurlijke gedrag in een relatief gecontroleerde omgeving beter te observeren, d.w.z. de laboratorium instelling. Belangrijker nog, hoewel dit protocol beoordeeld één keer te nesten op 9 – 12 maanden oud, we benadrukken dat nesten moet worden uitgevoerd op verschillende leeftijden. De eenvoud van dit protocol maakt het mogelijk om meerdere malen te worden uitgevoerd, idealiter vóór het begin van tekorten die neurodegeneratie begeleiden. Herhaalde metingen bieden de mogelijkheid om de waarschijnlijke causatieve rol van neurodegeneratie in verminderde broed baarheid te documenteren.
Natuurlijke nest gebouw is aangetoond dat verschillen tussen muizen van verschillende achtergrond stammen34, en als zodanig, de algehele kwaliteit en vorm van het nest kan afwijken niet te wijten aan het transgen van belang, maar als gevolg van de achtergrond stam. Bijvoorbeeld, de voor ouders van C57BL/6 muizen werden beschouwd als "Hole" nesters, terwijl de voor ouders van BALB/C muizen werden beschouwd als "oppervlakte" nesters35. Muizen op de C3H achtergrond of kruisen met deze stam, zoals de hybride C3H/he-C57BL/6 met E4 gebruikt in Graybeal et al.9 worden ook beschouwd als slechte nesters; Zo moeten onderzoekers sterk overwegen om besturings muizen op dezelfde achtergrond te gebruiken als transgene muizen, wat de directe, causatieve rol van het transgene (s) in het algemeen zou verbeteren, in plaats van de achtergrond, in neurodegeneratie en daaropvolgende tekorten in nest gebouw gedrag.
Sommige experimenten maken vaak gebruik van één scorer om de complexiteit van het nest kwalitatief te beoordelen; We maken echter het argument dat er meer scorers zijn, en nog belangrijker, dat de scorers blind zijn voor experimentele omstandigheden. Door deze aanpak gebruikten we drie onafhankelijke, blinde scorers en een intraclass correlatie om de overeenkomst tussen de scorers te beoordelen, die, met basisopleiding, hoge intraclass correlaties leverden die indicatief waren voor een hoge betrouwbaarheid van de Inter-Rater en een sterke overeenkomst over de nest-kwaliteit. Bovendien hadden de nesten van versnipperd papier en katoenen vierkantjes de hoogste intraclass correlaties, een indicatie van een sterkere overeenkomst en een grotere consistentie tussen de scorers. De sterke overeenkomst biedt ook een rechtvaardiging om de meervoudige scores samen te gemiddelde, een strategie die lukraak wordt geïmplementeerd in gedragsonderzoek. Hoewel deze strategie meer individuen vereist en, vermoedelijk, meer tijd om nesten te scoren, vermindert het effectief bias in kwalitatieve evaluaties zoals nesten.
De in deze test gebruikte broed materialen waren ongeveer gelijk in de prijs, behalve de zachte COB-bedding. Commercieel strooisel voor nesten kan economisch vindingrijk zijn voor sommige experimenteurs; echter, Martin et al.15 merk op dat katoenen pleinen, in vergelijking met andere materialen zoals geplisseerd papier, is een van de duurste materialen die beschikbaar zijn voor aankoop. Dit kan te wijten zijn aan eenvoudige beschikbaarheid, opslag en administratie, maar andere onderzoekers kunnen kiezen voor soortgelijke geldige en betrouwbare materialen, vooral wanneer ze worden uitgedaagd door grote aantallen dieren in een faciliteit, het aantal nesten proeven, tijdsbeperkingen voor het scoren van nesten en hoge kooi kosten. Zo kan versnipperd papier een meer haalbare en geschikte optie zijn. Bovendien kan het vastleggen van gegevens voor onze methode onmiddellijk worden uitgevoerd (d.w.z. scoren in persoon), hoewel Foto's sterk moeten worden overwogen om nesten te registreren, op te slaan en opnieuw te kwantificeren, indien gewenst met het oog op de beoordeling van Inter-en intra-Rater betrouwbaarheid op latere tijdstippen. Zoals opgemerkt, benadrukken we de opname van meerdere scorers voor "test, re-test"-praktijken om te beoordelen voor overeenstemming, omdat deze methodologisch verantwoorde procedures vaak over het hoofd worden gezien.
Concluderend zijn wij van mening dat de methodologie en statistische overwegingen (d.w.z. intraclass correlatie) voor deze test van belang kunnen zijn voor experimenten die de kwaliteit van het leven, algemeen welzijn en activiteiten van het dagelijks leven in muizen beoordelen.

Nest Building is een aangeboren gedrag in veel dieren zoals vogels, vissen, knaagdieren en mensapen, en het trekt meer aandacht voor zijn potentiële nut in de studie van neurologische ziekten en aandoeningen gekenmerkt door verminderde welzijn en verminderde activiteiten van Daily Living1. Muizen, zowel mannelijke als vrouwelijke, bouwen op soortgelijke grootte nesten voor reproductieve doeleinden, warmte behoud, en onderdak; nog belangrijker, ze blijven doen, zelfs wanneer verhoogd in laboratorium instellingen2. Hess, Petrovich en Goodwin3 beweren dat biologisch geschikte stimuli van essentieel belang zijn om biologisch geschikt gedrag zoals nesten te induceren; echter, een verscheidenheid aan natuurlijke en kunstmatige materialen, zoals hooi, hennep, katoen bindgaren, papier strips, katoen tandheelkundige ballen, en geperst katoen pleinen, zijn gebruikt om te beoordelen nest Building Behavior2. Veranderingen in dit nestgedrag (d.w.z. het niet aanmaken van een nest uit het meegeleverde materiaal) duiden in het algemeen op een verandering in de gezondheid of het welzijn. In de meeste gevallen wordt een gebrek aan nest-gebouw toegeschreven aan verschillende factoren die een negatief effect hebben op het welzijn. Dergelijke voorbeelden die de kwaliteit van het nest-gebouw in muizen effectief hebben verlaagd, omvatten extreme temperaturen; pijnlijke stimulatie; geïnduceerde ziekte en infectie; genetische mutaties; en hersenlaesies in de mediale vooroptische gebieden, septum, en Hippocampus4,5,6.
De ziekte van Alzheimer is een progressieve neurodegeneratieve ziekte gekenmerkt door verlies van hersenweefsel, accumulatie van extracellulaire amyloid-β plaques, en intracellulaire neurofibrillaire tangles samengesteld hyperfosforyleerd microtubulus-geassocieerde eiwitten, tau7. Bovendien, de ziekte van Alzheimer wordt gekenmerkt door, met name, tekorten in het leren en het geheugen en de beperkingen van de activiteiten van het dagelijks leven. Bij muizen worden activiteiten van het dagelijks leven vaak onderzocht via het circadiane wiel-Running8,9,10,11, hoewel nieuwe alternatieven, zoals nesten, steeds populairder worden. Nesten is aangetoond dat ze gevoelig zijn voor manipulaties (bijv. genetische mutaties, milieustressoren) die zijn geïdentificeerd als risicofactoren en/of oorzaken van de ziekte van Alzheimer. Als zodanig, nesten kan worden gebruikt als een aanvullende of complementaire assay in veel muizenstammen die modelleren van deze kenmerken van de ziekte van Alzheimer. Bijvoorbeeld, diaken en collega's12 gemeten nest gebouw van Tg2576 muizen met de Zweedse amyloïde precursor proteïne (APPswe) en presenilin 1 (PS1) genetische mutaties. De kwaliteit van nesten gebouwd door groep-gehuisvest Tg2576 muizen was aanzienlijk slechter dan wild type controles op zowel 3-en 12-maanden oud. In overeenstemming met deze bevindingen, Filali et al.13 gemeld dat afzonderlijk gehuisvest APPswe/PS1 mannelijke muizen gegeven twee stukken van 5 x 5 cm katoen gebouwd aanzienlijk armere nesten als gewaardeerd op een schaal van 1-5 (1 = nestlet niet aangeraakt, 5 = een in de buurt van perfect nest). Transgene muizen gebouwd consequent slechter nesten op 6-, 9-, en 12-maanden van leeftijd in vergelijking met hun wild type tegenhangers, en in sommige gevallen, de appswe/PS1 muizen helemaal niet om een nest uit de meegeleverde katoen te bouwen.
Uit vorig onderzoek van ons lab is gebleken dat wild type C57BL/6J-muizen significant betere nesten van katoenen vierkantjes bouwen in vergelijking met CRND8 en CRND8/E4-muizen9. Echter, de meerderheid van de experimenten met behulp van geperste katoenen pleinen lijken variabel te zijn, waarbij wild type muizen niet in staat zijn om verwachte hoge scores te tonen in vergelijking met transgene muizen die naar verwachting zeer lage scores vertonen in Nesting2, wat deels kan leiden tot een gebrek aan verschillen in geschatte parameters (d.w.z. gemiddelde verschillen) en statistische significantie. Het gebrek aan verschillen kan deels te wijten zijn aan onvoldoende veroudering van muizen of de tijd die wordt toegewezen voor het nesten. Als alternatief kan nest materiaal een extra uitdaging zijn, wat resulteert in meer variabiliteit als gevolg van de methodologische voorkeuren van onderzoekers in de hoeveelheid en het type materiaal, die zelfs kunnen communiceren met de muis stam. Robinson-Junker en collega's14 hebben bijvoorbeeld verwerkte of onverwerkte bedding materiaal van verschillende groottes (d.w.z. kleine of grote vlokken) geleverd aan C3H/hencrl-muizen en Balb/canncrl-muizen, die vaak worden waargenomen, respectievelijk als slecht en sterk nest Builders. Bij het geleverde onbewerkt beddengoed, C3H muizen gebouwd minder complex, maar vergelijkbaar in kwaliteit nesten in vergelijking met die van BALB/c muizen.  Evenzo vergeleek Martin en collega's15 de nest complexiteit van verschillende broed materialen die werden gegeven aan herten muizen, een verre verwant van de Mus musculus -soorten die verschillende evolutionaire verschillen hebben (d.w.z. meer kans om te graven in bomen en onderborstel en zijn actiever in gevangenschap), maar krijgen soortgelijke veehouderij zorg als gewone laboratorium muizen en bouwen nesten uit alle beschikbare zachte, vezelachtige materiaal16,17,18.  Vrouwtjes en fokkers met pups in de huis kooi gebouwd complexere nesten dan mannetjes, en de auteurs suggereren dat deze gedragsverschillen kunnen worden veroorzaakt door de geassocieerde veranderingen in progesteron concentraties in herten muizen15. Nog belangrijker, muizen gebouwd complexere nesten samengesteld uit bruin papier, gevolgd door katoen pleinen en katoen cilinders, en de minst complexe nesten werden opgebouwd uit wit papier en verspreide mini-katoen pleinen.
Ondanks de groeiende populariteit van nesten worden overwegingen met betrekking tot wetenschappelijk geldige, kosteneffectieve en tijdgevoelige praktijken minimaal besproken. Gezien de bovengenoemde methodologische en economische uitdagingen onderzoekt dit protocol het nut van verschillende nest materialen-katoenen vierkantjes, papier wendingen, versnipperd papier en verwerkte beddengoed-in nestgedrag. Concreet hebben we alle nest materialen geleverd aan zowel verouderde C57BL/6J wild type controles als de ziekte van Alzheimer APOE E4 muizen om potentiële genotype te onderzoeken door materiaal interacties in de nest kwaliteit. Daarnaast probeerde het experiment de betrouwbaarheid te beoordelen van nesten die uit verschillende materialen zijn opgebouwd. Dit protocol demonstreert de superioriteit van één nest materiaal in dit monster – versnipperd papier – in termen van de nest-kwaliteit en de scorer-overeenkomst, met de bedoeling de geldigheid en betrouwbaarheid van de nest assay te verbeteren.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:811px;" width="811">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Corncob bedding</td>
			<td style="width:127px;">Envigo</td>
			<td style="width:119px;">7092</td>
			<td style="width:349px;">1/8 in bedding for cotton squares, shredded paper, and paper twist trials</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cotton Squares</td>
			<td style="width:127px;">Envigo</td>
			<td style="width:119px;">Iso-Blox</td>
			<td style="width:349px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Diamond Twists</td>
			<td style="width:127px;">Envigo</td>
			<td style="width:119px;">7979C.CS</td>
			<td style="width:349px;">Paper twists used in protocol</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Mouse - APOE4 e4</td>
			<td style="width:127px;">Jackson Laboratories</td>
			<td style="width:119px;">#012307</td>
			<td style="width:349px;">Homozygous APEO4 e4 mouse bred with hemizyous J20 mouse</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Mouse - C57BL/6J</td>
			<td style="width:127px;">Jackson Laboratories</td>
			<td style="width:119px;">#000664</td>
			<td style="width:349px;">Wildtype mouse for controls</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Mouse - J20</td>
			<td style="width:127px;">Jackson Laboratories</td>
			<td style="width:119px;">#006293</td>
			<td style="width:349px;">Hemizygous mouse bred with the homozygous APOE e4 mouse to generate cross</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Rstudio</td>
			<td style="width:127px;">R Core Team</td>
			<td style="width:119px;">V1.1.463</td>
			<td style="width:349px;">Run with R version 3.5.3 (2019-03-11) -- &#34;Great Truth&#34;. Note: additional R Packages are included in provided code and can be installed from CRAN</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Soft Cob</td>
			<td style="width:127px;">Envigo</td>
			<td style="width:119px;">7087C</td>
			<td style="width:349px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

nest building behavior as an early indicator of behavioral deficits in mice

Nest Building is een aangeboren gedrag bij mannelijke en vrouwelijke knaagdieren, zelfs wanneer het wordt verhoogd in laboratorium instellingen. Als zodanig, veel onderzoekers bieden knaagdieren synthetische en/of natuurlijke materialen (zoals bindgaren, weefsel, katoen, papier, en hooi) als een meter van hun algehele welzijn en als een aanvullende beoordeling om te voorspellen van de mogelijke afname van de cognitie. Wijzigingen in het geneste gedrag, zoals het niet maken van een nest, duiden meestal op een verandering in de gezondheid of het welzijn. Daarnaast is het geneste gedrag gevoelig voor veel milieu-en fysiologische uitdagingen, evenals veel genetische mutaties onderliggende pathologische ziektetoestanden. Het volgende protocol beschrijft een paradigma gedragsmodel dat het gebruik van vier typen nest materiaal onderzoekt. Daarnaast maakt het protocol gebruik van intraclass correlaties om aan te tonen dat de betrouwbaarheid van de Inter-Rater hoger is wanneer nesten zijn opgebouwd uit versnipperd papier in vergelijking met andere veelgebruikte nest materialen zoals katoenen vierkantjes, papier wendingen en zachte COB Beddengoed. De gekozen methodologie en statistische overwegingen (d.w.z. intraclass correlatie) voor deze test kunnen van belang zijn voor degenen die experimenten uitvoeren om de kwaliteit van het leven van muizen te beoordelen.

De resultaten van de vier verschillende nest materialen die worden geleverd aan wild type en APOE E4-muizen worden als volgt uitgelegd. Op basis van bestaande criteria toonde het ICC een sterke overeenkomst tussen alle drie de programmeurs voor alle vier de nest materialen (versnipperd papier ICC = 0,94; vierkant ICC = 0,91; bedding ICC = 0,87; twist ICC = 0,87); Daarom werden de drie scores samen gemiddeld om een enkele score voor elk geleverd materiaal te creëren. Een 2 x 4 gemengde ANOVA leverde een significant belangrijk effect op van genotype, F(1, 19) = 31,30, p < 0,01, ηp2 = 0,62. In alle vier de geleverde materialen scoorde wild type muizen hoger op de nest-kwaliteit (3,18 ± 0,20) in vergelijking met APOE E4-muizen (1,98 ± 0,16). Daarnaast leverde de gemengde ANOVA een significant belangrijk effect op van materiaal, F(3, 57) = 57,48, p < 0,01, ηp2 = 0,75. Uit paarsgewijze vergelijkingen met Bonferroni-correctie bleek dat het geraspte papier (4,11 ± 0,20) significant hoger was (p < 0,05) in kwaliteit dan het vierkant (1,95 ± 0,21), beddengoed (2,21 ± 0,21), of twist (1,94 ± 0,20) materialen, zonder verschillen tussen de vierkante, strooisel en twist materialen (alle p > 0,99). Er was geen significante interactie tussen genotype en materiaal. Gegevens worden weergegeven in Figuur 3.
Andere experimenten uit ons laboratorium hebben opgeleverd vergelijkbare resultaten in vroege onset modellen van de ziekte van Alzheimer. Bijvoorbeeld, zoals aangetoond in Figuur 4, 5,5-maand-oude P301L rTg4510 (htau) muizen gebouwd significant slechter nesten uit versnipperd papier in vergelijking met hun leeftijd overeenkomende wild type tegenhangers31. Evenzo, Dual J20 (hAPP)/htau en single htau muizen bouwden slechtere nesten uit versnipperd papier in vergelijking met hun wild type en CAMKIIa-promotor alleen tegenhangers, zowel op 3,5-als 7 maanden oud32 (gegevens niet weergegeven).
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60139/60139fig3v2.jpg"> Figuur 3: nominale kwaliteit van nesten gemaakt van verschillende materialen geleverd aan wild type en ApoE E4 muizen. Een belangrijke invloed van genotype (* p < 0,01) toonde aan dat wild type muizen consequent betere nesten bouwden, gemaakt van het geraspte papier, geperste katoenen pleinen, papieren twist en zachte COB-bedding in vergelijking met APOE E4-muizen. Het belangrijkste effect van materiaal (* * p < 0,01) toonde ook aan dat nesten gemaakt van het geraspte papier hoger werden beoordeeld in kwaliteit in vergelijking met de drie andere materialen. Het versnipperde papier had de hoogste betrouwbaarheidsgraad van de Inter-Rater, zoals beoordeeld door ICC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60139/60139fig3v2large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60139/60139fig4.jpg"> Figuur 4: versnipperde papier nesten gebouwd door wild type en htau muizen, aan of uit zink water. a) representatievenesten gebouwd door 5,5-maand-oude wild type-en htau-muizen, op controle (kraan) water of water aangevuld met 10 delen per miljoen zink (een biometal betrokken bij de ziekte van Alzheimer). Nesten werden gescoord op de 1-5 schaal met behulp van de gespecificeerde criteria. Van links naar rechts: wild type + zink water (4.54 ± 0.52); wild type + controle water (4.15 ± 0,80); htau + controle water (3,08 ± 0,64); htau + zink water (2.46 ± 0.97). B) een genotype *-water interactie heeft aangetoond dat htau-muizen op zink water significant slechter zijn gemaakt dan de andere groepen (*); Bovendien toonden eenvoudige effecten aan dat htau muizen op zink water slechter nesten dan htau muizen op controle water. Wild type muizen op controle water en zink water-gebouwde nesten van hogere, en vergelijkbare kwaliteit, in vergelijking met hun tegenhangers htau. Herdrukt uit Journal van de ziekte van Alzheimer, vol 64, Craven, KM, kochen WR, Hernandez CM, Flinn JM, zink Vererveert tau pathologie in een tau muis model, 671-630, copyright (2018), met toestemming van IOS druk op31. De publicatie is beschikbaar op IOS Press via http://dx.doi.org/10.3233/JAD-180151. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60139/60139fig4large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Supplementary File 1" src="/files/ftp_upload/60139/60139supfig1.jpg"> Aanvullend bestand 1: Aanvullend Codeer bestand-nesten. R <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60139/suppfile1.R" target="_blank">Klik hier om dit bestand te downloaden.</a>
<img alt="Supplementary File 2" src="/files/ftp_upload/60139/60139supfig2.jpg"> Aanvullend bestand 2: AD Study nesten scores. CSV <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60139/suppfile2.csv" target="_blank">Klik hier om dit bestand te downloaden.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Nest Building Behavior as an Early Indicator of Behavioral Deficits in Mice at JoVE.com

Nest Building Behavior as an Early Indicator of Behavioral Deficits in Mice

Hier presenteren we een protocol om nest Building behavior in muizen te kwantificeren, waarvan bekend is dat ze zijn aangetast door verschillende neurologische aandoeningen en ziekten. Dit Protocol onderzoekt het nut van vier materialen en biedt de mogelijkheid om de Rater-overeenkomst te kwantificeren bij het scoren, waardoor de geldigheid en betrouwbaarheid van de test worden verbeterd.

Nest Building Behavior als een vroege indicator van gedrags tekorten bij muizen

Nest building is an innate behavior in male and female rodents, even when raised in laboratory settings. As such, many researchers provide rodents ...

Nestgedrag is een nuttige manier om activiteiten van het dagelijks leven in wilde en transgene muizen te beoordelen. Het is vooral handig bij het documenteren van cognitieve achteruitgang in neurodegeneratie over de levensduur. Deze techniek is een economische eenvoudige en elegante beoordeling van de dagelijkse levende activiteiten in muizen.Het kan ook worden uitgevoerd in een korte periode van tijd met minimale training. In ons laboratorium raden we versnipperd papier aan, omdat papier consistentere resultaten oplevert. Pilot studies kunnen echter worden uitgevoerd om te bepalen welk materiaal het beste past bij uw doelen en uw budget.In een aparte testruimte, stel de omgevingsomstandigheden, zodat ze consistent zijn in proeven en zijn identiek aan de behuizing kamer, en bieden voedsel, en water aan de kooien addlibitum. Wijs elke muis een willekeurig identificatienummer of een willekeurige letter toe. En neem de originele dier-ID en andere noodzakelijke identificatie in een kolonie record om ervoor te zorgen dat de assistenten en veeteelt personeel blind blijven voor de voorwaarden.Bestel willekeurig de kooiplaatsing in de testruimte, zodat de wildtype en transgene muizen niet ten onrechte worden gescheiden. En bedek de bodem van elke kooi met 100 gram droog gewicht van maïskolf beddengoed voor het vierkant, twist, en versnipperd papier proeven. En 100 gram zachte kolf beddengoed voor de zachte kolf proeven.Dan, net voor de invoering van een muis aan een kooi, plaats een enkele geperste katoenen vierkant, een enkele papieren twist, geen extra materiaal toegevoegd aan de zachte kolf beddengoed, of 2,5 gram schoon versnipperd wit printer papier gesneden in vijf tot zeven centimeter strips. Op hetzelfde moment van de dag, aan het begin van de lichtcyclus, breng de thuiskooi met de muizen in de testruimte. En breng elke muis in zijn toegewezen nestkooi met het materiaal al in de kooi.Wanneer alle muizen zijn geplaatst, breng de kooien terug naar de woonkamer en laat de muizen de proef 24 uur ongestoord voltooien. Verwijder aan het einde van de proef voorzichtig het deksel van elke kooi. En wanneer elke muis van het nest is afgestapt, fotografeer dan elk nest dat de toegewezen ID op de foto vastlegt en het uiterlijk van materialen buiten de kooi minimaliseert.Wanneer elk nest is gefotografeerd, breng elke muis voorzichtig over in individuele tijdelijke kooien. En begeleid het beddengoed en eventuele nestmaterialen uit elke kooi. Vervang vervolgens het beddengoed, zorg voor het volgende nestmateriaal in de reeks.En breng de muis terug naar de nestkast. Wanneer alle proeven zijn voltooid, terug de muizen naar hun huis kooien en observeren van de muizen voor eventuele agressief gedrag. Om de betrouwbaarheid van de interrede te behouden, worden voor elk nestmateriaal basislijnafbeeldingen verstrekt aan ten minste twee personen die blind zijn voor de studie.En bieden een reeks van monster nesten om de scorers vertrouwd te maken met elk type materiaal. Bij het scoren van de nesten, een score van een moet worden toegewezen wanneer de versnipperd papier of kleine vierkantjes blijven verspreid over de kooi, of het katoenen vierkant of twist blijft onaangeroerd. Een score van twee wordt toegekend wanneer een deel van het materiaal in een nest is geconstrueerd, maar meer dan 50% van het materiaal is niet gebruikt voor de nestconstructie.Een score van drie wordt toegekend wanneer een merkbaar nest wordt geconstrueerd, maar verschillende stukken zijn nog steeds verspreid. Een score van vier wordt toegekend wanneer bijna al het materiaal wordt gebruikt voor het nest, maar een paar stukken materiaal blijven verspreid of zijn in de buurt van het nest. Een score van vijf wordt toegekend wanneer bijna al het materiaal wordt gebruikt om een niet-identificeerbaar nest te maken.Laat de scorer een pauze nemen en opnieuw basislijn foto's om vermoeidheid en bias te voorkomen tijdens de scoring procedure als dat nodig is. Wanneer alle kooien zijn gescoord, voert u de scores in en formateert u het gegevensbestand om in een lang formaat te zijn, zodat de scores van dieren in afzonderlijke kolommen staan. In deze representatieve analyse van alle vier de geleverde materialen scoorden wildtypemuizen hoger op de nestkwaliteit in vergelijking met APOE e4-muizen.Met versnipperd papier beoordeeld aanzienlijk hoger in kwaliteit dan het vierkant, beddengoed, of draai materialen. Zonder verschillen waargenomen tussen het vierkant, beddengoed, en draai materialen. Bovendien bouwen de 5,5 maanden oude gemuteerde dieren in dit experiment met htau-muizen een nesten uit versnipperd papier dat aanzienlijk het slechtst was dan die welke door hun leeftijd waren gemaakt, overeenkomend met wildtype tegenhangers.Scores moeten blind blijven voor de experimentele omstandigheden en de scorecriteria bekijken. Met de conclusies die goed en geldig moeten zijn, moeten ook de inter- en intra-raterreabiliteiten worden beoordeeld. Graven en Circadian wheel running zijn twee andere gemeenschappelijke manieren van de beoordeling van activiteiten van het dagelijks leven.En ze kunnen dienen om het nestgedrag te complimenteren. Nesting kan worden gebruikt als een bijkomende beoordeling om mogelijke daling van cognitie te voorspellen, het verbreden van de adem van gedragsbeoordelingen in combinatie met Morris water doolhof en circadiane wiel lopen.

Research

JoVE Journal

Behavior

The Crossmodal Congruency Task as a Means to Obtain an Objective Behavioral Measure in the Rubber Hand Illusion Paradigm

De crossmodaal Congruentie Taak als een middel om een ​​doelstelling Behavioral Meet verkrijgen in de Rubber Hand Illusion Paradigm

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden ...

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Marmer begraven en Nestlet verscheuren als Tests van Repetitive, dwangmatig-achtig gedrag in Muizen

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a ...

Nest Building as an Indicator of Health and Welfare in Laboratory Mice

The minimization and alleviation of  suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this  negative experience one must be able to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Een procedure om-Context geïnduceerde Vernieuwing Observeer van Pavlov-geconditioneerde Alcohol-zoekend gedrag bij ratten

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior

De Gedwongen Swim Test als een model van Depressieve-achtig gedrag

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like ...

Vagus Nerve Stimulation as a Tool to Induce Plasticity in Pathways Relevant for Extinction Learning

Nervus Vagus Stimulatie als een Tool om plasticiteit te induceren in Pathways Relevant voor Extinction Learning

Extinction describes the process of attenuating behavioral responses to neutral stimuli when they no longer provide the reinforcement that has been ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

De knaagdieren Psychomotorische Waakzaamheid Test (rPVT): Een methode voor het beoordelen van Neurobehavioral bij ratten en muizen

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Behavioral Disturbances: An Innovative Approach to Monitor the Modulatory Effects of a Nutraceutical Diet

Gedragsstoornissen: een innovatieve benadering van de modulerende effecten van een Nutraceutical Diet Monitor

In dogs, diets are often used to modulate behavioral disturbances related to chronic anxiety and stress caused by intense and restless activity. However, ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Opsporen van gedrags tekorten in ratten na traumatisch hersenletsel

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

An Objective and Child-friendly Assessment of Arm Function by Using a 3-D Sensor

Een objectieve en kindvriendelijke beoordeling van Arm functie met behulp van een 3D-Sensor

Progressive and irreversible muscle atrophy characterizes Spinal Muscular Atrophy (SMA) and other similar muscle disorder diseases. Objective assessment ...