Name: isolation of specific neuron populations from roundworm caenorhabditis elegans
Uploaded: 2019-08-06T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Nous remercions la Dre Jennifer Fox et les membres du laboratoire Khalimonchuk pour leurs commentaires perspicaces. Nous reconnaissons le soutien des National Institutes of Health (R01 GM108975 à O.K. et T32 GM107001-01A1 à E.M.G.).

1. Préparation et collecte de vers âgés pour l'isolement cellulaire
REMARQUE: Expliqué ci-dessous est l'isolement des neurones cholinergiques de la souche transgénique unc-17::GFP (OH13083) obtenu à partir du Caenorhabditis Genetics Center (CGC) dépôt de souches à l'Université du Minnesota. Il est impératif de maintenir des conditions stériles pour prévenir la contamination par les champignons ou les bactéries.
<ol><li>Préparer et synchroniser les vers par la...

<ol>
	<li>Sulston, J. E., Schierenberg, E., White, J. G., Thomson, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+embryonic+cell+lineage+of+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.">The embryonic cell lineage of the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Developmental Biology. 100, 64-119 (1983).</li><li>White, J. G., Southgate, E., Thomson, J. N., Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+of+the+nervous+system+of+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.">The structure of the nervous system of the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society B. 314, 1-340 (1986).</li><li>Zeng, H., Sanes, J. 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M., Petrova, K., Benedetti, C., Yang, Y., Ron, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ClpP+mediates+activation+of+a+mitochondrial+unfolded+protein+response+in+C.+elegans.">ClpP mediates activation of a mitochondrial unfolded protein response in C. elegans.</a> Developmental Cell. 13, 467-480 (2007).</li><li>Walter, P., Ron, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+unfolded+protein+response:+from+stress+pathway+to+homeostatic+regulation.">The unfolded protein response: from stress pathway to homeostatic regulation.</a> Science. 334, 1081-1086 (2011).</li><li>Chen, C., Chen, Y., Jiang, H., Chen, C., Pan, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuron+aging:+learning+from+C.+elegans.">Neuron aging: learning from C. elegans.</a> Journal of Molecular Signal. 8 (14), 1-10 (2013).</li><li>Germany, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+AAA-ATPase+Afg1+preserves+mitochondrial+fidelity+and+cellular+health+by+maintaining+mitochondrial+matrix+proteostasis.">The AAA-ATPase Afg1 preserves mitochondrial fidelity and cellular health by maintaining mitochondrial matrix proteostasis.</a> Journal of Cell Science. 131, jcs219956 (2018).</li><li>Zhang, S., Banerjee, D., Kuhn, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+larval+cells+from+C.+elegans.">Isolation and culture of larval cells from C. elegans.</a> PLOS One. 6 (4), e19505 (2011).</li><li>Morley, J. F., Morimoto, R. 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Le ver rond C. elegans est un modèle bien établi et puissant pour étudier la santé neuronale et la maladie2. Avec de nombreux outils génétiques pour manipuler ces animaux et une quantité gérable de différents types de neurones, beaucoup de données peuvent être recueillies avec une quantité relativement faible de matériel. Ici, nous dénoncons une méthode optimisée pour isoler les neurones distincts des animaux entiers. En perturbant les protéines cuticules externes du ver,...

Au cours des dernières décennies, l'organisme modèle métazoaire Caenorhabditis elegans a été un atout énorme dans l'étude des neurones, des circuits neuronaux et de son rôle dans les réponses physiologiques et comportementales, et les neurodégénératifs associés au vieillissement Maladies. Une caractéristique unique de C. elegans est que les animaux sont transparents, permettant à la lignée de toutes les cellules somatiques adultes d'être cartographié1. C. elegans abrite également une quantité gérable de neurones, conduisant à la morphologie et la connectivité du système nerveux étant bien compris2. La lignée cellulaire invariante, la courte durée de vie et l'abondance d'outils génétiques à haut débit disponibles pour C. elegans en font un organisme modèle idéal pour l'étude du vieillissement au sein de différentes populations neuronales.
Le vieillissement des neurones et des troubles neurodégénératifs est complexe, et chaque trouble a des signatures pathologiques uniques qui lui sont associées. Cependant, pour beaucoup de ces désordres, tels que la maladie de Parkinson et la maladie d'Alzheimer, une caractéristique commune est la charge progressive des protéines mal repliées3,4,5. Dans ces deux maladies, les protéines se dissemblent et s'agrégent à l'intérieur de la cellule pour causer une toxicité, conduisant finalement à la mort cellulaire4,5. Pour le vieillissement approprié des neurones, l'homéostasie des mitochondries, plus particulièrement l'homéostasie protéique, est importante, car les perturbations et la dyshomeostasie peuvent mener à la neurodégénérescence6,7,8. Les cellules sont équipées de divers mécanismes pour maintenir l'homéostasie des protéines, l'un étant la réponse des protéines dépliée (UPR) - une voie classique où les signaux du réticulum endoplasmique (ER) activent des cascades de signaux intracellulaires, conduisant à une transcription réponse9. Semblable à cette ERUPR, métazoaires montrent une réponse similaire à la perte de l'homéostasie de protéine mitochondriale, le soi-disant mitochondrial UPR (UPRmt)7,8. C. elegans semble être l'organisme le plus basal à avoir une voie confirmée et bien définie UPRmt 7.
La fonction/dysfonctionnement de populations neuronales spécifiques au sein d'un réseau plus vaste peut être difficile à évaluer en raison de leur connectivité intrinsèque et de leur complexité3. Cependant, il est souvent nécessaire d'étudier des populations neuronales distinctes en raison de maladies spécifiques au type cellulaire avec des pathologies complexes, telles que celles associées à l'homéostasie des protéines cellulaires altérées. Chez C. elegans, des populations neuronales spécifiques peuvent être manipulées génétiquement permettant une observation facile in vivo. Le système nerveux de C. elegans se compose principalement de neurones, avec un petit pourcentage de cellules gliales. Chez les vers hermaphrodite adultes, il y a environ 302 neurones, subdivisés en plus de 100 classes différentes2,10. Les neurones tels que les neurones cholinergiques prédominent dans les jonctions neuromusculaires, tandis que les neurones dopaminergiques sont principalement impliqués dans la sensation10,11. Comme l'activité motrice et les capacités sensorielles diminuent avec l'âge, il est important de détailler les idées mécanistes sur les défauts dans ces neurones individuels11,12. En tant que tel, il est nécessaire d'avoir une méthode simple et robuste pour isoler les cellules intactes d'intérêt pour les études ex vivo ultérieures.
Ici, nous décrivons une méthode efficace optimisée pour l'isolement rapide des cellules neuronales spécifiques exprimant la protéine fluorescente verte (GFP) de C. elegans. Cette méthode d'isolement peut être pratiquée sur les vers larvaires, juvéniles ou adultes. L'isolement des cellules des vers larvaires a été précédemment édité par Zhang et autres13 et ne sera pas discuté ici. Une note importante ici est que tous les vers doivent être au même stade de vie pour empêcher la surdigestion de l'animal ou la contamination des animaux à différents stades de la vie. Grâce à la perturbation enzymatique et mécanique de la cuticule nématode, un exosquelette riche en collagène et d'autres protéines structurelles, une grande variété de cellules peut être isolée13,14. Les cellules peuvent ensuite être isolées par cytométrie du débit ou anticorps étiquetés perles magnétiques. Typiquement, l'ARN est isolé par l'intermédiaire d'une méthode d'isothiocyanate de phénol et de guanidine pour assurer l'enrichissement de la population cellulaire désirée15. Avec beaucoup de soin ces cellules isolées peuvent être maintenues dans un flacon de culture ou un plat multi-bien. Cette méthode représente un outil unique et puissant dans l'étude de neurones spécifiques et a la capacité d'isoler les cellules vivantes et fonctionnelles pour la culture ultérieure.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>6-well plate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-556-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar, Molecular Biology Grade</td>
			<td>VWR</td>
			<td>A0930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>496189</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Contess Automated Cell Counter</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Z359629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DTT</td>
			<td>USBiological</td>
			<td>D8070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Omega Scientific</td>
			<td>FB-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorodeoxyuridine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F0503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH1133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>O395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>USBiological</td>
			<td>P5110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimberly-Clark Professionals</td>
			<td>7552</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s L-15 Medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21083027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M8266</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>USBiological</td>
			<td>M2090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4&#183;7H2O</td>
			<td>USBiological</td>
			<td>S5199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>VWR</td>
			<td>X190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOCl (Bleach)</td>
			<td>Clorox</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>O583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomicen</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone Y</td>
			<td>USBiological</td>
			<td>P3306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pronase E</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7433</td>
			<td>protease mixture from Streptomyces griseus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>O227</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope</td>
			<td>Tritech Research</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>USBiological</td>
			<td>S8010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript IV One-Step synthesis kit</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12594025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15596026</td>
			<td>phenol and guanidine isothiocyanate solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue Stain</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>T10Z82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-GFP magnetic beads</td>
			<td>MBL</td>
			<td>D153-11</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of specific neuron populations from roundworm caenorhabditis elegans

Pendant le processus de vieillissement, beaucoup de cellules accumulent des niveaux élevés de dommages menant au dysfonctionnement cellulaire, qui sous-tend beaucoup de conditions gériatriques et pathologiques. Les neurones post-mitotiques représentent un type de cellule majeur affecté par le vieillissement. Bien que de multiples modèles mammifères du vieillissement neuronal existent, ils sont difficiles et coûteux à établir. Le ver rond Caenorhabditis elegans est un modèle puissant pour étudier le vieillissement neuronal, car ces animaux ont une courte durée de vie, une boîte à outils génétique robuste disponible, et un système nerveux bien catalogué. La méthode présentée ici permet un isolement sans faille de cellules spécifiques basées sur l'expression d'une protéine fluorescente verte transgénique (GFP). Les lignées animales transgéniques exprimant le PFG sous des promoteurs distincts, spécifiques au type cellulaire, sont digérées pour enlever la cuticule externe et délicatement perturbées mécaniquement pour produire de la boue contenant divers types de cellules. Les cellules d'intérêt sont ensuite séparées des cellules non ciblées par le tri des cellules activées par la fluorescence, ou par des perles magnétiques couplées à l'anti-GFP. Les cellules isolées peuvent ensuite être cultivées pour un temps limité ou immédiatement utilisées pour des analyses ex vivo spécifiques à des cellules telles que l'analyse transcriptionnelle par PCR quantitatif en temps réel. Ainsi, ce protocole permet une analyse rapide et robuste des réponses spécifiques aux cellules au sein de différentes populations neuronales chez C. elegans.

Le protocole décrit ici permet l'isolement spécifique des neurones cholinergiques unc-17::GFP-positifs du ver rond C. elegans pour des études ex vivo ultérieures telles que le profilage d'expression génique de type de cellule-spécifique et la culture à court terme pour les mesures d'électrophysiologie de patch-clamp.
La figure 1 montre des neurones cholinergiques non-17...

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Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

Isolement des populations neuronales spécifiques de Roundworm Caenorhabditis elegans

Ici, nous présentons un protocole pour l'isolement simple des groupes spécifiques des cellules neuronales vivantes exprimant la protéine fluorescente verte des lignes transgéniques de Caenorhabditis elegans. Cette méthode permet une variété d'études ex vivo axées sur des neurones spécifiques et a la capacité d'isoler les cellules pour la culture à court terme.

During the aging process, many cells accumulate high levels of damage leading to cellular dysfunction, which underlies many geriatric and pathological ...

Ce protocole permet l’isolement sans faille, la culture et l’interrogation des réponses transcriptionnelles dans une lignée cellulaire spécifique de C.elegans. Le principal avantage de ce protocole est le niveau élevé d’adaptabilité aux différents stades de vie des vers ou des types de cellules spécifiques à isoler. La démonstration de la procédure sera moi-même et Nataliya Zahayko, un technicien de notre laboratoire.Après avoir recueilli les animaux, centrifugez-les à 1600 fois g pendant cinq minutes. Enlevez tous les supernatants et réutilisez les vers en un millilitre de médias M9. Transférer la suspension dans un tube de microcentrifugeuse de 1,5 millilitre.Centrifugeuse à 1600 fois g pendant cinq minutes pour pelleter les vers. Ajouter ensuite 200 microlitres de tampon SDS-DTT et incuber à température ambiante pendant cinq minutes. Les vers devraient maintenant sembler froissés le long du corps s’ils sont vus au microscope léger.Ensuite, ajoutez 800 microlitres de tampon d’isolement glacé et mélangez en faisant glisser doucement le tube. Centrifugeuse à 13 000 fois g et à quatre degrés Celsius pendant une minute pour pelleter les vers. Retirer le surnatant et laver avec un millilitre de tampon d’isolement.Répétez la centrifugation et lavez le processus un total de cinq fois, en vous assurant d’enlever soigneusement le tampon d’isolement à chaque fois. Après cela, ajouter 100 microlitres de mélange de protéase de Streptomyces griseus, dissous dans le tampon d’isolement, à la pastille. Incuber à température ambiante pendant 10 à 15 minutes, en s’assurant d’appliquer une perturbation mécanique en évadant de haut en bas 60 à 70 fois avec une pointe de micropipette de 200 microlitres contre le fond du tube.Pour déterminer le stade de la digestion, retirez un à cinq microlitres du mélange de digestion, déposez-le sur une lame de verre et inspectez-le à l’aide d’un microscope à culture tissulaire. Après cinq à sept minutes, les fragments de ver devraient avoir une cuticule visiblement réduite et une boue de cellules sera facilement visible. Arrêtez la réaction en ajoutant 900 microlitres de L-15 moyen de Leibovitz disponible dans le commerce, complétés par 10 % de FBS et de pénicilline-streptomycine.Centrifugeuse à 10 000 fois g et à quatre degrés Celsius pendant cinq minutes pour granuler des fragments et des cellules isolés. Lavez les cellules granulées deux fois plus avec du l-15 froid complété par les médias à l’aide d’un millilitre de médias par lavage. Resuspendez les cellules granulées dans un millilitre de L-15 médias complétés, et laisser sur la glace pendant 30 minutes.Ensuite, prenez la couche supérieure, qui est d’environ 700 à 800 microlitres, et le transférer dans un tube de microcentrifugeuse. Utilisez un compteur cellulaire automatisé ou un hémacytomètre pour mesurer la densité cellulaire de 10 à 25 microlitres de cellules isolées. Cellules centrifugeuses de la suspension cellulaire isolée à 10 000 fois g et à quatre degrés Celsius pendant cinq minutes.Jetez le supernatant et resuspendez les cellules granulées dans le milieu complété L-15 à une densité cellulaire d’au plus six millions de cellules par millilitre pour éviter de surcharger le cytomètre d’écoulement. Ensuite, trier les cellules par expression GFP-positive à l’aide d’un cytomètre d’écoulement capable de trier les échantillons. Les cellules gfp-négatives peuvent être utilisées comme un contrôle pour l’analyse non spécifique au type de cellule.Après cela, plaquez les cellules isolées dans les puits d’une plaque stérile de six puits, placez la plaque dans un récipient en plastique, ajoutez un lingette humide ou du papier de soie mou pour ajouter de l’humidité aux cellules, et incubez à 20 degrés Celsius. Cellules centrifugeuses de la suspension cellulaire isolée dans un tube de microcentrifugeuse sans RNase de 1,5 millilitre à 10 000 fois g et à quatre degrés Celsius pendant cinq minutes. À l’aide d’une micropipette, retirer le supernatant et ajouter 100 microlitres de M9 moyen pour laver le milieu complété L-15.Ensuite, centrifugez les cellules à 10 000 fois g et à quatre degrés Celsius pendant cinq minutes et retirez le supernatant. Répétez ce processus de lavage et de centrifugation trois fois au total pour vous assurer que tous les supports sont enlevés, en vous assurant d’enlever soigneusement le supernatant à chaque fois. Ensuite, ajouter un millilitre de phénol et guanidine solution isothiocyanate aux cellules et pipette la suspension de haut en bas avec soin.Incuber le mélange à température ambiante pendant cinq minutes. Après cela, ajouter 250 microlitres de chloroforme et inverser doucement le tube 15 à 20 fois. Incuber à température ambiante pendant cinq minutes.Centrifugeuse à 10 000 fois g et à 25 degrés Celsius pendant cinq minutes. Utilisez une micropipette pour enlever soigneusement autant de la couche aqueuse supérieure que possible, en vous assurant de ne pas déranger les couches organiques inférieures. Transférer la couche inférieure dans un nouveau tube de microcentrifugeuse sans RNase de 1,5 millilitre.Au nouveau tube, ajouter 500 microlitres d’isopropanol et mélanger en inversant le tube. Incuber cette solution à température ambiante pendant cinq minutes. Puis centrifugez le tube à 14 000 fois g et à 25 degrés Celsius pendant 20 minutes.Placez les échantillons sur la glace et utilisez une micropipette pour enlever autant d’isopropanol que possible. Ajouter délicatement un millilitre de 70 % d’éthanol dans de l’eau double distillée sans RNase au tube en l’appliquant sur le côté du tube. Centrifugeuse à 10 000 fois g et à 25 degrés Celsius pendant cinq minutes.Retirer la majeure partie de l’éthanol et laisser sécher l’air du tube sur la glace pendant trois à cinq minutes. Après cela, ajouter 15 à 20 microlitres d’eau double distillée sans RNase. Utilisez un spectrophotomètre à 260 nanomètres pour mesurer la concentration et la pureté de l’ARN.Dans cette étude, les neurones cholinergiques unc-17:GFP-positifs sont extraits et isolés du ver rond C.elegans pour des études ex vivo ultérieures. Le gène unc-17 est exprimé dans tout le corps de C.elegans, et les codes pour un transporteur vésiculaire de transmembrane d’acétylcholine. L’expression de ce gène peut être observée dans la tête, le corps moyen, et les neurones de queue, et les projections de neurones.Des micrographes représentatifs de fluorescence des neurones unc-17:GFP-positifs après isolement, aussi bien qu’un contrôle négatif respectif des animaux sauvages non modifiés de type N2, sont montrés ici. Les cellules isolées peuvent rester en vie jusqu’à trois jours lorsqu’elles sont complétées par le L-15 moyen de Leibovitz et 10% FBS. Des données représentatives du qPCR provenant de neurones cholinergiques exprimant le GFP, ainsi que de cellules musculaires exprimant le GFP, sont présentées ici.Après avoir trié avec succès les cellules, l’ARN est isolé par l’intermédiaire d’une méthode d’isothiocyanate de phénol et de guanidine, après quoi cDNA a été produit à l’aide d’un kit de synthèse. L’expression des gènes neuronaux cholinergiques spécifiques, tph-1, hydroxylase de tryptophane, et bns-1, un transporteur synaptique de vésicule, est élevée dans les cellules isolées unc-17:GFP. Cependant, cette expression n’est pas présente dans les cellules isolées myo-3:GFP.L’inverse est vrai avec l’expression de la transcription de la chaîne myosine-lourde spécifique au muscle du myo-2, car l’expression de ce gène est limitée aux cellules musculaires isolées, mais pas aux cellules cholinergiques isolées. Il est important d’incuber complètement les vers. Cependant, l’incubation prolongée de la cuticule vermifuge peut entraîner la mort du ver ou un stress supplémentaire pour l’animal.Après l’isolement, les cellules peuvent être cultivés pendant un certain temps, ou utilisées pour l’isolement de l’ARN et l’analyse qRT-PCR. Les neurones cultivés peuvent être analysés plus avant par des mesures d’électrophoresis de pince de correction. Cette technique pourrait faciliter l’analyse ex vivo de groupes spécifiques de cellules, contribuant ainsi à améliorer notre compréhension des réponses spécifiques aux cellules dans le contexte d’organismes multicellulaires à différents stades de son cycle de vie.Comme des produits chimiques tels que le SDS et la TNT sont utilisés au cours de cette expérience, les procédures générales de sécurité en laboratoire devraient être suivies lors de la fabrication et de l’utilisation de tampons.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

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Biologie du développement

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Studying Oxidative Stress Caused by the Mitis Group Streptococci in Caenorhabditis elegans

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Étudier le Stress oxydatif causé par les streptocoques de groupe Mitis chez Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans (C. elegans), a free-living nematode, has emerged as an attractive model to study host-pathogen interactions. The presented ...

Isotropic Light-Sheet Microscopy and Automated Cell Lineage Analyses to Catalogue Caenorhabditis elegans Embryogenesis with Subcellular Resolution

Microscopie isotrope en feuilles légères et analyse automatisée de la lignée cellulaire au catalogue Caenorhabditis elegans embryogenèse avec résolution subcellulaire

Caenorhabditis elegans (C. elegans) stands out as the only organism in which the challenge of understanding the cellular origins of an entire nervous ...

Measuring Sperm Guidance and Motility within the Caenorhabditis elegans Hermaphrodite Reproductive Tract

Measuring Sperm Guidance and Motility within the Caenorhabditis elegans Hermaphrodite Reproductive Tract

Mesure du sperme guidage et motilité dans le Caenorhabditis elegans hermaphrodite appareil de reproduction

Successful fertilization is fundamental to sexual reproduction, yet little is known about the mechanisms that guide sperm to oocytes within the female ...