Name: generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen
Uploaded: 2019-11-27T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen at JoVE.com

وكان هذا العمل مدعوما بالمنحة الاساسيه التي تلقتها من أداره التكنولوجيا الحيوية ، حكومة الهند ، إلى المعهد الوطني للمناعة في نيودلهي.

وقد تمت الموافقة علي الاجراء الموصوف أدناه من قبل لجنه الأخلاقيات الحيوانية المؤسسية للمعهد الوطني لعلم المناعة ، نيودلهي. الرقم المرجعي التسلسلي للموافقة هو IAEC # 355/14.
1-الاعداد
<ol><li>التحضير للإجراءات الجراحية كما هو موضح سابقا من قبل Das B وآخرون26.</li>
	<li>استخدام...

تطوير نموذج الحيوانية المناسبة لمؤسسه الفا هو أمر بالغ الاهميه لفهم أفضل لتولد المرض وتطور الف. كما يوفر نموذج الحيوانية المميز لمؤسسه الفا فرصه لتطوير ومحاكمه النهج العلاجية الجديدة ضد مؤسسه المؤسسة. وقد بذلت محاولات كثيره لتطوير نموذج ذي صله سريريا من الف6،...

يتم تعريف فشل الكبد الحاد (الف) من قبل الجمعية الامريكيه لدراسة امراض الكبد والتطور السريع للاصابه الكبدية الحاده دون اي علامات الضرر السابقة ويتميز بضعف شديد من الاصطناعية, الأيض, والوظائف المزيلة للسموم من الكبد1. الف يختلف عن فشل الكبد المزمن حيث يحدث الفشل نتيجة لأصابه الكبد الناجمة علي مدي فتره طويلة من الزمن ومن فشل الكبد المزمن الحاد (aclf), حيث يحدث تلف مفاجئ في الكبد نتيجة لامراض الكبد المزمنة2,3,4. العلاج الوحيد المتاح لمؤسسه الفا هو زرع الكبد التقويمي ، أو قد يحدث الموت. ونظرا لنقص المتبرعين بالكبد ، فان معدل الوفاات في المرضي الذين يعانون من المؤسسة مرتفع جدا.
ولدراسة إمكانيات النهج العلاجية البديلة ولفهم الفيزيولوجيا المرضية لمؤسسه الفا علي نحو أفضل ، هناك حاجه إلى نماذج حيوانيه يمكن ان تعكس المؤسسة التي تحدث في البشر. العديد من نماذج الحيوانية المتاحة أصلا لديها عده عيوب. اثار اسيتامينوفين (APAP) من الصعب ان تتكاثر ولكن لديها أوجه التشابه الأقرب من حيث الزمانيه, السريرية, البيوكيميائية, والمعلمات المرضية. نماذج الحيوانية المستحثة apap كثيرا ما تواجه مشاكل بسبب وجود ميتهيموغلوبينيه الناجمة عن أكسده الهيموغلوبين بواسطة apap ووسيطه5,6,7. وهناك مشكله أخرى تتمثل في عدم وجود استنساخ تنعكس في ردود الجرعات غير المتوقعة ووقت الوفاة. نماذج الحيوانية الف المنتجة باستخدام الكربون رباعي كلوريد (سي سي4) لديها الفقراء استنساخ8،9،10،11. Concavalin a (يخدع a) و ليبوبليساكاريد (lps)-التي يسببها الف نماذج الحيوانية لا تعكس النمط السريري للمرض البشري ، علي الرغم من ان لديهم مزايا في دراسة أليات الخلوية المشاركة في امراض الكبد المناعة الذاتية وفي دراسة الانتان علي التوالي12،13،14،15. المثل ، ثيواسيتاميد (التاء) يتطلب أيضا التحول الإحيائي إلى المستقلب النشط ثيواسيتاميد سولفوكسيد ويظهر الأنواع الاختلافات16،17،18،19. د-galactosamine (د-غال) تنتج بعض التغيرات البيوكيميائية والايضيه والفسيولوجية مماثله للف ولكنها ليست قادره علي التعبير عن الحالة المرضية الفا كامله20،21،22،23. وكانت هناك محاولات قليله جدا للجمع بين اثنين أو أكثر من هذه الأساليب لتطوير نموذج لمؤسسه التنمية التي يمكن ان تعكس متلازمة الفا بطريقه أفضل13. ولذلك ، هناك حاجه إلى مزيد من الدراسات لتطوير نموذج يمكن ان تعكس المعلمات المرض ، وأفضل استنساخ ، ويوفر الوقت الكافي لدراسة اثار التدخل العلاجي.
في الدراسة الحالية ، تم إنشاء نموذج بديل للفا في الفئران من خلال الجمع بين اثار استئصال الكبد الجزئي (PHx) والجرعات المنخفضة من كاشف سميه كبديه. Apap له دور راسخ في التسبب في أصابه الكبد5,24,25. وهو مسكن يستخدم علي نطاق واسع وهو سام للكبد في الجرعات العلاجية بتشكيل الأيض السامة. والمعهد هو سبب العديد من الوفاات في البلدان المتقدمة النمو. الاصابه الجسدية الناجمة عن استئصال الكبد الجزئي يبدا تفعيل العمليات المختلفة التي تنطوي علي التهاب وكذلك تجديد الكبد. حقن العامل الكبدي APAP يسبب بيئة عدائيه في الكبد, منع انتشار الخلايا الكبدية. وهذا يقلل من فتره الإجهاد علي الحيوانية ، والتي عندما يقترن مع جرعات صغيره من السمية الكبدية ، يؤدي إلى استنساخ أفضل من الاجراء. لذلك ، باستخدام هذا النموذج ، تمت دراسة تاثير توافقي لنوعين من إصابات الكبد. وقد تمت دراسة المعلمات الفسيولوجية والبيوكيميائية لتوصيف النموذج الحيواني المطور لمؤسسه الفا. وقد تاكدت القابلية الناجحة لعمليه التحقق من الصحة من خلال زرع خلايا كبد الفئران الصحية المتزامنة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetaminophen (Biocetamol)</td>
			<td>EG Pharmaceuticals</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alkaline Phosphatase Kit (DEA)</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated analyser</td>
			<td>Tulip, Alto Santracruz, India</td>
			<td>Screen Maaster 3000</td>
			<td>Biochemical analyser for liver functional test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (Povidon-Iodine Solution)</td>
			<td>Win-Medicare; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biological safety cabinet (Class I)</td>
			<td>Kartos international; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bright Field Microscope</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>LX51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefotaxime (Taxim&#174;)</td>
			<td>AlKem; India</td>
			<td></td>
			<td>cefotaxime sodium injection, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Strainer</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>CLS431752</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type I</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>17100-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Buds</td>
			<td>Pure Swabs Pvt Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape Sheet</td>
			<td>JSD Surgicals, Delhi, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX Mountant</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>6522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin Y solution, alcoholic</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>HT110132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Anesthesia System</td>
			<td>Ugo Basile; Italy</td>
			<td>211000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Himedia, India</td>
			<td>GRM077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removing cream (Veet&#174;)</td>
			<td>Reckitt Benckiser, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Solution, Mayer&#39;s</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>MHS16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>RM554</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase From Sheep Testes</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>H6254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I.V. Cannula (Plusflon)</td>
			<td>Mediplus, India</td>
			<td>Ref 1732411420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>BD; US</td>
			<td>REF 303060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (Forane&#174;)</td>
			<td>Asecia Queenborough</td>
			<td>No B506</td>
			<td>Inhalation Anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketamax&#174;)</td>
			<td>Troikaa Pharmaceuticals Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Ketamine hydrochloride IP, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam (Melonex&#174;)</td>
			<td>Intas Pharmaceuticals Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Histo-Line Laboratories, Italy</td>
			<td>MRS3500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Thread</td>
			<td>Mighty; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>GRM 3660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percoll&#174;</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-0891-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refresh Tears/Eyemist Gel</td>
			<td>Allergan India Private Limited/Sun Pharma, India</td>
			<td>P3060</td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGOT (ASAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGPT (ALAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Cryotome E Cryostat</td>
			<td>Thermo Electron Corporation; US</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade No. 22</td>
			<td>La Medcare, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Board</td>
			<td>Locally made</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical White Tape</td>
			<td>3M India; India</td>
			<td>1530-1</td>
			<td>Micropore Surgical Tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Ethicon, Johnson &#38; Johnson, India</td>
			<td>NW 5047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes (1ml, 26 G)</td>
			<td>Dispo Van; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimmer (Clipper)</td>
			<td>Philips</td>
			<td>NL9206AD-4 DRACHTEN QT9005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing Machine</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>William&#39;s E Media</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>AT125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xylaxin&#174;)</td>
			<td>Indian Immunologicals Limited</td>
			<td></td>
			<td>Sedative, Pre-Anaesthetic, Analgesic and muscle relaxant</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen

فشل الكبد الحاد (الفا) هو حاله سريريه تسببها مسببات مختلفه مما ادي إلى فقدان وظائف الأيض ، البيوكيميائية ، توليف ، ومزيل السموم من الكبد. في معظم حالات تلف الكبد التي لا رجعه فيها ، تظل عمليه زرع الكبد التقويمية هي العلاج الوحيد المتاح. ولدراسة الإمكانيات العلاجية لعلاج المؤسسة ، فان الاختبار السابق لها في نموذج حيواني لمؤسسه الفا هو أمر أساسي. في الدراسة الحالية ، تم تطوير نموذج الفا في الفئران من خلال الجمع بين 70 ٪ استئصال الكبد الجزئي (PHx) وحقن اسيتامينوفين (APAP) التي توفر نافذه علاجيه من 48 h. تمت أزاله الفصوص الجانبية الوسطي واليسرى من الكبد إلى المكوس 70 ٪ من كتله الكبد وأعطيت APAP 24 ساعة بعد جراحيا لمده 2 أيام. تم العثور علي البقاء علي قيد الحياة في الحيوانية التي يسببها الف التي انخفضت بشده. وأكد تطوير الف من المستويات المصل المتغيرة من الانزيمات الأنين الامينيه المنقولة (ALT) ، اسبارتات الامينيه ترانسفيراز (AST) ، الفوسفاتيز القلوية (ALP) ؛ التغيرات في وقت البروز (PT); وتقييم المعدل الدولي الموحد (INR). كشفت دراسة عن التعبير الجيني من قبل qPCR زيادة في مستويات التعبير من الجينات المشاركة في موت الخلايا المبرمج, التهاب, وفي تطور أصابه الكبد. وقد لوحظ انحطاط منتشر من الخلايا الكبدية وتسلل للخلايا المناعية من قبل التقييم النسيجي. وقد تاكدت قابليه هذه المؤسسة للانعكاس من خلال استعاده مستويات البقاء والمصل لل ALT و AST و ALP بعد الزرع داخل الكلية لخلايا الكبد السليمة المتزامنة. ويقدم هذا النموذج بديلا موثوقا لنماذج الحيوانية المتاحة لدراسة الفيزيولوجيا المرضية لمؤسسه الفا وكذلك لتقييم إمكانات العلاج الجديد لمؤسسه الفا. كما ان استخدام نهجين مختلفين يجعل من الممكن دراسة الأثر المشترك للاصابه بالكبد الناجم عن الإصابات الجسدية والدوائية. استنساخ وجدوى الاجراء الحالي هو فائده اضافيه من النموذج.

نسبه البقاء علي قيد الحياة في نماذج الحيوانية من الف وقد تم توحيد الجرعة المثلي من APAP لتسبب الفا في تركيبه مع 70 ٪ PHx كما 750 مغ/كغ من وزن الجسم. بدا نظام العلاج 24 ساعة بعد 70 ٪ PHx ، عندما كانت الماشية قد تعافي تماما من الجراحة ، وتتكون من جرعتين APAP في فترات 24 ساعة. ولوحظت وفيات بمعدل 80 في...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen at JoVE.com

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

نموذج الحيوانية فشل الكبد الحاد وضعت في الدراسة الحالية يقدم بديلا ممكنا لدراسة العلاجات المحتملة. يستخدم النموذج الحالي التاثير المشترك للإصابات الكبدية الناجمة عن المخدرات والفيزيائية ويوفر نافذه زمنيه مناسبه لدراسة إمكانات العلاجات الجديدة.

جيل من نموذج الفئران من فشل الكبد الحاد عن طريق الجمع بين 70 ٪ استئصال الكبد الجزئي و اسيتامينوفين

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

يُعرَّف فشل الكبد الحاد أو ALF عموماً بأنه تطور سريع لإصابة الكبد في الكبد السليم، ويصحبه ضعف شديد في وظائفه الرئيسية. زرع الكبد العظام هو العلاج الوحيد المتاح في معظم الحالات. ولكن بسبب نقص المتبرعين بالكبد، فإن معدل الوفيات في مرضى مؤسسة آنا ليند مرتفع جداً.لدراسة إمكانات الأساليب العلاجية البديلة وفهم أفضل لعلم الفيزيولوجيا المرضية في ALF ، يتم استخدام نماذج حيوانية للمرض. وتستند العديد من نماذج ALF على الآثار السامة الكبدية من اسيتامينوفين, رابع كلوريد الكربون, كونكانافالين A, الدهون السكريات, د-Galactosamine والثيواسيتاميد. ومع ذلك ، فإن هذه لديها العديد من أوجه القصور مثل سوء إعادة التكاثر والنكوص ، والسمية للأعضاء الحيوية الأخرى ، وضعف انعكاس أمراض الأمراض البشرية واختلاف الأنواع.ومن ثم، هناك حاجة إلى نظام نموذجي أفضل قابل للاستنساخ ويسمح بفترة زمنية كافية لدراسة آثار التدخل العلاجي. في الدراسة الحالية، تم إنشاء نموذج ALF في الفئران من خلال الجمع بين آثار استئصال الكبد الجزئي والسمية الكبدية أسيتامينوفين. تتم إزالة الفص الجانبي المتوسط والمسار للكبد إلى مكوس 70٪ كتلة الكبد, وعلاوة على ذلك, أعطيت اسيتامينوفين للتسبب ALF.وقد اتسم تطوير ALF في النموذج من خلال التحليل الكيميائي الحيوي والهوسطية وقد تم تأكيد عكس تلف الكبد عن طريق زرع خلايا الكبد الفئران صحية syngeneic. واستخدمت الجرذان Wistar وجود وزن الجسم في حدود 180 إلى 250 غراما في الدراسة الحالية. تصف الخطوات التالية الإجراء الجراحي لاستقراء ALF في الفئران.يتم تخدير الحيوان عن طريق حقن خليط الكيتامين-زيلازين داخل الصفاق. يتم تأكيد التخدير الكامل عن طريق معسر إصبع القدم من الحيوان، ويتم تنفيذ إجراءات أخرى فقط عندما لا يكون هناك رد فعل دواسة. لمنع جفاف القرنية، يتم تطبيق قطرة العين التي تستند إلى السليلوز الميثيل على حد سواء على العينين.يتم تقييد الحيوان إلى المجلس الجراحي باستخدام شريط أبيض. يتم إزالة الشعر من منطقة جراحية في البطن العلوية اليمنى باستخدام مقص كهربائي. تطهير موقع الجراحة بواسطة ثلاثة الدعك بالتناوب من 70٪ الإيثانول واليود povidone باستخدام منصات القطن تعقيم في حركة دائرية.يتم وضع علامة على الجلد الذي سيتم قطعه فقط تحت عمودي القص على الوريدي وموازاة مع القفص الصدري. يتم وضع ورقة الستائر المعقمة التي لها فتحة حوالي ثلاثة سنتيمترات في سنتيمتر واحد على الجلد ملحوظ. يتم إجراء شق عرضية من حوالي 2-3 سم على طول خط ملحوظ مع مساعدة من مشرط.يتم إزالة مرفق الجلد مع طبقة العضلات الكامنة في محيط المنطقة المقشورة بلطف عن طريق نصائح القطن مبللة معقمة. بعد ذلك ، يتم إجراء شق عرضي من خلال الطبقة البريتونية فقط تحت عملية xiphoid. يتم كشف الفص الأيسر للكبد عن طريق إعطاء ضغط لطيف على الصدر بمساعدة اثنين من نصائح القطن المبلل المالحة.يتم تراجع حلقة خيط النايلون العقيمة حول فص الكبد المكشوف. يتم أخذ الحلقة بعناية إلى قاعدة الفص بمساعدة ملقط تشريح الصغرى أو براعم القطن. مع مساعدة من حامل الإبرة microsurgery والملوط الصغيرة، وتعادل طرفي الحلقة، ووضع عقدة أقرب إلى قاعدة الفص ممكن.هذا هو لتقلص الأوعية الدموية والحد من النزيف بعد إزالة الفص الكبد. عقدتين إضافيتين مربوطتان على الجانب الآخر. يتم قطع الفص المربوط فوق العقدة فقط باستخدام مقص الجراحة الدقيقة الذي يترك جذعًا إقفاريًا.وبالمثل، يتم رفع الفص المتوسط للكبد باستخدام نصائح القطن. التعرف على الشكل الفريد للفص المتوسط للكبد. وضع حلقة خيط النايلون على الفص، وربطة بحزم نهاياتها.يتم ربط عقدتين إضافيتين على الجانب الآخر واستئصال الفص. بعد إزالة الفصوص ، يتم خياطة الصفاق باستخدام خياطة القطومية القابلة للامتصاص 4/0 القابلة للامتصاص مع غرز مستمرة تليها خياطة الجلد مع خياطة بسيطة متقطعة. بعد إغلاق الجلد، يتم تطبيق محلول اليود povidone حول موقع الجراحة.تتم إزالة ورقة الستائر ويتم خلع الحيوان من لوحة الجراحة. جرعة المضادات الحيوية من 12 مليغرام cefotaxime في مل واحد من محلول الجلوكوز 5٪ تعطى داخل الصفاق إلى الحيوان لحمايته من خطر العدوى بعد الجراحة. لتخفيف الألم بعد الجراحة ، يتم إعطاء ميلوكسيكام المسكن ، عادة 1 ملغ لكل كجم من وزن الجسم تحت الجلد للحيوان ، تليها جرعة كل يوم لمدة يومين.يتم نقل الحيوان إلى قفص يتعافى دافئ. يصبح الحيوان واعية في غضون 30 إلى 40 دقيقة ويبدأ في التحرك. يتم الاحتفاظ بالحيوان الذي يتم تشغيله في عزلة حتى تلتئم الجروح الجراحية تمامًا ، والتي قد تستغرق من ثلاثة إلى أربعة أيام.لـ ALF، يتم حقن 750 ملليغرام لكل كيلوغرام من وزن الجسم من الأسيتامينوفين والجرعة الثانية من ميلوكسيكام داخل الرحم بعد 24 ساعة من إجراء استئصال الكبد الجزئي. يتم تكرار هذا النظام جرعة بعد 24 ساعة. بعد تحريض ALF، تم العثور على البقاء على قيد الحياة في الحيوانات إلى انخفاض حاد.ولتوصيف تطور ALF، تم قتل الحيوانات التي تعمل بالقتل الرحيم بعد الجرعة الثانية من الأسيتامينوفين، وأجريت العديد من الدراسات الكيميائية الحيوية والهوسطية. يتم وصف النتائج في الفيديو. وتبين أن نسبة البقاء على قيد الحياة في المجموعة المستحثة من قبل مؤسسة آنا ليند قد انخفضت بشدة، ولوحظت نسبة وفيات تصل إلى 80 في المائة في غضون 24 ساعة من الجرعة الثانية من الأسيتامينوفين.كان تلف الكبد واضحًا على المستوى المورفولوجي في المجموعة المستحثة في ALF وفقط 70٪ من مجموعة استئصال الكبد الجزئي. في حين أن المجموعة التحكم وفقط مجموعة اسيتامينوفين المعالجة كان لها مظهر صحي. تم العثور على مستويات انزيم من الأنين نقل الأمينية, الأسبارتات الأمينية transferase والفوسفاتاز القلوية لتكون مرتفعة للغاية في ALF الناجمة عن مجموعة بالمقارنة مع مجموعات أخرى.أظهر تحليل ملف تعريف التعبير الجيني من قبل qPCR التعبير عن الجينات المشاركة في موت الخلايا المبرمجة والتهاب وتطور إصابة الكبد. كشفت هيماتوكسيلين ويوسين تلطيخ أقسام أنسجة الكبد في الغالب خلايا الكبد الطبيعية في مجموعة التحكم. في المجموعة ALF، لوحظ في الغالب معتدلة الضمور الدهنية الكلي.تم العثور على وقت البروثرومبين والنسبة الدولية تطبيع لتكون مرتفعة في المجموعة التي تسببها ALF، مما يدل على إعاقة عملية تخثر الدم. تم العثور على نسبة البقاء على قيد الحياة لاستعادة في المجموعة المستحثة ALF بعد زرع خلايا الكبد الفئران صحية syngeneic. تم العثور على مستويات المصل من الانزيمات ألانين نقلات الأمينية, الأسبارتات الأمينية transferase والفوسفاتاز القلوية ليتم استعادة في الحيوانات التي يسببها ALF بعد زرع الخلايا.هذه الطريقة من تحريض ALF في الفئران هو استنساخها، ويظهر عكس جيدة ويوفر نافذة زمنية مناسبة لاختبار علاجات جديدة. ومن ثم، يمكن أن يكون هذا النموذج بمثابة نموذج فعال للمرض لتقييم النُهج العلاجية المحتملة لعلاج مؤسسة آنا ليند.

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

العمليات الجراحية لنموذج الفئران من الجزئي زرع الكبد orthotopic مع إعادة الإعمار الكبدي الشرياني

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

منتبذ مساعدة الجرذ زراعة الكبد مع تدفق التنظيم الوريد البابي Arterialization في الفشل الكبدي الحاد

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

التصور الأوعية الدموية ومتني التجديد بعد استئصال الكبد الجزئي 70٪ في الفئران العادية

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

طريقة التسليم المباشر القطاعي البينية الكبد باستخدام نموذج الفأر الكبد نقيري المشبك

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

نموذج الفئران لربط قسم الكبد وربط الوريد البابي لإجراءات مرحلية ظهرت (البس)

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

إينتراسبلينيك زرع خلايا الكبد بعد ظهرت جزئيا في إيماءة. الفئران مشمولان

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

أرتيرياليزيد إعادة "زرع الكبد الجزئي الفئران" مع في فيفو المنحى السفينة 70% ظهرت

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

زرع صفحة الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية للحد من تسرب بعد Colectomy الجزئية في نموذج الفئران

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

عزل كارديوميوسيتيس خوارج من نموذج الفئران من فشل القلب المتصلة بالمتلازمة الأيضية مع كسر قذفي الحفاظ على

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...

Induction and Phenotyping of Acute Right Heart Failure in a Large Animal Model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension

تحريض وتوصيف ظاهري لقصور القلب الأيمن الحاد في نموذج حيواني كبير لارتفاع ضغط الدم الرئوي الخثاري المزمن

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The ...