Name: generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen
Uploaded: 2019-11-27T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen at JoVE.com

Dit werk werd gesteund door de kern subsidie van het departement biotechnologie, de regering van India, aan het Nationaal Instituut voor immunologie, New Delhi.

De hieronder beschreven procedure is goedgekeurd door het institutioneel Comité voor dierenethiek van het Nationaal Instituut voor immunologie, New Delhi. Het seriële referentienummer van de goedkeuring is IAEC # 355/14.
1. voorbereiding
<ol><li>Bereid je voor op de chirurgische ingreep zoals eerder beschreven door Das B et al.26.</li>
	<li>Gebruik 6 – 8 weken oude inteelt Wistar ratten met een lichaamsgewicht van 200 – 250 g.</li>
	<li>Huisdieren onder de stand...

De ontwikkeling van een geschikt diermodel voor ALF is van het allergrootste belang voor een beter begrip van pathogenese en progressie van ALF. Een goed gekarakteriseerd ALF diermodel biedt ook de mogelijkheid voor de ontwikkeling en beproeving van nieuwe therapeutische benaderingen tegen ALF. Er zijn veel pogingen gedaan om een klinisch relevant model van Alf6,12,21,23,<sup class="...

Acuut leverfalen (ALF) wordt gedefinieerd door de Amerikaanse Vereniging voor de studie van leverziekten als snelle ontwikkeling van acute leverschade zonder enige voorafgaande tekenen van schade en wordt gekenmerkt door ernstige aantasting van de synthetische, metabole, en ontgiftende functies van de lever1. Alf verschilt van chronisch leverfalen waarbij de storing optreedt als gevolg van leverschade veroorzaakt gedurende een lange periode van tijd en van acuut chronisch leverfalen (aclf), waar abrupte leverschade plaatsvindt als gevolg van chronische leverziekten2,3,4. De enige beschikbare remedie voor ALF is orthotopic levertransplantatie (OLT), of de dood kan optreden. Vanwege het tekort aan lever donoren is het sterftecijfer bij patiënten met ALF zeer hoog.
Om het potentieel van alternatieve therapeutische benaderingen te bestuderen en om de pathofysiologie van ALF beter te begrijpen, zijn diermodellen nodig die het ALF kunnen weerspiegelen dat zich bij mensen voordoet. Veel van de reeds beschikbare ALF diermodellen hebben verschillende tekortkomingen. Acetaminophen (APAP) effecten zijn moeilijk te reproduceren, maar hebben de dichtstbijzijnde gelijkenissen in termen van temporele, klinische, biochemische, en pathologische parameters. APAP-geïnduceerde diermodellen ondervinden vaak problemen als gevolg van de aanwezigheid van methemoglobinemie veroorzaakt door de oxidatie van hemoglobine door APAP en haar tussen producten5,6,7. Een ander probleem is het gebrek aan reproduceerbaarheid dat wordt weerspiegeld door onvoorspelbare dosis responsen en de tijd van overlijden. De diermodellen van Alf die met koolstof Tetra chloride (CCL4) worden geproduceerd, hebben een slechte reproduceerbaarheidvan8,9,10en11. Concavalin a (CON a) en lipoplysaccharide (LPS)-geïnduceerde Alf diermodellen niet het klinische patroon van de ziekte van de mens weerspiegelen, hoewel ze voordelen in de studie van cellulaire mechanismen die betrokken zijn bij auto-immune leverziekten en in de studie van sepsis respectievelijk12,13,14,15. Evenzo vereist thioacetamide (TAA) ook biotransformatie naar een actieve metaboliet thioacetamide sulfoxide en toont soorten variatie16,17,18,19. D-galactosamine (d-Gal) produceert sommige biochemische, metabole en fysiologische veranderingen vergelijkbaar met Alf maar is niet in staat om de hele Alf pathologische aandoening20,21,22,23weer te geven. Er zijn zeer weinig pogingen geweest om twee of meer van deze methoden te combineren om een ALF-model te ontwikkelen dat in staat is om het ALF-syndroom op een betere manier te reflecteren13. Daarom zijn verdere studies nodig om een model te ontwikkelen dat de parameters van de ziekte kan weerspiegelen, een betere reproduceerbaarheid heeft en voldoende tijd biedt om de effecten van een therapeutische interventie te bestuderen.
In de huidige studie, een alternatief ALF model bij ratten is gemaakt door het combineren van de effecten van gedeeltelijke hepatectomie (PHx) en lagere doses van een Hepatotoxische reagens. APAP heeft een gevestigde rol in het veroorzaken van leverschade5,24,25. Het is een veelgebruikte analgetische en is giftig voor de lever bij supratherapeutische doses door het vormen van toxische metabolieten. APAP is de oorzaak van vele sterfgevallen in ontwikkelde landen. Lichamelijk letsel veroorzaakt door gedeeltelijke hepatectomie initieert activering van verschillende processen die betrokken zijn bij ontstekingen en lever regeneratie. Injectie van de Hepatotoxische agent APAP veroorzaakt een vijandige omgeving in de lever, het voorkomen van de proliferatie van hepatocyten. Dit vermindert de stress periode op het dier, die in combinatie met kleinere doses hepatotoxine leidt tot een betere reproduceerbaarheid van de procedure. Daarom is het gebruik van dit model een combinatoir effect van twee soorten lever blessures bestudeerd. Om het diermodel van de ontwikkelde ALF te karakteriseren, zijn fysiologische en biochemische parameters bestudeerd. Succesvolle reversibiliteit van ALF werd bevestigd door transplantatie van syngene gezonde rat hepatocyten.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetaminophen (Biocetamol)</td>
			<td>EG Pharmaceuticals</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alkaline Phosphatase Kit (DEA)</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated analyser</td>
			<td>Tulip, Alto Santracruz, India</td>
			<td>Screen Maaster 3000</td>
			<td>Biochemical analyser for liver functional test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (Povidon-Iodine Solution)</td>
			<td>Win-Medicare; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biological safety cabinet (Class I)</td>
			<td>Kartos international; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bright Field Microscope</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>LX51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefotaxime (Taxim&#174;)</td>
			<td>AlKem; India</td>
			<td></td>
			<td>cefotaxime sodium injection, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Strainer</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>CLS431752</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type I</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>17100-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Buds</td>
			<td>Pure Swabs Pvt Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape Sheet</td>
			<td>JSD Surgicals, Delhi, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX Mountant</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>6522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin Y solution, alcoholic</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>HT110132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Anesthesia System</td>
			<td>Ugo Basile; Italy</td>
			<td>211000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Himedia, India</td>
			<td>GRM077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removing cream (Veet&#174;)</td>
			<td>Reckitt Benckiser, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Solution, Mayer&#39;s</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>MHS16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>RM554</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase From Sheep Testes</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>H6254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I.V. Cannula (Plusflon)</td>
			<td>Mediplus, India</td>
			<td>Ref 1732411420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>BD; US</td>
			<td>REF 303060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (Forane&#174;)</td>
			<td>Asecia Queenborough</td>
			<td>No B506</td>
			<td>Inhalation Anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketamax&#174;)</td>
			<td>Troikaa Pharmaceuticals Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Ketamine hydrochloride IP, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam (Melonex&#174;)</td>
			<td>Intas Pharmaceuticals Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Histo-Line Laboratories, Italy</td>
			<td>MRS3500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Thread</td>
			<td>Mighty; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>GRM 3660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percoll&#174;</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-0891-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refresh Tears/Eyemist Gel</td>
			<td>Allergan India Private Limited/Sun Pharma, India</td>
			<td>P3060</td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGOT (ASAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGPT (ALAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Cryotome E Cryostat</td>
			<td>Thermo Electron Corporation; US</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade No. 22</td>
			<td>La Medcare, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Board</td>
			<td>Locally made</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical White Tape</td>
			<td>3M India; India</td>
			<td>1530-1</td>
			<td>Micropore Surgical Tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Ethicon, Johnson &#38; Johnson, India</td>
			<td>NW 5047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes (1ml, 26 G)</td>
			<td>Dispo Van; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimmer (Clipper)</td>
			<td>Philips</td>
			<td>NL9206AD-4 DRACHTEN QT9005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing Machine</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>William&#39;s E Media</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>AT125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xylaxin&#174;)</td>
			<td>Indian Immunologicals Limited</td>
			<td></td>
			<td>Sedative, Pre-Anaesthetic, Analgesic and muscle relaxant</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen

Acuut leverfalen (ALF) is een klinische aandoening veroorzaakt door verschillende etiologieën resulterend in het verlies van metabole, biochemische, synthetiserende, en ontgiftende functies van de lever. In de meeste onherstelbare leverschade gevallen, orthotrope levertransplantatie (OLT) blijft de enige beschikbare behandeling. Om het therapeutische potentieel van een behandeling voor ALF te bestuderen, is de voorafgaande test in een dierlijk model van ALF essentieel. In de huidige studie, een ALF model bij ratten werd ontwikkeld door het combineren van 70% partiële hepatectomie (PHx) en injecties van paracetamol (APAP) die voorziet in een therapeutisch venster van 48 h. De mediane en linker laterale lobben van de lever werden verwijderd naar accijnzen 70% van de lever massa en APAP werd gegeven 24 h postoperatief gedurende 2 dagen. Overleving in door ALF geïnduceerde dieren bleek ernstig afgenomen te zijn. De ontwikkeling van ALF werd bevestigd door veranderde serumspiegels van de enzymen alanine amino Transferase (ALAT), aspartaat aminotransferase (AST), alkalische fosfatase (ALP); veranderingen in de protrombine tijd (PT); en de beoordeling van de internationale genormaliseerde ratio (INR). Onderzoek van het genexpressie profiel door qPCR onthulde een toename van de expressieniveaus van genen die betrokken zijn bij apoptosis, ontsteking en in de progressie van leverbeschadiging. Diffuse degeneratie van hepatocyten en infiltratie van immuuncellen werd waargenomen door histologische evaluatie. De reversibiliteit van ALF werd bevestigd door het herstel van de overleving en serum niveaus van ALT, AST en ALP na intrasplenische transplantatie van syngene gezonde rat hepatocyten. Dit model presenteert een betrouwbaar alternatief voor de beschikbare ALF diermodellen om de pathofysiologie van ALF te bestuderen en om het potentieel van een nieuwe therapie voor ALF te evalueren. Het gebruik van twee verschillende benaderingen maakt het ook mogelijk om het gecombineerde effect van lichamelijke en drug-geïnduceerde leverschade te bestuderen. De reproduceerbaarheid en haalbaarheid van de huidige procedure is een bijkomend voordeel van het model.

Overlevingspercentage in diermodellen van ALF De optimale dosis APAP om ALF te veroorzaken in combinatie met 70% PHx werd gestandaardiseerd als 750 mg/kg lichaamsgewicht. Het behandelingsregime startte 24 uur na 70% PHx, toen de dieren volledig waren hersteld van de operatie, en bestond uit twee APAP doses met een interval van 24 uur. De sterfte werd waargenomen bij een snelheid van 80% na de toediening van de tweede dosis APAP, 48 h na de operatie. Het overlevingspercentage werd geanalyseerd en uitge...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen at JoVE.com

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

De acute leverfalen diermodel ontwikkeld in de huidige studie presenteert een haalbaar alternatief voor de studie van mogelijke therapieën. Het huidige model maakt gebruik van het gecombineerde effect van fysieke en drug-geïnduceerde leverschade en biedt een geschikte tijdvenster om het potentieel van nieuwe therapieën te bestuderen.

Generatie van een rat model van acuut leverfalen door het combineren van 70% partiële Hepatectomie en Acetaminophen

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

Acuut leverfalen of ALF wordt over het algemeen gedefinieerd als snelle ontwikkeling van leverletsel in een gezonde lever en gaat gepaard met ernstige aantasting van de belangrijkste functies. Orthotopische levertransplantatie is de enige beschikbare remedie in de meeste gevallen. Maar als gevolg van een tekort aan leverdonoren, het sterftecijfer bij ALF-patiënten is zeer hoog.Om het potentieel van alternatieve therapeutische benaderingen te bestuderen en de pathofysiologie van ALF beter te begrijpen, worden dierlijke modellen van de ziekte gebruikt. Veel van de ALF-modellen zijn gebaseerd op de hepatoxische effecten van paracetamol, koolstoftetrachloride, Concanavalin A, lipopolysaccharide, D-Galactosamine en thioacetamide. Deze hebben echter verschillende tekortkomingen, zoals slechte reproduceerbaarheid en omkeerbaarheid, toxiciteit voor andere vitale organen, slechte reflectie van pathologie van menselijke ziekten en soortenvariatie.Daarom is er behoefte aan een beter modelsysteem dat reproduceerbaar is en voldoende tijdsinterval mogelijk maakt om effecten van een therapeutische interventie te bestuderen. In de huidige studie is een ALF-model bij ratten gemaakt door effecten van gedeeltelijke hepatectomie en paracetamol hepatotoxiciteit te combineren. Mediaan en linker laterale kwab van de lever worden verwijderd om 70% levermassa accijns, en verder, paracetamol wordt gegeven aan ALF veroorzaken.De ontwikkeling van ALF in het model is gekenmerkt door biochemische en histologische analyse en omkeerbaarheid van leverschade is bevestigd door transplantatie van syngeneic gezonde rat hepatocyten. Wistar Ratten met lichaamsgewicht binnen het bereik van 180 tot 250 gram werden gebruikt in de huidige studie. De volgende stappen beschrijven de chirurgische ingreep voor inductie van ALF bij een rat.Het dier wordt verdoofd door het injecteren van Ketamine-Xylazine mengsel intraperitoneally. Volledige verdoving wordt bevestigd door het knijpen van de teen van het dier, en verdere procedures worden alleen uitgevoerd wanneer er geen pedaalreflex is. Om uitdroging van hoornvlies te voorkomen, wordt een op carboxy methylcellulose gebaseerde oogdruppel toegepast op beide ogen.Het dier wordt met behulp van een witte tape aan de chirurgische raad vastgehouden. Haar wordt verwijderd uit de rechterbovenhoek abdominale chirurgische gebied met behulp van een elektrische tondeuse. Desinfecteer de chirurgische plaats door drie afwisselende scrubs van 70% ethanol en povidone jodium met behulp van gesteriliseerde wattenschijfjes in cirkelvormige beweging.De te snijden huid is gemarkeerd net onder het borstbeen loodrecht op de xiphoid en parallel aan de ribbenkast. Een steriel laken met een opening van ongeveer drie centimeter bij een centimeter wordt geplaatst over de gemarkeerde huid. Een dwarse incisie van ongeveer twee tot drie centimeter wordt gemaakt langs de gemarkeerde lijn met behulp van een scalpel.De bevestiging van de huid met onderliggende spierlaag in de buurt van het ingesneden gebied wordt voorzichtig verwijderd door steriele bevochtigde katoenen tips. Vervolgens wordt een dwarse incisie gemaakt door middel van peritoneale laag net onder het xiphoidproces. De linkerkwab van de lever wordt blootgesteld door het geven van een zachte druk op de thorax met behulp van twee zoute bevochtigde katoenen tips.Een steriele nylon draad lus is gleed rond de blootgestelde leverkwab. De lus wordt zorgvuldig naar de basis van de kwab gebracht met behulp van micro-ontledende tangen of wattenstaafjes. Met behulp van microchirurgie naald houder en micro tangen, de twee uiteinden van de lus zijn gebonden, het plaatsen van de knoop zo dicht mogelijk bij de basis van de kwab mogelijk.Dit is om de bloedvaten te vernauwen en bloedingen te verminderen nadat de leverkwab is verwijderd. Aan de andere kant zijn twee extra knopen gebonden. De gebonden kwab wordt net boven de knoop gesneden met behulp van microchirurgschaar die een ischemische stomp achterlaat.Ook wordt de mediane kwab van de lever opgeheven met behulp van katoenen tips. Herken de unieke vorm van mediane kwab van de lever. Plaats een nylon draad lus over de kwab, stevig binden de uiteinden.Twee extra knopen zijn gebonden aan de andere kant en resect de kwab. Na het verwijderen van de lobben wordt het buikvlies gehecht met behulp van opneembare catgut chromische 4/0 opneembare hechting met continue steken, gevolgd door het hechten van de huid met eenvoudige onderbroken hechting. Na huidsluiting wordt povidone jodiumoplossing rond de chirurgische plaats aangebracht.Het laken wordt verwijderd en het dier wordt van de operatieplank gehaald. Een dosis antibiotica van 12 milligram cefotaxime in een ml van 5%glucoseoplossing wordt intraperitoneally aan het dier gegeven om het te beschermen tegen het risico van postoperatieve infectie. Voor pijnverlichting na de operatie wordt de pijnstillende meloxicam, meestal 1 mg per kg lichaamsgewicht, onderhuids aan het dier gegeven, gevolgd door een dosis per dag gedurende twee dagen.Het dier wordt verplaatst naar een warme herstellende kooi. Het dier wordt binnen 30 tot 40 minuten bij bewustzijn en begint te bewegen. Het geopereerde dier wordt geïsoleerd totdat chirurgische wonden volledig zijn genezen, wat drie tot vier dagen kan duren.Voor het opwekken van ALF wordt 750 milligram per kg lichaamsgewicht van paracetamol en de tweede dosis meloxicam intraperitoneally geïnjecteerd 24 uur na gedeeltelijke hepatectomieprocedure. Dit dosisregime wordt na 24 uur herhaald. Na inductie van ALF bleek de overleving bij dieren ernstig te zijn afgenomen.Om de ontwikkeling van ALF te karakteriseren, werden geopereerde dieren geëuthanaseerd na een tweede dosis paracetamol, en verschillende biochemische en histologische studies werden gedaan. De resultaten worden vooruit beschreven in de video. Overlevingspercentage in de ALF geïnduceerde groep bleek ernstig te zijn verminderd en tot 80% sterfte werd waargenomen binnen 24 uur na de tweede dosis paracetamol.Leverschade was duidelijk op morfologisch niveau in ALF geïnduceerde groep en slechts 70% gedeeltelijke hepatectomie groep. Terwijl de controlegroep en alleen paracetamol behandelde groep had een gezond uiterlijk. Enzymniveaus van alanine amino transferase, aspartaat amino transferase en alkalische fosfatase bleken zeer verhoogd te zijn in ALF geïnduceerde groep in vergelijking met andere groepen.Analyse van genexpressie profiel door qPCR toonde verhoogde expressie van genen die betrokken zijn bij apoptose, ontsteking en progressie van leverletsel. Hematoxyline en eosine kleuring van leverweefsel secties bleek meestal normale hepatocyten in de controlegroep. In de ALF-groep werd meestal matige macro vesiculaire vetdegeneratie waargenomen.Prothrombine tijd en International Normalized Ratio bleken te zijn verhoogd in ALF geïnduceerde groep, wat wijst op belemmerd bloedstolling proces. Overlevingspercentage bleek te worden hersteld in ALF geïnduceerde groep na transplantatie van syngeneic gezonde rat hepatocyten. Serumniveaus van enzymen alanine amino transferase, aspartaat aminotransferase en alkalische fosforfosfatase bleken na celtransplantatie te worden hersteld bij ALF geïnduceerde dieren.Deze methode om ALF bij ratten op te leiden is reproduceerbaar, toont een goede omkeerbaarheid en biedt een geschikt tijdvenster om nieuwe therapieën te testen. Vandaar dat dit model kan dienen als een efficiënt ziektemodel voor de evaluatie van potentiële therapeutische benaderingen voor de behandeling van ALF.

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Chirurgische ingrepen voor een Rat Model van deelspoelen orthotope levertransplantatie met hepatische arteriële reconstructie

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotopische Auxiliary Rat Liver Transplantation Met Flow-gereguleerd poortader Arterialization in acuut leverfalen

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

Visualisatie van vasculaire en Parenchymale Regeneratie na 70% Gedeeltelijke hepatectomy in normale muizen

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Wijze van Direct Segmentale Intra-lever Delivery Met behulp van een Rat Liver Hilar Clamp Model

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Rat Model van de lever partitie koppelen en Portal Vein afbinding voor geënsceneerde Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

Intrasplenic transplantatie van hepatocyten na gedeeltelijke Hepatectomy in KNIPOOG. SCID muizen

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Opnieuw Arterialized Rat gedeeltelijke lever transplantatie met een in vivo vaartuig georiënteerde 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Transplantatie van stamcellen adipeus weefsel afkomstige blad om lekkage na gedeeltelijke Colectomy in een Rat-Model

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

Isolatie van atriale Cardiomyocytes van een Rat Model van metabole syndroom-gerelateerde hartfalen met bewaarde ejectie Fractie

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...

Induction and Phenotyping of Acute Right Heart Failure in a Large Animal Model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension

Inductie en fenotypering van acuut rechterhartfalen in een groot diermodel van chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The ...