Name: generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen
Uploaded: 2019-11-27T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen at JoVE.com

עבודה זו נתמכת על ידי מענק הליבה שהתקבל מהמחלקה לביוטכנולוגיה, ממשלת הודו למכון הלאומי לאימונולוגיה, ניו דלהי.

ההליך המתואר להלן אושר על ידי ועדת האתיקה של בעלי החיים המוסדי של המכון הלאומי לאימונולוגיה, ניו דלהי. מספר האסמכתא הטורית של האישור מהווה המשך 355/14.
1. הכנה
<ol><li>היכונו להליך הכירורגי כמתואר קודם על ידי Das B et al.26.</li>
	<li>השתמש 6 – 8-שבוע בן המטבעי חולדות Wistar עם משקל ה...

התפתחותו של דגם בעלי חיים מתאים לאלף היא החשובה ביותר להבנת הפתוגנזה וההתקדמות של אלף. מודל מאופיין היטב של אלף בעלי חיים גם מספק את ההזדמנות לפיתוח ולניסוי של גישות טיפוליות חדשות נגד אלף. ניסיונות רבים נעשו לפתח מודל רלוונטי קלינית של אלף6,12,<sup class="xre...

אי ספיקת כבד חריפה (אלף) מוגדר על ידי האגודה האמריקנית לחקר מחלות כבד כהתפתחות מהירה של פגיעה בכבד חריפה ללא סימנים קודמים של נזק מאופיין ליקוי חמור של סינתטי, מטבולית, ו הרעלים פונקציות של הכבד1. אלף שונה מכשל כבד כרוני שבו הכישלון מתרחש כתוצאה של פגיעה בכבד הנגרמת על פני תקופה ארוכה של זמן מ ספיקת כבד כרונית חריפה (aclf), שבו נזק לכבד פתאומי מתרחש כתוצאה של מחלות כבד כרונית2,3,4. התרופה הזמינה היחידה עבור אלף היא השתלת כבד אורתוטופית (OLT), או מוות עלול להתרחש. בשל המחסור של תורמי הכבד, שיעור התמותה בחולים הסובלים מאלף הוא גבוה מאוד.
כדי ללמוד את הפוטנציאל של גישות טיפוליות חלופיות ולהבין טוב יותר את הפתופסיולוגיה של אלף, מודלים בעלי חיים שיכולים לשקף את אלף המתרחשים בבני האדם הם זקוקים. רבים מדגמי החיות הזמינים שכבר הינם בעלי מספר חסרונות. ההשפעות של פרצטמול (APAP) קשות להתרבות, אך יש להן את הדמיון הקרוב ביותר במונחים של הערכים הטמפורלית, הקליניים, הביוכימיים והפתולוגיים. Apap מודלים בעלי חיים המושרה לעתים קרובות בעיות בשל נוכחותם של טהמוגלובינמיה נגרמת על ידי חמצון של המוגלובין על ידי apap ו intermediates שלה5,6,7. בעיה נוספת היא חוסר ביכולת התגובה המשתקף על ידי תגובות מינון בלתי צפויות ואת זמן המוות. אלף מודלים בעלי חיים המיוצרים באמצעות פחמן טטרהכלוריד(ccl4) יש שיקול העוני המסכן8,9,10,11. קונקבלנה (קון a) וליפוסכריד (lps)-המושרה אלף בעלי חיים מודלים לא משקפים את הדפוס הקליני של המחלה האנושית, למרות שיש להם יתרונות במחקר של מנגנונים סלולריים המעורבים מחלות בכבד אוטואימוניות במחקר של אלח דם בהתאמה12,13,14,15. באופן דומה, thioacetamide (TAA) גם דורש ביוטרנספורמציה כדי מטבוליזם פעיל thioacetamide סולפוקסיד ומראה וריאציה מינים16,17,18,19. ד-גלטוסמיטין (d-Gal) מייצרת מספר שינויים ביוכימיים, מטבוליים ופיסיולוגיים הדומים לאלף, אך אינו מסוגל לשקף את כל המצב הפתולוגי של אלף20,21,22,23. היו מעט מאוד נסיונות לשלב שתיים או יותר מהשיטות האלה כדי לפתח דגם אלף שמסוגל לשקף את תסמונת אלף בצורה טובה יותר13. לכן, מחקרים נוספים נדרשים לפתח מודל שיכול לשקף את הפרמטרים של המחלה, יש התפתחות טובה יותר, ומספק מספיק זמן כדי ללמוד את ההשפעות של התערבות טיפולית.
במחקר הנוכחי, המודל האלטרנטיבי של אלף בחולדות נוצר על ידי שילוב ההשפעות של כריתת hepatectomy (PHx) ומינונים נמוכים יותר של מגיב hepatoרעילים. Apap יש תפקיד מבוסס היטב גרימת פציעה בכבד5,24,25. זהו כאבים בשימוש נרחב הוא רעיל לכבד במינון supratherapeutic על ידי יצירת מטבוליטים רעילים. APAP הוא הגורם למותם של רבים במדינות מפותחות. פגיעה גופנית נגרמת על ידי כריתת hepatectomy יוזם הפעלה של תהליכים שונים המעורבים דלקת, כמו גם התחדשות הכבד. הזרקה של הסוכן hepatotoxic APAP גורם לסביבה עוינת בכבד, מניעת התפשטות של hepatציטים. זה מפחית את תקופת הלחץ על בעל החיים, אשר כאשר בשילוב עם מינונים קטנים יותר של hepatotoxin, מוביל לשגות טוב יותר של ההליך. לכן, באמצעות מודל זה, השפעה שוללת של שני סוגים של פציעות בכבד נחקרו. כדי לאפיין את דגם אלף החי המפותח, הפרמטרים הפיזיולוגיים והביוכימיים נחקרו. ההיבישה המוצלחת של אלף אושרה על ידי השתלת החולדה בריאה syngeneic.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetaminophen (Biocetamol)</td>
			<td>EG Pharmaceuticals</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alkaline Phosphatase Kit (DEA)</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated analyser</td>
			<td>Tulip, Alto Santracruz, India</td>
			<td>Screen Maaster 3000</td>
			<td>Biochemical analyser for liver functional test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (Povidon-Iodine Solution)</td>
			<td>Win-Medicare; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biological safety cabinet (Class I)</td>
			<td>Kartos international; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bright Field Microscope</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>LX51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefotaxime (Taxim&#174;)</td>
			<td>AlKem; India</td>
			<td></td>
			<td>cefotaxime sodium injection, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Strainer</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>CLS431752</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type I</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>17100-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Buds</td>
			<td>Pure Swabs Pvt Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape Sheet</td>
			<td>JSD Surgicals, Delhi, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX Mountant</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>6522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin Y solution, alcoholic</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>HT110132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Anesthesia System</td>
			<td>Ugo Basile; Italy</td>
			<td>211000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Himedia, India</td>
			<td>GRM077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removing cream (Veet&#174;)</td>
			<td>Reckitt Benckiser, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Solution, Mayer&#39;s</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>MHS16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>RM554</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase From Sheep Testes</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>H6254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I.V. Cannula (Plusflon)</td>
			<td>Mediplus, India</td>
			<td>Ref 1732411420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>BD; US</td>
			<td>REF 303060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (Forane&#174;)</td>
			<td>Asecia Queenborough</td>
			<td>No B506</td>
			<td>Inhalation Anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketamax&#174;)</td>
			<td>Troikaa Pharmaceuticals Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Ketamine hydrochloride IP, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam (Melonex&#174;)</td>
			<td>Intas Pharmaceuticals Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Histo-Line Laboratories, Italy</td>
			<td>MRS3500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Thread</td>
			<td>Mighty; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>GRM 3660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percoll&#174;</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-0891-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refresh Tears/Eyemist Gel</td>
			<td>Allergan India Private Limited/Sun Pharma, India</td>
			<td>P3060</td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGOT (ASAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGPT (ALAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Cryotome E Cryostat</td>
			<td>Thermo Electron Corporation; US</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade No. 22</td>
			<td>La Medcare, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Board</td>
			<td>Locally made</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical White Tape</td>
			<td>3M India; India</td>
			<td>1530-1</td>
			<td>Micropore Surgical Tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Ethicon, Johnson &#38; Johnson, India</td>
			<td>NW 5047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes (1ml, 26 G)</td>
			<td>Dispo Van; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimmer (Clipper)</td>
			<td>Philips</td>
			<td>NL9206AD-4 DRACHTEN QT9005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing Machine</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>William&#39;s E Media</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>AT125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xylaxin&#174;)</td>
			<td>Indian Immunologicals Limited</td>
			<td></td>
			<td>Sedative, Pre-Anaesthetic, Analgesic and muscle relaxant</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen

אי ספיקת כבד חריפה (אלף) היא מחלה קלינית הנגרמת על ידי חבלות שונות וכתוצאה מכך אובדן מטבולית, ביוכימית, סינתזה, ו הרעלים פונקציות של הכבד. במקרים של נזק בלתי הפיך ביותר בכבד, השתלת כבד אורתוטרופי (OLT) נשאר הטיפול היחיד הזמין. כדי ללמוד את הפוטנציאל התרפויטי של טיפול באלף, הבדיקה המוקדמת במודל החי של אלף היא חיונית. במחקר הנוכחי, מודל אלף בחולדות פותחה על ידי שילוב 70% כריתת hepatectomy חלקית (PHx) וזריקות של פרצטמול (APAP) המספק חלון טיפולי של 48 h. חציון ואת האונות לרוחב השמאלי של הכבד הוסרו לבלו 70% ממסת הכבד APAP ניתנה 24 שעות בניתוח עבור 2 ימים. הישרדות בבעלי חיים באלף המושרה נמצאה בירידה חמורה. ההתפתחות של אלף אושרה על ידי שינוי רמות הסרום של האנזימים אלטין העברת אמינו (ALT), אספרטט העברת אמינו (AST), פוספטאז אלקליין (ALP); שינויים בזמן הפרותרומבין (PT); והערכה של היחס המנורמל הבינלאומי (INR). המחקר של הפרופיל ביטוי הגן על ידי qPCR חשף עלייה ברמות הביטוי של גנים המעורבים אפופטוזיס, דלקת, ובהתקדמות של פציעה בכבד. התנוונות מניוון של hepatocytes וחדירה של תאים חיסוניים נצפתה על ידי הערכה היסטולוגית. הסבירות של אלף אושרה על ידי שיקום של רמות ההישרדות והסרום של ALT, AST, ו-ALP לאחר השתלת הטחול של החולדה בריאה syngeneic. מודל זה מציג חלופה אמינה למודלים הזמינים בעלי חיים כדי ללמוד את הפתופסולוגיה של אלף, כמו גם להעריך את הפוטנציאל של טיפול הרומן של אלף. השימוש בשתי גישות שונות מאפשר גם לבחון את ההשפעה המשולבת של פגיעה בכבד ובתרופות הנובעות מסמים. השגות והכדאיות של ההליך הנוכחי הוא יתרון נוסף של המודל.

אחוז ההישרדות במודלים של בעלי חיים של אלף המינון האופטימלי של APAP לגרום אלף בשילוב עם 70% PHx היה מתוקננת כמו 750 מ"ג/ק"ג משקל הגוף. משטר הטיפול החל 24 שעות לאחר 70% PHx, כאשר בעלי החיים התאושש לחלוטין מהניתוח, וכללה שתי מנות APAP במרווחי זמן 24 h. התמותה נצפתה בשיעור של 80% לאחר הממשל של המינון הש...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen at JoVE.com

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

ספיקת כבד חריפה מודל בעלי חיים שפותחה במחקר הנוכחי מציג חלופה אפשרית למחקר של טיפולים פוטנציאליים. המודל הנוכחי מעסיק את ההשפעה המשולבת של פציעה פיזית ומושרה בתרופות בכבד ומספק חלון זמן מתאים כדי ללמוד את הפוטנציאל של טיפולים חדשניים.

הדור של מודל עכברוש של אי ספיקת כבד חריפה על ידי שילוב 70% כריתת הריאה חלקית ופרצטמול

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

אי ספיקת כבד חריפה או ALF מוגדר בדרך כלל התפתחות מהירה של פגיעה בכבד בכבד בריא מלווה פגיעה חמורה של הפונקציות העיקריות שלה. השתלת כבד אורתוטופית היא התרופה הזמינה היחידה ברוב המקרים. אבל בשל מחסור של תורמי כבד, שיעור התמותה של חולי ALF הוא גבוה מאוד.כדי לחקור את הפוטנציאל של גישות טיפוליות חלופיות ולהבין טוב יותר את הפתופיזיולוגיה של ALF, מודלים של בעלי חיים של המחלה מועסקים. רבים מדגמי ALF מבוססים על ההשפעות hepatotoxic של פרצטמול, פחמן tetrachloride, קונקאנבלין A, lipopolysaccharide, D-גלקטוזאמין ו thioacetamide. עם זאת, אלה יש כמה חסרונות כגון רבייה ירודה והפיכות, רעילות לאיברים חיוניים אחרים, השתקפות לקויה של פתולוגיה של מחלות אנושיות וריאציה מינים.לפיכך, יש צורך במערכת מודל טובה יותר כי הוא לשכפל ומאפשר מרווח זמן מספיק כדי ללמוד את ההשפעות של התערבות טיפולית. במחקר הנוכחי, מודל ALF בחולדות נוצר על ידי שילוב השפעות של כריתת hepatectomy חלקית ו פרצטמול hepatotoxicity. האונה האולטראלית החציונית והשמאלית של הכבד מוסרים כדי לסמל 70% מסת כבד, ויותר מכך, פרצטמול ניתן כדי לגרום ALF.הפיתוח של ALF במודל התאפיין בניתוח ביוכימי והיסטולוגי והיהפיכה של נזק לכבד אושרה על ידי השתלת hepatocytes חולדה בריאה סינגנית. חולדות Wistar בעל משקל גוף בטווח של 180 עד 250 גרם שימשו במחקר הנוכחי. השלבים הבאים מתארים את ההליך הכירורגי לגיוס של ALF בחולדה.החיה היא הרדמה על ידי הזרקת תערובת קטמין-Xylazine תוך-אפית. הרדמה מלאה מאושרת על ידי צביטת בוהן החיה, ונהלים נוספים מתבצעים רק כאשר אין רפלקס דוושה. כדי למנוע התפלת קרנית, טיפת עיניים מבוססת מתיל-תאית carboxy מוחלת על שתי העיניים.החיה מרוסנת ללוח הניתוחים באמצעות סרט לבן. השיער מוסר מהאזור הכירורגי של הבטן הימנית העליונה באמצעות קוצץ חשמלי. לחטא את האתר הכירורגי על ידי שלושה קרצוף לסירוגין של 70% אתנול ו povidone יוד באמצעות רפידות כותנה מעקרות בתנועה מעגלית.העור שיש לחתוך מסומן ממש מתחת לעצם החזה בניצב לשיפויד ומקביל לצלעות. גיליון וילון סטרילי בעל פתח של כשלושה סנטימטרים על סנטימטר אחד ממוקם מעל העור המסומן. חתך רוחבי של כשני עד שלושה סנטימטרים נעשה לאורך הקו המסומן בעזרת אזמל.ההחזקה של העור עם שכבת השריר הבסיסית בקרבת האזור חתוך מוסר בעדינות על ידי קצות כותנה לחים סטריליים. לאחר מכן, חתך רוחבי נעשה באמצעות שכבה צפי ממש מתחת לתהליך xiphoid. האונה השמאלית של הכבד נחשפת על ידי מתן לחץ עדין לבית החזה בעזרת שני קצות כותנה לחים מלוחים.לולאת חוט ניילון סטרילית מחליקה סביב אונה הכבד החשופה. הלולאה נלקחת בזהירות לבסיס האונה בעזרת מטלות ניתוח מיקרו או ניצני כותנה. בעזרת מחזיק מחט מיקרוכירורגיה ומטסות מיקרו, שני הקצוות של הלולאה קשורים, הצבת הקשר קרוב ככל האפשר לבסיס האונה.זה כדי לצמצם את כלי הדם ולהפחית את הדימום לאחר האונה הכבד מוסר. שני קשרים נוספים קשורים בצד השני. האונה הקשורה נחתכת ממש מעל הקשר באמצעות מספריים מיקרו-כירורגיים שמשאירים גדם איסכמי.באופן דומה, האונה החציונית של הכבד מורמת באמצעות קצות כותנה. לזהות את הצורה הייחודית של האונה החציונית של הכבד. מניחים לולאת חוט ניילון מעל האונה, לקשור בחוזקה את הקצוות שלה.שני קשרים נוספים קשורים בצד השני וחותלים את האונה. לאחר הסרת האונות, הלידונום נתפר באמצעות תפר כרום קטגוט 4/0 נספג עם תפרים רציפים ואחריו תפר עור עם תפר פשוט מופרע. לאחר סגירת העור, פתרון יוד povidone מוחל סביב האתר הכירורגי.יריעת הווילון מוסרת והבעל חיים נלקח ממועצת הניתוחים. מנה אנטיביוטית של 12 מיליגרם cefotaxime ב מיליליטר אחד של 5% פתרון גלוקוז ניתנת תוך ניתוחית לחיה כדי להגן עליו מפני הסיכון של זיהום לאחר הניתוח. להקלה על הכאב לאחר הניתוח, meloxicam משכך כאבים, בדרך כלל 1 מ"ג לכל קילוגרם משקל הגוף ניתנת תת עורית לחיה, ואחריו מנה כל יום במשך יומיים.החיה מועברת לכלוב התאוששות חם. החיה נעשית בהכרה תוך 30 עד 40 דקות ומתחיל לזוז. החיה המופעלת מוחזקת בבידוד עד לריפוי מלא של פצעים כירורגיים, דבר שעשוי להימשך שלושה עד ארבעה ימים.עבור גרימת ALF, 750 מיליגרם לק"ג משקל גוף של פרצטמול ואת המנה השנייה של meloxicam מוזרק תוך אפית 24 שעות לאחר הליך כריתת שומן חלקית. משטר מינון זה חוזר על עצמו לאחר 24 שעות. לאחר אינדוקציה של ALF, ההישרדות בבעלי חיים נמצאה ירידה חמורה.כדי לאפיין את התפתחות ALF, בעלי חיים המופעלים היו המתת לחץ ים לאחר מנה שנייה של פרצטמול, מחקרים ביוכימיים והיסטולוגיים שונים נעשו. התוצאות מתוארות קדימה בסרטון. אחוז ההישרדות בקבוצה המושרה ALF נמצאה ירידה חמורה עד 80% תמותה נצפתה בתוך 24 שעות של מנה שנייה של פרצטמול.נזק לכבד ניכר ברמה המורפולוגית בקבוצה הנגרמת על ידי ALF ורק 70% קבוצת כריתת כבד חלקית. בעוד קבוצת הביקורת ורק קבוצת טיפול פרצטמול היה מראה בריא. רמות האנזים של אלנין אמינו transferase, אספרטט אמינו transferase ו phosphatase אלקליין נמצאו גבוהות מאוד בקבוצה המושרה ALF בהשוואה לקבוצות אחרות.ניתוח של פרופיל ביטוי גנים על ידי qPCR הראה ביטוי גבוה של גנים המעורבים אפופטוזיס, דלקת והתקדמות של פגיעה בכבד. המטוקסילין וכתמי אאוסין של חלקי רקמת הכבד חשפו בעיקר hepatocytes נורמלי בקבוצת הביקורת. בקבוצת ALF, בעיקר ניוון שומן כלי רכב מאקרו מתון נצפתה.זמן פרותרומבין ויחס מנורמל בינלאומי נמצאו מוגבהים בקבוצה המושרה ALF, המציין תהליך קרישת דם מעוכב. אחוז ההישרדות נמצאה משוחזרת בקבוצה המושרה ALF לאחר השתלת hepatocytes חולדה בריאה סינגנית. רמות סרום של אנזימים אלנין אמינו transferase, אספרטט אמינו transferase ו phosphatase אלקליין נמצאו משוחזרים בבעלי חיים המושרה ALF לאחר השתלת תאים.שיטה זו של גרימת ALF בחולדות היא לשחזור, מראה היפוך טוב ומספק חלון זמן מתאים כדי לבדוק טיפולים חדשים. לפיכך, מודל זה יכול לשמש מודל מחלה יעיל להערכת גישות טיפוליות פוטנציאליות לטיפול ALF.

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotopic עזר עכברוש כבד השתלה עם זרימה מוסדר פורטל וריד Arterialization בכישלון חריף כבדית

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

ויזואליזציה של התחדשות כלי דם Parenchymal לאחר 70% חלקיות כריתה בעכברים נורמליים

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

שיטה של ​​המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

עכברוש מודל של שיוך מחיצה בכבד, וריד שער הכבד מצדו לניתוח בשלבים Hepatectomy (ALPPS)

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

השתלת intrasplenic של Hepatocytes לאחר Hepatectomy חלקית ב במנוד ראש. SCID עכברים

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

השתלת תאי רקמת שומן-Derived גיליון כדי להפחית את זליגת לאחר קיצור קיבה חלקית במודל של עכברים

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

בידוד של פרפור Cardiomyocytes ממודל עכברוש מטבוליות הקשורות תסמונת באי ספיקת לב עם שבריר פליטה משומר

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...

Induction and Phenotyping of Acute Right Heart Failure in a Large Animal Model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension

אינדוקציה ופנוטיפינג של אי ספיקת לב ימנית חריפה במודל בעלי חיים גדול של יתר לחץ דם ריאתי תרומבואמבולי כרוני

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The ...