Name: generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen
Uploaded: 2019-11-27T13:00:00
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इस काम को भारत सरकार के जैव प्रौद्योगिकी विभाग से राष्ट्रीय इम्यूनोलॉजी संस्थान नई दिल्ली को प्राप्त कोर ग्रांट ने समर्थन दिया।

नीचे वर्णित प्रक्रिया को राष्ट्रीय इम्यूनोलॉजी संस्थान, नई दिल्ली की संस्थागत पशु आचार समिति ने मंजूरी दे दी है। अनुमोदन का सीरियल रेफरेंस नंबर आईएईसी #355/14 है ।
1. तैयारी
<ol><li>दास बी एट अल<sup class="xref...

एएलएफ के लिए एक उपयुक्त पशु मॉडल का विकास रोगजनकता और एएलएफ की प्रगति की बेहतर समझ के लिए सर्वोपरि है। एक अच्छी तरह से विशेषता एएलएफ पशु मॉडल भी एएलएफ के खिलाफ नए चिकित्सीय दृष्टिकोणों के विकास और परीक?...

तीव्र जिगर की विफलता (ALF) को अमेरिकन एसोसिएशन फॉर द स्टडी फॉर द स्टडी फॉर लिवर डिजीज द्वारा क्षति के किसी भी पूर्व संकेत के बिना तीव्र यकृत चोट के तेजी से विकास के रूप में परिभाषित किया गया है और यह जिगरकेसिंथेटिक, मेटाबोलिक और विषहरण कार्यों की गंभीर हानि की विशेषता है। एएलएफ पुरानी यकृत विफलता से अलग होता है जहां विफलता लंबे समय तक और तीव्र पुरानी यकृत विफलता (एसीएलएफ) से होती है, जहां पुरानी यकृत बीमारियों2,3,4के परिणामस्वरूप अचानक यकृत क्षति होती है। एएलएफ के लिए एकमात्र उपलब्ध इलाज ऑर्थोटोपिक लिवर ट्रांसप्लांट (ओएलटी) है, या मौत हो सकती है। लिवर डोनर्स की कमी के कारण एएलएफ से पीड़ित मरीजों में मृत्यु दर काफी ज्यादा है।
वैकल्पिक चिकित्सीय दृष्टिकोणों की क्षमता का अध्ययन करने और एएलएफ के रोगविज्ञान को बेहतर ढंग से समझने के लिए, पशु मॉडल जो मनुष्यों में होने वाले एएलएफ को प्रतिबिंबित कर सकते हैं, की आवश्यकता है। पहले से उपलब्ध एएलएफ पशु मॉडल ों में से कई में कई कमियां हैं। एसीटामिनोफेन (एपीएपी) प्रभाव प्रजनन करना मुश्किल है लेकिन लौकिक, नैदानिक, जैव रासायनिक और रोग मापदंडों के मामले में निकटतम समानताएं हैं। एपीएपी द्वारा हीमोग्लोबिन के ऑक्सीकरण और इसके मध्यवर्ती5,6,7के कारण मेथोग्लोबिनमिया की उपस्थिति के कारण एपीएपी प्रेरित पशु मॉडल अक्सर समस्याओं का सामना करते हैं । एक और समस्या अप्रत्याशित खुराक प्रतिक्रियाओं और मृत्यु के समय से परिलक्षित प्रजनन क्षमता की कमी है। कार्बन टेट्रा क्लोराइड (सीसीएल4)का उपयोग करके उत्पादित एएलएफ पशु मॉडलों में खराब प्रजनन क्षमता8,9,10,11है । Concavalin A (कांग्रेस ए) और लिपोपलिसैक्हरिड (एलपीएस) प्रेरित एएलएफ पशु मॉडल मानव रोग के नैदानिक पैटर्न को प्रतिबिंबित नहीं करते हैं, हालांकि उन्हें ऑटोइम्यून यकृत रोगों में शामिल सेलुलर तंत्र के अध्ययन में और सेप्सिस के अध्ययन में क्रमशः12,13,14,15के फायदे हैं। इसी तरह, थिओएसेटामाइड (टीएए) को भी एक सक्रिय मेटाबोलाइट थियोएसेटामाइड सल्फासऑक्साइड में बायोट्रांसफॉर्मेशन की आवश्यकता होती है और प्रजातियों की भिन्नता16,17,18,19को दर्शाती है। डी-गैलेक्टोसामाइन (डी-गल) एएलएफ के समान कुछ जैव रासायनिक, मेटाबोलिक और शारीरिक परिवर्तन पैदा करता है लेकिन पूरे एएलएफ रोग की स्थिति20,21,22,23को प्रतिबिंबित करने में सक्षम नहीं है। एएलएफ मॉडल विकसित करने के लिए इनमें से दो या अधिक तरीकों को मिलाने के बहुत कम प्रयास किए गए हैं जो एएलएफ सिंड्रोम को बेहतर तरीके सेप्रतिबिंबितकरने में सक्षम है । इसलिए, आगे के अध्ययनके लिए एक मॉडल है कि रोग मापदंडों को प्रतिबिंबित कर सकते है विकसित करने के लिए आवश्यक हैं, बेहतर प्रजनन क्षमता है, और एक चिकित्सकीय हस्तक्षेप के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए पर्याप्त समय प्रदान करता है ।
वर्तमान अध्ययन में, आंशिक हेपेटेक्टोमी (पीएचएक्स) के प्रभाव और हेपेटोटॉक्स रिएजेंट की कम खुराक के संयोजन से चूहों में एक वैकल्पिक एएलएफ मॉडल बनाया गया है। एएपीएपी की लिवर इंजरी5,24,25को पैदा करने में अच्छी तरह से स्थापित भूमिका है । यह एक व्यापक रूप से उपयोग किया जाने वाला एनाल्जेसिक है और जहरीले मेटाबोलाइट्स बनाकर सुप्राथेराप्यूटिक खुराक पर जिगर के लिए विषाक्त है। एपीएपी विकसित देशों में कई मौतों का कारण है । आंशिक हेपेटेक्टोमी के कारण शारीरिक चोट सूजन के साथ-साथ जिगर के उत्थान में शामिल विभिन्न प्रक्रियाओं की सक्रियता शुरू करती है। हेपेटोटॉक्सिक एजेंट एपीएपी का इंजेक्शन जिगर में शत्रुतापूर्ण वातावरण का कारण बनता है, जिससे हेपेटोसाइट्स के प्रसार को रोका जा सकता है। यह जानवर पर तनाव की अवधि को कम करता है, जो हेपेटोक्सिन की छोटी खुराक के साथ संयुक्त होने पर, प्रक्रिया की बेहतर प्रजनन क्षमता की ओर जाता है। इसलिए, इस मॉडल का उपयोग करके, दो प्रकार के यकृत चोटों के संयोजन प्रभाव का अध्ययन किया गया है। विकसित एएलएफ पशु मॉडल की विशेषता के लिए, शारीरिक और जैव रासायनिक मापदंडों का अध्ययन किया गया है। एएलएफ की सफल रिवर्सिबिलिटी की पुष्टि सिंजेनिक स्वस्थ चूहे हेपेटोसाइट्स के प्रत्यारोपण से हुई थी।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetaminophen (Biocetamol)</td>
			<td>EG Pharmaceuticals</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alkaline Phosphatase Kit (DEA)</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated analyser</td>
			<td>Tulip, Alto Santracruz, India</td>
			<td>Screen Maaster 3000</td>
			<td>Biochemical analyser for liver functional test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (Povidon-Iodine Solution)</td>
			<td>Win-Medicare; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biological safety cabinet (Class I)</td>
			<td>Kartos international; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bright Field Microscope</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>LX51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefotaxime (Taxim&#174;)</td>
			<td>AlKem; India</td>
			<td></td>
			<td>cefotaxime sodium injection, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Strainer</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>CLS431752</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type I</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>17100-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Buds</td>
			<td>Pure Swabs Pvt Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape Sheet</td>
			<td>JSD Surgicals, Delhi, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX Mountant</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>6522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin Y solution, alcoholic</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>HT110132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Anesthesia System</td>
			<td>Ugo Basile; Italy</td>
			<td>211000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Himedia, India</td>
			<td>GRM077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removing cream (Veet&#174;)</td>
			<td>Reckitt Benckiser, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Solution, Mayer&#39;s</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>MHS16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>RM554</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase From Sheep Testes</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>H6254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I.V. Cannula (Plusflon)</td>
			<td>Mediplus, India</td>
			<td>Ref 1732411420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>BD; US</td>
			<td>REF 303060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (Forane&#174;)</td>
			<td>Asecia Queenborough</td>
			<td>No B506</td>
			<td>Inhalation Anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketamax&#174;)</td>
			<td>Troikaa Pharmaceuticals Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Ketamine hydrochloride IP, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam (Melonex&#174;)</td>
			<td>Intas Pharmaceuticals Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Histo-Line Laboratories, Italy</td>
			<td>MRS3500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Thread</td>
			<td>Mighty; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>GRM 3660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percoll&#174;</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-0891-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refresh Tears/Eyemist Gel</td>
			<td>Allergan India Private Limited/Sun Pharma, India</td>
			<td>P3060</td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGOT (ASAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGPT (ALAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Cryotome E Cryostat</td>
			<td>Thermo Electron Corporation; US</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade No. 22</td>
			<td>La Medcare, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Board</td>
			<td>Locally made</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical White Tape</td>
			<td>3M India; India</td>
			<td>1530-1</td>
			<td>Micropore Surgical Tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Ethicon, Johnson &#38; Johnson, India</td>
			<td>NW 5047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes (1ml, 26 G)</td>
			<td>Dispo Van; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimmer (Clipper)</td>
			<td>Philips</td>
			<td>NL9206AD-4 DRACHTEN QT9005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing Machine</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>William&#39;s E Media</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>AT125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xylaxin&#174;)</td>
			<td>Indian Immunologicals Limited</td>
			<td></td>
			<td>Sedative, Pre-Anaesthetic, Analgesic and muscle relaxant</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen

एक्यूट लिवर फेलियर (एएलएफ) एक नैदानिक स्थिति है जिसके परिणामस्वरूप विभिन्न एटिओलोजी होते हैं जिसके परिणामस्वरूप मेटाबोलिक, बायोकेमिकल, संश्लेषण और यकृत के डिटॉक्सिफाइंग कार्यों का नुकसान होता है। सबसे अपरिवर्तनीय जिगर क्षति के मामलों में, ऑर्थोट्रोपिक लिवर प्रत्यारोपण (OLT) केवल उपलब्ध उपचार रहता है । ALF के लिए एक उपचार की चिकित्सीय क्षमता का अध्ययन करने के लिए, ALF के एक पशु मॉडल में इसका पूर्व परीक्षण आवश्यक है । वर्तमान अध्ययन में, चूहों में एक एएलएफ मॉडल 70% आंशिक हेपेटेक्टोमी (पीएचएक्स) और एसीटामिनोफेन (एपीएपी) के इंजेक्शन के संयोजन से विकसित किया गया था जो 48 एच की चिकित्सीय खिड़की प्रदान करता है। जिगर के औसत और बाएं पार्श्व पालि को लिवर द्रव्यमान का 70% उत्पाद करने के लिए हटा दिया गया था और एपीएपी को 2 दिनों के लिए 24 घंटे पोस्टसर्जिकल दिया गया था। एएलएफ-प्रेरित जानवरों में अस्तित्व में गंभीर रूप से कमी पाई गई । एएलएफ के विकास की पुष्टि एंजाइमों के परिवर्तित सीरम स्तर से हुई थी, जो एलेनिन अमीनो ट्रांसफरेज़ (एएलटी), एस्पार्टेट अमीनो ट्रांसफरेज़ (एसीटी), क्षारीय फॉस्फेटेज (एएलपी); प्रोथ्रोबिन समय (पीटी) में परिवर्तन; और अंतर्राष्ट्रीय सामान्यीकृत अनुपात (आईएनआर) का मूल्यांकन। क्यूपीसीआर द्वारा जीन अभिव्यक्ति प्रोफ़ाइल के अध्ययन से एपोप्टोसिस, सूजन और यकृत की चोट की प्रगति में शामिल जीन के अभिव्यक्ति स्तर में वृद्धि का पता चला। हेपेटोसाइट्स का डिजास्टर और प्रतिरक्षा कोशिकाओं की घुसपैठ हिस्टोलॉजिकल मूल्यांकन द्वारा देखी गई थी। एएलएफ की रिवर्सिबिलिटी की पुष्टि सिंजेनिक स्वस्थ चूहे हेपेटोसाइट्स के इंट्रास्पलिक प्रत्यारोपण के बाद एएलटी, एसीटी और एएलपी के अस्तित्व और सीरम स्तर की बहाली से हुई थी। यह मॉडल एएलएफ के रोगविज्ञान का अध्ययन करने के साथ-साथ एएलएफ के लिए एक उपन्यास चिकित्सा की क्षमता का मूल्यांकन करने के लिए उपलब्ध एएलएफ पशु मॉडल के लिए एक विश्वसनीय विकल्प प्रस्तुत करता है। दो अलग-अलग दृष्टिकोणों का उपयोग शारीरिक और दवा-प्रेरित यकृत चोट के संयुक्त प्रभाव का अध्ययन करना भी संभव बनाता है। वर्तमान प्रक्रिया की प्रजनन क्षमता और व्यवहार्यता मॉडल का एक अतिरिक्त लाभ है।

एएलएफ के पशु मॉडलमें सर्वाइवल प्रतिशत एपीएपी की इष्टतम खुराक ७०% पीएचएक्स के साथ संयोजन में एएलएफ का कारण ७५० मिलीग्राम/किलोग्राम शरीर के वजन के रूप में मानकीकृत किया गया था । उपचार आहार 70% PHx के ?...

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Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

वर्तमान अध्ययन में विकसित तीव्र जिगर विफलता पशु मॉडल संभावित उपचारों के अध्ययन के लिए एक व्यवहार्य विकल्प प्रस्तुत करता है । वर्तमान मॉडल शारीरिक और नशीली दवाओं से प्रेरित हेपेटिक चोट के संयुक्त प्रभाव को रोजगार और उपन्यास चिकित्सा की क्षमता का अध्ययन करने के लिए एक उपयुक्त समय खिड़की प्रदान करता है ।

70% आंशिक हेपेटेक्टोमी और एसीटामिनोफेन के संयोजन से तीव्र यकृत विफलता के चूहे मॉडल की पीढ़ी

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

तीव्र जिगर की विफलता या ALF आम तौर पर एक स्वस्थ जिगर में जिगर की चोट के तेजी से विकास के रूप में परिभाषित किया गया है और इसके प्रमुख कार्यों की गंभीर हानि के साथ है । ऑर्थोटोपिक लिवर प्रत्यारोपण अधिकांश मामलों में एकमात्र उपलब्ध इलाज है। लेकिन लिवर डोनर्स की कमी के कारण एएलएफ के मरीजों में मृत्यु दर बहुत ज्यादा है।वैकल्पिक चिकित्सीय दृष्टिकोणों की क्षमता का अध्ययन करने और एएलएफ के रोगविज्ञान को बेहतर ढंग से समझने के लिए, रोग के पशु मॉडल नियोजित किए जाते हैं। एएलएफ के कई मॉडल एसिटामिनोफेन, कार्बन टेट्राक्लोराइड, कॉनकानवेलियन ए, लिपोपोलिसाकराइड, डी-गैलेक्टोसामाइन और थिओएस्टामामाइड के हेपेटोटॉक्सिक प्रभावों पर आधारित हैं। हालांकि, इनमें खराब प्रजनन क्षमता और रिवर्सिबिलिटी, अन्य महत्वपूर्ण अंगों के लिए विषाक्तता, मानव रोग विकृति और प्रजातियों में भिन्नता का खराब प्रतिबिंब जैसी कई कमियां हैं।इसलिए, एक बेहतर मॉडल प्रणाली की आवश्यकता है जो प्रजनन योग्य है और चिकित्सीय हस्तक्षेप के प्रभावों का अध्ययन करने के लिए पर्याप्त समय अंतराल की अनुमति देता है। वर्तमान अध्ययन में, आंशिक हेपेटेक्टॉमी और एसीटामिनोफेन हेपेटोटॉक्सिकिटी के प्रभावों के संयोजन से चूहों में एक एएलएफ मॉडल बनाया गया है। जिगर के औसत और बाएं पार्श्व पालि को उत्पाद शुल्क 70% यकृत द्रव्यमान में हटा दिया जाता है, और इसके अलावा, एसिटामिनोफेन को एएलएफ का कारण बनने के लिए दिया जाता है।मॉडल में एएलएफ के विकास को जैव रासायनिक और हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण की विशेषता है और यकृत क्षति की रिवर्सिबिलिटी सिनेजेनिक स्वस्थ चूहे हेपेटोसाइट्स के प्रत्यारोपण द्वारा पुष्टि की गई है। वर्तमान अध्ययन में 180 से 250 ग्राम की सीमा के भीतर शरीर का वजन होने वाले विस्टार चूहों का उपयोग किया गया था। निम्नलिखित चरण चूहे में एएलएफ को शामिल करने के लिए शल्य चिकित्सा प्रक्रिया का वर्णन करते हैं।जानवर को केटामाइन-जाइलाज़ीन मिश्रण को इंट्रापेरिटेली इंजेक्शन देकर एनेस्थेटाइज्ड किया जाता है। जानवर के पैर के पैर की अंगुली को पिंच करके पूर्ण एनेस्थेटाइजेशन की पुष्टि की जाती है, और आगे की प्रक्रियाएं तभी की जाती हैं जब कोई पेडल पलटा न हो। कॉर्नियल डेसीफिकेशन को रोकने के लिए, दोनों आंखों पर कार्बक्सी मिथाइल-सेल्यूलोज आधारित आई ड्रॉप लागू किया जाता है।जानवर को सफेद टेप का उपयोग करके सर्जिकल बोर्ड पर रोका जाता है। बाल एक बिजली क्लिपर का उपयोग कर ऊपरी दाहिने पेट सर्जिकल क्षेत्र से हटा दिया जाता है। परिपत्र गति में निष्फल कपास पैड का उपयोग करके 70% इथेनॉल और पोविडोन आयोडीन के तीन बारी-बारी से स्क्रब द्वारा सर्जिकल साइट को कीटाणुरहित करें।त्वचा को काटने के लिए xiphoid और रिबकेज के समानांतर के लिए स्टर्नम लंबवत के नीचे चिह्नित किया जाता है। एक बाँझ ड्रेप शीट जिसमें एक सेंटीमीटर द्वारा लगभग तीन सेंटीमीटर का उद्घाटन होता है, चिह्नित त्वचा पर रखा जाता है। स्केलपेल की मदद से चिह्नित रेखा के साथ लगभग दो से तीन सेंटीमीटर का एक ट्रांसवर्स चीरा बनाया जाता है।चीर क्षेत्र के आसपास अंतर्निहित मांसपेशियों की परत के साथ त्वचा का लगाव धीरे बाँझ गीला कपास युक्तियों द्वारा हटा दिया जाता है। इसके बाद, एक ट्रांसवर्स चीरा सिर्फ xiphoid प्रक्रिया के नीचे पेरिटोनियल परत के माध्यम से किया जाता है । दो खारे गीले कॉटन टिप्स की मदद से छाती को कोमल दबाव देकर लिवर की बाईं पालि को उजागर किया जाता है।एक बाँझ नायलॉन धागा पाश उजागर जिगर पालि के आसपास फिसल गया है । लूप को सावधानीपूर्वक माइक्रो विच्छेदन संदंश या कपास की कलियों की मदद से पालि के आधार पर ले जाया जाता है। माइक्रोसर्जरी सुई धारक और माइक्रो फोर्सप्स की मदद से, लूप के दो सिरों को बांधा जाता है, जो गाँठ को यथासंभव लोब के आधार के करीब रखते हैं।यह रक्त वाहिकाओं को संकुचित करने और जिगर के पालि को हटाने के बाद रक्तस्राव को कम करने के लिए है। दूसरी तरफ दो अतिरिक्त गांठें बंधी हुई हैं। बंधे पालि को माइक्रोसर्जरी कैंची का उपयोग करके गाँठ के ठीक ऊपर काटा जाता है जो इस्कीमिक स्टंप को छोड़ देता है।इसी तरह, कपास युक्तियों का उपयोग करके जिगर के औसत पालि को उठाया जाता है। जिगर के औसत पालि के अद्वितीय आकार को पहचानें। पालि के ऊपर एक नायलॉन धागा पाश रखें, मजबूती से अपने सिरों टाई ।दो अतिरिक्त समुद्री मील दूसरी तरफ बंधे हुए हैं और पालि को फिर से काटते हैं। लोब्स को हटाने के बाद, पेरिटोनम को अवशोषित कैटगट क्रोमिक 4/0 अवशोषित सीवन का उपयोग करके निरंतर टांके के साथ टांके का उपयोग करके टांके लगाया जाता है जिसके बाद त्वचा को सरल बाधित सीवन के साथ टांके आता है। त्वचा बंद होने के बाद, शल्य चिकित्सा साइट के चारों ओर पोविडोन आयोडीन समाधान लागू किया जाता है।ड्रेप शीट को हटा दिया जाता है और जानवर को सर्जरी बोर्ड से उतार लिया जाता है। 5% ग्लूकोज समाधान के एक मिलीलीटर में 12 मिलीग्राम सेफोटैक्सिम की एंटीबायोटिक खुराक जानवर को इंट्रापेरिटेली दी जाती है ताकि इसे पश्चात संक्रमण के जोखिम से बचाया जा सके। सर्जरी के बाद दर्द से राहत के लिए, एनाल्जेसिक मेलोक्सिकम, आमतौर पर 1 मिलीग्राम प्रति किलोग्राम शरीर का वजन जानवर को चमड़े के नीचे दिया जाता है, इसके बाद प्रत्येक दिन दो दिनों के लिए एक खुराक होती है।जानवर को गर्म ठीक होने वाले पिंजरे में ले जाया जाता है। जानवर 30 से 40 मिनट के भीतर होश में आ जाता है और हिलना शुरू कर देता है। ऑपरेशन किए गए जानवर को तब तक अलग-थलग रखा जाता है जब तक सर्जिकल घाव पूरी तरह से ठीक नहीं हो जाते, जिसमें तीन से चार दिन लग सकते हैं।एएलएफ को प्रेरित करने के लिए, एसिटामिनोफेन के 750 मिलीग्राम प्रति किलोग्राम शरीर का वजन और मेलोक्सीकम की दूसरी खुराक आंशिक हेपेटेक्टॉमी प्रक्रिया के 24 घंटे बाद इंट्रापेरिटोनली इंजेक्शन दी जाती है। यह खुराक आहार 24 घंटे के बाद दोहराया जाता है। एएलएफ के शामिल होने के बाद जानवरों में अस्तित्व में गंभीर रूप से कमी पाई गई ।एएलएफ के विकास की विशेषता के लिए, एसीटामिनोफेन की दूसरी खुराक के बाद संचालित जानवरों को इच्छामृत्यु दी गई थी, और विभिन्न जैव रासायनिक और हिस्टोलॉजिकल अध्ययन किए गए थे। वीडियो में आगे के परिणाम बताए गए हैं । एएलएफ प्रेरित समूह में जीवित रहने के प्रतिशत में गंभीर रूप से कमी पाई गई और एसिटामिनोफेन की दूसरी खुराक के 24 घंटे के भीतर ८०% तक मृत्यु दर देखी गई ।एएलएफ प्रेरित समूह में रूपात्मक स्तर पर यकृत क्षति स्पष्ट थी और केवल 70% आंशिक हेपेटेक्टॉमी समूह था। जबकि नियंत्रण समूह और केवल एसीटामिनोफेन उपचारित समूह में स्वस्थ उपस्थिति थी। अन्य समूहों की तुलना में एएलएफ प्रेरित समूह में एलेनिन अमीनो ट्रांसफरेज, एस्पार्टेट अमीनो ट्रांसफरेज और क्षारीय फॉस्फेटेस का एंजाइम स्तर अत्यधिक ऊंचा पाया गया।क्यूपीसीआर द्वारा जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइल के विश्लेषण से एपोप्टोसिस, सूजन और यकृत की चोट की प्रगति में शामिल जीन की ऊंचा अभिव्यक्ति दिखाई दी । लिवर टिश्यू सेक्शन के हेमेटॉक्सीलिन और इओसिन स्टेनिंग से कंट्रोल ग्रुप में ज्यादातर नॉर्मल हेपेटोसाइट्स का पता चला । एएलएफ समूह में, ज्यादातर मध्यम मैक्रो वेसिकुलर फैटी डिजनरेशन देखा गया।प्रोथ्रोम्बिन समय और अंतर्राष्ट्रीय सामान्यीकृत अनुपात को एएलएफ प्रेरित समूह में ऊंचा पाया गया, जो रक्त जमाव प्रक्रिया में रुकावट का संकेत है । सर्वाइवल प्रतिशत को सिनेजेनिक स्वस्थ चूहा हेपेटोसाइट्स के प्रत्यारोपण के बाद एएलएफ प्रेरित समूह में बहाल पाया गया । कोशिका प्रत्यारोपण के बाद एएलएफ प्रेरित जानवरों में एंजाइमों के सीरम का स्तर एलेनिन अमीनो ट्रांसफरेज, एस्पार्टेट अमीनो ट्रांसफरेज और क्षारीय फॉस्फेटेस को बहाल किया गया ।चूहों में एएलएफ को प्रेरित करने की यह विधि प्रजनन योग्य है, अच्छी रिवर्सिबिलिटी दिखाती है और नए उपचारों का परीक्षण करने के लिए एक उपयुक्त समय खिड़की प्रदान करती है। इसलिए, यह मॉडल एएलएफ के इलाज के लिए संभावित चिकित्सीय दृष्टिकोणों के मूल्यांकन के लिए एक कुशल रोग मॉडल के रूप में काम कर सकता है।

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

यकृत धमनी पुनर्निर्माण के साथ आंशिक orthotopic लीवर ट्रांसप्लांटेशन के एक चूहे मॉडल के लिए शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotopic सहायक चूहा जिगर प्रत्यारोपण के साथ तीव्र यकृत विफलता में पोर्टल शिरा उपर्युक्त क्रिया फ्लो विनियमित

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

सामान्य चूहों में 70% आंशिक hepatectomy के बाद संवहनी और Parenchymal उत्थान के दृश्य

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

के प्रत्यक्ष कमानी इंट्रा यकृत प्रसव के एक चूहा जिगर hilar क्लैंप मॉडल का उपयोग करते हुए विधि

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

चूहा मॉडल के लिए संबद्ध जिगर विभाजन और पोर्टल नस बंधाव के मंचन के लिए Hepatectomy (ALPPS) प्रक्रिया

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

मंजूरी में आंशिक Hepatectomy के बाद हेपैटोसाइट्स की Intrasplenic ट्रांसप्लांटेशन । SCID चूहों

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

फिर से Arterialized चूहा आंशिक vivo पोत में एक के साथ जिगर ट्रांसप्लांटेशन-उंमुख 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

वसा ऊतक के प्रत्यारोपण-व्युत्पन्न स्टेम सेल शीट एक चूहा मॉडल में आंशिक Colectomy के बाद रिसाव को कम करने के लिए

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

अलिंद Cardiomyocytes का एक चूहा मॉडल से चयापचय सिंड्रोम-संबंधित हृदय विफलता संरक्षित बेदखली अंश के साथ अलगाव

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...

Induction and Phenotyping of Acute Right Heart Failure in a Large Animal Model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension

क्रोनिक थ्रोम्बोएम्बोलिक पल्मोनरी हाइपरटेंशन के एक बड़े पशु मॉडल में तीव्र सही दिल की विफलता का प्रेरण और फेनोटाइपिंग

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The ...