Name: generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen
Uploaded: 2019-11-27T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen at JoVE.com

Bu çalışma Biyoteknoloji Bölümü, Hindistan Hükümeti Ulusal İmmünoloji Enstitüsü, Yeni Delhi alınan çekirdek hibe tarafından desteklenmiştir.

Aşağıda açıklanan prosedür, Yeni Delhi Ulusal İmmünoloji Enstitüsü Kurumsal Hayvan Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır. Onay seri referans numarası IAEC#355/14'tür.
1. Hazırlık
<ol><li>Das B ve ark.26tarafından daha önce açıklandığı gibi cerrahi işlem için hazırlanın.</li>
	<li>Vücut ağırlığı 200-250 g olan 6-8 haftalık inbred Wistar sıçanları kullanın.</li>
	<li>Standart hayvan bakım koşulları altında ev hayvanları ve i...

ALF için uygun bir hayvan modelinin geliştirilmesi patogenezin daha iyi anlaşılması ve ALF'nin ilerlemesi için çok önemlidir. Iyi karakterize ALF hayvan modeli de alf karşı yeni terapötik yaklaşımların geliştirilmesi ve deneme için fırsat sağlar. Birçokgirişimalf6,12, 21,23,46,47,<sup class="xre...

Akut karaciğer yetmezliği (ALF) Amerikan Derneği Karaciğer Hastalıkları Çalışma için herhangi bir hasar belirti olmadan akut karaciğer hasarının hızlı gelişimi olarak tanımlanır ve karaciğer ciddi bozulma ile karakterizedir, metabolik, ve karaciğer detoksifiye fonksiyonları1. ALF, uzun bir süre boyunca neden olduğu karaciğer hasarı ve ani karaciğer hasarı kronik karaciğerhastalıkları2 ,3,4sonucu gerçekleşir akut kronik karaciğer yetmezliği (ACLF), oluşur kronik karaciğer yetmezliği farklıdır . ALF için mevcut tek tedavi ortotopik karaciğer nakli (OLT), ya da ölüm oluşabilir. Karaciğer donör sıkıntısı nedeniyle, ALF muzdarip hastalarda mortalite oranı çok yüksektir.
Alternatif terapötik yaklaşımların potansiyelini incelemek ve ALF'nin patofizyolojisini daha iyi anlamak için, insanlarda meydana gelen ALF'yi yansıtabilen hayvan modellerine ihtiyaç vardır. Zaten mevcut ALF hayvan modellerinin çoğu birkaç eksiklikleri var. Asetaminofen (APAP) etkileri nin çoğaltılması zordur ancak temporal, klinik, biyokimyasal ve patolojik parametreler açısından en yakın benzerliklere sahiptir. APAP kaynaklı hayvan modelleri sık sık APAP ve ara5,6,7hemoglobin oksidasyonu nedeniyle methemoglobine varlığı nedeniyle sorunlarla karşılaşır. Başka bir sorun öngörülemeyen doz yanıtları ve ölüm saati yansıyan tekrarlanabilirlik eksikliğidir. Karbon tetra klorür (CCl4)kullanılarak üretilen ALF hayvan modelleri8,9,10,11'de düşük tekrarlanabilirlik vardır. Konkavalin A (Con A) ve lipoplysaccharide (LPS) indüklenen ALF hayvan modelleri insan hastalığının klinik modelini yansıtmaz, onlar otoimmün karaciğer hastalıkları ve sepsis çalışmada sırasıyla dahil hücresel mekanizmaların çalışmada avantajları olmasına rağmen12,13,14,15. Benzer şekilde, tiyoacetamide (TAA) da aktif bir metabolit tiyoacetamide sülfoksit biyotransformasyon gerektirir ve türlerin varyasyongösterir 16,17,18,19. D-galaktosamin (D-Gal) bazı biyokimyasal üretir, metabolik, ve fizyolojik değişiklikler ALF benzer ama tüm ALF patolojik durumu yansıtmak mümkün değildir20,21,22,23. Daha iyi bir şekilde ALF sendromu yansıtmak mümkün bir ALF modeli geliştirmek için bu yöntemlerin iki veya daha fazla birleştirmek için çok az girişimleri olmuştur13. Bu nedenle, daha fazla çalışma hastalık parametrelerini yansıtabilir bir model geliştirmek için gereklidir, daha iyi tekrarlanabilirlik vardır, ve terapötik bir müdahalenin etkilerini incelemek için yeterli zaman sağlar.
Mevcut çalışmada, sıçanlarda alternatif bir ALF modeli parsiyel hepatektomi (PHx) ve hepatotoksik reaktifin daha düşük dozlarda etkileri birleştirilerek oluşturulmuştur. APAP karaciğer hasarına neden iyi kurulmuş bir role sahiptir5,24,25. Yaygın olarak kullanılan bir analjeziktir ve toksik metabolitler oluşturarak supratherapeutic dozlarda karaciğer için toksiktir. APAP gelişmiş ülkelerde birçok ölüm nedenidir. Kısmi hepatektominin neden olduğu fiziksel yaralanma, inflamasyonla ilgili çeşitli süreçlerin aktivasyonunun yanı sıra karaciğer rejenerasyonunu da başlatır. Hepatotoksik ajan APAP enjeksiyonu karaciğerde düşmanca bir ortama neden olur, hepatositlerin çoğalmasını önler. Bu hayvan üzerindeki stres süresini azaltır, hangi hepatotoksin daha küçük dozlarda ile kombine edildiğinde, prosedürün daha iyi tekrarlanabilirlik yol açar. Bu nedenle, bu model kullanılarak, karaciğer yaralanmaları iki tür bir kombinator etkisi çalışılmıştır. Geliştirilen ALF hayvan modelini karakterize etmek için fizyolojik ve biyokimyasal parametreler incelenmiştir. AlF'nin başarılı geri dönüşü sinjenezik sağlıklı sıçan hepatositlerinin transplantasyonu ile doğrulandı.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetaminophen (Biocetamol)</td>
			<td>EG Pharmaceuticals</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alkaline Phosphatase Kit (DEA)</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated analyser</td>
			<td>Tulip, Alto Santracruz, India</td>
			<td>Screen Maaster 3000</td>
			<td>Biochemical analyser for liver functional test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (Povidon-Iodine Solution)</td>
			<td>Win-Medicare; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biological safety cabinet (Class I)</td>
			<td>Kartos international; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bright Field Microscope</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>LX51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefotaxime (Taxim&#174;)</td>
			<td>AlKem; India</td>
			<td></td>
			<td>cefotaxime sodium injection, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Strainer</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>CLS431752</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type I</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>17100-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Buds</td>
			<td>Pure Swabs Pvt Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape Sheet</td>
			<td>JSD Surgicals, Delhi, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX Mountant</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>6522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin Y solution, alcoholic</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>HT110132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Anesthesia System</td>
			<td>Ugo Basile; Italy</td>
			<td>211000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Himedia, India</td>
			<td>GRM077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removing cream (Veet&#174;)</td>
			<td>Reckitt Benckiser, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Solution, Mayer&#39;s</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>MHS16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>RM554</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase From Sheep Testes</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>H6254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I.V. Cannula (Plusflon)</td>
			<td>Mediplus, India</td>
			<td>Ref 1732411420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>BD; US</td>
			<td>REF 303060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (Forane&#174;)</td>
			<td>Asecia Queenborough</td>
			<td>No B506</td>
			<td>Inhalation Anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketamax&#174;)</td>
			<td>Troikaa Pharmaceuticals Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Ketamine hydrochloride IP, No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam (Melonex&#174;)</td>
			<td>Intas Pharmaceuticals Ltd; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders straight &#38; 
			curved</td>
			<td>Mercian; England</td>
			<td>BS-13-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Histo-Line Laboratories, Italy</td>
			<td>MRS3500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Thread</td>
			<td>Mighty; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>GRM 3660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percoll&#174;</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-0891-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refresh Tears/Eyemist Gel</td>
			<td>Allergan India Private Limited/Sun Pharma, India</td>
			<td>P3060</td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Major Surgicals; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGOT (ASAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SGPT (ALAT) KIT</td>
			<td>Coral Clinical System, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Cryotome E Cryostat</td>
			<td>Thermo Electron Corporation; US</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma; US</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade No. 22</td>
			<td>La Medcare, India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Board</td>
			<td>Locally made</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical White Tape</td>
			<td>3M India; India</td>
			<td>1530-1</td>
			<td>Micropore Surgical Tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Ethicon, Johnson &#38; Johnson, India</td>
			<td>NW 5047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes (1ml, 26 G)</td>
			<td>Dispo Van; India</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimmer (Clipper)</td>
			<td>Philips</td>
			<td>NL9206AD-4 DRACHTEN QT9005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing Machine</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td>No specific Catalog Number (Local Procurement)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>William&#39;s E Media</td>
			<td>Himedia; India</td>
			<td>AT125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xylaxin&#174;)</td>
			<td>Indian Immunologicals Limited</td>
			<td></td>
			<td>Sedative, Pre-Anaesthetic, Analgesic and muscle relaxant</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of a rat model of acute liver failure by combining 70% partial hepatectomy and acetaminophen

Akut karaciğer yetmezliği (ALF), karaciğerin metabolik, biyokimyasal, sentezleme ve detoksifiye fonksiyonlarının kaybına neden olan çeşitli etiyolojilerin neden olduğu klinik bir durumdur. Çoğu geri dönüşümsüz karaciğer hasarı durumlarda, ortotropik karaciğer nakli (OLT) mevcut tek tedavi kalır. ALF için bir tedavinin tedavi potansiyelini incelemek için, ALF bir hayvan modeli nde önceki test esastır. Mevcut çalışmada sıçanlarda ALF modeli %70 parsiyel hepatektomi (PHx) ve 48 saat tedavi penceresi sağlayan asetaminofen (APAP) enjeksiyonları birleştirilerek geliştirilmiştir. Karaciğerin ortanca ve sol lateral lobları karaciğer kitlesinin %70'ini çıkarmak için çıkarıldı ve APAP'a 2 gün boyunca ameliyat sonrası 24 saat verildi. ALF'ye bağlı hayvanlarda sağkalımda ciddi azalma saptandı. ALF gelişimi alanin amino transferaz (ALT), aspartat amino transferaz (AST), alkalen fosfataz (ALP) enzimlerinin değiştirilmiş serum düzeyleri ile doğrulandı; protrombin zaman değişiklikleri (PT); ve uluslararası normalleştirilmiş oranın (INR) değerlendirilmesi. QPCR ile gen ekspresyonu profilinin incelenmesi, apoptoz, inflamasyon ve karaciğer hasarının ilerlemesinde yer alan genlerin ekspresyon düzeylerinde artış olduğunu ortaya koymuştur. Histolojik değerlendirme ile hepatositlerin diffüz dejenerasyonu ve immün hücrelerin infiltrasyonu gözlendi. AlF'nin geri döndürülemeoranı, sinjenezik sağlıklı sıçan hepatositlerinin intrasplenik transplantasyonu ndan sonra ALT, AST ve ALP'in sağkalım ve serum düzeylerinin restorasyonu ile doğrulandı. Bu model, ALF'nin patofizyolojisini incelemek ve ALF için yeni bir tedavinin potansiyelini değerlendirmek için mevcut ALF hayvan modellerine güvenilir bir alternatif sunmaktadır. İki farklı yaklaşımın kullanımı da fiziksel ve ilaca bağlı karaciğer hasarının kombine etkisini incelemek mümkün kılar. Mevcut yordamın tekrarlanabilirliği ve fizibilitesi modelin ek bir yararıdır.

ALF hayvan modellerinde sağkalım yüzdesi APAP'ın alf'ye %70 PHx ile birlikte neden olan optimum dozu 750 mg/kg vücut ağırlığı olarak standartlaştırıldı. Tedavi rejimi% 70 PHx sonra 24 saat başladı, hayvanlar tamamen cerrahi kurtarıldı zaman, ve 24 saat aralıklarla iki APAP dozları oluşuyordu. Mortalite, ameliyat sonrası 48 saat olan Ikinci APAP dozu verildikten sonra %80 oranında gözlendi. Hayatta kalma yüzdesi Kaplan-Meier yöntemi ile analiz edilerek çizildi (<strong class=...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen at JoVE.com

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

Mevcut çalışmada geliştirilen akut karaciğer yetmezliği hayvan modeli potansiyel tedavilerin incelenmesi için uygun bir alternatif sunuyor. Mevcut model, fiziksel ve ilaca bağlı hepatik yaralanmanın kombine etkisini kullanır ve yeni tedavilerin potansiyelini incelemek için uygun bir zaman penceresi sağlar.

%70 Parsiyel Hepatektomi ve Asetaminofen birleştirerek Akut Karaciğer Yetmezliği Bir Sıçan Modeli Nin Üretimi

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

Akut karaciğer yetmezliği veya ALF genellikle sağlıklı bir karaciğerde karaciğer hasarının hızlı gelişimi olarak tanımlanır ve önemli fonksiyonlarının ciddi bozukluğu eşlik eder. Ortotopik karaciğer nakli vakaların çoğunda mevcut tek tedavidir. Ancak karaciğer donör sıkıntısı nedeniyle, ALF hastalarında mortalite oranı çok yüksektir.Alternatif terapötik yaklaşımların potansiyelini incelemek ve ALF'nin patofizyolojisini daha iyi anlamak için hastalığın hayvan modelleri kullanılmaktadır. ALF modellerinin çoğu asetaminofen, karbon tetraklorür, Concanavalin A, lipopolisakkarit, D-Galaktosamid ve tiyoasetamid in hepatotoksik etkilerine dayanmaktadır. Ancak, bu kötü tekrarlanabilirlik ve geri dönüş, diğer hayati organlara toksisite, insan hastalığı patoloji ve tür varyasyonunun kötü yansıması gibi çeşitli eksiklikleri var.Bu nedenle, tekrarlanabilir ve terapötik bir müdahalenin etkilerini incelemek için yeterli zaman aralığı sağlayan daha iyi bir model sistemi için bir ihtiyaç vardır. Mevcut çalışmada, sıçanlarda bir ALF modeli kısmi hepatektomi ve asetaminofen hepatotoksisite etkileri birleştirerek oluşturulmuştur. Karaciğerin ortanca ve sol lateral lob% 70 karaciğer kütlesi çıkarmak için kaldırılır, ve daha fazla, asetaminofen ALF neden verilir.Modelde ALF gelişimi biyokimyasal ve histolojik analiz ile karakterize edilmiş ve karaciğer hasarının geri dönüşümlülüğü syngenekkik sağlıklı sıçan hepatositlerinin transplantasyonu ile doğrulanmıştır. Mevcut çalışmada 180-250 gram aralığında vücut ağırlığına sahip Wistar Sıçanlar kullanılmıştır. Aşağıdaki adımlar bir sıçanda ALF indüksiyonu için cerrahi prosedürü açıklar.Hayvan ketamin-Ksilazin karışımı intraperitoneally enjekte edilerek anestezi edilir. Tam anestezi hayvanın ayak sıkışma tarafından teyit edilir, ve daha fazla işlem sadece hiçbir pedal refleks olduğunda yapılır. Korneanın kurumasını önlemek için her iki göze de karboksi metil selüloz esaslı göz damlası uygulanır.Hayvan beyaz bir bant kullanarak cerrahi tahtaya dizginlenir. Saç bir elektrikli makas kullanılarak sağ üst karın cerrahi bölgesinden kaldırılır. Cerrahi bölgeyi %70 etanol ve povione iyotlu üç adet alternatif önlük ile dairesel hareketle sterilize edilmiş pamuk pedler kullanarak dezenfekte edin.Kesilecek deri, göğüs kafesinin hemen altında ksifoide dik ve göğüs kafesine paralel olarak işaretlenir. Bir santimetre yaklaşık üç santimetre lik bir açıklığa sahip steril bir örtü levha işaretli derinin üzerine yerleştirilir. Yaklaşık 2-3 santimetre lik bir enine kesi, neşter yardımıyla işaretli çizgi boyunca yapılır.Kesici bölge çevresinde altta yatan kas tabakası ile cilt eki hafifçe steril nemlendirilmiş pamuk uçları tarafından kaldırılır. Daha sonra, bir enine kesi xiphoid sürecinin hemen altında periton tabakası ile yapılır. Karaciğerin sol lobu iki tuzlu nemlendirilmiş pamuk uçları yardımıyla toraks anazik bir basınç vererek maruz kalır.Steril bir naylon iplik halkası maruz kalan karaciğer lobu etrafında kaymış. Döngü dikkatle mikro diseksiyon forceps veya pamuk tomurcukları yardımıyla lob tabanına alınır. Mikrocerrahi iğne tutucu ve mikro forceps yardımıyla, döngü nün iki ucu bağlanır, mümkün olduğunca lob tabanına yakın düğüm yerleştirerek.Bu kan damarlarını daraltmak ve karaciğer lobu çıkarıldıktan sonra kanamayı azaltmak tır. Diğer tarafta iki düğüm daha var. Bağlı lob bir iskemik kütük bırakır mikrocerrahi makas kullanılarak düğüm hemen üzerinde kesilir.Benzer şekilde, karaciğer median lob pamuk uçları kullanılarak kaldırılır. Karaciğer median lob benzersiz şekli tanıyın. Lob üzerine bir naylon iplik halkası yerleştirin, sıkıca uçlarını bağlayın.Diğer tarafta iki düğüm daha bağlanır ve lob un rezeksiyonu yapılır. Loblar çıkardıktan sonra, periton basit kesme dikiş ile cilt dikiş takip sürekli dikiş ile emilebilir catgut kromik 4/ 0 emilebilir dikiş kullanılarak dikilir. Cilt kapatıldıktan sonra cerrahi bölgeye povison iyot solüsyonu uygulanır.Örtü kağıdı çıkarılır ve hayvan ameliyat panosundan çıkarılır. Bir ml'de %5 glukoz çözeltisi olan 12 miligram sefotaksim dozunun intraperitoneal olarak hayvana verilmesi, postoperatif enfeksiyon riskinden korunması için. Ameliyat sonrası ağrı kesici için, analjezik meloksikam, genellikle 1 kg vücut ağırlığı başına mg hayvana subkutan verilir, iki gün boyunca her gün bir doz takip.Hayvan sıcak bir iyileşme kafesine taşınır. Hayvan 30-40 dakika içinde bilincini yiyişecek ve hareket etmeye başlar. Ameliyat edilen hayvan, cerrahi yaralar tamamen iyileşene kadar izole tutulur, bu da üç ila dört gün sürebilir.ALF indükleme için, asetaminofen kg vücut ağırlığı başına 750 miligram ve meloksikam ikinci doz kısmi hepatektomi işleminden 24 saat sonra intraperitoneally enjekte edilir. Bu doz rejimi 24 saat sonra tekrarlanır. ALF indüksiyonundan sonra hayvanlarda sağkalımda ciddi azalma saptandı.ALF gelişimini karakterize etmek için, işletilen hayvanlar asetaminofen ikinci doz sonra ötenazi edildi, ve çeşitli biyokimyasal ve histolojik çalışmalar yapıldı. Sonuçlar videoda önceden açıklanmıştır. ALF indüklenen grupta sağkalım yüzdesi ciddi şekilde azalmış ve ikinci asetaminofen dozu 24 saat içinde %80'e kadar mortalite gözlenmiştir.ALF indüklenen grupta morfolojik düzeyde karaciğer hasarı ve sadece %70 parsiyel hepatektomi grubu görüldü. Oysa kontrol grubu ve sadece asetaminofen tedavi edilen grup sağlıklı bir görünüme sahipti. Alanin amino transferaz, aspartat amino transferaz ve alkalen fosfataz enzim düzeyleri diğer gruplara göre ALF indüklenen grupta yüksek olduğu bulunmuştur.QPCR ile gen ekspresyonu profilinin analizi, apoptozda yer alan genlerin yüksek ekspresyonu, inflamasyon ve karaciğer hasarının ilerlemesini gösterdi. Karaciğer dokusu kesitlerinin hematoksilin ve eozin boyaması kontrol grubunda çoğunlukla normal hepatositsapları saptadi. ALF grubunda çoğunlukla orta derecede makro vesiküler yağ dejenerasyonu gözlendi.Protrombin zamanı ve Uluslararası Normalize Oranı ALF indüklenen grupta yüksek bulundu, bu da kan pıhtılaşma sürecinin engellendiğini gösteriyordu. Sinjenezik sağlıklı sıçan hepatositlerinin transplantasyonu ndan sonra ALF indüklenen grupta sağkalım yüzdesi geri bulundu. Hücre nakli sonrası ALF kaynaklı hayvanlarda alanin amino transferaz, aspartat amino transferaz ve alkalen fosfataz enzimlerinin serum düzeylerinin onarıldığı saptandı.Sıçanlarda ALF indükleme Bu yöntem tekrarlanabilir, iyi geri dönüşümlülük gösterir ve yeni tedavileri test etmek için uygun bir zaman penceresi sağlar. Bu nedenle, bu model ALF tedavisinde potansiyel terapötik yaklaşımların değerlendirilmesi için etkili bir hastalık modeli olarak hizmet verebilir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Hepatik Arter İmar Kısmi Ortotopik Karaciğer Nakli Bir Rat Modeli Cerrahi İşlemleri

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotopik Yardımcı Sıçan Karaciğer Nakli ile Akut Karaciğer Yetmezliği Portal Ven arteriali Akış ayarlı

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

Normal Farelerde% 70 hepatektomi sonrası Vasküler ve Parankimal Rejenerasyon görselleştirme

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Bir Sıçan Karaciğer Hilar Kelepçe Modeli Kullanılarak Doğrudan Segmental İçi hepatik Dağıtım Yöntemi

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Karaciğer bölümü ilişkilendirme ve Portal ven ligasyonu hazırlanmış Hepatectomy (ALPPS) yordamı için fare modeli

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

Hepatositlerin intrasplenic nakli düğümde kısmi Hepatectomy sonra. SCID fareler

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Yeniden Arterialized sıçan kısmi karaciğer nakli bir vivo içinde gemi odaklı % 70 ile Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Bir sıçan modelinde kısmi kolektomi sonra kaçağı azaltmak için Yağ dokusundan elde edilen kök hücre sayfasının nakli

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

Bir fare modeli Metabolik sendromu ile ilgili kalp yetmezliği ile korunmuş ejeksiyon fraksiyonu atriyal Cardiomyocytes izolasyonu

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...

Induction and Phenotyping of Acute Right Heart Failure in a Large Animal Model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension

Kronik Tromboembolik Pulmoner Hipertansiyonun Büyük Bir Hayvan Modelinde Akut Sağ Kalp Yetmezliğinin İndüksiyonu ve Fenotiplemesi

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The ...