Name: an ectopic chemokine expression model for testing macrophage recruitment in vivo
Uploaded: 2019-09-25T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Ectopic Chemokine Expression Model for Testing Macrophage Recruitment In Vivo at JoVE.com

Мы благодарим д-ра Jingrong Пэн для обмена Tg (fabp10a: DsRed) трансгенной линии; Д-р Зилонг Вэнь для обмена Tg (mpeg1: GFP) трансгенных линий; Д-р Коити Каваками за предоставление вектора pTol2. Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (31771594), проектами научно-технического плана Гуандун (2019A030317001) и Фондами фундаментальных исследований для центральных университетов (D2191450).

ПРИМЕЧАНИЕ: Все образцы были обработаны фенилтиуреа (PTU) яичной воды для ингибирования пигмента.
1. Поколение Tg (fabp10a:il34) Трансгенные конструкции и инъекции рыбы
<ol><li>Клон 2,8 кб fabp10a промоутер8 и Ил-34 кодирования регионов (ENSDART00000126460.3) зебр...

<ol>
	<li>Howe, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+reference+genome+sequence+and+its+relationship+to+the+human+genome.">The zebrafish reference genome sequence and its relationship to the human genome.</a> Nature. 496 (7446), 498-503 (2013).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-34+is+a+tissue-restricted+ligand+of+CSF1R+required+for+the+development+of+Langerhans+cells+and+microglia.">IL-34 is a tissue-restricted ligand of CSF1R required for the development of Langerhans cells and microglia.</a> Nature Immunology. 13 (8), 753-760 (2012).</li><li>Lin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+a+cytokine+and+its+receptor+by+functional+screening+of+the+extracellular+proteome.">Discovery of a cytokine and its receptor by functional screening of the extracellular proteome.</a> Science. 320 (5877), 807-811 (2008).</li><li>Wei, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+overlap+but+differential+expression+of+CSF-1+and+IL-34+in+their+CSF-1+receptor-mediated+regulation+of+myeloid+cells.">Functional overlap but differential expression of CSF-1 and IL-34 in their CSF-1 receptor-mediated regulation of myeloid cells.</a> Journal of leukocyte biology. 88 (3), 495-505 (2010).</li><li>Etienne, D., Foucher, S. B. L. P., Norbert Ifrah, P. G. Y. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-34+Induces+the+Differentiation+of+Human+Monocytes+into+Immunosuppressive+Macrophages.+Antagonistic+Effects+of+GM-CSF+and+IFNc.">IL-34 Induces the Differentiation of Human Monocytes into Immunosuppressive Macrophages. Antagonistic Effects of GM-CSF and IFNc.</a> PLoS One. 8 (2), e56045 (2013).</li><li>Segaliny, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Syndecan-1+regulates+the+biological+activities+of+interleukin-34.">Syndecan-1 regulates the biological activities of interleukin-34.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1853 (5), 1010-1021 (2015).</li><li>Zhou, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=miR-28-5p-IL-34-macrophage+feedback+loop+modulates+hepatocellular+carcinoma+metastasis.">miR-28-5p-IL-34-macrophage feedback loop modulates hepatocellular carcinoma metastasis.</a> Hepatology. 63 (5), 1560-1575 (2016).</li><li>Gordon, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+specific+expression+and+developmental+regulation+of+two+genes+coding+for+rat+fatty+acid+binding+proteins.">Tissue specific expression and developmental regulation of two genes coding for rat fatty acid binding proteins.</a> Journal of Biological Chemistry. 260 (4), 1995-1998 (1985).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Zebrafish Book: A Guide for the Laboratory Use of Zebrafish (Danio rerio). , (2000).</li><li>N&#252;sslein-Volhard, C., Dahm, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Zebrafish: a practical approach. , (2002).</li><li>Jiang, Y., Chen, J., Yen, K., Xu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ectopically+Expressed+IL-34+Can+Efficiently+Induce+Macrophage+Migration+to+the+Liver+in+Zebrafish.">Ectopically Expressed IL-34 Can Efficiently Induce Macrophage Migration to the Liver in Zebrafish.</a> Zebrafish. 16 (2), 165-170 (2019).</li></ol>

Описанный здесь протокол позволяет исследовать функцию хемокина о поведении макрофагеина vivo и процедура требует некоторых технических знаний. Таким образом, существует несколько важных шагов, чтобы избежать осложнений в протоколе: 1) выбрать подходящую трансгенную линию, которая пок?...

Зебрафиш — небольшая тропическая пресноводная рыба, зародившаяся в Индии. Что касается сохранения генов, зебрафиш имеют сходство 87% с человеком1. Он может дать нам представление о смежных предметах человека, изучая регуляцию генов, функцию белка и поведение клеток, такие как миграция, пролиферация et.al у зебры. Эмбрион зебры может быть использован для наблюдения за развитием ранних эмбрионов на разных стадиях после ингибирования пигмента. Между тем, это занимает всего три месяца для зебры развиваться в половой зрелости, то зебрафиш может производить сотни яиц каждые 4 дня. Мини-размер, простое разведение, сильная репродуктивная способность, эти преимущества делают культуру зебры очень экономной, способствующей крупномасштабной культуре. Традиционная модель мыши млекопитающих имеет более высокие расходы на техническое обслуживание, чем зебрафиш, таким образом, ограничивая масштабы поднятия мыши. В аспекте раннего развития эмбриона, эмбрион мыши трудно наблюдать в живом состоянии из-за характеристик развития эмбриона мыши в утробе матери. Напротив, эмбрионы зебры развиваются внешне и прозрачны, поэтому их легко наблюдать под микроскопом. Кроме того, зебрафиш очень легко построить различные трансгенные линии для связанных исследований функции генов. В настоящее время, различные трансгенные линии зебры доступны для обозначения различных типов клеток. Это очень удобно сейчас, чтобы построить трансгенные линии для переэкспресса хемокинов в конкретных местах и изучить функции хемокинов на поведение клеток у зебры.
Здесь мы предоставили рабочий процесс для использования трансгенной линии зебры для исследования функции IL-34 на поведение макрофагов in vivo2,3,4,5,6,7. Во-первых, мы построили печени конкретных переэкспрессии плазмид гена il34 и вводили плазмид в одноклеточной стадии Tg (mpeg1: GFP) рыбных эмбрионов, которые специально помечены макрофагов флуоресцентным белком GFP. Затем мы использовали целые флуоресцентные установки на месте гибридизации и иммуно-стинеризм для обнаружения картины экспрессии il34 и числа или расположения макрофагов. Инъекционные эмбрионы WT были подняты для создания стабильной трансгенной линии. В этих шагах мы установили и проверили линию производства цитокинов и визуально оценили эффекты, которые можно увидеть на распределении макрофагов. Наконец, для изучения поведения макрофагов в ответ на цитокин, мы использовали конфокальные живые изображения, чтобы непосредственно наблюдать миграцию макрофагов, чтобы подтвердить функцию il34 на миграции макрофагов in vivo.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Antibody</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 488-Anti-Goat antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A11055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Digoxigenin-HRP&#160;</td>
			<td>perkinelmer</td>
			<td>NEF832001EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat-Anti-GFP antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab6658</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#183; 2H2O</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>21097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyanine 3 Plus Amplification Reagent</td>
			<td>perkinelmer</td>
			<td>NEL745001KT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E2 solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>15 mM&#160; NaCl +0.5 mM KCl +1.0 mM MgSO4+150 &#181;M&#160; KH2PO4 + 50 &#181;M&#160; Na2HPO4 +1.0 mM CaCl2 + 0.7 mM NaHCO3&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum(FBS)</td>
			<td>Life</td>
			<td>10099-133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>formamide</td>
			<td>Diamond</td>
			<td>A100314</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glycerol&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>V900860</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>heparin sodium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3149</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hybridization buffer(HB)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>50% formamide+ 5&#215;SSC+9 mM sodium citrate+50 &#956;g/ml heparin sodium+ 500 &#956;g/ml tRNA+ 0.1% Tween20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5655</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>low melting agarose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9414</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>methanol</td>
			<td>GHTECH</td>
			<td>1.17112.023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>methylene blue&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M9140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M2643</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde(PFA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>158127</td>
			<td>Suspend 16 g of PFA in 400 ml of 1x PBS, heat at 60 &#176;C&#160; to dissolve about 30 min. This solution can be prepared in advance and stored at -4 &#176;C. Caution. Manipulate with mask.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10&#215;PBS</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>14.2 g Na2HPO4+80 g NaCl+2 g KCl+ 2.4 g KH2PO4 in 1L ddH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phenylthiourea(PTU)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1&#215;Plus Amplification Diluent</td>
			<td>perkinelmer</td>
			<td>NEL745001KT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proteinase K&#160;</td>
			<td>Fermentas</td>
			<td>E00492</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20&#215;Saline sodium citrate(SSC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>175.3 g NaCl+ 88.2 g sodium citrate in 1 L ddH2O, PH 7.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium citrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tricaine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E10521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tRNA&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R6625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween20</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P2287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasmid</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pBLK-fabp10a-il34-sv40</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For Tg (fab10a:il34) transgenic line generation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pBSK-il34</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For il34 probe preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fish</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tg (mpeg1: GFP)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Label macrophages with GFP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tg (fabp10a: DsRed)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Label liver cells with DsRed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tg (fab10a:il34)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Over-expression IL-34 in liver cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an ectopic chemokine expression model for testing macrophage recruitment in vivo

Зебрафиш широко используется в фундаментальных и биомедицинских исследованиях. Многие трансгенные линии зебры в настоящее время доступны для обозначения различных типов клеток. Благодаря прозрачному эмбриональному телу зебры, нам удобно изучать влияние одного хемокина на поведение определенного типа клеток in vivo. Здесь мы предоставили рабочий процесс для изучения функции хемокина по миграции макрофагов in vivo. Мы построили ткани конкретных переэкспрессии плазмид для переэкспресса IL-34 и вводили плазмид в одной-клеточной стадии трансгенных эмбрионов рыб, макрофаги которых были специально помечены флуоресцентным белком. Затем мы использовали целые флуоресцентные установки на месте гибридизации и иммуно-стинеризм для обнаружения картины экспрессии хемокина и количество или расположение макрофагов. Инъекционные эмбрионы WT были подняты для создания стабильной трансгенной линии. Наконец, мы использовали конфокальные живые изображения, чтобы непосредственно наблюдать за поведением макрофагов в стабильных трансгенных рыб для изучения функции IL-34 на макрофагах in vivo.

Шаги, участвующие в протоколе зебры, иллюстрируются на рисунке 2. Во-первых, мы создали pBLK-fabp10a-il34-sv40 конструкции, в которой il34 был обусловлен fabp10a промоутер (Рисунок 2). Конструкция была микровведена в одноклеточную стадию Tg ...

Watch this Scientific Journal Video about An Ectopic Chemokine Expression Model for Testing Macrophage Recruitment In Vivo at JoVE.com

An Ectopic Chemokine Expression Model for Testing Macrophage Recruitment In Vivo

Чтобы проверить влияние хемокина на набор макрофагов in vivo, для обнаружения эктопического выражения хемокина использовалась вся монтация на макрофаг. Для наблюдения макрофагов в режиме реального времени использовалась живая визуализация.

Эктопическая модель экспрессии хемокина для тестирования макрофагов набора в Vivo

Zebrafish are widely used in basic and biomedical research. Many zebrafish transgenic lines are currently available to label various types of cells. Owing ...

Описанный здесь протокол позволяет исследовать функцию хемокина и поведение макрофагов in vivo. Большинство существующих экспериментальных моделей клеточного хемотаксиса основаны на экспериментах с клетками in vitro. Но эксперименты in vitro иногда слишком просты, чтобы моделировать сложную среду in vivo.Кроме того, они не могут представлять способность к химиотерапии in vivo. Эти методы используют специфические преимущества рыбы зебры для прямого наблюдения за поведением клеток, что трудно для мышей. Начните с генерации трансгенных конструкций TGFABP-10A interleukin-34.Введать FABP-10A интерлеукин-34 конструкций в одной клеточной стадии Tg (mpeg1:GFP)трансгенных и дикого типа эмбрионов рыб вместе с транспозазы MRNA. Поднимите и соберите эмбрионы в соответствии с рукописными инструкциями. Затем, исправить их с 4%paraformaldehyde ночь при температуре 4 градусов по Цельсию или в течение двух часов при комнатной температуре.После фиксации, мыть эмбрионы с PBST три раза в течение пяти минут за стирку. Обезвоживать эмбрионы отдельно с 50%метанол в PBST, а затем 100% метанол, затем переоставить на свежий 100% метанол, и хранить их при отрицательном 20 градусов по Цельсию, по крайней мере 2 часа. Когда вы будете готовы к гибридизации зонда, регидратировать эмбрионы отдельно в 50% метанола в PBST.Затем мыть их с PBST три раза в течение пяти минут за стирку. Переваривать эмбрионы с протеиназой K в PBST при комнатной температуре. Затем откажитесь от раствора пищеварения и повторите фиксацию с помощью 4%paraformaldehyde в течение 20 минут при комнатной температуре.После фиксации, мыть эмбрионы дважды с PBST в течение 10 минут за стирку. Выполните предгибридизацию с подогревом буфера гибридизации при 65 градусах по Цельсию в течение по крайней мере одного часа. Затем разогреть межлеукин-34 зонд до 65 градусов по Цельсию в течение 10 минут.Утилизация буфера гибридизации в оригинальную трубку и выполнить гибридизацию с разогретым зондом при 65 градусах по Цельсию в одночасье. На следующий день, мыть эмбрионы с 50%формамид и 2X SSCT следуют 2X SSCT, а затем 0.2X SSCT при 65 градусах по Цельсию. Повторите каждую стирку три раза с 20 минутами за стирку.Затем, мыть эмбрионы три раза с PBST в течение пяти минут за стирку. Блокируйте образцы 600 миллилитров блокирующего буфера в течение одного часа при комнатной температуре. Затем добавьте 400 микролитров раствора антител против дигоксигенина HRP и инкубировать эмбрионы при четырех градусах Цельсия за одну ночь.На следующий день, удалить антитела и мыть эмбрионы шесть раз с PBST в течение 20 минут за стирку. После последней стирки, промыть каждый образец с 30 микролитров 1X плюс разминования усиления в течение пяти минут. Инкубировать образцы фторфора тирамин рабочий раствор в течение пяти-15 минут в темноте.Продление инкубации до 30 минут, если сигналы слабы. Затем мыть эмбрионы с PBST три раза в течение 10 минут за стирку. И инкубировать их с первичным антителом при четырех градусах по Цельсию в одночасье.На следующий день, мыть эмбрионы пять раз с PBST в течение 30 минут за стирку, и инкубировать их вторичными антителами при четырех градусах по Цельсию в одночасье. На следующий день, мыть эмбрионы три раза в PBST в течение 10 минут за стирку, и хранить их в 70%глицерол в темноте при четырех градусах по Цельсию или отрицательные 20 градусов по Цельсию дольше. Перед визуализацией используйте флуоресцентный микроскоп для выбора красных и GFP двойных положительных эмбрионов DS.Чтобы смонтировать рыбу, используйте металлическую ванну, чтобы нагреть один миллилитр 1%низкий плавления агарозы выше 90 градусов по Цельсию. Затем охладить его до температуры тела и смешать в 50 микролитров 0,2% tricaine. Перенесите обезболеженные эмбрионы в небольшое блюдо, установленное с крышкой слайда на дне.Удалите окружающую воду и медленно уронить низкоплавильную агарозу на эмбрионы. Тщательно установите положение рыбы, прежде чем агароза затвердеет, сохраняя область печени близко к крышке слайда. После того, как агароза затвердевет, тщательно накройте ее другим слоем агарозы, чтобы укрепить его.Поместите блюдо на стол носителя конфокального микроскопа, накройте рыбу раствором Е2 с помощью tricaine и начните визуализацию. Для работы конфокального микроскопа откройте программное обеспечение Дзен Блэк 2.3 и нажмите кнопку найти, затем инкубации, а затем установить температуру до 29 градусов по Цельсию. Нажмите на меню приобретения и выберите необходимый режим сканирования и лазеры в меню смарт-настройки.Затем выберите стек и позицию. Нажмите на экспериментальное меню дизайнера и выберите включить многоблоковой эксперимент в первом блоке, чтобы найти образец под низким увеличением. Затем переключитесь на высокое увеличение и позвольте наблюдаемой области в центре поля зрения.Установите информацию о положении и стеке. Затем выберите соответствующую интенсивность лазера, слои сканирования и скорость изображения. После установки всех блоков установите соответствующее количество циклов и начните запись.Этот протокол был использован для введения печени конкретных интерлейкин-34 над выражением плазмид в трансгенных эмбрионов рыб, которые макрофаги были помечены GFP. Полная флуоресценция на месте гибридизации и иммуностимулирования были использованы для анализа экспрессии интерлейкина-34 и GFP помечены макрофаги. Номера клеток макрофагов были количественно проанализированы в необъективной и конструкции инъекционных эмбрионов печени и хвостовой области.Для непосредственного наблюдения за макрофагами, помеченными зелеными, проходящей мимо печени контрольной рыбы и мигрирующей в печень интерлейкина-34 над экспрессией рыбы, использовалась живая визуализация. Важные шаги этого протокола включают выбор подходящей трансгенной линии для обозначения ячейки интересов. И соответствующие ткани для визуализации вашего выражения трансгенного гена, а также соответствующее окно времени наблюдения.Этот метод может быть применен для изучения функции других хемокинов на поведение других клеток, таких как Т-клетки и нейтрофилов in vivo.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Live Imaging of Innate Immune and Preneoplastic Cell Interactions Using an Inducible Gal4/UAS Expression System in Larval Zebrafish Skin

Живая съемка врожденной иммунной и предраковых межклеточного взаимодействия, используя / UAS Expression System Индуцибельная Gal4 на личиночной данио рерио кожи

Here we describe a method to conditionally induce epithelial cell transformation by the use of the 4-Hydroxytamoxifen (4-OHT) inducible KalTA4-ERT2/UAS ...

An Optogenetic Approach for Assessing Formation of Neuronal Connections in a Co-culture System

Optogenetic подход к оценке Формирование нейронные связи в совместной культуре системы

Here we describe a protocol to generate a co-culture consisting of 2 different neuronal populations. Induced pluripotent stem cells (iPSCs) are ...

Development of an Ethanol-induced Fibrotic Liver Model in Zebrafish to Study Progenitor Cell-mediated Hepatocyte Regeneration

Разработка Этанол-индуцированной фиброзных модели печени в данио рерио для изучения прогениторных клеток-гепатоцитов опосредуется Регенерация

Sustained liver fibrosis with continuation of extracellular matrix (ECM) protein build-up results in the loss of cellular competency of the liver, leading ...

Drug Treatment and In Vivo Imaging of Osteoblast-Osteoclast Interactions in a Medaka Fish Osteoporosis Model

Drug Treatment and In Vivo Imaging of Osteoblast-Osteoclast Interactions in a Medaka Fish Osteoporosis Model

Лечение наркомании и<em&gt; В Vivo</em&gt; Визуализация остеобластов-остеокластов взаимодействий в модели Оризии Рыба Остеопороз

Bone-forming osteoblasts interact with bone-resorbing osteoclasts to coordinate the turnover of bone matrix and to control skeletal homeostasis. Medaka ...

An Ex Vivo Method for Time-Lapse Imaging of Cultured Rat Mesenteric Microvascular Networks

An Ex Vivo Method for Time-Lapse Imaging of Cultured Rat Mesenteric Microvascular Networks

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Метод ЗАМЕДЛЕННАЯ визуализации культивируемых Rat брыжеечные микрососудистых сетей

Angiogenesis, defined as the growth of new blood vessels from pre-existing vessels, involves endothelial cells, pericytes, smooth muscle cells, immune ...

In Vivo Imaging of Transgenic Gene Expression in Individual Retinal Progenitors in Chimeric Zebrafish Embryos to Study Cell Nonautonomous Influences

In Vivo Imaging of Transgenic Gene Expression in Individual Retinal Progenitors in Chimeric Zebrafish Embryos to Study Cell Nonautonomous Influences

В визуализации in vivo трансгенной экспрессии генов в Персональной Ретинального прародителей в химерных эмбрионов данио рерио по изучению мобильных неавтономных Влияния

The genetic and technical strengths have made the zebrafish vertebrate a key model organism in which the consequences of gene manipulations can be traced ...

Establishment of Larval Zebrafish as an Animal Model to Investigate Trypanosoma cruzi Motility In Vivo

Establishment of Larval Zebrafish as an Animal Model to Investigate Trypanosoma cruzi Motility In Vivo

Создание личиночной данио рерио как модель животного к расследованию Trypanosoma cruzi подвижности In Vivo

Chagas disease is a parasitic infection caused by Trypanosoma cruzi, whose motility is not only important for localization, but also for cellular binding ...

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

Применение РНК-интерференции и тепло шок индуцированной выражение фактор транскрипции для перепрограммирования клетки семенозачатка нейронов в C. elegans

Studying the cell biological processes during converting the identities of specific cell types provides important insights into mechanism that maintain ...

Culturing of Retinal Pigment Epithelial Cells on an Ex Vivo Model of Aged Human Bruch's Membrane

Culturing of Retinal Pigment Epithelial Cells on an Ex Vivo Model of Aged Human Bruch's Membrane

Культивирование клеток эпителия сетчатки пигментного модель Ex Vivo мембраны Бруха возрасте человека на

Aside from vitamins and antioxidants recommended by the Age-Related Eye Disease Study, there is no effective therapy for &#34;dry,&#34;&#160;or atrophic ...

An In Vitro Model of a Parallel-Plate Perfusion System to Study Bacterial Adherence to Graft Tissues

An In Vitro Model of a Parallel-Plate Perfusion System to Study Bacterial Adherence to Graft Tissues

В Vitro модель параллельно плита перфузии системы для изучения бактериальных приверженность графт тканей

Various valved conduits and stent-mounted valves are used for right ventricular outflow tract (RVOT) valve replacement in patients with congenital heart ...