Name: encapsulated cell technology for the delivery of biologics to the mouse eye
Uploaded: 2020-03-30T13:00:00
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El estudio fue apoyado en parte por subvenciones otorgadas a B. R. por los Institutos Nacionales de Salud (R01EY019320), el Departamento de Asuntos de Veteranos (RX000444 y BX003050), y la South Carolina SmartState Endowment.

Todos los experimentos se realizaron de acuerdo con la Declaración de ARVO para el Uso de Animales en Investigación Oftálmica y de La Visión y fueron aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Médica de Carolina del Sur bajo el protocolo ID 00399.
1. Cultivo celular
<ol><li>Generar células epiteliales de pigmento de la retina humana (ARPE-19) que expresen de forma estable el gen de elección según los protocolos publicados14,</...

<ol>
	<li>Allen, T. M., Cullis, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+systems:+entering+the+mainstream.">Drug delivery systems: entering the mainstream.</a> Science. 303 (5665), 1818-1822 (2004).</li><li>Tonnesen, H. H., Karlsen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alginate+in+drug+delivery+systems.">Alginate in drug delivery systems.</a> Drug Development and Industrial Pharmacy. 28 (6), 621-630 (2002).</li><li>Vilos, C., Velasquez, L. 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Uma nova estrat&#233;gia para produzir um dispositivo para entrega de f&#225;rmacos que ser&#225; usado na regenera&#231;&#227;o da pele. , (2012).</li><li>Huang, S., Fu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Naturally+derived+materials-based+cell+and+drug+delivery+systems+in+skin+regeneration.">Naturally derived materials-based cell and drug delivery systems in skin regeneration.</a> Journal of Controlled Release. 142 (2), 149-159 (2010).</li><li>Nograles, N., Abdullah, S., Shamsudin, M. N., Billa, N., Rosli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+and+characterization+of+pDNA-loaded+alginate+microspheres+for+oral+administration+in+mice.">Formation and characterization of pDNA-loaded alginate microspheres for oral administration in mice.</a> Journal of Bioscience and Bioengineering. 113 (2), 133-140 (2012).</li><li>Moore, K., Amos, J., Davis, J., Gourdie, R., Potts, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+polymeric+microcapsules+containing+a+low+molecular+weight+peptide+for+controlled+release.">Characterization of polymeric microcapsules containing a low molecular weight peptide for controlled release.</a> Microscopy and Microanalysis. 19 (1), 213-226 (2013).</li><li>Xu, Y., Skotak, M., Hanna, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospray+encapsulation+of+water-soluble+protein+with+polylactide.+I.+Effects+of+formulations+and+process+on+morphology+and+particle+size.">Electrospray encapsulation of water-soluble protein with polylactide. I. Effects of formulations and process on morphology and particle size.</a> Journal of Microencapsulation. 23 (1), 69-78 (2006).</li><li>Gryshkov, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Process+engineering+of+high+voltage+alginate+encapsulation+of+mesenchymal+stem+cells.">Process engineering of high voltage alginate encapsulation of mesenchymal stem cells.</a> Materials Science and Engineering: C. 36, 77-83 (2014).</li><li>Thanos, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+secretion+of+ciliary+neurotrophic+factor+to+the+vitreous,+using+the+encapsulated+cell+therapy-based+NT-501+intraocular+device.">Sustained secretion of ciliary neurotrophic factor to the vitreous, using the encapsulated cell therapy-based NT-501 intraocular device.</a> Tissue Engineering. (11-12), 1617-1622 (2004).</li><li>Kauper, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-year+intraocular+delivery+of+ciliary+neurotrophic+factor+by+encapsulated+cell+technology+implants+in+patients+with+chronic+retinal+degenerative+diseases.">Two-year intraocular delivery of ciliary neurotrophic factor by encapsulated cell technology implants in patients with chronic retinal degenerative diseases.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (12), 7484-7491 (2012).</li><li>Kauper, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+term,+sustained+intraocular+delivery+of+a+VEGF+antagonist+using+encapsulated+cell+technology+implant+for+the+treatment+of+choroidal+neovascular+diseases.">Long term, sustained intraocular delivery of a VEGF antagonist using encapsulated cell technology implant for the treatment of choroidal neovascular diseases.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53, 455 (2012).</li><li>Annamalai, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Encapsulated+Cell+Technology-Based+Delivery+of+a+Complement+Inhibitor+Reduces+Choroidal+Neovascularization+in+a+Mouse+Model.">Encapsulated Cell Technology-Based Delivery of a Complement Inhibitor Reduces Choroidal Neovascularization in a Mouse Model.</a> Translational Visual Science Technology. 7 (2), 3 (2018).</li><li>Alge, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+Pigment+Epithelium+Is+Protected+Against+Apoptosis+by+&#945;B-Crystallin.">Retinal Pigment Epithelium Is Protected Against Apoptosis by &#945;B-Crystallin.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 43 (11), 3575-3582 (2002).</li><li>Chiu, K., Chang, R. C., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravitreous+injection+for+establishing+ocular+diseases+model.">Intravitreous injection for establishing ocular diseases model.</a> Journal of Visualized Experiments. (8), 313 (2007).</li><li>Jove Science Education Database. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lab+Animal+Research.+Anesthesia+Induction+and+Maintenance.">Lab Animal Research. Anesthesia Induction and Maintenance.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2019).</li><li>Holz, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+Safety+of+Lampalizumab+for+Geographic+Atrophy+Due+to+Age-Related+Macular+Degeneration:+Chroma+and+Spectri+Phase+3+Randomized+Clinical+Trials.">Efficacy and Safety of Lampalizumab for Geographic Atrophy Due to Age-Related Macular Degeneration: Chroma and Spectri Phase 3 Randomized Clinical Trials.</a> JAMA Ophthalmology. 136 (6), 666-677 (2018).</li><li>Kassa, E., Ciulla, T. A., Hussain, R. M., Dugel, P. 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M., Ramo, K., Kumar-Singh, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Non+Membrane-Targeted+Human+Soluble+CD59+Attenuates+Choroidal+Neovascularization+in+a+Model+of+Age+Related+Macular+Degeneration.">A Non Membrane-Targeted Human Soluble CD59 Attenuates Choroidal Neovascularization in a Model of Age Related Macular Degeneration.</a> PLoS ONE. 6 (4), e19078 (2011).</li><li>Vincent, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+combination+PDGF+/+VEGF-antagonist+ECT+devices.">Generation of combination PDGF / VEGF-antagonist ECT devices.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 54, 3290 (2013).</li><li>Zhang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ciliary+neurotrophic+factor+delivered+by+encapsulated+cell+intraocular+implants+for+treatment+of+geographic+atrophy+in+age-related+macular+degeneration.">Ciliary neurotrophic factor delivered by encapsulated cell intraocular implants for treatment of geographic atrophy in age-related macular degeneration.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 108 (15), 6241-6245 (2011).</li><li>Chew, E. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ciliary+neurotrophic+factor+for+macular+telangiectasia+type+2:+results+from+a+phase+1+safety+trial.">Ciliary neurotrophic factor for macular telangiectasia type 2: results from a phase 1 safety trial.</a> American Journal of Ophthalmology. 159 (4), 659-666 (2015).</li><li>Birch, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Randomized+trial+of+ciliary+neurotrophic+factor+delivered+by+encapsulated+cell+intraocular+implants+for+retinitis+pigmentosa.">Randomized trial of ciliary neurotrophic factor delivered by encapsulated cell intraocular implants for retinitis pigmentosa.</a> American Journal of Ophthalmology. 156 (2), 283-292 (2013).</li></ol>

Esta técnica de encapsulación de células es relativamente rápida y fácil de realizar; sin embargo, ciertos puntos deben tenerse en cuenta para obtener resultados descendentes precisos. Las células deben mantenerse en cultivo en un plato de Petri antes de la encapsulación y mantenerse en la confluencia adecuada. La encapsulación debe realizarse en una campana de ventilación adecuada con flujo de aire regulado, si es posible. Demasiado fuerte de una corriente de aire puede afectar la formación de cápsulas, espec...

Las terapias basadas en células representan técnicas biológicas revolucionarias que se han aplicado ampliamente en la medicina. Recientemente, se han aplicado con éxito en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, enfermedades oculares, y el cáncer. Las terapias celulares cubren una amplia gama de campos, desde el reemplazo celular hasta la administración de fármacos, y este protocolo se centra en este último. Las microcápsulas de alginato biodegradables (MC) han demostrado eficacia como sistema de administración, y se están utilizando ampliamente en el campo biomédico. El alginato se ha utilizado en microencapsulación debido a su sencillo proceso de gelificante, biodegradabilidad, excelente biocompatibilidad y estabilidad en condiciones in vivo1,2,3,4.
El método de electrospray, como técnica de microencapsulación, se ha utilizado con éxito para encapsular péptidos y proteínas utilizando alginato (polímero base) y poli-l-ornitina (polímero de recubrimiento secundario). Ambos polímeros se encuentran naturalmente y se utilizan para su biocompatibilidad5,,6,7. Sin embargo, el principal desafío en las terapias basadas en células es la supresión del sistema inmunitario huésped para evitar efectos secundarios causados por fármacos inmunosupresores. La permeabilidad de las microcápsulas de alginato se considera una propiedad adecuada para la encapsulación celular, que permite la difusión de nutrientes, residuos y factores terapéuticos dentro y fuera de las células mientras los enmascara desde la respuesta inmune del huésped8,9,10.
En el ojo, las células encapsuladas se han utilizado en ensayos clínicos para la administración constante de productos biológicos (es decir, factores de crecimiento11,,12 y antagonistas del factor de crecimiento13) para el tratamiento de la retinitis pigmentosa o degeneración macular relacionada con la edad. Otros objetivos, como los inhibidores del complemento14, también se están explorando actualmente en entornos preclínicos.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>3 mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309656</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 G 1&#34; Blunt needle</td>
			<td>SAI Infusion technology</td>
			<td>B30-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alginic acid sodium salt, from brown algae</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A0682</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine Sulfate Ophthalmolic solution (1%)</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NDC 17478-215-15</td>
			<td>for pupil dilation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD 1 mL Syringe 26 G x 3/8 (0.45 mm x 10 mm)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>DG518105 500029609 REF 309625</td>
			<td>to generate the guide hole</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride, Anhydrous, granular</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C1016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GenTeal Tears</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>NDC 0078-0429-47</td>
			<td>to lubricate the eyes during anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goniotaire: Hypromellose (2.5%) Ophthalmolic Demulcent Solution (Sterile)</td>
			<td>Altaire Pharmaceuticals Inc.</td>
			<td>NDC 59390-182-13</td>
			<td>to lubricate the eyes during anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton Needle/syringe Tip: 27 Gauge, Small Hub RN NDL, custum length (12mm), point style 3, 6/PK</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>7803-01</td>
			<td>for intravitreal delivery of capsules</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton Syringe: 2.5 &#181;L, Model 62 RN SYR, NDL Sold Separately</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>7632-01</td>
			<td>for intravitreal delivery of capsules</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES buffer, 1M</td>
			<td>Fisher Bioreagents</td>
			<td>BP299100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High voltage generator</td>
			<td>ESD EMC Technology</td>
			<td>ES813-D20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LIVE/DEAD Viability/Cytotoxicity Kit</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>L3224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Ornithine hydrochloride, 99%</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>A12111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neomycin and Polymyxin B Sulfates and Dexamethasone Ophthalmolic Ointment</td>
			<td>SANDOZ</td>
			<td>NDC 61314-631-36</td>
			<td>antibiotic to prevent infection after intravitreal injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenolephrine Hydrochloride Ophthalmolic Solution (2.5%)</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NDC 17478-201-15</td>
			<td>for pupil dilation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S-5886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile syringe filters, 0.2 um</td>
			<td>VWR</td>
			<td>28143-312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>GRASEBY</td>
			<td>MS16A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

encapsulated cell technology for the delivery of biologics to the mouse eye

Muchas terapias actuales en desarrollo para enfermedades del polo posterior del ojo son biológicas. Estos medicamentos deben administrarse con frecuencia, por lo general a través de inyecciones intravítreas. Las células encapsuladas que expresan el biológico de elección se están convirtiendo en una herramienta para la producción y liberación de proteínas locales (por ejemplo, a través de la administración de fármacos a largo plazo). Además, los sistemas de encapsulación utilizan materiales permeables que permiten la difusión de nutrientes, desechos y factores terapéuticos dentro y fuera de las células. Esto ocurre mientras se enmascaran las células de la respuesta inmune del huésped, evitando la necesidad de supresión del sistema inmunitario huésped. Este protocolo describe el uso del alginato como polímero en microencapsulación junto con el método de electrospray como una técnica de microencapsulación. Las células ARPE-19, una línea celular de RPE humana que surge espontáneamente, se ha utilizado en experimentos de terapia celular a largo plazo debido a su funcionalidad de vida útil, y se utiliza aquí para la encapsulación y entrega de las cápsulas a los ojos del ratón. El manuscrito resume los pasos para la microencapsulación celular, el control de calidad y la entrega ocular.

Las células ARPE-19 son una línea celular de RPE humana inmortalizada espontáneamente que se ha demostrado que es susceptible de encapsulación y supervivencia a largo plazo tras la implantación de cápsulas en el ojo. Las herramientas para encapsular alginato se muestran en la Figura 1. En este estudio, se demostró que al encapsular en alginato, las células de las cápsulas de alginato fueron confirmadas por imágenes de campo brillante(Figura 2A). Se rea...

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Encapsulated Cell Technology for the Delivery of Biologics to the Mouse Eye

Aquí se presenta un protocolo para el uso del alginato como polímero en la microencapsulación de células inmortalizadas para la entrega a largo plazo de productos biológicos a ojos de roedores.

Tecnología celular encapsulada para la entrega de productos biológicos al ojo del ratón

Many current therapeutics under development for diseases of the posterior pole of the eye are biologics. These drugs need to be administered frequently, ...

Esta técnica es una forma confiable de entregar cualquier contenido, como medicamentos, proteínas o células, a lugares específicos en tejidos o animales. Puede realizar un seguimiento de la entrega y ajustar la liberación de los contenidos para que se ajusten al experimento que desee. Se puede utilizar para tratar numerosas enfermedades, desde la cicatrización de heridas hasta enfermedades oculares y cardíacas.La principal ventaja de este método es la capacidad de entregar células terapéuticas utilizando microcápsulas de alginato a los sitios de destino sin causar reacciones inmunitarias y mantener una entrega sostenida de terapias frescas secretas durante un período de tiempo más largo. Comience por cultivar células epiteliales de la retina de acuerdo con las instrucciones del manuscrito. Pasaje de las células cuando lleguen a 70 a 80% de confluencia utilizando procedimientos estándar de cultivo de tejido.Para encapsular las células, mezcle el alginato de sodio con agua desionizada para una concentración final de 2% de peso al volumen y purifique la mezcla mediante filtración con un filtro de jeringa estéril de 0,2 micrómetros. Pruebe, centrifugar y lave las células con 10 solución salina tamponada HEPES milimétrica. Utilice un hemocitociómetro para contar las células y ajustar la concentración celular final a un millón por mililitro de solución de alginato.Cargue 300 microlitros alícuotas de la mezcla de alginato y células en una jeringa de tres mililitros y adjúntela a una bomba de jeringa. Prepare un baño gelificante de acuerdo con las instrucciones del manuscrito y colóquelo en un vaso de precipitados estéril de 50 mililitros debajo de la punta de la jeringa a una aguja de siete milímetros a una distancia de pulverización de baño. Ajuste el voltaje a ocho kilovoltas y el caudal a 30 milímetros por hora para producir microcápsulas de aproximadamente 150 micrómetros de tamaño.Conecte el clip de tierra negro al cable de cobre que está medio sumergido en el baño de gelificación y conecte el clip del cable de ánodo rojo a la aguja. Se tarda aproximadamente 30 minutos en preparar las células encapsuladas de cada lote de un mililitro del alginato y la mezcla celular. Cuando se forme, lave las microcápsulas con solución de lavado dos veces e incubarlas con un 10%de FBS suplementado con DMEM en una incubadora humidificada a 37 grados centígrados y 5% de CO2.Después de una incubación de 24 horas, prepare una muestra de 500 microlitros de microcápsulas para su tinción lavándolos dos veces en la solución de lavado. Utilice un kit de ensayo LIVE/DEAD para mancharlos por viabilidad. Para asegurarse de que las microcápsulas tienen el tamaño adecuado, diluyalas en medios libres de suero.Aspirar cuidadosamente con una jeringa Hamilton de 2,5 microlitro. Expulse lentamente un microlitro cae sobre un portaobjetos del microscopio y determina la integridad de las microcápsulas con un microscopio Vertical Brightfield. En un ratón adecuadamente anestesiado, aplique lubricante ocular para mantener la humedad ocular y utilice una aguja de jeringa biselada de 26 calibres 3/8 pulgadas para establecer una punción inicial en el ojo justo debajo del limbo.Asegúrese de acercarse al ojo desde una dirección nasal en un ángulo de 45 grados manteniendo la punta biselada hacia arriba para evitar la perforación de la lente. A continuación, asegúrese de que toda la punta de la aguja se inserta en el ojo para la generación de orificios guía, pero tenga cuidado de no viajar demasiado lejos y perforar la retina temporal. Una vez que esto esté completo, retraiga lentamente la aguja.Dentro del micromaniprógrafo, coloque una jeringa Hamilton de punta contundente de calibre 27 de 2,5 microlitro que se haya llenado con solución de cápsula y alinee la aguja con el orificio guía inicial. Sostenga la cabeza del animal en una posición estable y maneje deliberadamente la aguja hacia el ojo. Para asegurar una posición correcta de la aguja dentro del vítreo, inserte la jeringa hasta que la punta de la aguja se pueda visualizar detrás de la lente.A continuación, inyecte la solución de la cápsula lentamente en el transcurso de 25 a 30 segundos. Y una vez completada, retraiga gradualmente la jeringa de punta contundente para minimizar la lesión en el ojo. Si es necesario, ajuste el tamaño de la cápsula ajustando el voltaje y el caudal de acuerdo con las instrucciones del manuscrito.La encapsulación de las células en el alginato se confirmó con imágenes de Brightfield y un ensayo LIVE/DEAD demostró que el 90% de las células eran viables después de la encapsulación. La viabilidad a largo plazo de las células se aseguró disolviendo las cápsulas en citrato de sodio y replating. La inyección intravítrea se realizó bajo inspección visual que permitió la visualización de cápsulas en el vítreo.Al intentar este procedimiento, no utilice PBS para ningún paso de lavado porque PBS disuelve las microcápsulas de alginato formadas. Después de su desarrollo, nuestro laboratorio se utiliza como un sistema de administración para tratar formas de insuficiencia cardíaca e hipertensión. Esta técnica se considera una herramienta prometedora para el tratamiento futuro de diferentes enfermedades cardiovasculares y neurológicas.

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