Name: a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats
Uploaded: 2019-11-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af Kinas National Natural Science Foundation (81603315, 81603316), Key R & D plan for Jiangxi provinsen i Kina (20171ACH80001), industrielle og akademiske samarbejdsprojekter i gymnasier og universiteter i Fujian-provinsen i Kina (2018Y41010011).

Proceduren og anvendelsen af animalske emner er blevet godkendt af National Institute of Health for pleje og brug af forsøgsdyr. Denne protokol er specifikt justeret for test af mellemhjernens arterie okklusion/reperfusion (MCAO/R) og sensorimotor funktion.
1. eksperimentel udformning og gruppering
<ol><li>Brug en rotte MCAO/R model til at screene en rotte hjernen iskæmisk modelmetode med mere alvorlig hjerneskade og større model succes ratio ved hjælp af Longa score og TTC farvning.<ol>...

<ol>
	<li>Kong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralization+of+chemokine-like+factor+1,+a+novel+C-C+chemokine,+protects+against+focal+cerebral+ischemia+by+inhibiting+neutrophil+infiltration+via+MAPK+pathways+in+rats.">Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 112 (2014).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+bilobalide+on+cerebral+ischemia+and+reperfusion+injury+are+associated+with+inhibition+of+pro-inflammatory+mediator+production+and+down-regulation+of+JNK1/2+and+p38+MAPK+activation.">Neuroprotective effects of bilobalide on cerebral ischemia and reperfusion injury are associated with inhibition of pro-inflammatory mediator production and down-regulation of JNK1/2 and p38 MAPK activation.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 167 (2014).</li><li>Thomas, A., Detilleux, J., Flecknell, P., Sandersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+Guidelines+on+Peri-Anesthesia+Care+for+Rat+Models+of+Stroke:+A+Meta-Analysis+Comparing+the+Years+2005+and+2015.">Impact of Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) Guidelines on Peri-Anesthesia Care for Rat Models of Stroke: A Meta-Analysis Comparing the Years 2005 and 2015.</a> PLoS One. 12, e0170243 (2017).</li><li>Kumar, A., Aakriti, V., Gupta, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+An+update.">A review on animal models of stroke: An update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>Tong, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+enhanced+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+nonhuman+primates+using+an+endovascular+trapping+technique.">An enhanced model of middle cerebral artery occlusion in nonhuman primates using an endovascular trapping technique.</a> AJNR Am. Journal of Neuroradiology. 36, 2354-2359 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9, 541-551 (2014).</li><li>Abrah&#225;m, H., Somogyv&#225;ri-Vigh, A., Maderdrut, J. L., Vigh, S., Arimura, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filament+size+influences+temperature+changes+and+brain+damage+following+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Filament size influences temperature changes and brain damage following middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Exp. Brain Res. 142, 131-138 (2002).</li><li>Sun, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coumarin+derivatives+protect+against+ischemic+brain+injury+in+rats.">Coumarin derivatives protect against ischemic brain injury in rats.</a> European Journal of Medicinal Chemistry. 67, 39-53 (2013).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Smith, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+site+and+lesion+topology+determine+efficacy+of+a+human+neural+stem+cell+line+in+a+rat+model+of+chronic+stroke.">Implantation site and lesion topology determine efficacy of a human neural stem cell line in a rat model of chronic stroke.</a> Stem Cell. 30, 785-796 (2012).</li><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Forsythia+suspense+extract+with+antioxidant+and+anti-inflammatory+properties+in+a+model+of+rotenone+induced+neurotoxicity.">Protective effects of Forsythia suspense extract with antioxidant and anti-inflammatory properties in a model of rotenone induced neurotoxicity.</a> Neurotoxicology. 52, 72-83 (2016).</li><li>Milani, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly-arginine+peptides+reduce+infarct+volume+in+a+permanent+middle+cerebral+artery+rat+stroke+model.">Poly-arginine peptides reduce infarct volume in a permanent middle cerebral artery rat stroke model.</a> BMC Neuroscience. 17, 19 (2016).</li><li>DeGraba, T. J., Ostrow, P., Hanson, S., Grotta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+performance,+histologic+damage,+and+calcium+influx+in+rats+treated+with+NBQX+after+focal+ischemia.">Motor performance, histologic damage, and calcium influx in rats treated with NBQX after focal ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14, 262-268 (1994).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+preclinical+animal+model+to+assess+brain+recovery+after+acute+stroke.">Validation of a preclinical animal model to assess brain recovery after acute stroke.</a> European Journal of Pharmacology. 835, 75-81 (2018).</li><li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IMM-H004+prevents+toxicity+induced+by+delayed+treatment+of+tPA+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemia+involving+PKA-and+PI3K-dependent+Akt+activation.">IMM-H004 prevents toxicity induced by delayed treatment of tPA in a rat model of focal cerebral ischemia involving PKA-and PI3K-dependent Akt activation.</a> European Journal of Neuroscience. 39, 2107-2118 (2014).</li><li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-3-n-butylphthalide+Promotes+Neurogenesis+and+Neuroplasticity+in+Cerebral+Ischemic+Rats.">L-3-n-butylphthalide Promotes Neurogenesis and Neuroplasticity in Cerebral Ischemic Rats.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 21, 733-741 (2015).</li></ol>

Mange modeller etablere metoder og adfærdsmæssige indikatorer, der er godt brugt i akut cerebral iskæmi kan ikke have væsentlige ændringer i inddrivelse og overdreven stadier af hjernen iskæmi16,17. Men, antallet af patienter med hjernen iskæmisk i Recovery og overdreven stadier er den største. Det er vigtigt at vælge en egnet dyremodel for genopretning og overdreven stadier af iskæmi slagtilfælde.
Vi bruger MCAO/R-modellen ...

Hjernen iskæmi er opdelt i tre faser med forskellige post-Stroke indikatorer: den akutte fase (inden for 1 uge), inddrivelse fase (1 uge til 6 måneder), og sequelae fase (mere end 6 måneder). I øjeblikket, de fleste undersøgelser fokuserer på den akutte fase af hjernen iskæmi på grund af sin betydelige effekt og multi-relative forskningsmodeller1,2,3. Men, genopretning og sequelae stadier af hjernen iskæmi kan ikke ignoreres på grund af deres langsigtede komplikation af handicap. Derfor er formålet med denne undersøgelse er at udforske en stabil, pålidelig og relativt enkel dyremodel til forskning genopretning og overdreven stadier af hjernen iskæmi.
Blandt de mange eksperimentelle hjernen iskæmi modeller, vi bruger midterste cerebral arterie okklusion (MCAO) via gevind bolt indsættelse i højre midterste cerebral arterie (MCA). Denne model er magen til menneskelige slagtilfælde, som kan producere større infarkt volumener, resultere i mange adfærdsmæssige lidelser relateret til slagtilfælde, og kan tillade blod reperfusion (R) ved at fjerne tråden bolt4,5,6. MCAO/R er også betragtes som guld standard animalsk model af hjernen iskæmi7. Endvidere, sværhedsgraden af hjernen skaden afhænger af diameteren og indsættelsen længden af tråden Bolt, varigheden af hjernen iskæmi, og dyrets vægt (større rotter har større hjerner og tykkere cerebrale blodkar)8. Derfor, ved at ændre tråden bolt type, infarkt tid, og rotte vægt, en passende model kan findes for genopretning og overdreven stadier af hjernen iskæmi i mcao/R rotter. For at validere rotte model, vi udførte en 1-dag, 35-dag, 60-dag, og 90-dages undersøgelse af MCAO/R model ved hjælp af TTC farvning og sensorimotor funktion eksperimenter (en bilateral asymmetri test, en gitter-Walking test, en rotarod test og en løft reb test).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anatomical Microscope</td>
			<td>Leica (Germany)</td>
			<td>S8</td>
			<td>Microscopic operating instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blade</td>
			<td>Gellette</td>
			<td>/</td>
			<td>Cutting brain sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constant Temperature Shaking Bed</td>
			<td>Taicang Experimental Equipment Factory</td>
			<td>THZ-C</td>
			<td>To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>700D</td>
			<td>For taking pictures of TTC staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Shaver</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>3000#</td>
			<td>Removal of hair from the neck of rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Hamostatic</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>14 cm</td>
			<td>Using for brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Pro Plus Software</td>
			<td>Media Cybernetics Inc.</td>
			<td>6.0</td>
			<td>Analyze the infarct volume</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>217170702</td>
			<td>Anesthetic gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microshear</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Forceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Auxiliary skin and muscle anatomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pphthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Using for cutting the skin of neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Brain Slice Mold</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>400 g</td>
			<td>For standard, uniform cutting of brain tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus</td>
			<td>Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>ZH-300B</td>
			<td>To test the sensorimotor function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anaesthesia Machine</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>ABM3000</td>
			<td>A gas anesthetic machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Thermostat</td>
			<td>Beijing Damida Technology Co., Ltd.</td>
			<td>DM.7-YLS-20A</td>
			<td>To maintain animal body temperature constant during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>16 cm</td>
			<td>Using for decapitate and brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td>Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>4-0 / 5-0</td>
			<td>Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thread Bolt</td>
			<td>Beijing Cinontech Co. Ltd.</td>
			<td>2636/2838/3040/3043-A4</td>
			<td>Blockage of the middle cerebral artery in rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>LOT#BCBP3272V</td>
			<td>Brain section staining reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats

Formålet med denne undersøgelse var at etablere og validere en dyr hjerne iskæmi model i Recovery og overdreven stadier. En mellemcerebral arterie okklusion/reperfusion (MCAO/R) model i mandlige Sprague-Dawley rotter blev valgt. Ved at ændre rotte vægt (260 − 330 g), gevind bolt typen (2636/2838/3040/3043) og hjernens infarkt tid (2-3 h), en højere Longa score, en større infarkt volumen og en større model succes ratio blev screenet ved hjælp af Longa score og TTC farvning. Den optimale model betingelse (300 g, 3040 gevind Bolt, 3 h hjerneinfarkt tid) blev erhvervet og anvendt i en 1-90 dag observationsperiode efter reperfusion via vurdering af sensorimotorik funktioner og infarkt volumen. På disse betingelser, den bilaterale asymmetri test havde en betydelig forskel fra 1 til 90 dage, og gitter-Walking test havde en betydelig forskel fra 1 til 60 dage; begge forskelle kunne være en passende sensorimotor funktionel test. Således, den mest hensigtsmæssige tilstand af en roman rotte model i Recovery og overdreven stadier af hjernen iskæmi blev fundet: 300 g rotter, der gennemgik mcao med en 3040 gevind bolt for en 3 h hjerneinfarkt og derefter reperfbrugt. De relevante sensorimotoriske funktionelle tests var en bilateral asymmetri test og en gitter-Walking test.

Ved anvendelse af ovennævnte procedure for en MCAO/R-model med en Longa-score og TTC-farvning, forskellige behandlinger af gennemsnitsvægten (275/300/320 g), bolt typer (2636/2838/3040/3043; Tabel 1) og iskæmisk gange (2-3 h) og 1 dag reperfusion blev brugt til at screene for den optimale hjernen iskæmi model i rotter. Model parametre af 300 g vægt, 3040 gevind Bolt, og 3 h hjernen infarkt tid var den mest egnede til den største cerebral infarkt, højeste Longa scor...

Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats

Formålet med denne undersøgelse er at etablere og validere en dyremodel for forskning i genopretning og overdreven stadier af hjernen iskæmi ved at teste hjerneinfarkt og sensorimotor funktion efter mellemhjernens arterie okklusion/reperfusion (mcao/R) efter 1-90 dage i rotter.

En præklinisk model til vurdering af hjerne bedring efter akut slagtilfælde hos rotter

The purpose of this study was to establish and validate an animal brain ischemia model in the recovery and sequela stages. A middle cerebral artery ...

Denne undersøgelse bruger en etableret dyremodel til forskning i genopretning og sequelae stadier af hjernen iskæmi. De største fordele ved denne teknik er, at den er stabil, pålidelig og forholdsvis enkel. Begynd med at placere en bedøvet rotte på en kirurgisk fastsættelse bord.Under hele operationen, opretholde kropstemperaturen af rotten ved 37 grader Celsius i et lille dyr termostat. Tilslut munden til anæstesi maskine maske og bekræfte dyb anæstesi ved manglende ekstremitet spænding, hornhinde reflekser og smerte. Fastgør rottens lemmer til operationsbordet ved hjælp af papirbandage.Med en elektrisk barbermaskine, fjerne hals pels og sterilisere halsen med 75% alkohol. Brug oftalmologiske saks til at skære to til tre centimeter langs den centrale langsgående form af halsen. Og så med oftalmologiske stænde, adskille den subkutane muskel.Brug hjemmelavet retractor til fuldt ud at eksponere synsfeltet. Der skal være omhu for at præsentere passende aseptisk teknik til alle overlevelseskirurgiske procedurer. Den teknik, der illustreres senere i videoen, skal praktiseres gennem hele proceduren.Brug mikrotænger til at isolere den almindelige halspulsåre, den eksterne halspulsåre og den interne halspulsåre. Arbejde under mikroskopet, brug 8-0 suturer til at ligate den fælles halspulsåren med hård knude, ekstern halspulsåren langt fra hjerteenden med hård knude, indre halspulsåre med løs knude og derefter at linje den eksterne halspulsåren nær hjerteden. Brug mikro saks, skære en lille åbning i den eksterne halspulsåren og forsigtigt indsætte en tråd bolt.Ligelig suturen af den eksterne halspulsåre, der er tynd og løs knude og afbrød den eksterne halspulsåre. Løs knude i den indre halspulsåre løsnes, og fortsæt med at indsætte gevindbolten til begyndelsen af den midterste cerebrale arterie markeret med suturen og afbrød den eksponerede gevindbolt. Efter den iskæmiske tid er nået efter to til tre timer, fastgør fraktur af den eksterne halspulsåre ved hjælp af mikrotæcesser og træk forsigtigt gevindbolten ud med en anden mikrotænger.Efter helt at trække den forreste ende af trådbolten fra den interne halspulsåre, ligte den eksterne halspulsåren, der er foret med 8-0 sutur og derefter fjerne trådbolten helt. Efter at løsne den fælles halspulsåren, dab ca 50, 000 enheder af penicillin natrium pulver på sårets overflade for at forhindre infektion. Brug fire suturer til sutur subkutane muskler og hud.Efter at have placeret rotten tilbage til buret, skal du bruge en 1 milliliter sprøjte til at give ca 0,2 milliliter vand til rotten mundtligt for at forhindre postoperativ dehydrering. Vælg dyrene i henhold til den længste score for TTC farvning eller sensoriske motorundersøgelser. Efter inkubering hjernen isoleret for TTC farvning på minus 20 grader Celsius på 30 minutter, placere den i en pre-afkølet rotte hjerne skive skimmel.Ved hjælp af en forkølet klinge, skære hjernen i seks to-millimeter tykke på hinanden følgende sektioner. Plet sektioner med 2% TTC i en seks-brønd kultur plade og inkubere i 30 til 60 minutter ved 37 grader Celsius, mens rystelser. Hvert 10.Line hjernen skiver lodret på den sorte pap i rækkefølge fra bagsiden til forsiden af hjernen ved hjælp af en lineal for at sikre, at den samlede længde af hver linje er den samme og tage billeder. Importer billedet, og vælg hjerneudsnit. Vælg sort forgrund, og skriv Alt Delete for at udfylde baggrundsfarven, og kontrol af D for at fravælge den.Endelig skal du gemme billedet på skrivebordet. Hvis du vil analysere mængden af infarkt, skal du først åbne softwaren og importere billedet. For at defekte modifikation skal du justere lysstyrken med kontrastforbedringsværktøjet, så baggrunden er sort.Brug midterværktøjet i filteret til at fjerne højlys. For at beregne den venstre normale hjerne område, skal du vælge farve ved hjælp af segmentering og justere værdien af H, S og I til at adskille hjernen skiver fra den sorte baggrund. Vend tilbage for at tælle størrelse og klik på tælle.Klik på split objekter i redigere for at adskille hjernen fra midterlinjen, som automatisk vil skelne venstre og højre hjerne områder. Hvis du vil beregne det højre infarkt-hjerneområde, skal du importere billedet, justere baggrunden og fjerne højlys som udført tidligere. Vælg tællestørrelse, og klik på værktøjet tegn fletobjekter i redigering.Vælg det iskæmiske område manuelt, og klik på antal for at beregne det iskæmiske område. Hvis du vil beregne det rigtige område med en sund hjerne, skal du først importere billedet, justere baggrunden og fjerne højlys som gjort tidligere. Vælg farve ved hjælp af segmentering og justere værdien af H, S og I til at adskille den sunde hjerne skiver fra den sorte baggrund.Vend tilbage for at tælle størrelse og klik på tælle for at beregne dette område. Klik på split objekter i redigere for at adskille hjernen fra midterlinjen, som automatisk vil skelne venstre og højre hjerne områder. Tag rotter valgt til sensoriske motoriske undersøgelser og til bilateral assymetri test og wrap papirtape på saphenous del af hver for klo tre gange ved hjælp af samme tryk.For hver rotte, optage med kameraet antallet af gange hver for klo kontakter og fjerner båndet inden for fem minutter, herunder upåvirket og påvirket pote gange. Gentag ombrydning og optagelse efter 30 minutter, og beregn derefter værdierne. For gitter gå test, placere rotten i midten af en forhøjet gitter overflade platform med 2,5 kvadratcentimeter åbninger.Skub rottens hofter lidt for at tilskynde den til at bevæge sig hen over overfladen. Brug kameraet, optage antallet af fodfejl foretaget af højre upåvirket og venstre berørte lemmer og det samlede trin nummer i et minut med kamera. Ved rotorstangtest skal du opsætte det roterende bartræthedsapparat til en hastighed på 13 omdr./min. over en periode på fem minutter ved hjælp af den understøttende software.Start edb-programmet og placere rotten på rotorstangsringe på samme tid. Afslut forsøget, hvis rotten falder af ringen eller efter fem minutter og registrere den roterende tid. Lad rotten hvile i 30 minutter, og gentag derefter testen to gange mere, og vælg den maksimale værdi som sidste roterende tid.Ved løfterebtest skal løftetovet sættes på et skrivebord. Få rotten til at gribe fat i rebet med dets forslimbs og lad det hænge. Optag tidspunktet for hængning og beregne score.Når hjernen iskæmisk skade induceret af midten cerebral arterie okklusion og reperfusion blev undersøgt, 300 gram vægt 3040 tråd bolt og tre-timers hjerne infarkt tid viste sig at være den mest egnede med den største cerebral infarkt, længste længste score, og største model succes forhold. Dette blev væsentligt forbedret i forhold til den konventionelle behandling af 275 gram vægt, 2636 tråd bolt og to-timers hjerne infarkt tid. At studere inddrivelse status af hjernen iskæmi, TTC farvning blev udført, og det afslørede infarkt og skrumpe volumen på 23,4% på den første dag efter midten cerebral arterie okklusion og reperfusion, 19,6% på 35:e dag, 16,1% på 60th og 15,7% på 90.Efter en dag med midt cerebral arterie okklusion og reperfusion, sensorisk motor bias i den bilaterale assymetri test, gitter gå fejl gange i nettet gå test og løfte reb score i løfte reb test er alle steget, mens stangen rotor tid i rotorstangen test faldt angiver betydningen af disse tests i at studere akut hjerneiskæmi. Kun sensorisk motorisk bias opretholdt store funktionelle lidelser med en tidsafhængig måde efter 35, 60 og 90 dage med midten cerebral arterie okklusion og reperfusion. For nettet walking test, var der betydelige forskelle i nettet gå fejl gange i 35 og 60 dage.Disse resultater viste, at disse to test kunne være egnede til at teste restitutionen hos rotter. For at sikre succes skal handlingen være skånsom, og operationen skal være stabil. Andre adfærdsmæssige tests såsom gangart detektion kan også være egnet til denne model.Udvikling af denne model kan bane vejen for forskere at udforske hjernen iskæmi i genopretning og sequelae faser.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

Transplantation af olfaktoriske Ensheathing Cells at evaluere Funktionel Recovery efter perifer nerveskade

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Forberedelse af akut hjernen skiver bruger en optimeret N-Methyl-D-glucamine beskyttende genoprettelsesmetode

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Utilizing 3D Printing Technology to Merge MRI with Histology: A Protocol for Brain Sectioning

Udnytte 3D Printing Technology til Flet MRI med Histologi: En protokol for Brain Skæring

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Delvis synsnerven Transection i rotter: en standardformular, som udarbejdes med en ny operativ tilgang til at vurdere sekundære Degeneration af Retinal Ganglion celler

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

En In Vivo evaluering af blod - hjerne barrieren forstyrrelser i en rotte Model af iskæmisk slagtilfælde

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

A Fibrin-Enriched and tPA-Sensitive Photothrombotic Stroke Model

En fibrinberiget og tPA-følsom fototrombotisk slagtilfældemodel

An ideal thromboembolic stroke model requires certain properties, including relatively simple surgical procedures with low mortality, a consistent ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

En rottemodel af EcoHIV-hjerneinfektion

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Motor Dual-Tasks for Gait Analysis and Evaluation in Post-Stroke Patients

Motoriske dobbeltopgaver til ganganalyse og evaluering hos patienter efter slagtilfælde

Eighteen stroke patients were recruited for this study involving the evaluation of cognition and walking ability and multitask gait analysis. Multitask ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Dural stimulering og periorbital von Frey test hos mus som en præklinisk model af hovedpine

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

En model for encephalomyosynangiose behandling efter mellemcerebral arterie okklusionsinduceret slagtilfælde hos mus

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...