Name: a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats
Uploaded: 2019-11-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

Dit werk werd gesteund door de National Natural Science Foundation of China (81603315, 81603316), key R & D plan van de provincie Jiangxi in China (20171ACH80001), industriële en academische samenwerkingsprojecten in hogescholen en universiteiten van de provincie Fujian in China (2018Y41010011).

De procedure en het gebruik van dierproef personen zijn goedgekeurd door het National Institute of Health for the Care and use of Lab animals. Dit protocol is specifiek aangepast voor de tests van de middelste cerebrale slagader occlusie/reperfusie (MCAO/R) en sensorimotorische functie.
1. experimenteel ontwerp en groepering
<ol><li>Gebruik een rat MCAO/R-model voor het scherm van een rat hersenen ischemische model methode met meer ernstige hersenletsel en grotere model succesratio met behul...

<ol>
	<li>Kong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralization+of+chemokine-like+factor+1,+a+novel+C-C+chemokine,+protects+against+focal+cerebral+ischemia+by+inhibiting+neutrophil+infiltration+via+MAPK+pathways+in+rats.">Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 112 (2014).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+bilobalide+on+cerebral+ischemia+and+reperfusion+injury+are+associated+with+inhibition+of+pro-inflammatory+mediator+production+and+down-regulation+of+JNK1/2+and+p38+MAPK+activation.">Neuroprotective effects of bilobalide on cerebral ischemia and reperfusion injury are associated with inhibition of pro-inflammatory mediator production and down-regulation of JNK1/2 and p38 MAPK activation.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 167 (2014).</li><li>Thomas, A., Detilleux, J., Flecknell, P., Sandersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+Guidelines+on+Peri-Anesthesia+Care+for+Rat+Models+of+Stroke:+A+Meta-Analysis+Comparing+the+Years+2005+and+2015.">Impact of Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) Guidelines on Peri-Anesthesia Care for Rat Models of Stroke: A Meta-Analysis Comparing the Years 2005 and 2015.</a> PLoS One. 12, e0170243 (2017).</li><li>Kumar, A., Aakriti, V., Gupta, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+An+update.">A review on animal models of stroke: An update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>Tong, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+enhanced+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+nonhuman+primates+using+an+endovascular+trapping+technique.">An enhanced model of middle cerebral artery occlusion in nonhuman primates using an endovascular trapping technique.</a> AJNR Am. Journal of Neuroradiology. 36, 2354-2359 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9, 541-551 (2014).</li><li>Abrah&#225;m, H., Somogyv&#225;ri-Vigh, A., Maderdrut, J. L., Vigh, S., Arimura, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filament+size+influences+temperature+changes+and+brain+damage+following+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Filament size influences temperature changes and brain damage following middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Exp. Brain Res. 142, 131-138 (2002).</li><li>Sun, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coumarin+derivatives+protect+against+ischemic+brain+injury+in+rats.">Coumarin derivatives protect against ischemic brain injury in rats.</a> European Journal of Medicinal Chemistry. 67, 39-53 (2013).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Smith, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+site+and+lesion+topology+determine+efficacy+of+a+human+neural+stem+cell+line+in+a+rat+model+of+chronic+stroke.">Implantation site and lesion topology determine efficacy of a human neural stem cell line in a rat model of chronic stroke.</a> Stem Cell. 30, 785-796 (2012).</li><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Forsythia+suspense+extract+with+antioxidant+and+anti-inflammatory+properties+in+a+model+of+rotenone+induced+neurotoxicity.">Protective effects of Forsythia suspense extract with antioxidant and anti-inflammatory properties in a model of rotenone induced neurotoxicity.</a> Neurotoxicology. 52, 72-83 (2016).</li><li>Milani, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly-arginine+peptides+reduce+infarct+volume+in+a+permanent+middle+cerebral+artery+rat+stroke+model.">Poly-arginine peptides reduce infarct volume in a permanent middle cerebral artery rat stroke model.</a> BMC Neuroscience. 17, 19 (2016).</li><li>DeGraba, T. J., Ostrow, P., Hanson, S., Grotta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+performance,+histologic+damage,+and+calcium+influx+in+rats+treated+with+NBQX+after+focal+ischemia.">Motor performance, histologic damage, and calcium influx in rats treated with NBQX after focal ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14, 262-268 (1994).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+preclinical+animal+model+to+assess+brain+recovery+after+acute+stroke.">Validation of a preclinical animal model to assess brain recovery after acute stroke.</a> European Journal of Pharmacology. 835, 75-81 (2018).</li><li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IMM-H004+prevents+toxicity+induced+by+delayed+treatment+of+tPA+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemia+involving+PKA-and+PI3K-dependent+Akt+activation.">IMM-H004 prevents toxicity induced by delayed treatment of tPA in a rat model of focal cerebral ischemia involving PKA-and PI3K-dependent Akt activation.</a> European Journal of Neuroscience. 39, 2107-2118 (2014).</li><li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-3-n-butylphthalide+Promotes+Neurogenesis+and+Neuroplasticity+in+Cerebral+Ischemic+Rats.">L-3-n-butylphthalide Promotes Neurogenesis and Neuroplasticity in Cerebral Ischemic Rats.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 21, 733-741 (2015).</li></ol>

Veel modellen tot vaststelling van methoden en gedragsindicatoren die goed worden gebruikt in acute cerebrale ischemie kunnen geen significante veranderingen in het herstel en sequela stadia van hersenen ischemie16,17. Echter, het aantal patiënten met hersenen ischemische in het herstel en sequela stadia is de grootste. Het is essentieel om te kiezen van een geschikte diermodel voor het herstel en sequela stadia van ischemie beroerte.
<p class="jove_content"...

Hersenen ischemie is onderverdeeld in drie stadia met verschillende post-Stroke indicatoren: de acute fase (binnen 1 week), de herstelfase (1 week tot 6 maanden), en de gevolgen fase (meer dan 6 maanden). Momenteel, de meeste studies richten op de acute fase van hersenen ischemie vanwege zijn significante effect en multi-relatieve onderzoek modellen1,2,3. Echter, de herstel-en gevolgen stadia van hersen ischemie kunnen niet worden genegeerd als gevolg van hun lange termijn complicatie van handicaps. Daarom is het doel van deze studie om te verkennen van een stabiele, betrouwbare en relatief eenvoudige diermodel voor het onderzoek van het herstel en sequela stadia van hersenen ischemie.
Onder de vele experimentele hersenen ischemie modellen, gebruiken we middelste cerebrale slagader occlusie (MCAO) via schroefdraad bout inbrengen in de rechter middelste cerebrale slagader (MCA). Dit model is vergelijkbaar met menselijke beroerte, die grotere infarct volumes kan produceren, resulteren in vele gedragsstoornissen gerelateerd aan een beroerte, en kan het toestaan van bloed reperfusie (R) door het verwijderen van de schroefdraad bout4,5,6. MCAO/R wordt ook beschouwd als de gouden standaard diermodel van hersenen ischemie7. Bovendien, de ernst van de hersenletsel hangt af van de diameter en de invoeging lengte van de schroefdraad bout, de duur van hersen ischemie, en het dierlijke gewicht (grotere ratten hebben grotere hersenen en dikkere cerebrale vaten)8. Daarom, door het veranderen van de schroefdraad bout type, de infarct tijd, en de rat gewicht, een geschikt model kan worden gevonden voor het herstel en sequela stadia van hersenen ischemie in MCAO/R ratten. Om het Rat-model te valideren, voerden we een 1-daagse, 35-dag, 60-dag, en 90-dag studie van de MCAO/R model met behulp van TTC kleuring en sensorimotorische functie experimenten (een bilaterale asymmetrie test, een grid-Walking test, een rotarod test en een hijs touw test).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anatomical Microscope</td>
			<td>Leica (Germany)</td>
			<td>S8</td>
			<td>Microscopic operating instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blade</td>
			<td>Gellette</td>
			<td>/</td>
			<td>Cutting brain sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constant Temperature Shaking Bed</td>
			<td>Taicang Experimental Equipment Factory</td>
			<td>THZ-C</td>
			<td>To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>700D</td>
			<td>For taking pictures of TTC staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Shaver</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>3000#</td>
			<td>Removal of hair from the neck of rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Hamostatic</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>14 cm</td>
			<td>Using for brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Pro Plus Software</td>
			<td>Media Cybernetics Inc.</td>
			<td>6.0</td>
			<td>Analyze the infarct volume</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>217170702</td>
			<td>Anesthetic gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microshear</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Forceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Auxiliary skin and muscle anatomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pphthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Using for cutting the skin of neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Brain Slice Mold</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>400 g</td>
			<td>For standard, uniform cutting of brain tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus</td>
			<td>Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>ZH-300B</td>
			<td>To test the sensorimotor function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anaesthesia Machine</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>ABM3000</td>
			<td>A gas anesthetic machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Thermostat</td>
			<td>Beijing Damida Technology Co., Ltd.</td>
			<td>DM.7-YLS-20A</td>
			<td>To maintain animal body temperature constant during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>16 cm</td>
			<td>Using for decapitate and brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td>Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>4-0 / 5-0</td>
			<td>Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thread Bolt</td>
			<td>Beijing Cinontech Co. Ltd.</td>
			<td>2636/2838/3040/3043-A4</td>
			<td>Blockage of the middle cerebral artery in rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>LOT#BCBP3272V</td>
			<td>Brain section staining reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats

Het doel van deze studie was het vestigen en valideren van een dier hersenen ischemie model in het herstel en sequela stadia. Een middelste cerebrale slagader occlusion/reperfusion (MCAO/R) model in mannelijke Sprague-Dawley ratten werd gekozen. Door het gewicht van de rat (260 − 330 g) te veranderen, werden het schroefdraad bout type (2636/2838/3040/3043) en de herseninfarct tijd (2-3 h), een hogere Longa-Score, een groter infarct-volume en een grotere succesratio van het model gescreend met behulp van de Score van de Longa en de TTC-kleuring. De optimale model conditie (300 g, 3040 schroefdraad bout, 3 uur herseninfarct tijd) werd verworven en gebruikt in een observatieperiode van 1-90 dagen na reperfusie via beoordeling van sensorimotorische functies en infarct volume. Onder deze omstandigheden had de bilaterale asymmetrie test een significant verschil van 1 tot 90 dagen, en de grid-Walking test had een significant verschil van 1 tot 60 dagen; beide verschillen kunnen een geschikte sensorimotorische functionele test zijn. Dus, de meest geschikte voorwaarde van een roman rat model in het herstel en sequela stadia van hersenen ischemie werd gevonden: 300 g ratten die onderging MCAO met een 3040 draadbout voor een 3 h herseninfarct en vervolgens reperfused. De geschikte sensorimotorische functionele testen waren een bilaterale asymmetrie test en een grid-Walking test.

Met behulp van de bovengenoemde procedure voor een MCAO/R-model met een Score van Longa en TTC-kleuring, verschillende behandelingen van gemiddeld gewicht (275/300/320 g), bout typen (2636/2838/3040/3043; Tabel 1) en ischemische tijden (2-3 h) en 1 dag reperfusie werden gebruikt om het scherm voor de optimale hersenen ischemie model bij ratten. Model parameters van 300 g gewicht, 3040 draadbout, en 3 h herseninfarct tijd waren het meest geschikt voor de grootste herseninf...

Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats

Het doel van deze studie is het vaststellen en valideren van een diermodel voor onderzoek in de herstel-en sequela stadia van hersen ischemie door het testen van herseninfarct en sensorimotorische functie na de middelste cerebrale slagader occlusion/reperfusie (MCAO/R) na 1-90 dagen bij ratten.

Een preklinisch model om hersen herstel na acute beroerte bij ratten te beoordelen

The purpose of this study was to establish and validate an animal brain ischemia model in the recovery and sequela stages. A middle cerebral artery ...

Deze studie maakt gebruik van een gevestigd diermodel om het herstel en de vervolgstadia van de hersenchemie te onderzoeken. De belangrijkste voordelen van deze techniek zijn dat het stabiel, betrouwbaar en relatief eenvoudig is. Begin met het plaatsen van een verdoofde rat op een chirurgische bevestigingstafel.Gedurende de operatie, handhaven van de lichaamstemperatuur van de rat op 37 graden Celsius in een klein dier thermostaat. Sluit de mond aan op de anesthesie machine masker en bevestig diepe anesthesie door gebrek aan extremiteit spanning, hoornvlies reflexen en pijn. Bevestig de ledematen van de rat op de operatietafel met behulp van papieren verband.Verwijder met een elektrisch scheerapparaat de nekjas en steriliseer de hals met 75% alcohol. Gebruik oogheelkundige schaar om twee tot drie centimeter te snijden langs de centrale longitudinale vorm van de nek. En dan met oogheelkundige tangen, scheiden de onderhuidse spier.Gebruik zelfgemaakte oprolmechanisme om het gezichtsveld volledig bloot te leggen. Er moet voor worden gezorgd dat de juiste aseptische techniek voor alle overlevingchirurgische procedures aanwezig is. De techniek die later in de video wordt geïllustreerd, moet gedurende de hele procedure worden toegepast.Gebruik de micro tangen om de gemeenschappelijke halsslagader, de externe halsslagader en de interne halsslagader te isoleren. Werken onder de microscoop, gebruik 8-0 hechtingen om de gemeenschappelijke halsslagader met harde knoop, externe halsslagader ver van het harteinde met harde knoop, interne halsslagader met losse knoop te binden en dan de externe halsslagader dichtbij het harteind te lijnen. Snijd met behulp van een microschaar een kleine opening in de externe halsslagader en steek voorzichtig een draadbout in.Ligate de hechting van de externe halsslagader die dun en losse knoop is en snijd de externe halsslagader af. Maak de losse knoop van de interne halsslagader los en blijf de draadbout aan het begin van de middelste hersenslagader met de hechting plaatsen en snijd de blootgestelde draadbout af. Nadat de ischemische tijd is bereikt na twee tot drie uur, bevestig de breuk van de externe halsslagader met behulp van micro tangen en trek voorzichtig de draadbout met een andere micro tang.Na het volledig terugtrekken van de voorkant van de draad bout van de interne halsslagader, ligate de externe halsslagader die is bekleed met 8-0 hechting en verwijder vervolgens de draadbout volledig. Na het losmaken van de gemeenschappelijke halsslagader, dep ongeveer 50.000 eenheden penicilline natriumpoeder op het wondoppervlak om infectie te voorkomen. Gebruik vier hechtingen om onderhuidse spieren en huid te hechten.Na het plaatsen van de rat terug naar de kooi, gebruik een een milliliter spuit om ongeveer 0,2 milliliter water te geven aan de rat mondeling om postoperatieve uitdroging te voorkomen. Kies de dieren volgens de langste score voor TTC vlekken of sensorische motorische studies. Na het uitbroeden van de hersenen geïsoleerd voor TTC vlekken op min 20 graden Celsius van 30 minuten, plaats het in een vooraf gekoelde rat hersenen slice mal.Met behulp van een vooraf gekoeld blad, snijd de hersenen in zes twee millimeter dikke opeenvolgende secties. Vlek de secties met 2%TTC in een zes-goed cultuurplaat en incubbate 30 tot 60 minuten bij 37 graden Van Celsius terwijl het schudden. Elke 10 minuten, flip de secties tot de hersenen ischemie en de niet-aangetaste gebieden zijn zichtbaar wit en rood.Lijn de hersenen snijdt verticaal op het zwarte karton in volgorde van de achterkant naar de voorkant van de hersenen met behulp van een liniaal om ervoor te zorgen dat de totale lengte van elke lijn is hetzelfde en foto's te nemen. Importeer de foto en selecteer de hersensegmenten. Selecteer zwarte voorgrond en typ Alt Delete om de achtergrondkleur op te vullen en schakel vervolgens D in om de selectie uit te zetten.Sla ten slotte de afbeelding op het bureaublad op. Als u het infarctvolume wilt analyseren, opent u eerst de software en importeert u de foto. Als u de wijziging wilt wijzigen, past u de helderheid aan met het gereedschap contrastverbetering, zodat de achtergrond zwart is.Gebruik in het filter het gereedschap Mediaan om de hooglichten te verwijderen. Als u het linker normale hersengebied wilt berekenen, selecteert u kleur met behulp van segmentatie en past u de waarde van H, S en ik aan om de hersensegmenten van de zwarte achtergrond te scheiden. Terug te tellen grootte en klik op tellen.Klik op gesplitste objecten in bewerken om de hersenen te scheiden van de middellijn die automatisch links en rechts hersengebieden zal onderscheiden. Als u het juiste hersengebied wilt berekenen, importeert u de afbeelding, past u de achtergrond aan en verwijdert u de hooglichten zoals eerder gedaan. Selecteer telgrootte en klik op het gereedschap Samenvoegobjecten tekenen in bewerken.Selecteer handmatig het ischemische gebied en klik op tellen om het ischemische gebied te berekenen. Als u het juiste gezonde hersengebied wilt berekenen, importeert u eerst de afbeelding, past u de achtergrond aan en verwijdert u de hooglichten zoals eerder gedaan. Selecteer kleur met behulp van segmentatie en pas de waarde van H, S en ik aan om de gezonde hersensegmenten te scheiden van de zwarte achtergrond.Terug te tellen grootte en klik op tellen om dit gebied te berekenen. Klik op gesplitste objecten in bewerken om de hersenen te scheiden van de middellijn die automatisch links en rechts hersengebieden zal onderscheiden. Neem ratten gekozen voor sensorische motorische studies en voor bilaterale assymetrie test en wrap paper tape op het saphenous deel van elke voorklauw drie keer met behulp van gelijke druk.Voor elke rat, opnemen met de camera het aantal keren dat elke voorenklauw contacten en verwijdert de tape binnen vijf minuten met inbegrip van onaangetaste en getroffen poottijden. Herhaal het inpakken en opnemen na 30 minuten en bereken vervolgens de waarden. Voor grid walking test, plaats de rat in het midden van een verhoogde raster oppervlak platform met 2,5 vierkante centimeter openingen.Duw de heupen van de rat iets om het aan te moedigen om over het oppervlak te bewegen. Met behulp van de camera, registreren het aantal voet fouten gemaakt door de rechter onaangetast en links aangetaste ledematen en de totale stap nummer in een minuut met de camera. Voor de rotorstangtest stelt u het rattenvermoeidingsapparaat voor de rat over een periode van vijf minuten in op een snelheid van 13 rpm met behulp van de ondersteunende software.Start het computerprogramma en plaats de rat op hetzelfde moment op de rotorstangringen. Beëindig de proef als de rat van de ring valt of na vijf minuten en neem de roterende tijd op. Laat de rat 30 minuten rusten, herhaal de test nog twee keer en kies de maximale waarde als laatste roterende tijd.Voor het hijsen touw test, plaats het hijstouw instrument op een bureau. Laat de rat het touw met zijn voorpoten vastgrijpen en laat het hangen. Nota van de tijd van het ophangen en bereken de scores.Wanneer de hersenen ischemische letsel veroorzaakt door middelste cerebrale slagader occlusie en reperfusie werd bestudeerd, 300 gram gewicht 3040 draad bout en drie uur herseninfarct tijd bleek het meest geschikt met de grootste herseninfarct, hoogste langste score, en grootste model succes ratio. Dit was aanzienlijk verbeterd in vergelijking met de conventionele behandeling van 275 gram gewicht, 2636 draad bout en twee uur herseninfarct tijd. Om de herstelstatus van hersenischemie te bestuderen, werd TTC-kleuring uitgevoerd en het bleek het infarct en krimpvolume op 23,4% op de eerste dag na de middelste cerebrale slagader occlusie en reperfusie, 19,6% op de 35e dag, 16,1% op de 60e en 15,7% op de 90e.Na een dag van middelste cerebrale slagader occlusie en reperfusie, zintuiglijke motor bias in de bilaterale assymetrie test, grid lopen fouttijden in het rooster lopen test en hijstouw score in de hijstouw test zijn allemaal verhoogd, terwijl de rotor staaf tijd in de rotor staaf test verminderd wat het belang van deze tests in het bestuderen van acute hersenen ischemie. Alleen sensorische motorische bias onderhouden grote functionele stoornissen met een tijd-afhankelijke manier na 35, 60 en 90 dagen van middelste cerebrale slagader occlusie en reperfusie. Voor de grid walking test waren er aanzienlijke verschillen in grid walking error times voor 35 en 60 dagen.Deze resultaten gaven aan dat deze twee tests geschikt zouden kunnen zijn voor het testen van het herstel bij ratten. Om succes te garanderen, moet de actie zacht zijn en moet de werking stabiel zijn. Andere gedragstests zoals gangdetectie kunnen ook geschikt zijn voor dit model.Ontwikkeling van dit model zou de weg kunnen effenen voor onderzoekers om de hersenen ischemie te verkennen in het herstel en sequelae stadia.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

Transplantatie van olfactorische Ensheathing Cellen tot functioneel herstel Evalueer na perifere zenuwschade

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Voorbereiding van Acute hersenen segmenten met behulp van een geoptimaliseerde N-Methyl-D-glucamine beschermende herstelmethode

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Utilizing 3D Printing Technology to Merge MRI with Histology: A Protocol for Brain Sectioning

Met behulp van 3D-printtechnologie om samenvoegen MRI met de histologie: A Protocol for Brain Snijden

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Gedeeltelijke oogzenuw transect bij ratten: een Model tot stand gebracht met een nieuwe operationele aanpak om te beoordelen van secundaire degeneratie van het netvlies peesknoopcellen

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

In Vivo eenbeoordeling van de verstoring van de bloed - hersen barrière in een Rat Model van ischemische beroerte

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

A Fibrin-Enriched and tPA-Sensitive Photothrombotic Stroke Model

Een fibrine-verrijkt en tPA-gevoelig fototrombotisch beroertemodel

An ideal thromboembolic stroke model requires certain properties, including relatively simple surgical procedures with low mortality, a consistent ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

Een rattenmodel van EcoHIV-herseninfectie

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Motor Dual-Tasks for Gait Analysis and Evaluation in Post-Stroke Patients

Motorische duale taken voor loopanalyse en -evaluatie bij patiënten na een beroerte

Eighteen stroke patients were recruited for this study involving the evaluation of cognition and walking ability and multitask gait analysis. Multitask ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Durale stimulatie en periorbitale von Frey-testen bij muizen als een preklinisch model van hoofdpijn

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

Een model voor encefalomyosynangiose behandeling na middelste cerebrale arterie occlusie-geïnduceerde beroerte bij muizen

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...