Name: a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats
Uploaded: 2019-11-06T13:00:00
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Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China (81603315, 81603316), dal piano Key R & D della provincia di Jiangxi in Cina (20171ACH80001), progetti di cooperazione industriale e accademica in college e università della provincia di Fujian in Cina (2018Y41010011).

La procedura e l'uso di soggetti animali sono stati approvati dall'Istituto Nazionale della Salute per la cura e l'uso di animali da laboratorio. Questo protocollo è specificamente regolato per i test di occlusione/reperfusione dell'arteria cerebrale media (MCAO/R) e della funzione sensomotoria.
1. Progettazione sperimentale e raggruppamento
<ol><li>Utilizzare un modello di ratto MCAO/R per vagliare un metodo del modello ischemico del cervello del ratto con lesioni cerebrali più gravi e un...

<ol>
	<li>Kong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralization+of+chemokine-like+factor+1,+a+novel+C-C+chemokine,+protects+against+focal+cerebral+ischemia+by+inhibiting+neutrophil+infiltration+via+MAPK+pathways+in+rats.">Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 112 (2014).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+bilobalide+on+cerebral+ischemia+and+reperfusion+injury+are+associated+with+inhibition+of+pro-inflammatory+mediator+production+and+down-regulation+of+JNK1/2+and+p38+MAPK+activation.">Neuroprotective effects of bilobalide on cerebral ischemia and reperfusion injury are associated with inhibition of pro-inflammatory mediator production and down-regulation of JNK1/2 and p38 MAPK activation.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 167 (2014).</li><li>Thomas, A., Detilleux, J., Flecknell, P., Sandersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+Guidelines+on+Peri-Anesthesia+Care+for+Rat+Models+of+Stroke:+A+Meta-Analysis+Comparing+the+Years+2005+and+2015.">Impact of Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) Guidelines on Peri-Anesthesia Care for Rat Models of Stroke: A Meta-Analysis Comparing the Years 2005 and 2015.</a> PLoS One. 12, e0170243 (2017).</li><li>Kumar, A., Aakriti, V., Gupta, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+An+update.">A review on animal models of stroke: An update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>Tong, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+enhanced+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+nonhuman+primates+using+an+endovascular+trapping+technique.">An enhanced model of middle cerebral artery occlusion in nonhuman primates using an endovascular trapping technique.</a> AJNR Am. Journal of Neuroradiology. 36, 2354-2359 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9, 541-551 (2014).</li><li>Abrah&#225;m, H., Somogyv&#225;ri-Vigh, A., Maderdrut, J. L., Vigh, S., Arimura, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filament+size+influences+temperature+changes+and+brain+damage+following+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Filament size influences temperature changes and brain damage following middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Exp. Brain Res. 142, 131-138 (2002).</li><li>Sun, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coumarin+derivatives+protect+against+ischemic+brain+injury+in+rats.">Coumarin derivatives protect against ischemic brain injury in rats.</a> European Journal of Medicinal Chemistry. 67, 39-53 (2013).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Smith, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+site+and+lesion+topology+determine+efficacy+of+a+human+neural+stem+cell+line+in+a+rat+model+of+chronic+stroke.">Implantation site and lesion topology determine efficacy of a human neural stem cell line in a rat model of chronic stroke.</a> Stem Cell. 30, 785-796 (2012).</li><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Forsythia+suspense+extract+with+antioxidant+and+anti-inflammatory+properties+in+a+model+of+rotenone+induced+neurotoxicity.">Protective effects of Forsythia suspense extract with antioxidant and anti-inflammatory properties in a model of rotenone induced neurotoxicity.</a> Neurotoxicology. 52, 72-83 (2016).</li><li>Milani, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly-arginine+peptides+reduce+infarct+volume+in+a+permanent+middle+cerebral+artery+rat+stroke+model.">Poly-arginine peptides reduce infarct volume in a permanent middle cerebral artery rat stroke model.</a> BMC Neuroscience. 17, 19 (2016).</li><li>DeGraba, T. J., Ostrow, P., Hanson, S., Grotta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+performance,+histologic+damage,+and+calcium+influx+in+rats+treated+with+NBQX+after+focal+ischemia.">Motor performance, histologic damage, and calcium influx in rats treated with NBQX after focal ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14, 262-268 (1994).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+preclinical+animal+model+to+assess+brain+recovery+after+acute+stroke.">Validation of a preclinical animal model to assess brain recovery after acute stroke.</a> European Journal of Pharmacology. 835, 75-81 (2018).</li><li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IMM-H004+prevents+toxicity+induced+by+delayed+treatment+of+tPA+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemia+involving+PKA-and+PI3K-dependent+Akt+activation.">IMM-H004 prevents toxicity induced by delayed treatment of tPA in a rat model of focal cerebral ischemia involving PKA-and PI3K-dependent Akt activation.</a> European Journal of Neuroscience. 39, 2107-2118 (2014).</li><li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-3-n-butylphthalide+Promotes+Neurogenesis+and+Neuroplasticity+in+Cerebral+Ischemic+Rats.">L-3-n-butylphthalide Promotes Neurogenesis and Neuroplasticity in Cerebral Ischemic Rats.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 21, 733-741 (2015).</li></ol>

Molti modelli che stabiliscono metodi e indicatori comportamentali che sono ben utilizzati in ischemia cerebrale acuta non possono avere cambiamenti significativi nelle fasi di recupero e sequela di ischemia cerebrale16,17. Tuttavia, il numero di pazienti con ipomia cerebrale nelle fasi di recupero e sequela è il più grande. È essenziale selezionare un modello animale adatto per le fasi di recupero e sequela di ictus ischemia.
Usiam...

L'ischemia cerebrale è divisa in tre fasi con diversi indicatori post-ictus: la fase acuta (entro 1 settimana), la fase di recupero (da 1 settimana a 6 mesi) e la fase di sequelae (più di 6 mesi). Attualmente, la maggior parte degli studi si concentrano sullo stadio acuto dell'ischemia cerebrale a causa del suo effetto significativo e dei modelli di ricerca multi-relativi1,2,3. Tuttavia, le fasi di recupero e sequele dell'ischemia cerebrale non possono essere ignorate a causa della loro complicazione a lungo termine delle disabilità. Pertanto, lo scopo di questo studio è quello di esplorare un modello animale stabile, affidabile e relativamente semplice per ricercare il recupero e le fasi sequela dell'ischemia cerebrale.
Tra i molti modelli sperimentali di ischemia cerebrale, usiamo l'occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) tramite l'inserimento del bullone filo nell'arteria cerebrale centrale destra (MCA). Questo modello è simile all'ictus umano, che può produrre volumi infarto più grandi, provocare molti disturbi comportamentali legati all'ictus e può consentire la riperfusione di sangue (R) rimuovendo il bullone del filo4,5,6. MCAO/R è anche considerato il modello animale oro standard di ischemia del cervello7. Inoltre, la gravità della lesione cerebrale dipende dal diametro e dalla lunghezza di inserimento del bullone del filo, dalla durata dell'ischemia cerebrale e dal peso animale (i ratti più grandi hanno cervelli più grandi e vasi cerebrali più spessi)8. Pertanto, cambiando il tipo di bullone filo, il tempo infarto, e il peso del ratto, un modello adatto può essere trovato per il recupero e le fasi sequela di ischemia cerebrale nei ratti MCAO / R. Per convalidare il modello di ratto, abbiamo eseguito uno studio di 1 giorno, 35 giorni, 60 giorni e 90 giorni del modello MCAO/R utilizzando esperimenti di colorazione ETC e funzione sensoriale (un test di asimmetria bilaterale, un test di camminata alla griglia, un test di rotazione e un test di sollevamento).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anatomical Microscope</td>
			<td>Leica (Germany)</td>
			<td>S8</td>
			<td>Microscopic operating instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blade</td>
			<td>Gellette</td>
			<td>/</td>
			<td>Cutting brain sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constant Temperature Shaking Bed</td>
			<td>Taicang Experimental Equipment Factory</td>
			<td>THZ-C</td>
			<td>To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>700D</td>
			<td>For taking pictures of TTC staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Shaver</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>3000#</td>
			<td>Removal of hair from the neck of rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Hamostatic</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>14 cm</td>
			<td>Using for brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Pro Plus Software</td>
			<td>Media Cybernetics Inc.</td>
			<td>6.0</td>
			<td>Analyze the infarct volume</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>217170702</td>
			<td>Anesthetic gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microshear</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Forceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Auxiliary skin and muscle anatomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pphthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Using for cutting the skin of neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Brain Slice Mold</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>400 g</td>
			<td>For standard, uniform cutting of brain tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus</td>
			<td>Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>ZH-300B</td>
			<td>To test the sensorimotor function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anaesthesia Machine</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>ABM3000</td>
			<td>A gas anesthetic machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Thermostat</td>
			<td>Beijing Damida Technology Co., Ltd.</td>
			<td>DM.7-YLS-20A</td>
			<td>To maintain animal body temperature constant during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>16 cm</td>
			<td>Using for decapitate and brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td>Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>4-0 / 5-0</td>
			<td>Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thread Bolt</td>
			<td>Beijing Cinontech Co. Ltd.</td>
			<td>2636/2838/3040/3043-A4</td>
			<td>Blockage of the middle cerebral artery in rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>LOT#BCBP3272V</td>
			<td>Brain section staining reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats

Lo scopo di questo studio era quello di stabilire e convalidare un modello di ischemia del cervello animale nelle fasi di recupero e sequela. È stato scelto un modello di occlusione/reperfusione cerebrale centrale (MCAO/R) nei ratti Maschi Sprague-Dawley. Cambiando il peso del ratto (260-330 g), il tipo di bullone del filo (2636/2838/3040/3043) e il tempo infarto del cervello (2-3 h), un punteggio di Longa più alto, un volume infarto più grande e un maggiore rapporto di successo del modello sono stati sottoposti a screening utilizzando il punteggio di Longa e la colorazione TTC. La condizione ottimale del modello (300 g, 3040 bulloni di filo, tempo infarto cerebrale 3 h) è stata acquisita e utilizzata in un periodo di osservazione di 1-90 giorni dopo la riperfusione attraverso la valutazione delle funzioni motorie e del volume infarto. A queste condizioni, il test di asimmetria bilaterale ha avuto una differenza significativa da 1 a 90 giorni e il test di camminata alla griglia ha avuto una differenza significativa da 1 a 60 giorni; entrambe le differenze potrebbero essere un adeguato test funzionale del sensomotorio. Così, è stata trovata la condizione più appropriata di un nuovo modello di ratto nelle fasi di recupero e sequela dell'ischemia cerebrale: 300 g di ratti che hanno subito MCAO con un bullone a filo 3040 per un infarto cerebrale 3 h e poi riperfusi. I test funzionali sensomotori appropriati sono stati un test di asimmetria bilaterale e un test di grid-walking.

Utilizzando la procedura di cui sopra per un modello MCAO/R con il punteggio di un Longa e la colorazione TTC, diversi trattamenti di peso medio (275/300/320 g), tipi di bulloni (2636/2838/3040/3043; Tabella 1) e i tempi ischemici (2-3 h) e 1 giorno di riperfusione sono stati utilizzati per lo screening per il modello di ischemia cerebrale ottimale nei ratti. I parametri del modello di 300 g di peso, 3040 bulloni filo, e 3 h tempo infarto cervello erano i più adatti per ...

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A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats

Lo scopo di questo studio è quello di stabilire e convalidare un modello animale per la ricerca nelle fasi di recupero e sequela dell'ischemia cerebrale testando l'infarto cerebrale e la funzione motoria sensoriale dopo l'occlusione/reperfusione dell'arteria cerebrale media (MCAO/R) dopo 1-90 giorni in ratti.

Un modello preclinico per valutare il recupero del cervello dopo l'ictus acuto nei ratti

The purpose of this study was to establish and validate an animal brain ischemia model in the recovery and sequela stages. A middle cerebral artery ...

Questo studio utilizza un modello animale consolidato per ricercare il recupero e le fasi sequele dell'ischemia cerebrale. I principali vantaggi di questa tecnica sono che è stabile, affidabile e relativamente semplice. Inizia posizionando un topo anestetizzato su un tavolo di fissaggio chirurgico.Durante l'intervento chirurgico, mantenere la temperatura corporea del topo a 37 gradi Celsius in un piccolo termostato animale. Collegare la bocca alla maschera della macchina per anestesia e confermare l'anestesia profonda per mancanza di tensione alle estremità, riflessi corneali e dolore. Fissare gli arti del topo al tavolo operatorio usando bende di carta.Con un rasoio elettrico, rimuovere il collo e sterilizzare il collo con il 75% di alcol. Utilizzare forbici oftalmiche per tagliare da due a tre centimetri lungo la forma longitudinale centrale del collo. E poi con le forcep oftalmiche, separare il muscolo sottocutaneo.Usa il riavvolgitore fatto in casa per esporre completamente il campo visivo. Occorre fare attenzione a presentare un'adeguata tecnica aseptica per tutte le procedure chirurgiche di sopravvivenza. La tecnica illustrata più avanti nel video dovrebbe essere praticata attraverso l'intera procedura.Utilizzare i micro forcep per isolare l'arteria carotide comune, l'arteria carotide esterna e l'arteria carotide interna. Lavorando al microscopio, utilizzare 8-0 suture per legare la comune arteria carotide con nodo duro, arteria carotide esterna lontano dall'estremità del cuore con nodo duro, arteria carotide interna con nodo sciolto e poi per allineare l'arteria carotide esterna vicino all'estremità del cuore. Utilizzando micro forbici, tagliare una piccola apertura nell'arteria carotide esterna e inserire delicatamente un bullone del filo.Legare la sutura dell'arteria carotide esterna che è nodo sottile e sciolto e tagliare l'arteria carotide esterna. Allentare il nodo sciolto dell'arteria carotide interna e continuare a inserire il bullone del filo all'inizio dell'arteria cerebrale centrale contrassegnata con la sutura e tagliare il bullone del filo esposto. Dopo aver raggiunto il tempo ischemico dopo due o tre ore, fissare la frattura dell'arteria carotide esterna utilizzando micro forcep ed estrarre delicatamente il bullone del filo con altri micro forcep.Dopo aver completamente ritirato l'estremità anteriore del bullone del filo dall'arteria carotide interna, ligate l'arteria carotide esterna che è stata rivestita con 8-0 sutura e quindi rimuovere completamente il bullone del filo. Dopo aver allentato la comune arteria carotide, tamponare circa 50.000 unità di polvere di sodio penicillina sulla superficie della ferita per prevenire l'infezione. Usa quattro suture per suturare muscoli e pelle sottocutanei.Dopo aver riposizionare il topo nella gabbia, utilizzare una siringa millilitro per dare circa 0,2 millilitri di acqua al ratto per via orale per prevenire la disidratazione postoperatoria. Scegli gli animali in base al punteggio più lungo per la colorazione TTC o gli studi motori sensoriali. Dopo aver incubato il cervello isolato per la colorazione TTC a meno 20 gradi Celsius di 30 minuti, posizionarlo in uno stampo a fette cerebrali del topo pre-raffreddato.Usando una lama pre-raffreddata, tagliare il cervello in sei sezioni consecutive spesse due millimetri. Macchiare le sezioni con 2%TTC in una piastra di coltura a sei pozzi e incubare per 30-60 minuti a 37 gradi Celsius mentre si trema. Ogni 10 minuti, capovolgere le sezioni fino a quando l'ischemia cerebrale e le aree non colpite sono visibilmente bianche e rosse.Allineare le fette cerebrali verticalmente sul cartone nero in ordine dal retro alla parte anteriore del cervello usando un righello per assicurarsi che la lunghezza totale di ogni linea sia la stessa e scattare foto. Importa la foto e seleziona le fette cerebrali. Selezionare il primo piano nero e digitare Alt Elimina per riempire il colore di sfondo e quindi Ctrl D da deselezionare.Infine, salva l'immagine sul desktop. Per analizzare il volume infarto, aprire prima il software e importare la foto. Per evitare modifiche, regolare la luminosità con lo strumento di miglioramento del contrasto in modo che lo sfondo sia nero.Nel filtro, utilizzare lo strumento mediana per rimuovere le evidenziazioni. Per calcolare l'area cerebrale normale sinistra, selezionare il colore utilizzando la segmentazione e regolare il valore di H, S e I per separare le fette cerebrali dallo sfondo nero. Tornare alla dimensione del conteggio e fare clic sul conteggio.Clicca su oggetti divisi in modifica per separare il cervello dalla linea mediana che distinguerà automaticamente le aree cerebrali sinistra e destra. Per calcolare l'area cerebrale infaritta destra, importare l'immagine, regolare lo sfondo e rimuovere le evidenziazioni come fatto in precedenza. Selezionare le dimensioni del conteggio e fare clic sullo strumento Disegna oggetti unione in modifica.Selezionare manualmente l'area ischemica e fare clic sul conteggio per calcolare l'area ischemica. Per calcolare l'area cerebrale sana giusta, importare prima l'immagine, regolare lo sfondo e rimuovere le evidenziazioni come fatto in precedenza. Selezionare il colore utilizzando la segmentazione e regolare il valore di H, S e I per separare le fette cerebrali sane dallo sfondo nero.Tornare alla dimensione del conteggio e fare clic sul conteggio per calcolare quest'area. Clicca su oggetti divisi in modifica per separare il cervello dalla linea mediana che distinguerà automaticamente le aree cerebrali sinistra e destra. Prendere ratti scelti per studi motori sensoriali e per test bilaterali di assimetria e nastro di carta avvolgente sulla parte safenosa di ogni artiglio tre volte utilizzando la stessa pressione.Per ogni topo, registrare con la fotocamera il numero di volte in cui ogni artiglio anteriore contatta e rimuove il nastro entro cinque minuti, inclusi i tempi delle zampe non influenzati e interessati. Ripetere il wrapping e la registrazione dopo 30 minuti e quindi calcolare i valori. Per il test di camminata a griglia, posizionare il ratto al centro di una piattaforma di superficie della griglia elevata con aperture di 2,5 centimetri quadrati.Spingere leggermente i fianchi del topo per incoraggiarlo a muoversi attraverso la superficie. Utilizzando la fotocamera, registrare il numero di guasti al piede effettuati dagli arti destro non influenzato e sinistro interessato e il numero totale del passo in un minuto con la fotocamera. Per la prova dell'asta del rotore, impostare l'apparato di fatica a barra rotante del ratto a una velocità di 13 RPM per un periodo di cinque minuti utilizzando il software di supporto.Avviare il programma per computer e posizionare il topo sugli anelli dell'asta del rotore contemporaneamente. Terminare la prova se il topo cade dall'anello o dopo cinque minuti e registrare il tempo di rotazione. Lasciare riposare il ratto per 30 minuti, quindi ripetere il test altre due volte e scegliere il valore massimo come ultimo tempo di rotazione.Per la prova della fune di sollevamento, posizionare lo strumento della corda di sollevamento su una scrivania. Fai afferrare la corda al topo con gli arti anteriori e lasciala appendere. Registrare l'ora di sospensione e calcolare i punteggi.Quando è stata studiata una lesione ischemica cerebrale indotta dall'occlusione dell'arteria cerebrale media e dalla riperfusione, il bullone del filo da 300 grammi di peso 3040 e il tempo di infarto cerebrale di tre ore si sono rivelati i più adatti con il più grande infarto cerebrale, il punteggio più alto più lungo e il più grande rapporto di successo del modello. Questo è stato significativamente migliorato rispetto al trattamento convenzionale di peso di 275 grammi, bullone del filo 2636 e tempo di infarto cerebrale di due ore. Per studiare lo stato di recupero dell'ischemia cerebrale, è stata eseguita la colorazione TTC e ha rivelato il volume infarto e restringimento al 23,4% il primo giorno dopo l'occlusione e la riperfusione dell'arteria cerebrale media, il 19,6% il 35 ° giorno, il 16,1% il 60 ° e il 15,7% il 90 ° .Dopo un giorno di occlusione e riperfusione dell'arteria cerebrale media, la distorsione sensoriale del motore nel test bilaterale di assimetria, i tempi di errore di camminata della griglia nella prova di camminata della griglia e il punteggio della corda di sollevamento nella prova della corda di sollevamento sono tutti aumentati mentre il tempo dell'asta del rotore nella prova dell'asta del rotore è diminuito indicando l'importanza di questi test nello studio dell'ischemia cerebrale acuta. Solo la distorsione motoria sensoriale ha mantenuto grandi disturbi funzionali con un modo dipendente dal tempo dopo 35, 60 e 90 giorni di occlusione e riperfusione dell'arteria cerebrale media. Per il test di camminata in griglia, ci sono state differenze significative dei tempi di errore di camminata della griglia per 35 e 60 giorni.Questi risultati hanno indicato che queste due prove potrebbero essere idonee a testare il recupero nei ratti. Al fine di garantire il successo, l'azione dovrebbe essere delicata e l'operazione dovrebbe essere costante. Altri test comportamentali come il rilevamento dell'andatura possono essere adatti anche per questo modello.Lo sviluppo di questo modello potrebbe spianare la strada ai ricercatori per esplorare l'ischemia cerebrale nelle fasi di recupero e sequele.

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Una valutazione In Vivo di rottura della barriera emato - encefalica in un modello del ratto del colpo ischemico

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

A Fibrin-Enriched and tPA-Sensitive Photothrombotic Stroke Model

Un modello di ictus fototrombotico arricchito di fibrina e sensibile al tPA

An ideal thromboembolic stroke model requires certain properties, including relatively simple surgical procedures with low mortality, a consistent ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

Un modello di ratto di infezione cerebrale EcoHIV

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Motor Dual-Tasks for Gait Analysis and Evaluation in Post-Stroke Patients

Doppio compito motorio per l'analisi e la valutazione dell'andatura nei pazienti post-ictus

Eighteen stroke patients were recruited for this study involving the evaluation of cognition and walking ability and multitask gait analysis. Multitask ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Stimolazione durale e test di von Frey periorbitale nei topi come modello preclinico di cefalea

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

Un modello per il trattamento dell'encefalomiosinangiosi dopo ictus indotto da occlusione dell'arteria cerebrale media nei topi

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...