Name: a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats
Uploaded: 2019-11-06T13:00:00
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이 작품은 중국 국립 자연 과학 재단 (81603315, 81603316), 중국 장시성의 주요 R & D 계획 (20171ACH80001), 푸젠 성 대학의 산업 및 학술 협력 프로젝트에 의해 지원되었다 중국 (2018Y4101011).

동물 과목의 절차 와 사용은 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 건강의 국립 연구소에 의해 승인되었습니다. 이 프로토콜은 특히 중간 대뇌 동맥 폐색 / 재관류 (MCAO / R) 및 감각 운동 기능의 테스트를 위해 조정됩니다.
1. 실험적인 디자인 과 그룹화
<ol><li>쥐 MCAO/R 모델을 사용하여 Longa의 점수 및 TTC 염색을 사용하여 더 심한 뇌 손상 및 더 큰 모델 성공률을 가진 쥐 뇌 허혈 ?...

<ol>
	<li>Kong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralization+of+chemokine-like+factor+1,+a+novel+C-C+chemokine,+protects+against+focal+cerebral+ischemia+by+inhibiting+neutrophil+infiltration+via+MAPK+pathways+in+rats.">Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 112 (2014).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+bilobalide+on+cerebral+ischemia+and+reperfusion+injury+are+associated+with+inhibition+of+pro-inflammatory+mediator+production+and+down-regulation+of+JNK1/2+and+p38+MAPK+activation.">Neuroprotective effects of bilobalide on cerebral ischemia and reperfusion injury are associated with inhibition of pro-inflammatory mediator production and down-regulation of JNK1/2 and p38 MAPK activation.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 167 (2014).</li><li>Thomas, A., Detilleux, J., Flecknell, P., Sandersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+Guidelines+on+Peri-Anesthesia+Care+for+Rat+Models+of+Stroke:+A+Meta-Analysis+Comparing+the+Years+2005+and+2015.">Impact of Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) Guidelines on Peri-Anesthesia Care for Rat Models of Stroke: A Meta-Analysis Comparing the Years 2005 and 2015.</a> PLoS One. 12, e0170243 (2017).</li><li>Kumar, A., Aakriti, V., Gupta, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+An+update.">A review on animal models of stroke: An update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>Tong, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+enhanced+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+nonhuman+primates+using+an+endovascular+trapping+technique.">An enhanced model of middle cerebral artery occlusion in nonhuman primates using an endovascular trapping technique.</a> AJNR Am. Journal of Neuroradiology. 36, 2354-2359 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9, 541-551 (2014).</li><li>Abrah&#225;m, H., Somogyv&#225;ri-Vigh, A., Maderdrut, J. L., Vigh, S., Arimura, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filament+size+influences+temperature+changes+and+brain+damage+following+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Filament size influences temperature changes and brain damage following middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Exp. Brain Res. 142, 131-138 (2002).</li><li>Sun, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coumarin+derivatives+protect+against+ischemic+brain+injury+in+rats.">Coumarin derivatives protect against ischemic brain injury in rats.</a> European Journal of Medicinal Chemistry. 67, 39-53 (2013).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Smith, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+site+and+lesion+topology+determine+efficacy+of+a+human+neural+stem+cell+line+in+a+rat+model+of+chronic+stroke.">Implantation site and lesion topology determine efficacy of a human neural stem cell line in a rat model of chronic stroke.</a> Stem Cell. 30, 785-796 (2012).</li><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Forsythia+suspense+extract+with+antioxidant+and+anti-inflammatory+properties+in+a+model+of+rotenone+induced+neurotoxicity.">Protective effects of Forsythia suspense extract with antioxidant and anti-inflammatory properties in a model of rotenone induced neurotoxicity.</a> Neurotoxicology. 52, 72-83 (2016).</li><li>Milani, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly-arginine+peptides+reduce+infarct+volume+in+a+permanent+middle+cerebral+artery+rat+stroke+model.">Poly-arginine peptides reduce infarct volume in a permanent middle cerebral artery rat stroke model.</a> BMC Neuroscience. 17, 19 (2016).</li><li>DeGraba, T. J., Ostrow, P., Hanson, S., Grotta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+performance,+histologic+damage,+and+calcium+influx+in+rats+treated+with+NBQX+after+focal+ischemia.">Motor performance, histologic damage, and calcium influx in rats treated with NBQX after focal ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14, 262-268 (1994).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+preclinical+animal+model+to+assess+brain+recovery+after+acute+stroke.">Validation of a preclinical animal model to assess brain recovery after acute stroke.</a> European Journal of Pharmacology. 835, 75-81 (2018).</li><li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IMM-H004+prevents+toxicity+induced+by+delayed+treatment+of+tPA+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemia+involving+PKA-and+PI3K-dependent+Akt+activation.">IMM-H004 prevents toxicity induced by delayed treatment of tPA in a rat model of focal cerebral ischemia involving PKA-and PI3K-dependent Akt activation.</a> European Journal of Neuroscience. 39, 2107-2118 (2014).</li><li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-3-n-butylphthalide+Promotes+Neurogenesis+and+Neuroplasticity+in+Cerebral+Ischemic+Rats.">L-3-n-butylphthalide Promotes Neurogenesis and Neuroplasticity in Cerebral Ischemic Rats.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 21, 733-741 (2015).</li></ol>

급성 뇌허혈에 잘 사용되는 방법 및 행동 지표를 확립하는 많은 모델은 뇌 허혈의 회복 및 후유증 단계에 큰 변화가 없을 수 있습니다16,17. 그러나 회복 및 후유증 단계에서 뇌 허혈환자의 수가 가장 많다. 허혈성 뇌졸중의 회복 및 후유증 단계에 적합한 동물 모델을 선택하는 것이 필수적입니다.
쥐의 적당한 무게(260-330 g), 스레드 ?...

뇌 허혈은 급성 단계 (1 주 이내), 회복 단계 (1 주 ~ 6 개월), 후유증 단계 (6 개월 이상)와 다른 뇌졸중 후 지표가있는 세 단계로 나뉩니다. 현재, 대부분의 연구는 뇌 허혈의 급성 단계에 초점을 맞추고 있기 때문에 중요한 효과와 다중 상대 연구 모델1,2,3. 그러나, 뇌 허혈의 회복과 후유증 단계는 장애의 장기 합병증으로 인해 무시 될 수 없습니다. 따라서, 본 연구의 목적은 뇌 허혈의 회복 및 후유증 단계를 연구하기 위해 안정적이고 안정적이며 비교적 간단한 동물 모델을 탐구하는 것이다.
많은 실험적인 뇌 허혈 모델 중, 우리는 오른쪽 중간 대뇌 동맥에 스레드 볼트 삽입을 통해 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)를 사용합니다 (MCA). 이 모델은 더 큰 경색 볼륨을 생성할 수 있는 인간 뇌졸중과 유사하며, 뇌졸중과 관련된 많은 행동 장애를 초래하며, 스레드 볼트4,5,6을제거하여 혈액 재관류(R)를 허용할 수 있다. MCAO/R은 또한 뇌 허혈7의 금표준 동물 모델로 간주됩니다. 더욱이, 뇌 손상의 중증도는 나사 볼트의 직경 및 삽입 길이, 뇌 허혈의 지속 시간 및 동물 체중(큰 쥐는 더 큰 두뇌와 두꺼운 대뇌 혈관을 가지고 있음)에 따라 달라집니다8. 따라서, 나사 볼트 유형, 경색 시간 및 랫트 무게를 변경함으로써, MCAO/R 랫트에서 뇌 허혈의 회복 및 후유증 단계에 적합한 모델을 찾을 수 있다. 쥐 모델의 유효성을 검사하기 위해 TTC 염색 및 감각 운동 기능 실험(양측 비대칭 테스트, 그리드 보행 테스트, 회전 테스트 및 리프팅 로프 테스트)을 사용하여 MCAO/R 모델에 대한 1일, 35일, 60일 및 90일 간의 연구를 수행했습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anatomical Microscope</td>
			<td>Leica (Germany)</td>
			<td>S8</td>
			<td>Microscopic operating instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blade</td>
			<td>Gellette</td>
			<td>/</td>
			<td>Cutting brain sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constant Temperature Shaking Bed</td>
			<td>Taicang Experimental Equipment Factory</td>
			<td>THZ-C</td>
			<td>To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>700D</td>
			<td>For taking pictures of TTC staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Shaver</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>3000#</td>
			<td>Removal of hair from the neck of rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Hamostatic</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>14 cm</td>
			<td>Using for brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Pro Plus Software</td>
			<td>Media Cybernetics Inc.</td>
			<td>6.0</td>
			<td>Analyze the infarct volume</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>217170702</td>
			<td>Anesthetic gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microshear</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Forceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Auxiliary skin and muscle anatomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pphthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Using for cutting the skin of neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Brain Slice Mold</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>400 g</td>
			<td>For standard, uniform cutting of brain tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus</td>
			<td>Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>ZH-300B</td>
			<td>To test the sensorimotor function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anaesthesia Machine</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>ABM3000</td>
			<td>A gas anesthetic machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Thermostat</td>
			<td>Beijing Damida Technology Co., Ltd.</td>
			<td>DM.7-YLS-20A</td>
			<td>To maintain animal body temperature constant during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>16 cm</td>
			<td>Using for decapitate and brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td>Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>4-0 / 5-0</td>
			<td>Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thread Bolt</td>
			<td>Beijing Cinontech Co. Ltd.</td>
			<td>2636/2838/3040/3043-A4</td>
			<td>Blockage of the middle cerebral artery in rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>LOT#BCBP3272V</td>
			<td>Brain section staining reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats

이 연구의 목적은 회복 및 후유증 단계에서 동물 뇌 허혈 모델을 확립하고 검증하는 것이었습니다. 남성 스프라그-다울리 쥐의 중간 대뇌 동맥 폐색/재관류(MCAO/R) 모델이 선택되었습니다. 쥐의 무게 (260-330 g), 스레드 볼트 유형 (2636/2838/3040/3043) 및 뇌 경색 시간 (2-3 h), 높은 롱가의 점수, 더 큰 경색 볼륨 및 더 큰 모델 성공 비율을 Longa의 점수와 TTC 염색을 사용하여 스크리닝하였다. 최적의 모델 상태(300 g, 3040 스레드 볼트, 3시간 뇌 경색 시간)를 획득하여 감각 운동 기능 및 경색 부피의 평가를 통해 재관류 후 1-90일 관찰 기간에 사용하였다. 이러한 조건에서, 양측 비대칭 시험은 1 일에서 90 일까지 유의한 차이를 가졌고, 그리드 보행 시험은 1 에서 60 일까지 유의한 차이를 가졌다; 두 가지 차이점은 적절한 감각 운동 기능 테스트가 될 수 있습니다. 따라서, 뇌 허혈의 회복 및 후유증 단계에서 새로운 쥐 모델의 가장 적절한 조건이 발견되었다: 300 g 쥐는 3040 브레인 볼트와 MCAO를 겪은 다음 뇌 경색을 위해 다음 reperfused. 적절한 감각 운동 기능 테스트는 양측 비대칭 테스트와 그리드 보행 테스트였습니다.

Longa의 점수 및 TTC 염색이 있는 MCAO/R 모델에 대해 위에서 언급한 절차를 사용하여, 평균 중량의 다른 처리(275/300/320 g), 볼트 유형(2636/2838/3040/3043; 표 1) 및 허혈성 시간(2-3 시간) 및 1일 재관류를 사용하여 랫트에서 최적의 뇌 허혈 모델을 스크리밍하였다. 300g 무게, 3040 나사 볼트 및 3 h 뇌 경색 시간의 모델 매개 변수는 가장 큰 뇌 경색, 가장 높은 Longa의 점수 및 ?...

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A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats

이 연구의 목적은 1-90 후 중뇌 동맥 폐색 / 재관류 (MCAO / R) 후 뇌 경색 및 감각 운동 기능을 테스트하여 뇌 허혈의 회복 및 후유부단계에서 연구를위한 동물 모델을 확립하고 검증하는 것입니다. 쥐에서 일.

쥐에서 급성 뇌졸중 후 뇌 회복을 평가하는 전임상 모델

The purpose of this study was to establish and validate an animal brain ischemia model in the recovery and sequela stages. A middle cerebral artery ...

이 연구는 확립 된 동물 모델을 사용하여 뇌 허혈의 회복과 후유단계를 연구합니다. 이 기술의 주요 장점은 안정적이고 신뢰할 수 있으며 비교적 간단하다는 것입니다. 먼저 마취된 쥐를 수술 용 고정 테이블에 놓는 것으로 시작합니다.수술 내내, 작은 동물 온도 조절기에서 37섭씨에서 쥐의 체온을 유지한다. 마취 기계 마스크에 입을 연결하고 사지 장력, 각막 반사 신경 및 통증의 부족으로 깊은 마취를 확인합니다. 용지 붕대를 사용하여 쥐의 팔다리를 수술대에 고정합니다.전기 면도기로 목 털을 제거하고 75 %의 알코올로 목을 살균하십시오. 안과 가위를 사용하여 목의 중앙 세로 모양을 따라 2~3cm를 자른다. 그리고 안과 봉제와 함께 피하 근육을 분리하십시오.수제 리트랙터를 사용하여 시야를 완전히 노출하십시오. 모든 생존 수술 절차에 적합한 무균 기술을 제시하기 위해주의를 기울여야합니다. 비디오의 나중에 설명된 기술은 전체 절차를 통해 수행해야 합니다.마이크로 집게를 사용하여 일반적인 경동맥, 외부 경동맥 및 내부 경동맥을 분리합니다. 현미경으로 작업, 사용 8-0 단단한 매듭으로 일반적인 경동맥을 리딩하는 봉합사, 단단한 매듭으로 심장 끝에서 멀리 외부 경동맥, 느슨한 매듭으로 내부 경동맥을 묶은 다음 심장 끝 근처의 외부 경동맥을 줄. 마이크로 가위를 사용하여 외부 경동맥의 작은 개구부를 자르고 나사 볼트를 부드럽게 삽입합니다.얇고 느슨한 매듭외부 경동맥의 봉합사를 리게이트하고 외부 경동맥을 잘라냅니다. 내부 경동맥의 느슨한 매듭을 풀고 봉합사로 표시된 중간 대뇌 동맥의 시작 부분에 스레드 볼트를 계속 삽입하고 노출된 실 볼트를 차단합니다. 허혈 시간이 2 ~3 시간 후에 도달 한 후 마이크로 집게를 사용하여 외부 경동맥의 골절을 수정하고 다른 마이크로 집게로 스레드 볼트를 부드럽게 꺼냅니다.내부 경동맥에서 나사 볼트의 프런트 엔드를 완전히 철회한 후 8-0으로 늘어선 외부 경동맥을 리게이트합니다. 봉합사 다음 스레드 볼트를 완전히 제거합니다. 일반적인 경동맥을 풀어낸 후, 감염을 방지하기 위해 상처 표면에 페니실린 나트륨 분말의 약 50, 000 단위를 두드려. 피하 근육과 피부를 봉합하기 위해 4 개의 봉합사를 사용합니다.쥐를 다시 케이지에 넣은 후, 1 밀리리터 주사기를 사용하여 수술 후 탈수를 방지하기 위해 약 0.2 밀리리터의 물을 쥐에게 구두로 제공합니다. TTC 염색 또는 감각 모터 연구에 대 한 가장 긴 점수에 따라 동물을 선택 합니다. TTC 염색을 위해 격리된 뇌를 30분 영하 20도에서 배양한 후 미리 냉각된 쥐 뇌 슬라이스 몰드에 놓습니다.미리 냉각된 블레이드를 사용하여 뇌를 6개의 2mm 두께의 연속 섹션으로 자른다. 6웰 컬쳐 플레이트에 2%TTC로 섹션을 염색하고 흔들리는 동안 섭씨 37도에서 30~60분 동안 배양합니다. 10 분마다 뇌가 허혈되고 영향을받지 않는 부위가 눈에 띄게 흰색과 빨간색이 될 때까지 섹션을 뒤집습니다.각 줄의 총 길이가 동일하고 사진을 찍을 수 있도록 통치자를 사용하여 뇌의 뒤쪽에서 뇌 의 전면에 순서대로 뇌 슬라이스를 수직으로 줄입니다. 사진을 가져오고 뇌 조각을 선택합니다. 검은색 전경을 선택하고 Alt Delete를 입력하여 배경 색을 채운 다음 D를 제어하여 선택 취소합니다.마지막으로 이미지를 바탕 화면에 저장합니다. 광활한 볼륨을 분석하려면 먼저 소프트웨어를 열고 사진을 가져옵니다. 수정을 결함으로 변경하려면 배경이 검은색이 되도록 대비 향상 도구로 밝기를 조정합니다.필터에서 중앙값 도구를 사용하여 하이라이트를 제거합니다. 왼쪽 정상 뇌 영역을 계산하려면 세분화를 사용하여 색상을 선택하고 H, S 및 I의 값을 조정하여 뇌 조각을 검은 색 배경에서 분리합니다. 카운트 크기로 돌아가 수를 클릭합니다.편집에서 분할 된 물체를 클릭하여 뇌를 중간선과 분리하여 왼쪽과 오른쪽 뇌 영역을 자동으로 구별합니다. 오른쪽 경색 뇌 영역을 계산하려면 이미지를 가져오고 배경을 조정하고 이전과 마찬가지로 하이라이트를 제거합니다. 카운트 크기를 선택하고 편집에서 병합 개체 도구를 그립니다.허혈 영역을 수동으로 선택하고 카운트를 클릭하여 허혈 영역을 계산합니다. 올바른 건강한 뇌 영역을 계산하려면 먼저 이미지를 가져오고 배경을 조정하고 이전과 마찬가지로 하이라이트를 제거합니다. 세분화를 사용하여 색상을 선택하고 H, S 및 I의 값을 조정하여 건강한 뇌 조각을 검은 색 배경에서 분리합니다.카운트 크기로 돌아가서 카운트를 클릭하여 이 영역을 계산합니다. 편집에서 분할 된 물체를 클릭하여 뇌를 중간선과 분리하여 왼쪽과 오른쪽 뇌 영역을 자동으로 구별합니다. 감각 모터 연구를 위해 선택된 쥐를 취하고 양자 간 비순조 시험을 위해 선택하고 동일한 압력을 사용하여 각 발톱의 사페누스 부분에 종이 테이프를 세 번 감쌉니다.각 쥐에 대해 카메라로 각 발톱 접촉 횟수를 기록하고 영향을 받지 않고 영향을 받지 않는 발 시간을 포함하여 5분 이내에 테이프를 제거합니다. 30분 후에 래핑 및 레코딩을 반복한 다음 값을 계산합니다. 그리드 보행 테스트를 위해 2.5 평방 센티미터의 개구부가 있는 높은 그리드 표면 플랫폼의 중앙에 쥐를 배치합니다.쥐의 엉덩이를 약간 밀어 표면을 가로 질러 움직이도록 격려하십시오. 카메라를 사용하여 오른쪽 영향을 받지 않고 왼쪽에 영향을 받지 않은 팔다리와 총 걸음 수에 의해 만들어진 발 결함의 수를 카메라로 1분 안에 기록합니다. 로터 로드 테스트의 경우, 서포트 소프트웨어를 사용하여 5분 동안 쥐 회전 바 피로 장치를 13 RPM의 속도로 설정합니다.컴퓨터 프로그램을 시작하고 동시에 로터 로드 링에 쥐를 배치합니다. 쥐가 링에서 떨어지거나 5 분 후에 떨어지면 시험을 종료하고 회전 시간을 기록하십시오. 쥐를 30분 동안 쉬게 한 다음 테스트를 두 번 더 반복하고 최대 값을 마지막 회전 시간으로 선택합니다.리프팅 로프 테스트를 위해 리프팅 로프 장비를 책상위에 놓습니다. 쥐가 앞다리로 밧줄을 잡고 걸게하십시오. 교수형 시간을 기록하고 점수를 계산합니다.중대 뇌동맥 폐색및 재관류에 의해 유발되는 뇌 허혈성 상해가 연구되었을 때, 300그램 무게 3040 실 볼트와 3시간 뇌 경색 시간이 가장 큰 뇌경색, 가장 높은 최장 점수 및 가장 큰 모델 성공률에 가장 적합한 것으로 판명되었습니다. 이는 275그램 무게, 2636개의 실볼트 및 2시간 뇌 경색 시간의 종래의 치료에 비해 현저히 개선되었다. 뇌허혈의 회복 상태를 연구하기 위해 TTC 염색이 수행되었고, 중견동맥 폐색 및 재관주 후 첫날 23.4%로 경색 및 수축 부피를, 35일째 19.6%, 60일에는 16.1%, 90일에는 15.7%로 나타났다.중뇌 동맥 폐색 및 재퍼융합의 하루 후, 양측 의 형편성 검사에서 감각 모터 편향, 그리드 보행 오류 시간 리프팅 로프 테스트에서 도취 감소 로터 로드 시험에서 로터 로드 시간이 모두 증가하면서 로터 로드 테스트에서 이러한 시험의 중요성을 나타내는 급성 뇌 허혈을 연구하는 이러한 시험의 중요성을 나타낸다. 만 감각 모터 바이어스는 중간 뇌동맥 폐색 및 재구의 35, 60 및 90 일 후에 시간 의존적인 방식으로 큰 기능 장애를 유지했습니다. 그리드 걷기 테스트의 경우 35일과 60일 동안 그리드 보행 오류 시간의 상당한 차이가 있었습니다.이러한 결과 이러한 두 테스트 쥐에서 복구 테스트에 적합 할 수 있습니다 표시. 성공을 보장하기 위해 동작은 온화해야하며 작업이 안정적이어야합니다. 걸음걸이 검출과 같은 다른 행동 테스트도 이 모델에 적합할 수 있다.이 모형의 발달은 연구원이 복구및 후유 단계에서 두뇌 허혈을 탐구하는 쪽을 포장할 수 있었습니다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

말초 신경 손상 후 기능 회복을 평가하기 위해 후각 Ensheathing 세포의 이식

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

연구

신경과학

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

최적화 된 N를 사용 하 여 급성 뇌 조각의 준비-메 틸-D-glucamine 보호 복구 방법

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Utilizing 3D Printing Technology to Merge MRI with Histology: A Protocol for Brain Sectioning

3D 인쇄 기술을 활용하여 조직학과 MRI를 병합하기 : 두뇌를위한 프로토콜 단면

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

쥐에 있는 부분 시 신경 Transection: 망막 신경 절 세포의 2 차 변성을 평가 하기 위해 새로운 수술 방식으로 설립 모델

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌혈관 장애의 비보에 평가

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

A Fibrin-Enriched and tPA-Sensitive Photothrombotic Stroke Model

피브린이 풍부하고 tPA에 민감한 광혈전 뇌졸중 모델

An ideal thromboembolic stroke model requires certain properties, including relatively simple surgical procedures with low mortality, a consistent ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

에코HIV 뇌 감염의 쥐 모델

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Motor Dual-Tasks for Gait Analysis and Evaluation in Post-Stroke Patients

뇌졸중 후 환자의 보행 분석 및 평가를 위한 운동 이중 작업

Eighteen stroke patients were recruited for this study involving the evaluation of cognition and walking ability and multitask gait analysis. Multitask ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

마우스에서 중뇌동맥 폐색 유발 뇌졸중 후 뇌근육활막증 치료 모델

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...