Name: a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats
Uploaded: 2019-11-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av National Natural Science Foundation i Kina (81603315, 81603316), Key R & D plan for Jiangxi provinsen i Kina (20171ACH80001), industriell og faglig samarbeid prosjekter i høgskoler og universiteter i Fujian-provinsen i Kina (2018Y41010011).

Prosedyren og bruk av dyre har blitt godkjent av National Institute of Health for omsorg og bruk av forsøksdyr. Denne protokollen er spesielt tilpasset for tester av middels cerebral arterien okklusjon/reperfusion (MCAO/R) og Sensorimotor funksjon.
1. eksperimentell design og gruppering
<ol><li>Bruk en rotte MCAO/R modellen til skjermen en rotte hjerne iskemiske modell metoden med mer alvorlig hjerneskade og større modell suksess ratio bruker Longa score og TTC farging.<ol>
<li>Utfør eksp...

<ol>
	<li>Kong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralization+of+chemokine-like+factor+1,+a+novel+C-C+chemokine,+protects+against+focal+cerebral+ischemia+by+inhibiting+neutrophil+infiltration+via+MAPK+pathways+in+rats.">Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 112 (2014).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+bilobalide+on+cerebral+ischemia+and+reperfusion+injury+are+associated+with+inhibition+of+pro-inflammatory+mediator+production+and+down-regulation+of+JNK1/2+and+p38+MAPK+activation.">Neuroprotective effects of bilobalide on cerebral ischemia and reperfusion injury are associated with inhibition of pro-inflammatory mediator production and down-regulation of JNK1/2 and p38 MAPK activation.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 167 (2014).</li><li>Thomas, A., Detilleux, J., Flecknell, P., Sandersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+Guidelines+on+Peri-Anesthesia+Care+for+Rat+Models+of+Stroke:+A+Meta-Analysis+Comparing+the+Years+2005+and+2015.">Impact of Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) Guidelines on Peri-Anesthesia Care for Rat Models of Stroke: A Meta-Analysis Comparing the Years 2005 and 2015.</a> PLoS One. 12, e0170243 (2017).</li><li>Kumar, A., Aakriti, V., Gupta, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+An+update.">A review on animal models of stroke: An update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>Tong, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+enhanced+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+nonhuman+primates+using+an+endovascular+trapping+technique.">An enhanced model of middle cerebral artery occlusion in nonhuman primates using an endovascular trapping technique.</a> AJNR Am. Journal of Neuroradiology. 36, 2354-2359 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9, 541-551 (2014).</li><li>Abrah&#225;m, H., Somogyv&#225;ri-Vigh, A., Maderdrut, J. L., Vigh, S., Arimura, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filament+size+influences+temperature+changes+and+brain+damage+following+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Filament size influences temperature changes and brain damage following middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Exp. Brain Res. 142, 131-138 (2002).</li><li>Sun, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coumarin+derivatives+protect+against+ischemic+brain+injury+in+rats.">Coumarin derivatives protect against ischemic brain injury in rats.</a> European Journal of Medicinal Chemistry. 67, 39-53 (2013).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Smith, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+site+and+lesion+topology+determine+efficacy+of+a+human+neural+stem+cell+line+in+a+rat+model+of+chronic+stroke.">Implantation site and lesion topology determine efficacy of a human neural stem cell line in a rat model of chronic stroke.</a> Stem Cell. 30, 785-796 (2012).</li><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Forsythia+suspense+extract+with+antioxidant+and+anti-inflammatory+properties+in+a+model+of+rotenone+induced+neurotoxicity.">Protective effects of Forsythia suspense extract with antioxidant and anti-inflammatory properties in a model of rotenone induced neurotoxicity.</a> Neurotoxicology. 52, 72-83 (2016).</li><li>Milani, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly-arginine+peptides+reduce+infarct+volume+in+a+permanent+middle+cerebral+artery+rat+stroke+model.">Poly-arginine peptides reduce infarct volume in a permanent middle cerebral artery rat stroke model.</a> BMC Neuroscience. 17, 19 (2016).</li><li>DeGraba, T. J., Ostrow, P., Hanson, S., Grotta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+performance,+histologic+damage,+and+calcium+influx+in+rats+treated+with+NBQX+after+focal+ischemia.">Motor performance, histologic damage, and calcium influx in rats treated with NBQX after focal ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14, 262-268 (1994).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+preclinical+animal+model+to+assess+brain+recovery+after+acute+stroke.">Validation of a preclinical animal model to assess brain recovery after acute stroke.</a> European Journal of Pharmacology. 835, 75-81 (2018).</li><li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IMM-H004+prevents+toxicity+induced+by+delayed+treatment+of+tPA+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemia+involving+PKA-and+PI3K-dependent+Akt+activation.">IMM-H004 prevents toxicity induced by delayed treatment of tPA in a rat model of focal cerebral ischemia involving PKA-and PI3K-dependent Akt activation.</a> European Journal of Neuroscience. 39, 2107-2118 (2014).</li><li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-3-n-butylphthalide+Promotes+Neurogenesis+and+Neuroplasticity+in+Cerebral+Ischemic+Rats.">L-3-n-butylphthalide Promotes Neurogenesis and Neuroplasticity in Cerebral Ischemic Rats.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 21, 733-741 (2015).</li></ol>

Mange modeller etablere metoder og atferdsdata indikatorer som er godt brukt i akutte cerebral iskemi kan ikke ha vesentlige endringer i utvinningen og sequela stadier av Brain ischemia16,17. Imidlertid er antall pasienter med hjerne iskemiske i utvinningen og sequela stadier den største. Det er viktig å velge en passende dyremodell for utvinning og sequela stadier av iskemi hjerneslag.
Vi bruker MCAO/R-modellen i rotter til å skjer...

Brain iskemi er delt inn i tre stadier med ulike post-takts indikatorer: den akutte scenen (innen 1 uke), utvinning scenen (1 uke til 6 måneder), og sekvele scenen (mer enn 6 måneder). I dag, de fleste studier fokus på den akutte fasen av hjernen iskemi på grunn av sin betydelige effekt og multi-relative forskning modeller1,2,3. Men, utvinning og sekvele stadier av hjernen iskemi kan ikke ignoreres på grunn av deres langsiktige komplikasjoner av funksjonshemminger. Derfor er hensikten med denne studien er å utforske en stabil, pålitelig og relativt enkel dyremodell til forskning utvinning og sequela stadier av hjernen iskemi.
Blant de mange eksperimentelle hjernen iskemi modeller, bruker vi middels cerebral arterien okklusjon (MCAO) via tråden bolt innsetting i høyre midten cerebral arterien (MCA). Denne modellen er lik menneskets hjerneslag, som kan produsere større infarkt volumer, resultere i mange atferdsforstyrrelser knyttet til hjerneslag, og kan tillate blod reperfusion (R) ved å fjerne tråden bolt4,5,6. MCAO/R er også betraktet gullstandarden dyret modell av hjernen iskemi7. Videre avhenger alvorlighetsgraden av hjerne skaden på diameteren og innsetting lengden av tråden bolten, varigheten av hjernen iskemi, og dyret vekt (større rotter har større hjerner og tykkere cerebral fartøy)8. Derfor, av skiftende tråden bolt type, infarkt tid, og rotta vekt, en passende modell kan grunnlegge for gjennervervelsen og sequela scener av hjerne iskemi inne MCAO/R rotter. For å validere rotte modellen, utførte vi en 1-dag, 35-dagers, 60-dag, og 90-dagers studie av MCAO/R-modellen ved hjelp av TTC farging og Sensorimotor funksjon eksperimenter (en bilateral asymmetri test, et rutenett-walking test, en rotarod test og en løfting tau test).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anatomical Microscope</td>
			<td>Leica (Germany)</td>
			<td>S8</td>
			<td>Microscopic operating instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blade</td>
			<td>Gellette</td>
			<td>/</td>
			<td>Cutting brain sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constant Temperature Shaking Bed</td>
			<td>Taicang Experimental Equipment Factory</td>
			<td>THZ-C</td>
			<td>To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>700D</td>
			<td>For taking pictures of TTC staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Shaver</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>3000#</td>
			<td>Removal of hair from the neck of rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Hamostatic</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>14 cm</td>
			<td>Using for brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Pro Plus Software</td>
			<td>Media Cybernetics Inc.</td>
			<td>6.0</td>
			<td>Analyze the infarct volume</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>217170702</td>
			<td>Anesthetic gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microshear</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Forceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Auxiliary skin and muscle anatomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pphthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Using for cutting the skin of neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Brain Slice Mold</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>400 g</td>
			<td>For standard, uniform cutting of brain tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus</td>
			<td>Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>ZH-300B</td>
			<td>To test the sensorimotor function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anaesthesia Machine</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>ABM3000</td>
			<td>A gas anesthetic machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Thermostat</td>
			<td>Beijing Damida Technology Co., Ltd.</td>
			<td>DM.7-YLS-20A</td>
			<td>To maintain animal body temperature constant during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>16 cm</td>
			<td>Using for decapitate and brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td>Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>4-0 / 5-0</td>
			<td>Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thread Bolt</td>
			<td>Beijing Cinontech Co. Ltd.</td>
			<td>2636/2838/3040/3043-A4</td>
			<td>Blockage of the middle cerebral artery in rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>LOT#BCBP3272V</td>
			<td>Brain section staining reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats

Hensikten med denne studien var å etablere og validere et dyr hjernen iskemi modell i utvinningen og sequela stadier. En middel hjerne arterien okklusjon/reperfusion (MCAO/R) modell i mannlig Sprague-Dawley rotter ble valgt. Ved å endre rotte vekten (260 − 330 g), ble tråd bolt typen (2636/2838/3040/3043) og hjerneinfarkt tid (2-3 h), en høyere Longa-poengsum, et større infarkt volum og et større suksess forhold i modellen vist ved hjelp av Longa poengsum og TTC-farging. Den optimale modellen tilstand (300 g, 3040 tråd bolt, 3 h Brain infarkt tid) ble kjøpt og brukt i en 1-90 dagers observasjons periode etter reperfusion via vurdering av Sensorimotor funksjoner og infarkt volum. Ved disse forholdene, den bilaterale asymmetri test hadde en betydelig forskjell fra 1 til 90 dager, og Grid-walking test hadde en betydelig forskjell fra 1 til 60 dager; begge forskjellene kan være en passende Sensorimotor funksjonstest. Således, de fleste passende forfatning av en romersk rotten modell inne gjennervervelsen og sequela scener av hjerne iskemi var grunnlegge: 300 g rotter det gjennomgikk MCAO med en 3040 tråden bolt for en 3 h hjerneinfarkt og så reperfused. De riktige Sensorimotor funksjons testene var en bilateral asymmetri test og et rutenett-walking test.

Ved hjelp av ovennevnte prosedyren for en MCAO/R modell med Longa score og TTC farging, ulike behandlinger av gjennomsnittlig vekt (275/300/320 g), bolt typer (2636/2838/3040/3043; Tabell 1) og iskemiske tider (2-3 h) og 1 dag reperfusion ble brukt til skjermen for den optimale hjernen iskemi modell i rotter. Modell parametre av 300 g vekt, 3040 tråd bolt, og 3 h hjerneinfarkt tid var mest egnet for de største cerebral hjerteinfarkt, høyeste Longa score og beste modell...

Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats

Formålet med denne studien er å etablere og validere en dyr modell for forskning i utvinningen og sequela stadier av hjernen iskemi ved å teste hjerneinfarkt og Sensorimotor funksjon etter midten cerebral arterien okklusjon/reperfusion (MCAO/R) etter 1-90 dager hos rotter.

En prekliniske modell for å vurdere Brain Recovery etter akutt hjerneslag i rotter

The purpose of this study was to establish and validate an animal brain ischemia model in the recovery and sequela stages. A middle cerebral artery ...

Denne studien bruker en etablert dyremodell for å undersøke utvinningen og oppfølgerstadiene av hjerneiskemi. De viktigste fordelene med denne teknikken er at den er stabil, pålitelig og relativt enkel. Begynn med å plassere en bedøvet rotte på et kirurgisk festebord.Gjennom operasjonen, opprettholde kroppstemperaturen til rotten ved 37 grader Celsius i en liten dyr termostat. Koble munnen til anestesi maskin maske og bekrefte dyp anestesi ved mangel på ekstremitet spenning, hornhinnen reflekser og smerte. Fest rottens lemmer til operasjonsbordet ved hjelp av papirbandasje.Med en elektrisk barbermaskin fjerner du nakkefrakken og steriliserer nakken med 75 % alkohol. Bruk oftalmisk saks til å kutte to til tre centimeter langs den sentrale langsgående formen på nakken. Og så med oftalmiske tang, skille subkutan muskel.Bruk hjemmelaget retractor for å fullt ut utsette synsfeltet. Forsiktighet må tas for å presentere passende aseptisk teknikk for alle overlevelse kirurgiske prosedyrer. Teknikken illustrert senere i videoen skal praktiseres gjennom hele prosedyren.Bruk mikro tang for å isolere den vanlige halspulsåren, den ytre halspulsåren og den indre halspulsåren. Arbeide under mikroskopet, bruk 8-0 suturer for å ligate den vanlige halspulsåren med hard knute, ekstern halspulsåren langt fra hjertetden med hard knute, intern halspulsåren med løs knute og deretter å linje den ytre halspulsåren nær hjertetden. Bruk mikrosaks, kutt en liten åpning i den ytre halspulsåren og sett forsiktig inn en trådbolt.Ligate suturen av den ytre halspulsåren som er tynn og løs knute og avskåret den ytre halspulsåren. Løsne den løse knuten i den indre halspulsåren og fortsett å sette inn gjengbolten til begynnelsen av den midterste hjernearterien merket med suturen og kutt av den eksponerte gjengebolten. Etter at iskemisk tid er nådd etter to til tre timer, fest bruddet i den eksterne halspulsåren ved hjelp av mikro tang og trekk forsiktig ut gjengbolten med en annen mikro tang.Etter fullstendig tilbaketrekking av den fremre enden av trådbolten fra den indre halspulsåren, ligate den eksterne halspulsåren som har blitt foret med 8-0 og fjern deretter gjengebolten helt. Etter å ha løsnet den vanlige halspulsåren, dab ca 50,000 enheter av penicillin natriumpulver på såroverflaten for å hindre infeksjon. Bruk fire suturer for å suturere subkutane muskler og hud.Etter å ha plassert rotten tilbake til buret, bruk en en milliliter sprøyte for å gi ca. 0,2 milliliter vann til rotten oralt for å forhindre postoperativ dehydrering. Velg dyrene i henhold til den lengste poengsummen for TTC farging eller sensoriske motorstudier. Etter inkubering av hjernen isolert for TTC farging på minus 20 grader Celsius på 30 minutter, plasser den i en forkjølt rotte hjerne skive mold.Bruk et forhåndskjølt blad, kutt hjernen i seks to millimeter tykke påfølgende seksjoner. Beis seksjonene med 2% TTC i en seks-brønns kulturplate og inkuber i 30 til 60 minutter ved 37 grader Celsius mens du rister. Hvert 10. minutt, snu seksjonene til hjerneiskemien og de ikke-infiserte områdene er synlig hvite og røde.Linje hjernen skiver vertikalt på den svarte papp for fra baksiden til forsiden av hjernen ved hjelp av en linjal for å sikre at den totale lengden på hver linje er den samme og ta bilder. Importer bildet og velg hjerneskiver. Velg svart forgrunn, og skriv inn Alt Delete for å fylle bakgrunnsfargen og deretter Kontroll D for å fjerne merkingen.Til slutt lagrer du bildet på skrivebordet. For å analysere det infarktvolumet, først åpne programvaren og importere bildet. Hvis du vil foreta feiljustering, justerer du lysstyrken med kontrastforbedringsverktøyet slik at bakgrunnen er svart.I filteret bruker du medianverktøyet til å fjerne høydepunktene. For å beregne det venstre normale hjerneområdet, velg farge ved hjelp av segmentering og juster verdien av H, S og jeg for å skille hjerneskiver fra den svarte bakgrunnen. Gå tilbake til tellestørrelse og klikk på antall.Klikk på delte objekter i redigering for å skille hjernen fra midtlinjen som automatisk skiller venstre og høyre hjerneområder. For å beregne riktig infarkt hjerneområde, importer bildet, juster bakgrunnen og fjern høydepunktene som gjort tidligere. Velg tellestørrelse og klikk på tegne fletteobjekter verktøyet i redigering.Velg iskemisk område manuelt og klikktelling for å beregne det iskemiske området. For å beregne riktig sunt hjerneområde, må du først importere bildet, justere bakgrunnen og fjerne høydepunktene som gjort tidligere. Velg farge ved hjelp av segmentering og juster verdien av H, S og I for å skille de sunne hjerneskivene fra den svarte bakgrunnen.Gå tilbake til tellestørrelse og klikk på telle for å beregne dette området. Klikk på delte objekter i redigering for å skille hjernen fra midtlinjen som automatisk skiller venstre og høyre hjerneområder. Ta rotter valgt for sensoriske motorstudier og for bilateral assymetri test og wrap papir tape på den saphenous delen av hver forklå tre ganger ved hjelp av like trykk.For hver rotte, ta opp med kameraet antall ganger hver forklåpe kontakter og fjerner båndet innen fem minutter, inkludert upåvirket og berørte pote ganger. Gjenta bryting og opptak etter 30 minutter, og beregn deretter verdiene. For rutenettgangtest, plasser rotten i midten av en forhøyet rutenettoverflateplattform med 2,5 kvadratcentimeter åpninger.Skyv rottens hofter litt for å oppmuntre den til å bevege seg over overflaten. Ved hjelp av kamera, ta opp antall fotfeil gjort av høyre upåvirket og venstre berørte lemmer og det totale trinnnummeret på ett minutt med kamera. For rotorstangtest setter du opp rotteroterende bartretthetsapparatet til en hastighet på 13 O/min over en fem minutters periode ved hjelp av støtteprogramvaren.Start dataprogrammet og plasser rotten på rotorstangringene samtidig. Avslutt studien hvis rotten faller av ringen eller etter fem minutter og registrerer den roterende tiden. La rotten hvile i 30 minutter, gjenta deretter testen to ganger til og velg maksimumsverdien som siste roterende tid.For å løfte tautest, plasser løftetauinstrumentet på et skrivebord. Få rotten til å gripe tauet med forbenene og la det henge. Registrer tidspunktet for henging og beregn poengsummene.Når hjerne iskemisk skade indusert av midten cerebral arterie okklusjon og reperfusjon ble studert, 300 gram vekt 3040 tråd bolt og tre timers hjerneinfarkt tid viste seg å være den mest egnet med den største cerebral infarkt, høyeste lengste score, og største modell suksessforhold. Dette ble betydelig forbedret sammenlignet med konvensjonell behandling av 275 gram vekt, 2636 tråd bolt og to timers hjerne infarkt tid. For å studere utvinningsstatusen til hjerneiskemi, ble TTC-farging utført, og det avslørte infarkt og krympevolum på 23,4% på den første dagen etter midten cerebral arterie okklusjon og reperfusjon, 19,6% på 35th dag, 16,1% på 60th og 15,7% på 90th.Etter en dag med midtre cerebral arterie okklusjon og reperfusjon, sensorisk motor bias i bilateral assymetri test, rutenett walking feiltider i rutenettet walking test og løfte tau score i løftetau testen er alle økt mens rotorstang tid i rotorstang testen redusert indikerer viktigheten av disse testene i å studere akutt hjerneiskemi. Bare sensorisk motorisk bias opprettholdt store funksjonsforstyrrelser med en tidsavhengig måte etter 35, 60 og 90 dager med midterste cerebral arterie okklusjon og reperfusjon. For rutenettets gangtest var det betydelige forskjeller i nettgangsfeiltider i 35 og 60 dager.Disse resultatene indikerte at disse to testene kunne være egnet for testing av utvinning hos rotter. For å sikre suksess, bør handlingen være forsiktig og operasjonen skal være jevn. Andre atferdstester som gangartdeteksjon kan også være egnet for denne modellen.Utvikling av denne modellen kan bane vei for forskere å utforske hjernen iskemi i utvinning og sequelae stadier.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

Transplantasjon av Olfactory Ensheathing Cells å evaluere Funksjonell Recovery etter perifer nerveskade

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Utarbeidelse av akutt hjernen skiver med en optimalisert N-Methyl-D-glucamine beskyttende gjenopprettingsmetode

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Utilizing 3D Printing Technology to Merge MRI with Histology: A Protocol for Brain Sectioning

Utnytte 3D utskriftsteknologi til Merge MR med histologi: En protokoll for Brain Seksjonering

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Delvis synsnerven Transection i rotter: modell etablert med en ny Operative tilnærming til vurdere sekundære degenerasjon av netthinnen ganglieceller

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

Bedømme i Vivo blod - hjerne barrieren avbrudd i en rotte modell av iskemiske hjerneslag

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

A Fibrin-Enriched and tPA-Sensitive Photothrombotic Stroke Model

En fibrinberiket og tPA-sensitiv fototrombotisk slagmodell

An ideal thromboembolic stroke model requires certain properties, including relatively simple surgical procedures with low mortality, a consistent ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

En rottemodell av EcoHIV hjerneinfeksjon

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Motor Dual-Tasks for Gait Analysis and Evaluation in Post-Stroke Patients

Motoriske dobbeltoppgaver for ganganalyse og evaluering hos pasienter etter slag

Eighteen stroke patients were recruited for this study involving the evaluation of cognition and walking ability and multitask gait analysis. Multitask ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Dural stimulering og periorbital von frey testing hos mus som en preklinisk modell for hodepine

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

En modell for encefalomyosynangiose behandling etter Middle Cerebral Artery okklusjon-indusert hjerneslag hos mus

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...