Name: a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats
Uploaded: 2019-11-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

Detta arbete stöddes av National Natural Science Foundation i Kina (81603315, 81603316), Key R & D plan för Jiangxi-provinsen i Kina (20171ACH80001), industriella och akademiska samarbetsprojekt i högskolor och universitet i Fujian-provinsen i Kina (2018Y41010011).

Förfarandet och användningen av djur försökspersoner har godkänts av National Institute of Health för vård och användning av försöksdjur. Detta protokoll är specifikt justerat för tester av mellersta cerebral artär ocklusion/reperfusion (MCAO/R) och sensorimotorik funktion.
1. experimentell design och gruppering
<ol><li>Använd en råtta MCAO/R modell för att skärmen en råtta hjärna ischemisk modell metod med mer svår hjärnskada och större modell framgång förhållande m...

<ol>
	<li>Kong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralization+of+chemokine-like+factor+1,+a+novel+C-C+chemokine,+protects+against+focal+cerebral+ischemia+by+inhibiting+neutrophil+infiltration+via+MAPK+pathways+in+rats.">Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 112 (2014).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+bilobalide+on+cerebral+ischemia+and+reperfusion+injury+are+associated+with+inhibition+of+pro-inflammatory+mediator+production+and+down-regulation+of+JNK1/2+and+p38+MAPK+activation.">Neuroprotective effects of bilobalide on cerebral ischemia and reperfusion injury are associated with inhibition of pro-inflammatory mediator production and down-regulation of JNK1/2 and p38 MAPK activation.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 167 (2014).</li><li>Thomas, A., Detilleux, J., Flecknell, P., Sandersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+Guidelines+on+Peri-Anesthesia+Care+for+Rat+Models+of+Stroke:+A+Meta-Analysis+Comparing+the+Years+2005+and+2015.">Impact of Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) Guidelines on Peri-Anesthesia Care for Rat Models of Stroke: A Meta-Analysis Comparing the Years 2005 and 2015.</a> PLoS One. 12, e0170243 (2017).</li><li>Kumar, A., Aakriti, V., Gupta, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+An+update.">A review on animal models of stroke: An update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>Tong, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+enhanced+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+nonhuman+primates+using+an+endovascular+trapping+technique.">An enhanced model of middle cerebral artery occlusion in nonhuman primates using an endovascular trapping technique.</a> AJNR Am. Journal of Neuroradiology. 36, 2354-2359 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9, 541-551 (2014).</li><li>Abrah&#225;m, H., Somogyv&#225;ri-Vigh, A., Maderdrut, J. L., Vigh, S., Arimura, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filament+size+influences+temperature+changes+and+brain+damage+following+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Filament size influences temperature changes and brain damage following middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Exp. Brain Res. 142, 131-138 (2002).</li><li>Sun, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coumarin+derivatives+protect+against+ischemic+brain+injury+in+rats.">Coumarin derivatives protect against ischemic brain injury in rats.</a> European Journal of Medicinal Chemistry. 67, 39-53 (2013).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Smith, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+site+and+lesion+topology+determine+efficacy+of+a+human+neural+stem+cell+line+in+a+rat+model+of+chronic+stroke.">Implantation site and lesion topology determine efficacy of a human neural stem cell line in a rat model of chronic stroke.</a> Stem Cell. 30, 785-796 (2012).</li><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Forsythia+suspense+extract+with+antioxidant+and+anti-inflammatory+properties+in+a+model+of+rotenone+induced+neurotoxicity.">Protective effects of Forsythia suspense extract with antioxidant and anti-inflammatory properties in a model of rotenone induced neurotoxicity.</a> Neurotoxicology. 52, 72-83 (2016).</li><li>Milani, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly-arginine+peptides+reduce+infarct+volume+in+a+permanent+middle+cerebral+artery+rat+stroke+model.">Poly-arginine peptides reduce infarct volume in a permanent middle cerebral artery rat stroke model.</a> BMC Neuroscience. 17, 19 (2016).</li><li>DeGraba, T. J., Ostrow, P., Hanson, S., Grotta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+performance,+histologic+damage,+and+calcium+influx+in+rats+treated+with+NBQX+after+focal+ischemia.">Motor performance, histologic damage, and calcium influx in rats treated with NBQX after focal ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14, 262-268 (1994).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+preclinical+animal+model+to+assess+brain+recovery+after+acute+stroke.">Validation of a preclinical animal model to assess brain recovery after acute stroke.</a> European Journal of Pharmacology. 835, 75-81 (2018).</li><li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IMM-H004+prevents+toxicity+induced+by+delayed+treatment+of+tPA+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemia+involving+PKA-and+PI3K-dependent+Akt+activation.">IMM-H004 prevents toxicity induced by delayed treatment of tPA in a rat model of focal cerebral ischemia involving PKA-and PI3K-dependent Akt activation.</a> European Journal of Neuroscience. 39, 2107-2118 (2014).</li><li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-3-n-butylphthalide+Promotes+Neurogenesis+and+Neuroplasticity+in+Cerebral+Ischemic+Rats.">L-3-n-butylphthalide Promotes Neurogenesis and Neuroplasticity in Cerebral Ischemic Rats.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 21, 733-741 (2015).</li></ol>

Många modeller som upprättar metoder och beteendemässiga indikatorer som är väl används i akut cerebral ischemi kanske inte har betydande förändringar i återhämtning och följd stadier av hjärnan ischa16,17. Emellertid, antalet patienter med hjärnischemisk i återhämtning och följd stadier är störst. Det är viktigt att välja en lämplig djurmodell för återhämtning och följd stadier av ischemi stroke.
Vi använder ...

Brain ischa är uppdelad i tre stadier med olika post-stroke indikatorer: den akuta stadiet (inom 1 vecka), återhämtning skede (1 vecka till 6 månader), och följdtillstånd skede (mer än 6 månader). För närvarande, de flesta studier fokuserar på den akuta fasen av hjärnan ischa på grund av dess betydande effekt och flera relativa forskningsmodeller1,2,3. Emellertid, återhämtning och följdtillstånd stadier av hjärnan ischa kan inte ignoreras på grund av deras långsiktiga komplikation av funktionshinder. Därför är syftet med denna studie att utforska en stabil, pålitlig och relativt enkel djurmodell för att forska återhämtning och följd stadier av hjärnan ischa.
Bland de många experimentella hjärnan ischemi modeller, vi använder mellersta cerebral artär ocklusion (mcao) via gänga bult insättning i den högra mellersta cerebral artär (MCA). Denna modell liknar människans stroke, som kan producera större-infarct volymer, resultera i många beteendemässiga störningar relaterade till stroke, och kan tillåta blod reperfusion (R) genom att ta bort tråden bult4,5,6. MCAO/R anses också guldmynt standard djurmodell av hjärnan ischa7. Dessutom, svårighetsgraden av hjärnskada beror på diametern och insättnings längden av tråden bult, varaktigheten av hjärnans Ischia, och djurens vikt (större råttor har större hjärnor och tjockare cerebrala kärl)8. Därför, genom att ändra tråden bult typ,-infarct tid, och råtta vikt, en lämplig modell kan hittas för återhämtning och följd stadier av hjärnan ischemi i mcao/R råttor. För att validera råtta-modellen utförde vi en 1-dagars, 35-dagars, 60-dagars och 90-dagars studie av MCAO/R-modellen med hjälp av TTC-färgning och Sensorimotoriska experiment (ett bilateralt asymmetri test, ett Grid-Walking test, ett rotarod test och ett lyftrep test).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anatomical Microscope</td>
			<td>Leica (Germany)</td>
			<td>S8</td>
			<td>Microscopic operating instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blade</td>
			<td>Gellette</td>
			<td>/</td>
			<td>Cutting brain sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constant Temperature Shaking Bed</td>
			<td>Taicang Experimental Equipment Factory</td>
			<td>THZ-C</td>
			<td>To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>700D</td>
			<td>For taking pictures of TTC staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Shaver</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>3000#</td>
			<td>Removal of hair from the neck of rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Hamostatic</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>14 cm</td>
			<td>Using for brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Pro Plus Software</td>
			<td>Media Cybernetics Inc.</td>
			<td>6.0</td>
			<td>Analyze the infarct volume</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>217170702</td>
			<td>Anesthetic gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microshear</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Forceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Auxiliary skin and muscle anatomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pphthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Using for cutting the skin of neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Brain Slice Mold</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>400 g</td>
			<td>For standard, uniform cutting of brain tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus</td>
			<td>Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>ZH-300B</td>
			<td>To test the sensorimotor function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anaesthesia Machine</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>ABM3000</td>
			<td>A gas anesthetic machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Thermostat</td>
			<td>Beijing Damida Technology Co., Ltd.</td>
			<td>DM.7-YLS-20A</td>
			<td>To maintain animal body temperature constant during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>16 cm</td>
			<td>Using for decapitate and brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td>Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>4-0 / 5-0</td>
			<td>Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thread Bolt</td>
			<td>Beijing Cinontech Co. Ltd.</td>
			<td>2636/2838/3040/3043-A4</td>
			<td>Blockage of the middle cerebral artery in rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>LOT#BCBP3272V</td>
			<td>Brain section staining reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats

Syftet med denna studie var att etablera och validera en Animal hjärna ischelmodell i återhämtning och följd stadier. En mellersta cerebral artär ocklusion/reperfusion (MCAO/R) modell i manliga Sprague-Dawley råttor valdes. Genom att ändra råttans vikt (260 − 330 g), var gängbulten typ (2636/2838/3040/3043) och hjärnan-infarct tid (2-3 h), en högre Longa poäng, en större-infarct volym och en större modell framgång förhållande screenades med Longa Poäng och TTC färgning. Den optimala modellen skick (300 g, 3040 gänga bult, 3 h Brain-infarct tid) förvärvades och används i en 1-90 dag observationsperiod efter reperfusion via bedömning av sensomotoriska funktioner och-infarct volym. Vid dessa förhållanden, det bilaterala asymmetri testet hade en signifikant skillnad från 1 till 90 dagar, och Grid-Walking test hade en signifikant skillnad från 1 till 60 dagar; båda skillnaderna kan vara ett passande sensorimotoriskt funktionstest. Sålunda, det lämpligaste villkoret för en roman råtta modell i återhämtning och följd stadier av hjärnan ischa hittades: 300 g råttor som genomgick mcao med en 3040 gänga bult för en 3 h hjärninfarkt och sedan reperfused. Lämpliga Sensorimotoriska funktionstester var ett bilateralt asymmetri test och ett Grid-Walking test.

Med hjälp av ovannämnda förfarande för en MCAO/R-modell med en Longa-Poäng och TTC-färgning, olika behandlingar av medelvikt (275/300/320 g), bulttyper (2636/2838/3040/3043; Tabell 1) och ischemiska gånger (2-3 h) och 1 dag reperfusion användes för att skärmen för den optimala hjärnan ischa modell hos råttor. Modellparametrar för 300 g vikt, 3040 gängbult, och 3 h Brain-infarct tid var den mest lämpade för den största hjärninfarkt, högsta Longa Poäng ...

Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats

Syftet med denna studie är att etablera och validera en djurmodell för forskning i återhämtning och följd stadier av hjärnan ischa genom att testa hjärninfarkt och sensomotoriska funktion efter mellersta cerebral artär ocklusion/reperfusion (mcao/R) efter 1-90 dagar hos råttor.

En preklinisk modell för att bedöma hjärn återhämtning efter akut stroke hos råttor

The purpose of this study was to establish and validate an animal brain ischemia model in the recovery and sequela stages. A middle cerebral artery ...

Denna studie använder en etablerad djurmodell för att forska återhämtning och följdstadier stadier av hjärnans ischemi. De viktigaste fördelarna med denna teknik är att den är stabil, pålitlig och relativt enkel. Börja med att placera en sövd råtta på ett kirurgiskt fästbord.Under hela operationen, upprätthålla kroppstemperaturen hos råttan vid 37 grader Celsius i ett litet djur termostat. Anslut munnen till anestesi maskinmask och bekräfta djup anestesi av brist på extremitetsspänning, rekonflexer och smärta. Fix råttans lemmar till operationsbordet med hjälp av papper bandage.Med en elektrisk rakapparat, ta bort halsrocken och sterilisera halsen med 75%alkohol. Använd oftalmisk sax för att skära två till tre centimeter längs halsens centrala längdform. Och sedan med oftalmiska tövingar, separera subkutan muskel.Använd hemgjort upprullningsdon för att fullständigt exponera synfältet. Försiktighet måste vidtas för att presentera lämplig aseptisk teknik för alla överlevnad kirurgiska ingrepp. Tekniken illustreras senare i videon bör praktiseras genom hela förfarandet.Använd mikrotens tärna för att isolera den gemensamma halspulsådern, den yttre halspulsådern och den inre halspulsådern. Arbeta under mikroskopet, använd 8-0 suturer till ligate den gemensamma halspulsådern med hård knut, yttre halspulsådern långt från hjärtänden med hård knut, inre halspulsådern med lös knut och sedan att linje den yttre halspulsådern nära hjärtänden. Med hjälp av mikro sax, skär en liten öppning i den yttre halspulsådern och försiktigt in en tråd bult.Ligate suturen av den yttre halspulsådern som är tunn och lös knut och skär av den yttre halspulsådern. Lossa den lösa knut av den inre halspulsådern och fortsätt sätta in gängbulten till början av den mellersta cerebrala artären märkt med suturen och skär av den exponerade gängbulten. Efter den ischemiska tiden har nåtts efter två till tre timmar, fixera frakturen på den yttre halspulsådern med hjälp av mikro-tlyck och dra försiktigt ut gängbulten med en annan mikro-tlyck.Efter att helt dra tillbaka den främre änden av gängbulten från den inre halspulsådern, ligate den yttre halspulsådern som har fodrats med 8-0 suturen och ta sedan bort gängbulten helt. Efter lossa den gemensamma halspulsådern, sandskädda cirka 50, 000 enheter av penicillin natrium pulver på sårytan för att förhindra infektion. Använd fyra suturer för att sutur subkutana muskler och hud.När råttan har placerats tillbaka till buren ska du använda en milliliterspruta för att ge cirka 0,2 milliliter vatten till råttan oralt för att förhindra postoperativ uttorkning. Välj djuren enligt den längsta poängen för TTC-färgning eller sensoriska motorstudier. Efter inkubering hjärnan isolerade för TTC färgning på minus 20 grader Celsius på 30 minuter, placera den i en pre-kyld råtta hjärnskiva mögel.Med hjälp av en färdigkyld blad, skär hjärnan i sex två millimeter tjocka på varandra följande sektioner. Fläcka sektionerna med 2%TTC i en sex-brunnskulturplatta och inkubera i 30 till 60 minuter vid 37 grader Celsius medan du skakar. Var 10 minuter, vänd sektionerna tills hjärnan ischemi och de icke-infekterade områdena är synligt vita och röda.Linje hjärnan skivor vertikalt på den svarta kartongen i ordning från baksidan till framsidan av hjärnan med hjälp av en linjal för att säkerställa att den totala längden på varje linje är densamma och ta bilder. Importera fotot och markera hjärnsegmenten. Välj svart förgrund och skriv Alt Ta bort för att fylla bakgrundsfärgen och sedan Kontroll D för att avmarkera.Slutligen, spara bilden till skrivbordet. Om du vill analysera infarct-volymen öppnar du först programvaran och importerar fotot. Om du vill defekta modifiering justerar du ljusstyrkan med verktyget för kontrastförbättring så att bakgrunden blir svart.I filter använder du medianverktyget för att ta bort höjdpunkterna. För att beräkna det vänstra normala hjärnområdet väljer du färg med hjälp av segmentering och justerar värdet på H, S och I för att separera hjärnskivorna från den svarta bakgrunden. Återgå till antal storlek och klicka på räkna.Klicka på split objekt i redigera för att skilja hjärnan från mittlinjen som automatiskt kommer att skilja vänster och höger hjärnområden. För att beräkna rätt infarct hjärnan området, importera bilden, justera bakgrunden, och ta bort höjdpunkterna som gjort tidigare. Välj antal storlek och klicka på Rita slå samman objekt verktyg i redigera.Välj det ischemiska området manuellt och klicka på antal för att beräkna det ischemiska området. För att beräkna rätt friska hjärnan område, först importera bilden, justera bakgrunden, och ta bort höjdpunkterna som gjort tidigare. Välj färg med hjälp av segmentering och justera värdet på H, S och I för att separera de friska hjärnskivorna från den svarta bakgrunden.Återgå till räkna storlek och klicka på räkna att beräkna detta område. Klicka på split objekt i redigera för att skilja hjärnan från mittlinjen som automatiskt kommer att skilja vänster och höger hjärnområden. Ta råttor som valts för sensoriska motorstudier och för bilateralt assymetritest och linda papperstejp på den saphenous delen av varje framklo tre gånger med hjälp av lika tryck.För varje råtta, spela in med kamera antalet gånger varje förklo kontakter och tar bort bandet inom fem minuter inklusive opåverkade och drabbade tass gånger. Upprepa omslag och inspelning efter 30 minuter och beräkna sedan värdena. För grid walking test, placera råttan i mitten av en förhöjd rutnät yta plattform med 2,5 kvadratcentimeter öppningar.Tryck råttans höfter något för att uppmuntra den att röra sig över ytan. Med hjälp av kamera, registrera antalet fotfel som gjorts av höger opåverkade och vänster drabbade lemmar och det totala stegnumret i en minut med kamera. För rotorstavsprovning, ställ in den ratroterande stångutmattningsapparaturen till en hastighet av 13 RPM under en femminutersperiod med hjälp av den stödjande programvaran.Starta datorprogrammet och placera råttan på rotorstavens ringar samtidigt. Avsluta rättegången om råttan faller av ringen eller efter fem minuter och registrera den roterande tiden. Låt råttan vila i 30 minuter, upprepa sedan testet två gånger till och välj det högsta värdet som sista roterande tid.För att lyfta linprov, placera lyftrepinstrumentet på ett skrivbord. Ha råttan grepp repet med sina framben och låt den hänga. Registrera tidpunkten för hängning och beräkna poängen.När hjärnan ischemisk skada framkallas av mellersta cerebral gatan ocklusion och reperfusion studerades 300 gram vikt 3040 tråd bult och tre timmars hjärnan infarct tid visat sig vara den mest lämpliga med den största hjärninfarkt, högsta längsta poängen och största modellen framgång förhållande. Detta förbättrades avsevärt jämfört med den konventionella behandlingen av 275 gram vikt, 2636 tråd bult och två timmars hjärnan infarct tid. För att studera återhämtning status hjärnan ischemi, TTC färgning utfördes och det visade infarct och krympa volym på 23,4%på den första dagen efter mellersta cerebral artärocklusion och reperfusion, 19,6%på 35: e dagen, 16,1%på 60: e och 15,7%på 90.Efter en dag av mellersta cerebral artär ocklusion och reperfusion, sensorisk motor bias i den bilaterala assymetry testet, grid walking feltider i rutnätet gångtest och lyftrep poäng i lyftrepet testet är alla ökade medan rotorn rod tid i rotorn rod test minskade anger betydelsen av dessa tester i att studera akut hjärnan ischemi. Endast sensoriska motor bias upprätthålls stora funktionella störningar med en tid-beroende sätt efter 35, 60 och 90 dagar av mellersta cerebral gatan ocklusion och reperfusion. För rutnätet promenader testet fanns det betydande skillnader i rutnät walking fel gånger för 35 och 60 dagar.Dessa resultat visade att dessa två tester skulle kunna vara lämpliga för att testa återhämtningen hos råttor. För att säkerställa framgång, bör åtgärden vara mild och operationen bör vara stadig. Andra beteendetester som gångdetektering kan också vara lämpliga för denna modell.Utveckling av denna modell kan bana väg för forskare att utforska hjärnan ischemi i återhämtning och sviter stadier.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

Transplantation av Lukt Ensheathing celler att utvärdera funktionell återhämtning efter perifer nervskada

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Beredning av akut hjärnskada skivor använder en optimerad N-metyl-D-glucamine skyddande återställningsmetod

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Utilizing 3D Printing Technology to Merge MRI with Histology: A Protocol for Brain Sectioning

Med hjälp av 3D Printing Technology till Merge MRI med histologi: Ett protokoll för Brain sektionering

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Partiell synnerven Transection råttor: en förebild som upprättats med en ny operativ metod att bedöma sekundära Degeneration av retinala ganglionceller

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

En In Vivo -bedömning av blod - hjärnbarriären störningar i en råtta modell av ischemisk Stroke

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

A Fibrin-Enriched and tPA-Sensitive Photothrombotic Stroke Model

En fibrinberikad och tPA-känslig fototrombotisk strokemodell

An ideal thromboembolic stroke model requires certain properties, including relatively simple surgical procedures with low mortality, a consistent ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

En råttmodell av EcoHIV hjärninfektion

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Motor Dual-Tasks for Gait Analysis and Evaluation in Post-Stroke Patients

Motoriska dubbla uppgifter för gånganalys och utvärdering hos patienter efter stroke

Eighteen stroke patients were recruited for this study involving the evaluation of cognition and walking ability and multitask gait analysis. Multitask ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Dural stimulering och periorbital von Frey-testning hos möss som en preklinisk modell av huvudvärk

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

En modell för encefalomyosynangios behandling efter mellersta cerebral artär ocklusion-inducerad stroke hos möss

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...