Name: a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats
Uploaded: 2019-11-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81603315, 81603316), Çin'deki Jiangxi eyaletinin Önemli Ar-Ge planı (20171ACH80001), Fujian eyaletinin kolej ve üniversitelerinde endüstriyel ve akademik işbirliği projeleri tarafından desteklenmiştir. Çin (2018Y41010011).

Hayvan deneklerin prosedürü ve kullanımı, laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için Ulusal Sağlık Enstitüsü tarafından onaylanmıştır. Bu protokol özellikle orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu (MCAO/R) ve sensorimotor fonksiyon testleri için ayarlanmıştır.
1. Deneysel tasarım ve gruplandırma
<ol><li>Longa skoru ve TTC boyama kullanarak daha ciddi beyin hasarı ve daha fazla model başarı oranı ile bir sıçan beyin iskemik model yöntemi ekran iç...

<ol>
	<li>Kong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralization+of+chemokine-like+factor+1,+a+novel+C-C+chemokine,+protects+against+focal+cerebral+ischemia+by+inhibiting+neutrophil+infiltration+via+MAPK+pathways+in+rats.">Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 112 (2014).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+bilobalide+on+cerebral+ischemia+and+reperfusion+injury+are+associated+with+inhibition+of+pro-inflammatory+mediator+production+and+down-regulation+of+JNK1/2+and+p38+MAPK+activation.">Neuroprotective effects of bilobalide on cerebral ischemia and reperfusion injury are associated with inhibition of pro-inflammatory mediator production and down-regulation of JNK1/2 and p38 MAPK activation.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 167 (2014).</li><li>Thomas, A., Detilleux, J., Flecknell, P., Sandersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+Guidelines+on+Peri-Anesthesia+Care+for+Rat+Models+of+Stroke:+A+Meta-Analysis+Comparing+the+Years+2005+and+2015.">Impact of Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) Guidelines on Peri-Anesthesia Care for Rat Models of Stroke: A Meta-Analysis Comparing the Years 2005 and 2015.</a> PLoS One. 12, e0170243 (2017).</li><li>Kumar, A., Aakriti, V., Gupta, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+An+update.">A review on animal models of stroke: An update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>Tong, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+enhanced+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+nonhuman+primates+using+an+endovascular+trapping+technique.">An enhanced model of middle cerebral artery occlusion in nonhuman primates using an endovascular trapping technique.</a> AJNR Am. Journal of Neuroradiology. 36, 2354-2359 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9, 541-551 (2014).</li><li>Abrah&#225;m, H., Somogyv&#225;ri-Vigh, A., Maderdrut, J. L., Vigh, S., Arimura, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filament+size+influences+temperature+changes+and+brain+damage+following+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Filament size influences temperature changes and brain damage following middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Exp. Brain Res. 142, 131-138 (2002).</li><li>Sun, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coumarin+derivatives+protect+against+ischemic+brain+injury+in+rats.">Coumarin derivatives protect against ischemic brain injury in rats.</a> European Journal of Medicinal Chemistry. 67, 39-53 (2013).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Smith, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+site+and+lesion+topology+determine+efficacy+of+a+human+neural+stem+cell+line+in+a+rat+model+of+chronic+stroke.">Implantation site and lesion topology determine efficacy of a human neural stem cell line in a rat model of chronic stroke.</a> Stem Cell. 30, 785-796 (2012).</li><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Forsythia+suspense+extract+with+antioxidant+and+anti-inflammatory+properties+in+a+model+of+rotenone+induced+neurotoxicity.">Protective effects of Forsythia suspense extract with antioxidant and anti-inflammatory properties in a model of rotenone induced neurotoxicity.</a> Neurotoxicology. 52, 72-83 (2016).</li><li>Milani, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly-arginine+peptides+reduce+infarct+volume+in+a+permanent+middle+cerebral+artery+rat+stroke+model.">Poly-arginine peptides reduce infarct volume in a permanent middle cerebral artery rat stroke model.</a> BMC Neuroscience. 17, 19 (2016).</li><li>DeGraba, T. J., Ostrow, P., Hanson, S., Grotta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+performance,+histologic+damage,+and+calcium+influx+in+rats+treated+with+NBQX+after+focal+ischemia.">Motor performance, histologic damage, and calcium influx in rats treated with NBQX after focal ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14, 262-268 (1994).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+preclinical+animal+model+to+assess+brain+recovery+after+acute+stroke.">Validation of a preclinical animal model to assess brain recovery after acute stroke.</a> European Journal of Pharmacology. 835, 75-81 (2018).</li><li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IMM-H004+prevents+toxicity+induced+by+delayed+treatment+of+tPA+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemia+involving+PKA-and+PI3K-dependent+Akt+activation.">IMM-H004 prevents toxicity induced by delayed treatment of tPA in a rat model of focal cerebral ischemia involving PKA-and PI3K-dependent Akt activation.</a> European Journal of Neuroscience. 39, 2107-2118 (2014).</li><li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-3-n-butylphthalide+Promotes+Neurogenesis+and+Neuroplasticity+in+Cerebral+Ischemic+Rats.">L-3-n-butylphthalide Promotes Neurogenesis and Neuroplasticity in Cerebral Ischemic Rats.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 21, 733-741 (2015).</li></ol>

Akut serebral iskemide iyi kullanılan yöntem ve davranışsal göstergeleri oluşturan birçok modelde beyin iskemisinin iyileşme ve sekeli evrelerinde önemli değişiklikler olmayabilir16,17. Ancak, iyileşme ve sekel aşamalarında beyin iskemik olan hastaların sayısı en büyüktür. İskemi inmenin iyileşme ve sekel aşamaları için uygun bir hayvan modeli seçmek esastır.
Farelerde MCAO/R modelini farelerin uygun ağırl?...

Beyin iskemi farklı inme sonrası göstergeleri ile üç aşamaya ayrılır: akut evre (içinde 1 hafta), iyileşme aşaması (1 hafta-6 ay), ve sekel evresi (6 aydan fazla). Şu anda, çoğu çalışma beyin iskemi akut aşamasında çünkü önemli etkisi ve çok göreceli araştırma modelleri1,2,3odaklanmak . Ancak, beyin iskemisinin iyileşme ve sekel aşamaları uzun süreli sakatlık komplikasyonları nedeniyle göz ardı edilemez. Bu nedenle, bu çalışmanın amacı beyin iskemi kurtarma ve sekel aşamaları araştırmak için istikrarlı, güvenilir ve nispeten basit bir hayvan modeli keşfetmektir.
Birçok deneysel beyin iskemi modelleri arasında, sağ orta serebral arter içine iplik cıvata ekleme yoluyla orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) kullanın (MCA). Bu model insan inme benzer, hangi büyük enfarktk hacimleri üretebilir, inme ile ilgili birçok davranış bozuklukları neden, ve iplik cıvata kaldırarak kan reperfüzyonu izin verebilir (R) iplik cıvatakaldırarak 4,5,6. MCAO / R da beyin iskemi altın standart hayvan modeli olarak kabul edilir7. Ayrıca, beyin hasarının şiddeti çapı ve iplik cıvata ekleme uzunluğuna bağlıdır, beyin iskemi süresi, ve hayvan ağırlığı (büyük sıçanlar daha büyük beyin ve kalın serebral damarlar var)8. Bu nedenle, iplik cıvata tipi değiştirerek, enfarktüs süresi, ve sıçan ağırlığı, uygun bir model kurtarma ve MCAO / R sıçanlarda beyin iskemi sekeli aşamaları için bulunabilir. Sıçan modelini doğrulamak için, TTC boyama ve sensorimotor fonksiyon deneyleri (ikili asimetri testi, ızgara yürüme testi, rotarod testi ve kaldırma ipi testi) kullanarak MCAO/R modelinin 1 günlük, 35 günlük, 60 günlük ve 90 günlük bir çalışmasını gerçekleştirdik.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anatomical Microscope</td>
			<td>Leica (Germany)</td>
			<td>S8</td>
			<td>Microscopic operating instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blade</td>
			<td>Gellette</td>
			<td>/</td>
			<td>Cutting brain sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constant Temperature Shaking Bed</td>
			<td>Taicang Experimental Equipment Factory</td>
			<td>THZ-C</td>
			<td>To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>700D</td>
			<td>For taking pictures of TTC staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Shaver</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>3000#</td>
			<td>Removal of hair from the neck of rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Hamostatic</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>14 cm</td>
			<td>Using for brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Pro Plus Software</td>
			<td>Media Cybernetics Inc.</td>
			<td>6.0</td>
			<td>Analyze the infarct volume</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science</td>
			<td>217170702</td>
			<td>Anesthetic gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microshear</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Vascular micromanipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Forceps</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Auxiliary skin and muscle anatomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pphthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>10 cm</td>
			<td>Using for cutting the skin of neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Brain Slice Mold</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>400 g</td>
			<td>For standard, uniform cutting of brain tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus</td>
			<td>Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>ZH-300B</td>
			<td>To test the sensorimotor function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anaesthesia Machine</td>
			<td>Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>ABM3000</td>
			<td>A gas anesthetic machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Thermostat</td>
			<td>Beijing Damida Technology Co., Ltd.</td>
			<td>DM.7-YLS-20A</td>
			<td>To maintain animal body temperature constant during operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical device Co., Ltd.</td>
			<td>16 cm</td>
			<td>Using for decapitate and brain removing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td>Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>4-0 / 5-0</td>
			<td>Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thread Bolt</td>
			<td>Beijing Cinontech Co. Ltd.</td>
			<td>2636/2838/3040/3043-A4</td>
			<td>Blockage of the middle cerebral artery in rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>LOT#BCBP3272V</td>
			<td>Brain section staining reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a preclinical model to assess brain recovery after acute stroke in rats

Bu çalışmanın amacı, kurtarma ve sekel aşamalarında bir hayvan beyin iskemi modeli kurmak ve doğrulamak oldu. Erkek Sprague-Dawley sıçanlarında orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu (MCAO/R) modeli seçildi. Farenin ağırlığını (260−330 g) değiştirerek, iplik cıvata tipi (2636/2838/3040/3043) ve beyin enfarktüs süresi (2-3 saat), longa skoru, daha büyük bir enfarkt hacmi ve daha büyük bir model başarı oranı Longa skoru ve TTC boyama kullanılarak tarandı. Optimum model durumu (300 g, 3040 iplik cıvata, 3 saat beyin enfarktüs süresi) duyusal motor fonksiyonları ve enfarktüs hacmi nin değerlendirilmesi ile reperfüzyon sonrası 1-90 günlük bir gözlem döneminde elde edilmiş ve kullanılmıştır. Bu koşullarda, ikili asimetri testi 1 ile 90 gün arasında önemli bir fark vardı ve ızgara yürüyüş testi 1 ila 60 gün arasında önemli bir fark vardı; her iki fark uygun bir sensorimotor fonksiyonel test olabilir. Böylece, beyin iskemi kurtarma ve sekel aşamalarında yeni bir sıçan modelinin en uygun durumu bulundu: 3 h beyin enfarktüs için 3040 iplik cıvata ile MCAO yapıldı 300 g sıçanlar ve daha sonra reperfüzyon. Uygun sensorimotor fonksiyonel testler ikili asimetri testi ve ızgara yürüyüş testi idi.

Longa skoru ve TTC boyama, ortalama ağırlık (275/300/320 g), cıvata tipleri (2636/2838/3040/3043) farklı tedaviler ile bir MCAO / R modeli için yukarıda belirtilen prosedürü kullanarak; Tablo 1) sıçanlarda optimal beyin iskemi modelinin taranması için iskemik (2-3 saat) ve 1 gün reperfüzyon kullanılmıştır. 300 g ağırlık, 3040 iplik cıvata ve 3 saat beyin enfarktüs süresi model parametreleri en büyük serebral enfarktüs, en yüksek Longa skoru ve...

Watch this Scientific Journal Video about A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats at JoVE.com

A Preclinical Model to Assess Brain Recovery After Acute Stroke in Rats

Bu çalışmanın amacı, 1-90 sonrası orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu (MCAO/R) sonrası beyin enfarktüsü ve sensorimotor fonksiyonunu test ederek beyin iskemisinin iyileşme ve sekel evrelerinde araştırma için bir hayvan modeli oluşturmak ve doğrulamaktır. farelerde gün.

Sıçanlarda Akut İnme Sonrası Beyin İyileşmesini Değerlendiren Bir Preklinik Model

The purpose of this study was to establish and validate an animal brain ischemia model in the recovery and sequela stages. A middle cerebral artery ...

Bu çalışma, beyin iskemisinin iyileşmesini ve sekeli evrelerini araştırmak için yerleşik bir hayvan modeli kullanmaktadır. Bu tekniğin başlıca avantajları istikrarlı, güvenilir ve nispeten basit olmasıdır. Bir cerrahi sabitleme masasına anestezili bir sıçan yerleştirerek başlayın.Ameliyat boyunca, küçük bir hayvan termostatında 37 santigrat derecede sıçanın vücut ısısını koruyun. Anestezi makinesi maskesi ağız bağlayın ve ekstremite gerginlik, kornea refleksleri ve ağrı eksikliği ile derin anestezi onaylamak. Kağıt bandajlar kullanarak farenin uzuvlarını ameliyat masasına sabitle.Elektrikli tıraş ile boyun katını çıkarın ve boynu %75 alkolle sterilize edin. Boynun merkezi uzunlamasına şekli boyunca 2-3 santimetre kesmek için oftalmik makas kullanın. Ve sonra oftalmik büşonlar ile, deri altı kas ayırın.Tamamen görme alanı ortaya çıkarmak için ev yapımı retraktör kullanın. Tüm sağkalım cerrahisi için uygun aseptik tekniğin sunulması için özen sağlanmalıdır. Videoda daha sonra gösterilen teknik tüm yordam boyunca uygulanmalıdır.Ortak karotis arter izole etmek için mikro forceps kullanın, dış karotis arter ve internal karotis arter. Mikroskop altında çalışmak, 8-0 kullanın sert düğüm ile ortak karotis arter ligate için dikişler, sert düğüm ile kalp ucundan uzak dış karotid arter, gevşek düğüm ile iç karotis arter ve daha sonra kalp ucuna yakın dış karotid arter hattı. Mikro makas kullanarak, dış karotis arter küçük bir açıklık kesmek ve yavaşça bir iplik cıvata takın.İnce ve gevşek düğüm ve dış karotis arter kesilmiş dış karotis arter dikiş ligate. Internal karotis arter gevşek düğüm gevşetin ve orta serebral arter ucuta ile işaretlenmiş başına iplik cıvata eklemeye devam ve maruz iplik cıvata kesti. Iskemik zaman iki ila üç saat sonra ulaşıldıktan sonra, mikro forceps kullanarak dış karotis arter kırığı düzeltmek ve yavaşça başka bir mikro forceps ile iplik cıvata çekin.İplik cıvatasının ön ucunu internal karotis arterden tamamen çektikten sonra, 8-0 ile kaplı olan dış karotis arteri sıvılaştırmak dikiş ve sonra iplik cıvata tamamen çıkarın. Ortak karotis arter gevşetilmesinden sonra, enfeksiyon önlemek için yara yüzeyinde penisilin sodyum tozu yaklaşık 50, 000 adet dab. Deri altı kasları ve cildi dikmek için dört dikiş kullanın.Fareyi kafese geri yerleştirdikten sonra, ameliyat sonrası dehidratasyondan korunmak için fareye yaklaşık 0,2 mililitre su vermek için bir mililitrelik şırınga kullanın. TTC boyama veya duyusal motor çalışmaları için en uzun skora göre hayvanları seçin. 30 dakika eksi 20 santigrat derece ttc boyama için izole beyin kuluçka sonra, önceden soğutulmuş sıçan beyin dilim kalıp yerleştirin.Önceden soğutulmuş bir bıçak kullanarak, beyni arka arkaya altı tane iki milimetre kalınlığında kes. Altı kuyulu bir kültür plakasında %2 TTC ile kesitleri lekeleyin ve sallayarak 37 derecede 30 ila 60 dakika kuluçkaya yatırın. Her 10 dakikada bir, beyin iskemi ve etkilenmemiş alanlar gözle görülür beyaz ve kırmızı olana kadar bölümleri çevirin.Her satırın toplam uzunluğu aynı olduğundan emin olmak ve fotoğraf çekmek için bir cetvel kullanarak beynin arkasından öne doğru sırayla siyah karton üzerinde dikey beyin dilimleri hattı. Fotoğrafı al ve beyin dilimlerini seç. Arka plan rengini doldurmak için siyah ön plan ve Alt Delete yazın ve ardından seçip dolmasını denetlemek için D'yi denetle'yi seçin.Son olarak, görüntüyü masaüstüne kaydedin. Enfarktüs hacmini analiz etmek için önce yazılımı açın ve fotoğrafı içe aktarın. Değişikliği hata yapmak için, arka planın siyah olması için kontrast geliştirme aracıyla parlaklığı ayarlayın.Filtrede, vurguları kaldırmak için ortanca aracı kullanın. Sol normal beyin alanını hesaplamak için, segmentasyon kullanarak renk seçin ve siyah arka plan dan beyin dilimleri ayırmak için H, S ve Ben değerini ayarlayın. Boyutu saymak için geri dönün ve sayım'a tıklayın.Beyni otomatik olarak sol ve sağ beyin alanlarını ayırt edecek orta hattan ayırmak için düzendeki bölünmüş nesneleri tıklatın. Sağ enfarktüs beyin alanını hesaplamak için görüntüyü içe aktarın, arka planı ayarlayın ve daha önce yapıldığı gibi vurguları kaldırın. Sayım boyutunu seçin ve düzenlemede birleştirme nesneleri aracını birleştir'e tıklayın.Iskemik alanı el ile seçin ve iskemik alanı hesaplamak için saymayı tıklatın. Doğru sağlıklı beyin alanını hesaplamak için, önce görüntüyü aktarın, arka planı ayarlayın ve daha önce yapılan vurguları kaldırın. Segmentasyon kullanarak renk seçin ve siyah arka plan sağlıklı beyin dilimleri ayırmak için H, S ve Ben değerini ayarlayın.Boyutu saymak için geri dönün ve bu alanı hesaplamak için sayım'ı tıklatın. Beyni otomatik olarak sol ve sağ beyin alanlarını ayırt edecek orta hattan ayırmak için düzendeki bölünmüş nesneleri tıklatın. Duyusal motor çalışmalar ve ikili assymetry testi için seçilen sıçanları alın ve eşit basınç kullanarak her bir ön pençenin safenöz kısmına kağıt bant sarın.Her sıçan için, her bir ön pençe kontağını kaç kez kameraya kaydedin ve etkilenmemiş ve etkilenen pençe süreleri de dahil olmak üzere beş dakika içinde bandı kaldırır. 30 dakika sonra sarma ve kaydı tekrarlayın ve sonra değerleri hesaplayın. Izgara yürüyüş testi için, 2,5 santimetre kare açıklıklar ile yüksek bir ızgara yüzey platformunun ortasına sıçan yerleştirin.Farenin kalçalarını hafifçe itin ve yüzeyde hareket etmesini teşvik edin. Kamerayı kullanarak, sağ dan etkilenmemiş ve sol etkilenen uzuvların yaptığı ayak hatalarının sayısını ve toplam adım numarasını kamerayla bir dakikada kaydedin. Rotor çubuk testi için, destek leyici yazılımı kullanarak beş dakikalık bir süre içinde fare döner çubuk yorulma cihazını beş dakikalık bir süre içinde 13 RPM hıza ayarlayın.Bilgisayar programını başlatın ve aynı anda rotor çubuk halkaları üzerinde sıçan yerleştirin. Fare halkadan düşerse veya beş dakika sonra denemeyi sonlandırın ve dönen süreyi kaydedin. Fareyi 30 dakika dinlenmeye bırakın, testi iki kez daha tekrarlayın ve son dönen zaman olarak maksimum değeri seçin.Halat testi kaldırmak için kaldırma halatı aletini bir masaya yerleştirin. Farenin ipi ön ayaklarıyla tutup asmasına izin versin. Asılı kalma süresini kaydedin ve puanları hesaplayın.Orta serebral arter oklüzyonu ve reperfüzyonu ile indüklenen beyin iskemik hasarı incelendiğinde, 300 gram ağırlık 3040 iplik cıvata ve üç saatlik beyin enfarktüsü süresi en büyük serebral enfarktüs, en yüksek en yüksek skor ve en büyük model başarı oranı ile en uygun olduğu kanıtlanmıştır. Bu önemli ölçüde 275 gram ağırlık, 2636 iplik cıvata ve iki saatlik beyin enfarktüs süresi konvansiyonel tedavi ile karşılaştırıldığında geliştirilmiştir. Beyin iskemisinin iyileşme durumunu incelemek için TTC boyama yapıldı ve orta serebral arter oklüzyonu ve reperfüzyonu sonrası ilk gün %23.4, 35.günde %19.6, 60.günde %16.1 ve 90.'da %15.7 enfarktüs ve küçültme hacmi saptandı.Orta serebral arter oklüzyonu ve reperfüzyonu bir gün sonra, bilateral assymetri testinde duyusal motor sapma, ızgara yürüme testinde ızgara yürüme hata süreleri ve kaldırma iptestinde kaldırma ipi skoru artarken, rotor çubuk testinde rotor çubuk süresi akut beyin iskemisinin incelenmesinde bu testlerin önemini gösteren azalmıştır. Sadece duyusal motor sapma orta serebral arter oklüzyonu ve reperfüzyon 35, 60 ve 90 gün sonra zamana bağlı bir şekilde büyük fonksiyonel bozukluklar muhafaza. Izgara yürüyüş testi için, 35 ve 60 gün boyunca ızgara yürüme hata süreleri önemli farklılıklar vardı.Bu sonuçlar, bu iki testin sıçanlarda iyileşmeyi test etmek için uygun olabileceğini göstermiştir. Başarıyı sağlamak için, eylem nazik olmalı ve işlem kararlı olmalıdır. Yürüyüş algılama gibi diğer davranışsal testler de bu model için uygun olabilir.Bu modelin geliştirilmesi araştırmacılar ın iyileşme ve sekel aşamalarında beyin iskemi keşfetmek için önünü açabilir.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

Periferik Sinir Hasarı Sonrası Fonksiyonel Kurtarma Değerlendirmesinde Koku Ensheathing Hücre Nakli

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

En iyi duruma getirilmiş bir Nkullanarak akut beyin dilimleri hazırlanması-metil-D-glucamine koruyucu kurtarma yöntemi

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Utilizing 3D Printing Technology to Merge MRI with Histology: A Protocol for Brain Sectioning

3D Baskı Teknolojisini kullanan Histoloji ile MRG Birleştirme: Beyin için Protokol Kesit

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Kısmi optik sinir transeksiyon Sıçanlarda: ikincil dejenerasyonu retina Ganglion hücrelerinin değerlendirmek için yeni bir operatif yaklaşım ile kurulan bir Model

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

Kan - beyin bariyerini bozulma iskemik inme, bir fare modeli Vivo içinde değerlendirilmesi

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

A Fibrin-Enriched and tPA-Sensitive Photothrombotic Stroke Model

Fibrin ile zenginleştirilmiş ve tPA'ya duyarlı fototrombotik inme modeli

An ideal thromboembolic stroke model requires certain properties, including relatively simple surgical procedures with low mortality, a consistent ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

EcoHIV Beyin Enfeksiyonunun Bir Sıçan Modeli

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Motor Dual-Tasks for Gait Analysis and Evaluation in Post-Stroke Patients

İnme sonrası hastalarda yürüme analizi ve değerlendirmesi için motor ikili görevler

Eighteen stroke patients were recruited for this study involving the evaluation of cognition and walking ability and multitask gait analysis. Multitask ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Preklinik Bir Baş Ağrısı Modeli Olarak Farelerde Dural Stimülasyon ve Periorbital von Frey Testi

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

Farelerde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Kaynaklı İnme Sonrası Ensefalomiyosinanjiyoz Tedavisi İçin Bir Model

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...