Name: an intestine/liver microphysiological system for drug pharmacokinetic and toxicological assessment
Uploaded: 2020-12-03T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Intestine/Liver Microphysiological System for Drug Pharmacokinetic and Toxicological Assessment at JoVE.com

نشكر الدكتور كريستي غوجين- غيلوزو، والدكتور فيليب جريبون في الوحدة 522 INSERM، والدكتور كريستيان تريبو في الوحدة 271 INSERM لاستخدام المواد البيولوجية (خلايا هيبا RG) وإتاحتها لنا من أجل إجراء البحث الأكاديمي.

1. إنتاج مكافئات الأنسجة للزراعة في 2-OC
<ol><li>إنتاج مكافئ حاجز الأمعاء الدقيقة<ol>
<li>الحفاظ على خلايا Caco-2 وHT-29 باستخدام الأمعاء ما يعادل المتوسطة: DMEM تكمل مع 10٪ FBS، 1٪ البنسلين وstreptomycin، و 1٪ غير الضرورية الأحماض الأمينية، والتي سميت باسم "DMEM S" في هذه المخطوطة.</li>
		<li>إزالة المتوسطة، وغسل مرتين مع...

<ol>
	<li>Zhang, D., Luo, G., Ding, X., Lu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+experimental+models+of+drug+metabolism+and+disposition+in+drug+discovery+and+development.">Preclinical experimental models of drug metabolism and disposition in drug discovery and development.</a> Acta Pharmaceutica Sinica B. 2 (6), 549-561 (2012).</li><li>Hynds, R. E., Giangreco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relevance+of+human+stem+cell-derived+organoid+models+for+epithelial+translational+medicine.">The relevance of human stem cell-derived organoid models for epithelial translational medicine.</a> Stem Cells. 31 (3), 417-422 (2013).</li><li>Sivaraman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Microscale+In+vitro+Physiological+Model+of+the+Liver:+Predictive+Screens+for+Drug+Metabolism+and+Enzyme+Induction.">A Microscale In vitro Physiological Model of the Liver: Predictive Screens for Drug Metabolism and Enzyme Induction.</a> Current Drug Metabolism. 6 (6), 569-591 (2005).</li><li>Dehne, E. M., Hasenberg, T., Marx, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ascendance+of+microphysiological+systems+to+solve+the+drug+testing+dilemma.">The ascendance of microphysiological systems to solve the drug testing dilemma.</a> Future Science OA. 3 (2), 185 (2017).</li><li>Oleaga, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-Organ+toxicity+demonstration+in+a+functional+human+in+vitro+system+composed+of+four+organs.">Multi-Organ toxicity demonstration in a functional human in vitro system composed of four organs.</a> Scientific Reports. 6, 20030 (2016).</li><li>Maschmeyer, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+four-organ-chip+for+interconnected+long-term+co-culture+of+human+intestine,+liver,+skin+and+kidney+equivalents.">A four-organ-chip for interconnected long-term co-culture of human intestine, liver, skin and kidney equivalents.</a> Lab Chip. 15 (12), 2688-2699 (2015).</li><li>Esch, M. B., Mahler, G. J., Stokol, T., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body-on-a-chip+simulation+with+gastrointestinal+tract+and+liver+tissues+suggests+that+ingested+nanoparticles+have+the+potential+to+cause+liver+injury.">Body-on-a-chip simulation with gastrointestinal tract and liver tissues suggests that ingested nanoparticles have the potential to cause liver injury.</a> Lab Chip. 14 (16), 3081-3092 (2014).</li><li>Materne, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Multi-organ+Chip+-+A+Microfluidic+Platform+for+Long-term+Multi-tissue+Coculture.">The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture.</a> Journal of Visualized Experiments. , e52526 (2015).</li><li>Esch, M. B., Ueno, H., Applegate, D. R., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular,+pumpless+body-on-a-chip+platform+for+the+co-culture+of+GI+tract+epithelium+and+3D+primary+liver+tissue.">Modular, pumpless body-on-a-chip platform for the co-culture of GI tract epithelium and 3D primary liver tissue.</a> Lab Chip. 16 (14), 2719-2729 (2016).</li><li>Sung, J. H., Kam, C., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microfluidic+device+for+a+pharmacokinetic&#8211;pharmacodynamic+(PK-PD)+model+on+a+chip.">A microfluidic device for a pharmacokinetic&#8211;pharmacodynamic (PK-PD) model on a chip.</a> Lab on a Chip. 10 (4), 446-455 (2010).</li><li>Viravaidya, K., Sin, A., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+Microscale+Cell+Culture+Analog+to+Probe+Naphthalene+Toxicity.">Development of a Microscale Cell Culture Analog to Probe Naphthalene Toxicity.</a> Biotechnology Progress. 20 (1), 316-323 (2004).</li><li>Sin, A., Chin, K. C., Jamil, M. F., Kostov, Y., Rao, G., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Design+and+Fabrication+of+Three-Chamber+Microscale+Cell+Culture+Analog+Devices+with+Integrated+Dissolved+Oxygen+Sensors.">The Design and Fabrication of Three-Chamber Microscale Cell Culture Analog Devices with Integrated Dissolved Oxygen Sensors.</a> Biotechnology Progress. 20 (1), 338-345 (2004).</li><li>Tsamandouras, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+Gut+and+Liver+Microphysiological+Systems+for+Quantitative+In+vitro+Pharmacokinetic+Studies.">Integrated Gut and Liver Microphysiological Systems for Quantitative In vitro Pharmacokinetic Studies.</a> The AAPS Journal. 19 (5), 1499-1512 (2017).</li><li>Graham, G. G., Davies, M. J., Day, R. O., Mohamudally, A., Scott, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+modern+pharmacology+of+paracetamol:+Therapeutic+actions,+mechanism+of+action,+metabolism,+toxicity+and+recent+pharmacological+findings.">The modern pharmacology of paracetamol: Therapeutic actions, mechanism of action, metabolism, toxicity and recent pharmacological findings.</a> Inflammopharmacology. 21 (3), 201-232 (2013).</li><li>Hodgman, M. J., Garrard, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Review+of+Acetaminophen+Poisoning.">A Review of Acetaminophen Poisoning.</a> Critical Care Clinics. 28 (4), 499-516 (2012).</li><li>Maschmeyer, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chip-based+human+liver-intestine+and+liver-skin+co-cultures+-+A+first+step+toward+systemic+repeated+dose+substance+testing+in+vitro.">Chip-based human liver-intestine and liver-skin co-cultures - A first step toward systemic repeated dose substance testing in vitro.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 95, 77-87 (2015).</li><li>Bessems, J. G. M., Vermeulen, N. P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paracetamol+(acetaminophen)-induced+toxicity:+Molecular+and+biochemical+mechanisms,+analogues+and+protective+approaches.">Paracetamol (acetaminophen)-induced toxicity: Molecular and biochemical mechanisms, analogues and protective approaches.</a> Critical Reviews in Toxicology. 31 (1), 55-138 (2001).</li><li>Hirt, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+afterload+induces+pathological+cardiac+hypertrophy:+A+new+in+vitro+model.">Increased afterload induces pathological cardiac hypertrophy: A new in vitro model.</a> Basic Research in Cardiology. 107 (6), 307 (2012).</li><li>Fink, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+stretch+of+engineered+heart+tissue+induces+hypertrophy+and+functional+improvement.">Chronic stretch of engineered heart tissue induces hypertrophy and functional improvement.</a> The FASEB journal official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 14 (5), 669-679 (2000).</li><li>Zhang, B., Peticone, C., Murthy, S. K., Radisic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standalone+perfusion+platform+for+drug+testing+and+target+validation+in+micro-vessel+networks.">A standalone perfusion platform for drug testing and target validation in micro-vessel networks.</a> Biomicrofluidics. 7 (4), 044125 (2013).</li><li>Ara&#250;jo, F., Sarmento, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+the+characterization+of+an+in+vitro+triple+co-culture+intestine+cell+model+for+permeability+studies.">Towards the characterization of an in vitro triple co-culture intestine cell model for permeability studies.</a> International Journal of Pharmaceutics. 458 (1), 128-134 (2013).</li><li>Cadena-Herrera, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+three+viable-cell+counting+methods:+Manual,+semi-automated,+and+automated.">Validation of three viable-cell counting methods: Manual, semi-automated, and automated.</a> Biotechnology Reports. 7, 9-16 (2015).</li><li>Gripon, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+of+a+human+hepatoma+cell+line+by+hepatitis+B+virus.">Infection of a human hepatoma cell line by hepatitis B virus.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99 (24), 15655-15660 (2002).</li><li>Guillouzo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+hepatoma+HepaRG+cells:+A+highly+differentiated+model+for+studies+of+liver+metabolism+and+toxicity+of+xenobiotics.">The human hepatoma HepaRG cells: A highly differentiated model for studies of liver metabolism and toxicity of xenobiotics.</a> Chemico-Biological Interactions. 168 (1), 66-73 (2007).</li><li>Wagner, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dynamic+multi-organ-chip+for+long-term+cultivation+and+substance+testing+proven+by+3D+human+liver+and+skin+tissue+co-culture.">A dynamic multi-organ-chip for long-term cultivation and substance testing proven by 3D human liver and skin tissue co-culture.</a> Lab on a Chip. 13 (18), 3538-3547 (2013).</li><li>Forrest, J. A. H., Clements, J. A., Prescott, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Pharmacokinetics+of+Paracetamol.">Clinical Pharmacokinetics of Paracetamol.</a> Clinical Pharmacokinetics. 7 (2), 93-107 (1982).</li><li>Dollery, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Therapeutic Drugs. , (1999).</li><li>Shah, V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioanalytical+method+validation-a+revisit+with+a+decade+of+progress.">Bioanalytical method validation-a revisit with a decade of progress.</a> Pharmaceutical research. 17 (12), 1551-1557 (2000).</li><li>Marin, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shp2+negatively+regulates+growth+in+cardiomyocytes+by+controlling+focal+adhesion+kinase/src+and+mTOR+pathways.">Shp2 negatively regulates growth in cardiomyocytes by controlling focal adhesion kinase/src and mTOR pathways.</a> Circulation Research. 103 (8), 813-824 (2008).</li><li>Linkert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metadata+matters:+Access+to+image+data+in+the+real+world.">Metadata matters: Access to image data in the real world.</a> Journal of Cell Biology. 189 (5), 777-782 (2010).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OECD+TG+491+-+Short+Time+Exposure+In+vitro+Test+Method+for+Identifying+i)+Chemicals+Inducing+Serious+Eye+Damage+and+ii)+Chemicals+Not+Requiring+Classification+for+Eye+Irritation+or+Serious+Eye+Damage.">OECD TG 491 - Short Time Exposure In vitro Test Method for Identifying i) Chemicals Inducing Serious Eye Damage and ii) Chemicals Not Requiring Classification for Eye Irritation or Serious Eye Damage.</a> OECD. 14, (2018).</li><li>Fernandes, M. B., Gon&#231;alves, J. E., Tavares, L. C., Storpirtis, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caco-2+cells+permeability+evaluation+of+nifuroxazide+derivatives+with+potential+activity+against+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+(MRSA).">Caco-2 cells permeability evaluation of nifuroxazide derivatives with potential activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA).</a> Drug Development and Industrial Pharmacy. 41 (7), 1066-1072 (2015).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OECD+TG+492+-+Reconstructed+human+Cornea-like+Epithelium+(RhCE)+test+method+for+identifying+chemicals+not+requiring+classification+and+labelling+for+eye+irritation+or+serious+eye+damage.">OECD TG 492 - Reconstructed human Cornea-like Epithelium (RhCE) test method for identifying chemicals not requiring classification and labelling for eye irritation or serious eye damage.</a> OECD. 35, (2018).</li><li>OECD, O. E. C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OECD+TG+431+-+In+vitro+skin+corrosion:+reconstructed+human+epidermis+(RHE)+test+method.">OECD TG 431 - In vitro skin corrosion: reconstructed human epidermis (RHE) test method.</a> OECD. 8, (2016).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OECD+TG+439+-+In+vitro+Skin+Irritation:+Reconstructed+Human+Epidermis+Test+Method.">OECD TG 439 - In vitro Skin Irritation: Reconstructed Human Epidermis Test Method.</a> OECD. 21, (2015).</li><li>Marin, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetaminophen+absorption+and+metabolism+in+an+intestine/liver+microphysiological+system.">Acetaminophen absorption and metabolism in an intestine/liver microphysiological system.</a> Chemico-Biological Interactions. 299, 59-76 (2019).</li><li>Maass, C., Stokes, C. L., Griffith, L. G., Cirit, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-functional+scaling+methodology+for+translational+pharmacokinetic+and+pharmacodynamic+applications+using+integrated+microphysiological+systems+(MPS).">Multi-functional scaling methodology for translational pharmacokinetic and pharmacodynamic applications using integrated microphysiological systems (MPS).</a> Integrative Biology (United Kingdom). 9 (4), 290-302 (2017).</li><li>Sung, J. H., Wang, Y., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+using+mathematical+modeling+approaches+to+design+and+interpret+multi-organ+microphysiological+systems+(MPS).">Strategies for using mathematical modeling approaches to design and interpret multi-organ microphysiological systems (MPS).</a> APL Bioengineering. 3 (2), 021501 (2019).</li></ol>

إن التقييم الدقيق والموثوق للخصائص الدوائية للأدوية الجديدة التحقيقية أمر بالغ الأهمية للحد من المخاطر في خطوات التطوير التالية. MPS هي تقنية جديدة نسبيا ، التي تهدف إلى تحسين القدرة التنبؤية وتقليل التكاليف والوقت الذي يقضيه مع الاختبارات قبل الإكلينيكية. وتتقدم مجموعتنا في تقييم الخصا?...

ونظراً للاختلافات الجينية والبروتيومية، فإن النماذج الحيوانية لها قيمة تنبؤية محدودة بالنسبة لعدة نتائج بشرية. وعلاوة على ذلك، فهي تستغرق وقتا طويلا، ومكلفة ومشكوك فيها أخلاقيا1. MPS هي تقنية جديدة نسبيا تهدف إلى تحسين القدرة التنبؤية وتقليل التكاليف والوقت الذي يقضيه مع الاختبارات قبل السريرية. فهي الأجهزة microfluidic زراعة organoids (المحاكاة الاصطناعية وحدات وظيفية من الأجهزة) في ظل تدفق وسائل الإعلام التي تعزز الاتصالات organoid organoid. Organoids مصنوعة من الخلايا البشرية زيادة صلة الترجمة2،3،4. ومن المتوقع أن MPS لأداء أفضل من الاختبارات الحيوانية لأنها بشرية وراثيا وتكخيص التفاعل بين الأنسجة. عندما تعمل بكامل طاقتها، فإن MPS تقديم نتائج أكثر وضوحا، في سرعة أعلى وأقل التكاليف والمخاطر4. العديد من المجموعات النامية MPS لعدة أغراض, وخاصة نماذج المرض لاختبار فعالية المخدرات.
مستوى التعرض هو واحد من أهم المعلمات لتقييم فعالية الدواء وسميته5،6،7،8،9،10،11،12. MPS يسمح التكامل العضوي الذي يحاكي التعرض النظامي ومن المتوقع أن يكون أداؤه أفضل من ثقافة الأنسجة البشرية التقليدية 2D. هذه التكنولوجيا يمكن أن تحسن بشكل كبير التنبؤ بالمجمع امتصاص الأمعاء والكبد الأيض4.
و MPS دمج نموذج معادل الإنسان من الأمعاء والكبد هو نقطة انطلاق جيدة، معتبرا الدور المركزي لهذين الجهازين في التوافر البيولوجي للأدوية والتعرض الجهازي13,14,15. APAP هو دواء جذاب لدراسة MPS دون مكافئ الكلى لأن استقلابه يتم بشكل رئيسي من قبل الكبد16,17.
و2-OC هو جهاز microfluidic من غرفتين مناسبة لثقافة اثنين من الأنسجة البشرية المختلفة المكافئة / organoids مترابطة بواسطة microchannels16. من أجل محاكاة في المختبر البشري عن طريق الفم / الحقن الوريدي من المخدرات وتقييم آثار عبر الحديث بين الأمعاء والكبد مكافئات على المستحضرات الدوائية APAP، إلى جانب وظيفة organoids ومقومات البقاء، تم تنفيذ ثلاثة جمعيات MPS مختلفة: (1) "الأمعاء 2-OC MPS" تتألف من الأمعاء مكافئ يستند في إدراج ثقافة تحتوي على Caco-2 + HT-29 الخلايا coculture، دمجها في الجهاز 2-OC. (2) "الكبد 2-OC MPS" تتألف من spheroids الكبد مصنوعة من HepaRG + HHSteC (خلايا هيبيت الكبدية الإنسان) متكاملة في الجهاز 2-OC؛ و (3) "الأمعاء / الكبد 2-OC MPS" تتألف من ما يعادل الأمعاء في مقصورة جهاز واحد التواصل مع مكافئ الكبد في الآخر من خلال تدفق وسائل الإعلام من خلال القنوات microfluidic.
تم إجراء جميع المقايسات تحت ثابت (لا تدفق) وديناميكية (مع تدفق) الشروط بسبب تأثير المحفزات الميكانيكية (ضغط، وتمتد، والتشيد) على الخلية قابلية البقاء والوظائف18،19،20. هذه المادة يصف بروتوكول لAP البصرية عن طريق الفم / الحقن وتقليد الإدارة والامتصاص / الأيض والتحليلات السمية في 2 - OC MPS التي تحتوي على الأمعاء البشرية والكبد ما يعادل نماذج.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1x DPBS</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>14190235</td>
			<td>No calcium, no magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-OC</td>
			<td>TissUse GmbH</td>
			<td></td>
			<td>Two-organ chip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384-well Spheroid Microplate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3830</td>
			<td>Black/Clear, Round Bottom, Ultra-Low Attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% Paraformaldehyde</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Use to fix cell</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetaminophen</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A7085</td>
			<td>Use to MPS assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Tedia</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HPLC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 phalloidin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>confocal experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HPLC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caco-2 cells</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>86010202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cacodylate buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal Fluorescence microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DMI6000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM1950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM high glucose</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12800017</td>
			<td>Add supplements: 10% fetal bovine serum, 100 units per mL penicillin, 100 &#181;g/mL streptomycin, and 1% non-essential amino acids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D4540</td>
			<td>Add 2% to HepaRG media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Synth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12657029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezing medium OCT</td>
			<td>Tissue-Tek</td>
			<td></td>
			<td>Tissue-Tek&#174; O.C.T.&#8482; Compound is a formulation of watersoluble glycols and resins, providing a convenient specimen matrix for cryostat sectioning at temperatures of -10&#176;C and below.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin &#38; Eosin</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HepaRG cells</td>
			<td>Biopredic International</td>
			<td>HPR101</td>
			<td>Undifferentiated cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HHSTeC</td>
			<td>ScienCell Research Laboratories</td>
			<td>5300</td>
			<td>Cells and all culture supplements</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HCA experiments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HT-29 cells</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>85061109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Insulin</td>
			<td>Invitrogen - Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12585014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H0888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Merck</td>
			<td>278475</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Karnovsky&#8217;s fixative</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A2916801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luna C18 guard column SS</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HPLC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DMi4000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>RM2245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millicell 0.4 &#181;m pore size inserts</td>
			<td>Merck</td>
			<td>PIHP01250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millicell ERS-2 meter</td>
			<td>Merck</td>
			<td>MERS00002</td>
			<td>Used to TEER measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MitoTracker Deep Red</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HCA experiments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>M6494</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX3000P system</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neubauer chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Counting cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operetta High Content Imaging System</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P450-Glo CYP3A4 Assay with Luciferin-IPA</td>
			<td>Promega</td>
			<td>Cat.# V9001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15070063</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permount</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Histology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>RT-qPCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVDF membrane</td>
			<td>BioRad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVDF Syringe filter</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>0.22 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reversed-phase Luna C18 column</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HPLC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker (IKA VXR Basic Vibrax)</td>
			<td>IKA Works GmbH &#38; Co</td>
			<td>2819000</td>
			<td>Used for spheroids to improve MTT assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stellate Cell Media (STeC CM)</td>
			<td>ScienCell</td>
			<td>5301</td>
			<td>Add STeC CM supplements</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScriptIITM Reverse Transcriptase</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR Green PCR Master Mix</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRizol TM reagent</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Trizol is a monophasic solution of phenol and guanidine isothiocyanate.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA solution</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>R001100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-low-attachment plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS3471-24EA</td>
			<td>6 wells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectashield plus DAPI mounting media</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White Opaque 96-well Microplate</td>
			<td>PerkinHelmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wide-bore tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Williams E</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-29510</td>
			<td>Add supplements: 10% fetal bovine serum, 2 mM L-glutamine, 100 units per ml penicillin, 100 &#181;g/mL streptomycin and 5 &#181;g/mL human insulin</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intestine/liver microphysiological system for drug pharmacokinetic and toxicological assessment

ومن المتوقع أن يكون أداء النظم الدقيقة الفيزيولوجية التي أدخلت مؤخراً التي تزرع العضيات البشرية أفضل من أداء الحيوانات في مرحلة الاختبارات قبل الفحصي لعملية تطوير المخدرات لأنها بشرية وراثياً وتختبأ التفاعل بين الأنسجة. في هذه الدراسة، تم دمج حاجز الأمعاء البشرية (التي تحاكيها ثقافة شارك في زراعة الخلايا كاكو-2 وHT-29) والكبد المكافئ (التي تحاكيها spheroids مصنوعة من خلايا هيباتج متمايزة وخلايا نجمية الكبدية البشرية) في جهاز microfluidic لرقاقة جهازين (2-OC) لتقييم بعض الأسيتامينوفين (APAP) الدوائية (PK) والخصائص السامة. وكان MPS ثلاث جمعيات: الأمعاء فقط 2-OC، الكبد فقط 2-OC، والأمعاء / الكبد 2-OC مع نفس وسائل الإعلام تضخ كلا organoids. بالنسبة لتقييمات PK، قمنا بسد APAP في وسائل الإعلام في نقاط زمنية محددة مسبقاً بعد إدارتها إما فوق الحاجز المعوي (محاكاة الطريق الفموي) أو في وسائل الإعلام (محاكاة الطريق الوريدي)، عند 12 ميكرومتر و2 ميكرومتر على التوالي. تم تحليل عينات الوسائط من خلال عكس مرحلة اللونية السائلة عالية الضغط (HPLC). تم تحليل العضيات من أجل التعبير الجيني، وقيم TEER، للتعبير عن البروتين والنشاط، ثم تم جمعها، وإصلاحها، وتقديمها إلى مجموعة من التقييمات المورفولوجية. كان أداء تقنية MTT جيدًا في تقييم الجدوى العضوية ، ولكن التحليلات عالية المحتوى (HCA) تمكنت من اكتشاف أحداث سامة مبكرة جدًا استجابة لعلاج APAP. لقد تحققنا من أن تدفق الوسائط لا يؤثر بشكل كبير على امتصاص APAP في حين أنه يحسن بشكل كبير وظائف الكبد المكافئة. ويمكن محاكاة امتصاص الأمعاء البشرية APAP والتمثيل الغذائي الكبدي في MPS. إن الارتباط بين بيانات MPS وفي نمّجة السيليكو لديه إمكانات كبيرة لتحسين قابلية التنبؤ بالأساليب المختبرية وتوفير دقة أفضل من النماذج الحيوانية في الدراسات الدوائية السمية.

لإجراء اختبارات PK APAP في 2-OC MPS، فإن الخطوة الأولى هي تصنيع الأمعاء البشرية والكبد مكافئات (organoids). وهي مدمجة في جهاز microfluidic 2-OC(الشكل 1A)24 ساعة قبل البدء في اختبار PK APAP. في اليوم التالي، يتم تغيير الوسيط، ويتم عرض النموذج إلى APAP. يوضح الشكل 1 مكافئات الأمعاء والكب?...

Watch this Scientific Journal Video about An Intestine/Liver Microphysiological System for Drug Pharmacokinetic and Toxicological Assessment at JoVE.com

An Intestine/Liver Microphysiological System for Drug Pharmacokinetic and Toxicological Assessment

لقد كشفنا نظام microphysiological (MPS) مع الأمعاء والكبد organoids لاسيتامينوفين (APAP). توضح هذه المقالة طرق الإنتاج العضوي وتقييمات الملكية الدوائية والسمية APAP في MPS. كما يصف تحليل وظائف الأنسجة اللازمة للتحقق من صحة النتائج.

جهاز الأمعاء/الكبد الدقيق فيزيولوجيا لتقييم الأدوية الدوائية والسمية

The recently introduced microphysiological systems (MPS) cultivating human organoids are expected to perform better than animals in the preclinical tests ...

النظم الدقيقة الفيزيولوجية لديها القدرة على محاكاة الدوائية والاستجابة السمية من جسم الإنسان لعلاجات محددة من المصالح. النظم الدقيقة الفيزيولوجية لديها القدرة على استبدال الاختبارات الحيوانية حيث أن استخدامها يمكن أن يحسن القدرة التنبؤية للطرق في المختبر ويقلل من تكلفة ووقت الدراسات الدوائية والسمية. قبل 24 ساعة من إدارة المادة الاختبارية، تقسيم 800 ميكرولتر أليكوت من ويليام ES المتوسطة بين المقصورات الأكبر والأصغر من رقاقة الجهاز اثنين، وpirate المتوسطة القاعدية وapical من كل مكافئ حاجز معوي في لوحات البئر المعدة 24.باستخدام ملقط العقيمة، ودمج إدراج واحد لكل اثنين من الدائرة رقاقة الجهاز في المقصورة أكبر وإضافة 200 ميكرولترات من DMEMS إلى الجانب apical. باستخدام نصائح تحمل واسعة، ودمج 20 مكافئ الكبد لكل دائرة في المقصورة أصغر من رقاقة الجهاز اثنين وربط النظام إلى وحدة التحكم. ثم قم بتوصيل وحدة التحكم بمزود هواء مضغوط وقم بضبط الضغط على 300 بار تقريبًا بالإضافة إلى 300 وتواتر ضخ يبلغ 0.3 هيرتز.في اليوم التالي تمييع محلول أسيتامينوفين المخزون إلى تركيز 12 ميكرومولار. لتحل محل المتوسطة في النظام، التعرق وسائل الإعلام القاعدية وapical من حاجز المعوي ما يعادل في رقاقة الجهاز اثنين وإضافة 500 ميكرولترات من الثقافة الطازجة المتوسطة المناسبة في المقصورة الكبيرة في الجانب القاعدي العضوي و 300 ميكرولترات إلى المقصورة الصغيرة. بعد التحقق من وجود فقاعات، محاكاة الإدارة عن طريق الفم مع إضافة 200 ميكرولترات من 12 محلول الأسيتامينوفين الدقيقة على الجانب apical من الأمعاء تدرج ثقافة وربط الجهاز microphysiological إلى وحدة التحكم.جمع حجم إجمالي من الجانبين على حد سواء apical المعوية والبصلة، وكذلك من المقصورة الصغيرة في ثلاثية في النقاط الزمنية المشار إليها. عندما يتم جمع جميع العينات، قم بتعيين جميع المعلمات ذات الصلة لتحليل HPLC كما هو مبين في الجدول وتصفية المرحلة المتنقلة من خلال مرشح غشاء 0.4 ميكرون تحت فراغ. ثم تصفية العينات من خلال 0.22 ميكرون المسام حجم PVDF مرشح حقنة وتخزين العينات في قارورة قبل البدء في قياس الأشعة فوق البنفسجية HPLC.لتقييم الجدوى العضوية، نقل جميع 20 spheroids من كل تكرار إلى آبار فردية من لوحة 96 جيدا ونقل إدراج ثقافة الخلية إلى الآبار الفردية من لوحة 24 جيدا. غسل مكافئات الأنسجة ثلاث مرات مع DPBS الطازجة في غسل وإضافة 300 ميكرولتر من واحد ملليغرام لكل ملليلتر MTT حل لكل بئر التجريبية. بعد ثلاث ساعات حضانة في حاضنة ثقافة الخلية، استبدال حل MTT مع 200 ميكرولترات من ايزوبروبانول في البئر لاحتضان بين عشية وضحاها في أربع درجات مئوية لاستخراج هشطة MTT من الأمعاء والكبد مكافئات.في صباح اليوم التالي، نقل 200 ميكرولترات من كل ناظر إلى البئر المناسبة في لوحة 96 بئر وقراءة formazan على قارئ لوحة في 570 نانومتر للسماح بحساب القدرة النسبية للخلايا للحد من MTT باستخدام متوسط الكثافة البصرية لكل نقطة زمنية مقارنة مع التحكم السلبي. للتحليل الخلوي والهظري للعينات، أولاً إصلاح الأمعاء والكبد مكافئات في 4٪ شبهformaldehyde في 0.1 PBS المول لمدة 25 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. في نهاية الحضانة، وغسل organoids خمس مرات في برنامج تلفزيوني لمدة 10 دقائق لكل غسل، قبل تلطيخ الأمعاء والكبد مع tetramethylrhodamine isothiocyanate phalloidin اليكسا فلور 647 phalloidin لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة.في نهاية الحضانة، نقل العينات إلى تجميد المتوسطة لبضع دقائق قبل المفاجئة تجميد الأنسجة في النيتروجين السائل. بعد ذلك ، استخدم الكريسوستات للحصول على 10 إلى 12 ميكرون سميكة الكبد spheroid المقاطع الجليدية وتركيب أقسام الأنسجة في تصاعد المتوسطة مع DAPI للتصوير عن طريق المجهر الفلوروسية confocal. بالنسبة للميتوكوندريا والتلطيخ النووي، غطي العينات بالكامل بمحلول تلوين الميتوكوندريا لمدة 15 إلى 45 دقيقة في 37 درجة مئوية في جو مرطب مع 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.في نهاية الحضانة، بعناية استبدال حل تلطيخ مع 2 إلى 4٪ شبهformaldehyde في برنامج تلفزيوني لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. بعد إصلاح, بلطف شطف الخلايا مرتين مع برنامج تلفزيوني جديد لمدة خمس دقائق لكل غسل قبل وضع العلامات على العينات مع حمض نووي تلطيخ حل العمل لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. في نهاية الحضانة، وغسل العينات مع ثلاثة، خمس دقائق يغسل في برنامج تلفزيوني محمي من الضوء، واستخدام وصمة عار الحمض النووي لتسهيل الكم من عدد من وصمة عار الميتوكوندريا التعبير عن الخلايا على المجهر الفلورسنت مع مجموعات مرشح المناسبة.دمج حاجز الأمعاء البشرية والكبد ما يعادلها في جهاز microfluidic رقاقة الجهاز يسمح بتقييم الخصائص الدوائية والسمية من العلاجات ذات الاهتمام. بعد العلاج، يمكن تحليل عينات الوسائط من قبل HPLC. يمكن تحليل الأعضاء للتعبير الجيني، وقيم المقاومة الكهربائية عبر الظهارية، والتعبير البروتيني والنشاط، وكذلك لخصائصها المورفولوجية.يمكن إجراء تحليل MTT لتقييم قابلية الحياة للعضية، وكذلك للكشف عن الأحداث السامة المبكرة جدًا استجابةً لعلاج الأسيتامينوفين. لا يؤثر تدفق الوسائط بشكل كبير على امتصاص الأسيتامينوفين ، في حين أنه يحسن بشكل كبير وظائف مكافئة للكبد ، مما يشير إلى أن امتصاص الأسيتامينوفين المعوي البشري والتمثيل الغذائي الكبدي يمكن محاكاته في هذا النظام الفيزيولوجي الدقيق. 4- ويمكن للنظم الفيزيولوجية الدقيقة أن تحل محل النماذج الحيوانية في تطوير المخدرات واكتشافها لأنها تحاكي بشكل أفضل علم وظائف الأعضاء البشرية ويمكن استخدامها لتعزيز تطوير العقاقير بسرعة أعلى وتكلفة أقل للمخاطر والتعقيدات.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Chemistry

Unit 1

Pharmacokinetics

SCIENTISTS IN ACTION

Preparation and Characterization of SDF-1&#945;-Chitosan-Dextran Sulfate Nanoparticles

Preparation and Characterization of SDF-1ÃƒÅ½Ã‚Â±-Chitosan-Dextran Sulfate Nanoparticles

إعداد وتوصيف SDF-1α-الشيتوزان-ديكستران سلفات النانوية

Chitosan (CS) and dextran sulfate (DS) are charged polysaccharides (glycans), which form polyelectrolyte complex-based nanoparticles when mixed under ...

Preparation and Characterization of Individual and Multi-drug Loaded Physically Entrapped Polymeric Micelles

إعداد وتوصيف الفردية والمتعددة المخدرات تحميل جسديا شرك البوليمرية المذيلات

Amphiphilic block copolymers like polyethyleneglycol-block-polylactic acid (PEG-b-PLA) can self-assemble into micelles above their critical micellar ...

Protocol for the Synthesis of Ortho-trifluoromethoxylated Aniline Derivatives

Protocol for the Synthesis of Ortho-trifluoromethoxylated Aniline Derivatives

بروتوكول لتوليف<em&gt; أورثو</em&gt; مشتقات الانيلين -trifluoromethoxylated

Molecules bearing trifluoromethoxy (OCF3) group often show desired pharmacological and biological properties. However, facile synthesis of ...

PTR-ToF-MS Coupled with an Automated Sampling System and Tailored Data Analysis for Food Studies: Bioprocess Monitoring, Screening and Nose-space Analysis

بتر-توف-مس يقترن مع نظام أخذ العينات الآلي وتحليل البيانات مصممة خصيصا لدراسات الغذاء: رصد العمليات الحيوية والفحص وتحليل الأنف الفضاء

Proton Transfer Reaction (PTR), combined with a Time-of-Flight (ToF) Mass Spectrometer (MS) is an analytical approach based on chemical ionization that ...

An Aptamer-based Sensor for Unchelated Gadolinium(III)

An Aptamer-based Sensor for Unchelated GadoliniumIII

والاستشعار القائمة على أبتمر لUnchelated الجادولينيوم (III)

A method for determining the presence of unchelated trivalent gadolinium ion (Gd3+) in aqueous solution is demonstrated. Gd3+ is often present in samples ...

Real-time Breath Analysis by Using Secondary Nanoelectrospray Ionization Coupled to High Resolution Mass Spectrometry

تحليل التنفس في الوقت الحقيقي باستخدام التأين نانوليكتروسبراي الثانوية بالإضافة إلى دقة عالية الطيف الكتلي

Exhaled volatile organic compounds (VOCs) have aroused considerable interest, since they can serve as biomarkers for disease diagnosis and environmental ...

An Engineered Split-TET2 Enzyme for Chemical-inducible DNA Hydroxymethylation and Epigenetic Remodeling

إنزيم TET2 انقسام هندسيا للحمض النووي الكيميائية إيندوسيبلي هيدروكسيميثيليشن ويعيد البناء جينية

DNA methylation is a stable and heritable epigenetic modification in the mammalian genome and is involved in regulating gene expression to control ...

Generation of Electronic Cigarette Aerosol by a Third-Generation Machine-Vaping Device: Application to Toxicological Studies

جيل من الهباء الجوي السجائر الإلكترونية بجهاز فابينج آلة للجيل الثالث: تطبيق للدراسات السمية

Electronic-cigarette (e-cig) devices use heat to produce an inhalable aerosol from a liquid (e-liquid) composed mainly of humectants, nicotine, and ...

High-throughput and Comprehensive Drug Surveillance Using Multisegment Injection-Capillary Electrophoresis-Mass Spectrometry

مراقبة المخدرات الفائق وشاملة باستخدام مولتيسيجمينت الشعرية حقن التفريد الكتلي

New analytical methods are urgently needed to enable high-throughput, yet comprehensive drug screening, given an alarming opioid and prescription drug ...

An Electrochemical Cholesteric Liquid Crystalline Device for Quick and Low-Voltage Color Modulation

الكهروكيميائية Cholesteric سائلة بلورية جهاز لتعديل لون سريعة والجهد المنخفض

We demonstrate a method for fabricating a prototype reflective display device that contains cholesteric liquid crystal (LC) as an active component. The ...