Name: an intestine/liver microphysiological system for drug pharmacokinetic and toxicological assessment
Uploaded: 2020-12-03T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Intestine/Liver Microphysiological System for Drug Pharmacokinetic and Toxicological Assessment at JoVE.com

Dr. Christie Guguen-Guillouzo, Unit 522 INSERM'den Dr. Philippe Gripon ve Ünite 271 INSERM'den Dr. Christian Trepo'ya Biyolojik Materyalin (Hepa RG hücreleri) kullanımı ve akademik araştırmayapmak için bize sunulması için teşekkür ederiz.

1. 2-OC'de ekim için doku eşdeğerlerinin üretimi
<ol><li>İnce bağırsak bariyereşdeğerüretimi<ol>
<li>Bağırsak eşdeğer imasını kullanarak Caco-2 ve HT-29 hücrelerini koruyun: DMEM %10 FBS, %1 penisilin ve streptomisin ve bu el yazmasında "DMEM S" olarak adlandırılan esansiyel olmayan amino asitler ile desteklenmiştir.</li>
		<li>Ortayı çıkarın, 1x DPBS ile iki kez yıkayın ve hücre kültürü şişelerinde yetiştirilen Caco-2 hücrelerini ayırmak için %0,25 Tripsin/EDTA'dan 8 mL ekleyin (17...

<ol>
	<li>Zhang, D., Luo, G., Ding, X., Lu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+experimental+models+of+drug+metabolism+and+disposition+in+drug+discovery+and+development.">Preclinical experimental models of drug metabolism and disposition in drug discovery and development.</a> Acta Pharmaceutica Sinica B. 2 (6), 549-561 (2012).</li><li>Hynds, R. E., Giangreco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relevance+of+human+stem+cell-derived+organoid+models+for+epithelial+translational+medicine.">The relevance of human stem cell-derived organoid models for epithelial translational medicine.</a> Stem Cells. 31 (3), 417-422 (2013).</li><li>Sivaraman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Microscale+In+vitro+Physiological+Model+of+the+Liver:+Predictive+Screens+for+Drug+Metabolism+and+Enzyme+Induction.">A Microscale In vitro Physiological Model of the Liver: Predictive Screens for Drug Metabolism and Enzyme Induction.</a> Current Drug Metabolism. 6 (6), 569-591 (2005).</li><li>Dehne, E. M., Hasenberg, T., Marx, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ascendance+of+microphysiological+systems+to+solve+the+drug+testing+dilemma.">The ascendance of microphysiological systems to solve the drug testing dilemma.</a> Future Science OA. 3 (2), 185 (2017).</li><li>Oleaga, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-Organ+toxicity+demonstration+in+a+functional+human+in+vitro+system+composed+of+four+organs.">Multi-Organ toxicity demonstration in a functional human in vitro system composed of four organs.</a> Scientific Reports. 6, 20030 (2016).</li><li>Maschmeyer, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+four-organ-chip+for+interconnected+long-term+co-culture+of+human+intestine,+liver,+skin+and+kidney+equivalents.">A four-organ-chip for interconnected long-term co-culture of human intestine, liver, skin and kidney equivalents.</a> Lab Chip. 15 (12), 2688-2699 (2015).</li><li>Esch, M. B., Mahler, G. J., Stokol, T., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body-on-a-chip+simulation+with+gastrointestinal+tract+and+liver+tissues+suggests+that+ingested+nanoparticles+have+the+potential+to+cause+liver+injury.">Body-on-a-chip simulation with gastrointestinal tract and liver tissues suggests that ingested nanoparticles have the potential to cause liver injury.</a> Lab Chip. 14 (16), 3081-3092 (2014).</li><li>Materne, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Multi-organ+Chip+-+A+Microfluidic+Platform+for+Long-term+Multi-tissue+Coculture.">The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture.</a> Journal of Visualized Experiments. , e52526 (2015).</li><li>Esch, M. B., Ueno, H., Applegate, D. R., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular,+pumpless+body-on-a-chip+platform+for+the+co-culture+of+GI+tract+epithelium+and+3D+primary+liver+tissue.">Modular, pumpless body-on-a-chip platform for the co-culture of GI tract epithelium and 3D primary liver tissue.</a> Lab Chip. 16 (14), 2719-2729 (2016).</li><li>Sung, J. H., Kam, C., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microfluidic+device+for+a+pharmacokinetic&#8211;pharmacodynamic+(PK-PD)+model+on+a+chip.">A microfluidic device for a pharmacokinetic&#8211;pharmacodynamic (PK-PD) model on a chip.</a> Lab on a Chip. 10 (4), 446-455 (2010).</li><li>Viravaidya, K., Sin, A., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+Microscale+Cell+Culture+Analog+to+Probe+Naphthalene+Toxicity.">Development of a Microscale Cell Culture Analog to Probe Naphthalene Toxicity.</a> Biotechnology Progress. 20 (1), 316-323 (2004).</li><li>Sin, A., Chin, K. C., Jamil, M. F., Kostov, Y., Rao, G., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Design+and+Fabrication+of+Three-Chamber+Microscale+Cell+Culture+Analog+Devices+with+Integrated+Dissolved+Oxygen+Sensors.">The Design and Fabrication of Three-Chamber Microscale Cell Culture Analog Devices with Integrated Dissolved Oxygen Sensors.</a> Biotechnology Progress. 20 (1), 338-345 (2004).</li><li>Tsamandouras, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+Gut+and+Liver+Microphysiological+Systems+for+Quantitative+In+vitro+Pharmacokinetic+Studies.">Integrated Gut and Liver Microphysiological Systems for Quantitative In vitro Pharmacokinetic Studies.</a> The AAPS Journal. 19 (5), 1499-1512 (2017).</li><li>Graham, G. G., Davies, M. J., Day, R. O., Mohamudally, A., Scott, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+modern+pharmacology+of+paracetamol:+Therapeutic+actions,+mechanism+of+action,+metabolism,+toxicity+and+recent+pharmacological+findings.">The modern pharmacology of paracetamol: Therapeutic actions, mechanism of action, metabolism, toxicity and recent pharmacological findings.</a> Inflammopharmacology. 21 (3), 201-232 (2013).</li><li>Hodgman, M. J., Garrard, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Review+of+Acetaminophen+Poisoning.">A Review of Acetaminophen Poisoning.</a> Critical Care Clinics. 28 (4), 499-516 (2012).</li><li>Maschmeyer, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chip-based+human+liver-intestine+and+liver-skin+co-cultures+-+A+first+step+toward+systemic+repeated+dose+substance+testing+in+vitro.">Chip-based human liver-intestine and liver-skin co-cultures - A first step toward systemic repeated dose substance testing in vitro.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 95, 77-87 (2015).</li><li>Bessems, J. G. M., Vermeulen, N. P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paracetamol+(acetaminophen)-induced+toxicity:+Molecular+and+biochemical+mechanisms,+analogues+and+protective+approaches.">Paracetamol (acetaminophen)-induced toxicity: Molecular and biochemical mechanisms, analogues and protective approaches.</a> Critical Reviews in Toxicology. 31 (1), 55-138 (2001).</li><li>Hirt, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+afterload+induces+pathological+cardiac+hypertrophy:+A+new+in+vitro+model.">Increased afterload induces pathological cardiac hypertrophy: A new in vitro model.</a> Basic Research in Cardiology. 107 (6), 307 (2012).</li><li>Fink, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+stretch+of+engineered+heart+tissue+induces+hypertrophy+and+functional+improvement.">Chronic stretch of engineered heart tissue induces hypertrophy and functional improvement.</a> The FASEB journal official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 14 (5), 669-679 (2000).</li><li>Zhang, B., Peticone, C., Murthy, S. K., Radisic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standalone+perfusion+platform+for+drug+testing+and+target+validation+in+micro-vessel+networks.">A standalone perfusion platform for drug testing and target validation in micro-vessel networks.</a> Biomicrofluidics. 7 (4), 044125 (2013).</li><li>Ara&#250;jo, F., Sarmento, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+the+characterization+of+an+in+vitro+triple+co-culture+intestine+cell+model+for+permeability+studies.">Towards the characterization of an in vitro triple co-culture intestine cell model for permeability studies.</a> International Journal of Pharmaceutics. 458 (1), 128-134 (2013).</li><li>Cadena-Herrera, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+three+viable-cell+counting+methods:+Manual,+semi-automated,+and+automated.">Validation of three viable-cell counting methods: Manual, semi-automated, and automated.</a> Biotechnology Reports. 7, 9-16 (2015).</li><li>Gripon, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+of+a+human+hepatoma+cell+line+by+hepatitis+B+virus.">Infection of a human hepatoma cell line by hepatitis B virus.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99 (24), 15655-15660 (2002).</li><li>Guillouzo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+hepatoma+HepaRG+cells:+A+highly+differentiated+model+for+studies+of+liver+metabolism+and+toxicity+of+xenobiotics.">The human hepatoma HepaRG cells: A highly differentiated model for studies of liver metabolism and toxicity of xenobiotics.</a> Chemico-Biological Interactions. 168 (1), 66-73 (2007).</li><li>Wagner, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dynamic+multi-organ-chip+for+long-term+cultivation+and+substance+testing+proven+by+3D+human+liver+and+skin+tissue+co-culture.">A dynamic multi-organ-chip for long-term cultivation and substance testing proven by 3D human liver and skin tissue co-culture.</a> Lab on a Chip. 13 (18), 3538-3547 (2013).</li><li>Forrest, J. A. H., Clements, J. A., Prescott, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Pharmacokinetics+of+Paracetamol.">Clinical Pharmacokinetics of Paracetamol.</a> Clinical Pharmacokinetics. 7 (2), 93-107 (1982).</li><li>Dollery, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Therapeutic Drugs. , (1999).</li><li>Shah, V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioanalytical+method+validation-a+revisit+with+a+decade+of+progress.">Bioanalytical method validation-a revisit with a decade of progress.</a> Pharmaceutical research. 17 (12), 1551-1557 (2000).</li><li>Marin, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shp2+negatively+regulates+growth+in+cardiomyocytes+by+controlling+focal+adhesion+kinase/src+and+mTOR+pathways.">Shp2 negatively regulates growth in cardiomyocytes by controlling focal adhesion kinase/src and mTOR pathways.</a> Circulation Research. 103 (8), 813-824 (2008).</li><li>Linkert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metadata+matters:+Access+to+image+data+in+the+real+world.">Metadata matters: Access to image data in the real world.</a> Journal of Cell Biology. 189 (5), 777-782 (2010).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OECD+TG+491+-+Short+Time+Exposure+In+vitro+Test+Method+for+Identifying+i)+Chemicals+Inducing+Serious+Eye+Damage+and+ii)+Chemicals+Not+Requiring+Classification+for+Eye+Irritation+or+Serious+Eye+Damage.">OECD TG 491 - Short Time Exposure In vitro Test Method for Identifying i) Chemicals Inducing Serious Eye Damage and ii) Chemicals Not Requiring Classification for Eye Irritation or Serious Eye Damage.</a> OECD. 14, (2018).</li><li>Fernandes, M. B., Gon&#231;alves, J. E., Tavares, L. C., Storpirtis, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caco-2+cells+permeability+evaluation+of+nifuroxazide+derivatives+with+potential+activity+against+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+(MRSA).">Caco-2 cells permeability evaluation of nifuroxazide derivatives with potential activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA).</a> Drug Development and Industrial Pharmacy. 41 (7), 1066-1072 (2015).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OECD+TG+492+-+Reconstructed+human+Cornea-like+Epithelium+(RhCE)+test+method+for+identifying+chemicals+not+requiring+classification+and+labelling+for+eye+irritation+or+serious+eye+damage.">OECD TG 492 - Reconstructed human Cornea-like Epithelium (RhCE) test method for identifying chemicals not requiring classification and labelling for eye irritation or serious eye damage.</a> OECD. 35, (2018).</li><li>OECD, O. E. C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OECD+TG+431+-+In+vitro+skin+corrosion:+reconstructed+human+epidermis+(RHE)+test+method.">OECD TG 431 - In vitro skin corrosion: reconstructed human epidermis (RHE) test method.</a> OECD. 8, (2016).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OECD+TG+439+-+In+vitro+Skin+Irritation:+Reconstructed+Human+Epidermis+Test+Method.">OECD TG 439 - In vitro Skin Irritation: Reconstructed Human Epidermis Test Method.</a> OECD. 21, (2015).</li><li>Marin, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetaminophen+absorption+and+metabolism+in+an+intestine/liver+microphysiological+system.">Acetaminophen absorption and metabolism in an intestine/liver microphysiological system.</a> Chemico-Biological Interactions. 299, 59-76 (2019).</li><li>Maass, C., Stokes, C. L., Griffith, L. G., Cirit, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-functional+scaling+methodology+for+translational+pharmacokinetic+and+pharmacodynamic+applications+using+integrated+microphysiological+systems+(MPS).">Multi-functional scaling methodology for translational pharmacokinetic and pharmacodynamic applications using integrated microphysiological systems (MPS).</a> Integrative Biology (United Kingdom). 9 (4), 290-302 (2017).</li><li>Sung, J. H., Wang, Y., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+using+mathematical+modeling+approaches+to+design+and+interpret+multi-organ+microphysiological+systems+(MPS).">Strategies for using mathematical modeling approaches to design and interpret multi-organ microphysiological systems (MPS).</a> APL Bioengineering. 3 (2), 021501 (2019).</li></ol>

Araştırmacı yeni ilaçların farmakolojik özelliklerinin doğru ve güvenilir bir şekilde değerlendirilmesi, aşağıdaki geliştirme adımlarında riski azaltmak için kritik öneme sahiptir. MPS, tahmin gücünü artırmayı ve klinik öncesi testlerle harcanan maliyetleri ve zamanı azaltmayı amaçlayan nispeten yeni bir teknolojidir. Grubumuz çoğunlukla kurşun optimizasyonu için gerekli olan farmakokinetik ve toksikolojik özelliklerin değerlendirilmesinde ilerlemektedir. İki odası olan ve iki organoidi...

Genomik ve proteomik farklılıklar nedeniyle, hayvan modelleri çeşitli insan sonuçları için sınırlı tahmin değerine sahiptir. Ayrıca, onlar zaman alıcı, pahalı ve etik şüpheli1. MPS, tahmin gücünü artırmayı ve klinik öncesi testler ile harcanan maliyetleri ve zamanı azaltmayı amaçlayan nispeten yeni bir teknolojidir. Organoid-organoid iletişimi teşvik eden medya akışı altında organoidler (organların yapay mimetik fonksiyonel birimleri) yetiştiren mikroakışkan cihazlardır. İnsan hücrelerinden yapılan organoidler çeviri alakaartış 2,3,4. MPS'nin hayvan testlerinden daha iyi performans göstermesi beklenmektedir çünkü genetik olarak insandırlar ve dokular arasındaki etkileşimi özetlerler. Tam olarak işlevsel olduğunda, MPS daha anlamlı sonuçlar sağlayacaktır, daha yüksek hızda ve daha düşük maliyetler ve riskler4. Birçok grup çeşitli amaçlar için MPS geliştiriyor, özellikle hastalığın etkinliğini test etmek için hastalık modelleri.
Maruz kalma düzeyi ilaç etkinliği ve toksisite değerlendirmek için en kritik parametrelerden biridir5,6,7,8,9,10,11,12. MPS sistemik maruziyet taklit organoid entegrasyonu sağlar ve geleneksel 2D insan doku kültüründen daha iyi performans bekleniyor. Bu teknoloji önemli ölçüde bileşik bağırsak emilimi ve karaciğer metabolizması tahmin artırabilir4.
Bağırsak ve karaciğer insan eşdeğer modeli entegre bir MPS iyi bir başlangıç noktasıdır, ilaç biyoyararlanım ve sistemik maruz kalma bu iki organın merkezi rolü göz önüne alındığında13,14,15. APAP onun metaboliti karaciğer tarafından ağırlıklı olarak yapılır çünkü bir MPS okumak için cazip bir ilaçtır16,17.
2-OC iki farklı insan eşdeğer doku / organoidler mikrokanallar16ile birbirine kültür için uygun iki odalı mikroakışkan cihazdır. Bir ilacın in vitro insan oral/intravenöz yönetimini taklit etmek ve bağırsak ve karaciğer eşdeğerleri arasındaki çapraz konuşmanın APAP farmakokinetiği üzerine etkilerini değerlendirmek için, organoidlerin işlevselliği ve canlılığının yanı sıra, üç farklı MPS derlemesi gerçekleştirildi: (1) 2-OC cihazına entegre edilmiş Caco-2 + HT-29 hücre koculture içeren bir kültür eklemesine dayalı bir bağırsak eşdeğerinden oluşan bir "Bağırsak 2-OC MPS"; (2) 2-OC cihazına entegre edilmiş HepaRG + HHSteC (İnsan Hepatik Stellat Hücreleri) içeren karaciğer küresellerinden oluşan bir "Karaciğer 2-OC MPS"; ve (3) bir cihaz bölmesinde bağırsak eşdeğeri oluşan bir "Bağırsak / Karaciğer 2-OC MPS" mikroakışkan kanallar aracılığıyla medya akışı ile diğer karaciğer eşdeğeri ile iletişim.
Tüm tahliller statik altında yapıldı (hiçbir akış) ve dinamik (akış ile) mekanik uyaranların etkisi nedeniyle (sıkıştırma, germe, ve kesme) hücre canlılığı ve işlevleri18,19,20. Bu makalede, insan bağırsağı ve karaciğer eşdeğeri modelleri içeren 2-OC MPS'de APAP oral/intravenöz uygulama öykünme protokolü ve ilgili emilim/metabolizma ve toksikolojik analizler açıklanmaktadır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1x DPBS</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>14190235</td>
			<td>No calcium, no magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-OC</td>
			<td>TissUse GmbH</td>
			<td></td>
			<td>Two-organ chip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384-well Spheroid Microplate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3830</td>
			<td>Black/Clear, Round Bottom, Ultra-Low Attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% Paraformaldehyde</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Use to fix cell</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetaminophen</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A7085</td>
			<td>Use to MPS assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Tedia</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HPLC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 phalloidin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>confocal experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HPLC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caco-2 cells</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>86010202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cacodylate buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal Fluorescence microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DMI6000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM1950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM high glucose</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12800017</td>
			<td>Add supplements: 10% fetal bovine serum, 100 units per mL penicillin, 100 &#181;g/mL streptomycin, and 1% non-essential amino acids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D4540</td>
			<td>Add 2% to HepaRG media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Synth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12657029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezing medium OCT</td>
			<td>Tissue-Tek</td>
			<td></td>
			<td>Tissue-Tek&#174; O.C.T.&#8482; Compound is a formulation of watersoluble glycols and resins, providing a convenient specimen matrix for cryostat sectioning at temperatures of -10&#176;C and below.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin &#38; Eosin</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HepaRG cells</td>
			<td>Biopredic International</td>
			<td>HPR101</td>
			<td>Undifferentiated cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HHSTeC</td>
			<td>ScienCell Research Laboratories</td>
			<td>5300</td>
			<td>Cells and all culture supplements</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HCA experiments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HT-29 cells</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>85061109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Insulin</td>
			<td>Invitrogen - Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12585014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H0888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Merck</td>
			<td>278475</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Karnovsky&#8217;s fixative</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A2916801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luna C18 guard column SS</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HPLC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DMi4000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>RM2245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millicell 0.4 &#181;m pore size inserts</td>
			<td>Merck</td>
			<td>PIHP01250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millicell ERS-2 meter</td>
			<td>Merck</td>
			<td>MERS00002</td>
			<td>Used to TEER measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MitoTracker Deep Red</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HCA experiments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>M6494</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX3000P system</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neubauer chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Counting cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operetta High Content Imaging System</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P450-Glo CYP3A4 Assay with Luciferin-IPA</td>
			<td>Promega</td>
			<td>Cat.# V9001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15070063</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permount</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Histology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>RT-qPCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVDF membrane</td>
			<td>BioRad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVDF Syringe filter</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>0.22 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reversed-phase Luna C18 column</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td></td>
			<td>Used to perform HPLC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker (IKA VXR Basic Vibrax)</td>
			<td>IKA Works GmbH &#38; Co</td>
			<td>2819000</td>
			<td>Used for spheroids to improve MTT assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stellate Cell Media (STeC CM)</td>
			<td>ScienCell</td>
			<td>5301</td>
			<td>Add STeC CM supplements</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScriptIITM Reverse Transcriptase</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR Green PCR Master Mix</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRizol TM reagent</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Trizol is a monophasic solution of phenol and guanidine isothiocyanate.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA solution</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>R001100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-low-attachment plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS3471-24EA</td>
			<td>6 wells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectashield plus DAPI mounting media</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White Opaque 96-well Microplate</td>
			<td>PerkinHelmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wide-bore tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Williams E</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-29510</td>
			<td>Add supplements: 10% fetal bovine serum, 2 mM L-glutamine, 100 units per ml penicillin, 100 &#181;g/mL streptomycin and 5 &#181;g/mL human insulin</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intestine/liver microphysiological system for drug pharmacokinetic and toxicological assessment

Yakın zamanda tanıtılan mikrofizyolojik sistemlerin (MPS) insan organoidlerini yetiştiren, genetik olarak insan oldukları ve dokular arasındaki etkileşimi yeniden özetledikleri için ilaç geliştirme sürecinin klinik öncesi test aşamasında hayvanlardan daha iyi performans göstermesi beklenmektedir. Bu çalışmada, insan bağırsak bariyeri (Caco-2 ve HT-29 hücrelerinin ortak kültürü ile taklit) ve karaciğer eşdeğeri (farklılaştırılmış HepaRG hücreleri ve insan hepatik stellat hücrelerinden oluşan küresel ler tarafından taklit edilmiştir) bazı asetaminofen (APAP) farmakinetik (PK) ve toksik özellikleri değerlendirmek için iki organlı çip (2-OC) mikroakışkan cihaza entegre edilmiştir. MPS üç derlemeleri vardı: Bağırsak sadece 2-OC, Karaciğer sadece 2-OC, ve Bağırsak / Karaciğer 2-OC aynı ortam her iki organoidperile. PK değerlendirmeleri için, apap'ı bağırsak bariyerinin üzerinden (sözlü rotayı taklit) veya medyada (intravenöz rotayı taklit ederek) uyguladıktan sonra, amedia'ya sırasıyla 12 μM ve 2 μM dozladık. Ortam örnekleri ters fazlı yüksek basınçlı sıvı kromatografi (HPLC) ile analiz edildi. Organoidler gen ekspresyonu, TEER değerleri, protein ekspresyonu ve aktivitesi için analiz edildi ve daha sonra toplandı, düzeltildi ve bir dizi morfolojik değerlendirmeye sunuldu. MTT tekniği organoid canlılığı değerlendirmede iyi performans gösterdi, ancak yüksek içerik analizleri (HCA) APAP tedavisine yanıt olarak çok erken toksik olayları tespit edebildi. Medya akışının APAP emilimini önemli ölçüde etkilemediğini, ancak karaciğereşdeğerinin işlevselliğini önemli ölçüde iyileştirdiğini doğruladık. APAP insan bağırsak emilimi ve hepatik metabolizma MPS taklit edilebilir. MPS verileri ile silico modelleme arasındaki ilişki, in vitro yöntemlerin öngörülebilirliğini artırmak ve farmakokinetik ve toksikolojik çalışmalarda hayvan modellerinden daha iyi doğruluk sağlamak için büyük bir potansiyele sahiptir.

2-OC MPS PK APAP testleri gerçekleştirmek için, ilk adım insan bağırsağı ve karaciğer eşdeğerleri (organoidler) üretmektir. PK APAP tkalasına başlamadan önce 2-OC mikroakışkan cihaza(Şekil 1A) 24 saat entegre edilmiştir. Ertesi gün ortam değiştirilir ve model APAP'a maruz kalır. Şekil 1, 2-OC cihazının içine yerleştirilen bağırsak ve karaciğer eşdeğerlerini(Şekil 1B)ve APAP PK deney zaman dilimini<s...

Watch this Scientific Journal Video about An Intestine/Liver Microphysiological System for Drug Pharmacokinetic and Toxicological Assessment at JoVE.com

An Intestine/Liver Microphysiological System for Drug Pharmacokinetic and Toxicological Assessment

Biz asetaminofen (APAP) bağırsak ve karaciğer organoidleri ile bir mikrofizyolojik sistem (MPS) maruz. Bu makalede, MPS'de organoid üretim yöntemleri ve APAP farmakokinetik ve toksikolojik özellik değerlendirmeleri açıklanmaktadır. Ayrıca sonuçları doğrulamak için gerekli doku işlevselliği analizleri açıklar.

İlaç Farmakokinetik ve Toksikolojik Değerlendirme için Bir Bağırsak/Karaciğer Mikrofizyolojik Sistemi

The recently introduced microphysiological systems (MPS) cultivating human organoids are expected to perform better than animals in the preclinical tests ...

Mikrofizyolojik sistemler, farmakokinetik ve insan vücudunun toksikolojik tepkisini ilgi alanlarına özgü tedavilere taklit etme yeteneğine sahiptir. Mikrofizyolojik sistemler, in vitro yöntemlerin öngörülebilir gücünü artırabileceği ve farmakokinetik ve toksikolojik çalışmaların maliyetini ve süresini azaltabileceğinden hayvan testlerinin yerini alma potansiyeline sahiptir. Test maddesi uygulamasından 24 saat önce, William ES ortamının 800 mikrolitrelik aliquot'unu iki organ yongasının daha büyük ve küçük bölmeleri arasında bölüştürün ve hazırlanan 24 kuyu plakasındaki her bağırsak bariyerinden bazolateral ve apikal ortamı aspire edin.Steril forsepskullanarak, her iki organ yonga devresi başına bir kesici ucu daha büyük bölmeye entegre edin ve apikal tarafa 200 mikrolitre DMEMS ekleyin. Geniş delik ipuçları kullanarak, devre başına 20 karaciğer eşdeğerini iki organ çipinin daha küçük bölmesine entegre edin ve sistemi kontrol ünitesine bağlayın. Daha sonra kontrol ünitesini basınçlı hava beslemesine bağlayın ve basıncı yaklaşık olarak artı veya eksi 300 bara ve 0,3 Hertz pompalama frekansına ayarlayın.Ertesi gün 12 mikromolar konsantrasyonstok asetaminofen çözeltisi seyreltmek. Sistemdeki ortamı değiştirmek için, iki organ çipindeki bağırsak bariyerinden bazolateral ve apikal ortam aspire edin ve organoid bazolateral taraftaki büyük bölmeye 500 mikrolitre taze uygun kültür ortamı ve küçük bölmeye 300 mikrolitre ekleyin. Kabarcıklar kontrol ettikten sonra, bağırsak kültürünün apical tarafında 12 mikromolar asetaminofen çözeltisi 200 mikrolitre eklenmesi ile oral uygulama öykünmek ekler ve kontrol ünitesine mikrofizyolojik sistem bağlayın.Hem intestinal apikal hem de bazolateral kenarlardan ve belirtilen zaman noktalarında triplicate küçük bölmeden toplam hacmi toplamak. Tüm numuneler toplandığında, HPLC analizi için ilgili tüm parametreleri tabloda belirtildiği şekilde ayarlayın ve mobil fazı vakum altında 0,4 mikron membran filtresinden filtreleyin. Daha sonra numuneleri 0,22 mikron gözenek boyutunda PVDF şırınga filtresinden filtreleyin ve HPLC UV ölçümüne başlamadan önce numuneleri bir şişede saklayın.Organoid canlılığını değerlendirmek için, her çoğaltma dan tüm 20 küresel oidleri 96 kuyu plaka bireysel kuyulara aktarın ve hücre kültürü 24 kuyu plaka bireysel kuyular ekler aktarın. Doku eşdeğerlerini yıkama başına taze DPBS ile üç kez yıkayın ve her deneysel kuyuya mililitre Başına bir miligram lık MTT çözeltisine 300 mikrolitre ekleyin. Hücre kültürü kuluçka üç saat kuluçka sonra, bağırsak ve karaciğer eşdeğerleri MTT formazan ayıklamak için dört santigrat derecede bir gecede kuluçka için iyi başına 200 mikrolitre izopropanol ile MTT çözeltisi değiştirin.Ertesi sabah, 96 kuyu plaka uygun kuyuya her supernatant 200 mikrolitre aktarın ve negatif kontrol ile karşılaştırıldığında her zaman noktasının ortalama optik yoğunluğunu kullanarak MTT azaltmak için hücrelerin göreceli yeteneğini hesaplama sağlamak için 570 nanometre bir plaka okuyucu formazan okuyun. Örneklerin sitokimyasal ve histolojik analizi için, önce oda sıcaklığında 25 dakika boyunca 0,1 molar PBS'de %4 paraformaldehitte bağırsak ve karaciğer eşdeğerlerini düzeltin. Kuluçka sonunda, tetrameethylrhodamine izothiocyanate phalloidin Alexa Flor 647 phalloidin oda sıcaklığında bir saat boyunca bağırsak ve karaciğer eşdeğerleri boyama önce, yıkama başına 10 dakika PBS beş kez organoidler yıkayın.Kuluçka sonunda, sıvı nitrojen dokuları dondurma önce birkaç dakika için dondurucu ortama örnekleri aktarın. Daha sonra, 10 ila 12 mikron kalınlığında karaciğer küresel kriyo-kesitleri elde etmek ve konfokal floresan mikroskopi ile görüntüleme için DAPI ile montaj orta doku bölümleri monte etmek için bir kriyostat kullanın. Mitokondriyal ve nükleer boyama için, %5 karbondioksit içeren nemli bir atmosferde 37 derecede 15 ila 45 dakikalık bir kuluçka için numuneleri mitokondriyal boyama çözeltisi ile tamamen kapatın.Kuluçka sonunda, oda sıcaklığında 15 dakika boyunca PBS'de %2-4 paraformaldehit ile boyama çözeltisini dikkatlice değiştirin. Sabitlemeden sonra, numuneleri oda sıcaklığında 10 dakika boyunca nükleik asit boyama çözeltisi ile etiketlemeden önce hücreleri yıkama başına beş dakika boyunca taze PBS ile iki kez hafifçe durulayın. Kuluçka sonunda, numuneleri ışıktan korunan PBS'de üç, beş dakikalık yıkamalarla yıkayın ve uygun filtre setleri ile floresan mikroskoptaki mitokondriyal leke ifade eden hücrelerin sayısının ölçülmesini kolaylaştırmak için nükleik asit lekesini kullanın.İnsan bağırsak bariyerini ve karaciğer eşdeğerinin iki organ çipi mikroakışkan cihazına entegre edilmesi, ilgi çekici tedavilerin farmakokinetik ve toksikolojik özelliklerinin değerlendirilmesine olanak sağlar. Tedaviden sonra, medya örnekleri HPLC ile analiz edilebilir. Organoidler gen ekspresyonu, trans-epitel elektriksel direnç değerleri, protein ekspresyonu ve aktivitesi ve morfolojik özellikleri açısından analiz edilebilir.MTT analizi organoid canlılığı değerlendirmek için yapılabilir, yanı sıra asetaminofen tedavisine yanıt olarak çok erken toksik olayları tespit etmek için. Medya akışı önemli ölçüde asetaminofen emilimini etkilemez, önemli ölçüde karaciğer eşdeğer işlevselliğini artırır ise, insan bağırsak asetaminofen emilimi ve hepatik metabolizma bu mikrofizyolojik sistemde taklit edilebilir gösteren. Mikrofizyolojik sistemler, insan fizyolojisini daha iyi taklit ettikleri için ilaç geliştirme ve keşifteki hayvan modellerinin yerini alabilen ve daha yüksek hızda ilaç gelişimini teşvik etmek ve risk ve karmaşıklığa daha düşük maliyetle teşvik etmek için kullanılabilir.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Chemistry

Unit 1

Pharmacokinetics

SCIENTISTS IN ACTION

Preparation and Characterization of SDF-1&#945;-Chitosan-Dextran Sulfate Nanoparticles

Preparation and Characterization of SDF-1ÃƒÅ½Ã‚Â±-Chitosan-Dextran Sulfate Nanoparticles

SDF-1α-Kitosan-Dekstran Sülfat nano partiküllerin hazırlanması ve Karakterizasyonu

Chitosan (CS) and dextran sulfate (DS) are charged polysaccharides (glycans), which form polyelectrolyte complex-based nanoparticles when mixed under ...

Preparation and Characterization of Individual and Multi-drug Loaded Physically Entrapped Polymeric Micelles

Hazırlanması ve Bireysel Karakterizasyonu ve Multi-ilaç Fiziksel, polimerik misellerin Entrapped Loaded

Amphiphilic block copolymers like polyethyleneglycol-block-polylactic acid (PEG-b-PLA) can self-assemble into micelles above their critical micellar ...

Protocol for the Synthesis of Ortho-trifluoromethoxylated Aniline Derivatives

Protocol for the Synthesis of Ortho-trifluoromethoxylated Aniline Derivatives

Sentezi İçin Protokol<em&gt; Ortho</em&gt; -trifluoromethoxylated Anilin türevleri

Molecules bearing trifluoromethoxy (OCF3) group often show desired pharmacological and biological properties. However, facile synthesis of ...

PTR-ToF-MS Coupled with an Automated Sampling System and Tailored Data Analysis for Food Studies: Bioprocess Monitoring, Screening and Nose-space Analysis

Gıda Örneklerinde Otomatik Örnekleme Sistemi ve Özelleştirilmiş Veri Analizi ile Birleştirilen PTR-ToF-MS: Biyolojik İşlem İzleme, Tarama ve Burun Uzayı Analizi

Proton Transfer Reaction (PTR), combined with a Time-of-Flight (ToF) Mass Spectrometer (MS) is an analytical approach based on chemical ionization that ...

An Aptamer-based Sensor for Unchelated Gadolinium(III)

An Aptamer-based Sensor for Unchelated GadoliniumIII

Unchelated Gadolinium için bir Aptamer tabanlı Sensörü (III)

A method for determining the presence of unchelated trivalent gadolinium ion (Gd3+) in aqueous solution is demonstrated. Gd3+ is often present in samples ...

Real-time Breath Analysis by Using Secondary Nanoelectrospray Ionization Coupled to High Resolution Mass Spectrometry

İkincil Nanoelectrospray iyonlaşma kullanarak gerçek zamanlı nefes analiz için yüksek çözünürlüklü kütle spektrometresi birleştiğinde

Exhaled volatile organic compounds (VOCs) have aroused considerable interest, since they can serve as biomarkers for disease diagnosis and environmental ...

An Engineered Split-TET2 Enzyme for Chemical-inducible DNA Hydroxymethylation and Epigenetic Remodeling

Kimyasal-indüklenebilir DNA Hydroxymethylation ve epigenetik Remodeling için bir mühendislik Split-TET2 enzim

DNA methylation is a stable and heritable epigenetic modification in the mammalian genome and is involved in regulating gene expression to control ...

Generation of Electronic Cigarette Aerosol by a Third-Generation Machine-Vaping Device: Application to Toxicological Studies

Elektronik Sigara Aerosol üçüncü nesil makine-Vaping aygıt tarafından nesil: toksikolojik çalışmalar uygulamaya

Electronic-cigarette (e-cig) devices use heat to produce an inhalable aerosol from a liquid (e-liquid) composed mainly of humectants, nicotine, and ...

High-throughput and Comprehensive Drug Surveillance Using Multisegment Injection-Capillary Electrophoresis-Mass Spectrometry

Multisegment enjeksiyon-kılcal Elektroforez kütle spektrometresi kullanılarak yüksek üretilen iş ve kapsamlı uyuşturucu gözetim

New analytical methods are urgently needed to enable high-throughput, yet comprehensive drug screening, given an alarming opioid and prescription drug ...

An Electrochemical Cholesteric Liquid Crystalline Device for Quick and Low-Voltage Color Modulation

Bir elektrokimyasal Kolesterik sıvı kristal aygıt için hızlı ve düşük voltajlı renk modülasyon

We demonstrate a method for fabricating a prototype reflective display device that contains cholesteric liquid crystal (LC) as an active component. The ...