Name: use of magnetic resonance imaging and biopsy data to guide sampling procedures for prostate cancer biobanking
Uploaded: 2019-10-10T13:00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of Magnetic Resonance Imaging and Biopsy Data to Guide Sampling Procedures for Prostate Cancer Biobanking at JoVE.com

ويرغب المؤلفون في الاعتراف بسرطان البروستاتا في المملكة العربية البريطانية لتمويل SH تحت مركز التميز البريطاني لسرطان البروستاتا وزمالة السفر الجائزة (TLD-PF16-004) وحصان تحت الابتكار (PG14-018-TR2). وقد حظي هذا العمل بدعم الباحثين في مركز البحوث الطبية الحيوية في مستشفيات المعهد الوطني للبحوث الصحية بجامعه لندن.

ويلتزم البروتوكول بالمبادئ التوجيهية المحلية وتوافق عليه لجنه الأخلاقيات البحثية (المرجع 15/YH/0311).
ملاحظه: وبما ان هذه الطريقة تنطوي علي أخذ عينات من الانسجه البشرية ، يجب مراعاه جميع الإجراءات المحلية المتعلقة بالأخلاقيات والموافقة قبل بدء البروتوكول. قد يتم تضمين حالات استئصال البروستاتا الجذرية إذا كانت بيانات التصوير بالرنين المغناطيسي والخزعة متوفرة قبل الجراحة ، مع قطر الورم ≥ 5 ملم. وينبغي استبعاد الحالات إذا لم تكن آلافه المفهرسة محدده بشكل جيد ، اي ان التغييرات المنتشرة فقط مرئية بالرنين المغناطيسي.
1. جهاز تشريح البروستاتا
<ol><li>شراء جهاز تشريح البروستاتا (جدول المواد). بدلا من ذلك ، اطبع مقبض شفره باستخدام طابعه ثلاثية الابعاد كما تم نشرها سابقا10. ملاحظه: تم شراء الجهاز وشفرات المتاحة المستخدمة هنا ببموجب اتفاقيه نقل المواد من معهد أبحاث السرطان ، لندن ، المملكة العربية البريطانية.</li>
</ol>2. استهداف الأورام
<ol><li>مراجعه الملاحظات السريرية لتحديد آلافه المؤشر كما هو مبين من قبل خزعة تشخيصيه ، علي سبيل المثال ، الخلفي الأيسر.</li>
	<li>مراجعه صور التصوير بالرنين المغناطيسي لقياس موقع الورم أعلاه.<ol>
<li>العثور علي تسلسل حيث الورم هو الأكثر وضوحا في الطائرة المحورية ، علي سبيل المثال ، T2-المرجحة.</li>
		<li>انتقل من خلال الصور المحورية للعثور علي الصورة حيث الورم هو أكبر وطباعه الصورة للرجوع اليها.</li>
		<li>في الصورة الاكليليه المقابلة ، وقياس المسافة من قاعده البروستاتا إلى الموضع المحوري المحدد ، وطول كامل من البروستاتا من قمة إلى قاعده (مم) ، والطباعة للرجوع اليها.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. مجموعه من البروستاتا
<ol><li>التحقق من ملاحظات المريض لضمان الموافقة المستنيرة المناسبة تم الحصول عليها لهذا الاجراء وأي تطبيقات البحوث المصب.</li>
	<li>بعد استئصال البروستاتا الجذرية ، وجمع البروستات في وعاء جاف. تاكد من عدم أضافه الفورمالين أو مثبت آخر إلى البروستاتا.</li>
	<li>نقل إلى مكان معقم مناسب لأخذ العينات ، علي سبيل المثال ، غطاء التيار الرقائقي في مختبر الامراض.</li>
	<li>الشروع في أخذ العينات في أقرب وقت ممكن إذا كان مطلوبا الانسجه الطازجة. ملاحظه: بالنسبة لبعض التطبيقات (علي سبيل المثال ، تقييم الحمض النووي الذي لا ينبغي ان تتحلل بأسرع ما يكون RNA) ، قد يكون من المناسب تبريد العينة وأخذ عينات في اليوم التالي.</li>
</ol>4. اعداد العينات
<ol><li>اعداد غطاء المحرك الرقائقي وجهاز تشريح البروستاتا وفقا لإجراءات أزاله التلوث المحلية ، وذلك باستخدام تقنيه معقمه. هنا ، رش 70 ٪ الايثانول ويمسح عبر جميع الأسطح. استخدام الابر المعقمة أحاديه الاستخدام والمشرط. استخدام شفرات تقطيع اللحم تصل إلى ثلاث مرات ؛ يغسل بعد كل استخدام في الماء الساخن والصابون ، ثم رذاذ ويمسح مع 70 ٪ الايثانول.</li>
	<li>تزن البروستاتا (ز) باستخدام مقياس قياسي.</li>
	<li>الحبر البروستاتا. طلاء الجانب الأيسر مع الحبر الأزرق والجانب الأيمن مع الحبر الأسود. غطي الكبسولة الكاملة والحويصلات المنوية بالحبر للدلالة فيما بعد علي الهوامش الجراحية. ملاحظه: قد تختلف إجراءات التحبير محليا ويمكن تعديلها وفقا لذلك.</li>
</ol>5. البروستاتا التشريح
<ol><li>تجميع جهاز تشريح عن طريق إدخال الجدران عموديا في قاعده الموقف (الشكل 1ا).</li>
	<li>مكان البروستاتا بحيث قاعده وقمة تواجه الجدران المعاكسة ، مع الجانب الخلفي أسفل والامامي. ضع دبابيس الذهب حول البروستاتا. دفع البروستاتا إلى الداخل قليلا إذا لزم الأمر للحصول علي نوبة دافئ ، والتي سوف تدعم البروستاتا خلال تشريح.</li>
	<li>قياس طول البروستاتا من قاعده إلى قمة ، وذلك باستخدام مسطره ، وقارن مع طول البروستاتا كما يقاس بالرنين المغناطيسي. إذا تقلصت البروستاتا ، تطبيق تصحيح مخصص علي المسافة المتوقعة من قاعده لاستهداف شريحة عرضيه. علي سبيل المثال ، إذا كان طول البروستاتا الكامل في صوره التصوير بالرنين المغناطيسي هو 50 مم ، ولكن عند قياسه بمسطره عند هذه النقطة فقد تقلص إلى 45 مم ، وقلل من وضع التقطيع المتوقع بنسبه 10%.</li>
	<li>قياس من القاعدة إلى شريحة عرضيه المطلوب. اختيار دبوس الذي يجلس الأقرب إلى هذا القياس لشريحة حولها.</li>
	<li>ارتداء قفازات البريد الكتروني لمنع الاصابه ، وعقد جهاز تشريح (الشكل 1ب) ، شفرات مكان اما جانب دبوس المحددة واستخدام فاصل للحفاظ علي شفرات 5 ملم بعيدا. تاخذ شريحة ببطء وبحزم تحريك ريش إلى أسفل ، إلى الامام والخلف مع السكتات الدماغية الطويلة (الشكل 1ج). تاكد من فصل شريحة كامله قبل تفكيك الجهاز.</li>
	<li>أزاله الجدران والدبابيس واتخاذ بعناية شريحة علي ورقه معقمه من الفلين المجلس باستخدام القفازات.</li>
</ol>6. أخذ العينات الانسجه
<ol><li>افحص الشريحة العرضية بصريا وقارنها بالصورة المحورية للتصوير بالرنين المغناطيسي. في بعض الحالات ، قد تظهر منطقه الورم شاحب من الانسجه المحيطة بها.</li>
	<li>بالربت شريحة عرضيه بلطف. في بعض الحالات ، قد يشعر الورم أكثر حزما من الانسجه المحيطة بها.</li>
	<li>باستخدام صوره التصوير بالرنين المغناطيسي المحورية كدليل ، حدد مجالا واحدا أو أكثر لأخذ العينات.</li>
	<li>
تاخذ اللكمات خزعة من المنطقة المطلوبة من الانسجه.
	<ol>
<li>باستخدام لكمه 6 ملم ، ودفع لأسفل علي المنطقة المطلوبة من الانسجه.</li>
		<li>تويست لكمه الانسجه علي الفور وأسفل ضد الفلين لضمان الانفصال الكامل واستخدام مشرط حاد للفصل إذا لزم الأمر.</li>
		<li>أزاله لكمه ومكان في أنابيب/قوالب حسب الضرورة عن طريق إخراج باستخدام المكبس.</li>
		<li>كرر لمزيد من الأورام والعينات الحميدة كما هو مطلوب ، مع منفصلة اللكمات خزعة معقمه. الحبر الثقوب حيث تم التقاط اللكمات باللون الأحمر.</li>
		<li>لاحظ موقع كل لكمه مع وزن البروستاتا وأي ملاحظات علي لون الانسجه/المتانة.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. تقديم البروستاتا للتشخيص المحلي
<ol><li>دبوس البروستاتا إلى الفلين مع الابر استخدام واحد العقيمة قبل التثبيت من أجل منع انكماش الانسجه وتزييفها ، والتي يمكن ان تغير مظهر الهوامش الجراحية.</li>
	<li>بعد تثبيت الفلين ، وتقديم البروستاتا إلى قسم التشريح للتشخيص السريرية القياسية.</li>
</ol>8. أزاله التلوث من جهاز
<ol><li>التخلص من جميع المعدات المتاحة في مجاري النفايات الطبية الحيوية و/أو حاويات الكتل كما هو محدد محليا.</li>
	<li>تطهير غطاء التيار الرقائقي وجهاز تشريح البروستاتا وفقا لتقييمات المخاطر المحلية المناسبة للانسجه البشرية (علي سبيل المثال ، عن طريق الرش مع 70 ٪ EtOH والمسح).</li>
</ol>

<ol>
	<li>Sooriakumaran, P., Henderson, A., Denham, P., Langley, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+obtaining+prostate+tissue+for+gene+expression+profiling.">A novel method of obtaining prostate tissue for gene expression profiling.</a> International Journal of Surgical Pathology. 17 (3), 238-243 (2009).</li><li>Jhavar, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processing+of+radical+prostatectomy+specimens+for+correlation+of+data+from+histopathological,+molecular+biological,+and+radiological+studies:+a+new+whole+organ+technique.">Processing of radical prostatectomy specimens for correlation of data from histopathological, molecular biological, and radiological studies: a new whole organ technique.</a> Journal of Clinical Pathology. 58 (5), 504-508 (2005).</li><li>Wheeler, T. M., Lebovitz, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fresh+tissue+harvest+for+research+from+prostatectomy+specimens.">Fresh tissue harvest for research from prostatectomy specimens.</a> The Prostate. 25 (5), 274-279 (1994).</li><li>Esgueva, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Next-generation+prostate+cancer+biobanking:+toward+a+processing+protocol+amenable+for+the+International+Cancer+Genome+Consortium.">Next-generation prostate cancer biobanking: toward a processing protocol amenable for the International Cancer Genome Consortium.</a> Diagnostic Molecular Pathology. 21 (2), 61-68 (2012).</li><li>Dev, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biobanking+after+robotic-assisted+radical+prostatectomy:+a+quality+assessment+of+providing+prostate+tissue+for+RNA+studies.">Biobanking after robotic-assisted radical prostatectomy: a quality assessment of providing prostate tissue for RNA studies.</a> Journal of Translational Medicine. 9, 121 (2011).</li><li>Tolkach, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blind+Biobanking+of+the+Prostatectomy+Specimen:+Critical+Evaluation+of+the+Existing+Techniques+and+Development+of+the+New+4-Level+Tissue+Extraction+Model+With+High+Sampling+Efficacy.">Blind Biobanking of the Prostatectomy Specimen: Critical Evaluation of the Existing Techniques and Development of the New 4-Level Tissue Extraction Model With High Sampling Efficacy.</a> The Prostate. 77 (4), 396-405 (2017).</li><li>Warren, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+sampling+tissue+for+research+which+preserves+pathological+data+in+radical+prostatectomy.">Method for sampling tissue for research which preserves pathological data in radical prostatectomy.</a> The Prostate. 73 (2), 194-202 (2013).</li><li>Heavey, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PatiEnt+prOstate+samPLes+for+rEsearch,+a+tissue+collection+pathway+utilizing+magnetic+resonance+imaging+data+to+target+tumor+and+benign+tissue+in+fresh+radical+prostatectomy+specimens.">PatiEnt prOstate samPLes for rEsearch, a tissue collection pathway utilizing magnetic resonance imaging data to target tumor and benign tissue in fresh radical prostatectomy specimens.</a> The Prostate. 79 (7), 768-777 (2019).</li><li>Bailey, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VERDICT+MRI+validation+in+fresh+and+fixed+prostate+specimens+using+patient-specific+moulds+for+histological+and+MR+alignment.">VERDICT MRI validation in fresh and fixed prostate specimens using patient-specific moulds for histological and MR alignment.</a> NMR in Biomedicine. 32 (5), 4073 (2019).</li><li>Bourne, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apparatus+for+Histological+Validation+of+In+Vivo+and+Ex+Vivo+Magnetic+Resonance+Imaging+of+the+Human+Prostate.">Apparatus for Histological Validation of In Vivo and Ex Vivo Magnetic Resonance Imaging of the Human Prostate.</a> Frontiers in Oncology. 7, 47 (2017).</li></ol>

وليس لدي المؤلفين ما يفصحون عنه.

وتشمل الخطوات الهامه في هذا البروتوكول تحديد منطقه الورم لأخذ العينات ، وقياس البروستاتا ، وأخذ عينات الانسجه. أولا ، قياس التصوير بالرنين المغناطيسي لتحديد المنطقة الصحيحة لأخذ العينات هو المفتاح. نحن نظهر هذه الطريقة في الفيديو المصاحب. ومع ذلك ، نوصي أيضا بتاكيد القياسات مع اخصائي أشعه في الدرجة الاولي. الملاحظات السريرية واضحة التي تشير الباحث نحو منطقه صور التصوير بالرنين المغناطيسي التي تحتوي علي آلافه مؤشر مثاليه. ثانيا ، يجب اجراء قياس البروستاتا مع الرعاية ، وضمان ان يتم عقد الحاكم في زاوية لقياس طول كامل من قاعده إلى قمة ، موازيه لل الامامي من البروستاتا. ثالثا ، ينبغي تاكيد المناطق السرطانية قبل أخذ العينات من خلال الفحص البصري لشريحة الانسجه فيما يتعلق بصوره التصوير بالرنين المغناطيسي الاصليه ، وتحسس الانسجه (في بعض الحالات يمكن ان تشعر منطقه الورم بكثافة أكبر) ، وتقييم لون النسيج بصريا (في بعض حالات الورم سوف تظهر أكثر شاحب من الانسجه الحميدة المحيطة بها).
وقد تم تنفيذ هذا البروتوكول بالبالكامل في دوري/UCLH من قبل الباحثين دكتوراه غير السريرية, زميل علم الامراض, الاستشاريين علم الامراض, والفنيين البحوث. وفي تجربتنا ، يمكن استخلاص جميع خطوات البروتوكول في اطار عشر حالات بصرف الاعتبار عن الخلفية التقنية. ومع ذلك ، نوصي بالتدريب من اخصائي الاشعه فيما يتعلق بقياس التصوير بالرنين المغناطيسي والتدريب من طبيب الامراض فيما يتعلق بالتشريح في المقام الأول. يمكن تعديل البروتوكول باستخدام مقبض التقطيع المطبوع ثلاثي الابعاد ، كما تم نشره سابقا في10.
وتشمل القيود المحتملة لهذه التقنية خطر عرقله التشخيص. تشريح البروستاتا هو خطوه رئيسيه ، والتي يمكن ان تعيق علي الدرجات أو معدلات الهامش الإيجابي إذا فعلت بشكل غير صحيح. هناك نوعان من القضايا المحتملة هنا. أولا ، إذا تمت أزاله كل من آلافه المؤشر واستخدامها لتجريب الانسجه الطازجة علي الفور ، لن يتم اجراء التشخيص السريري الروتيني لهذه آلافه والمريض قد يساء تشخيصها بأنها مصابه بسرطان الصف السفلي. ولتجنب ذلك ، ينبغي علي الباحث مناقشه خطه أخذ العينات مع اخصائي الامراض الاستشارية الذي سيراجع القضية بشكل روتيني ، قبل أخذ العينات ، والاتفاق علي عدد ومكان العينات التي سيتم أخذها. قد يتم استبعاد الأورام الصغيرة محليا لهذا السبب. ثانيا ، إذا لم يتم تثبيت كبسوله البروستاتا بشكل صحيح إلى مجلس الفلين قبل التثبيت ، وهذا يمكن ان يسمح الانسجه الداخلية لانتفاخ الخارج اثناء التثبيت ، وتغيير الهوامش الجراحية. وهذا يمكن ان يؤدي إلى هامش إيجابي كاذبه, حيث يظهر الورم المتبقية للاقامه في كبسوله بحته بسبب تشويه الانسجه.
تكمن اهميه هذه التقنية فيما يتعلق بالأساليب الموجودة أساسا مع استهداف الأورام. وقد تم حتى الآن نشر مجموعه من الطرق لأخذ عينات من العينات الجذرية لاستئصال البروستاتا ؛ ومع ذلك ، هذه كلها تعتمد علي نهج أخذ العينات عشوائي كليا أو جزئيا1،2،3،4،5،6،7. استخدام الخزعة وخاصه بيانات التصوير بالرنين المغناطيسي هنا قد تحسنت الكفاءة ، مما يسمح لأخذ العينات المخفضة مع زيادة الثقة في الحصول علي الانسجه السرطانية8.
وتسمح التطبيقات المستقبلية لهذه الطريقة باعتماد مجموعه أوسع من التقنيات النهائية من الأساليب السابقة لأخذ العينات. علي سبيل المثال ، توافر الانسجه الطازجة التي لديها احتمال كبير لان يكون الورم يعني انه يمكن استخدام تقنيات الانسجه الطازجة الأكثر تكلفه و/أو كثيفه العمالة ، حيث ان العديد من العينات غير مطلوبه لضمان وجود الورم. وهذا يمكن ان تشمل وليست مقتصرة علي, السابقة الجسم البيولوجي الثقافة, التصوير بالرنين المغناطيسي السابقة, صور متقدمة وناسخه.

الوصول إلى الانسجه البشرية عاليه الجودة سرطان البروستاتا شرط أساسي لقياده البحوث الفعالة في هذا المجال. وهناك عدد من الطرق القائمة لعينه من انسجه البروستاتا بعد استئصال البروستاتا الجذرية للبحوث. عاده ما تنطوي علي استخدام الخزعات لكمه لاتخاذ عينات عشوائية من شريحة جديده ، مجمده أو ثابته من انسجه البروستاتا ، ويؤكد باثر رجعي ما إذا كان الورم موجودا في كل عينه من الدم & يووسين (H & E) كما تقييمها من قبل اخصائي امراض المسالك البولية1،2،3،4،5. وقد قام استعراض حديث بتجميع لمحه عامه عن هذه الأساليب الحالية6. هذه الطرق مفيده لبعض التطبيقات المصب ، حيث يمكن تخزين الانسجه وتقييمها لمحتوي الورم في وقت لاحق ، مثل التحليلات الجينية علي نطاق واسع مثل الاتحاد الدولي لجينوم السرطان (ICGC) وأطلس الجينوم السرطاني (TCGA) 4,7. ومع ذلك ، يمكن تحسين هذه الطرق في إذا كنا لاستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) و/أو البيانات خزعة لاستهداف مناطق معينه من البروستاتا لأخذ العينات. ومن شان ذلك ان يحسن المنهجية بطريقتين ؛ أولا ، عن طريق الحد من عدد عينات الانسجه التي تم جمعها ، وزيادة الكفاءة والحد من الضغط علي أقسام الامراض وتكلفه التخزين ، وثانيا ، من خلال السماح الانسجه الطازجة لاستخدامها علي الفور دون الحاجة إلى تاكيد فوري من محتوي الورم ، لحاله جديده من التقنيات المصب الفن مثل التصوير الانسجه الحية ، الجيل العضوي أو الثقافة المجرية السابقة. وقد أدت هذه الحاجة البحثية إلى تطوير الشعب (المريض عينات البروستاتا للبحث) الأسلوب ، والنتائج من الحالات 84 الاولي التي استخدمت بيوانكيد الناس نشرت مؤخرا8. وقد تم أيضا نشر الاختلاف من هذا الأسلوب مع ثلاثه الابعاد (3d) المطبوعة جهاز التشريح والعفن المريض محدده ، من أجل تسهيل التصوير بالرنين المغناطيسي السابق الجسم الخارجي علي الانسجه قبل وبعد تثبيت9،10.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1040px;" width="1039">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:208px;">6 mm biopsy punch</td>
			<td style="width:247px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:115px;">13404607</td>
			<td style="width:471px;">Disposable biopsy punches for removing 6 mm tissue samples</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:208px;">Black Ink</td>
			<td style="width:247px;">Leica Biosystems</td>
			<td style="width:115px;">3801753</td>
			<td>Tissue marking &#38; margin dye</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:208px;">Blue Ink</td>
			<td style="width:247px;">Leica Biosystems</td>
			<td style="width:115px;">3801751</td>
			<td>Tissue marking &#38; margin dye</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:208px;">Chainmail hand glove</td>
			<td style="width:247px;">Arco</td>
			<td>1456803</td>
			<td>Chainmail gloves to protect hand during slicing</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:208px;">Cork board</td>
			<td style="width:247px;">Fisher Scientific</td>
			<td>12396447</td>
			<td>Cork board for pinning prostate to following sampling procedure</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:208px;">Needles</td>
			<td style="width:247px;">SLS (Scientific Laboratory supplies)</td>
			<td>SYR6112</td>
			<td>Sterile needles to use to pin tissue to cork board following sampling</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:208px;">Prostate slicing aparatus</td>
			<td style="width:247px;">Insitute of Cancer Research, London</td>
			<td style="width:115px;">NA - must be obtained under MTA</td>
			<td>A kit containing the slicer handle, blades, spacer, base, walls and pins</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

use of magnetic resonance imaging and biopsy data to guide sampling procedures for prostate cancer biobanking

الطرق السابقة لأنسجه البروستاتا بيوانكينج ، بعد استئصال البروستاتا الجذري ، وشملت عموما أخذ العينات عشوائي. من أجل زيادة الكفاءة ، وتمكين مجموعه أكبر من التطبيقات المصب ، تم تطوير طريقه أكثر استهدافا لأخذ عينات من انسجه البروستاتا. هنا نستخدم كلا من التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) وبيانات الخزعة لاستهداف مناطق معينه من الجهاز لأخذ العينات. وتشمل هذه الطريقة استخدام جهاز تشريح البروستاتا المنشورة سابقا الذي يزيل شريحة 5 ملم عرضيه من منطقه محدده سلفا من البروستاتا ، تليها أزاله الخزعات 6 ملم لكمه من مناطق محدده مسبقا من هذه الشريحة. ويمكن تخزين هذه العينات المجمدة أو الثابتة لأغراض بيوانكينج ، أو استخدامها طازجه علي الفور مع 70 ٪ من الثقة من محتوي الورم ، بالمقارنة مع 10 ٪ من الثقة نهج أخذ العينات عشوائي. وهذا يتيح استخدام جميع التقنيات القياسية المصب مثل الجينوم ، والبروتينات أو العمل النسيجي ، ولكن أيضا العمل الذي يتطلب الانسجه الطازجة مثل التصوير الانسجه الحية أو الثقافة المجرية السابقة.

يمكن استخدام الانسجه البروستاتا الطازجة عينات باستخدام أسلوب الناس لمجموعه متنوعة من التقنيات المصب ، بما في ذلك التسلسل الجيني والثقافة المجرية السابقة. وقد سبق ان نشرت الحالات الاولي 59 التي عينت باستخدام هذه الطريقة بالمقارنة مع نسخه سابقه من الأسلوب ، إلى جانب البيانات الاوليه للمصب8. الوقت من أول تشريح البروستاتا إلى تجميد/تحديد الخزعات لكمه هنا كان ما يقرب من 1 دقيقه ، والتي تم الاحتفاظ بها إلى الحد الأدنى لتجنب تدهور الحمض الريبي النيبالي. الوقت من أزاله البروستاتا إلى تشريح البروستاتا يجب أيضا ان تبقي إلى الحد الأدنى ، علي الرغم من هنا استغرق هذا حوالي 20 دقيقه بسبب لدينا مختبرات المسرح وعلم الامراض يجري في مواقع مختلفه.
اعتمادا علي تطبيق المصب ، وعاده ما يتم أخذ عينات اثنين علي الأقل: واحد من منطقه الانسجه السرطانية المتوقعة واحد من منطقه من الانسجه الحميدة المتوقعة. المقياس الرئيسي للنجاح في طريقه أخذ العينات نفسها هو تقييم محتوي الورم في عينه معينه.
للدخول في مشروع الجينوم 100,000 ، يجب تقييم قسم الانسجه الملونة H & E من قبل اخصائي المسالك البولية ، ويجب ان تحتوي العينة علي ما لا يقل عن 40 ٪ من الخلايا السرطانية. قد لا يزال يتم تضمين العينات التي تحتوي علي اقل من 40% الورم في المشروع إذا تم بنجاح الماكرو. من الحالات الاولي 92 العينات بهذه الطريقة, 64% الواردة علي الأقل 40% الورم وقدمت إلى 100,000 الجينوم المشروع دون تشريح ماكروكلي. تم استخراج الحمض النووي وكان من الغلة والجودة الكافية في جميع الحالات (الجدول 1). وقد سبق ان نشرت مجموعه فرعيه أوليه من 59 من هذه العينات بالمقارنة مع الطريقة السابقة8.
للثقافة المجرية السابقة, الورم المتطابقة والانسجه الحميدة يجب ان تكون ذات نوعيه كافيه لتحمل الثقافة 72 h دون تدهور كبير. وقد تم استزراع عينات الانسجه المتعددة من إجمالي ثلاثه مرضي بنجاح8.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60216/60216fig1.jpg"> الشكل 1: جهاز تشريح البروستاتا. تم الحصول علي هذا الجهاز ببموجب اتفاقيه نقل المواد من معهد أبحاث السرطان. (ا) يتم ادراج الجدران عمودي علي القاعدة ، ويتم ادراج دبابيس الذهب في القاعدة المحيطة بالبروستاتا (البروستاتا لا المصورة). (B) يتم إدخال شفرات موازيه قابله للاستبدال في مقبض النصل. (ج) تمرير شفرات بين دبابيس الذهب من أجل شريحة 5 ملم القسم من البروستاتا. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60216/60216fig1large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>ن (٪)</td>
		</tr>
<tr>
<td>أصابه (> 40 ٪ ورم)</td>
			<td>59 (64%)</td>
		</tr>
<tr>
<td>أصابه متحيزة (5-30% ورم)</td>
			<td>6 (7 في المائة)</td>
		</tr>
<tr>
<td>الانسه (0% ورم)</td>
			<td>27 (29 في المائة)</td>
		</tr>
<tr>
<td>مجموع</td>
			<td>92 (100%)</td>
		</tr>
</tbody></table>الجدول 1: معدل ضرب الورم. تم تحديد معدل ضرب الورم من قبل خبير استشاري متخصص في سرطان البروستاتا ، بعد مراجعه الانسجه الملونة H & E. تم تحديد محتوي الخلايا السرطانية من > 40 ٪ لتكون مناسبه لادراجها في 100,000 الجينوم المشروع ، وفقا للمبادئ التوجيهية الجينوم إنكلترا.

Watch this Scientific Journal Video about Use of Magnetic Resonance Imaging and Biopsy Data to Guide Sampling Procedures for Prostate Cancer Biobanking at JoVE.com

Use of Magnetic Resonance Imaging and Biopsy Data to Guide Sampling Procedures for Prostate Cancer Biobanking

هذا الأسلوب ينطوي علي استخدام البيانات التشخيصية السريرية لمرضي سرطان البروستاتا من أجل توجيه إجراءات أخذ العينات ، عندما النسيج البيوانكينج بعد استئصال البروستاتا الجذرية. هذا يتغلب علي القضايا مع أساليب نشرت سابقا حول الكفاءة وتوافر الانسجه الطازجة لمجموعه أوسع من التطبيقات المصب.

استخدام التصوير بالرنين المغناطيسي وبيانات الخزعة لتوجيه إجراءات أخذ العينات لسرطان البروستاتا بيومانكينج

Previous methods for biobanking prostate tissue, following radical prostatectomy, generally involved random sampling. In order to increase efficiency, and ...

أهمية هذا البروتوكول على طرق أخذ العينات البروستاتا السابقة هو أنه يعطينا ثقة أعلى من استهداف أنسجة الورم الطازجة للبحوث. لذلك، يمكننا أن نأخذ الأنسجة الطازجة مباشرة إلى المختبر ونستخدمها في الثقافة أو التصوير لأن لدينا ثقة عالية من العينات التي هي ورم والتي هي حميدة. نصيحتي الرئيسية عند تعلم هذه التقنية هي العمل مع أخصائي الأمراض المحلي الخاص بك حتى لا يتم اختراق التشخيص النهائي للأنسجة والتقرير.لاستهداف موقع الورم، راجع صور التصوير بالرنين المغناطيسي لقياس الموقع فوق الورم والعثور على التسلسل الذي يظهر به الورم أكثر في المستوى المحوري. قم بالتمرير عبر الصور المحورية لتحديد الصورة التي يكون الورم فيها أكبر وطباعة الصورة كمرجع. في الصورة التاجية المقابلة، وقياس المسافة من قاعدة البروستاتا إلى موقف محوري المحدد وقياس الطول الكامل للبروتاتا من القمة إلى القاعدة في ملليمترات.ثم طباعة هذه القياسات ووضع علامة على مواقع الورم للرجوع إليها. بعد أن تم جمع العينة، تعقيم غطاء محرك تدفق الفاتنة وجهاز تشريح البروستاتا مع 70٪ الإيثانول ووزنها البروستاتا على مقياس قياسي في غرام. ثم طلاء الجانب الأيمن بالحبر الأزرق والجانب الأيسر من العينة بالحبر الأسود الذي يغطي الكبسولة الكاملة والحويصلات المنوية بالحبر للسماح بالتمييز في الهوامش الجراحية.لشريحة البروستاتا، ووضع الأنسجة مع قاعدة و القمة التي تواجه الجدران المعاكسة للجهاز مع الجانب الخلفي إلى أسفل والجانب الأمامي حتى. ضع دبابيس الذهب حول عينة الأنسجة دفع البروستاتا إلى الداخل قليلا إذا لزم الأمر لتحقيق نوبة دافئ وقياس طول البروستاتا من القاعدة إلى القمة لمقارنة هذا القياس إلى طول البروستاتا التي يتم قياسها عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي. إذا تقلصت البروستاتا، وضبط موقف تشريح المتوقعة من قبل النسبة المئوية المناسبة من التخفيض.بعد ذلك، قم بالقياس من القاعدة إلى الشريحة العرضية المطلوبة وحدد الدبوس الأقرب إلى هذا القياس لشريحة حولها. ارتداء قفازات chainmail لمنع الإصابة، ووضع شفرات من جهاز تشريح على جانبي دبوس المحدد واستخدام المسافة للحفاظ على ريش خمسة ملليمترات. للحصول على شريحة، واستخدام السكتات الدماغية طويلة لتحريك ببطء ولكن بحزم ريش إلى أسفل، إلى الأمام، والخلف مؤكدا من خلال الشعور بأن شريحة كاملة قد فصل قبل تفكيك الجهاز.ثم إزالة الجدران والدبابيس واستخدام القفازات لنقل بعناية شريحة على قطعة عقيمة من الفلين. بعد الحصول على العينة، فحص بصريا شريحة عرضية للمقارنة مع صورة التصوير بالرنين المغناطيسي المحوري. في بعض الحالات، قد تظهر منطقة الورم أكثر شحوباً من الأنسجة المحيطة.Palpate شريحة عرضية بلطف. قد يشعر الورم أكثر ثباتًا من الأنسجة المحيطة. باستخدام صورة التصوير بالرنين المغناطيسي المحوري كدليل، حدد واحد أو أكثر من المناطق لأخذ العينات واستخدام لكمة ستة ملليمترات لدفع إلى أسفل على منطقة الأنسجة من الفائدة.تحريف لكمة الأنسجة على الفور وإلى أسفل ضد الفلين لضمان فصل كامل باستخدام مشرط حاد لفصل عينة خزعة من العينة حسب الضرورة. عندما يتم الحصول على العينة، إزالة لكمة واستخدام المكبس لإخراج العينة في الحاوية المناسبة لتحليل المصب اللاحقة. ثم الحبر الثقوب حيث اتخذت اللكمات باللون الأحمر ونلاحظ موقع كل لكمة جنبا إلى جنب مع وزن البروستاتا وأي ملاحظات حول لون الأنسجة والحزم.دبوس كبسولة البروستاتا إلى الفلين لمنع البيلغينغ أثناء التثبيت. غمر البروستاتا والفلين في تثبيت ضمان العينة مغمورة بالكامل. في هذا التحليل التمثيلي، من أول 92 حالة تم أخذ عينات منها كما هو موضح، احتوى 64٪ من العينات على ما لا يقل عن 40٪ من الورم وتم تقديمها إلى مشروع الجينوم 100000 دون ميكروديستيكشن.وقد استُخرج الحمض النووي وكان له مردود كاف وجودة كافية في جميع الحالات، ونشرت مجموعة فرعية أولية من 59 عينة من هذه العينات للمقارنة مع طريقة سابقة لأخذ العينات. بعد هذا الإجراء، يمكن استخدام عينات الورم الطازجة للتصوير الحي أو الثقافة مما يسمح لنا باختبار المؤشرات الحيوية الجديدة والأدوية ومعرفة المزيد عن بيولوجيا الورم. الآن بعد أن نستخدم هذه الطريقة بشكل روتيني ، لقد كنت قادرا على تقديم مشروع باستخدام هذا النسيج لثقافة الجسم الحي السابق للنظر في مجموعات جديدة من العلاجات قبل الظهر لسرطان البروستاتا.

Research

JoVE Journal

Medicine

Magnetic Resonance Derived Myocardial Strain Assessment Using Feature Tracking

الرنين المغناطيسي المشتقة عضلة القلب عن طريق تقييم سلالة ميزة تتبع

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that ...

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

ومتعددة الوسائط التصوير من الأوعية الدموية في نموذج الفئران عاري من سرطان الثدي الإنبثاث العظام باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي، الحجمي التصوير المقطعي والموجات فوق الصوتية

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

Microarray-based Identification of Individual HERV Loci Expression: Application to Biomarker Discovery in Prostate Cancer

تحديد القائمة على ميكروأري من الفردية هيرفي الامكنه التعبير: التطبيق على العلامات البيولوجية ديسكفري في سرطان البروستاتا

The prostate-specific antigen (PSA) is the main diagnostic biomarker for prostate cancer in clinical use, but it lacks specificity and sensitivity, ...

Tracking the Mammary Architectural Features and Detecting Breast Cancer with Magnetic Resonance Diffusion Tensor Imaging

تتبع الثديية الميزات المعمارية والكشف عن سرطان الثدي مع الرنين المغناطيسي التصوير إنتشار العضلة الشادة

Breast cancer is the most common cause of cancer among women worldwide. Early detection of breast cancer has a critical role in improving the quality of ...

Quantitative Magnetic Resonance Imaging of Skeletal Muscle Disease

الكمي التصوير بالرنين المغناطيسي من مرض العضلات والهيكل العظمي

Quantitative magnetic resonance imaging (qMRI) describes the development and use of MRI to quantify physical, chemical, and/or biological properties of ...

Dynamic Contrast Enhanced Magnetic Resonance Imaging of an Orthotopic Pancreatic Cancer Mouse Model

التباين الديناميكي المحسن التصوير بالرنين المغناطيسي لنموذج مثلي سرطان البنكرياس ماوس

Dynamic contrast enhanced magnetic resonance imaging (DCE-MRI) has been limitedly used for orthotopic pancreatic tumor xenografts due to severe ...

Simultaneous PET/MRI Imaging During Mouse Cerebral Hypoxia-ischemia

في وقت واحد التصوير PET / MRI خلال الماوس الدماغي نقص الأكسجة-نقص التروية

Dynamic changes in tissue water diffusion and glucose metabolism occur during and after hypoxia in cerebral hypoxia-ischemia reflecting a bioenergetics ...

Cardiac Magnetic Resonance Imaging at 7 Tesla

القلب التصوير بالرنين المغناطيسي في 7 تسلا

CMR at an ultra-high field (magnetic field strength B0&#160;&#8805; 7 Tesla) benefits from the signal-to-noise ratio (SNR) advantage inherent at higher ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

مرحلة التباين صور الرنين المغناطيسي في الشريان السباتي المشترك الفئران

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...

Quantification of Levator Ani Hiatus Enlargement by Magnetic Resonance Imaging in Males and Females with Pelvic Organ Prolapse

التحديد الكمي لتوسيع الفرجة العاني عضلة رافعة بالتصوير بالرنين المغناطيسي في الذكور والإناث مع انسدال الجهاز الحوض

Here we present a protocol to examine the levator ani hiatus in males and females with pelvic organ prolapse, during the Valsalva maneuver and while ...