Name: bulk droplet vitrification for primary hepatocyte preservation
Uploaded: 2019-10-25T13:00:00
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I finanziamenti degli Stati Uniti National Institutes of Health (R01DK096075, R01DK107875 e R01DK114506) e del Dipartimento della Difesa degli Stati Uniti (DoD RTRP W81XWH-17-1-0680) sono molto riconosciuti.

I principali isolati di epatociti per questo protocollo sono stati eseguiti dal Cell Resource Core (CRC) presso il Massachusetts General Hospital, Boston, Massachusetts, USA. Il protocollo sugli animali (#2011N000111) è stato approvato dall'Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) del Massachusetts General Hospital.
1. Vitrificazione delle gocce
<ol><li>Preparare le soluzioni di vetrificazione.
	<ol>
<li>Aggiungere 40 mg di albumina di siero bovino (BSA) a 17,0 m...

<ol>
	<li>Carpentier, B., Gautier, A., Legallais, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artificial+and+bioartificial+liver+devices:+present+and+future.">Artificial and bioartificial liver devices: present and future.</a> Gut. 58 (12), 1690-1702 (2009).</li><li>Fox, I. J., Chowdhury, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatocyte+transplantation:+Hepatocyte+transplantation.">Hepatocyte transplantation: Hepatocyte transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 4, 7-13 (2004).</li><li>Hughes, R. D., Mitry, R. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bulk+Droplet+Vitrification:+An+Approach+to+Improve+Large-Scale+Hepatocyte+Cryopreservation+Outcome.">Bulk Droplet Vitrification: An Approach to Improve Large-Scale Hepatocyte Cryopreservation Outcome.</a> Langmuir. , (2019).</li><li>Parmegiani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sterilization+of+liquid+nitrogen+with+ultraviolet+irradiation+for+safe+vitrification+of+human+oocytes+or+embryos.">Sterilization of liquid nitrogen with ultraviolet irradiation for safe vitrification of human oocytes or embryos.</a> Fertility and Sterility. 94 (4), 1525-1528 (2010).</li><li>Best, B. 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La crioconservazione degli epatociti con congelamento lento si traduce in ridotta vitalità e funzione metabolica. La vetrificazione offre un'alternativa promettente per la crioconservazione classica, poiché il congelamento delle lesioni è completamente evitato9. Tuttavia, la pre-incubazione con CPA è necessaria per ridurre la velocità di raffreddamento critica8. Di conseguenza, la vetrificazione è ostacolata dalla tossicità CPA17 e limitata a ...

La perdita di vitalità cellulare e funzione metabolica dopo la crioconservazione degli epatociti è ancora un problema importante che limita le applicazioni cliniche1,2,3. Il metodo di riferimento della crioconservazione dell'epatocito è il congelamento lento, che viene eseguito pre-incubando gli epatociti con CPA (solfuro dimetilo [DMSO], glucosio e albumina) e il successivo congelamento del tasso controllato (a circa 1 temperature criogeniche4,5. Nonostante molte ottimizzazioni segnalate, tossicità CPA insieme a squilibri osmotici dannosi durante il congelamento e lo stress meccanico della formazione del ghiaccio rimangono svantaggi fondamentali di congelamento lento6,7.
La vetrificazione offre un vantaggio rispetto al congelamento lento in quanto la lesione dovuta alla formazione di ghiaccio è completamente evitata da una transizione di fase diretta dell'acqua nello stato del vetro6. Tuttavia, per raggiungere la temperatura di transizione del vetro di acqua pura (-137 gradi centigradi), l'acqua deve essere raffreddata a velocità nell'ordine di un milione di gradi Celsius al secondo (cioè la velocità di raffreddamento critica) per evitare la formazione di ghiaccio al di sopra della temperatura di transizione del vetro8 . L'aggiunta di CPA può ridurre la velocità di raffreddamento critica e aumentare la temperatura di transizione del vetro delle soluzioni acquose9. Tuttavia, anche con elevate concentrazioni di CPA (ad esempio, 40% v/v DMSO o superiore) i tassi di raffreddamento rapido sono comunque necessari per il successo della vitrificazione8,9.
I tassi di raffreddamento richiesti e le elevate concentrazioni di CPA provocano due importanti inconvenienti della vetrificazione. In primo luogo, per consentire un raffreddamento rapido, i campioni devono avere una massa termica bassa. In secondo luogo, per raggiungere elevate concentrazioni di CPA evitando lesioni osmotiche, i CPA devono essere lentamente introdotti ed equilibrati completamente tra i compartimenti intra-eextracellulari6. Questo aumenta il tempo di esposizione delle cellule alle CPA tossiche. Insieme, questo rende la vitrificazione un processo ingombrante che è limitato a pochi campioni di piccole dimensioni (microlitri) alla volta. Il vetrificazione delle goccioline è stata proposta come una potenziale soluzione a tali restrizioni. Esponendo piccole goccioline cariche di cellule (nanolitri) all'azoto liquido, il tasso di raffreddamento è notevolmente aumentato, il che consente di conseguenza una notevole riduzione della concentrazione di CPA10,11,12 ,13,14. Anche se più ugelli che generano gocciolette ad alta frequenza potrebbero potenzialmente essere utilizzati simultaneamente, la dimensione estremamente ridotta delle gocciolamenti limita la velocità effettiva ai microlitri al minuto10, il che preclude una vetrificazione efficiente delle grandi cellule volumi con grandi quantità di tassi di lavorazione più elevati nell'ordine dei millilitri al minuto.
Recentemente è stato dimostrato che questi limiti intrinseci di vetrificazione possono essere superati da vetrificazione gocciolamento alla rinfusa15. Questo nuovo metodo sfrutta la rapida disidratazione osmotica per concentrare una concentrazione intracellulare di CPA del 7,5% v/v glicole di etilene e DMSO immediatamente prima della vitrificazione, eliminando la necessità di un completo equilibrato di concentrazioni di CPA tossici. La disidratazione cellulare viene eseguita in un dispositivo fluido da una breve esposizione degli epatociti a un'alta concentrazione extracellulare di CPA. Anche se questa esposizione provoca una rapida disidratazione osmotica, è troppo breve per l'alta concentrazione di CPA per diffondersi nelle cellule. Immediatamente dopo la disidratazione, le cellule vengono caricate in goccioline che sono direttamente vetrificate in azoto liquido. Questo metodo elimina la necessità di un assorbimento intracellulare completo di alte concentrazioni di CPA, mentre l'elevata concentrazione extracellulare di CPA consente la vitrificazione di goccioline di grandi dimensioni, con conseguenti elevati volumi di throughput con una tossicità CPA minima.
La vetrificazione del vetrino delle gocce migliora la vitalità diretta e a lungo termine dopo la conservazione, così come la morfologia e la funzione metabolica degli epatociti del ratto primario rispetto alla crioconservazione classica con congelamento lento15. Questo manoscritto fornisce i dettagli metodologici per la vetrificazione delle gocce di rattociti primari.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD Disposable 3 mL Syringes with Luer-Lok Tips</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-823-435</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beaker</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS1000-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Belzer UW Cold Storage Solution</td>
			<td>Bridge to Life</td>
			<td>BUW-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cole-Parmer Female Luer to 1/16&#34; low-profile semi-rigid tubing barb, PP</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>EW-45508-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryogentic stroage tank / Cryotank</td>
			<td>Chart Industries</td>
			<td>MVE 800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM, powder, high glucose, pyruvate</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12800-082</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylene Glycol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>107-21-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra long forceps</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-316C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand Higher-Speed Easy Reader Plastic Centrifuge Tubes - Flat top closure</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>06-443-18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fishing line</td>
			<td>Stren</td>
			<td>SOFS4-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid nitrogen</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>7727-37-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masterflex L/S Platinum-Cured Silicone Tubing, L/S 14</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>EW-96410-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mix Tips, For Use With 3HPW1</td>
			<td>Grainger</td>
			<td>3WRL7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nalgene Polypropylene Powder Funnel</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>4252-0100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 20 ga</td>
			<td>Becton Dickinson (BD)</td>
			<td>305175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm M - Flexible film</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7793-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor Blade</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spatula</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>EW-06369-18</td>
			<td>&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steriflip sterile filter</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SE1M179M6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose (Crystalline/Certified ACS)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S5-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>New Era Pump Systems Inc.</td>
			<td>NE-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo-Flask Benchtop Liquid Nitrogen Container</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>2122</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bulk droplet vitrification for primary hepatocyte preservation

La vetrificazione è una promettente alternativa senza ghiaccio per la crioconservazione classica a freddo (a circa 1 omin/min) di campioni biologici. La vetrificazione richiede velocità di raffreddamento estremamente veloci per ottenere la transizione dell'acqua nella fase del vetro, evitando la formazione dannosa di ghiaccio. Sebbene la pre-incubazione con agenti crioprotettivi (CPA) possa ridurre il tasso di raffreddamento critico dei campioni biologici, sono generalmente necessarie elevate concentrazioni per consentire la crioconservazione senza ghiaccio mediante vitrificazione. Di conseguenza, la vetrificazione è ostacolata dalla tossicità della CPA e limitata a piccoli campioni che possono essere raffreddati rapidamente. Recentemente è stato dimostrato che questi limiti intrinseci possono essere superati dalla vetrificazione delle gocce di gocciolamento. Utilizzando questo nuovo metodo, le cellule vengono prima pre-incubate con una bassa concentrazione di CPA intracellulare. Sfruttando una rapida disidratazione osmotica, il CPA intracellulare è concentrato direttamente prima della vitrificazione, senza la necessità di equilibrare pienamente le concentrazioni di CPA tossiche. La disidratazione cellulare viene eseguita in un dispositivo fluido e integrata con la generazione continua ad alta velocità effettiva di goccioline di grandi dimensioni che sono vetrificate in azoto liquido. Questo metodo di crioconservazione senza ghiaccio con tossicità CPA minima è adatto per grandi quantità di cellule e si traduce in una maggiore vitalità epatocite e funzione metabolica rispetto alla crioconservazione classica a congelamento lento. Questo manoscritto descrive in dettaglio i metodi per il successo della vetrificazione delle gocce di gocciolamento.

Gli epatociti primari appena isolati provenienti da cinque diversi fegati di ratto sono stati utilizzati per un confronto diretto tra la vetrificazione delle goccioline sfuse e la crioconservazione classica utilizzando i protocolli di congelamento lento preminenti riportati nella letteratura4, 5.In breve, gli epatociti sono stati sospesi in UW integrati con BSA (2,2 mg/mL), glucosio (333 mM) e DMSO (10% v/v) e congelati con un congelatore a tasso controllato. Do...

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Bulk Droplet Vitrification for Primary Hepatocyte Preservation

Questo manoscritto descrive un metodo di crioconservazione senza ghiaccio per grandi quantità di epatociti di ratto per cui le cellule primarie sono pre-incubate con agenti crioprotettivi a bassa concentrazione e vetrificate in grandi goccioline.

Vitrificazione delle gocce di gocciolamento per la conservazione degli epatiti primari

Vitrification is a promising ice-free alternative for classic slow-freezing (at approximately 1 &#176;C/min) cryopreservation of biological samples. ...

La vetrificazione è tipicamente gestita dalla tossicità degli agenti crioprotettivi. E re-inserito in piccoli campioni che possono essere raffreddati velocemente. Questo protocollo consente la vetrificazione di grandi quantità di cellule durante l'utilizzo di una bassa concentrazione di CPA durante la pre-incubazione.Utilizzando una rapida disidratazione osmotica, il CPA a bassa inter cellar viene concentrato nel dispositivo fluido direttamente prima della vetrificazione. Ciò elimina la necessità di concentrazioni di CPA tossiche completamente equilibrati. La vetrificazione delle goccioline sfuse può fornire epatociti vitali e metabolicamente attivi per l'uso di trapianti di epatociti e dispositivi epatici bio-artificiali che attualmente siamo ostacolati da esiti inadeguati dopo la crioconservazione.Questo metodo può potenzialmente essere adattato per la vetrificazione di altri tipi di cellule che devono essere crioconsenti in grandi quantità, come gli emoderivi o le cellule staminali, tra gli altri. Per iniziare, fare la soluzione di vetrificazione 1 aggiungendo 40 milligrammi di BSA a 17,0 millilitri di soluzione dell'Università del Wisconsin. Utilizzare un filtro da 0,22 micrometri per filtrare sterilemente la soluzione e conservare a quattro gradi Celsius.Effettuare la soluzione di vetrificazione 2 come descritto nel protocollo. E sterile filtrarlo attraverso un filtro da 0,22 micrometri. Caricare 3,5 millilitri di soluzione V2 filtrata sterile in una siringa da tre millilitri e conservare a quattro gradi Celsius.Per preparare l'apparato di vetrificazione delle goccioline sfuse, in primo luogo, tagliare lungo un lato della manica grigia esterna degli aghi di miscelazione. Piegare il manicotto aperto per rimuoverlo dall'ago di miscelazione. Quindi, tagliare l'ago di miscelazione a una lunghezza di 20 millimetri e inserire la sua uscita di taglio in un ago di iniezione calibro 20.Far scorrere due sezioni di tubi di silicio da 25 millimetri sopra le entrate dell'ago di miscelazione. E assicurarsi la loro posizione con la colla. Sterilizzare questo assemblaggio in autoclave.Riempire un pallone Dewar sterile con azoto liquido. E sterilizzare l'esterno con isopropanolo prima di posizionare in una cappa sterile per la coltura di cellule di flusso Laminer. Assicurarsi di indossare dispositivi di protezione individuale appropriati in quanto l'azoto liquido può causare gravi ustioni.Per creare il dispositivo di raccolta goccioline inserire un imbuto con lo stesso diametro esterno del diametro interno del Dewar, in un tubo conico da 50 millilitri. Utilizzando forcep di grandi dimensioni, premere lentamente il dispositivo di raccolta delle goccioline verso il basso nell'azoto liquido nella sua posizione verticale finale. Assicurarsi che il tubo conico poggia in posizione verticale nella parte inferiore del Dewar.E il livello di azoto liquido è inferiore di un centimetro rispetto al bordo dell'imbuto. Per montare una pompa per siringhe in posizione verticale sulla parete del cappuccio di coltura cellulare, legare una corda dai piedi della pompa della siringa alle viti sporgenti dalla parete del cofano di coltura cellulare. Quindi, posizionare l'azoto liquido Dewar con il dispositivo di raccolta delle goccioline sotto la pompa della siringa montata verticalmente.Dopo aver ottenuto epatociti di ratto appena isolati, contare la concentrazione dello stock per esclusione blu tri-pan. E trasferire 40 milioni di epatociti vitali in un tubo conico da 50 millilitri. Centrifugare gli epatociti a 50 volte G per cinque minuti senza pausa.Aspirare il supernatante. Sospendere di nuovo gli epatociti in 3,4 millilitri di soluzione V1. E incubare sul ghiaccio per tre minuti.Quindi, aggiungere 150 microlitri di DMSO e 150 microlitri di EG;mescolare delicatamente e incubare nuovamente sul ghiaccio per tre minuti. Aggiungere nuovamente 150 microlitri di DMSO e 150 microlitri di EG agli epatociti e mescolare delicatamente. Caricare 3,5 millilitri di questa miscela in una siringa da tre millilitri.Inserire la siringa con epatociti pre-incubati e la siringa con soluzione V2 sull'adattatore della pompa della siringa. Attaccare due adattatori femmina Luer Lock per tubi-barbe alle siringhe. E far scorrere il tubo di silicio del gruppo dell'ago di miscelazione sui raccordi per barbe.Posizionare l'intero gruppo nella pompa della siringa. Tre minuti dopo l'ultima edizione di DMSO ed EG agli epatociti, avviare la pompa a due millilitri al minuto. Dopo che tutti gli epatociti sono stati aggiunti all'azoto liquido fermare la pompa.Utilizzando un ago calibro 20, forare 10 piccoli fori nel coperchio di un tubo conico da 50 millilitri. E avvolgere l'esterno del coperchio con una pellicola flessibile, creando una valvola che consentirà la fuoriuscita di azoto liquido sinistro evaporante. Per raccogliere le goccioline di epatociti vetrificate, rimuovere prima l'imbuto dal Dewar con azoto liquido.Successivamente, con lunghe forcep, eserti dal tubo conico che contiene le goccioline dall'azoto liquido e versare lentamente l'azoto liquido in eccesso dal tubo conico. Chiudere il tubo conico con il coperchio perforato e quindi posizionare direttamente il tubo conico chiuso con goccioline di epatociti vetrificate nel Dewar con azoto liquido. Infine, trasferire il tubo conico dall'azoto liquido in un criotank di azoto liquido.Dopo aver fatto la soluzione di riscaldamento con saccarosio e mezzi di coltura di epatociti DMEM, utilizzare un filtro da 0,22 micrometri per filtrarlo sterile. Quindi scaldarlo a 37 gradi Celsius. Per riciclare gli epatociti rimuovere il tubo conico con epatociti vetrificati dal criotank e trasportarlo in azoto liquido Dewar nella cappa della sottocultura.Allentare leggermente il tappo e riposizionare il tubo conico nell'azoto liquido. Lavorando rapidamente, aggiungere tutte le goccioline di epatociti vetrificate a un becher vuoto, quindi aggiungere rapidamente 100 millilitri di 37 gradi Celsius soluzione di riscaldamento caldo mescolando per 10 secondi. Quando le goccioline vengono rimosse dal congelamento intra-est dell'azoto liquido si verifica in pochi secondi se le goccioline non vengono rapidamente ririvissé.Pertanto, è fondamentale aggiungere direttamente il supporto di riscaldamento alle goccioline durante l'agitazione. Dividere la soluzione di riscaldamento con epatociti in due tubi conici da 50 millilitri. Centrifugare i tubi per due minuti a 100 volte G a quattro gradi Celsius senza rottura.Aspirare i supernatanti a lasciare un volume totale di 12,5 millilitri utilizzando il marchio di graduazione del tubo come riferimento. Per diluire la soluzione di riscaldamento al 50% aggiungere 12,5 millilitri di DMEM ghiacciato per tubo conico. Sospendere e incubare sul ghiaccio per tre minuti.Per diluire la soluzione di riscaldamento al 25% aggiungere 25 millilitri di DMEM ghiacciato per tubo conico. Dopo aver centrifugato per cinque minuti a 50 volte G a quattro gradi Celsius senza rottura, aspirare il supernatante e sospendere di nuovo gli epatociti in due millilitri del mezzo di coltura desiderato. Se misurata dai test di esclusione blu tri-pan, che determinano l'integrità della membrana, la vetrificazione delle goccioline sfuse ha portato a una vitalità diretta degli epatociti post-conservazione del 79%Questo è stato significativamente superiore alla vitalità del 68% dopo la classica crioconservazione ottimizzata.La resa della vetrificazione delle goccioline sfuse è stata del 56%, superiore del 10% e più consistente rispetto alla crioconservazione classica. Utilizzando il saggio di metabolizzazione presto-colla nelle colture universitarie e sandwich a lungo termine, l'attività metabolica negli epatociti è stata misurata per essere significativamente più alta dopo la vetrificazione delle goccioline alla rinfusa, quindi dopo la crioconservazione classica. La sintesi dell'albumina, come parametro più utilizzato della funzione sintetica degli epatociti, era maggiore di quasi due volte dopo la vetrificazione delle goccioline sfuse, quindi dopo la classica crioconservazione.La produzione di urea è stata utilizzata per misurare la funzione di disintossicazione degli epatociti in una cultura di una settimana. Negli epatociti vetrificati a goccia sfusa, la produzione di urea era significativamente superiore a quella degli epatociti crioconservati classici. Per risultati coerenti dopo la vetrificazione delle goccioline sfuse è importante seguire esattamente i tempi durante la pre-incubazione degli APC e il riscaldamento come descritto in questo protocollo.Dopo aver ritoritoritorito le goccioline di epatociti vetrificate si finirà con una migliore sospensione di dimensionamento che quindi può essere utilizzata in tutti gli stessi modi in cui se fossero appena isolate. Come metodo di conservazione migliorato, la vetrificazione delle goccioline sfuse può aumentare la disponibilità di pri-ma per la ricerca e le applicazioni cliniche.

Research

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Un approccio basato su goccia di microfluidica e microsfere-PCR amplificazione per ampliconi di DNA Single-Stranded

Droplet-based microfluidics enable the reliable production of homogeneous microspheres in the microfluidic channel, providing controlled size and ...

Morphometric Protocol for the Objective Assessment of Blastocyst Behavior During Vitrification and Warming Steps

Morfometrica protocollo per la valutazione obiettiva dei blastocisti comportamento durante la vetrificazione e passaggi scaldavivande

This article describes the noninvasive method of blastocyst morphometry based on time-lapse microphotography for the accurate monitoring of a ...

Prospecting Microbial Strains for Bioremediation and Probiotics Development for Metaorganism Research and Preservation

Prospezione ceppi microbici per biorimediazione e lo sviluppo di probiotici per la ricerca e la conservazione dei metaorganismi

Pollution affects all biomes. Marine environments have been particularly impacted, especially coral reefs, one of the most sensitive ecosystems on Earth. ...

High Throughput Yeast Strain Phenotyping with Droplet-Based RNA Sequencing

Phenotipizzazione del ceppo di lievito ad alta velocità effettiva con sequenziamento dell'RNA basato su droplet

The powerful tools available to edit yeast genomes have made this microbe a valuable platform for engineering. While it is now possible to construct ...

Primary Clarification of CHO Harvested Cell Culture Fluid using an Acoustic Separator

Chiarificazione primaria del fluido di coltura cellulare raccolto da CHO utilizzando un separatore acustico

Primary clarification is an essential step in a biomanufacturing process for the initial removal of cells from therapeutic products within the harvested ...