Name: implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice
Uploaded: 2019-12-21T10:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

Dit onderzoek werd gefinancierd door de Ligue Genevoise contre le Cancer (naar V.S.-B.) en door het centrum voor biomedische beeldvorming (CIBM) van de universiteiten en ziekenhuizen van Genève en Lausanne (naar D.J.C., O.B. en S.G.).

Alle hieronder beschreven procedures zijn goedgekeurd door het Comité voor dierenverzorging en-gebruik en door het Veterinair Bureau van Genève, Zwitserland (vergunning GE/106/16). De MPM cellijn H2052/484 werd opgericht en gekarakteriseerd in ons laboratorium zoals beschreven in het artikel van Colin DJ en et al.23. Kort, H2052/484 cellijn werd opgericht uit een thoracale tumor verkregen na een intrapleurale injectie van NCI-H2052 (ATCC) cellen in immunodeficiënte naakt muizen.
<p class="j...

<ol>
	<li>Grishman, E., Cohen, S., Salomon, M. I., Churg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+lesions+in+acute+rheumatic+fever.">Renal lesions in acute rheumatic fever.</a> The American Journal of Pathology. 51 (6), 1045-1061 (1967).</li><li>Mossman, B. T., Gee, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos-related+diseases.">Asbestos-related diseases.</a> The New England Journal of Medicine. 320 (26), 1721-1730 (1989).</li><li>Pass, H. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos+exposure,+pleural+mesothelioma,+and+serum+osteopontin+levels.">Asbestos exposure, pleural mesothelioma, and serum osteopontin levels.</a> The New England Journal of Medicine. 353 (15), 1564-1573 (2005).</li><li>Allen, L. P., Baez, J., Stern, M. E. C., Takahashi, K., George, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+and+the+Economic+Effect+of+Asbestos+Bans+and+Decline+in+Asbestos+Consumption+and+Production+Worldwide.">Trends and the Economic Effect of Asbestos Bans and Decline in Asbestos Consumption and Production Worldwide.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (3), (2018).</li><li>LaDou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+case+for+a+global+ban+on+asbestos.">The case for a global ban on asbestos.</a> Environmental Health Perspectives. 118 (7), 897-901 (2010).</li><li>Soeberg, M., Vallance, D. A., Keena, V., Takahashi, K., Leigh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Australia's+Ongoing+Legacy+of+Asbestos:+Significant+Challenges+Remain+Even+after+the+Complete+Banning+of+Asbestos+Almost+Fifteen+Years+Ago.">Australia's Ongoing Legacy of Asbestos: Significant Challenges Remain Even after the Complete Banning of Asbestos Almost Fifteen Years Ago.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (2), (2018).</li><li>Glynn, M. E., Keeton, K. A., Gaffney, S. H., Sahmel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambient+Asbestos+Fiber+Concentrations+and+Long-Term+Trends+in+Pleural+Mesothelioma+Incidence+between+Urban+and+Rural+Areas+in+the+United+States+(1973-2012).">Ambient Asbestos Fiber Concentrations and Long-Term Trends in Pleural Mesothelioma Incidence between Urban and Rural Areas in the United States (1973-2012).</a> Risk Analysis. 38 (3), 454-471 (2018).</li><li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+trend+analysis+on+malignant+mesothelioma+in+China.">Epidemiology and trend analysis on malignant mesothelioma in China.</a> The Chinese Journal of Cancer Research. 29 (4), 361-368 (2017).</li><li>Chernova, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Fiber+Carbon+Nanotubes+Replicate+Asbestos-Induced+Mesothelioma+with+Disruption+of+the+Tumor+Suppressor+Gene+Cdkn2a+(Ink4a/Arf).">Long-Fiber Carbon Nanotubes Replicate Asbestos-Induced Mesothelioma with Disruption of the Tumor Suppressor Gene Cdkn2a (Ink4a/Arf).</a> Current Biology. 27 (21), 3302-3314 (2017).</li><li>Fukushima, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carcinogenicity+of+multi-walled+carbon+nanotubes:+challenging+issue+on+hazard+assessment.">Carcinogenicity of multi-walled carbon nanotubes: challenging issue on hazard assessment.</a> The Journal of Occupational Health. 60 (1), 10-30 (2018).</li><li>Robinson, B. W., Musk, A. W., Lake, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+mesothelioma.">Malignant mesothelioma.</a> The Lancet. 366 (9483), 397-408 (2005).</li><li>Ricciardi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+for+malignant+pleural+mesothelioma:+an+international+guidelines+review.">Surgery for malignant pleural mesothelioma: an international guidelines review.</a> The Journal of Thoracic Diseases. 10, 285-292 (2018).</li><li>Hiddinga, B. I., Rolfo, C., van Meerbeeck, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesothelioma+treatment:+Are+we+on+target?+A+review.">Mesothelioma treatment: Are we on target? A review.</a> The Journal of Advanced Research. 6 (3), 319-330 (2015).</li><li>Kim, J., Bhagwandin, S., Labow, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+peritoneal+mesothelioma:+a+review.">Malignant peritoneal mesothelioma: a review.</a> Annals of Translational Medicine. 5 (11), 236 (2017).</li><li>Ampollini, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immuno-chemotherapy+reduces+recurrence+of+malignant+pleural+mesothelioma:+an+experimental+setting.">Immuno-chemotherapy reduces recurrence of malignant pleural mesothelioma: an experimental setting.</a> The European Journal of Cardiothoracic Surgery. 35 (3), 457-462 (2009).</li><li>de Jong, M., Essers, J., van Weerden, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+preclinical+tumour+models:+improving+translational+power.">Imaging preclinical tumour models: improving translational power.</a> Nature Reviews Cancer. 14 (7), 481-493 (2014).</li><li>Mak, I. W., Evaniew, N., Ghert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lost+in+translation:+animal+models+and+clinical+trials+in+cancer+treatment.">Lost in translation: animal models and clinical trials in cancer treatment.</a> The American Journal of Translational Research. 6 (2), 114-118 (2014).</li><li>Mazzocchi, A. R., Rajan, S. A. P., Votanopoulos, K. I., Hall, A. R., Skardal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+patient-derived+3D+mesothelioma+tumor+organoids+facilitate+patient-centric+therapeutic+screening.">In vitro patient-derived 3D mesothelioma tumor organoids facilitate patient-centric therapeutic screening.</a> Scientific Reports. 8 (1), 2886 (2018).</li><li>Gengenbacher, N., Singhal, M., Augustin, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+mouse+solid+tumour+models:+status+quo,+challenges+and+perspectives.">Preclinical mouse solid tumour models: status quo, challenges and perspectives.</a> Nature Reviews Cancer. 17 (12), 751-765 (2017).</li><li>Kanemura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+response+assessment+with+18F-FDG-PET/CT+is+superior+to+modified+RECIST+for+the+evaluation+of+response+to+platinum-based+doublet+chemotherapy+in+malignant+pleural+mesothelioma.">Metabolic response assessment with 18F-FDG-PET/CT is superior to modified RECIST for the evaluation of response to platinum-based doublet chemotherapy in malignant pleural mesothelioma.</a> The European Journal of Radiology. 86, 92-98 (2017).</li><li>Truong, M. T., Viswanathan, C., Godoy, M. B., Carter, B. W., Marom, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+pleural+mesothelioma:+role+of+CT,+MRI,+and+PET/CT+in+staging+evaluation+and+treatment+considerations.">Malignant pleural mesothelioma: role of CT, MRI, and PET/CT in staging evaluation and treatment considerations.</a> Seminars in Roentgenology. 48 (4), 323-334 (2013).</li><li>MacArthur Clark, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+3Rs+in+research:+a+contemporary+approach+to+replacement,+reduction+and+refinement.">The 3Rs in research: a contemporary approach to replacement, reduction and refinement.</a> The British Journal of Nutrition. 120, 1-7 (2018).</li><li>Colin, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Model+of+Human+Malignant+Mesothelioma+in+Athymic+Mice.">Experimental Model of Human Malignant Mesothelioma in Athymic Mice.</a> The International Journal of Molecular Sciences. 19 (7), (2018).</li><li>Fueger, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+animal+handling+on+the+results+of+18F-FDG+PET+studies+in+mice.">Impact of animal handling on the results of 18F-FDG PET studies in mice.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 47 (6), 999-1006 (2006).</li><li>Devaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissues+in+different+anatomical+sites+can+sculpt+and+vary+the+tumor+microenvironment+to+affect+responses+to+therapy.">Tissues in different anatomical sites can sculpt and vary the tumor microenvironment to affect responses to therapy.</a> Molecular Therapy. 22 (1), 18-27 (2014).</li><li>Beliz&#225;rio, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunodeficient+mouse+models:+An+overview.">Immunodeficient mouse models: An overview.</a> The Open Immunology Journal. 2, 79-85 (2009).</li><li>Jackaman, C., Yeoh, T. L., Acuil, M. L., Gardner, J. K., Nelson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+mesothelioma+induces+locally-proliferating+IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+)+M3+macrophages+that+can+be+selectively+depleted+by+chemotherapy+or+immunotherapy.">Murine mesothelioma induces locally-proliferating IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+) M3 macrophages that can be selectively depleted by chemotherapy or immunotherapy.</a> Oncoimmunology. 5 (6), 1173299 (2016).</li><li>James, M. L., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+imaging+primer:+modalities,+imaging+agents,+and+applications.">A molecular imaging primer: modalities, imaging agents, and applications.</a> Physiological Reviews. 92 (2), 897-965 (2012).</li><li>Kenny, L. M., Aboagye, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+translation+of+molecular+imaging+agents+used+in+PET+studies+of+cancer.">Clinical translation of molecular imaging agents used in PET studies of cancer.</a> Advances in Cancer Research. 124, 329-374 (2014).</li></ol>

Dit artikel beschrijft een origineel orthotopic model van MPM H2052/484 cellen geïnjecteerd in de pleuraholte van athymische muizen en een methode van monitoring door kleine dierlijke PET/CT Imaging. Dit model kan worden geïmplementeerd met matige dier handling en chirurgie vaardigheden en geeft een zeer goede ontwikkelingssnelheid. Het maakt een groot experimenteel venster van ongeveer 10 weken in onbehandelde muizen en niet-invasieve longitudinale detectie van tumoren al in 2 weken na de injectie mogelijk.
<p cla...

Maligne mesothelioom van de pleura (mpm) is een kanker die meestal wordt geassocieerd met de blootstelling aan asbestvezels1,2,3. Hoewel asbest in de meeste westerse landen4,5,6verboden is, neemt de incidentie van mpm nog steeds toe met7,8. Onlangs suggereert blootstelling van muizen aan koolstofnanobuizen dat ze kunnen resulteren in een significant gezondheidsrisico bij de mens9,10. De gegevens suggereren dat blootstelling aan deze producten kan leiden tot chronische ontstekingen en moleculaire veranderingen (bijv. verlies van tumor suppressor trajecten) die de progressie ten grondslag liggen aan maligne mesothelioom. Op dit moment zijn multiwall carbon nanotubes een van de belangrijkste producten van nanotechnologie en worden steeds meer opgenomen in verschillende producten zoals composieten, energieopslag materialen, medicijnen, elektronica en milieuherstel materialen.
MPM is een kanker met een slechte prognose en de meeste patiënten sterven binnen twee jaar na de diagnose als gevolg van een beperkte werkzaamheid van de huidige behandelings modaliteiten11. De keuze van de behandeling voor MPM is afhankelijk van de kanker fase. Voor de meeste vroege fase MPM (fase 1 en eventueel enige fase 2 of 3 tumoren), de klinische aanpak is een multimodale therapie met inbegrip van de chirurgische resectie van de tumoren, geassocieerd met radiotherapie en chemotherapie12. Een gecombineerde chemotherapie met cisplatine en pemetrexed is geïndiceerd voor de behandeling van de meeste patiënten die gediagnosticeerd zijn met gevorderde lokaal invasieve ziekte, die niet vatbaar is voor chirurgische resectie, of die anders geen kandidaat zijn voor curatieve chirurgie13,14. Er is daarom een dringende behoefte om effectievere behandelingen voor MPM-patiënten te ontwikkelen. Er zijn echter weinig gevalideerde in vivo diermodellen die de klinische relevantie van MPM weerspiegelen. Verschillende Murine mpm modellen zijn ontwikkeld, maar de meeste van hen niet getrouw recapituleren de complexe aspecten van de mpm tumor micro omgeving15,16,17,18. Het gebruik van asbest-geïnduceerde MPM bij muizen, genetisch gemanipuleerde MPM-Muismodellen of modellen van syngene transplantatie van muriene MPM-cellijnen wordt beperkt door fundamentele fenotypische en functionele verschillen en vertaalt bijgevolg slecht nieuwe ontdekkingen naar de kliniek. Andere preklinische Murine mpm-modellen zijn meestal afhankelijk van subcutane of peritoneale xenograften van menselijke cellijnen in immunodeficiënte muizen. Hoewel deze modellen gemakkelijk te bewaken zijn en fundamentele gegevens leveren, is de micro-omgeving van deze xenotransplantaten niet zo vergelijkbaar met menselijke tumoren die de translatie kracht van de meeste van deze preklinische studies aantasten, die het meest van deze preklinische-onderzoeken uitmaken. Omgekeerd, orthotopic xenotransplantaten weerspiegelen het gedrag van de patiënt tumor en reactie op de behandeling als ze worden omringd door een soortgelijke micro-omgeving als die gevonden in de oorspronkelijke tumor site16.
Moleculaire beeldvorming door [18F] FDG-PET/CT is de methode van keuze om de progressie van de ziekte in de lengterichting te monitoren bij patiënten met mpm20,21. Daarom bevordert het toevlucht nemen tot deze niet-invasieve beeldvormings methode de vertaling van preklinisch onderzoek naar klinische proeven16,22aanzienlijk. Bovendien helpt het om het vereiste aantal dieren te verminderen, aangezien elk dier zijn eigen controle over de tijd vertegenwoordigt.
In dit artikel presenteren we een betrouwbaar orthotopic xenotransplantaatmodellen is mpm-model dat is verkregen na injectie van de humane mpm-cellijn H2052/484 in de pleuraholte van athymische-muizen. In combinatie met [18F] FDG-PET/CT-beeldvorming is dit model een waardevolle en reproduceerbare methode om functionele en mechanistische effecten van nieuwe diagnostische strategieën en behandelingen voor menselijke mpm te bestuderen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3-mice bed</td>
			<td>Minerve</td>
			<td></td>
			<td>bed for mice imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Athymic Nude-Foxn1n nu/nu</td>
			<td>Envigo, Huntingdon, UK</td>
			<td>6907F</td>
			<td>immunodeficient mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Mundipharma Medical Company, CH</td>
			<td>111131</td>
			<td>polyvidone iodine solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Saline (DPBS)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>14190094</td>
			<td>Buffer for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>PAA Laboratories, Pasching, Austria</td>
			<td>A15-101</td>
			<td>cell culture medium supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>324826</td>
			<td>syringe for cell injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>15140122</td>
			<td>antibiotics for cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>61870010</td>
			<td>basal cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temgesic (Buprenorphin 0.3 mg/mL)</td>
			<td>Alloga SA, CH</td>
			<td>700320</td>
			<td>opioid analgesic product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triumph PET/SPECT/CT</td>
			<td>Trifoil, Chatsworth, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>imaging equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>25050014</td>
			<td>enzymatic cell dissociation buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virkon S 2%</td>
			<td>Milian, Vernier, CH</td>
			<td>972472</td>
			<td>disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vivoquant</td>
			<td>Invicro, Boston, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice

Maligne mesothelioom van de pleura (MPM) is een zeldzame en agressieve tumor die zich voordoet in het mesothelium dat de longen, het hart en de thoracale holte bedekt. De ontwikkeling van MPM wordt voornamelijk geassocieerd met asbest. Behandelingen bieden slechts een bescheiden overleving, aangezien het mediane overlevings gemiddelde 9 – 18 maanden na het tijdstip van diagnose is. Daarom moeten effectievere behandelingen worden vastgesteld. De meeste gegevens die nieuwe therapeutische doelstellingen beschrijven, werden verkregen uit in vitro experimenten en moeten worden gevalideerd in betrouwbare in vivo preklinische modellen. Dit artikel beschrijft een dergelijke betrouwbare MPM orthotopic model verkregen na injectie van een humane MPM cellijn H2052/484 in de pleuraholte van immunodeficiënte athymische muizen. Transplantatie in de orthotopic site maakt het bestuderen van de progressie van tumor in de natuurlijke in vivo omgeving. Positron emissie tomografie/computertomografie (PET/CT) moleculaire beeldvorming met behulp van de klinische [18f] -2-Fluoro-2-deoxy-D-glucose ([18f] FDG) radio Tracer is de diagnosemethode van keuze voor het onderzoeken van patiënten met mpm. Dienovereenkomstig werd [18F] FDG-PET/CT gebruikt om de progressie van de ziekte van de H2052/484 orthotopic model te monitoren. Deze techniek heeft een hoog 3R potentieel (reduce het aantal dieren, rgegevens om pijn en ongemak te verminderen, en rv ervangen door dier experimenten met alternatieven), omdat de ontwikkeling van de tumor niet-invasief kan worden gecontroleerd en het aantal benodigde dieren aanzienlijk kan worden verminderd.
Dit model toont een hoge ontwikkelingssnelheid, een snelle tumorgroei, is kostenefficiënt en zorgt voor een snelle klinische vertaling. Door dit orthotopic xenotransplantaatmodellen is mpm-model te gebruiken, kunnen onderzoekers de biologische reacties van een betrouwbaar mpm-model beoordelen na therapeutische ingrepen.

Het H2052/484 orthotopic model Orthotopic MPM modellen door intra-Thoracic injectie van gekweekte kankercellen, vooral H2052/484 cellen zijn relatief eenvoudig te installeren. De verschillende hierboven beschreven stappen vereisen alleen bescheiden kennis van de celcultuur en de chirurgische stappen zijn toegankelijk voor matig opgeleide dieren onderzoekers. Naakt muizen en cellen moeten onder steriele omstandigheden worden gemanipuleerd om de uitkomst van de implantaties te maximaliseren. Door het zo...

Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice

Dit artikel beschrijft de generatie van een orthotopic muismodel van menselijke pleura mesothelioom door implantatie van H2052/484 mesothelioom cellen in de pleuraholte van immuungecompromitteerde athymische muizen. De longitudinale monitoring van de ontwikkeling van intrapleurale tumoren werd beoordeeld door niet-invasieve multimodale [18F] -2-Fluoro-2-deoxy-D-glucose positron emissie tomografie en computertomografie beeldvorming.

Implantatie en monitoring door PET/CT van een Orthothematisch model van menselijk pleura mesothelioom in Athymic muizen

Malignant pleural mesothelioma (MPM) is a rare and aggressive tumor arising in the mesothelium that covers the lungs, the heart, and the thoracic cavity. ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen met betrekking tot de ontwikkeling, behandeling en diagnose van menselijke pleurale mesothelioom. Het belangrijkste voordeel van dit betrouwbare preklinische orthotopische model is dat het de progressie en pathologie van de menselijke ziekte repliceert in een micro-omgeving dicht bij die gevonden bij patiënten met pleuramesothelioom. Daarom is dit onschatbare model van groot belang en het gebruik van niet-invasieve moleculaire beeldvorming maakt longitudinale monitoring mogelijk in overeenstemming met het drie R-concept.Voordat u begint met het voorbereiden van het anesthesiesysteem en het chirurgische gebied in een laminaire stroomkap door alle oppervlakken met ontsmettingsmiddel te besproeien. Plaats de micro-geïsoleerde SPF-kooien in de gedesinfecteerde stroomkap. Plaats een verwarmingskussen, povidone-jodium oplossing 30 gauge Hamilton spuit, gaas en wattenstaafjes chirurgie instrumenten en micropipets en tips in de laminaire flow hood.Zodra de muis goed is verdoofd onderhuids injecteren 0,05 milligram per kilogram Buprinorfine voor postoperatieve pan reliëf. Plaats vervolgens de muis aan de rechterkant op het verwarmingskussen en maak het chirurgische gebied schoon met povidone-jodiumoplossing en maak een 5 millimeter incisie van de huid. Maak het omringende vet en de spieren met een stompe schaar vrij om de ribben bloot te leggen.Homogenize de cel schorsing en belasting 50 microliters in de Hamilton spuit ervoor te zorgen dat luchtbellen te voorkomen. Veeg de naald met 70% alcohol voorafgaand aan elke injectie. Injecteer de cellen langzaam in de pleuraholte tussen de zesde en zevende ribben die de naald onder een hoek van 30 graden en twee tot drie millimeter onder de intercostale spieren houden.Houd de naald net onder de ribben om te voorkomen dat injecteren in de longen. Het moet zichtbaar zijn door de spieren. Sluit de wond met drie tot vier opneembare hechtingen en bewaar de muis in een opgewarmde omgeving totdat deze wakker wordt.Bij het uitvoeren van implantatie is het erg belangrijk om de naald correct te positioneren om de diepte van de naaldpenetratie te beperken. Gebruik een verwarmingskamer verwarmingskussen, of infraroodlamp om de muizen 30 minuten voor te bereiden op 30 graden Celsius voorafgaand aan de injectie van fluor-18 (FDG)Met behulp van een dosiscalculator bereid je drie tot vier megabecquereldosans fluor-18 (FDG)voor in 150 tot 200 microliter zoute in 1 milliliter insulinespuiten. Zorg ervoor dat u alle tijden van radioactiviteit dosis metingen injecties, en PET-scans op te nemen om standaard opnamewaarden of SUV's te berekenen.Weeg de muizen vervolgens intraveneus injecteer de fluor-18 (FDG)Na de injectie laat de muizen wakker in warme omstandigheden gedurende 45 minuten. Laad vervolgens de muizen op het scannerbed breng het bed over naar een scanner en onderwerp de dieren aan een CT-scan gecentreerd op de longen. Verplaats het bed naar het PET-subsysteem plaats de overname een uur na de fluor-18(FDG)injectie gedurende een duur van 15 minuten.Verwijder vervolgens de muizen uit de beeldkamer en laat ze herstellen in hun kooi en houd ze in een gebied gewijd aan radioactief verval. Voorafgaand aan beeldanalyse reconstrueren CT en PET scans zoals beschreven in het manuscript. Kalibreer de beelden door het scannen van een fantoomcilinder en automatisch co registreren van de scans volgens de ingebouwde software-oplossing.Als u de afbeeldingen wilt analyseren, worden de CT-gegevens als referentie geladen door op het pictogram geopende gegevens te klikken. Laad vervolgens de PET-gegevens als invoer door op het pictogram gegevens toevoegen te klikken. Pas de kleurschaal zo CT en PET aan om afbeeldingen te contrasteren voor visuele inspectie.Selecteer het gereedschap 3D-ROI in het vervolgkeuzemenu klik op ROI toevoegen en geef de bestandslongen een naam. Klik op segmentatiealgoritmen en buurtdrempels en definieer invoer als achtergrond en afbeelding als ref. Voer min en max in volgens de waarden van de muislongdichtheid.Inspecteer de 3D-gerenderde longen door op het VTK-pictogram te klikken. Klik vervolgens op het tabelpictogram weergeven en haal het volume in de gegenereerde tabel op. Om de fluor-18 (FDG)in tumoren te analyseren zet PET-beelden om naar SUV door rekenkunde te selecteren in het vervolgkeuzemenu.Selecteer scalaire multipliciteit en gebruik NP een als geselecteerd en stel de becquerel per milliliter in op SUV-factor als scalar. Selecteer ten slotte het gereedschap 3D ROI in het vervolgkeuzemenu en klik op ROI toevoegen en geef de bestandstumoren een naam. Klik op 3D-verf modus en bol uit te schakelen 2D alleen en de grootte van de vorm aan te passen aan de tumoren te omringen.Klik op het pictogram van de showtabel en haal de maximale WAARDE van de SUV uit de gegenereerde tabel. De 3D-renderings van de CT-scans geven een overzicht van MPM tumorlokalisatie en maken het mogelijk longvolumes te berekenen. Longvolume metingen aanzienlijk afnemen na verloop van tijd na de injectie van intrapleurale tumoren.De PET-scan geeft waardevolle informatie over de metabole status van MPM-tumoren. De tumoren waren te onderscheiden twee weken na enting en fluor-18 (FDG)opname werd gekwantificeerd door het extraheren van SUV's die positief gecorreleerd waren met het aantal dagen na injectie. Bovendien correleren longvolumes en fluor-18(FDG)avidity met elkaar met een R-kwadraat van 0,6 die de sterkte van deze metingen ondersteunt voor het monitoren van MPM orthotopische tumorontwikkeling.Na deze procedure kunnen andere methoden worden uitgevoerd, zoals histologie, immunohistochemie en stroomcytometrie om te reageren op orthobiologische vragen zoals de proliferatietoestand en fenotypische kenmerken van tumoren en van de micro-omgeving. Tot slot maken deze preklinische technieken de weg vrij voor onderzoekers om nieuwe diagnostische en behandelingsstrategie van pleuramesothelioom te verkennen. Bovendien rechtvaardigt het gebruik van moleculaire beeldvorming een snelle vertaling van nieuwe bevindingen naar de kliniek.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Een orthotope Model van sereuze eierstokkanker in immunocompetente muizen voor In vivo Tumor Imaging en Bewaking van de Tumor Immuunrespons

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Comprehensive &amp; Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

Comprehensive & Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

Uitgebreide &amp; Rendabele laboratorium controle van HIV / AIDS: een Afrikaanse Role Model

We present the video about assisting anti-retroviral therapy (ART) by an apt laboratory service - representing a South-African role model for economical ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Inductie van Graft-versus-host ziekte en<em&gt; In Vivo</em&gt; T-cel monitoren door gebruik van een MHC-matched muizenmodel

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Recurrent Herpetic Stromal Keratitis in Mice, a Model for Studying Human HSK

Terugkerende Herpetische Stroma Keratitis in Muizen, een model voor het bestuderen van de Mens HSK

Herpetic eye disease, termed herpetic stromal keratitis (HSK), is a potentially blinding infection of the cornea that results in over 300,000 clinical ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

Een<em&gt; In vitro</em&gt; Model te Heterogeniteit van Human Macrophage Differentiatie en Polarisatie Studie

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

Geoptimaliseerde protocollen voor<em&gt; Mycobacterium leprae</em&gt; Strain Management: Bevroren Stock Behoud en onderhoud in Athymische Naakt Muizen

Leprosy, caused by Mycobacterium leprae, is an important infectious disease that is still endemic in many countries around the world, including Brazil. ...

A Semi-automated Approach to Preparing Antibody Cocktails for Immunophenotypic Analysis of Human Peripheral Blood

Een semi-automatische Aanpak Voorbereiding Antibody Cocktails voor Immunophenotypic Analyse van de humane perifere bloed

Immunophenotyping of peripheral blood by flow cytometry determines changes in the frequency and activation status of peripheral leukocytes during disease ...

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo  Cell Trafficking by PET/CT

Muizen-lymfocyt Labeling door<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-Antibody Receptor targeting voor<em&gt; In Vivo</em&gt; Celverkeer PET / CT

This protocol illustrates the production of 64Cu and the chelator conjugation/radiolabeling of a monoclonal antibody (mAb) followed by murine lymphocyte ...

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Analyse van lymfocyt extravasatie gebruik van een<em&gt; In Vitro</em&gt; Model van het menselijk bloed-hersenbarrière

Lymphocyte extravasation into the central nervous system (CNS) is critical for immune surveillance. Disease-related alterations of lymphocyte ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

Een IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model voor de<em&gt; In Vivo</em&gt; Lange termijn monitoring van inflammatoire reacties

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...