Name: implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice
Uploaded: 2019-12-21T10:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

מחקר זה מומן על ידי Ligue Genevoise הסרטן (כדי V.S.-B.) ועל ידי המרכז להדמיה ביו-רפואית (CIBM) של אוניברסיטאות ובתי חולים של ז'נבה ולוזאן (כדי D.J.C., הגיניקולוגית ו S.G.).

כל ההליכים המתוארים להלן אושרו על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים והשימוש בוועדה ובמשרד הוטרינרים של ז'נבה, שוויץ (אישור GE/106/16). קו התא MPM H2052/484 הוקם והתאפיין במעבדה שלנו כמפורט במאמר של קולין DJ ו-et al.23. בקצרה, H2052/484 קו התא הוקמה מגידול בבית החזה שהתקבל לאחר הזרקה הפנים של NCI-H2052 (ATCC) תא...

<ol>
	<li>Grishman, E., Cohen, S., Salomon, M. I., Churg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+lesions+in+acute+rheumatic+fever.">Renal lesions in acute rheumatic fever.</a> The American Journal of Pathology. 51 (6), 1045-1061 (1967).</li><li>Mossman, B. T., Gee, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos-related+diseases.">Asbestos-related diseases.</a> The New England Journal of Medicine. 320 (26), 1721-1730 (1989).</li><li>Pass, H. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos+exposure,+pleural+mesothelioma,+and+serum+osteopontin+levels.">Asbestos exposure, pleural mesothelioma, and serum osteopontin levels.</a> The New England Journal of Medicine. 353 (15), 1564-1573 (2005).</li><li>Allen, L. P., Baez, J., Stern, M. E. C., Takahashi, K., George, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+and+the+Economic+Effect+of+Asbestos+Bans+and+Decline+in+Asbestos+Consumption+and+Production+Worldwide.">Trends and the Economic Effect of Asbestos Bans and Decline in Asbestos Consumption and Production Worldwide.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (3), (2018).</li><li>LaDou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+case+for+a+global+ban+on+asbestos.">The case for a global ban on asbestos.</a> Environmental Health Perspectives. 118 (7), 897-901 (2010).</li><li>Soeberg, M., Vallance, D. A., Keena, V., Takahashi, K., Leigh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Australia's+Ongoing+Legacy+of+Asbestos:+Significant+Challenges+Remain+Even+after+the+Complete+Banning+of+Asbestos+Almost+Fifteen+Years+Ago.">Australia's Ongoing Legacy of Asbestos: Significant Challenges Remain Even after the Complete Banning of Asbestos Almost Fifteen Years Ago.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (2), (2018).</li><li>Glynn, M. E., Keeton, K. A., Gaffney, S. H., Sahmel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambient+Asbestos+Fiber+Concentrations+and+Long-Term+Trends+in+Pleural+Mesothelioma+Incidence+between+Urban+and+Rural+Areas+in+the+United+States+(1973-2012).">Ambient Asbestos Fiber Concentrations and Long-Term Trends in Pleural Mesothelioma Incidence between Urban and Rural Areas in the United States (1973-2012).</a> Risk Analysis. 38 (3), 454-471 (2018).</li><li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+trend+analysis+on+malignant+mesothelioma+in+China.">Epidemiology and trend analysis on malignant mesothelioma in China.</a> The Chinese Journal of Cancer Research. 29 (4), 361-368 (2017).</li><li>Chernova, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Fiber+Carbon+Nanotubes+Replicate+Asbestos-Induced+Mesothelioma+with+Disruption+of+the+Tumor+Suppressor+Gene+Cdkn2a+(Ink4a/Arf).">Long-Fiber Carbon Nanotubes Replicate Asbestos-Induced Mesothelioma with Disruption of the Tumor Suppressor Gene Cdkn2a (Ink4a/Arf).</a> Current Biology. 27 (21), 3302-3314 (2017).</li><li>Fukushima, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carcinogenicity+of+multi-walled+carbon+nanotubes:+challenging+issue+on+hazard+assessment.">Carcinogenicity of multi-walled carbon nanotubes: challenging issue on hazard assessment.</a> The Journal of Occupational Health. 60 (1), 10-30 (2018).</li><li>Robinson, B. W., Musk, A. W., Lake, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+mesothelioma.">Malignant mesothelioma.</a> The Lancet. 366 (9483), 397-408 (2005).</li><li>Ricciardi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+for+malignant+pleural+mesothelioma:+an+international+guidelines+review.">Surgery for malignant pleural mesothelioma: an international guidelines review.</a> The Journal of Thoracic Diseases. 10, 285-292 (2018).</li><li>Hiddinga, B. I., Rolfo, C., van Meerbeeck, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesothelioma+treatment:+Are+we+on+target?+A+review.">Mesothelioma treatment: Are we on target? A review.</a> The Journal of Advanced Research. 6 (3), 319-330 (2015).</li><li>Kim, J., Bhagwandin, S., Labow, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+peritoneal+mesothelioma:+a+review.">Malignant peritoneal mesothelioma: a review.</a> Annals of Translational Medicine. 5 (11), 236 (2017).</li><li>Ampollini, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immuno-chemotherapy+reduces+recurrence+of+malignant+pleural+mesothelioma:+an+experimental+setting.">Immuno-chemotherapy reduces recurrence of malignant pleural mesothelioma: an experimental setting.</a> The European Journal of Cardiothoracic Surgery. 35 (3), 457-462 (2009).</li><li>de Jong, M., Essers, J., van Weerden, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+preclinical+tumour+models:+improving+translational+power.">Imaging preclinical tumour models: improving translational power.</a> Nature Reviews Cancer. 14 (7), 481-493 (2014).</li><li>Mak, I. W., Evaniew, N., Ghert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lost+in+translation:+animal+models+and+clinical+trials+in+cancer+treatment.">Lost in translation: animal models and clinical trials in cancer treatment.</a> The American Journal of Translational Research. 6 (2), 114-118 (2014).</li><li>Mazzocchi, A. R., Rajan, S. A. P., Votanopoulos, K. I., Hall, A. R., Skardal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+patient-derived+3D+mesothelioma+tumor+organoids+facilitate+patient-centric+therapeutic+screening.">In vitro patient-derived 3D mesothelioma tumor organoids facilitate patient-centric therapeutic screening.</a> Scientific Reports. 8 (1), 2886 (2018).</li><li>Gengenbacher, N., Singhal, M., Augustin, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+mouse+solid+tumour+models:+status+quo,+challenges+and+perspectives.">Preclinical mouse solid tumour models: status quo, challenges and perspectives.</a> Nature Reviews Cancer. 17 (12), 751-765 (2017).</li><li>Kanemura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+response+assessment+with+18F-FDG-PET/CT+is+superior+to+modified+RECIST+for+the+evaluation+of+response+to+platinum-based+doublet+chemotherapy+in+malignant+pleural+mesothelioma.">Metabolic response assessment with 18F-FDG-PET/CT is superior to modified RECIST for the evaluation of response to platinum-based doublet chemotherapy in malignant pleural mesothelioma.</a> The European Journal of Radiology. 86, 92-98 (2017).</li><li>Truong, M. T., Viswanathan, C., Godoy, M. B., Carter, B. W., Marom, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+pleural+mesothelioma:+role+of+CT,+MRI,+and+PET/CT+in+staging+evaluation+and+treatment+considerations.">Malignant pleural mesothelioma: role of CT, MRI, and PET/CT in staging evaluation and treatment considerations.</a> Seminars in Roentgenology. 48 (4), 323-334 (2013).</li><li>MacArthur Clark, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+3Rs+in+research:+a+contemporary+approach+to+replacement,+reduction+and+refinement.">The 3Rs in research: a contemporary approach to replacement, reduction and refinement.</a> The British Journal of Nutrition. 120, 1-7 (2018).</li><li>Colin, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Model+of+Human+Malignant+Mesothelioma+in+Athymic+Mice.">Experimental Model of Human Malignant Mesothelioma in Athymic Mice.</a> The International Journal of Molecular Sciences. 19 (7), (2018).</li><li>Fueger, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+animal+handling+on+the+results+of+18F-FDG+PET+studies+in+mice.">Impact of animal handling on the results of 18F-FDG PET studies in mice.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 47 (6), 999-1006 (2006).</li><li>Devaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissues+in+different+anatomical+sites+can+sculpt+and+vary+the+tumor+microenvironment+to+affect+responses+to+therapy.">Tissues in different anatomical sites can sculpt and vary the tumor microenvironment to affect responses to therapy.</a> Molecular Therapy. 22 (1), 18-27 (2014).</li><li>Beliz&#225;rio, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunodeficient+mouse+models:+An+overview.">Immunodeficient mouse models: An overview.</a> The Open Immunology Journal. 2, 79-85 (2009).</li><li>Jackaman, C., Yeoh, T. L., Acuil, M. L., Gardner, J. K., Nelson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+mesothelioma+induces+locally-proliferating+IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+)+M3+macrophages+that+can+be+selectively+depleted+by+chemotherapy+or+immunotherapy.">Murine mesothelioma induces locally-proliferating IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+) M3 macrophages that can be selectively depleted by chemotherapy or immunotherapy.</a> Oncoimmunology. 5 (6), 1173299 (2016).</li><li>James, M. L., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+imaging+primer:+modalities,+imaging+agents,+and+applications.">A molecular imaging primer: modalities, imaging agents, and applications.</a> Physiological Reviews. 92 (2), 897-965 (2012).</li><li>Kenny, L. M., Aboagye, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+translation+of+molecular+imaging+agents+used+in+PET+studies+of+cancer.">Clinical translation of molecular imaging agents used in PET studies of cancer.</a> Advances in Cancer Research. 124, 329-374 (2014).</li></ol>

נייר זה מתאר מודל מקורי של הנושא האורתוגרף של MPM H2052/484 תאים מוזרק בחלל הפלאורלי של עכברים athymic ושיטת ניטור על ידי בעלי חיים קטן PET/CT הדמיה. מודל זה יכול להיות מיושם עם טיפול בינוני בעלי חיים וכישורי ניתוח ומציג שיעור התפתחות טובה מאוד. זה מאפשר חלון ניסיוני גדול של כ 10 שבועות בעכברים מטופל וזי...

מזותליומה ממאירה (MPM) הוא סרטן הקשורים בדרך כלל עם החשיפה סיבי אסבסט1,2,3. למרות אסבסט הוחרם ברוב המדינות המערביות4,5,6, השכיחות של MPM עדיין גדל7,8. לאחרונה, חשיפה של עכברים פחמן צינוריות מרמז כי הם עלולים לגרום לסיכון בריאותי משמעותי בבני אדם9,10. הנתונים מצביעים על כך שחשיפה למוצרים אלה עלולה לגרום לדלקות כרוניות ולשינויים מולקולריים (למשל, הפסד של מסלולים סרטניים-מדכא) כי התקדמות ושתתות מזותליומה ממאירה. כיום, מרובת קירות פחמן צינוריות הם אחד המוצרים החשובים ביותר של ננוטכנולוגיה והם משולבים יותר ויותר במוצרים שונים כגון, חומרים מרוכבים, אחסון אנרגיה, רפואה, אלקטרוניקה, חומרים לתיקון סביבתי.
MPM הוא סרטן עם פרוגנוזה גרועה, ורוב המטופלים מתים בתוך שנתיים לאחר האבחנה בשל יעילות מוגבלת של שיטות הטיפול הנוכחי11. הבחירה של הטיפול MPM תלוי בשלב הסרטן. עבור השלב המוקדם ביותר MPM (שלב 1 ואולי כמה שלב 2 או 3 גידולים), הגישה הקלינית היא טיפול רב מודאלי כולל כריתת כירורגית של גידולים, הקשורים הקרנות וכימותרפיה12. כימותרפיה משולבת עם ציספלטין טינית ו pemetrexed מצוין לטיפול ברוב החולים שאובחנו עם מחלה פולשנית מקומי מקומית, כי הוא לא קלה לניתוח כירורגי, או מי הם לא אחרת מועמדים לכירורגיה מרפא13,14. יש, לכן, צורך דחוף לפתח טיפולים יעילים יותר עבור חולים MPM. עם זאת, יש אימות מעטים בדגמי בעלי חיים vivo המשקפים את הרלוונטיות הקלינית של MPM. מספר מודלים murine MPM פותחו אך רובם לא בנאמנות לאחר לכידה היבטים מורכבים של הגידול MPM מיקרוסביבה15,16,17,18. השימוש בMPM אסבסט המושרה בעכברים, מהונדסים גנטית MPM מודלים העכבר, או מודלים של השתלת syngeneic של קווי MPM מורטין מוגבלים על ידי הבדלים בסיסיים פנומטאריים ופונקציונלי, וכתוצאה מכך, לתרגם בצורה גרועה תגליות חדשות למרפאה. אחרים מודלים טרום קלינית murine MPM להסתמך בעיקר על תת עורית או הצפק של קווי תאים אנושיים בעכברים לקויה. בעוד מודלים אלה קל לפקח ולספק נתונים בסיסיים, מיקרו הסביבה של אלה xenografts זה לא דומה לגידולים אנושיים לפגוע בכוח translational של רוב המחקרים הפרה-קליניים האלה17,19. לעומת זאת, אורתובנושא xenografts טוב יותר לשקף את ההתנהגות הגידול החולה ואת התגובה לטיפול כפי שהם מוקפים מיקרוסביבה דומה כמו אחד שנמצא באתר הגידול המקורי16.
הדמיה מולקולרית על-ידי [18F] fdg-PET/CT היא שיטת הבחירה כדי longitudinally הצג התקדמות המחלה בחולים עם MPM20,21. לכן, להזדקק לשיטה זו שאינה פולשנית הדמיה מקדם מאוד את התרגום של מחקרים פרה-קליניים לניסויים קליניים16,22. כמו-כן, היא מסייעת להפחית את מספר החיות הנדרש, שכן כל חיה מייצגת את שליטתה בזמן.
במאמר זה, אנו מציגים את הנושא מהימן מבע מודל MPM שהתקבל לאחר ההזרקה של קו MPM התא האנושי H2052/484 לתוך חלל הצפק של עכברים athymic. ביחד עם [18F] fdg-PET/CT הדמיה, מודל זה הוא שיטה בעלת ערך ומגוון ללמוד אפקטים פונקציונליים ומכניסטיים של אסטרטגיות אבחון חדשות וטיפולים עבור MPM אנושי.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3-mice bed</td>
			<td>Minerve</td>
			<td></td>
			<td>bed for mice imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Athymic Nude-Foxn1n nu/nu</td>
			<td>Envigo, Huntingdon, UK</td>
			<td>6907F</td>
			<td>immunodeficient mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Mundipharma Medical Company, CH</td>
			<td>111131</td>
			<td>polyvidone iodine solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Saline (DPBS)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>14190094</td>
			<td>Buffer for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>PAA Laboratories, Pasching, Austria</td>
			<td>A15-101</td>
			<td>cell culture medium supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>324826</td>
			<td>syringe for cell injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>15140122</td>
			<td>antibiotics for cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>61870010</td>
			<td>basal cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temgesic (Buprenorphin 0.3 mg/mL)</td>
			<td>Alloga SA, CH</td>
			<td>700320</td>
			<td>opioid analgesic product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triumph PET/SPECT/CT</td>
			<td>Trifoil, Chatsworth, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>imaging equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>25050014</td>
			<td>enzymatic cell dissociation buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virkon S 2%</td>
			<td>Milian, Vernier, CH</td>
			<td>972472</td>
			<td>disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vivoquant</td>
			<td>Invicro, Boston, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice

מזותליומה ממאירה (MPM) הוא גידול נדיר אגרסיבי הנובעים הmesothelium המכסה את הריאות, הלב, ואת חלל החזה. פיתוח MPM משויך בעיקר אסבסט. טיפולים מספקים הישרדות צנועה בלבד מאז ממוצע ההישרדות החציוני הוא 9 – 18 חודשים מרגע האבחנה. לכן, יש לזהות טיפולים יעילים יותר. רוב הנתונים המתארים מטרות טיפוליות חדשות הושגו מתוך ניסויים בתחום החוץ וצריך להיות מאומת בvivo מודלים פרה קליניים. מאמר זה מתאר אחד מודל MPM הנושא אמין שהושג לאחר ההזרקה של קו MPM תא אנושי H2052/484 לתוך החלל הפלאורלי של עכברים החיסונית החיסוני. השתלת באתר אורתוסייט מאפשר ללמוד את ההתקדמות של הגידול הטבעי בסביבה vivo. פליטת פוזיטרונים טומוגרפיה/טומוגרפיה ממוחשבת (PET/CT) דימות מולקולרי באמצעות קליני [18f] -2-fluoro-2-Deoxy-D-גלוקוז ([18f] fdg) מעקב האבחנה היא שיטת האבחון של הבחירה לבדיקת חולים עם MPM. לכן, [18F] FDG-PET/CT שימש כדי longitudinally לפקח על התקדמות המחלה של מודל H2052/484 הנושא. טכניקה זו יש פוטנציאל 3r גבוה (reduce מספר בעלי חיים, rגדר כדי להפחית את הכאב ואת חוסר הנוחות, ו Rגדר ניסויים בבעלי חיים עם חלופות) מאז פיתוח הגידול יכול להיות מפוקח באופן לא פולשני ומספר בעלי החיים הנדרשים יכול להיות מופחת משמעותית.
מודל זה מציג שיעור פיתוח גבוה, צמיחה גידול מהיר, הוא חסכוני ומאפשר תרגום קליני מהיר. על-ידי שימוש זה MPM הנושא מודל מבע, החוקרים יכולים להעריך את התגובות הביולוגי של מודל MPM אמין בעקבות התערבויות טיפוליות.

מודל הנושא H2052/484 אורתוטופית MPM מודלים על ידי הזרקת פנים-החזה של תאים סרטניים תרבותי, במיוחד H2052/484 תאים קל יחסית ההתקנה. השלבים השונים המתוארים לעיל דורשים רק ידע תרבותי של התאים הצנועים ומצעדי הניתוח נגישים לניסויים בבעלי חיים מאומנים בינוניים. עכברים ותאים ערומים צריך להיות מנ?...

Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice

מאמר זה מתאר את הדור של מודל העכבר אורתוטופית של מזותליומה האנושית על ידי השרשה של H2052/484 מזותליומה תאים לתוך חלל הצפק של עכברים החיסוני החיסונית. ניטור האורך של הפיתוח של גידולים הפנים הוערך על ידי לא פולשני ובלה מורכבת ודאלי [18F] -2-fluoro-2-deoxy-D-גלוקוז פליטת פוזיטרון טומוגרפיה ודימות טומוגרפיה ממוחשבת.

השרשה וניטור על ידי PET/CT של מודל אורתוטופית של מזותליומה של האדם בעכברים האטורי

Malignant pleural mesothelioma (MPM) is a rare and aggressive tumor arising in the mesothelium that covers the lungs, the heart, and the thoracic cavity. ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח הקשורות להתפתחות, טיפול ואבחון של מזותליומה pleural אנושי. היתרון העיקרי של מודל אורתוטופי פרה-קליני אמין זה הוא שהוא משכפל את התקדמות המחלה האנושית ואת הפתולוגיה במיקרו-וירוס קרוב לזה שנמצא בחולים עם מזותליומה pleural. לכן, מודל זה לא יסולא בפז הוא בעל משמעות גבוהה והשימוש בהדמיה מולקולרית לא פולשנית מאפשר ניטור אורך בקנה אחד עם מושג R שלוש.לפני תחילת להכין את מערכת ההרדמה ואת האזור הכירורגי במכסה המנוע לזרימה למינארית על ידי ריסוס כל המשטחים עם חיטוי. מניחים את כלובי ה-SPF המבודדים במכסה המנוע של הזרימה המחטאת. מניחים כרית חימום, פתרון povidone-יוד 30 מד המילטון מזרק, גזה כותנה ספוגיות כלי ניתוח micropipettes וטיפים מכסה המנוע לזרימת למינאר.לאחר העכבר הוא הרדמה כראוי תת עורית להזריק 0.05 מיליגרם לקילוגרם Buprinorphine להקלה על המחבת שלאחר הניתוח. לאחר מכן מניחים את העכבר על צד ימין שלה על גבי כרית החימום ולנקות את האזור הכירורגי עם פתרון povidone-יוד ולעשות חתך 5 מילימטר של העור. לנקות את השומן והשרירים שמסביב עם מספריים קהה לחשוף את הצלעות.הומוגניזציה של ההשעיה התא לטעון 50 microliters לתוך מזרק המילטון הקפדה להימנע בועות אוויר. יש לנגב את המחט ב-70% אלכוהול לפני כל זריקה. לאט להזריק את התאים לתוך חלל pleural בין הצלעות השישית והשביעית מחזיק את המחט בזווית של 30 מעלות ושניים עד שלושה מילימטרים מתחת לשרירים הבין צלעיים.שמור את המחט ממש מתחת לצלעות, כדי למנוע הזרקה לתוך הריאות. זה צריך להיות גלוי דרך השרירים. בסיום, סגרו את הפצע עם שלושה עד ארבעה תפרים נספגים ואחסנו את העכבר בסביבה מחוממת עד שהוא מתעורר.בעת ביצוע ההשתלה חשוב מאוד למקם כראוי את המחט כדי להגביל את עומק חדירת המחט. השתמש כרית חימום תא חימום, או מנורת אינפרא אדום כדי לחמם את העכברים ב 30 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות לפני הזרקת פלואור-18(FDG)באמצעות מחשבון מינון להכין שלוש עד ארבע מנות מגה-בקרל של פלואור-18(FDG)ב 150 כדי 200 microliters של מלוחים ב 1 מזרקי אינסולין מיליליטר. הקפד להקליט את כל הזמנים של זריקות מדידות מינון רדיואקטיביות, וסריקות PET על מנת לחשב ערכי ספיגה סטנדרטיים או רכבי שטח.לשקול את העכברים ואז להזריק דרך הווריד את הפלואור-18(FDG)לאחר ההזרקה להשאיר את העכברים ערים בתנאים חמים במשך 45 דקות. ואז לטעון את העכברים על מיטת הסורק להעביר את המיטה לסורק ולחשוף את בעלי החיים לסריקת CT מרוכז על הריאות. מעבירים את המיטה לתת-מערכת PET מכניסים את הרכישה שעה לאחר הזרקת הפלואור-18 (FDG) למשך 15 דקות.לאחר מכן הסירו את העכברים מתא ההדמיה ואפשרו להם להתאושש בכלוב שלהם תוך שמירה עליהם באזור המוקדש לריקבון רדיואקטיבי. לפני ניתוח תמונה לשחזר CT וסריקות PET כמתואר בכתב היד. כייל את התמונות על ידי סריקת גליל פנטום ורישום אוטומטי של הסריקות בהתאם לפתרון התוכנה המובנה.כדי לנתח את התמונות לטעון את נתוני CT כהפניה על ידי לחיצה על סמל הנתונים הפתוחים. לאחר מכן טען את נתוני PET כקלט על-ידי לחיצה על סמל הוספת הנתונים. התאימו את סרגל הצבעים כך ש- CT ו- PET יכוונו תמונות לבדיקה חזותית.בחרו בכלי 3D ROI מהתפריט הנפתח ולחצו על הוספת ROI, ותנו שם לריאות הקובץ. לחץ על אלגוריתמי פילוח סף שכונתי ולאחר מכן להגדיר קלט כמו רקע ותמונה כמו ref. הזן מינימום ומקסימום בהתאם לערכי צפיפות הריאות של העכבר.בדוק את הריאות המעובדות תלת-ממדיות על-ידי לחיצה על סמל VTK. לאחר מכן לחץ על הצג סמל טבלה ואחזר את אמצעי האחסון בטבלה שנוצרה. כדי לנתח את הפלואור-18(FDG) בגידולים להמיר תמונות PET ל- SUV על ידי בחירת אריתמטיקה מהתפריט הנפתח.בחר ריבוי סקלרי ולאחר מכן השתמש NP אחד כפי שנבחר ולהגדיר את becquerel למיליליטר גורם SUV כמו סקלרי. לבסוף בחר בכלי 3D ROI מהתפריט הנפתח ולחץ על הוסף ROI ותן שם לגידולים בקובץ. לחץ על מצב צבע 3D ו כדור לבטל את הסימון 2D בלבד ולהתאים את גודל הצורה כדי להקיף את הגידולים.לחץ על סמל הצג טבלה ולאחזר את הערך המרבי SUV מהטבלה שנוצרה. עיבודים תלת-ממדיים של סריקות CT לתת סקירה של לוקליזציה גידול MPM ולאפשר חישוב של נפחי ריאות. מדידות נפח הריאות ירידה משמעותית לאורך זמן לאחר הזרקת גידולים תוך פלורליים.סריקת PET מספקת מידע רב ערך על המצב המטבולי של גידולי MPM. הגידולים היו להבחין שבועיים לאחר השתלת פלואור-18 (FDG) ספיגה היה לכמת על ידי חילוץ רכבי שטח אשר היו בקורלציה חיובית עם מספר הימים לאחר הזרקת. יתר על כן, נפחי ריאות ופלאור-18(FDG) avidity לתאם אחד עם השני עם R בריבוע של 0.6 התומך בחוזק של מדידות אלה לניטור התפתחות גידול אורתוטופי MPM.בעקבות הליך זה ניתן לבצע שיטות אחרות כגון היסטולוגיה, אימונוהיסטוכימיה וציטומטריית זרימה על מנת להגיב לשאלות אורתוביולוגיות כגון מצב ההתפשטות והמאפיין הפנוטיפי של גידולים והמיקרו-וירוס. לסיכום, טכניקות פרה-קליניות אלה סוללות את הדרך לחוקרים לחקור אסטרטגיית אבחון וטיפול חדשה של מזותליומה pleural. יתר על כן, השימוש בהדמיה מולקולרית מצדיק תרגום מהיר של ממצאים חדשים למרפאה.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

דגם orthotopic של סרטן השחלות הצפק ב עכברים immunocompetent עבור In vivo הדמיה ניטור הגידול של המערכת החיסונית גידול

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Comprehensive &amp; Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

Comprehensive & Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

מקיף &amp; עלות מעבדה ניטור יעיל של HIV / איידס: מודל לחיקוי אפריקה

We present the video about assisting anti-retroviral therapy (ART) by an apt laboratory service - representing a South-African role model for economical ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

אינדוקציה של מחלת שתל נגד מארח ו<em&gt; In Vivo</em&gt; ניטור תא T תוך שימוש במודל Murine MHC התאמה

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Recurrent Herpetic Stromal Keratitis in Mice, a Model for Studying Human HSK

Keratitis חוזר herpetic סטרומה בעכברים, מודל ללימוד HSK אנוש

Herpetic eye disease, termed herpetic stromal keratitis (HSK), is a potentially blinding infection of the cornea that results in over 300,000 clinical ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

<em&gt; במבחנה</em&gt; מודל ללמוד ההטרוגניות של בידול Macrophage אדם וקיטוב

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

פרוטוקולים אופטימליים עבור<em&gt; Leprae Mycobacterium</em&gt; ניהול הזנים: קפוא במלאי שימור ותחזוקה בעכברים בעירום athymic

Leprosy, caused by Mycobacterium leprae, is an important infectious disease that is still endemic in many countries around the world, including Brazil. ...

A Semi-automated Approach to Preparing Antibody Cocktails for Immunophenotypic Analysis of Human Peripheral Blood

גישה אוטומטית-למחצה הכנת קוקטיילי נוגדן עבור ניתוח Immunophenotypic של אדם דם היקפי

Immunophenotyping of peripheral blood by flow cytometry determines changes in the frequency and activation status of peripheral leukocytes during disease ...

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo  Cell Trafficking by PET/CT

Murine לימפוציטים תיוג ידי<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-נוגדן קולטן מיקוד עבור<em&gt; In vivo</em&gt; סחר Cell על ידי PET / CT

This protocol illustrates the production of 64Cu and the chelator conjugation/radiolabeling of a monoclonal antibody (mAb) followed by murine lymphocyte ...

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

ניתוח של לימפוציטים extravasation שימוש<em&gt; במבחנה</em&gt; דגם של מחסום אנושי דם-מוח

Lymphocyte extravasation into the central nervous system (CNS) is critical for immune surveillance. Disease-related alterations of lymphocyte ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

דגם IL-8 עכבר transgenized חולף עבור<em&gt; בויבו</emמעקב ארוך טווח אחר תגובות דלקתיות

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...