Name: implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice
Uploaded: 2019-12-21T10:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

この研究は、リーグ・ジュネーブ・コントル・ル・ガン(V.S.-B.へ)とジュネーブ・ローザンヌ大学病院バイオメディカルイメージングセンター(CIBM)(D.J.C.、O.B.、S.G.へ)によって資金提供されました。

以下に記載されているすべての手順は、制度的な動物のケアと使用委員会とスイスのジュネーブの獣医国家事務所によって承認されました(認可GE/106/16)。MPM細胞株H2052/484が確立され、コリンDJおよびら23の記事に詳述されているように当研究室で特徴づけられた。簡単に説明すると、H2052/484細胞株は、NCI-H2052(ATCC)細胞を免疫不全ヌードマウスに静脈内注射した後に得られた胸?...

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	<li>Grishman, E., Cohen, S., Salomon, M. I., Churg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+lesions+in+acute+rheumatic+fever.">Renal lesions in acute rheumatic fever.</a> The American Journal of Pathology. 51 (6), 1045-1061 (1967).</li><li>Mossman, B. T., Gee, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos-related+diseases.">Asbestos-related diseases.</a> The New England Journal of Medicine. 320 (26), 1721-1730 (1989).</li><li>Pass, H. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos+exposure,+pleural+mesothelioma,+and+serum+osteopontin+levels.">Asbestos exposure, pleural mesothelioma, and serum osteopontin levels.</a> The New England Journal of Medicine. 353 (15), 1564-1573 (2005).</li><li>Allen, L. P., Baez, J., Stern, M. E. C., Takahashi, K., George, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+and+the+Economic+Effect+of+Asbestos+Bans+and+Decline+in+Asbestos+Consumption+and+Production+Worldwide.">Trends and the Economic Effect of Asbestos Bans and Decline in Asbestos Consumption and Production Worldwide.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (3), (2018).</li><li>LaDou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+case+for+a+global+ban+on+asbestos.">The case for a global ban on asbestos.</a> Environmental Health Perspectives. 118 (7), 897-901 (2010).</li><li>Soeberg, M., Vallance, D. A., Keena, V., Takahashi, K., Leigh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Australia's+Ongoing+Legacy+of+Asbestos:+Significant+Challenges+Remain+Even+after+the+Complete+Banning+of+Asbestos+Almost+Fifteen+Years+Ago.">Australia's Ongoing Legacy of Asbestos: Significant Challenges Remain Even after the Complete Banning of Asbestos Almost Fifteen Years Ago.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (2), (2018).</li><li>Glynn, M. E., Keeton, K. A., Gaffney, S. H., Sahmel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambient+Asbestos+Fiber+Concentrations+and+Long-Term+Trends+in+Pleural+Mesothelioma+Incidence+between+Urban+and+Rural+Areas+in+the+United+States+(1973-2012).">Ambient Asbestos Fiber Concentrations and Long-Term Trends in Pleural Mesothelioma Incidence between Urban and Rural Areas in the United States (1973-2012).</a> Risk Analysis. 38 (3), 454-471 (2018).</li><li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+trend+analysis+on+malignant+mesothelioma+in+China.">Epidemiology and trend analysis on malignant mesothelioma in China.</a> The Chinese Journal of Cancer Research. 29 (4), 361-368 (2017).</li><li>Chernova, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Fiber+Carbon+Nanotubes+Replicate+Asbestos-Induced+Mesothelioma+with+Disruption+of+the+Tumor+Suppressor+Gene+Cdkn2a+(Ink4a/Arf).">Long-Fiber Carbon Nanotubes Replicate Asbestos-Induced Mesothelioma with Disruption of the Tumor Suppressor Gene Cdkn2a (Ink4a/Arf).</a> Current Biology. 27 (21), 3302-3314 (2017).</li><li>Fukushima, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carcinogenicity+of+multi-walled+carbon+nanotubes:+challenging+issue+on+hazard+assessment.">Carcinogenicity of multi-walled carbon nanotubes: challenging issue on hazard assessment.</a> The Journal of Occupational Health. 60 (1), 10-30 (2018).</li><li>Robinson, B. W., Musk, A. W., Lake, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+mesothelioma.">Malignant mesothelioma.</a> The Lancet. 366 (9483), 397-408 (2005).</li><li>Ricciardi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+for+malignant+pleural+mesothelioma:+an+international+guidelines+review.">Surgery for malignant pleural mesothelioma: an international guidelines review.</a> The Journal of Thoracic Diseases. 10, 285-292 (2018).</li><li>Hiddinga, B. I., Rolfo, C., van Meerbeeck, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesothelioma+treatment:+Are+we+on+target?+A+review.">Mesothelioma treatment: Are we on target? A review.</a> The Journal of Advanced Research. 6 (3), 319-330 (2015).</li><li>Kim, J., Bhagwandin, S., Labow, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+peritoneal+mesothelioma:+a+review.">Malignant peritoneal mesothelioma: a review.</a> Annals of Translational Medicine. 5 (11), 236 (2017).</li><li>Ampollini, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immuno-chemotherapy+reduces+recurrence+of+malignant+pleural+mesothelioma:+an+experimental+setting.">Immuno-chemotherapy reduces recurrence of malignant pleural mesothelioma: an experimental setting.</a> The European Journal of Cardiothoracic Surgery. 35 (3), 457-462 (2009).</li><li>de Jong, M., Essers, J., van Weerden, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+preclinical+tumour+models:+improving+translational+power.">Imaging preclinical tumour models: improving translational power.</a> Nature Reviews Cancer. 14 (7), 481-493 (2014).</li><li>Mak, I. W., Evaniew, N., Ghert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lost+in+translation:+animal+models+and+clinical+trials+in+cancer+treatment.">Lost in translation: animal models and clinical trials in cancer treatment.</a> The American Journal of Translational Research. 6 (2), 114-118 (2014).</li><li>Mazzocchi, A. R., Rajan, S. A. P., Votanopoulos, K. I., Hall, A. R., Skardal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+patient-derived+3D+mesothelioma+tumor+organoids+facilitate+patient-centric+therapeutic+screening.">In vitro patient-derived 3D mesothelioma tumor organoids facilitate patient-centric therapeutic screening.</a> Scientific Reports. 8 (1), 2886 (2018).</li><li>Gengenbacher, N., Singhal, M., Augustin, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+mouse+solid+tumour+models:+status+quo,+challenges+and+perspectives.">Preclinical mouse solid tumour models: status quo, challenges and perspectives.</a> Nature Reviews Cancer. 17 (12), 751-765 (2017).</li><li>Kanemura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+response+assessment+with+18F-FDG-PET/CT+is+superior+to+modified+RECIST+for+the+evaluation+of+response+to+platinum-based+doublet+chemotherapy+in+malignant+pleural+mesothelioma.">Metabolic response assessment with 18F-FDG-PET/CT is superior to modified RECIST for the evaluation of response to platinum-based doublet chemotherapy in malignant pleural mesothelioma.</a> The European Journal of Radiology. 86, 92-98 (2017).</li><li>Truong, M. T., Viswanathan, C., Godoy, M. B., Carter, B. W., Marom, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+pleural+mesothelioma:+role+of+CT,+MRI,+and+PET/CT+in+staging+evaluation+and+treatment+considerations.">Malignant pleural mesothelioma: role of CT, MRI, and PET/CT in staging evaluation and treatment considerations.</a> Seminars in Roentgenology. 48 (4), 323-334 (2013).</li><li>MacArthur Clark, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+3Rs+in+research:+a+contemporary+approach+to+replacement,+reduction+and+refinement.">The 3Rs in research: a contemporary approach to replacement, reduction and refinement.</a> The British Journal of Nutrition. 120, 1-7 (2018).</li><li>Colin, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Model+of+Human+Malignant+Mesothelioma+in+Athymic+Mice.">Experimental Model of Human Malignant Mesothelioma in Athymic Mice.</a> The International Journal of Molecular Sciences. 19 (7), (2018).</li><li>Fueger, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+animal+handling+on+the+results+of+18F-FDG+PET+studies+in+mice.">Impact of animal handling on the results of 18F-FDG PET studies in mice.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 47 (6), 999-1006 (2006).</li><li>Devaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissues+in+different+anatomical+sites+can+sculpt+and+vary+the+tumor+microenvironment+to+affect+responses+to+therapy.">Tissues in different anatomical sites can sculpt and vary the tumor microenvironment to affect responses to therapy.</a> Molecular Therapy. 22 (1), 18-27 (2014).</li><li>Beliz&#225;rio, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunodeficient+mouse+models:+An+overview.">Immunodeficient mouse models: An overview.</a> The Open Immunology Journal. 2, 79-85 (2009).</li><li>Jackaman, C., Yeoh, T. L., Acuil, M. L., Gardner, J. K., Nelson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+mesothelioma+induces+locally-proliferating+IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+)+M3+macrophages+that+can+be+selectively+depleted+by+chemotherapy+or+immunotherapy.">Murine mesothelioma induces locally-proliferating IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+) M3 macrophages that can be selectively depleted by chemotherapy or immunotherapy.</a> Oncoimmunology. 5 (6), 1173299 (2016).</li><li>James, M. L., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+imaging+primer:+modalities,+imaging+agents,+and+applications.">A molecular imaging primer: modalities, imaging agents, and applications.</a> Physiological Reviews. 92 (2), 897-965 (2012).</li><li>Kenny, L. M., Aboagye, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+translation+of+molecular+imaging+agents+used+in+PET+studies+of+cancer.">Clinical translation of molecular imaging agents used in PET studies of cancer.</a> Advances in Cancer Research. 124, 329-374 (2014).</li></ol>

本論文では、アチミックマウスの胸膜腔に注入されたMPM H2052/484細胞のオリジナルオルソトピックモデルと、小型動物PET/CTイメージングによるモニタリング方法について述べている。このモデルは適度な動物の扱いおよび外科の技術と実施することができ、非常によい発達率を表示する。これは、未治療のマウスで約10週間の大きな実験ウィンドウと注射後2週間で腫瘍の非侵襲的な縦方向検出...

悪性胸膜中皮腫(MPM)は、アスベスト繊維1、2、3への曝露に最も頻繁に関連する癌である。ほとんどの西洋諸国4、5、6でアスベストが禁止されているが、MPMの発生率は依然として7、8増加している。近年、カーボンナノチューブへのマウスの暴露は、ヒト9、10において重大な健康リスクをもたらす可能性があることを示唆している。このデータは、これらの製品への曝露が、悪性中皮腫への進行の基礎である慢性炎症および分子変化(例えば、腫瘍抑制経路の喪失)を誘発する可能性があることを示唆している。現在、マルチウォールカーボンナノチューブはナノテクノロジーの最も重要な製品の一つであり、複合材料、エネルギー貯蔵材料、医薬品、エレクトロニクス、環境修復材料など様々な製品にますます取り入れされています。
MPMは予後不良の癌であり、ほとんどの患者は現在の治療モダリティ11の有効性が限られているため診断後2年以内に死亡する。MPMの治療の選択は癌の段階に依存する。ほとんどの初期段階のMPM(ステージ1およびおそらくいくつかのステージ2または3の腫瘍)において、臨床アプローチは、放射線療法および化学療法12に関連する腫瘍の外科的切除を含むマルチモーダル療法である。シスプラチンおよびペメトレキセドとの併用化学療法は、進行した局所侵襲性疾患と診断されたほとんどの患者の治療のために示される、それは外科的切除に適さない、または治療手術の候補ではない13、14である。したがって、MPM患者に対してより効果的な治療法を開発することが急務である。しかし、MPMの臨床関連性を反映する生体内動物モデルで検証されたものはほとんどありません。いくつかのマウスMPMモデルが開発されているが、それらのほとんどは、MPM腫瘍微小環境15、16、17、18の複雑な側面を忠実に再現していない。マウスにおけるアスベスト誘発MPMの使用、遺伝子操作されたMPMマウスモデル、またはマウスMPM細胞株の同系移植モデルは、基本的な表現型および機能的な違いによって制限され、その結果、新しい発見をクリニックに翻訳することが不十分である。他の前臨床マウスMPMモデルは、主に免疫不全マウスにおけるヒト細胞株の皮下または腹膜異種移植片に依存する。これらのモデルは、基本的なデータを監視し、提供することが容易であるが、これらの異種移植片の微小環境は、これらの前臨床試験の大部分の翻訳力を損なうヒト腫瘍に匹敵するものではない17、19。逆に、オルソトピック異種移植片は、元の腫瘍部位16に見られるものと同様の微小環境に囲まれている患者腫瘍行動および治療への応答をよりよく反映する。
[18F]FDG-PET/CTによる分子イメージングは、MPM20、21を有する患者における疾患の進行を縦方向に監視する選択方法である。したがって、この非侵襲的イメージング法に頼る上で、臨床試験16、22への前臨床試験の翻訳を大いに促進する。さらに、各動物は時間の経過に応じて独自の制御を表すので、必要な動物の数を減らすのに役立ちます。
本稿では、ヒトMPM細胞株H2052/484をアチミックマウスの胸膜腔に注入した後に得られた信頼性の高いオルソトピック異種移植片MPMモデルを提示する。[18F]FDG-PET/CTイメージングと組み合わせることで、このモデルは、ヒトMPMの新しい診断戦略および治療の機能的および機械的効果を研究するための貴重で再現可能な方法である。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3-mice bed</td>
			<td>Minerve</td>
			<td></td>
			<td>bed for mice imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Athymic Nude-Foxn1n nu/nu</td>
			<td>Envigo, Huntingdon, UK</td>
			<td>6907F</td>
			<td>immunodeficient mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Mundipharma Medical Company, CH</td>
			<td>111131</td>
			<td>polyvidone iodine solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Saline (DPBS)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>14190094</td>
			<td>Buffer for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>PAA Laboratories, Pasching, Austria</td>
			<td>A15-101</td>
			<td>cell culture medium supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>324826</td>
			<td>syringe for cell injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>15140122</td>
			<td>antibiotics for cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>61870010</td>
			<td>basal cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temgesic (Buprenorphin 0.3 mg/mL)</td>
			<td>Alloga SA, CH</td>
			<td>700320</td>
			<td>opioid analgesic product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triumph PET/SPECT/CT</td>
			<td>Trifoil, Chatsworth, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>imaging equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>25050014</td>
			<td>enzymatic cell dissociation buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virkon S 2%</td>
			<td>Milian, Vernier, CH</td>
			<td>972472</td>
			<td>disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vivoquant</td>
			<td>Invicro, Boston, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice

悪性胸膜中皮腫(MPM)は、肺、心臓、胸腔を覆う中皮に生じる稀で攻撃的な腫瘍である。MPMの開発は主にアスベストに関連しています。治療は、中央値の生存平均が診断時から9〜18ヶ月であるので、わずかな生存期間のみを提供する。したがって、より効果的な治療法を特定する必要があります。新しい治療標的を記述するほとんどのデータは、インビトロ実験から得られ、生体内前臨床モデルで信頼性の高い検証を行う必要があります。本稿では、ヒトMPM細胞株H2052/484を免疫不全アチミックマウスの胸膜腔に注入した後に得られた、そのような信頼性の高いMPMオルソトピックモデルの1つについて説明する。オルソトピック部位での移植は、自然な生体内環境での腫瘍の進行を研究することを可能にする。陽電子放射断層撮影/コンピュータ断層撮影(PET/CT)臨床[18F]-2-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース([18F]FDG)ラジオトレーサを用いた分子イメージングは、MPMを有する患者を検査するための診断方法である。従って、[18F]FDG-PET/CTは、H2052/484オルソトピックモデルの疾患進行を縦方向にモニタリングするために使用された。この技術は、腫瘍の発達を非侵襲的に監視することができ、必要な動物の数を有意に減少させることができるので、高い3R電位(Rは動物の数を誘発し、痛みや不快感を軽減するRefine、および代替を伴うReplace動物実験)を有する。
このモデルは高い発達率を示し、急速な腫瘍の成長は費用効率がよく、急速な臨床翻訳を可能にする。このオルソトピック異種移植片MPMモデルを使用することにより、研究者は治療介入に続く信頼性の高いMPMモデルの生物学的応答を評価することができる。

H2052/484 オルソトピックモデル 培養癌細胞の胸腔内注射によるオルソトピックMPMモデル、特にH2052/484細胞は比較的セットアップが容易である。上記の異なるステップは、適度な細胞培養知識を必要とし、手術ステップは適度に訓練された動物実験者にアクセス可能です。ヌードマウスおよび細胞は、移植の結果を最大化するために無菌条件下で操作されるべきである。短い麻酔...

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Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice

本稿では、免疫不全歯立マウスの胸膜腔にH2052/484中皮腫細胞を移植することにより、ヒト胸膜中皮腫の直交マウスモデルの生成について説明する。胸腔内腫瘍の発症の縦方向モニタリングを非侵襲的マルチモーダル[18F]-2-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース陽電子放射断層撮影およびコンピュータ断層撮影法によって評価した。

アチミックマウスにおけるヒト胸膜中皮腫の正形細胞モデルのPET/CTによる移植とモニタリング

Malignant pleural mesothelioma (MPM) is a rare and aggressive tumor arising in the mesothelium that covers the lungs, the heart, and the thoracic cavity. ...

この方法は、ヒト胸膜中皮腫の開発、治療および診断に関連する重要な質問に答えるのに役立ちます。この信頼性の高い前臨床整形物モデルの主な利点は、胸膜中皮腫患者に見られる微小環境でヒト疾患の進行と病理を複製することです。したがって、この貴重なモデルは、重要度が高く、非侵襲的な分子イメージングを使用することで、3つのR概念に沿った縦方向モニタリングが可能になります。麻酔システムと手術領域を噴霧してすべての表面に消毒剤を噴霧して、ラミナルフローフードで整える前に行ってください。マイクロ分離されたSPFケージを、感染したフローフードに入れます。加熱パッド、ポビドネヨウ素溶液30ゲージハミルトンシリンジ、ガーゼおよび綿棒手術器具とマイクロピペットと先端を層状フローフードに配置します。マウスが適切に麻酔を受けたら、術後のパンレリーフのために1キログラムブプリノアフィンあたり0.05ミリグラムを注入する。その後、マウスを加熱パッドの上の右側に置き、ポビドンヨウ素溶液で外科領域をきれいにし、皮膚の5ミリメートルの切開を行います。周囲の脂肪と筋肉を鈍いはさみでクリアして、肋骨を露出させます。細胞懸濁液を均質化し、50マイクロリットルをハミルトンシリンジにロードし、気泡を避けるようにします。注射の前に70%アルコールで針を拭いてください。30度の角度で針を保持し、肋間筋肉の下で2〜3ミリメートルの間に6番目と7番目の肋骨の間の胸膜腔にゆっくりと細胞を注入します。肺に注入を避けるために肋骨のすぐ下に針を保ちます.それは筋肉を通して見えるはずです。終了したら、3〜4本の吸収性縫合糸で傷口を閉じ、目が覚めるまでマウスを温めた環境に保管します。移植を行うときは、針の浸透の深さを制限するために針を正しく配置することが非常に重要です。加熱室加熱パッド、または赤外線ランプを使用して、fluor-18(FDG)の注射前に30°Cでマウスを30°Cで過温します(FDG)用量計算機を使用すると、150〜200マイクロリットルの生理食塩水で3〜4メガベクレル用量を調製します。標準的な取り込み値またはSUVを計算するために、放射能線量測定注射、およびPETスキャンのすべての時間を記録することを確認してください。その後、注射後にマウスを45分間暖かい状態で目覚めた後、マウスの重さを静脈内にfluor-18(FDG)に注入する。次に、スキャナーベッドにマウスをロードし、スキャナーにベッドを転送し、肺を中心としたCTスキャンに動物を置きます。PETサブシステムにベッドを移動し、15分間の間、フルーラ-18(FDG)注入の1時間後に取得を挿入します。その後、画像処理室からマウスを取り出し、放射性崩壊専用の領域に保管してケージ内で回復させます。画像解析の前に、原稿に記載されているようにCTスキャンとPETスキャンを再構築します。ファントムシリンダーをスキャンして画像をキャリブレーションし、内蔵のソフトウェアソリューションに従ってスキャンを自動的に共同登録します。画像を分析するには、開いているデータアイコンをクリックして、CTデータを参照としてロードします。次に、追加データアイコンをクリックして、入力としてPETデータをロードします。CT と PET が画像を対比して目視検査できるようにカラースケールを調整します。ドロップダウン メニューから [3D ROI] ツールを選択し、[ROI の追加] をクリックし、ファイルの肺に名前を付けます。セグメンテーション アルゴリズムと近傍しきい値をクリックし、入力を背景として定義し、イメージを ref として定義します。マウスの肺密度の値に従って最小と最大を入力します。VTK アイコンをクリックして、3D レンダリングされた肺を検査します。次に、[テーブルアイコンを表示]をクリックし、生成されたテーブルのボリュームを取得します。腫瘍の蛍光体-18(FDG)を分析するには、ドロップダウンメニューから演算を選択してPET画像をSUVに変換します。スカラー多重度を選択し、選択したNP 1を使用し、1ミリリットル当たりのベクレルをSUVファクターにスカラーとして設定します。最後に、ドロップダウン メニューから [3D ROI] ツールを選択し、[ROI の追加] をクリックしてファイルの腫瘍に名前を付けます。3D ペイント モードをクリックし、球体は 2D のみをオフにし、腫瘍を囲むようにシェイプのサイズを調整します。テーブルアイコンを表示して、生成されたテーブルからSUVの最大値を取得します。CT スキャンからの 3D レンダリングは MPM 腫瘍の局在の概要を与え、肺容積の計算を可能にする。肺容積測定は、胸膜内腫瘍の注射後に時間の経過とともに有意に減少する。PETスキャンはMPM腫瘍の代謝状態についての貴重な情報を提供する。この腫瘍は移植後2週間で区別可能であり、fluor-18(FDG)取り込みは、注射後の日数と正の相関を持つSUVを抽出することによって定量化した。さらに、肺容積とフルオロ-18(FDG)の熱心さは、MPM異所腫瘍の発生を監視するためのこれらの測定の強さを支える0.6のR二乗と相互に相関する。この手順に従って、組織学、免疫組織化学、およびフローサイトメトリーなどの他の方法は、腫瘍の増殖状態および表現型特性および微小環境の形態的な問題に答えるために行うことができる。結論として、これらの前臨床技術は、研究者が胸膜中皮腫の新しい診断および治療戦略を探求する道を開く。さらに、分子イメージングの使用は、クリニックへの新しい知見の迅速な翻訳を保証します。

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

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のための免疫担当マウスにおける漿液性卵巣癌の同所性モデル in vivoで</em腫瘍免疫応答の>腫瘍イメージングとモニタリング

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Comprehensive &amp; Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

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HIV / AIDSの包括的＆コスト効率に優れた研究室の監視：アフリカのロールモデル

We present the video about assisting anti-retroviral therapy (ART) by an apt laboratory service - representing a South-African role model for economical ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

移植片対宿主病の誘導および<emインビボで&gt;</emMHCマッチしたマウスモデルを使用する&gt; T細胞のモニタリング

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Recurrent Herpetic Stromal Keratitis in Mice, a Model for Studying Human HSK

マウスにおける再発性ヘルペス性間質性角膜炎、人間のHSKを研究するためのモデル

Herpetic eye disease, termed herpetic stromal keratitis (HSK), is a potentially blinding infection of the cornea that results in over 300,000 clinical ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

不定冠詞<em&gt;インビトロ</emヒトマクロファージの分化と偏光の不均一性を研究するために&gt;モデル

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

のための最適化されたプロトコル<em&gt;らい菌</em&gt;ひずみ管理：無胸腺ヌードマウスにおける凍結ストック保全とメンテナンス

Leprosy, caused by Mycobacterium leprae, is an important infectious disease that is still endemic in many countries around the world, including Brazil. ...

A Semi-automated Approach to Preparing Antibody Cocktails for Immunophenotypic Analysis of Human Peripheral Blood

ヒト末梢血の免疫表現型分析のための抗体のカクテルを準備する半自動のアプローチ

Immunophenotyping of peripheral blood by flow cytometry determines changes in the frequency and activation status of peripheral leukocytes during disease ...

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo  Cell Trafficking by PET/CT

マウスリンパ球標識による<sup&gt; 64</sup以下のためのターゲット設定&gt;のCu-抗体の受容体<em&gt;インビボ</em&gt; PET / CTによる細胞輸送

This protocol illustrates the production of 64Cu and the chelator conjugation/radiolabeling of a monoclonal antibody (mAb) followed by murine lymphocyte ...

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

使用してリンパ球血管外漏出の分析<em&gt;インビトロ</em&gt;ヒト血液脳関門のモデル

Lymphocyte extravasation into the central nervous system (CNS) is critical for immune surveillance. Disease-related alterations of lymphocyte ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

IL-8トランジェントトランスジェニックマウスモデル<em&gt;インビボ</em&gt;炎症反応の長期モニタリング

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...