Name: implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice
Uploaded: 2019-12-21T10:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

Это исследование финансировалось Ligue Genevoise contre le Cancer (в V.S.-B.) и Центром биомедицинской визуализации (CIBM) университетов и больниц в Петербурге и Лозанне (в D.J.C., O.B. и S.G.).

Все процедуры, описанные ниже, были утверждены институциональным комитетом по уходу за животными и использованию и ветеринарным государственным отделением в Швейцарии (Authorization GE/106/16). Линия клеток MPM H2052/484 была создана и охарактеризована в нашей лаборатории как подробно описано в стать...

<ol>
	<li>Grishman, E., Cohen, S., Salomon, M. I., Churg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+lesions+in+acute+rheumatic+fever.">Renal lesions in acute rheumatic fever.</a> The American Journal of Pathology. 51 (6), 1045-1061 (1967).</li><li>Mossman, B. T., Gee, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos-related+diseases.">Asbestos-related diseases.</a> The New England Journal of Medicine. 320 (26), 1721-1730 (1989).</li><li>Pass, H. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos+exposure,+pleural+mesothelioma,+and+serum+osteopontin+levels.">Asbestos exposure, pleural mesothelioma, and serum osteopontin levels.</a> The New England Journal of Medicine. 353 (15), 1564-1573 (2005).</li><li>Allen, L. P., Baez, J., Stern, M. E. C., Takahashi, K., George, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+and+the+Economic+Effect+of+Asbestos+Bans+and+Decline+in+Asbestos+Consumption+and+Production+Worldwide.">Trends and the Economic Effect of Asbestos Bans and Decline in Asbestos Consumption and Production Worldwide.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (3), (2018).</li><li>LaDou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+case+for+a+global+ban+on+asbestos.">The case for a global ban on asbestos.</a> Environmental Health Perspectives. 118 (7), 897-901 (2010).</li><li>Soeberg, M., Vallance, D. A., Keena, V., Takahashi, K., Leigh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Australia's+Ongoing+Legacy+of+Asbestos:+Significant+Challenges+Remain+Even+after+the+Complete+Banning+of+Asbestos+Almost+Fifteen+Years+Ago.">Australia's Ongoing Legacy of Asbestos: Significant Challenges Remain Even after the Complete Banning of Asbestos Almost Fifteen Years Ago.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (2), (2018).</li><li>Glynn, M. E., Keeton, K. A., Gaffney, S. H., Sahmel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambient+Asbestos+Fiber+Concentrations+and+Long-Term+Trends+in+Pleural+Mesothelioma+Incidence+between+Urban+and+Rural+Areas+in+the+United+States+(1973-2012).">Ambient Asbestos Fiber Concentrations and Long-Term Trends in Pleural Mesothelioma Incidence between Urban and Rural Areas in the United States (1973-2012).</a> Risk Analysis. 38 (3), 454-471 (2018).</li><li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+trend+analysis+on+malignant+mesothelioma+in+China.">Epidemiology and trend analysis on malignant mesothelioma in China.</a> The Chinese Journal of Cancer Research. 29 (4), 361-368 (2017).</li><li>Chernova, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Fiber+Carbon+Nanotubes+Replicate+Asbestos-Induced+Mesothelioma+with+Disruption+of+the+Tumor+Suppressor+Gene+Cdkn2a+(Ink4a/Arf).">Long-Fiber Carbon Nanotubes Replicate Asbestos-Induced Mesothelioma with Disruption of the Tumor Suppressor Gene Cdkn2a (Ink4a/Arf).</a> Current Biology. 27 (21), 3302-3314 (2017).</li><li>Fukushima, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carcinogenicity+of+multi-walled+carbon+nanotubes:+challenging+issue+on+hazard+assessment.">Carcinogenicity of multi-walled carbon nanotubes: challenging issue on hazard assessment.</a> The Journal of Occupational Health. 60 (1), 10-30 (2018).</li><li>Robinson, B. W., Musk, A. W., Lake, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+mesothelioma.">Malignant mesothelioma.</a> The Lancet. 366 (9483), 397-408 (2005).</li><li>Ricciardi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+for+malignant+pleural+mesothelioma:+an+international+guidelines+review.">Surgery for malignant pleural mesothelioma: an international guidelines review.</a> The Journal of Thoracic Diseases. 10, 285-292 (2018).</li><li>Hiddinga, B. I., Rolfo, C., van Meerbeeck, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesothelioma+treatment:+Are+we+on+target?+A+review.">Mesothelioma treatment: Are we on target? A review.</a> The Journal of Advanced Research. 6 (3), 319-330 (2015).</li><li>Kim, J., Bhagwandin, S., Labow, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+peritoneal+mesothelioma:+a+review.">Malignant peritoneal mesothelioma: a review.</a> Annals of Translational Medicine. 5 (11), 236 (2017).</li><li>Ampollini, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immuno-chemotherapy+reduces+recurrence+of+malignant+pleural+mesothelioma:+an+experimental+setting.">Immuno-chemotherapy reduces recurrence of malignant pleural mesothelioma: an experimental setting.</a> The European Journal of Cardiothoracic Surgery. 35 (3), 457-462 (2009).</li><li>de Jong, M., Essers, J., van Weerden, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+preclinical+tumour+models:+improving+translational+power.">Imaging preclinical tumour models: improving translational power.</a> Nature Reviews Cancer. 14 (7), 481-493 (2014).</li><li>Mak, I. W., Evaniew, N., Ghert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lost+in+translation:+animal+models+and+clinical+trials+in+cancer+treatment.">Lost in translation: animal models and clinical trials in cancer treatment.</a> The American Journal of Translational Research. 6 (2), 114-118 (2014).</li><li>Mazzocchi, A. R., Rajan, S. A. P., Votanopoulos, K. I., Hall, A. R., Skardal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+patient-derived+3D+mesothelioma+tumor+organoids+facilitate+patient-centric+therapeutic+screening.">In vitro patient-derived 3D mesothelioma tumor organoids facilitate patient-centric therapeutic screening.</a> Scientific Reports. 8 (1), 2886 (2018).</li><li>Gengenbacher, N., Singhal, M., Augustin, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+mouse+solid+tumour+models:+status+quo,+challenges+and+perspectives.">Preclinical mouse solid tumour models: status quo, challenges and perspectives.</a> Nature Reviews Cancer. 17 (12), 751-765 (2017).</li><li>Kanemura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+response+assessment+with+18F-FDG-PET/CT+is+superior+to+modified+RECIST+for+the+evaluation+of+response+to+platinum-based+doublet+chemotherapy+in+malignant+pleural+mesothelioma.">Metabolic response assessment with 18F-FDG-PET/CT is superior to modified RECIST for the evaluation of response to platinum-based doublet chemotherapy in malignant pleural mesothelioma.</a> The European Journal of Radiology. 86, 92-98 (2017).</li><li>Truong, M. T., Viswanathan, C., Godoy, M. B., Carter, B. W., Marom, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+pleural+mesothelioma:+role+of+CT,+MRI,+and+PET/CT+in+staging+evaluation+and+treatment+considerations.">Malignant pleural mesothelioma: role of CT, MRI, and PET/CT in staging evaluation and treatment considerations.</a> Seminars in Roentgenology. 48 (4), 323-334 (2013).</li><li>MacArthur Clark, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+3Rs+in+research:+a+contemporary+approach+to+replacement,+reduction+and+refinement.">The 3Rs in research: a contemporary approach to replacement, reduction and refinement.</a> The British Journal of Nutrition. 120, 1-7 (2018).</li><li>Colin, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Model+of+Human+Malignant+Mesothelioma+in+Athymic+Mice.">Experimental Model of Human Malignant Mesothelioma in Athymic Mice.</a> The International Journal of Molecular Sciences. 19 (7), (2018).</li><li>Fueger, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+animal+handling+on+the+results+of+18F-FDG+PET+studies+in+mice.">Impact of animal handling on the results of 18F-FDG PET studies in mice.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 47 (6), 999-1006 (2006).</li><li>Devaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissues+in+different+anatomical+sites+can+sculpt+and+vary+the+tumor+microenvironment+to+affect+responses+to+therapy.">Tissues in different anatomical sites can sculpt and vary the tumor microenvironment to affect responses to therapy.</a> Molecular Therapy. 22 (1), 18-27 (2014).</li><li>Beliz&#225;rio, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunodeficient+mouse+models:+An+overview.">Immunodeficient mouse models: An overview.</a> The Open Immunology Journal. 2, 79-85 (2009).</li><li>Jackaman, C., Yeoh, T. L., Acuil, M. L., Gardner, J. K., Nelson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+mesothelioma+induces+locally-proliferating+IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+)+M3+macrophages+that+can+be+selectively+depleted+by+chemotherapy+or+immunotherapy.">Murine mesothelioma induces locally-proliferating IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+) M3 macrophages that can be selectively depleted by chemotherapy or immunotherapy.</a> Oncoimmunology. 5 (6), 1173299 (2016).</li><li>James, M. L., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+imaging+primer:+modalities,+imaging+agents,+and+applications.">A molecular imaging primer: modalities, imaging agents, and applications.</a> Physiological Reviews. 92 (2), 897-965 (2012).</li><li>Kenny, L. M., Aboagye, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+translation+of+molecular+imaging+agents+used+in+PET+studies+of+cancer.">Clinical translation of molecular imaging agents used in PET studies of cancer.</a> Advances in Cancer Research. 124, 329-374 (2014).</li></ol>

В этой статье описывается оригинальная ортотопическая модель клеток MPM H2052/484, впрыскиваемых в плевральную полость агимических мышей, и метод мониторинга с помощью изображения ПЭТ/КТ у мелких животных. Эта модель может быть реализована с умеренной обработки животных и хирургии навыки и...

Злокачественная плевральная мезотелиома (MPM) является рак чаще всего связаны с воздействием асбеста волокон1,2,3. Хотя асбест был запрещен в большинстве западных стран4,5,6, заболеваемость MPM по-прежнему растет7,8. В последнее время воздействие мышей нананотрубки углерода предполагает, что они могут привести к значительному риску для здоровья людей9,10. Данные показывают, что воздействие этих продуктов может вызвать хроническое воспаление и молекулярные изменения (например, потеря опухолевых путей супрессора), которые лежат в основе прогрессии злокачественной мезотелиомы. В настоящее время многостенные углеродные нанотрубки являются одним из наиболее важных продуктов нанотехнологий и все чаще включаются в различные продукты, такие как композиты, материалы для хранения энергии, медицина, электроника и материалы для восстановления окружающей среды.
MPM является рак с плохим прогнозом, и большинство пациентов умирают в течение двух лет после постановки диагноза из-за ограниченной эффективности текущих методов лечения11. Выбор лечения МПМ зависит от стадии рака. Для большинства ранних стадиях MPM (стадия 1 и, возможно, некоторые стадии 2 или 3 опухоли), клинический подход мультимодальной терапии, включая хирургическую резекцию опухолей, связанных с лучевой терапией и химиотерапией12. Комбинированная химиотерапия с цисплатином и пеметрексом показана для лечения большинства пациентов с диагнозом прогрессирующее локально инвазивное заболевание, которое не поддается хирургической резекции, или которые в противном случае не являются кандидатами на лечебную операцию13,14. Поэтому существует настоятельная необходимость в разработке более эффективных методов лечения пациентов СМП. Тем не менее, Есть несколько проверенных моделей in vivo животных, которые отражают клиническую релевантность MPM. Было разработано несколько моделей murine MPM, но большинство из них не подытожают сложные аспекты микросреды опухоли MPM15,16,17,18. Использование асбеста индуцированной MPM у мышей, генетически модифицированных моделей мыши MPM, или моделей сингенной трансплантации линий клеток Murine MPM ограничены фундаментальными фенотипическими и функциональными различиями и, следовательно, плохо переводят новые открытия в клинику. Другие доклинические модели Murine MPM в основном полагаются на подкожные или перитонеальные ксенотранспланты клеточных линий человека у иммунодефицитных мышей. Хотя эти модели легко контролировать и предоставлять фундаментальные данные, микроокружение этих ксенотрансплантатов не то, что сопоставимы с человеческими опухолями, ухудшающих трансляционную силу большинства из этих доклинических исследований17,19. И наоборот, ортотопические ксенотрансплантаты лучше отражают поведение опухоли пациента и ответ на лечение, поскольку они окружены аналогичной микросредой, как один найти в первоначальном сайте опухоли16.
Молекулярная визуализация по No18F'FDG-PET/CT является методом выбора продольно контролировать прогрессирование заболевания у пациентов с MPM20,21. Поэтому прибегая к этому неинвазивный метод визуализации, значительно способствует переводу доклинических исследований на клинические испытания16,22. Кроме того, это помогает уменьшить необходимое количество животных, как каждое животное представляет свой собственный контроль с течением времени.
В этой статье мы представляем надежную ортотопическую модель ксенотрансплантата MPM, полученную после инъекции клеточной линии MPM человека H2052/484 в плевральную полость агимических мышей. Эта модель, в сочетании с изображением No18F'FDG-PET/CT, является ценным и воспроизводимым методом изучения функциональных и механистических эффектов новых диагностических стратегий и методов лечения МПМ человека.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3-mice bed</td>
			<td>Minerve</td>
			<td></td>
			<td>bed for mice imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Athymic Nude-Foxn1n nu/nu</td>
			<td>Envigo, Huntingdon, UK</td>
			<td>6907F</td>
			<td>immunodeficient mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Mundipharma Medical Company, CH</td>
			<td>111131</td>
			<td>polyvidone iodine solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Saline (DPBS)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>14190094</td>
			<td>Buffer for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>PAA Laboratories, Pasching, Austria</td>
			<td>A15-101</td>
			<td>cell culture medium supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>324826</td>
			<td>syringe for cell injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>15140122</td>
			<td>antibiotics for cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>61870010</td>
			<td>basal cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temgesic (Buprenorphin 0.3 mg/mL)</td>
			<td>Alloga SA, CH</td>
			<td>700320</td>
			<td>opioid analgesic product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triumph PET/SPECT/CT</td>
			<td>Trifoil, Chatsworth, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>imaging equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>25050014</td>
			<td>enzymatic cell dissociation buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virkon S 2%</td>
			<td>Milian, Vernier, CH</td>
			<td>972472</td>
			<td>disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vivoquant</td>
			<td>Invicro, Boston, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice

Злокачественная плевральная мезотелиома (MPM) является редкой и агрессивной опухолью, возникающей в мезотелиии, которая покрывает легкие, сердце и грудную полость. Развитие MPM в основном связано с асбестом. Лечение обеспечивает лишь скромную выживаемость, так как средняя продолжительность выживаемости составляет 9-18 месяцев с момента постановки диагноза. Поэтому необходимо определить более эффективное лечение. Большинство данных, описывающих новые терапевтические цели, были получены в ходе экспериментов in vitro и должны быть проверены в надежных доклинических моделях in vivo. В этой статье описывается одна из таких надежных ортотопических моделей MPM, полученных после инъекции человеческой линии клеток MPM H2052/484 в плевральную полость иммунодефицитных атгимических мышей. Трансплантация в ортотопии позволяет изучать прогрессирование опухоли в естественной среде in vivo. Позитронно-эмиссионная томография/компьютерная томография (ПЭТ/КТ) молекулярная томография с использованием клинической no18F'-2-fluoro-2-deoxy-D-глюкозы(No 18F'FDG) радиотрейд является методом диагностики выбора для обследования пациентов с MPM. Соответственно, для продольного мониторинга прогрессирования заболевания ортотопической модели H2052/484 использовался18ФЗФГ-ПЭТ/КТ. Этот метод имеет высокий потенциал 3R(Reduce количество животных, Refine для уменьшения боли и дискомфорта, и Replace животных экспериментов с альтернативами), так как развитие опухоли можно контролировать неинвазивно и количество животных, необходимых может быть значительно сокращена.
Эта модель отображает высокий уровень развития, быстрый рост опухоли, является экономически эффективным и позволяет быстро ею клинический перевод. Используя эту ортотопическую модель xenograft MPM, исследователи могут оценить биологические реакции надежной модели MPM после терапевтических вмешательств.

Ортотопическая модель H2052/484 Ортотопические модели MPM путем внутриторакальной инъекции культивированных раковых клеток, особенно H2052/484 клеток относительно легко настроить. Различные шаги, описанные выше, требуют только скромных знаний клеточной культуры, и этапы операции д?...

Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice

В этой статье описывается поколение ортотопической мыши модели человека плевральной мезотелиомы путем имплантации H2052/484 мезотелиомы клеток в плевральной полости иммунокомпромиссных атимических мышей. Продольный мониторинг развития интрафлеурных опухолей оценивался с помощью неинвазивной мультимодальной no18ФЗ-2-фторо-2-дезокси-D-глюкозы позитронно-глюкозной позитронной эмиссионной томографии и компьютерной томографии.

Имплантация и мониторинг ПЭТ/КТ ортотопической модели плевральной мезотелиомы человека у атимических мышей

Malignant pleural mesothelioma (MPM) is a rare and aggressive tumor arising in the mesothelium that covers the lungs, the heart, and the thoracic cavity. ...

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы, связанные с развитием, лечением и диагностикой плевральной мезотелиомы человека. Основным преимуществом этой надежной доклинической ортотопической модели является то, что она повторяет прогрессирование и патологию заболевания человека в микроокноронии, близкой к те, которые находятся у пациентов с плевральной мезотелиомой. Таким образом, эта бесценная модель имеет большое значение и использование неинвазивной молекулярной визуализации позволяет продольного мониторинга в соответствии с тремя R концепции.Перед началом подготовки анестезии системы и хирургической области в ламинарный капюшон потока путем распыления всех поверхностей с дезинфицирующим средством. Поместите микро-изолированные клетки SPF в дезинфицированный капюшон потока. Поместите грелку, раствор povidone-йода 30 калибровочный шприц Гамильтона, марлю и ватные тампоны хирургические инструменты и микропипюты и кончики в капоте ламинарного потока.После того, как мышь правильно анестезированной подкожно вводить 0,05 миллиграммов на килограмм Бупринорфин для послеоперационного рельефа кастрюлю. Затем поместите мышь на правой стороне на верхней части грелки и очистить хирургическую область с раствором povidone-йода и сделать 5-миллиметровый разрез кожи. Очистить окружающий жир и мышцы тупыми ножницами, чтобы разоблачить ребра.Гомогенизировать подвеску клетки и загрузить 50 микролитров в шприц Гамильтон убедившись, чтобы избежать пузырьков воздуха. Протрите иглу 70% алкоголя до каждой инъекции. Медленно вводите клетки в плевральной полости между шестым и седьмым ребрами, держа иглу под углом 30 градусов и два-три миллиметра под межреберными мышцами.Держите иглу прямо под ребрами, чтобы избежать инъекций в легкие. Она должна быть видна через мышцы. Когда закончите, закройте рану тремя-четырьмя абсорбируемыми швами и храните мышь в разогретой среде, пока она не проснется.При выполнении имплантации очень важно правильно распоставить иглу, чтобы ограничить глубину проникновения иглы. Используйте нагревательную камеру, или инфракрасную лампу, чтобы довоить мышей при 30 градусах по Цельсию в течение 30 минут до инъекции фтора-18 (FDG) С помощью калькулятора дозы подготовить от трех до четырех мегабеккерельных доз фтора-18 (FDG) в 150-200 микролитров солевого раствора в 1 миллилитровых инсулиновых шприцах. Убедитесь в том, чтобы записывать все времена радиоактивности измерения дозы инъекций, и ПЭТ-сканирования для того, чтобы вычислить стандартные значения поглощения или внедорожников.Взвешивание мышей затем внутривенно вводить фтор-18 (FDG)После инъекции оставить мышей спать в теплых условиях в течение 45 минут. Затем загрузите мышей на кровать сканера передачи кровати к сканеру и подвергать животных КТ по центру легких. Переместив кровать в подсистему ПЭТ, вставьте приобретение через час после инъекции фтора-18 (FDG) в течение 15 минут.Затем удалите мышей из камеры визуализации и дайте им восстановиться в клетке, удерживая их в области, посвященной радиоактивному распаду. До анализа изображений реконструируют КТ и ПЭТ-сканирование, как описано в рукописи. Калибруйте изображения, сканируя фантомный цилиндр и автоматически регистрируя сканирование в соответствии со встроенным программным решением.Для анализа изображений загрузите данные КТ в качестве ссылки, нажав на значок открытых данных. Затем загрузите данные ПЭТ в качестве ввода, нажав на значок данных приложения. Отрегулируйте цветовую гамму так CT и ПЭТ, чтобы контрастировать изображения для визуального осмотра.Выберите 3D-инструмент окупаемости из меню падения нажмите на добавить рентабельность инвестиций, и назовите легкие файла. Нажмите на алгоритмы сегментации и пороговые значения соседства, затем определите входные данные в качестве фона и изображения в качестве рефери. Введите мин и макс в соответствии с значениями плотности легких мыши.Осмотрите 3D визуализированые легкие, нажав на значок VTK. Затем нажмите значок таблицы show и извлекайте громкость в сгенерированную таблицу. Для анализа фтора-18 (FDG) в опухолях преобразуют ПЭТ-изображения во внедорожник, выбирая арифметику из выпадают из меню.Выберите масштабарную множественность, затем используйте NP один в качестве выбранного и установите беккерель на миллилитр для фактора SUV в качестве масштабарного. Наконец выберите 3D roi инструмент из выпадают меню и нажмите добавить рентабельность инвестиций и назвать файл опухолей. Нажмите на режим 3D краски и сферы беспрепятственно 2D только и настроить размер формы, чтобы окружить опухоли.Нажмите на значок таблицы шоу и извлекайте максимальное значение SUV из сгенерированного стола. 3D визуализации от КТ дают обзор локализации опухоли MPM и позволяют вычислить объемы легких. Измерения объема легких значительно уменьшаются с течением времени после инъекции внутриплевральных опухолей.ПЭТ-сканирование предоставляет ценную информацию о метаболическом состоянии опухолей MPM. Опухоли были различимы через две недели после прививки и флюор-18 (FDG)поглощение было количественно путем извлечения внедорожников, которые были положительно коррелируют с количеством дней после инъекции. Кроме того, объемы легких и флюор-18 (FDG) алчность коррелируют друг с другом с R квадратом 0,6, который поддерживает прочность этих измерений для мониторинга развития ортопедической опухоли MPM.После этой процедуры другие методы, такие как гистология, иммуногистохимия, и цитометрия потока могут быть выполнены для того, чтобы ответить на ортобиологические вопросы, такие как состояние пролиферации и фенотипические характеристики опухолей и микроокноронации. В заключение, эти доклинические методы прокладывают путь для исследователей, чтобы изучить новую стратегию диагностики и лечения плевральной мезотелиомы. Кроме того, использование молекулярной визуализации требует быстрого перевода новых результатов в клинику.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Ортотопическая Модель серозного рака яичников у иммунокомпетентных мышей для В естественных условиях Опухоль изображений и мониторинг иммунного ответа опухоли

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Comprehensive &amp; Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

Comprehensive & Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

Всеобъемлющее и экономически эффективных лабораторного мониторинга за ВИЧ / СПИД: африканские образцом для подражания

We present the video about assisting anti-retroviral therapy (ART) by an apt laboratory service - representing a South-African role model for economical ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Индукционная трансплантат против хозяина и<em&gt; В Vivo</em&gt; Т-клеток Мониторинг Использование MHC соответствием мышиной модели

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Recurrent Herpetic Stromal Keratitis in Mice, a Model for Studying Human HSK

Рецидивирующей герпетической Стромальные Кератит у мышей, модель для изучения человека HSK

Herpetic eye disease, termed herpetic stromal keratitis (HSK), is a potentially blinding infection of the cornea that results in over 300,000 clinical ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

<em&gt; В пробирке</em&gt; Модель для изучения гетерогенности человека дифференциации макрофагов и поляризация

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

Оптимизированные протоколы для<em&gt; Микобактерией лепры</em&gt; Штамм Управление: Замороженные со сохранения и поддержания у бестимусных голых мышей

Leprosy, caused by Mycobacterium leprae, is an important infectious disease that is still endemic in many countries around the world, including Brazil. ...

A Semi-automated Approach to Preparing Antibody Cocktails for Immunophenotypic Analysis of Human Peripheral Blood

Полуавтоматический подход к подготовке антител коктейли Иммунофенотипирование периферической крови человека

Immunophenotyping of peripheral blood by flow cytometry determines changes in the frequency and activation status of peripheral leukocytes during disease ...

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo  Cell Trafficking by PET/CT

Мышиные лимфоцит Этикетировочное по<sup&gt; 64</sup&gt; Си-антитело к рецептору Ориентация на<em&gt; В Vivo</em&gt; Cell Торговля ПЭТ / КТ

This protocol illustrates the production of 64Cu and the chelator conjugation/radiolabeling of a monoclonal antibody (mAb) followed by murine lymphocyte ...

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Анализ лимфоцитов экстравазации спользование<em&gt; In Vitro</em&gt; Модель человеческого гематоэнцефалический барьер

Lymphocyte extravasation into the central nervous system (CNS) is critical for immune surveillance. Disease-related alterations of lymphocyte ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

Модель переходной трансгенерации IL-8 для<em&gt; В Виво</em&gt; Долгосрочный мониторинг воспалительных реакций

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...