Name: implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice
Uploaded: 2019-12-21T10:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

Bu araştırma Ligue Genevoise contre le Cancer (V.S.-B.) ve Cenevre ve Lozan Üniversiteleri ve Hastaneleri Biyomedikal Görüntüleme Merkezi (CIBM) tarafından (D.J.C., O.B. ve S.G.)'ye finanse edilmiştir.

Aşağıda açıklanan tüm prosedürler kurumsal hayvan bakım ve kullanım komitesi ve İsviçre'nin Cenevre veteriner devlet ofisi tarafından onaylanmıştır (Yetki GE/106/16). MPM hücre hattı H2052/484 kuruldu ve Colin DJ ve ark.23makalesinde ayrıntılı olarak bizim laboratuvarda karakterize . Kısaca, NCI-H2052 (ATCC) hücrelerinin immüneksik Nude farelere intrapleural enjeksiyonu sonrasında elde edilen torasik tümörden H2052/484 hücre hattı oluşturuldu.
<p class="jove_title"...

<ol>
	<li>Grishman, E., Cohen, S., Salomon, M. I., Churg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+lesions+in+acute+rheumatic+fever.">Renal lesions in acute rheumatic fever.</a> The American Journal of Pathology. 51 (6), 1045-1061 (1967).</li><li>Mossman, B. T., Gee, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos-related+diseases.">Asbestos-related diseases.</a> The New England Journal of Medicine. 320 (26), 1721-1730 (1989).</li><li>Pass, H. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asbestos+exposure,+pleural+mesothelioma,+and+serum+osteopontin+levels.">Asbestos exposure, pleural mesothelioma, and serum osteopontin levels.</a> The New England Journal of Medicine. 353 (15), 1564-1573 (2005).</li><li>Allen, L. P., Baez, J., Stern, M. E. C., Takahashi, K., George, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+and+the+Economic+Effect+of+Asbestos+Bans+and+Decline+in+Asbestos+Consumption+and+Production+Worldwide.">Trends and the Economic Effect of Asbestos Bans and Decline in Asbestos Consumption and Production Worldwide.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (3), (2018).</li><li>LaDou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+case+for+a+global+ban+on+asbestos.">The case for a global ban on asbestos.</a> Environmental Health Perspectives. 118 (7), 897-901 (2010).</li><li>Soeberg, M., Vallance, D. A., Keena, V., Takahashi, K., Leigh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Australia's+Ongoing+Legacy+of+Asbestos:+Significant+Challenges+Remain+Even+after+the+Complete+Banning+of+Asbestos+Almost+Fifteen+Years+Ago.">Australia's Ongoing Legacy of Asbestos: Significant Challenges Remain Even after the Complete Banning of Asbestos Almost Fifteen Years Ago.</a> The Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (2), (2018).</li><li>Glynn, M. E., Keeton, K. A., Gaffney, S. H., Sahmel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambient+Asbestos+Fiber+Concentrations+and+Long-Term+Trends+in+Pleural+Mesothelioma+Incidence+between+Urban+and+Rural+Areas+in+the+United+States+(1973-2012).">Ambient Asbestos Fiber Concentrations and Long-Term Trends in Pleural Mesothelioma Incidence between Urban and Rural Areas in the United States (1973-2012).</a> Risk Analysis. 38 (3), 454-471 (2018).</li><li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+trend+analysis+on+malignant+mesothelioma+in+China.">Epidemiology and trend analysis on malignant mesothelioma in China.</a> The Chinese Journal of Cancer Research. 29 (4), 361-368 (2017).</li><li>Chernova, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Fiber+Carbon+Nanotubes+Replicate+Asbestos-Induced+Mesothelioma+with+Disruption+of+the+Tumor+Suppressor+Gene+Cdkn2a+(Ink4a/Arf).">Long-Fiber Carbon Nanotubes Replicate Asbestos-Induced Mesothelioma with Disruption of the Tumor Suppressor Gene Cdkn2a (Ink4a/Arf).</a> Current Biology. 27 (21), 3302-3314 (2017).</li><li>Fukushima, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carcinogenicity+of+multi-walled+carbon+nanotubes:+challenging+issue+on+hazard+assessment.">Carcinogenicity of multi-walled carbon nanotubes: challenging issue on hazard assessment.</a> The Journal of Occupational Health. 60 (1), 10-30 (2018).</li><li>Robinson, B. W., Musk, A. W., Lake, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+mesothelioma.">Malignant mesothelioma.</a> The Lancet. 366 (9483), 397-408 (2005).</li><li>Ricciardi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+for+malignant+pleural+mesothelioma:+an+international+guidelines+review.">Surgery for malignant pleural mesothelioma: an international guidelines review.</a> The Journal of Thoracic Diseases. 10, 285-292 (2018).</li><li>Hiddinga, B. I., Rolfo, C., van Meerbeeck, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesothelioma+treatment:+Are+we+on+target?+A+review.">Mesothelioma treatment: Are we on target? A review.</a> The Journal of Advanced Research. 6 (3), 319-330 (2015).</li><li>Kim, J., Bhagwandin, S., Labow, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+peritoneal+mesothelioma:+a+review.">Malignant peritoneal mesothelioma: a review.</a> Annals of Translational Medicine. 5 (11), 236 (2017).</li><li>Ampollini, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immuno-chemotherapy+reduces+recurrence+of+malignant+pleural+mesothelioma:+an+experimental+setting.">Immuno-chemotherapy reduces recurrence of malignant pleural mesothelioma: an experimental setting.</a> The European Journal of Cardiothoracic Surgery. 35 (3), 457-462 (2009).</li><li>de Jong, M., Essers, J., van Weerden, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+preclinical+tumour+models:+improving+translational+power.">Imaging preclinical tumour models: improving translational power.</a> Nature Reviews Cancer. 14 (7), 481-493 (2014).</li><li>Mak, I. W., Evaniew, N., Ghert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lost+in+translation:+animal+models+and+clinical+trials+in+cancer+treatment.">Lost in translation: animal models and clinical trials in cancer treatment.</a> The American Journal of Translational Research. 6 (2), 114-118 (2014).</li><li>Mazzocchi, A. R., Rajan, S. A. P., Votanopoulos, K. I., Hall, A. R., Skardal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+patient-derived+3D+mesothelioma+tumor+organoids+facilitate+patient-centric+therapeutic+screening.">In vitro patient-derived 3D mesothelioma tumor organoids facilitate patient-centric therapeutic screening.</a> Scientific Reports. 8 (1), 2886 (2018).</li><li>Gengenbacher, N., Singhal, M., Augustin, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+mouse+solid+tumour+models:+status+quo,+challenges+and+perspectives.">Preclinical mouse solid tumour models: status quo, challenges and perspectives.</a> Nature Reviews Cancer. 17 (12), 751-765 (2017).</li><li>Kanemura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+response+assessment+with+18F-FDG-PET/CT+is+superior+to+modified+RECIST+for+the+evaluation+of+response+to+platinum-based+doublet+chemotherapy+in+malignant+pleural+mesothelioma.">Metabolic response assessment with 18F-FDG-PET/CT is superior to modified RECIST for the evaluation of response to platinum-based doublet chemotherapy in malignant pleural mesothelioma.</a> The European Journal of Radiology. 86, 92-98 (2017).</li><li>Truong, M. T., Viswanathan, C., Godoy, M. B., Carter, B. W., Marom, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+pleural+mesothelioma:+role+of+CT,+MRI,+and+PET/CT+in+staging+evaluation+and+treatment+considerations.">Malignant pleural mesothelioma: role of CT, MRI, and PET/CT in staging evaluation and treatment considerations.</a> Seminars in Roentgenology. 48 (4), 323-334 (2013).</li><li>MacArthur Clark, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+3Rs+in+research:+a+contemporary+approach+to+replacement,+reduction+and+refinement.">The 3Rs in research: a contemporary approach to replacement, reduction and refinement.</a> The British Journal of Nutrition. 120, 1-7 (2018).</li><li>Colin, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Model+of+Human+Malignant+Mesothelioma+in+Athymic+Mice.">Experimental Model of Human Malignant Mesothelioma in Athymic Mice.</a> The International Journal of Molecular Sciences. 19 (7), (2018).</li><li>Fueger, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+animal+handling+on+the+results+of+18F-FDG+PET+studies+in+mice.">Impact of animal handling on the results of 18F-FDG PET studies in mice.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 47 (6), 999-1006 (2006).</li><li>Devaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissues+in+different+anatomical+sites+can+sculpt+and+vary+the+tumor+microenvironment+to+affect+responses+to+therapy.">Tissues in different anatomical sites can sculpt and vary the tumor microenvironment to affect responses to therapy.</a> Molecular Therapy. 22 (1), 18-27 (2014).</li><li>Beliz&#225;rio, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunodeficient+mouse+models:+An+overview.">Immunodeficient mouse models: An overview.</a> The Open Immunology Journal. 2, 79-85 (2009).</li><li>Jackaman, C., Yeoh, T. L., Acuil, M. L., Gardner, J. K., Nelson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+mesothelioma+induces+locally-proliferating+IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+)+M3+macrophages+that+can+be+selectively+depleted+by+chemotherapy+or+immunotherapy.">Murine mesothelioma induces locally-proliferating IL-10(+)TNF-alpha(+)CD206(-)CX3CR1(+) M3 macrophages that can be selectively depleted by chemotherapy or immunotherapy.</a> Oncoimmunology. 5 (6), 1173299 (2016).</li><li>James, M. L., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+imaging+primer:+modalities,+imaging+agents,+and+applications.">A molecular imaging primer: modalities, imaging agents, and applications.</a> Physiological Reviews. 92 (2), 897-965 (2012).</li><li>Kenny, L. M., Aboagye, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+translation+of+molecular+imaging+agents+used+in+PET+studies+of+cancer.">Clinical translation of molecular imaging agents used in PET studies of cancer.</a> Advances in Cancer Research. 124, 329-374 (2014).</li></ol>

Bu makalede, atimik farelerin plevral kavitesinde enjekte edilen MPM H2052/484 hücrelerinin orijinal ortotopik modeli ve küçük hayvan PET/CT görüntüleme siyumlama yöntemi açıklanmaktadır. Bu model orta hayvan işleme ve cerrahi becerileri ile uygulanabilir ve çok iyi bir gelişme oranı görüntüler. Tedavi edilmeyen farelerde yaklaşık 10 haftalık büyük bir deneysel pencere ve enjeksiyondan 2 hafta sonra tümörlerin non-invaziv longitudinal tespitine olanak sağlar.
Ortotopi...

Malign plevral mezotelyoma (MPM) en sık asbest liflerine maruz kalma ile ilişkili bir kanserdir1,2,3. Asbest çoğu Batı ülkesinde yasaklanmış olmasına rağmen4,5,6, MPM insidansı halaartmaktadır 7,8. Son zamanlarda, karbon nanotüpler farelerin maruz kalma onlar insanlarda önemli sağlık riski neden olabileceğini düşündürmektedir9,10. Veriler, bu ürünlere maruz kalmanın kronik inflamasyona ve malign mezotelyoma ilerlemenin altında yatan moleküler değişikliklere (örneğin, tümör baskılayıcı yolların kaybına) yol açabileceğini düşündürmektedir. Şu anda, multiwall karbon nanotüpler nanoteknolojinin en önemli ürünlerinden biridir ve giderek kompozitler, enerji depolama malzemeleri, tıp, elektronik ve çevresel iyileştirme malzemeleri gibi çeşitli ürünler dahil edilmektedir.
MPM kötü prognoz ile bir kanser, ve çoğu hasta mevcut tedavi yöntemleri sınırlı etkinliği nedeniyle tanı dan sonra iki yıl içinde ölür11. MPM için tedavi seçimi kanser evrelerine bağlıdır. En erken evre MPM için (evre 1 ve muhtemelen bazı evre 2 veya 3 tümörler), klinik yaklaşım tümörlerin cerrahi rezeksiyonu da dahil olmak üzere multimodal bir tedavi, radyoterapi ve kemoterapi ile ilişkili12. Sisplatin ve pemetrexed ile kombine kemoterapi cerrahi rezeksiyon için uygun değildir, ileri lokal invaziv hastalık tanısı çoğu hastanın tedavisinde endikedir, ya da aksi takdirde küratif cerrahi için aday değildir13,14. Bu nedenle, MPM hastaları için daha etkili tedaviler geliştirmek için acil bir ihtiyaç vardır. Ancak, MPM klinik alaka yansıtan vivo hayvan modelleri birkaç doğrulanmış vardır. Birkaç murine MPM modelleri geliştirilmiştir ama bunların çoğu sadakatle MPM tümör mikroçevre15,16,17,18karmaşık yönlerini özetlemek yok . Farelerde asbestkaynaklı MPM kullanımı, genetiği değiştirilmiş MPM fare modelleri veya murine MPM hücre hatlarının synjenik transplantasyon modelleri temel phenotipik ve fonksiyonel farklılıklar la sınırlıdır ve sonuç olarak, yeni keşifleri kliniğe kötü bir şekilde çevirir. Diğer preklinik murine MPM modelleri çoğunlukla immünoffik farelerde insan hücre hatlarının deri altı veya periton ksenogreftlerine dayanır. Bu modelleri izlemek ve temel verileri sağlamak kolay olsa da, bu ksenogreftlerin mikroortamı bu preklinik çalışmaların çoğunun çeviri gücünü bozan insan tümörleri ile karşılaştırılabilir değildir17,19. Tersine, ortotopik ksenogreftler daha iyi hasta tümör davranışı ve tedaviye yanıt yansıtmak gibi orijinal tümör sitede bulunan benzer bir mikroçevre ile çevrilidir16.
[18F]FDG-PET/BT moleküler görüntüleme MPM20,21olan hastalarda hastalık ilerlemesini uzunlamasına izlemek için tercih edilen bir yöntemdir. Bu nedenle, bu non-invaziv görüntüleme yöntemine başvurmak klinik çalışmalara preklinik çalışmaların çevirisini büyük ölçüde teşvik etmektedir16,22. Ayrıca, her hayvan zaman içinde kendi kontrolünü temsil ettiği için gerekli hayvan sayısını azaltmaya yardımcı olur.
Bu yazıda, atimik farelerin plevral kaviteye insan MPM hücre hattı H2052/484 enjeksiyonu sonrasında elde edilen güvenilir bir ortotopik ksenogreft MPM modeli saılmaktadır. [18F]FDG-PET/CT görüntüleme ile birleştiğinde, bu model insan MPM için yeni tanı stratejileri ve tedavilerin fonksiyonel ve mekanistik etkilerini incelemek için değerli ve tekrarlanabilir bir yöntemdir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3-mice bed</td>
			<td>Minerve</td>
			<td></td>
			<td>bed for mice imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Athymic Nude-Foxn1n nu/nu</td>
			<td>Envigo, Huntingdon, UK</td>
			<td>6907F</td>
			<td>immunodeficient mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Mundipharma Medical Company, CH</td>
			<td>111131</td>
			<td>polyvidone iodine solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Saline (DPBS)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>14190094</td>
			<td>Buffer for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>PAA Laboratories, Pasching, Austria</td>
			<td>A15-101</td>
			<td>cell culture medium supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>324826</td>
			<td>syringe for cell injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>15140122</td>
			<td>antibiotics for cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>61870010</td>
			<td>basal cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temgesic (Buprenorphin 0.3 mg/mL)</td>
			<td>Alloga SA, CH</td>
			<td>700320</td>
			<td>opioid analgesic product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triumph PET/SPECT/CT</td>
			<td>Trifoil, Chatsworth, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>imaging equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>25050014</td>
			<td>enzymatic cell dissociation buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virkon S 2%</td>
			<td>Milian, Vernier, CH</td>
			<td>972472</td>
			<td>disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vivoquant</td>
			<td>Invicro, Boston, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation and monitoring by pet/ct of an orthotopic model of human pleural mesothelioma in athymic mice

Malign plevral mezotelyoma (MPM), mezotelyumda akciğerleri, kalbi ve göğüs boşluğunu kaplayan nadir ve agresif bir tümördür. MPM gelişimi esas olarak asbest ile ilişkilidir. Ortanca sağkalım ortalaması tanı konduktan 9-18 ay olduğu için tedaviler sadece mütevazı bir sağkalım sağlar. Bu nedenle daha etkili tedaviler tespit edilmelidir. Yeni terapötik hedefleri açıklayan verilerin çoğu in vitro deneylerden elde edilebildi ve güvenilir in vivo preklinik modellerde doğrulanması gerekiyor. Bu makalede, immünofik atimik farelerin plevral kavite içine bir insan MPM hücre hattı H2052/484 enjeksiyonu sonrasında elde edilen böyle bir güvenilir MPM ortotopik modeli açıklanmaktadır. Ortotopik bölgede transplantasyon, doğal in vivo ortamda tümörün ilerlemesinin incelenmesini sağlar. Pozitron emisyon tomografisi/bilgisayarlı tomografi (PET/BT) moleküler görüntüleme klinik [18F]-2-floro-2-deoksi-D-glukoz([18F]FDG) radyotracer, MPM'li hastaların incelenmesinde tercih edilen tanı yöntemidir. Buna göre [18F]FDG-PET/CT H2052/484 ortotopik modelin hastalık ilerlemesini uzunlaizlemek için kullanıldı. Tümör gelişimi non-invaziv olarak izlenebilir ve gerekli hayvan sayısı önemli ölçüde azaltılabilir beri bu teknik yüksek bir 3R potansiyele sahiptir(Reduce hayvan sayısı, ağrı ve rahatsızlık azaltmak için Refine ve alternatifler iyer Replace hayvan deneyleri).
Bu model yüksek bir gelişme hızı görüntüler, hızlı bir tümör büyüme, maliyet-etkin ve hızlı klinik çeviri sağlar. Bu ortotopik ksenogreft MPM modelini kullanarak, araştırmacılar terapötik müdahaleler sonrasında güvenilir bir MPM modelinin biyolojik yanıtlarını değerlendirebilirler.

H2052/484 ortotopik model Ortotopik MPM modelleri kültürlü kanser hücrelerinin intra-torasik enjeksiyonu ile, özellikle H2052/484 hücreleri kurulumu nispeten kolaydır. Yukarıda açıklanan farklı adımlar sadece mütevazı hücre kültürü bilgisi gerektirir ve cerrahi adımlar orta eğitimli hayvan deneyciler için erişilebilir. Çıplak fareler ve hücreler implantasyonların sonucunu en üst düzeye çıkarmak için steril koşullar altında manipüle edilmelidir. Kısa anestezi ve minim...

Watch this Scientific Journal Video about Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice at JoVE.com

Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice

Bu makalede, h2052/484 mezotelyoma hücrelerinin immünazatlı atimik farelerin plevral kaviteye implantasyonu ile insan plevral mezotelyoma bir ortopik fare modeli nin üretimi açıklanmaktadır. İntraplevral tümörlerin gelişiminin uzunlamasına takibi non-invaziv multimodal[18F]-2-floro-2-deoksi-D-glukoz pozitron emisyon tomografisi ve bilgisayarlı tomografi görüntüleme ile değerlendirildi.

Athymic Farelerde İnsan Plevral Mezotelyoma'nın Ortotopik Modelinin PET/BT ile İmplantasyonu ve İzlenmesi

Malignant pleural mesothelioma (MPM) is a rare and aggressive tumor arising in the mesothelium that covers the lungs, the heart, and the thoracic cavity. ...

Bu yöntem, insan plevral mezotelyoma gelişimi, tedavisi ve tanısı ile ilgili anahtar soruların cevaplamak için yardımcı olabilir. Bu güvenilir pre-klinik ortotopik modelin en büyük avantajı plevral mezotelyoma hastalarında bulunana yakın bir mikroortamda insan hastalığının progresyonu ve patolojisini çoğaltmasidır. Bu nedenle, bu paha biçilmez model yüksek öneme sahiptir ve non-invaziv moleküler görüntüleme kullanımı üç R kavramı doğrultusunda uzunlamasına izleme sağlar.Başlamadan önce tüm yüzeylere dezenfektan püskürtülerek laminaakış kaputunda anestezi sistemi ve cerrahi alanı hazırlayın. Mikro-izole SPF kafesleri dezenfekte akış kaputuna yerleştirin. Bir ısıtma yastığı yerleştirin, povidone-iyot çözeltisi 30 gauge Hamilton şırınga, gazlı bez ve pamuklu bezler cerrahi aletleri ve mikropipetler ve ipuçları laminar akış kaputuna.Fare düzgün bir şekilde anestezi edildikten sonra postoperatif tava rahatlaması için kilogram başına 0,05 miligram buprinorfin enjekte edin. Daha sonra fareyi ısıtma yastığının üzerine sağ tarafına yerleştirin ve povison-iyot solüsyonu ile cerrahi bölgeyi temizleyin ve cildin 5 milimetrelik bir kesisini yapın. Kaburga ları ortaya çıkarmak için çevredeki yağ ve kasları künt makasla temizleyin.Hücre süspansiyonhomojeize ve hamilton şırınga içine 50 mikrolitre yükleyin hava kabarcıkları önlemek için emin olun. Her enjeksiyondan önce iğneyi %70 alkolle silin. Yavaş yavaş interkostal kaslar altında 30 derece ve 2-3 milimetrelik bir açıyla iğne tutan altıncı ve yedinci kaburga arasında plevral kavite içine hücreleri enjekte.Akciğerlere enjekte önlemek için kaburga altında iğne tutun. Kaslardan görülebilmeli. Bittiğinde, yarayı 3-4 emilebilir dikişle kapatın ve uyanana kadar fareyi ısıtılmış bir ortamda saklayın.İmplantasyon yapılırken iğnepeneciliğin derinliğini sınırlamak için iğneyi doğru bir şekilde konumlandırmak çok önemlidir. Bir ısıtma odası ısıtma yastığı kullanın, ya da kızılötesi lamba 30 derece santigrat de flor-18 (FDG) bir doz hesap makinesi kullanarak 1 mililitre insülin şırıngalar tuzlu 150 ila 200 mikrolitre üç ila dört megabecquerel dozhazırlamak enjeksiyonu önce 30 derece santigrat fareler kullanın. Standart alım değerlerini veya SUV'ları hesaplamak için tüm radyoaktivite doz ölçümlerini ve PET taramalarını kaydettiğinden emin olun.Fareleri tartın sonra intravenöz flor-18 enjekte(FDG)Enjeksiyondan sonra 45 dakika boyunca sıcak koşullarda fareleri uyanık bırakın. Daha sonra tarayıcı yatağına fareleri yükleyin yatağı tarayıcıya aktarın ve hayvanları akciğerlere odaklanmış bir CT taramasına tabi tarayın. Yatağı PET alt sistemine taşıyın, 15 dakika boyunca flor-18(FDG) enjeksiyonundan bir saat sonra satın alma takın.Sonra fareleri görüntüleme odasından çıkarın ve onları radyoaktif bozunmaya adanmış bir alanda tutarak kafeslerinde toparlanmalarına izin verin. Önce görüntü analizi makalede açıklandığı gibi CT ve PET taramaları yeniden. Bir hayalet silindirtileterek görüntüleri kalibre edin ve yerleşik yazılım çözümüne göre taramaları otomatik olarak birlikte kaydedin.Görüntüleri analiz etmek için açık veri simgesine tıklayarak CT verilerini referans olarak yükleyin. Ardından, ek veri simgesine tıklayarak PET verilerini giriş olarak yükleyin. Renk skalasını ct ve PET'i görsel inceleme için kontrast görüntülere göre ayarlayın.Açılan menüden 3B YG aracını seçin Yatırım Getirisi ekle'ye tıklayın ve dosyanın akciğerlerini adlandırın. Segmentasyon algoritmaları ve mahalle eşleme üzerine tıklayın sonra ref olarak arka plan ve görüntü olarak giriş tanımlayın. Fare akciğer yoğunluğu değerlerine göre min ve max girin.VTK simgesini tıklatarak 3B işlenmiş akciğerleri inceleyin. Ardından tablo simgesini göster simgesini tıklatın ve oluşturulan tablodaki birimi alın. Tümörlerde flor-18 (FDG) analiz etmek için açılan menüden aritmetik seçerek PET görüntüleri SUV dönüştürmek.Skaler çokluk seçin sonra seçili olarak NP birini kullanın ve skaler olarak SUV faktörü mililitre başına becquerel ayarlayın. Son olarak açılır menüden 3D Yatırım Getirisi aracını seçin ve RoI ekleyin ve dosya tümörleri adlandırmak tıklayın. 3D boya moduna tıklayın ve küre sadece 2D uncheck ve tümörleri çevreleyen şeklin boyutunu ayarlayın.Tablo simgesini göster'e tıklayın ve oluşturulan tablodan SUV maksimum değerini alın. CT taramalarından elde edilen 3Boyutlu görüntülemeler MPM tümör lokalizasyonuna genel bir bakış verir ve akciğer hacimlerinin hesaplanmasına olanak sağlar. İntraplevral tümörlerin enjeksiyonundan sonra akciğer hacmi ölçümleri zaman içinde önemli ölçüde azalır.PET tarası MPM tümörlerinin metabolik durumu hakkında değerli bilgiler sağlar. İnjektör den iki hafta sonra tümörler ayırt edilebilirdi ve flor-18(FDG) alımı enjeksiyon sonrası gün sayısı ile pozitif ilişkili SUV'lar çıkarılarak ölçüldü. Ayrıca, akciğer hacimleri ve flor-18 (FDG)avidite mpm ortotopik tümör gelişimini izlemek için bu ölçümlerin gücünü destekleyen 0.6 kare bir R kare ile birbirleriyle ilişkilidir.Bu işlemin ardından tümörlerin ve mikroçevrenin proliferasyon durumu ve henotypik karakteristiği gibi ortobiyolojik sorulara cevap vermek için histoloji, immünohistokimya ve akış sitometrisi gibi başka yöntemler de uygulanabilmektedir. Sonuç olarak, bu klinik öncesi teknikler araştırmacıların plevral mezotelyomanın yeni tanı ve tedavi stratejisini keşfetmelerinin önünü açmaktır. Ayrıca, moleküler görüntüleme kullanımı yeni bulguların kliniğe hızlı bir şekilde çevrilmesini gerektirmemektedir.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Immünkompetan Fare Seröz Yumurtalık Kanseri bir Ortotopik Model In vivo</emTümör Bağışıklık Yanıtları> Tümör Görüntüleme ve İzleme

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Comprehensive &amp; Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

Comprehensive & Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

HIV / AIDS Kapsamlı ve Maliyet Etkin Laboratuvar Kontrolü: Afrikalı bir Rol Modeli

We present the video about assisting anti-retroviral therapy (ART) by an apt laboratory service - representing a South-African role model for economical ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Graft-versus-host hastalığı indüksiyonu ve<em&gt; In Vivo</emBir MHC-eşlemeli murin Model Kullanma&gt; T Hücre İzleme

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Recurrent Herpetic Stromal Keratitis in Mice, a Model for Studying Human HSK

Farelerde Tekrarlayan Herpetik Stromal Keratit, İnsan HSK Eğitim İçin Bir Model

Herpetic eye disease, termed herpetic stromal keratitis (HSK), is a potentially blinding infection of the cornea that results in over 300,000 clinical ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

Bir<em&gt; In vitro</emİnsan Makrofaj Farklılaşma ve Polarizasyon heterojenliği Eğitim için&gt; Model

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

Optimized Protocols for Mycobacterium leprae Strain Management: Frozen Stock Preservation and Maintenance in Athymic Nude Mice

Için optimize Protokoller<em&gt; Mycobacterium leprae</em&gt; Gerilme Yönetimi: Atimik Çıplak Farelerde Dondurulmuş Hazır Koruma ve Bakım

Leprosy, caused by Mycobacterium leprae, is an important infectious disease that is still endemic in many countries around the world, including Brazil. ...

A Semi-automated Approach to Preparing Antibody Cocktails for Immunophenotypic Analysis of Human Peripheral Blood

İnsan Periferik Kan immünfenotipik Analizi Antikor Kokteyller Hazırlama A Yarı-otomatik Yaklaşım

Immunophenotyping of peripheral blood by flow cytometry determines changes in the frequency and activation status of peripheral leukocytes during disease ...

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo  Cell Trafficking by PET/CT

tarafından Kemirgen Lenfosit Etiketleme<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-Antikor Reseptör için hedefleme<em&gt; In Vivo</em&gt; PET / CT ile hücre Trafik

This protocol illustrates the production of 64Cu and the chelator conjugation/radiolabeling of a monoclonal antibody (mAb) followed by murine lymphocyte ...

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Bir kullanma Lenfosit Ekstravazasyonunun analizi<em&gt; İn Vitro</em&gt; İnsan Kan-beyin bariyeri Model

Lymphocyte extravasation into the central nervous system (CNS) is critical for immune surveillance. Disease-related alterations of lymphocyte ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

Bir IL-8 Geçici Transgenize Edilmiş Fare Modeli<emIn vivo</em&gt; İnflamatuvar Yanıtların Uzun Vadeli İzlenmesi

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...