Name: imaging and analysis of tissue orientation and growth dynamics in the developing drosophila epithelia during pupal stages
Uploaded: 2020-06-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Imaging and Analysis of Tissue Orientation and Growth Dynamics in the Developing Drosophila Epithelia During Pupal Stages at JoVE.com

Gostaríamos de agradecer aos membros do laboratório Martín-Blanco por discussões úteis. Agradecemos também a Nic Tapon (The Crick Institute, Londres, Reino Unido), o Bloomington Stock Center (University of Indiana, EUA) e flybase (por anotação genética Drosophila). Federica Mangione foi apoiada por uma bolsa de pré-doutorado da JAE-CSIC. O laboratório Martín-Blanco foi financiado pelo Programa Estatal de Fomento de la Investigación Científica y Técnica de Excelencia (BFU2014-57019-P e BFU2017-82876-P) e da Fundação Ramón Areces.

NOTA: Este protocolo é dividido em cinco etapas: (1) encenar a pupae, (2) preparar a pupae para imagem, (3) imagens vivas da epitélio abdominal crescente, (4) geração de mosaicos genéticos, (5) processamento e análise de dados (incluindo seções descrevendo como analisar a dinâmica de orientação celular a partir de contornos de junção celular e dinâmica de crescimento de clones celulares).
1. Encenação de Drosophila pupae antes da imagem
<ol><li>A cultura voa do genó...

<ol>
	<li>Gillespie, P. G., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanotransduction+by+hair+cells:+models,+molecules,+and+mechanisms.">Mechanotransduction by hair cells: models, molecules, and mechanisms.</a> Cell. 139, 33-44 (2009).</li><li>Deans, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+balance+of+form+and+function:+planar+polarity+and+development+of+the+vestibular+maculae.">A balance of form and function: planar polarity and development of the vestibular maculae.</a> Seminars in Cellular and Developmental Biology. 24, 490-498 (2013).</li><li>Stell, W. 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C., Wasser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+imaging+of+muscles+in+Drosophila+metamorphosis:+Towards+high-throughput+gene+identification+and+function+analysis.">Live imaging of muscles in Drosophila metamorphosis: Towards high-throughput gene identification and function analysis.</a> Methods. 96, 103-117 (2016).</li><li>Teng, X., Qin, L., Le Borgne, R., Toyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remodeling+of+adhesion+and+modulation+of+mechanical+tensile+forces+during+apoptosis+in+Drosophila+epithelium.">Remodeling of adhesion and modulation of mechanical tensile forces during apoptosis in Drosophila epithelium.</a> Development. 144, 95-105 (2017).</li><li>Weavers, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systems+Analysis+of+the+Dynamic+Inflammatory+Response+to+Tissue+Damage+Reveals+Spatiotemporal+Properties+of+the+Wound+Attractant+Gradient.">Systems Analysis of the Dynamic Inflammatory Response to Tissue Damage Reveals Spatiotemporal Properties of the Wound Attractant Gradient.</a> Current Biology. 26, 1975-1989 (2016).</li><li>Mangione, F., Martin-Blanco, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Dachsous/Fat/Four-Jointed+Pathway+Directs+the+Uniform+Axial+Orientation+of+Epithelial+Cells+in+the+Drosophila+Abdomen.">The Dachsous/Fat/Four-Jointed Pathway Directs the Uniform Axial Orientation of Epithelial Cells in the Drosophila Abdomen.</a> Cell Reports. 25, 2836-2850 (2018).</li><li>Casal, J., Struhl, G., Lawrence, P. 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C., Wenger, Y., Galliot, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+Somatic+Adult+Tissues+Develop+Organizer+Activity.">How Somatic Adult Tissues Develop Organizer Activity.</a> Current Topics in Developmental Biology. 116, 391-414 (2016).</li><li>Collinet, C., Rauzi, M., Lenne, P. F., Lecuit, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+and+tissue-scale+forces+drive+oriented+junction+growth+during+tissue+extension.">Local and tissue-scale forces drive oriented junction growth during tissue extension.</a> Nature Cell Biology. 17, 1247-1258 (2015).</li><li>Martin-Blanco, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=puckered+encodes+a+phosphatase+that+mediates+a+feedback+loop+regulating+JNK+activity+during+dorsal+closure+in+Drosophila.">puckered encodes a phosphatase that mediates a feedback loop regulating JNK activity during dorsal closure in Drosophila.</a> Genes and Development. 12, 557-570 (1998).</li><li>Dye, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+dynamics+underlying+oriented+growth+of+the+Drosophila+wing+imaginal+disc.">Cell dynamics underlying oriented growth of the Drosophila wing imaginal disc.</a> Development. 144, 4406-4421 (2017).</li><li>Williams-Masson, E. M., Malik, A. N., Hardin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+actin-mediated+two-step+mechanism+is+required+for+ventral+enclosure+of+the+C.+elegans+hypodermis.">An actin-mediated two-step mechanism is required for ventral enclosure of the C. elegans hypodermis.</a> Development. 124, 2889-2901 (1997).</li><li>Ferguson, M. 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A ordem de longo alcance é uma característica essencial da maioria das unidades fisiológicas funcionais. Durante a morfogênese, a ordem é alcançada através da integração de instruções complexas implementadas com alta precisão temporal e espacial. Restrições múltiplas e multinível são integradas em arranjos teciduais estereotipados.
Polaridade e direcionalidade são fundamentais para o arranjo espacial ordenado durante o desenvolvimento. Polaridade implica quebra de simetria du...

Para alcançar seus papéis, os tecidos epiteliais dependem totalmente da organização espacial de seus componentes celulares. Na maioria das epitélios, as células não são apenas embaladas umas contra as outras para criar uma camada precisa de paralelepípedos, mas elas se orientam em relação aos eixos do corpo.
A importância funcional da organização precisa do tecido é óbvia na epitélio sensorial, como o ouvido interno vertebrado e a retina. No primeiro caso, as células de cabelo e suporte se alinham em uma direção axial específica para sentir eficientemente entradas mecânicas como som e movimento1,,2. Da mesma forma, a organização espacial celular fotorreceptora é essencial para alcançar propriedades ópticas ideais pela retina3. O controle espacial da posição e orientação celular é, portanto, de particular relevância para a função fisiológica adequada.
Drosophila é um inseto holometaboloso que sofre uma transformação completa de suas estruturas corporais larvais através da metamorfose, dando origem aos seus tecidos adultos. A pupa Drosophila é um excelente modelo para a imagem ao vivo não invasiva de uma variedade de eventos dinâmicos, incluindo migração celular de desenvolvimento4, divisão celular e dinâmica de crescimento5,contração muscular6,morte celular7,reparação de feridas8e orientação celular9. Na Drosophilaadulta, o epitélio externo mostra um alto grau de ordem. Isso é facilmente observado nos arranjos de trichomes (ou seja, saliências celulares originárias de células epiteliais únicas) e cerdas sensoriais por toda a superfície corporal da mosca10. De fato, as trichomes estão alinhadas em linhas paralelas que guiam o fluxo de ar11. A morfogênese da epitélio adulta e o arranjo ordenado das células individuais começa durante a embriogênese e culmina durante os estágios pupais. Enquanto em divisões celulares de embriões, intercalações e alterações de forma todas as alterações diminuem a ordem tecidual12,13, isso é revertido em estágios posteriores de desenvolvimento, especialmente em estágios pupais, quando a mosca se aproxima da maturidade9.
A pupa drosophila imóvel fornece um sistema ideal para avaliar as mudanças de forma e orientação celular. A epiderme abdominal pupal apresenta vantagens especiais. Enquanto os precursores da cabeça adulta, tórax, genitália e apêndices crescem e se padronizam a partir de estágios larvais, os histoblastos, que são integrados à epiderme larval, começam a crescer ediferenciar-se apenasna pupariação 14 . Este recurso permite o acompanhamento de todos os eventos espesso envolvidos no estabelecimento da ordem tecidual em sua totalidade9.
Os histoblastos são especificados durante o desenvolvimento embrionário em posições gerlaterais em cada segmento abdominal presuntivo. A epiderme abdominal dorsal do adulto deriva dos ninhos de histoblasto situados dorsolateramente presentes nos compartimentos anterior e posterior15,16. À medida que os histoblastos se expandem, substituindo as células epiteliais larvais (LECs), os ninhos contralaterais se fundem na linha média dorsal formando uma folha confluente17,,18,19,,20.
Este trabalho descreve 1) uma metodologia de dissecção, montagem e imagem ao vivo de longo prazo dos métodos analíticos Drosophila pupae e 2) para estudar a dinâmica da orientação celular e do crescimento em alta resolução espostetorial. Aqui é fornecido um protocolo detalhado, abrangendo todas as etapas necessárias desde a preparação inicial do pupae (ou seja, encenação e imagem) até a extração e quantificação das características de direcionalidade e orientação. Também descrevemos como inferir propriedades de tecidos locais a partir da análise de clones celulares. Todas as etapas descritas são minimamente invasivas e permitem análises ao vivo de longo prazo. Os métodos descritos aqui podem ser facilmente adaptados e aplicados a outros estágios de desenvolvimento, tecidos ou organismos modelo.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Analysis Software</td>
			<td>-</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td>Analyzing data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila</td>
			<td>Atpa::GFP</td>
			<td>-</td>
			<td>Strains employed for data collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila</td>
			<td>hsflp1.22;FRT40A/FRT40A Ubi.RFP.nls</td>
			<td>-</td>
			<td>Strains employed for data collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont 5 Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11251-20</td>
			<td>1.5 mm diameter for dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Bottom Plates</td>
			<td>Mat Tek</td>
			<td>P35G-0.170-14-C</td>
			<td>Mounting pupae for data collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halocarbon Oil 27</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9002-83-9</td>
			<td>mounting pupae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted Confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM700</td>
			<td>Data collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DFC365FX</td>
			<td>Visualization of the pupae during dissection</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

imaging and analysis of tissue orientation and growth dynamics in the developing drosophila epithelia during pupal stages

Dentro de organismos multicelulares, tecidos e órgãos maduros apresentam altos graus de ordem nos arranjos espaciais de suas células constituintes. Um exemplo notável é dado pela epitélio sensorial, onde células das mesmas ou distintas identidades são reunidas através da adesão celular mostrando padrões planares altamente organizados. As células se alinham umas com as outras na mesma direção e exibem polaridade equivalente em grandes distâncias. Esta organização da epithelia madura é estabelecida ao longo da morfogênese. Para entender como o arranjo planar da epitélia madura é alcançado, é fundamental acompanhar a orientação celular e a dinâmica de crescimento com alta fidelidade espostetal durante o desenvolvimento in vivo. Ferramentas analíticas robustas também são essenciais para identificar e caracterizar transições locais para globais. A drosophila pupa é um sistema ideal para avaliar mudanças de forma celular orientadas subjacentes à morfogênese epitelial. O epitélio em desenvolvimento pupal constitui a superfície externa do corpo imóvel, permitindo imagens de longo prazo de animais intactos. O protocolo descrito aqui é projetado para imagem e análise de comportamentos celulares em níveis globais e locais na epiderme abdominal pupal à medida que cresce. A metodologia descrita pode ser facilmente adaptada à imagem de comportamentos celulares em outros estágios de desenvolvimento, tecidos, estruturas subcelulares ou organismos modelo.

O protocolo descrito acima abrange a preparação da pupae Drosophila para imagens vivas de longo prazo e os procedimentos para análise da orientação celular e dinâmica de crescimento da epiderme abdominal. Aplicando essa metodologia é possível gerar filmes de alta resolução da pupae em desenvolvimento por períodos de até 48h sem fotobleaching significativo ou fototoxicidade. Instantâneos que retratam a epiderme abdominal (por exemplo, histoblasts e LECs) em diferentes...

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Imaging and Analysis of Tissue Orientation and Growth Dynamics in the Developing Drosophila Epithelia During Pupal Stages

Este protocolo é projetado para a imagem e análise da dinâmica da orientação celular e crescimento tecidual na epitélia abdominal Drosophila à medida que a mosca-das-frutas sofre metamorfose. A metodologia aqui descrita pode ser aplicada ao estudo de diferentes estágios de desenvolvimento, tecidos e estruturas subcelulares em Drosophila ou outros organismos modelo.

Imagem e Análise da Dinâmica de Orientação e Crescimento tecidual na Epitélia Drosophila em Desenvolvimento durante os estágios pupal

Within multicellular organisms, mature tissues and organs display high degrees of order in the spatial arrangements of their constituent cells. A ...

Dentro de organismos multicelulares, o tecido exibe altos graus em sua orientação espacial. As células se alinham e exibem uma gama de prioridades em grandes distâncias ao longo da morfogênese. Para entender como os arranjos planares da epitélio são alcançados durante o desenvolvimento, é crucial acompanhar as orientações e dinâmicas de crescimento das células com alta fidelidade temporal espacial in vivo.O protocolo descrito foi projetado para imagem e análise de comportamentos celulares em níveis globais e locais na epiderme pupal drosophila. Essa metodologia poderia fornecer insights sobre diferentes teorias da pesquisa, biologia celular, morfogênese e polaridade planar e pode ser aplicada à análise de outros tecidos, estruturas e modelos. Todas as etapas podem ser executadas facilmente após alguma prática.Eles exigem precisão. A visualização deste protocolo ajuda a alcançar resultados ótimos em um tempo menor. A dissecção pupal é complexa.Para começar, use um pincel umedecido para transferir pré-pupas brancas encenadas para um frasco de plástico fresco, e mantê-los lá pelo tempo necessário a 25 graus Celsius. Em seguida, remova cada pupae da parede do frasco com a ajuda de fórceps. Cole o lado ventral de cada pupa em um slide de vidro coberto com fita adesiva dupla face.Bata suavemente nos espirros da cabeça e na superfície dorsal da pupa com as pontas dos fórceps para garantir a adesão da caixa pupal à fita. Comece a dissecção sob um microscópio estéreo removendo suavemente o operculum do pupário com as fórceps. Insira uma ponta das fórceps em um raso entre a caixa pupal e a superfície da pupa através da abertura opercular.Rasgue a caixa da cabeça à cauda lateralmente em um ou mais balanços, evitando beliscar a pupa. Dobre a caixa de pupal rachada para os lados laterais enquanto você continua procedendo para a extremidade posterior. Remova a pupa da caixa pupal aberta inserindo cuidadosamente os fórceps sob o animal e puxando suavemente para cima.A pupa gruda na ponta dos fórceps. Segure a pupa suavemente pelo lado ventral, e transfira a pupa para um prato com fundo de vidro em cima de uma pequena gota de óleo de halocarboneto permeável a gás. Enrole um pedaço de papel de tecido molhado nas bordas do prato e cubra o prato para manter a umidade.Oriente a pupa sobre a gota de óleo sobre os pratos com fundo de vidro de acordo com o domínio e o processo a ser avaliado. Para imagens vivas de longo prazo da expansão precoce dos ninhos dorsais, dorsais orientam lateralmente a pupa. Para imaginar sua expansão tardia e remodelação tecidual, orienta dormente a pupa.Transfira o prato com fundo de vidro contendo a pupae montada para o estágio do microscópio e concentre-se na superfície da área abdominal usando luz transmitida. Para empregar recombinação mitótica para induzir mosaicos genéticos no epitélio abdominal, prepare fêmeas virgens carregando um flipase indutível de choque térmico, um local FRT em um local genômico específico, e um marcador celular reconhecível distal para o local da FRT. Prepare machos mutantes carregando um local FRT no local genômico equivalente.Cruze várias fêmeas e machos em uma proporção de três a um em um frasco de plástico a 25 graus Celsius por quatro a cinco dias. Para gerar clones somáticos nos histoblastos, realize o tratamento de choque térmico no terceiro estágio larval instar da prole da cruz submergindo os frascos de plástico contendo os animais em um banho de água a 37 graus Celsius por 45 minutos a uma hora. No software imagem J, use a função de projeção de intensidade máxima para proteger as fatias de pilha Z adquiridas pela microscopia confocal em 2D.Os ninhos têm uma forma característica que os orienta em um sistema de coordenadas planar anterior à esquerda e dorsal até o topo. Para alcançar resultados ótimos com esta análise, a imagem de entrada deve ser adquirida com alta resolução. Para obter valores de orientação qualitativa nas bordas de células locais, clique no menu plug-in e escolha a opção de distribuição J de orientação.Defina o sigma da janela gaussiana para um pixel, spline cúbico para gradiente, coerência mínima para 20% e energia mínima para um por cento. Empregue a opção de pesquisa de cores do plug-in. Defina a tonalidade para orientação, saturação à coerência e brilho para a imagem de entrada.Esta cor codifica as orientações de borda do celular em relação ao sistema de coordenadas do planar definido. Em seguida, sob o menu plug-in, use a opção de medida J orientação para quantificar orientações celulares e célula direcional para alinhamento celular. Gerar regiões pequenas e adjacentes não sobrepostas de interesse de peso uniforme em torno de 20 micrômetros vezes 20 micrômetros dentro da área ocupada pelos histoblastos.A medida premente calcula a orientação e coerência local dominantes dos ROIs. Neste estudo, a metodologia utilizada é capaz de gerar filmes de alta resolução da pupae em desenvolvimento por períodos de até 48 horas sem branqueamento fotográfico significativo ou toxicidade fotográfica. Exemplos de clones do tipo selvagem marcados pela ausência de RFP NLS e seus pontos gêmeos às 26 horas após a formação do puparium são mostrados aqui.Os clones alongaram-se ao longo dos limites segmentais. Clones gêmeos dispostos em paralelo ou em conjunto. A morfologia de um clone do tipo selvagem às 26 horas e 47 horas após a formação do puparium mostra morfologia de borda complexa em ambos os estágios.Parcelas de caixa e bigode para parâmetros geométricos em 26 horas e 47 horas após a formação do puparium mostram que a área média e o perímetro aumentaram significativamente nesta janela de tempo. A orientação do clone foi mantida durante a expansão e remodelação. Parâmetros de forma em 26 horas e 47 horas após a formação do puparium indicam a rugosidade, a arredondamento e a circularidade mal alteradas nos clones do tipo selvagem.Certifique-se de não danificar a pupa, caso contrário ela morrerá dentro de algumas horas, afetando imagens ao vivo. Este protocolo não requer um reagente de sartus ou instrumento para ser empregado. Evite se beliscar ao dissecar.Aplicando essas metodologias possíveis para gerar filmes de alta resolução por longo prazo usando diferentes técnicas de imaginar. Focal para fótons ou discos giratórios. A análise de cloro pode ser empregada para explorar respostas não autônomas, uma vez que as células aleatórias facilitam na identificação de conversas cruzadas ou mecanismos de comunicação celular.Esses métodos podem ser facilmente adaptados para estudar uma gama completa de fenômenos morfogenéticos, incluindo a coordenação do desenvolvimento epidérmico, muscular e neuro durante a metamorfose.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Imaging and Analysis of Tissue Orientation and Growth Dynamics in the Developing Drosophila Epithelia During Pupal Stages

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Vivo-imaging da<em&gt; Drosophila</em&gt; Pupal Eye

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Biologia do Desenvolvimento

Assaying Blood Cell Populations of the Drosophila melanogaster Larva

Assaying Blood Cell Populations of the Drosophila melanogaster Larva

Ensaiando populações de células do sangue<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Larva

In vertebrates, hematopoiesis is regulated by inductive microenvironments (niches). Likewise, in the invertebrate model organism&#160;Drosophila ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

Imagem ao vivo do mouse Fusão do palato secundário

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissecção e imunofluorescência coloração de cogumelo corpo e fotoreceptor neurônios em cérebros adultos Drosophila melanogaster

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Methods for Imaging Intracellular pH of the Follicle Stem Cell Lineage in Live Drosophila Ovarian Tissue

Methods for Imaging Intracellular pH of the Follicle Stem Cell Lineage in Live Drosophila Ovarian Tissue

Métodos para o pH intracelular Imaging da linhagem de células-tronco do folículo em tecido ovariano de Drosophila

Changes in intracellular pH (pHi) play important roles in the regulation of many cellular functions, including metabolism, proliferation, and ...

Dissection and Staining of Drosophila Pupal Ovaries

Dissection and Staining of Drosophila Pupal Ovaries

Dissecção e coloração dos ovários Pupal drosófila

Unlike adult Drosophila ovaries, pupal ovaries are relatively difficult to access and examine due to their small size, translucence, and encasing within a ...

In Vivo Imaging of Muscle-tendon Morphogenesis in Drosophila Pupae

In Vivo Imaging of Muscle-tendon Morphogenesis in Drosophila Pupae

Na Vivo Imagem latente da morfogênese músculo-tendão em pupas de Drosophila

Muscles together with tendons and the skeleton enable animals including humans to move their body parts. Muscle morphogenesis is highly conserved from ...

Preparing Developing Peripheral Olfactory Tissue for Molecular and Immunohistochemical Analysis in Drosophila

Preparing Developing Peripheral Olfactory Tissue for Molecular and Immunohistochemical Analysis in Drosophila

Preparando a desenvolver tecido olfativo periférico para Molecular e análise imuno-histoquímica em Drosophila

The olfactory system of Drosophila is a widely used system in developmental neurobiology, systems neuroscience, as well as neurophysiology, behavior, and ...

Analysis of Actomyosin Dynamics at Local Cellular and Tissue Scales Using Time-lapse Movies of Cultured Drosophila Egg Chambers

Analysis of Actomyosin Dynamics at Local Cellular and Tissue Scales Using Time-lapse Movies of Cultured Drosophila Egg Chambers

Análise da dinâmica da Actomiosina em escalas celulares e teciduais locais usando filmes de lapso de tempo das câmaras de ovos de Drosophila cultivadas

Drosophila immature eggs are called egg chambers, and their structure resembles primitive organs that undergo morphological changes from a round to an ...

Dissection of the Drosophila Pupal Retina for Immunohistochemistry, Western Analysis, and RNA Isolation

Dissection of the Drosophila Pupal Retina for Immunohistochemistry, Western Analysis, and RNA Isolation

Dissecação da Retina Pupal drosófila para imuno-histoquímica, análise ocidental e isolamento de RNA

The Drosophila pupal retina provides an excellent model system for the study of morphogenetic processes during development. In this paper, we present a ...