Name: experimental approach to examine leptin signaling in the carotid bodies and its effects on control of breathing
Uploaded: 2019-10-25T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Experimental Approach to Examine Leptin Signaling in the Carotid Bodies and its Effects on Control of Breathing at JoVE.com

R01HL138932, RO1HL133100, RO1HL128970, AHACDA34700025

Alle eksperimentelle protokoller ha blitt anerkjent av det institusjonell dyr bekymre og bruk komité (MO18M211).
1. leptin infusjon
Merk: For å undersøke effekten av leptin på pusting, har vi tilført leptin subkutant i mager C57BL/6J mus av en osmotisk pumpe for å øke sirkulerende leptin nivåer til de som er observert i overvektige mus.
<ol><li>
Osmotisk pumpe forberedelse
	<ol>
<li>Veie den tomme pumpen for å kontrollere...

<ol>
	<li>O'donnell, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptin+prevents+respiratory+depression+in+obesity.">Leptin prevents respiratory depression in obesity.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 159, 1477-1484 (1999).</li><li>Polotsky, V. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+gender+exacerbates+respiratory+depression+in+leptin-deficient+obesity.">Female gender exacerbates respiratory depression in leptin-deficient obesity.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 164, 1470-1475 (2001).</li><li>Bassi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+leptin+replacement+enhances+chemorespiratory+responses+in+leptin-deficient+mice+independent+of+changes+in+body+weight.">Central leptin replacement enhances chemorespiratory responses in leptin-deficient mice independent of changes in body weight.</a> Pflu&#776;gers Archiv: European Journal of Physiology. 464, 145-153 (2012).</li><li>Inyushkina, E. M., Merkulova, N. A., Inyushkin, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+the+respiratory+activity+of+leptin+at+the+level+of+the+solitary+tract+nucleus.">Mechanisms of the respiratory activity of leptin at the level of the solitary tract nucleus.</a> Neuroscience and Behavioral Physiology. 40, 707-713 (2010).</li><li>Considine, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum+immunoreactive-leptin+concentrations+in+normal-weight+and+obese+humans.">Serum immunoreactive-leptin concentrations in normal-weight and obese humans.</a> New England Journal of Medicine. 334, 292-295 (1996).</li><li>Maffei, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptin+levels+in+human+and+rodent:+measurement+of+plasma+leptin+and+ob+RNA+in+obese+and+weight-reduced+subjects.">Leptin levels in human and rodent: measurement of plasma leptin and ob RNA in obese and weight-reduced subjects.</a> Nature Medicine. 1, 1155-1161 (1995).</li><li>Phipps, P. R., Starritt, E., Caterson, I., Grunstein, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+serum+leptin+with+hypoventilation+in+human+obesity.">Association of serum leptin with hypoventilation in human obesity.</a> Thorax. 57, 75-76 (2002).</li><li>Berger, S., Polotsky, V. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptin+and+Leptin+Resistance+in+the+Pathogenesis+of+Obstructive+Sleep+Apnea:+A+Possible+Link+to+Oxidative+Stress+and+Cardiovascular+Complications.">Leptin and Leptin Resistance in the Pathogenesis of Obstructive Sleep Apnea: A Possible Link to Oxidative Stress and Cardiovascular Complications.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2018, 5137947 (2018).</li><li>Ribeiro, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+fat+diet+blunts+the+effects+of+leptin+on+ventilation+and+on+carotid+body+activity.">High fat diet blunts the effects of leptin on ventilation and on carotid body activity.</a> The Journal of Physiology. 96, 3187-3199 (2018).</li><li>Yuan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptin+signaling+in+the+carotid+body+regulates+a+hypoxic+ventilatory+response+through+altering+TASK+channel+expression.">Leptin signaling in the carotid body regulates a hypoxic ventilatory response through altering TASK channel expression.</a> Frontiers in Physiology. 9, 249 (2018).</li><li>Caballero-Eraso, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptin+acts+in+the+carotid+bodies+to+increase+minute+ventilation+during+wakefulness+and+sleep+and+augment+the+hypoxic+ventilatory+response.">Leptin acts in the carotid bodies to increase minute ventilation during wakefulness and sleep and augment the hypoxic ventilatory response.</a> The Journal of Physiology. 591, 151-172 (2018).</li><li>Jun, J. C., Shin, M. K., Yao, Q., Devera, R., Fonti-Bevans, S., Polotsky, V. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermoneutrality+modifies+the+impact+of+hypoxia+on+lipid+metabolism.">Thermoneutrality modifies the impact of hypoxia on lipid metabolism.</a> American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism. 304, 424-435 (2012).</li><li>Polotsky, V. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+interrupted+leptin+pathways+on+ventilatory+control.">Impact of interrupted leptin pathways on ventilatory control.</a> Journal of Applied Physiology. 96, 991-998 (2004).</li><li>Pho, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+leptin+replacement+on+sleep-disordered+breathing+in+the+leptin-deficient+ob/ob+mouse.">The effect of leptin replacement on sleep-disordered breathing in the leptin-deficient ob/ob mouse.</a> Journal of Applied Physiology. 120, 78-86 (2016).</li><li>Hernandez, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+whole+body+plethysmography+system+for+the+continuous+characterization+of+sleep+and+breathing+in+a+mouse.">Novel whole body plethysmography system for the continuous characterization of sleep and breathing in a mouse.</a> Journal of Applied Physiology. 112, 671-680 (2012).</li><li>Powell, F. L., Milsom, W. K., Mitchell, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+domains+of+the+hypoxic+ventilatory+response.">Time domains of the hypoxic ventilatory response.</a> Respiration Physiology. 112, 123-134 (1998).</li><li>Drorbaugh, J. E., Fenn, W. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+barometric+method+for+measuring+ventilation+in+newborn+infants.">A barometric method for measuring ventilation in newborn infants.</a> Pediatrics. 16, 81-87 (1955).</li><li>Duffin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+ventilatory+response+to+hypoxia.">Measuring the ventilatory response to hypoxia.</a> The Journal of Physiology. 587, 285-293 (2007).</li><li>Teppema, L. J., Dahan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Ventilatory+Response+to+Hypoxia+in+Mammals:+Mechanisms,+Measurement,+and+Analysis.">The Ventilatory Response to Hypoxia in Mammals: Mechanisms, Measurement, and Analysis.</a> Physiological Reviews. 90, 675-754 (2010).</li><li>Nurse, C. A., Fearon, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carotid+body+chemoreceptors+in+dissociated+cell+culture.">Carotid body chemoreceptors in dissociated cell culture.</a> Microscopy Research and Technique. 59, 249-255 (2002).</li><li>Kumar, P., Prabhakar, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+chemoreceptors:+function+and+plasticity+of+the+carotid+body.">Peripheral chemoreceptors: function and plasticity of the carotid body.</a> Comprehensive Physiology. 2, 141-219 (2012).</li><li>Roux, J. C., Peyronnet, J., Pascual, O., Dalmaz, Y., Pequignot, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventilatory+and+central+neurochemical+reorganisation+of+O2+chemoreflex+after+carotid+sinus+nerve+transection+in+rat.">Ventilatory and central neurochemical reorganisation of O2 chemoreflex after carotid sinus nerve transection in rat.</a> The Journal of Physiology. 522, 493-501 (2000).</li></ol>

Hovedfokuset i vår studie var å undersøke åndedretts effekter av leptin signalering i CB. Flere protokoller er utviklet for å vurdere leptin rolle på en mekanistisk måte. Først bestemte bidrag av CB til HVR ble analysert av forsiktig kvantifisering av HVR i løpet av de første 2 min av hypoxic eksponering. For det andre, relevansen av CB i leptin-mediert opp-regulering av kontroll av pusting ble undersøkt av to komplementære tilnærminger. I mager vill-type mus med lave leptin nivåer ble HVR målt ved Baselin...

En adipocyte produsert hormon leptin opptrer i hypothalamus å undertrykke matinntak og øke metabolic rate. Studier utført i vårt laboratorium1,2 og av andre etterforskere3,4 viste at leptin øker hyperkapniske ventilatory Response (HVR) forebygge fedme hypoventilasjon i leptin mangelfull fedme. Men, et flertall av overvektige individer har høy plasma leptin nivåer og demonstrere motstand mot metabolske og respiratoriske effekter av hormonet5,6,7,8. Motstand mot leptin er multifaktoriell, men begrenset permeabilitet av blod-hjerne-barrieren (BBB) til leptin spiller en viktig rolle. Vi foreslår at leptin handlinger under BBB i et sentralt organ for perifer hypoxic følsomhet, den hals puls organer (CB), å forsvare puste i overvektige individer. CBS Express den lange funksjonelle isoformen av leptin reseptor, LepRb, men rollen som CB i respiratoriske effekter av leptin har ikke vært tilstrekkelig belyst9,10.
Målet med vår metode var å undersøke effekten av leptin signalering i CB på HVR. Vår begrunnelse var å utføre (a) tap av funksjon eksperimenter infusjonen leptin i mus med intakt hals puls organer og denervated hals puls organer etterfulgt av HVR målinger; (b) gevinst av funksjonen eksperimenter i DB/DB mus mangler LepRb, der vi målte HVR ved Baseline og etter uttrykk for LEPRb eksklusivt i CB. Fordelen med våre teknikker var at vi utførte alle våre eksperimenter i hemningsløs unanesthetized mus under søvn og våkenhet. Tidligere etterforskere enten utført sine eksperimenter under anestesi9 eller ikke måle effekten av leptin under søvn10. I tillegg er vår studie den første til å utnytte en unik gevinst på funksjonen tilnærming med selektiv LepRb uttrykk i CB beskrevet ovenfor.
I den brede sammenhengen, kan vår tilnærming være generalisert til andre reseptorer uttrykt i CB og deres rolle i hypoxic følsomhet. Etterforskerne kan sette mot en ligand til en reseptor av interesse og måle HVR ved Baseline og etter CB denervation. Som en utfyllende tilnærming, kan en reseptor av interesse være overexpressed i CB og HVR målinger kan utføres før og etter overuttrykte bruke vår teknologi som er beskrevet i dette manuskriptet.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1ml Insulin Syringes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>309311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1x PBS (pH 7.4)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-023</td>
			<td>500 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ad-Lacz</td>
			<td>Dr. Christopher Rhodes (University of Chicago)</td>
			<td></td>
			<td>1x1010 pfu/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ad-LepRb-GFP</td>
			<td>Vector Biolabs</td>
			<td>ADV-263380</td>
			<td>2-5x1010 pfu/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic cart</td>
			<td>Atlantic Biomedical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Purdue Products Ltd.</td>
			<td>12496-0757-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine (Buprenex)</td>
			<td>Reckitt Benckiser Healthcare Ltd.</td>
			<td>12496-0757-5</td>
			<td>0.3mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57Bl/6J</td>
			<td>Jackson laboratory</td>
			<td>000664</td>
			<td>Mice Strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Gauze Sponges</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>22-362-178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>db/db</td>
			<td>Jackson laboratory</td>
			<td>000697</td>
			<td>Mice Strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Pharmco-AAPER</td>
			<td>111000200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Vetone</td>
			<td>502017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab Chart</td>
			<td>Data Science International (DSI)</td>
			<td></td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel Matrix</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>356234</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Spring Scissors</td>
			<td>World Precision Instruments (WPI)</td>
			<td>14124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Ox Plus</td>
			<td>STARR Life Sciences Corp.</td>
			<td></td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Ox Plus Collar Sensor</td>
			<td>STARR Life Sciences Corp.</td>
			<td>015022-2</td>
			<td>Medium Collar Clip Special 7&#8221;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Whole Body Plethysmography Chamber</td>
			<td>Data Science International (DSI)</td>
			<td>PLY3211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ohio Care Plus Incubator</td>
			<td>Ohmeda</td>
			<td>HCHD000173</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Scissors</td>
			<td>World Precision Instruments (WPI)</td>
			<td>501753-G</td>
			<td>Straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmotic Pump</td>
			<td>Alzet</td>
			<td>1003D</td>
			<td>1ul per hour, 3 days</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4557</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Mouse Leptin protein</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>498-OB-05M</td>
			<td>5mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>RICCA Chemical</td>
			<td>7210-16</td>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Surgical Suture</td>
			<td>DemeTech</td>
			<td>DT-639-1</td>
			<td>Silk, size 6-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermometer</td>
			<td>Innovative Calibration Solutions (INNOCAL)</td>
			<td>EW 20250-91</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

experimental approach to examine leptin signaling in the carotid bodies and its effects on control of breathing

En adipocyte-produsert hormon leptin er en potent respiratoriske stimulerende, som kan spille en viktig rolle i å forsvare åndedretts funksjon i fedme. Hals puls organene (CB), et nøkkel organ for perifer hypoxic følsomhet, uttrykker den lange funksjonelle isoformen av leptin reseptor (LepRb), men rollen til leptin signalering i kontroll av pusting har ikke blitt fullstendig belyst. Vi undersøkte hypoxic ventilatory respons (HVR) (1) i C57BL/6J-mus før og etter leptin infusjon ved Baseline og etter CB denervation; (2) i LepRb-mangelfull obese DB/DB mus ved Baseline og etter LepRb overuttrykte i CBS. I C57BL/6J mus, leptin økte HVR og effekter av leptin på HVR ble avskaffet av CB denervation. I DB/DB mus, LepRb uttrykk i CB utvidet HVR. Derfor konkluderer vi at leptin opptrer i CB å øke responsen på hypoksi.

Kontinuerlig infusjon av leptin betydelig økt HVR i mager C57BL/6J mus fra 0,23 til 0,31 mL/min/g/ΔFiO2 (P < 0,001, figur 2)11. CSND avskaffet leptin økning i HVR (figur 2), mens ingen demping effekter av CSND på HVR ble observert i humbug kirurgi gruppe etter leptin infusjon.
LepRb uttrykk i CB av LepRb-mangelfulle overvektige DB/DB mus indusert e...

Watch this Scientific Journal Video about Experimental Approach to Examine Leptin Signaling in the Carotid Bodies and its Effects on Control of Breathing at JoVE.com

Experimental Approach to Examine Leptin Signaling in the Carotid Bodies and its Effects on Control of Breathing

Vår studie fokuserer på virkningene av leptin signalering i hals puls kroppen (CB) på hypoxic ventilatory respons (HVR). Vi utførte "tap av funksjon" eksperimenter måle effekten av leptin på HVR etter CB denervation og "gevinst av funksjon" eksperimenter som måler HVR etter overuttrykte av leptin reseptoren i CB.

Eksperimentell tilnærming til å undersøke leptin signalering i hals puls organer og dens virkninger på kontroll av pusting

An adipocyte-produced hormone leptin is a potent respiratory stimulant, which may play an important role in defending respiratory function in obesity. The ...

Vår protokoll kan brukes til å undersøke respiratoriske effekter av leptin på carotis kroppen i perifer chemoreflex pustekontroll, og fysiologiske reaksjoner på hypoksi. Vi kan også vurdere effekten av tap og gevinst av halspuls kroppsfunksjon ved hjelp av kirurgisk og kjemisk denervasjon og adenovirus transfection henholdsvis. Før du begynner prosedyren, måle temperaturen inne i en skreddersydd hele kroppen plasthemagrophy kammer, og måle den relative fuktigheten i laboratoriet.Deretter måler du kroppsvekten og rektaltemperaturen til den eksperimentelle musen. Plasser musen inne i kammeret og legg en oksymeterkrage rundt dyrets barberte hals. Og sørg for å forsegle kammeret helt for å unngå luftlekkasjer.Vent ca 30 minutter til musen er stille og kammeret er på et konstant volum. Før du begynner å registrere respiratoriske signaler og perifer oksygenmetning ved normoksi. Etter 20 minutter med normoksi, utsett dyret for en konstant blandet gassstrøm på 10% oksygen og 3% karbondioksid.Og begynn å registrere den første syklusen av akutt hypoksi i respiratoriske signaler og perifer oksygenmetning. I løpet av de første 30 sekundene med hypoksi åpner du de to små sideportene ved foten av kammeret for å tillate plugger av blandingsgassene. Etter de første 30 sekundene lukker du en av de små sideportene i kammeret og fortsetter å registrere ved en konstant hypoksi ved 10% av fraksjonen av inspirert oksygen i fem minutter.På slutten av hypoksibehandlingen, bytt in-flow-kilden for å utsette musen for romluft og la dyret gjenopprette ved normoksi i minst 30 minutter før du begynner neste analyse. På slutten av forsøket, koble en sprøyte til en av de små sideportene ved foten av kammeret og injisere en milliliter romluft i hele blod plethysmografi kammeret tre ganger for å kalibrere kammeret. Etter den tredje flush, måle temperaturen i kammeret med dyret fortsatt inne og kammeret fortsatt lukket.Deretter åpner du kammeret og måler rektal temperaturen på musen før du returnerer dyret til sitt hjem bur. For kirurgisk denervasjon av carotis sinusnerven, administrer analgesi til bedøvelsesmusen, og fjern håret i nakkeområdet. Desinfiser den eksponerte huden med Betadin og alkohol og påfør salve på dyrets øyne.Etter å ha gjort et midtlinjet snitt, fjern bindevevet og fettvevet for å avsløre bifurcation av de vanlige halspulsårene og identifisere hypoglossalnerven. Løft opp hypoglossalnerven for å eksponere ordseddelnerven rett nedenfor og bruk mikrofjærsaks til bilateralt dissekere carotis sinusnervene. Når halslegemene har blitt eksponert, må du forsiktig suspendere en mikroliter av riktig adenovirus i fire mikroliter flytende Matrigel matrise på is, per side, og påfør fem mikroliter av virussuspensjonen til halskroppsområdet bilateralt.Vent to til tre minutter til den flytende Matrigel matrisen har størknet før snittet lukkes med 6-0 silkesutur og administrerer en milliliter normal saltvann subkutant. Deretter huser du musen i et gjenopprettingskammer med overvåking til sternal recumbency før du returnerer dyret til sitt hjem bur. Kontinuerlig infusjon av leptin øker den hypoksiske ventilatoriske responsen hos magre C57BL/6-mus, mens carotis sinusnerveksjon avskaffer denne leptininduserte økningen.Som forventet observeres ingen dempende effekter av carotis sinusnerveksjon på hypoksisk ventilatorisk respons i sham kirurgi gruppen etter leptin infusjon. Induksjon av leptin reseptor lang isoform uttrykk i carotis organer av leptin reseptor lang isoform mangelfull overvektige db / db mus resulterer i en betydelig økning i hypoksisk ventilatorisk respons. Mens etter transfection med kontroll LacZ adenovirus, ingen endring observeres.Disse teknikkene tillater analyse av rollen til halslegemer i perifer chemoreflex og effekten av leptin på carotislegemer i kontroll av puster.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Anatomy and Physiology

Biology

Unit 1

The Respiratory System

SCIENTISTS IN ACTION

Creating Defined Gaseous Environments to Study the Effects of Hypoxia on C. elegans

Creating Defined Gaseous Environments to Study the Effects of Hypoxia on C. elegans

Opprette Definerte Gassformige Miljøer å studere effekter av hypoksi på<em&gt; C. elegans</em

Oxygen is essential for all metazoans to survive, with one known exception1. Decreased O2 availability (hypoxia) can arise during states of disease, ...

Mechanical Stimulation-induced Calcium Wave Propagation in Cell Monolayers: The Example of Bovine Corneal Endothelial Cells

Mekanisk stimulering-indusert Kalsium wave forplantning i cellemonolagene: The Eksempel på storfe Hornhinnen endotelceller

Intercellular communication is essential for the coordination of physiological processes between cells in a variety of organs and tissues, including the ...

The ChroP Approach Combines ChIP and Mass Spectrometry to Dissect Locus-specific Proteomic Landscapes of Chromatin

Den ChroP Approach Kombinerer Chip og massespektrometri å dissekere Locus-spesifikke proteomikk Landscapes of Kromatin

Chromatin is a highly dynamic nucleoprotein complex made of DNA and proteins that controls various DNA-dependent processes. Chromatin structure and ...

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Metode for vurdering av effektene av en Range av bølgelengder og intensiteter av Red / nær-infrarødt Lysterapi på oksidativt stress<em&gt; In Vitro</em

Red/near-infrared light therapy (R/NIR-LT), delivered by laser or light emitting diode (LED), improves functional and morphological outcomes in a range of ...

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

Kvantifisering av endotelcelle klebrighet<em&gt; In Vitro</em

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This ...

Gap Junctional Intercellular Communication: A Functional Biomarker to Assess Adverse Effects of Toxicants and Toxins, and Health Benefits of Natural Products

Gap junctional interkommunikasjons: En funksjonell biomarkør for å vurdere skadevirkninger av giftstoffer og giftstoffer, og helsemessige fordeler av Natural Products

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer (SL-DT) technique that measures intercellular communication through gap junction ...

Imaging G Protein-coupled Receptor-mediated Chemotaxis and its Signaling Events in Neutrophil-like HL60 Cells

Imaging G protein-koblet reseptor-mediert Chemotaxis og av signalanlegget hendelser i nøytrofilmedierte som HL60 celler

Eukaryotic cells sense and move towards a chemoattractant gradient, a cellular process referred as chemotaxis. Chemotaxis plays critical roles in many ...

A Method to Assess Bacteriocin Effects on the Gut Microbiota of Mice

En metode for å vurdere bakteriocin-effekter på gut-mikrobioten av mus

Very intriguing questions arise with our advancing knowledge on gut microbiota composition and the relationship with health, particularly relating to the ...

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium gjennomstrømming Screening analyser for vurdering av virkningene på Ca2 +-signalisering og Acrosome reaksjon i menneskelig sæden

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...

A Pipeline using Bilateral In Utero Electroporation to Interrogate Genetic Influences on Rodent Behavior

En rørledning ved hjelp av bilateral in utero elektroporasjon for å avhøre genetiske påvirkninger på gnageratferd

As genome-wide association studies shed light on the heterogeneous genetic underpinnings of many neurological diseases, the need to study the contribution ...