Name: chronic, acute, and reactivated hiv infection in humanized immunodeficient mouse models
Uploaded: 2019-12-03T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models at JoVE.com

وقد دعم هذا العمل من قبل القسم السريري IHV الصناديق الداخلية إلى JCZ.

وفي هذا العمل ، تم تنفيذ جميع الرعاية والإجراءات الحيوانية وفقا للبروتوكولات التي استعرضتها ووافقت عليها اللجنة المؤسسية للعناية بالماشية واستخدامها في كليه الطب بجامعه ماريلاند (البروتوكول رقم 1018017 ، 1018018 ، 0318009).
1. الإنسانCD34 + HSC تهجين فئران حديثي الولادة
<ol><li>استخد...

<ol>
	<li>Shultz, L. D., Ishikawa, F., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+in+translational+biomedical+research.">Humanized mice in translational biomedical research.</a> Nature Reviews Immunology. 7, 118-130 (2007).</li><li>Koboziev, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+humanized+mice+to+study+the+pathogenesis+of+autoimmune+and+inflammatory+diseases.">Use of humanized mice to study the pathogenesis of autoimmune and inflammatory diseases.</a> Inflammatory Bowel Diseases. 21 (7), 1652-1673 (2015).</li><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID/&#947;cnull+mouse:+An+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells.">NOD/SCID/&#947;cnull mouse: An excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li><li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD/SCID/IL2+receptor+{gamma}+chain(null)+mice.">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li><li>Kim, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Mouse+Model+for+the+Study+of+Human+Immunodeficiency+Virus.">A Simple Mouse Model for the Study of Human Immunodeficiency Virus.</a> AIDS research and human retroviruses. 32 (2), 194-202 (2016).</li><li>Wunderlich, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AML+xenograft+efficiency+is+significantly+improved+in+NOD/SCID-IL2RG+mice+constitutively+expressing+human+SCF,+GM-CSF+and+IL-3.">AML xenograft efficiency is significantly improved in NOD/SCID-IL2RG mice constitutively expressing human SCF, GM-CSF and IL-3.</a> Leukemia. 24 (10), 1785-1788 (2010).</li><li>Billerbeck, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+human+CD4+FoxP3++regulatory+T+cells+in+human+stem+cell+factor-,+granulocyte-macrophage+colony-stimulating+factor-,+and+interleukin-3-expressing+NOD-SCID+IL2R&#947;null+humanized+mice.">Development of human CD4+FoxP3+ regulatory T cells in human stem cell factor-, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-, and interleukin-3-expressing NOD-SCID IL2R&#947;null humanized mice.</a> Blood. 117 (11), 3076-3086 (2011).</li><li>Coughlan, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloid+Engraftment+in+Humanized+Mice:+Impact+of+Granulocyte-Colony+Stimulating+Factor+Treatment+and+Transgenic+Mouse+Strain.">Myeloid Engraftment in Humanized Mice: Impact of Granulocyte-Colony Stimulating Factor Treatment and Transgenic Mouse Strain.</a> Stem cells and development. 25 (7), 530-541 (2016).</li><li>Kumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+Cell-Specific+siRNA+Delivery+Suppresses+HIV-1+Infection+in+Humanized+Mice.">T Cell-Specific siRNA Delivery Suppresses HIV-1 Infection in Humanized Mice.</a> Cell. 134 (4), 577-586 (2008).</li><li>Victor Garcia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+for+HIV+and+AIDS+research.">Humanized mice for HIV and AIDS research.</a> Current Opinion in Virology. 19, 56-64 (2016).</li><li>Ara&#237;nga, M., Su, H., Poluektova, L. Y., Gorantla, S., Gendelman, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+cellular+and+tissue+replication+patterns+in+infected+humanized+mice.">HIV-1 cellular and tissue replication patterns in infected humanized mice.</a> Scientific Reports. 6, 1-12 (2016).</li><li>Satheesan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+replication+and+latency+in+a+humanized+NSG+mouse+model+during+suppressive+oral+combinational+ART.">HIV replication and latency in a humanized NSG mouse model during suppressive oral combinational ART.</a> Journal of Virology. 92 (7), 2118 (2018).</li><li>Medina-Moreno, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+of+CDK9+with+indirubin+3&#8217;-monoxime+safely+and+durably+reduces+HIV+viremia+in+chronically+infected+humanized+mice.">Targeting of CDK9 with indirubin 3&#8217;-monoxime safely and durably reduces HIV viremia in chronically infected humanized mice.</a> PLoS ONE. 12 (8), 1-13 (2017).</li><li>Honeycutt, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+sustain+HIV+replication+in+vivo+independently+of+T+cells.">Macrophages sustain HIV replication in vivo independently of T cells.</a> The Journal of Clinical Investigation. 126 (4), 1353-1366 (2016).</li><li>Perdomo-Celis, F., Medina-Moreno, S., Davis, H., Bryant, J., Zapata, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+Replication+in+Humanized+IL-3/GM-CSF-Transgenic+NOG+Mice.">HIV Replication in Humanized IL-3/GM-CSF-Transgenic NOG Mice.</a> Pathogens. 8 (33), 1-16 (2019).</li><li>Akkina, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvements+and+Limitations+of+Humanized+Mouse+Models+for+HIV+Research:+NIH/NIAID+"Meet+the+Experts"+2015+Workshop+Summary.">Improvements and Limitations of Humanized Mouse Models for HIV Research: NIH/NIAID "Meet the Experts" 2015 Workshop Summary.</a> AIDS Research and Human Retroviruses. 32 (2), 109-119 (2015).</li><li>Dudek, T. E., Allen, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-Specific+CD8++T-Cell+Immunity+in+Humanized+Bone+Marrow-Liver-Thymus+Mice.">HIV-Specific CD8+ T-Cell Immunity in Humanized Bone Marrow-Liver-Thymus Mice.</a> The Journal of Infectious Diseases. 208, 150-154 (2013).</li><li>Skelton, J. K., Ortega-Prieto, A. M., Dorner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Hitchhiker's+guide+to+humanized+mice:+new+pathways+to+studying+viral+infections.">A Hitchhiker's guide to humanized mice: new pathways to studying viral infections.</a> Immunology. 154, 50-61 (2018).</li><li>Pearson, T., Greiner, D. L., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+"humanized"+mice+to+study+human+immunity.">Creation of "humanized" mice to study human immunity.</a> Current Protocols in Immunology. , (2008).</li><li>Hasgur, S., Aryee, K. E., Shultz, L. D., Greiner, D. L., Brehm, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+Immunodeficient+Mice+Bearing+Human+Immune+Systems+by+the+Engraftment+of+Hematopoietic+Stem+Cells.">Generation of Immunodeficient Mice Bearing Human Immune Systems by the Engraftment of Hematopoietic Stem Cells.</a> Methods in molecular biology. 1438, 67-78 (2016).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD/LtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells.">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> Journal of Immunology. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li><li>King, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+Hu-PBL+model+for+the+study+of+human+islet+alloreactivity+based+on+NOD-scid+mice+bearing+a+targeted+mutation+in+the+IL-2+receptor+gamma+chain+gene.">A new Hu-PBL model for the study of human islet alloreactivity based on NOD-scid mice bearing a targeted mutation in the IL-2 receptor gamma chain gene.</a> Clinical Immunology. 126 (3), 303-314 (2008).</li><li>King, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+peripheral+blood+leucocyte+non-obese+diabetic-severe+combined+immunodeficiency+interleukin-2+receptor+gamma+chain+gene+mouse+model+of+xenogeneic+graft-versus-host-like+disease+and+the+role+of+host+major+histocompatibility+complex.">Human peripheral blood leucocyte non-obese diabetic-severe combined immunodeficiency interleukin-2 receptor gamma chain gene mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host major histocompatibility complex.</a> Clinical and Experimental Immunology. 157 (1), 104-118 (2009).</li><li>Covassin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+peripheral+blood+CD4+T+cell-engrafted+non-obese+diabetic-scid+IL2rgamma(null)+H2-Ab1+(tm1Gru)+Tg+(human+leucocyte+antigen+D-related+4)+mice:+a+mouse+model+of+human+allogeneic+graft-versus-host+disease.">Human peripheral blood CD4 T cell-engrafted non-obese diabetic-scid IL2rgamma(null) H2-Ab1 (tm1Gru) Tg (human leucocyte antigen D-related 4) mice: a mouse model of human allogeneic graft-versus-host disease.</a> Clinical and experimental immunology. 166 (2), 269-280 (2011).</li><li>Heredia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+of+mTOR+catalytic+site+inhibits+multiple+steps+of+the+HIV-1+lifecycle+and+suppresses+HIV-1+viremia+in+humanized+mice.">Targeting of mTOR catalytic site inhibits multiple steps of the HIV-1 lifecycle and suppresses HIV-1 viremia in humanized mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (30), 9412-9417 (2015).</li><li>Nair, A., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human.">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> Journal of Basic and Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li><li>Miller, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+parameters+that+affect+human+hematopoietic+cell+outputs+in+mutant+c-kit-immunodeficient+mice.">Analysis of parameters that affect human hematopoietic cell outputs in mutant c-kit-immunodeficient mice.</a> Experimental Hematology. 48, 41-49 (2017).</li><li>Murphy, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+T+cell+differentiation+and+lymphomagenesis+in+the+thymus+of+mice+with+severe+combined+immune+deficiency+(SCID).">Induction of T cell differentiation and lymphomagenesis in the thymus of mice with severe combined immune deficiency (SCID).</a> Journal of Immunology. 153 (3), 1004-1014 (1994).</li><li>Poluektova, L. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+Mice+as+Models+for+Human+Disease.">Humanized Mice as Models for Human Disease.</a> Humanized Mice for HIV Research. , 15-24 (2015).</li><li>Nakata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potent+anti-R5+human+immunodeficiency+virus+type+1+effects+of+a+CCR5+antagonist,+AK602/ONO4128/GW873140,+in+a+novel+human+peripheral+blood+mononuclear+cell+nonobese+diabetic-SCID,+interleukin-2+receptor+gamma-chain-knocked-out+AIDS+mouse+model.">Potent anti-R5 human immunodeficiency virus type 1 effects of a CCR5 antagonist, AK602/ONO4128/GW873140, in a novel human peripheral blood mononuclear cell nonobese diabetic-SCID, interleukin-2 receptor gamma-chain-knocked-out AIDS mouse model.</a> Journal of Virology. 79 (4), 2087-2096 (2005).</li><li>Terahara, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+Reporter+Signals,+EGFP,+and+DsRed,+Encoded+in+HIV-1+Facilitate+the+Detection+of+Productively+Infected+Cells+and+Cell-Associated+Viral+Replication+Levels.">Fluorescent Reporter Signals, EGFP, and DsRed, Encoded in HIV-1 Facilitate the Detection of Productively Infected Cells and Cell-Associated Viral Replication Levels.</a> Frontiers in Microbiology. 2, 280 (2012).</li><li>Nicolini, F. E., Cashman, J. D., Hogge, D. E., Humphries, R. K., Eaves, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID+mice+engineered+to+express+human+IL-3,+GM-CSF+and+Steel+factor+constitutively+mobilize+engrafted+human+progenitors+and+compromise+human+stem+cell+regeneration.">NOD/SCID mice engineered to express human IL-3, GM-CSF and Steel factor constitutively mobilize engrafted human progenitors and compromise human stem cell regeneration.</a> Leukemia. 18 (2), 341-347 (2004).</li><li>Cyster, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicular+stromal+cells+and+lymphocyte+homing+to+follicles.">Follicular stromal cells and lymphocyte homing to follicles.</a> Immunological Reviews. 176, 181-193 (2000).</li><li>Seung, E., Tager, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humoral+Immunity+in+Humanized+Mice:+A+Work+in+Progress.">Humoral Immunity in Humanized Mice: A Work in Progress.</a> Journal of Infectious Diseases. 208, 155-159 (2013).</li><li>Wahl, A., Victor Garcia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+BLT+humanized+mice+to+investigate+the+immune+reconstitution+of+the+gastrointestinal+tract.">The use of BLT humanized mice to investigate the immune reconstitution of the gastrointestinal tract.</a> Journal of Immunological Methods. 410, 28-33 (2014).</li><li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+human+humoral+immune+responses+in+a+novel+HLA-DR-expressing+transgenic+NOD/Shi-scid/&#947;c+null+mouse.">Induction of human humoral immune responses in a novel HLA-DR-expressing transgenic NOD/Shi-scid/&#947;c null mouse.</a> International Immunology. 24 (4), 243-252 (2012).</li><li>Ali, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenogeneic+Graft-versus-Host-Disease+in+NOD-scid+IL-2R&#947;null+Mice+Display+a+T-Effector+Memory+Phenotype.">Xenogeneic Graft-versus-Host-Disease in NOD-scid IL-2R&#947;null Mice Display a T-Effector Memory Phenotype.</a> PLoS ONE. 7 (8), 1-10 (2012).</li><li>Brehm, M. A., Wiles, M. V., Greiner, D. L., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+improved+humanized+mouse+models+for+human+infectious+diseases.">Generation of improved humanized mouse models for human infectious diseases.</a> Journal of Immunological Methods. 410, 3-17 (2014).</li><li>Hakre, S., Chavez, L., Shirakawa, K., Verdin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+latency:+experimental+systems+and+molecular+models.">HIV latency: experimental systems and molecular models.</a> FEMS Microbiology Reviews. 36 (3), 706-716 (2012).</li><li>Wu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRIM5&#945;+Restriction+Affects+Clinical+Outcome+and+Disease+Progression+in+Simian+Immunodeficiency+Virus-Infected+Rhesus+Macaques.">TRIM5&#945; Restriction Affects Clinical Outcome and Disease Progression in Simian Immunodeficiency Virus-Infected Rhesus Macaques.</a> Journal of Virology. 89 (4), 2233 (2015).</li></ol>

وقد تم تحقيق تقدم هام في تطوير سلالات الماوس نقص المناعة لأنسنه ، مع عدد من الخيارات المختلفة التي يمكن استخدامها وفقا للاهتمام البحوث1. المنصوص عليها هنا هو بروتوكول عام لإضفاء الطابع الإنساني علي NS γ-سلسلهخاليه من الفئران وسلالات مماثله وراثيا لاستخدامها في ثلاثه نما...

وتستند هذه الفئران علي السكري غير البدناء (إيماءه) الخلفية ، مع طفرة scid والطفرة المستهدفة في مستقبل il-2 γ-سلسله الموضع (المشتركة γ سلسله ل il-2 ، آيل-4 ، آيل-7 ، آيل-9 ، آيل-15 ، وآيل-21) ، التي تحفز علي ضعف شديد في تطوير الماوس T-، B-، والطبيعية القاتل (NK) الخلايا1. التالي ، فانها تدعم الانسجه البشرية ، والCD34 البشرية + الخلايا الجذعية التي تكون الدم (hscs) ، والإنسان الطرفية خلايا أحاديه النوى (pbmcs)3،4،5. الاضافه إلى ذلك ، فان التعبير المعدل وراثيا لعوامل الدم البشرية ، مثل عامل الخلايا الجذعية ، والحبيبية/الضامة-عامل تحفيز المستعمرات (GM-السائل الدماغي الشوكي) ، و IL-3 يعزز التطعيم من السكان النخاعي البشري6،7،8.
بالنسبة للدراسات المتعلقة بفيروس نقص المناعة البشرية ، تم وصف عده نماذج من الماوس γ-سلسلهفارغه ، والتي تختلف في سلاله الماوس ، ونوع من خلايا الإنسان المستخدمة ، ونوع من الانسجه للانغراف ، واصل الخلايا (اي ، صحية مقابل. المتبرع المصاب بالفيروس)9،10. سلاله الأصلي ، ومع ذلك ، يستخدم علي نطاق واسع نظرا للمستويات العالية من الخلايا البشرية النسخ المتماثل والفيروسية بعد العدوى مع سلاله الفيروس المرجعي11،12،13. سلالات الماوس المناعية مماثله مع التعبير المحورة وراثيا من العوامل التي تكون الدم الإنسان (علي سبيل المثال ، شراب-exl أو SGM3) أو مع يزرع من الكبد البشري وانسجه الغدة الصعتريه (الفئران نخاع العظم-الكبد-الغدة الصعتريه) مفيده لتقييم دور السكان النخاعي في الاستجابة المناعية المضادة للفيروس ، والآثار المترتبة علي الفيروس علي هذه الانسجه ، ومشاركتها كخزانات الفيروسية14،15. وعلاوة علي ذلك ، يمكن استخدام بعض السلالات مع التعبير المحور وراثيا من جزيئات الكريات البيضاء البشرية (هلا) ، فضلا عن الفئران ، لدراسة استجابه الخلايا التائية للعدوى بفيروس نقص المناعة16،17.
بشكل عام ، في هذه الفئران ، والانسنه يعتمد علي الأصل الخلوية ، والطريق التسليم (داخل الكبد ، في الوريد ، الحقن الوريدي ، اينترارداك) والفار العمر في وقت اينغراتمال18،19،20. وفيما يتعلق أصل الخلية ، CD34الإنسان + HSC المستمدة من دم الحبل الشوكي ، كبد الجنين ، أو الدم الطرفية المعباه يمكن حقنها في حديثي الولادة أو الفئران الشباب3،21. الاضافه إلى ذلك ، الكبار γ-سلسله الفئرانالفارغة يمكن أنسنه بواسطة حقن pbmc (هنا ، يشار اليه باسم الفئرانالخالية من السلسلة γ-pbl-NS) ، مما يسمح للدوران الزمني لهذه الخلايا في الدم ، والاجهزه اللمفاوية الثانوية ، والانسجه الملتهبة22،23،24.
وصفت هنا هو بروتوكول مفصل لإنشاء huNS γ سلسلهخاليه من نماذج الماوس لدراسة العدوى بفيروس نقص المناعة الذاتي. الأول هو النموذج المزمن ، حيث يتم حقن الإنسانCD34 + hscs المستمدة من دم الحبل الشوكي من متبرع صحي في الفئران حديثي الولادة ، تليها العدوى مع سلاله الفيروس المرجعي بعد 14 أسبوعا من أعاده تشكيل جهاز المناعة البشرية. هذا النموذج يسمح رصد الفئران لمده تصل إلى ~ 36 أسابيع بعد العدوى. النموذج الثاني هو نموذج حاد ، والتي يتم حقن Pbmmms من متبرع صحي في الكبار NS γ-سلسله الفئرانفارغه ، تليها العدوى مع سلاله فيروس نقص المناعة البشرية المرجعية بعد 3 أسابيع من الإنسان T-خليه التوسع في الماوس. وأخيرا ، فان النموذج الثالث هو نموذج أعاده التنشيط ، الذي يستمد منه المانحون المصابون بفيروس نقص المناعة المكتسب في اطار العلاج المضاد للفيروسات العكوسه (ART) في الفئران البالغة الγهالخالية من الإيدز. في هذه الحالة ، بيئة خاليه من المخدرات يسمح لأعاده تنشيط الفيروسية وزيادة في الحمل الفيروسي. النموذجين الأخير تسمح الرصد لمده تصل إلى ~ 9 أسابيع بعد العملية.
عموما ، هذه النماذج الثلاثة هي مفيده للدراسات الفيروسية ، والدراسات قبل السريرية من الادويه الجديدة ، وتقييم اثار العدوى بفيروس نقص المناعة الذاتي علي الاستجابة المناعية العالمية. ومن المهم أيضا النظر في ان استخدام الفئران الانسانيه المصابة بفيروس نقص المناعة الذاتية يتطلب مراجعه وموافقه من قبل لجنه السلامة المؤسسية للسلامة البيولوجية وكذلك من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الماشية (IACUC) قبل اي تجربه. وهذا يضمن ان تتبع الدراسة جميع الانظمه المؤسسية الداخلية والخارجية لاستخدام المواد البيولوجية الخطرة والمناولة الانسانيه للحيوانات التجريبية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0. 5 ml Microcentrifuge tubes</td>
			<td>Neptune</td>
			<td>3735.S.X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1. 5 ml Microcentrifuge tubes</td>
			<td>Neptune</td>
			<td>3745.S.X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml conical tubes</td>
			<td>Stellar scientific</td>
			<td>T15-600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml conical tubes</td>
			<td>Stellar scientific</td>
			<td>T50-600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK lysis buffer</td>
			<td>Quality biological</td>
			<td>118-156-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pads</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>06-669-62</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD3 clone UCHT1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>300439</td>
			<td>APC conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD4 clone OKT4</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>317420</td>
			<td>AF488 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD45 clone 2D1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>368522</td>
			<td>BV421 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD8 clone SK1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>344710</td>
			<td>PerCP-Cy5.5 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosafaty cabinet level 2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>If posible connected to an exauste chimeny when handling Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonnet</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-900</td>
			<td>Single use cap for basic protection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cavicide</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>13-1000</td>
			<td>Surface desinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD34+ cells</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>2C-101</td>
			<td>As many vials available from a single donor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>65-6KR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear jar</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>77977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton gauze pad</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>22-415-468</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable lab coats</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>19-472-422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA micro tubes</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>450480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Face Mask</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-897</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS lysing solution</td>
			<td>BD</td>
			<td>340202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS premium HI</td>
			<td>Atlanta biologicals</td>
			<td>S1115OH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll</td>
			<td>GE health one</td>
			<td>17-1440-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>We used FACS Aria II</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometry tubes</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352054</td>
			<td>5 ml polystyrene and round bottom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HIV BaL</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Prepared in our uQUANT core facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human PBMCs</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HIV positive and negative volunteers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared warming pad</td>
			<td>Venet scientific</td>
			<td>DCT-25</td>
			<td>Temporary therapeutic warming pad for small animals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isentress (Raltegravir)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>NSC 0006-0227061</td>
			<td>Antiretroviral medication to treat human immunodeficiency virus (HIV)-Integrase inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mark I irradiator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Equipment belonging to university of Maryland</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse ear tags</td>
			<td>National Band &#38; Tag company</td>
			<td>1005-1L1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Natelson blood collection tubes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>02-668-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOG-EXL</td>
			<td>Taconic</td>
			<td>HSCFTL-13395-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG mice</td>
			<td>Jackson</td>
			<td>5557</td>
			<td>Time pregnant females for CD34 engraftment and Juveniles for PBMCs engraftment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG-SGM3</td>
			<td>Jackson</td>
			<td>13062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde 16%</td>
			<td>Electron microscopy sciences</td>
			<td>15710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 1X pH 7.4</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>100-10-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>08-757-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quantistudio qPCR machine</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>QS3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent reservoirs</td>
			<td>Costar</td>
			<td>4870</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI media 1640 1X</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11875-093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shoe covers</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-911</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile disposable Gloves</td>
			<td>Microflex</td>
			<td>SUF-524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript II First-Strand Synthesis SuperMix</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10080-400</td>
			<td>cDNA synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 28-G x 1/2</td>
			<td>BD</td>
			<td>329-461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 29-G x 1/2</td>
			<td>BD</td>
			<td>324-702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Truvada (Emtricitabine and Tenofovir</td>
			<td>Gilead</td>
			<td>NDC 61958-0701-1</td>
			<td>Antiretroviral medication to treat human immunodeficiency virus (HIV)-Nicleoside analog-transcriptase inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8154</td>
			<td>Cell count and viability</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vick Vaporub</td>
			<td>School health</td>
			<td>43214</td>
			<td>Ointment based on menthol and eucalyptus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water molecular biology grade</td>
			<td>Quality biological</td>
			<td>351-029-131</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic, acute, and reactivated hiv infection in humanized immunodeficient mouse models

أنسنه إيماءه/SCID/آيل-2 مستقبلات γ-سلسله الفئرانفارغه تلخيص بعض ملامح المناعة البشرية ، والتي يمكن استغلالها في البحوث الاساسيه وما قبل السريرية علي الامراض المعدية. وصفت هنا ثلاثه نماذج من الفئران المناعية الانسانيه لدراسة ديناميات العدوى بفيروس نقص المناعة التي. ويستند الأول علي حقن داخل الكبد منCD34 + الخلايا الجذعية للدم في الفئران حديثي الولادة ، والذي يسمح لأعاده تشكيل العديد من الدم والخلايا اللمفاوية الانسجه المحصورة ، تليها العدوى مع سلاله الفيروس المرجعي. هذا النموذج يسمح رصد لمده تصل إلى 36 أسابيع بعد العدوى ، التالي يسمي النموذج المزمن. ويشار إلى النموذجين الثاني والثالث باسم النماذج الحاده وأعاده التنشيط ، حيث يتم حقن الخلايا أحاديه النواة في الدم المحيطيه داخل الفئران البالغة. وفي النموذج الحاد ، يتم تطويق الخلايا من متبرع صحي من خلال الطريق داخل الصفاق ، تليها العدوى بسلاله الفيروس المرجعية. وأخيرا ، في نموذج أعاده التنشيط ، يتم التعاطي مع خلايا من متبرع مصاب بفيروس نقص المناعة التي تخضع للعلاج المضاد للفيروسات الرجعية عبر الطريق داخل الصفاق. في هذه الحالة ، بيئة خاليه من المخدرات في الماوس يسمح لأعاده تنشيط الفيروس وزيادة في الحمل الفيروسي. وتصف البروتوكولات المقدمة هنا النهج التجريبي التقليدي لنماذج الماوس الانسانيه وغير المناعية للاصابه بفيروس نقص المناعة الفيروس.

كما هو موضح أعلاه ، في 14 أسبوعا بعد حقن HSC (نموذج المزمن) أو في 3 أسابيع حقن بعد PBMC (نماذج الحاده وأعاده التنشيط) ، ونزفت الفئران للكشف عن مستوي الخلايا البشرية التي يتم الكشف عنها عن طريق تدفق الخلوية. ممثل استراتيجية لتقييم 1) CD45الإنسان + أعاده تكوين الخلايا و 2) وترد النسبة المئوي?...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models at JoVE.com

Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models

وفيما يلي ثلاثه نهج تجريبية لدراسة ديناميات الاصابه بفيروس نقص المناعة التي تصيب الفئران الانسانيه. ويسمح الأول بدراسة احداث العدوى المزمنة ، في حين يسمح الأخيران بدراسة الاحداث الحاده بعد العدوى الاوليه أو أعاده التنشيط الفيروسي.

عدوي فيروس نقص المناعة المزمنة والحاده والمعاد تنشيطها في نماذج الماوس المناعية الانسانيه

Humanized NOD/SCID/IL-2 receptor &#947;-chainnull mice recapitulate some features of human immunity, which can be exploited in basic and pre-clinical ...

يصف هذا الإجراء ثلاثة نماذج من الفئران المناعية الأنسمنة لدراسة ديناميات العدوى بفيروس نقص المناعة البشرية. NSG الفئران أنساء يلخص ملامح المناعة البشرية. في هذه الحالة، السماح بدراسة الإصابة المزمنة والحادة، وإعادة تنشيط الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في البيئات السابقة السريرية.إثبات عملية إعداد الخلية ستكون ساندرا مدينا مورينو، مشرفة أبحاث مختبرية من مجموعتنا. عند تنفيذ هذا الإجراء، دائما استخدام معدات الحماية الشخصية القابل للتصرف بما في ذلك الدعك المعقم، والقفازات، والأحذية المخصصة، وأغطية الأحذية، قناع، نظارات واقية، الشعر وأغطية اللحية، ومعطف مختبر معقمة. بالنسبة للنموذج المزمن، إعادة اعتماد مليون خلية CD34 + الخلايا الجذعية البشرية المجمدة في 10 ملليلتر من وسائل الإعلام RPMI 1640 مع 10٪ FBS تحت خزانة السلامة الحيوية المعتمدة والحفاظ على ظروف معقمة.استخدام 10 ميكرولترات من التعليق لحساب والتحقق من صلاحية الخلية من قبل استبعاد Trypan الأزرق تلطيخ في قياس الهيموسيت. ثم الطرد المركزي تعليق الخلية في 400 مرة ز لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. تجاهل فائقة و resuspend الخلايا في PBS 1X الباردة في التركيز المطلوب.إبقاء الخلايا على الجليد حتى الحقن. فرك الفراش نظيفة بين اليدين لإخفاء أي الروائح الأجنبية الأخرى على الجراء المتلقي. ثم ضع الجراء في طبق بيتري معقم مساحته 100 ملليمتر مربع مع كمية صغيرة من مواد الفراش من قفص المربي.وضع طبق بيتري في قفص نقل نظيفة ومن ثم وضع القفص في قفص نقل كاربوي لحماية الجراء من الضوء المباشر والضوضاء. تغطية قفص النقل مع لوحة غطاء لتجنب التعرض للحيوانات للبيئة أثناء العبور إلى غرفة التشعيع. بعد التخدير كما هو موضح في بروتوكول النص، والاستعداد لengraftment عن طريق حقن الكبد.لتقليل وقت ضبط النفس في الفأر، دع أحد المحققين يقوم بتحميل الحقنة مع تعليق الخلايا الجذعية، واجعل المحقق الثاني يمسك الجرو ويدير الحقنة. تحميل 50 ميكرولترات من CD34 + تعليق الخلايا الجذعية البشرية في حقنة مع إبرة المرفقة تحت مجلس الوزراء السلامة البيولوجية المعتمدة. تقييد الجراء مع الإبهام وأصابع المؤشر وتنظيف موقع الحقن مع 70٪ الكحول.استخدام زاوية إبرة ضحلة لتقديم 50 ميكرولترات من الخلايا مباشرة في الكبد حتى لا تخترق الكبد تماما. قبل الدفء الطبق باستخدام وسادة الاحترار الأشعة تحت الحمراء للقوارض في 20 درجة مئوية لضمان الجراء لن يكون أكثر من الدفء. ضع الجراء على طبق بيتري المغطى بالشاش العقيم لمدة دقيقة إلى خمس دقائق للسماح بالتعافي.مباشرة قبل العودة الجراء إلى والديهم، وتطبيق كمية صغيرة من المنثول والمرهم القائم على الأوكالبتوس باستخدام الإبهام وأصابع مؤشر على خطم كلا الوالدين لتجنب أكل لحوم البشر أو رفض الجراء. تحقق من الأقفاص اليومية ، وتبحث عن أي علامات الكسب غير المشروع مقابل المرض المضيف في الجراء مثل الجلد الجاف ، لا تغذية ، طفح جلدي ، أو ثعلبة. فَرّمَ الجراء في ثلاثة أسابيعِ من العمرِ ويَعْنيهم في أقفاصِ مختلفةِ.تحقق من الحفة في الدم المحيطي عن طريق عملية التنقية المتدفقة في عمر 14 أسبوعًا. وتظهر استراتيجية تمثيلية لـ "البوابات" لتقييم إعادة بناء الخلايا CD45+الخلية البشرية والنسبة المئوية للخلايا CD4+وC8+T. معدل نجاح engraftment هو ما بين 80٪ إلى 100٪ استخدام خلايا أحادية النوى الدم الطرفية البشرية المستمدة من متبرع سليم للنموذج الحاد أو من مريض مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية الذي كان تحت العلاج المضاد للفيروسات العكوسة لنموذج إعادة تنشيط.طبقة 15 ملليلتر من الدم كله في خمسة ملليلتر من كثافة معقم التدرج المتوسطة في أنبوب مخروطي 50 ملليلتر. أجهزة الطرد المركزي في 400 مرة ز لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة دون فواصل لتجنب معطف بافي من أن تصبح مختلطة مع متوسط الكثافة الانحدار. جمع بعناية جزء من الخلايا أحادية النوى بين متوسط الكثافة الانحدار وsupernatant.نقل معطف بافي إلى أنبوب جهاز طرد مركزي 15 ملليلتر تحتوي على 10 ملليلتر من 1X PBS. جهاز طرد مركزي في 300 مرة ز لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. تجاهل supernatant وإزالة خلايا الدم الحمراء المتبقية عن طريق التحلل مع خمسة ملليلتر من ACK تحلل العازلة المضافة إلى الخلايا بيليه.احتضان لمدة أربع دقائق في درجة حرارة الغرفة. بعد الطرد المركزي مرة أخرى كما كان من قبل، والتخلص من عظمى وrsuspend في 10 ملليلتر من 1X PBS أو RPMI 1640 المتوسطة. استخدام 10 ميكرولترات من تعليق الخلية لحساب الخلايا والتحقق من قابلية البقاء عن طريق استبعاد Trypan الأزرق تلطيخ في قياس الهيموسيت.عادة، يتم الحصول على واحد إلى اثنين من الخلايا مليون لكل ملليلتر من الدم مع أكثر من 95٪ قابلية البقاء. بعد الطرد المركزي كما كان من قبل، والتخلص من عظمى وضبط عدد الخلايا إلى التركيز المطلوب. تحميل 3.5 مليون خلية أحادية النوى الدم المحيطية في 200 ميكرولترات من 1X PBS في حقنة مع إبرة مرفقة تحت خزانة السلامة البيولوجية المعتمدة.إزالة الماوس من القفص وعقد عليه من قبل الذيل بحيث يمكن قبضة شبكة تطبيق الجر لطيف إلى الوراء. ثم ضع السبابة والإبهام على أكتاف الحيوان الاستيلاء على الجلد فضفاضة من الرقبة واستخدام الاصبع الأوسط لتحقيق الاستقرار في ظهره. حرك رأس الماوس للخلف بحيث يكون ظهره فوق رأسه.وهذا يسمح لل الحشو في تجويف البطن أن يكون المشردين إلى الوراء ويقلل من خطر ثقب الأعضاء الداخلية أثناء الحقن. تنظيف موقع الحقن مع 70٪ الكحول. اختراق الحقنة المعدة من خلال جدار البطن والطامح قبل حقن الخلايا.إذا تم استنشق أي مادة، إزالة الحقنة والتخلص منها. خلاف ذلك ، حقن الخلايا ببطء في تجويف intraperitoneal قبل إزالة الحقنة والتخلص منها. أعد الحيوان إلى قفصه وتحقق من النقاب في الدم المحيطي عن طريق قياس تدفق الاليات في ثلاثة أسابيع بعد الحقن.تحديد الفئران بواسطة وضع علامات الأذن. مراقبة الفئران المستخدمة في هذه التجارب عن كثب، مرتين في اليوم بعد كل إجراء لعلامات الضائقة السريرية. ثم انتقل إلى حقن فيروس نقص المناعة البشرية كما هو موضح في بروتوكول النص.بعد حقن فيروس نقص المناعة البشرية، هناك زيادة سريعة في الحمل الفيروسي البلازما عادة ما يكون يمكن الكشف عنها بعد أسبوعين إلى ثلاثة أسابيع بعد العدوى في كل من النماذج المزمنة والحادية مع الحركية مماثلة في نموذج إعادة التنشيط. وتتزامن الزيادة في الحمل الفيروسي مع انخفاض نسبة CD4:CD8. لا يتم ملاحظة هذه التغييرات في أجهزة الماوس التحكم.وتجدر الإشارة إلى أنه في نموذج الماوس البالغ من نوع PBMC NSG، لوحظ انعكاس أولي لنسبة CD4:CD8 وإعادة تشكيله على طول وقت الرصد. عندما يتم إعطاء العلاج المضاد للفيروسات العكوسة للفئران المصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، حدث قمع الحمل الفيروسي وكذلك الانتعاش في نسبة CD4:CD8 كما هو متوقع الوصول إلى مستويات مماثلة لتلك الموجودة في الضوابط غير المصابة. عادة، بعد أسبوعين إلى ثلاثة أسابيع من العلاج، لوحظ انخفاض في الحمل الفيروسي وزيادة في نسبة CD4:CD8 في النماذج المزمنة والحادة، وإعادة التنشيط.استخدم جرعة التشعيع الموصى بها لتجنب الجرعة الزائدة القاتلة أو رفض الخلايا المزروعة. لا تخترق تماما الكبد أثناء الحقن واستخدام الفراش لإخفاء الروائح التي سوف ترى السد على أنها أجنبية. وتسمح هذه النماذج الثلاثة باختبار المركبات المضادة للفيروسات، أو الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية أو غيرها من المواد البيولوجية التي تؤثر على النسخ الفيروسي.وبالإضافة إلى ذلك، فإنها تسمح بإجراء تجارب نقل تكيفية للعلاج المناعي لفيروس نقص المناعة البشرية. يمكن إعادة تشكيل الفئران البشرية NSG جزئيًا أو كاملًا مع الخلايا البشرية للاستجابة لمسببات الأمراض أو الأدوية ، مما يحاكي تعقيد جهاز المناعة البشري. جميع التدابير البيولوجية الأساسية يجب أن تتبع بدقة منذ NSG يمكن أن تكون الفئران أنس ما هو عليه مع كل من مورين والمسببات البشرية، وخاصة في هذه الحالة التي تستخدم فيروس نقص المناعة البشرية التلاعب.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

الاستدلال الوراثي من HIV - 1 Tropism باستخدام السكان على أساس تسلسل V3

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

في الجسم الحي أسلوب التصوير لتميز الالتهاب الحاد والمزمن

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

على المدى الطويل المزمن<em&gt; الزائفة الزنجارية</em&gt; عدوى مجرى الهواء في الفئران

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

أنسنة نموذج الفأر لدراسة الالتهابات البكتيرية استهداف الأوعية الدموية الدقيقة

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

Rapid Screening of HIV Reverse Transcriptase and Integrase Inhibitors

الفحص السريع للفيروس نقص المناعة البشرية والناسخ العكسي مثبطات Integrase

Although a number of anti HIV drugs have been approved, there are still problems with toxicity and drug resistance. This demonstrates a need to identify ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

تحريض الفئران المعوية التهاب عن طريق نقل بالتبني من المستجيب CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; عالية</sup&gt; خلايا T في الفئران العوز المناعي

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Mouse Models Of Helicobacter Infection And Gastric Pathologies

Mouse Models Of Helicobacter Infection And Gastric Pathologies

نماذج الماوس الملوية العدوى وأمراض المعدة

Helicobacter pylori is a gastric pathogen that is present in half of the global population and is a significant cause of morbidity and mortality in ...

Humanized NOD/SCID/IL2r&#947;null (hu-NSG) Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

Humanized NOD/SCID/IL2rÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

أنسنة إيماءة/نظام/IL2rγفارغة الماوس (هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية) نموذج للنسخ المتماثل من فيروس نقص المناعة البشرية والدراسات الكمون

Ethical regulations and technical challenges for research in human pathology, immunology, and therapeutic development have placed small animal models in ...

CRISPR-Cas9-based Genome Engineering to Generate Jurkat Reporter Models for HIV-1 Infection with Selected Proviral Integration Sites

هندسة الجينوم كريسبر-Cas9-تعتمد لتوليد نماذج مراسل جوركات للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية-1 مع مواقع مختارة من التكامل بروفيرال

Human immunodeficiency virus (HIV) integrates its proviral DNA non-randomly into the host cell genome at recurrent sites and genomic hotspots. Here we ...

Establishment of the Dual Humanized TK-NOG Mouse Model for HIV-associated Liver Pathogenesis

إنشاء نموذج الماوس ثنائي الأنسنة TK-NOG لمسببات أمراض الكبد المرتبطة بفيروس نقص المناعة البشرية

Despite the increased life expectancy of patients infected with human immunodeficiency virus-1 (HIV-1), liver disease has emerged as a common cause of ...