Name: chronic, acute, and reactivated hiv infection in humanized immunodeficient mouse models
Uploaded: 2019-12-03T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door interne fondsen van de IHV Clinical Division aan JCZ.

In dit werk werden alle dierenverzorging en-procedures uitgevoerd volgens de protocollen die werden beoordeeld en goedgekeurd door het institutioneel Dierenzorg-en gebruiks Comité (IACUC) aan de Universiteit van Maryland School of Medicine (protocol nummers 1018017, 1018018 en 0318009).
1. Human CD34+ HSC engraftment van pasgeboren muizen
<ol><li>Gebruik altijd wegwerp persoonlijke beschermingsmiddelen (PBM), waaronder steriele scrubs, handschoenen, speciale schoenen, schoen hoez...

<ol>
	<li>Shultz, L. D., Ishikawa, F., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+in+translational+biomedical+research.">Humanized mice in translational biomedical research.</a> Nature Reviews Immunology. 7, 118-130 (2007).</li><li>Koboziev, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+humanized+mice+to+study+the+pathogenesis+of+autoimmune+and+inflammatory+diseases.">Use of humanized mice to study the pathogenesis of autoimmune and inflammatory diseases.</a> Inflammatory Bowel Diseases. 21 (7), 1652-1673 (2015).</li><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID/&#947;cnull+mouse:+An+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells.">NOD/SCID/&#947;cnull mouse: An excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li><li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD/SCID/IL2+receptor+{gamma}+chain(null)+mice.">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li><li>Kim, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Mouse+Model+for+the+Study+of+Human+Immunodeficiency+Virus.">A Simple Mouse Model for the Study of Human Immunodeficiency Virus.</a> AIDS research and human retroviruses. 32 (2), 194-202 (2016).</li><li>Wunderlich, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AML+xenograft+efficiency+is+significantly+improved+in+NOD/SCID-IL2RG+mice+constitutively+expressing+human+SCF,+GM-CSF+and+IL-3.">AML xenograft efficiency is significantly improved in NOD/SCID-IL2RG mice constitutively expressing human SCF, GM-CSF and IL-3.</a> Leukemia. 24 (10), 1785-1788 (2010).</li><li>Billerbeck, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+human+CD4+FoxP3++regulatory+T+cells+in+human+stem+cell+factor-,+granulocyte-macrophage+colony-stimulating+factor-,+and+interleukin-3-expressing+NOD-SCID+IL2R&#947;null+humanized+mice.">Development of human CD4+FoxP3+ regulatory T cells in human stem cell factor-, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-, and interleukin-3-expressing NOD-SCID IL2R&#947;null humanized mice.</a> Blood. 117 (11), 3076-3086 (2011).</li><li>Coughlan, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloid+Engraftment+in+Humanized+Mice:+Impact+of+Granulocyte-Colony+Stimulating+Factor+Treatment+and+Transgenic+Mouse+Strain.">Myeloid Engraftment in Humanized Mice: Impact of Granulocyte-Colony Stimulating Factor Treatment and Transgenic Mouse Strain.</a> Stem cells and development. 25 (7), 530-541 (2016).</li><li>Kumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+Cell-Specific+siRNA+Delivery+Suppresses+HIV-1+Infection+in+Humanized+Mice.">T Cell-Specific siRNA Delivery Suppresses HIV-1 Infection in Humanized Mice.</a> Cell. 134 (4), 577-586 (2008).</li><li>Victor Garcia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+for+HIV+and+AIDS+research.">Humanized mice for HIV and AIDS research.</a> Current Opinion in Virology. 19, 56-64 (2016).</li><li>Ara&#237;nga, M., Su, H., Poluektova, L. Y., Gorantla, S., Gendelman, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+cellular+and+tissue+replication+patterns+in+infected+humanized+mice.">HIV-1 cellular and tissue replication patterns in infected humanized mice.</a> Scientific Reports. 6, 1-12 (2016).</li><li>Satheesan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+replication+and+latency+in+a+humanized+NSG+mouse+model+during+suppressive+oral+combinational+ART.">HIV replication and latency in a humanized NSG mouse model during suppressive oral combinational ART.</a> Journal of Virology. 92 (7), 2118 (2018).</li><li>Medina-Moreno, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+of+CDK9+with+indirubin+3&#8217;-monoxime+safely+and+durably+reduces+HIV+viremia+in+chronically+infected+humanized+mice.">Targeting of CDK9 with indirubin 3&#8217;-monoxime safely and durably reduces HIV viremia in chronically infected humanized mice.</a> PLoS ONE. 12 (8), 1-13 (2017).</li><li>Honeycutt, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+sustain+HIV+replication+in+vivo+independently+of+T+cells.">Macrophages sustain HIV replication in vivo independently of T cells.</a> The Journal of Clinical Investigation. 126 (4), 1353-1366 (2016).</li><li>Perdomo-Celis, F., Medina-Moreno, S., Davis, H., Bryant, J., Zapata, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+Replication+in+Humanized+IL-3/GM-CSF-Transgenic+NOG+Mice.">HIV Replication in Humanized IL-3/GM-CSF-Transgenic NOG Mice.</a> Pathogens. 8 (33), 1-16 (2019).</li><li>Akkina, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvements+and+Limitations+of+Humanized+Mouse+Models+for+HIV+Research:+NIH/NIAID+"Meet+the+Experts"+2015+Workshop+Summary.">Improvements and Limitations of Humanized Mouse Models for HIV Research: NIH/NIAID "Meet the Experts" 2015 Workshop Summary.</a> AIDS Research and Human Retroviruses. 32 (2), 109-119 (2015).</li><li>Dudek, T. E., Allen, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-Specific+CD8++T-Cell+Immunity+in+Humanized+Bone+Marrow-Liver-Thymus+Mice.">HIV-Specific CD8+ T-Cell Immunity in Humanized Bone Marrow-Liver-Thymus Mice.</a> The Journal of Infectious Diseases. 208, 150-154 (2013).</li><li>Skelton, J. K., Ortega-Prieto, A. M., Dorner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Hitchhiker's+guide+to+humanized+mice:+new+pathways+to+studying+viral+infections.">A Hitchhiker's guide to humanized mice: new pathways to studying viral infections.</a> Immunology. 154, 50-61 (2018).</li><li>Pearson, T., Greiner, D. L., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+"humanized"+mice+to+study+human+immunity.">Creation of "humanized" mice to study human immunity.</a> Current Protocols in Immunology. , (2008).</li><li>Hasgur, S., Aryee, K. E., Shultz, L. D., Greiner, D. L., Brehm, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+Immunodeficient+Mice+Bearing+Human+Immune+Systems+by+the+Engraftment+of+Hematopoietic+Stem+Cells.">Generation of Immunodeficient Mice Bearing Human Immune Systems by the Engraftment of Hematopoietic Stem Cells.</a> Methods in molecular biology. 1438, 67-78 (2016).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD/LtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells.">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> Journal of Immunology. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li><li>King, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+Hu-PBL+model+for+the+study+of+human+islet+alloreactivity+based+on+NOD-scid+mice+bearing+a+targeted+mutation+in+the+IL-2+receptor+gamma+chain+gene.">A new Hu-PBL model for the study of human islet alloreactivity based on NOD-scid mice bearing a targeted mutation in the IL-2 receptor gamma chain gene.</a> Clinical Immunology. 126 (3), 303-314 (2008).</li><li>King, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+peripheral+blood+leucocyte+non-obese+diabetic-severe+combined+immunodeficiency+interleukin-2+receptor+gamma+chain+gene+mouse+model+of+xenogeneic+graft-versus-host-like+disease+and+the+role+of+host+major+histocompatibility+complex.">Human peripheral blood leucocyte non-obese diabetic-severe combined immunodeficiency interleukin-2 receptor gamma chain gene mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host major histocompatibility complex.</a> Clinical and Experimental Immunology. 157 (1), 104-118 (2009).</li><li>Covassin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+peripheral+blood+CD4+T+cell-engrafted+non-obese+diabetic-scid+IL2rgamma(null)+H2-Ab1+(tm1Gru)+Tg+(human+leucocyte+antigen+D-related+4)+mice:+a+mouse+model+of+human+allogeneic+graft-versus-host+disease.">Human peripheral blood CD4 T cell-engrafted non-obese diabetic-scid IL2rgamma(null) H2-Ab1 (tm1Gru) Tg (human leucocyte antigen D-related 4) mice: a mouse model of human allogeneic graft-versus-host disease.</a> Clinical and experimental immunology. 166 (2), 269-280 (2011).</li><li>Heredia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+of+mTOR+catalytic+site+inhibits+multiple+steps+of+the+HIV-1+lifecycle+and+suppresses+HIV-1+viremia+in+humanized+mice.">Targeting of mTOR catalytic site inhibits multiple steps of the HIV-1 lifecycle and suppresses HIV-1 viremia in humanized mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (30), 9412-9417 (2015).</li><li>Nair, A., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human.">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> Journal of Basic and Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li><li>Miller, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+parameters+that+affect+human+hematopoietic+cell+outputs+in+mutant+c-kit-immunodeficient+mice.">Analysis of parameters that affect human hematopoietic cell outputs in mutant c-kit-immunodeficient mice.</a> Experimental Hematology. 48, 41-49 (2017).</li><li>Murphy, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+T+cell+differentiation+and+lymphomagenesis+in+the+thymus+of+mice+with+severe+combined+immune+deficiency+(SCID).">Induction of T cell differentiation and lymphomagenesis in the thymus of mice with severe combined immune deficiency (SCID).</a> Journal of Immunology. 153 (3), 1004-1014 (1994).</li><li>Poluektova, L. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+Mice+as+Models+for+Human+Disease.">Humanized Mice as Models for Human Disease.</a> Humanized Mice for HIV Research. , 15-24 (2015).</li><li>Nakata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potent+anti-R5+human+immunodeficiency+virus+type+1+effects+of+a+CCR5+antagonist,+AK602/ONO4128/GW873140,+in+a+novel+human+peripheral+blood+mononuclear+cell+nonobese+diabetic-SCID,+interleukin-2+receptor+gamma-chain-knocked-out+AIDS+mouse+model.">Potent anti-R5 human immunodeficiency virus type 1 effects of a CCR5 antagonist, AK602/ONO4128/GW873140, in a novel human peripheral blood mononuclear cell nonobese diabetic-SCID, interleukin-2 receptor gamma-chain-knocked-out AIDS mouse model.</a> Journal of Virology. 79 (4), 2087-2096 (2005).</li><li>Terahara, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+Reporter+Signals,+EGFP,+and+DsRed,+Encoded+in+HIV-1+Facilitate+the+Detection+of+Productively+Infected+Cells+and+Cell-Associated+Viral+Replication+Levels.">Fluorescent Reporter Signals, EGFP, and DsRed, Encoded in HIV-1 Facilitate the Detection of Productively Infected Cells and Cell-Associated Viral Replication Levels.</a> Frontiers in Microbiology. 2, 280 (2012).</li><li>Nicolini, F. E., Cashman, J. D., Hogge, D. E., Humphries, R. K., Eaves, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID+mice+engineered+to+express+human+IL-3,+GM-CSF+and+Steel+factor+constitutively+mobilize+engrafted+human+progenitors+and+compromise+human+stem+cell+regeneration.">NOD/SCID mice engineered to express human IL-3, GM-CSF and Steel factor constitutively mobilize engrafted human progenitors and compromise human stem cell regeneration.</a> Leukemia. 18 (2), 341-347 (2004).</li><li>Cyster, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicular+stromal+cells+and+lymphocyte+homing+to+follicles.">Follicular stromal cells and lymphocyte homing to follicles.</a> Immunological Reviews. 176, 181-193 (2000).</li><li>Seung, E., Tager, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humoral+Immunity+in+Humanized+Mice:+A+Work+in+Progress.">Humoral Immunity in Humanized Mice: A Work in Progress.</a> Journal of Infectious Diseases. 208, 155-159 (2013).</li><li>Wahl, A., Victor Garcia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+BLT+humanized+mice+to+investigate+the+immune+reconstitution+of+the+gastrointestinal+tract.">The use of BLT humanized mice to investigate the immune reconstitution of the gastrointestinal tract.</a> Journal of Immunological Methods. 410, 28-33 (2014).</li><li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+human+humoral+immune+responses+in+a+novel+HLA-DR-expressing+transgenic+NOD/Shi-scid/&#947;c+null+mouse.">Induction of human humoral immune responses in a novel HLA-DR-expressing transgenic NOD/Shi-scid/&#947;c null mouse.</a> International Immunology. 24 (4), 243-252 (2012).</li><li>Ali, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenogeneic+Graft-versus-Host-Disease+in+NOD-scid+IL-2R&#947;null+Mice+Display+a+T-Effector+Memory+Phenotype.">Xenogeneic Graft-versus-Host-Disease in NOD-scid IL-2R&#947;null Mice Display a T-Effector Memory Phenotype.</a> PLoS ONE. 7 (8), 1-10 (2012).</li><li>Brehm, M. A., Wiles, M. V., Greiner, D. L., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+improved+humanized+mouse+models+for+human+infectious+diseases.">Generation of improved humanized mouse models for human infectious diseases.</a> Journal of Immunological Methods. 410, 3-17 (2014).</li><li>Hakre, S., Chavez, L., Shirakawa, K., Verdin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+latency:+experimental+systems+and+molecular+models.">HIV latency: experimental systems and molecular models.</a> FEMS Microbiology Reviews. 36 (3), 706-716 (2012).</li><li>Wu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRIM5&#945;+Restriction+Affects+Clinical+Outcome+and+Disease+Progression+in+Simian+Immunodeficiency+Virus-Infected+Rhesus+Macaques.">TRIM5&#945; Restriction Affects Clinical Outcome and Disease Progression in Simian Immunodeficiency Virus-Infected Rhesus Macaques.</a> Journal of Virology. 89 (4), 2233 (2015).</li></ol>

Belangrijke vooruitgang is bereikt in de ontwikkeling van immunodeficiënte muizenstammen voor de humanisering, met een aantal verschillende opties die kunnen worden gebruikt in overeenstemming met het onderzoek belang1. Hier is een algemeen protocol voor de humanisering van NS γ-ketennulmuizen en genetisch vergelijkbare stammen die moeten worden gebruikt in drie verschillende modellen voor het BESTUDEREN van HIV-infecties. In de eerste experimentele benadering worden bestraalde pasgeb...

De gehumaniseerde NOD/SCID/Interleukine (IL)-2-receptor γ-ketenNull (hierna genoemd huns γ-ketenNull) muismodel is op grote schaal gebruikt voor het bestuderen van de pathogenese van infecties, auto-immuniteit, en Cancer, evenals voor pre-klinische studies van drugs en menselijke cel gebaseerde therapieën1,2. Deze muizen zijn gebaseerd op een niet-zwaarlijvige diabetische (NOD) achtergrond, met de scid -mutatie en gerichte mutatie bij de Il-2-receptor γ-Chain Locus (gemeenschappelijke γ-keten voor Il-2, Il-4, Il-7, Il-9, Il-15 en Il-21), die een ernstige aantasting veroorzaken bij de ontwikkeling van muis T-, B-en Natural Killer (NK)-cellen1. Zo ondersteunen ze het engraftment van menselijk weefsel, humane CD34+ hematopoietische stamcellen (hscs) en humane perifere bloed mononucleaire cellen (PBMCs)3,4,5. Bovendien bevordert transgene expressie van menselijke hematopoietische factoren, zoals stamcel factor (SCF), granulocyt/macrofaag kolonie-stimulerende factor (GM-CSF), en Il-3 de engraftment van menselijke myeloïde populaties6,7,8.
Voor HIV-onderzoeken zijn verschillende huNS γ-ChainNull -Muismodellen beschreven, die verschillen in de muis stam, het type gebruikte menselijke cellen, het type weefsels voor de engraftment en de oorsprong van cellen (d.w.z. gezond versus HIV-geïnfecteerde donor)9,10. De oorspronkelijke stam, echter, wordt veel gebruikt als gevolg van de hoge niveaus van menselijke cellen engraftment en virale replicatie na infectie met een verwijzing HIV-stam11,12,13. Soortgelijke immunodeficiënte muizenstammen met transgene expressie van menselijke hematopoietische factoren (bijv. nog-EXL of NSG-SGM3) of met implantaten van menselijke lever en Thymus weefsels (beenmerg-lever-Thymus [blt] muizen) zijn nuttig voor het evalueren van de rol van myeloïde populaties in de anti-HIV-immuunrespons, effecten van HIV op deze weefsels, en hun deelname als virale reservoirs14,15. Bovendien kunnen sommige stammen met een transgene expressie van humane leukocytenantigeen (HLA) moleculen, evenals blt-muizen, worden gebruikt voor het bestuderen van de T-cel respons op HIV-infectie16,17.
In het algemeen, in deze muizen, is de humanisatie afhankelijk van de cellulaire oorsprong, de toedieningsroute (intraperitoneale, Intrahepatische, intraveneuze, intracardiac) en muis leeftijd op het moment van engraftment18,19,20. Met betrekking tot de celoorsprong kan Human CD34+ HSC afgeleid van snoer bloed, foetale lever of gemobiliseerd perifeer bloed worden geïnjecteerd bij pasgeborenen of jonge muizen3,21. Bovendien kunnen volwassen γ-ketennulmuizen worden gehumaniseerd door de injectie van PBMC (hier, aangeduid als Hu-PBL-NS γ-ChainNull muizen), waardoor de temporale circulatie van deze cellen in het bloed, secundaire lymfoïde organen en ontstoken weefsels22,23,24.
Hier beschreven is een gedetailleerd protocol voor het opzetten van huNS γ-ChainNull Muismodellen voor de studie van HIV-infectie. De eerste is het chronische model, waarbij humane CD34+ hscs afgeleid van bloed van een gezonde donor worden geïnjecteerd in pasgeboren muizen, gevolgd door infectie met een referentie HIV-stam na 14 weken van het menselijk immuunsysteem reconstitutie. Dit model maakt het mogelijk om muizen te monitoren tot ~ 36 weken na infectie. Het tweede model is een acuut model, waarin PBMCs, afgeleid van een gezonde donor, worden geïnjecteerd in volwassen NS γ-ketennulmuizen , gevolgd door infectie met een referentie-HIV-stam na 3 weken menselijke T-cel expansie in de muis. Ten slotte is het derde model het reactiveringsmodel, waarin PBMCs, afkomstig van een HIV-geïnfecteerde donor onder suppressieve antiretrovirale therapie (kunst), wordt geïnjecteerd in volwassen NS γ-Chainnulmuizen . In dit geval, een drug-vrije omgeving zorgt voor virale reactivering en verhoging van de virale belasting. De twee laatste modellen maken bewaking mogelijk tot ~ 9 weken na engraftment.
Over het algemeen zijn deze drie modellen nuttig voor virologische studies, preklinische studies van nieuwe geneesmiddelen, en evaluatie van HIV-infectie effecten op de wereldwijde immuunrespons. Het is ook belangrijk om te bedenken dat het gebruik van met HIV geïnfecteerde gehumaniseerde muizen moet worden herzien en goedgekeurd door het Comité voor institutionele bioveiligheid (IBC) en door het Comité voor dierenverzorging en-gebruik (IACUC) voor een experiment. Dit zorgt ervoor dat de studie alle interne en externe institutionele voorschriften voor het gebruik van gevaarlijk biologisch materiaal en humane hantering van proefdieren volgt.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0. 5 ml Microcentrifuge tubes</td>
			<td>Neptune</td>
			<td>3735.S.X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1. 5 ml Microcentrifuge tubes</td>
			<td>Neptune</td>
			<td>3745.S.X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml conical tubes</td>
			<td>Stellar scientific</td>
			<td>T15-600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml conical tubes</td>
			<td>Stellar scientific</td>
			<td>T50-600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK lysis buffer</td>
			<td>Quality biological</td>
			<td>118-156-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pads</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>06-669-62</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD3 clone UCHT1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>300439</td>
			<td>APC conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD4 clone OKT4</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>317420</td>
			<td>AF488 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD45 clone 2D1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>368522</td>
			<td>BV421 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD8 clone SK1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>344710</td>
			<td>PerCP-Cy5.5 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosafaty cabinet level 2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>If posible connected to an exauste chimeny when handling Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonnet</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-900</td>
			<td>Single use cap for basic protection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cavicide</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>13-1000</td>
			<td>Surface desinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD34+ cells</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>2C-101</td>
			<td>As many vials available from a single donor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>65-6KR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear jar</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>77977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton gauze pad</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>22-415-468</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable lab coats</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>19-472-422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA micro tubes</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>450480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Face Mask</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-897</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS lysing solution</td>
			<td>BD</td>
			<td>340202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS premium HI</td>
			<td>Atlanta biologicals</td>
			<td>S1115OH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll</td>
			<td>GE health one</td>
			<td>17-1440-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>We used FACS Aria II</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometry tubes</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352054</td>
			<td>5 ml polystyrene and round bottom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HIV BaL</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Prepared in our uQUANT core facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human PBMCs</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HIV positive and negative volunteers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared warming pad</td>
			<td>Venet scientific</td>
			<td>DCT-25</td>
			<td>Temporary therapeutic warming pad for small animals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isentress (Raltegravir)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>NSC 0006-0227061</td>
			<td>Antiretroviral medication to treat human immunodeficiency virus (HIV)-Integrase inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mark I irradiator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Equipment belonging to university of Maryland</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse ear tags</td>
			<td>National Band &#38; Tag company</td>
			<td>1005-1L1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Natelson blood collection tubes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>02-668-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOG-EXL</td>
			<td>Taconic</td>
			<td>HSCFTL-13395-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG mice</td>
			<td>Jackson</td>
			<td>5557</td>
			<td>Time pregnant females for CD34 engraftment and Juveniles for PBMCs engraftment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG-SGM3</td>
			<td>Jackson</td>
			<td>13062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde 16%</td>
			<td>Electron microscopy sciences</td>
			<td>15710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 1X pH 7.4</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>100-10-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>08-757-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quantistudio qPCR machine</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>QS3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent reservoirs</td>
			<td>Costar</td>
			<td>4870</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI media 1640 1X</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11875-093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shoe covers</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-911</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile disposable Gloves</td>
			<td>Microflex</td>
			<td>SUF-524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript II First-Strand Synthesis SuperMix</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10080-400</td>
			<td>cDNA synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 28-G x 1/2</td>
			<td>BD</td>
			<td>329-461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 29-G x 1/2</td>
			<td>BD</td>
			<td>324-702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Truvada (Emtricitabine and Tenofovir</td>
			<td>Gilead</td>
			<td>NDC 61958-0701-1</td>
			<td>Antiretroviral medication to treat human immunodeficiency virus (HIV)-Nicleoside analog-transcriptase inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8154</td>
			<td>Cell count and viability</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vick Vaporub</td>
			<td>School health</td>
			<td>43214</td>
			<td>Ointment based on menthol and eucalyptus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water molecular biology grade</td>
			<td>Quality biological</td>
			<td>351-029-131</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic, acute, and reactivated hiv infection in humanized immunodeficient mouse models

Gehumaniseerd NOD/SCID/IL-2 receptor γ-ketenNull muizen recapituleren sommige kenmerken van de menselijke immuniteit, die kunnen worden misbruikt in basis-en preklinisch onderzoek naar besmettelijke ziekten. Hier beschreven zijn drie modellen van gehumaniseerd immunodeficiënte muizen voor het bestuderen van de dynamiek van HIV-infectie. De eerste is gebaseerd op de Intrahepatische injectie van CD34+ hematopoietische stamcellen in pasgeboren muizen, die de reconstitutie van verschillende bloed-en lymfoïde weefsel-besloten cellen mogelijk maakt, gevolgd door infectie met een referentie-HIV-stam. Dit model maakt monitoring mogelijk tot 36 weken na infectie en wordt daarom het chronische model genoemd. De tweede en derde modellen worden de acute en reactiverings modellen genoemd, waarin perifere bloed mononucleaire cellen intraperitoneaal worden geïnjecteerd bij volwassen muizen. In het acute model worden cellen van een gezonde donor geënt via de intraperitoneale route, gevolgd door een infectie met een referentie-HIV-stam. Tot slot worden in het reactiveringsmodel cellen van een HIV-geïnfecteerde donor onder antiretrovirale therapie via de intraperitoneale route geënt. In dit geval, een drug-vrije omgeving in de muis zorgt voor virus reactivering en een toename van de virale belasting. De protocollen die hier worden beschreven, beschrijven de conventionele experimentele aanpak voor gehumaniseerde, immunodeficiënte muizen modellen van HIV-infectie.

Zoals hierboven beschreven, na 14 weken na-HSC injectie (chronisch model) of na 3 weken na PBMC injectie (acute en reactivatie modellen), worden de muizen voor het screenen van het niveau van menselijke cellen engraftment door flow cytometrie. Een representatieve strategie voor de evaluatie van 1) humane CD45+ cellen reconstitutie en 2) percentage van de CD4+ -en CD8+ T-cellen wordt weergegeven in Figuur 1A. Meestal varieert het niveau van en...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models at JoVE.com

Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models

Hier beschreven zijn drie experimentele benaderingen voor het bestuderen van de dynamiek van HIV-infectie in gehumaniseerde muizen. De eerste maakt de studie van chronische infectie gebeurtenissen, terwijl de twee laatsten voor de studie van acute gebeurtenissen na primaire infectie of virale reactivatie.

Chronische, acute en Gereactiveerde HIV-infectie in gehumaniseerde Immunodeficiënte Muismodellen

Humanized NOD/SCID/IL-2 receptor &#947;-chainnull mice recapitulate some features of human immunity, which can be exploited in basic and pre-clinical ...

Deze procedure beschrijft drie modellen van gehumaniseerde immunodeficiënte muizen voor de studie van de dynamiek van HIV-infectie. NSG gehumaniseerde muizen recapituleert op kenmerken van menselijke immuniteit. In dit geval, waardoor de studie van chronische, acute en gereactiveerde HIV-infectie in pre-klinische omgevingen.Het aantonen van de celvoorbereidingsprocedure is Sandra Medina-Moreno, een laboratoriumonderzoeksbegeleider van onze groep. Gebruik bij het uitvoeren van deze procedure altijd persoonlijke wegwerpbeschermingsmiddelen, waaronder steriele scrubs, handschoenen, speciale schoenen, schoenhoezen, masker, bril, haar- en baardmutsen en een steriele labjas. Voor het chronische model, resuspend een miljoen bevroren CD34 + menselijke stamcellen in 10 milliliter RPMI 1640 media met 10%FBS onder een gecertificeerde bioveiligheidskast en handhaven steriele omstandigheden.Gebruik 10 microliter van de suspensie om de levensvatbaarheid van de cel te tellen en te controleren door Trypan Blue uitsluitingsvlekken in een hemocytometer. Centrifuge vervolgens de celsuspensie op 400 keer g gedurende 15 minuten bij kamertemperatuur. Gooi de supernatant weg en zet de cellen opnieuw op in koude 1X PBS bij de vereiste concentratie.Houd de cellen op ijs tot de injectie. Wrijf schoon beddengoed tussen de handen om andere vreemde geuren te maskeren op de ontvanger pups. Plaats vervolgens pups in een steriele petrischaal van 100 vierkante millimeter, samen met een kleine hoeveelheid strooisel uit de kooi van de fokker.Zet de Petri schotel in een schone transportkooi en plaats de kooi in een Carboy transportkooi om pups te beschermen tegen direct licht en lawaai. Bedek de transportkooi met een afdeksel om blootstelling van dieren aan het milieu tijdens het transport naar de bestralingsruimte te voorkomen. Na verdoving zoals beschreven in het tekstprotocol, bereid je voor op engraftment via leverinjectie.Om de tijd van muisbeveiliging te minimaliseren, laat een onderzoeker de spuit laden met de stamcelsuspensie en laat de tweede onderzoeker de pup vasthouden en de injectie toedienen. Laad 50 microliter van de CD34+human stamcelsuspensie in de spuit met een bijgevoegde naald onder de gecertificeerde bioveiligheidskast. Bedwing de pups met duim- en wijsvingers en maak de injectieplaats schoon met 70% alcohol.Gebruik een ondiepe naaldhoek om 50 microliter cellen rechtstreeks in de lever te leveren om de lever niet volledig te doorboren. Verwarm de schotel voor met behulp van een infrarood warming pad voor knaagdieren bij 20 graden Celsius om ervoor te zorgen dat de pups niet over opgewarmd zullen zijn. Leg de pups op de petrischaal bedekt met steriel gaas gedurende een tot vijf minuten om herstel mogelijk te maken.Onmiddellijk voordat de pups aan hun ouders, een kleine hoeveelheid menthol en eucalyptus-gebaseerde zalf met behulp van de duim en wijsvingers aan de snuit van beide ouders om kannibalisme of afwijzing van de pups te voorkomen. Controleer kooien elke dag, op zoek naar tekenen van graft versus gastheer ziekte bij de pups zoals droge huid, geen voeding, huiduitslag, of alopecia. Spenen de pups op drie weken oud en huis ze in verschillende kooien.Controleer de engraftment in het perifere bloed door flow cytometrie op 14 weken oud. Er wordt een representatieve gatingstrategie getoond voor de evaluatie van menselijke CD45+-celreconstructie en percentage CD4+- en CD8+T-cellen. Het slagingspercentage van engraftment is tussen 80%tot 100%Gebruik menselijke perifere bloed mononucleaire cellen afkomstig van een gezonde donor voor het acute model of van een HIV-geïnfecteerde patiënt die onder antiretrovirale therapie voor de reactivering model.Laag 15 milliliter vol bloed in vijf milliliter steriel dichtheidsgradiënt medium in een conische buis van 50 milliliter. Centrifuge op 400 keer g gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur zonder pauzes om te voorkomen dat de buffy jas wordt gemengd met de dichtheid gradiënt medium. Verzamel zorgvuldig de fractie van mononucleaire cellen tussen het dichtheidsgradiëntmedium en het supernatant.Breng de buffy jas naar een 15 milliliter centrifuge buis met 10 milliliter 1X PBS. Centrifuge op 300 keer g gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur. Gooi de supernatant weg en verwijder de resterende rode bloedcellen door te lyseren met vijf milliliter ACK lyse buffer toegevoegd aan de pelleted cellen.Vier minuten incubeer maken bij kamertemperatuur. Na het centrifugeren weer als voorheen, gooi de supernatant en resuspend in 10 milliliter van 1X PBS of RPMI 1640 medium. Gebruik 10 microliter van de celsuspensie om de cellen te tellen en controleer de levensvatbaarheid door Trypan Blue uitsluitingsvlekken in een hemocytometer.Typisch, een tot twee miljoen cellen worden verkregen voor elke een milliliter bloed met meer dan 95%levensvatbaarheid. Na centrifugatie zoals voorheen, gooi het supernatant weg en pas het celnummer aan de vereiste concentratie aan. Laad 3,5 miljoen perifere bloedmononucleaire cellen in 200 microliter van 1X PBS in een spuit met een bijgevoegde naald onder een gecertificeerde bioveiligheidskast.Haal de muis uit de kooi en houd deze bij de staart, zodat deze het gaas kan vasthouden door zachte tractie naar achteren toe te passen. Plaats vervolgens de wijsvinger en duim op de schouders van het dier grijpen de losse huid van de nek en met behulp van de middelvinger om zijn rug te stabiliseren. Schuif de muiskop naar achteren, zodat de rug boven zijn hoofd staat.Hierdoor kan de ingewanden in de buikholte naar achteren worden verplaatst en vermindert het risico op het doorboren van inwendige organen tijdens de injectie. Reinig de injectieplaats met 70% alcohol. Penetreer de voorbereide spuit door de buikwand en aspirate voordat het injecteren van de cellen.Als er materiaal wordt aangezogen, verwijder de spuit en gooi het weg. Anders, injecteer de cellen langzaam in de intraperitoneale holte voordat u de spuit verwijdert en weggooit. Breng het dier terug naar zijn kooi en controleer de engraftment in perifeer bloed door stromingscytometrie na drie weken na injectie.Identificeer muizen door oortagging. Observeer de muizen die in deze experimenten worden gebruikt, twee keer per dag na elke procedure voor klinische tekenen van nood. Ga dan verder met hiv-injectie zoals beschreven in het tekstprotocol.Na hiv-injectie is er een snelle toename van de virale plasmabelasting die meestal detecteerbaar is na twee tot drie weken na infectie in zowel de chronische als acute modellen met vergelijkbare kinetiek in het reactiveringsmodel. De toename van de virale belasting valt samen met een daling van de CD4:CD8-verhouding. Deze veranderingen worden niet waargenomen bij controlemuizen.Van belang, in de gehumaniseerde PBMC NSG volwassen muis model, een eerste inversie van de CD4:CD8 verhouding wordt waargenomen en gereconstrueerd langs de monitoring tijd. Wanneer antiretrovirale therapie wordt toegediend aan hiv-geïnfecteerde muizen, een onderdrukking van de virale belasting en herstel in de CD4:CD8-verhouding vond plaats zoals verwacht het bereiken van vergelijkbare niveaus als die in niet-geïnfecteerde controles. Typisch, na twee tot drie weken van de behandeling, een afname van de virale belasting en toename van de CD4:CD8 ratio wordt waargenomen in de chronische, acute, en reactivering modellen.Gebruik de aanbevolen bestralingsdosis om dodelijke overdosering of afstoting van getransplanteerde cellen te voorkomen. Niet volledig doorboren van de lever tijdens de injectie en gebruik beddengoed om geuren die de dam zal waarnemen als vreemd maskeren. Deze drie modellen maken het testen van antivirale verbindingen, anti-HIV antilichamen of andere biologische stoffen die virale replicatie beïnvloeden mogelijk.Daarnaast maken ze adaptieve overdrachtsexperimenten voor HIV-immunotherapie mogelijk. NSG gehumaniseerde muizen kunnen gedeeltelijk of volledig worden gereconstitueerd met menselijke cellen om te reageren op ziekteverwekkers of drugs, het nabootsen van de complexiteit van het menselijk immuunsysteem. Alle fundamentele biologische maatregelen moeten strikt worden gevolgd, aangezien NSG gehumaniseerde muizen kunnen worden besmet met zowel murine als menselijke ziekteverwekkers, met name in dit geval die hiv-virusmanipulatie gebruikt.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

Genotypische Inferentie van HIV-1 tropisme de populatie-gebaseerde Sequencing van V3

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo beeldvorming methode om acute en chronische ontsteking Onderscheid

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronische<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Luchtweginfectie in Muizen

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

Gehumaniseerd muismodel om te studeren Bacteriële infecties Targeting microvasculature

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

Rapid Screening of HIV Reverse Transcriptase and Integrase Inhibitors

Snelle screening van HIV reverse transcriptase en integrase-remmers

Although a number of anti HIV drugs have been approved, there are still problems with toxicity and drug resistance. This demonstrates a need to identify ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Inductie van Muriene darmontsteking door adoptieve overdracht van effector CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Hoog</sup&gt; T cellen in immunodeficiënte muizen

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Mouse Models Of Helicobacter Infection And Gastric Pathologies

Mouse Models Of Helicobacter Infection And Gastric Pathologies

Muismodellen van Helicobacter infectie en maag pathologieën

Helicobacter pylori is a gastric pathogen that is present in half of the global population and is a significant cause of morbidity and mortality in ...

Humanized NOD/SCID/IL2r&#947;null (hu-NSG) Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

Humanized NOD/SCID/IL2rÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

Gehumaniseerd knik/SCID/IL2rγnull (hu-NSG) muis Model voor HIV-replicatie en Latency Studies

Ethical regulations and technical challenges for research in human pathology, immunology, and therapeutic development have placed small animal models in ...

CRISPR-Cas9-based Genome Engineering to Generate Jurkat Reporter Models for HIV-1 Infection with Selected Proviral Integration Sites

CRISPR-Cas9-gebaseerde genoom Engineering voor het genereren van Jurkat verslaggever modellen voor HIV-1 infectie met geselecteerde proviraal integratie Sites

Human immunodeficiency virus (HIV) integrates its proviral DNA non-randomly into the host cell genome at recurrent sites and genomic hotspots. Here we ...

Establishment of the Dual Humanized TK-NOG Mouse Model for HIV-associated Liver Pathogenesis

Oprichting van de dubbele gehumaniseerde TK-nog muis model voor HIV-geassocieerde lever pathogenese

Despite the increased life expectancy of patients infected with human immunodeficiency virus-1 (HIV-1), liver disease has emerged as a common cause of ...