Name: chronic, acute, and reactivated hiv infection in humanized immunodeficient mouse models
Uploaded: 2019-12-03T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models at JoVE.com

Questo lavoro è stato supportato dai fondi interni della divisione clinica IHV a JC .

In questo lavoro, tutte le procedure e la cura degli animali sono state eseguite secondo protocolli esaminati e approvati dall'Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) presso la University of Maryland School of Medicine (numeri di protocollo 1018017, 1018018 e 0318009).
1. Human CD34- Innesto HSC di topi neonati
<ol><li>Utilizzare sempre attrezzature di protezione personale usa e getta (PPE), tra cui scrub sterili, guanti, scarpe dedicate, copriscarpe, maschera, occhial...

<ol>
	<li>Shultz, L. D., Ishikawa, F., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+in+translational+biomedical+research.">Humanized mice in translational biomedical research.</a> Nature Reviews Immunology. 7, 118-130 (2007).</li><li>Koboziev, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+humanized+mice+to+study+the+pathogenesis+of+autoimmune+and+inflammatory+diseases.">Use of humanized mice to study the pathogenesis of autoimmune and inflammatory diseases.</a> Inflammatory Bowel Diseases. 21 (7), 1652-1673 (2015).</li><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID/&#947;cnull+mouse:+An+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells.">NOD/SCID/&#947;cnull mouse: An excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li><li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD/SCID/IL2+receptor+{gamma}+chain(null)+mice.">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li><li>Kim, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Mouse+Model+for+the+Study+of+Human+Immunodeficiency+Virus.">A Simple Mouse Model for the Study of Human Immunodeficiency Virus.</a> AIDS research and human retroviruses. 32 (2), 194-202 (2016).</li><li>Wunderlich, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AML+xenograft+efficiency+is+significantly+improved+in+NOD/SCID-IL2RG+mice+constitutively+expressing+human+SCF,+GM-CSF+and+IL-3.">AML xenograft efficiency is significantly improved in NOD/SCID-IL2RG mice constitutively expressing human SCF, GM-CSF and IL-3.</a> Leukemia. 24 (10), 1785-1788 (2010).</li><li>Billerbeck, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+human+CD4+FoxP3++regulatory+T+cells+in+human+stem+cell+factor-,+granulocyte-macrophage+colony-stimulating+factor-,+and+interleukin-3-expressing+NOD-SCID+IL2R&#947;null+humanized+mice.">Development of human CD4+FoxP3+ regulatory T cells in human stem cell factor-, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-, and interleukin-3-expressing NOD-SCID IL2R&#947;null humanized mice.</a> Blood. 117 (11), 3076-3086 (2011).</li><li>Coughlan, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloid+Engraftment+in+Humanized+Mice:+Impact+of+Granulocyte-Colony+Stimulating+Factor+Treatment+and+Transgenic+Mouse+Strain.">Myeloid Engraftment in Humanized Mice: Impact of Granulocyte-Colony Stimulating Factor Treatment and Transgenic Mouse Strain.</a> Stem cells and development. 25 (7), 530-541 (2016).</li><li>Kumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+Cell-Specific+siRNA+Delivery+Suppresses+HIV-1+Infection+in+Humanized+Mice.">T Cell-Specific siRNA Delivery Suppresses HIV-1 Infection in Humanized Mice.</a> Cell. 134 (4), 577-586 (2008).</li><li>Victor Garcia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+for+HIV+and+AIDS+research.">Humanized mice for HIV and AIDS research.</a> Current Opinion in Virology. 19, 56-64 (2016).</li><li>Ara&#237;nga, M., Su, H., Poluektova, L. Y., Gorantla, S., Gendelman, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+cellular+and+tissue+replication+patterns+in+infected+humanized+mice.">HIV-1 cellular and tissue replication patterns in infected humanized mice.</a> Scientific Reports. 6, 1-12 (2016).</li><li>Satheesan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+replication+and+latency+in+a+humanized+NSG+mouse+model+during+suppressive+oral+combinational+ART.">HIV replication and latency in a humanized NSG mouse model during suppressive oral combinational ART.</a> Journal of Virology. 92 (7), 2118 (2018).</li><li>Medina-Moreno, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+of+CDK9+with+indirubin+3&#8217;-monoxime+safely+and+durably+reduces+HIV+viremia+in+chronically+infected+humanized+mice.">Targeting of CDK9 with indirubin 3&#8217;-monoxime safely and durably reduces HIV viremia in chronically infected humanized mice.</a> PLoS ONE. 12 (8), 1-13 (2017).</li><li>Honeycutt, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+sustain+HIV+replication+in+vivo+independently+of+T+cells.">Macrophages sustain HIV replication in vivo independently of T cells.</a> The Journal of Clinical Investigation. 126 (4), 1353-1366 (2016).</li><li>Perdomo-Celis, F., Medina-Moreno, S., Davis, H., Bryant, J., Zapata, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+Replication+in+Humanized+IL-3/GM-CSF-Transgenic+NOG+Mice.">HIV Replication in Humanized IL-3/GM-CSF-Transgenic NOG Mice.</a> Pathogens. 8 (33), 1-16 (2019).</li><li>Akkina, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvements+and+Limitations+of+Humanized+Mouse+Models+for+HIV+Research:+NIH/NIAID+"Meet+the+Experts"+2015+Workshop+Summary.">Improvements and Limitations of Humanized Mouse Models for HIV Research: NIH/NIAID "Meet the Experts" 2015 Workshop Summary.</a> AIDS Research and Human Retroviruses. 32 (2), 109-119 (2015).</li><li>Dudek, T. E., Allen, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-Specific+CD8++T-Cell+Immunity+in+Humanized+Bone+Marrow-Liver-Thymus+Mice.">HIV-Specific CD8+ T-Cell Immunity in Humanized Bone Marrow-Liver-Thymus Mice.</a> The Journal of Infectious Diseases. 208, 150-154 (2013).</li><li>Skelton, J. K., Ortega-Prieto, A. M., Dorner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Hitchhiker's+guide+to+humanized+mice:+new+pathways+to+studying+viral+infections.">A Hitchhiker's guide to humanized mice: new pathways to studying viral infections.</a> Immunology. 154, 50-61 (2018).</li><li>Pearson, T., Greiner, D. L., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+"humanized"+mice+to+study+human+immunity.">Creation of "humanized" mice to study human immunity.</a> Current Protocols in Immunology. , (2008).</li><li>Hasgur, S., Aryee, K. E., Shultz, L. D., Greiner, D. L., Brehm, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+Immunodeficient+Mice+Bearing+Human+Immune+Systems+by+the+Engraftment+of+Hematopoietic+Stem+Cells.">Generation of Immunodeficient Mice Bearing Human Immune Systems by the Engraftment of Hematopoietic Stem Cells.</a> Methods in molecular biology. 1438, 67-78 (2016).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD/LtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells.">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> Journal of Immunology. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li><li>King, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+Hu-PBL+model+for+the+study+of+human+islet+alloreactivity+based+on+NOD-scid+mice+bearing+a+targeted+mutation+in+the+IL-2+receptor+gamma+chain+gene.">A new Hu-PBL model for the study of human islet alloreactivity based on NOD-scid mice bearing a targeted mutation in the IL-2 receptor gamma chain gene.</a> Clinical Immunology. 126 (3), 303-314 (2008).</li><li>King, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+peripheral+blood+leucocyte+non-obese+diabetic-severe+combined+immunodeficiency+interleukin-2+receptor+gamma+chain+gene+mouse+model+of+xenogeneic+graft-versus-host-like+disease+and+the+role+of+host+major+histocompatibility+complex.">Human peripheral blood leucocyte non-obese diabetic-severe combined immunodeficiency interleukin-2 receptor gamma chain gene mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host major histocompatibility complex.</a> Clinical and Experimental Immunology. 157 (1), 104-118 (2009).</li><li>Covassin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+peripheral+blood+CD4+T+cell-engrafted+non-obese+diabetic-scid+IL2rgamma(null)+H2-Ab1+(tm1Gru)+Tg+(human+leucocyte+antigen+D-related+4)+mice:+a+mouse+model+of+human+allogeneic+graft-versus-host+disease.">Human peripheral blood CD4 T cell-engrafted non-obese diabetic-scid IL2rgamma(null) H2-Ab1 (tm1Gru) Tg (human leucocyte antigen D-related 4) mice: a mouse model of human allogeneic graft-versus-host disease.</a> Clinical and experimental immunology. 166 (2), 269-280 (2011).</li><li>Heredia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+of+mTOR+catalytic+site+inhibits+multiple+steps+of+the+HIV-1+lifecycle+and+suppresses+HIV-1+viremia+in+humanized+mice.">Targeting of mTOR catalytic site inhibits multiple steps of the HIV-1 lifecycle and suppresses HIV-1 viremia in humanized mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (30), 9412-9417 (2015).</li><li>Nair, A., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human.">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> Journal of Basic and Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li><li>Miller, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+parameters+that+affect+human+hematopoietic+cell+outputs+in+mutant+c-kit-immunodeficient+mice.">Analysis of parameters that affect human hematopoietic cell outputs in mutant c-kit-immunodeficient mice.</a> Experimental Hematology. 48, 41-49 (2017).</li><li>Murphy, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+T+cell+differentiation+and+lymphomagenesis+in+the+thymus+of+mice+with+severe+combined+immune+deficiency+(SCID).">Induction of T cell differentiation and lymphomagenesis in the thymus of mice with severe combined immune deficiency (SCID).</a> Journal of Immunology. 153 (3), 1004-1014 (1994).</li><li>Poluektova, L. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+Mice+as+Models+for+Human+Disease.">Humanized Mice as Models for Human Disease.</a> Humanized Mice for HIV Research. , 15-24 (2015).</li><li>Nakata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potent+anti-R5+human+immunodeficiency+virus+type+1+effects+of+a+CCR5+antagonist,+AK602/ONO4128/GW873140,+in+a+novel+human+peripheral+blood+mononuclear+cell+nonobese+diabetic-SCID,+interleukin-2+receptor+gamma-chain-knocked-out+AIDS+mouse+model.">Potent anti-R5 human immunodeficiency virus type 1 effects of a CCR5 antagonist, AK602/ONO4128/GW873140, in a novel human peripheral blood mononuclear cell nonobese diabetic-SCID, interleukin-2 receptor gamma-chain-knocked-out AIDS mouse model.</a> Journal of Virology. 79 (4), 2087-2096 (2005).</li><li>Terahara, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+Reporter+Signals,+EGFP,+and+DsRed,+Encoded+in+HIV-1+Facilitate+the+Detection+of+Productively+Infected+Cells+and+Cell-Associated+Viral+Replication+Levels.">Fluorescent Reporter Signals, EGFP, and DsRed, Encoded in HIV-1 Facilitate the Detection of Productively Infected Cells and Cell-Associated Viral Replication Levels.</a> Frontiers in Microbiology. 2, 280 (2012).</li><li>Nicolini, F. E., Cashman, J. D., Hogge, D. E., Humphries, R. K., Eaves, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID+mice+engineered+to+express+human+IL-3,+GM-CSF+and+Steel+factor+constitutively+mobilize+engrafted+human+progenitors+and+compromise+human+stem+cell+regeneration.">NOD/SCID mice engineered to express human IL-3, GM-CSF and Steel factor constitutively mobilize engrafted human progenitors and compromise human stem cell regeneration.</a> Leukemia. 18 (2), 341-347 (2004).</li><li>Cyster, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicular+stromal+cells+and+lymphocyte+homing+to+follicles.">Follicular stromal cells and lymphocyte homing to follicles.</a> Immunological Reviews. 176, 181-193 (2000).</li><li>Seung, E., Tager, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humoral+Immunity+in+Humanized+Mice:+A+Work+in+Progress.">Humoral Immunity in Humanized Mice: A Work in Progress.</a> Journal of Infectious Diseases. 208, 155-159 (2013).</li><li>Wahl, A., Victor Garcia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+BLT+humanized+mice+to+investigate+the+immune+reconstitution+of+the+gastrointestinal+tract.">The use of BLT humanized mice to investigate the immune reconstitution of the gastrointestinal tract.</a> Journal of Immunological Methods. 410, 28-33 (2014).</li><li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+human+humoral+immune+responses+in+a+novel+HLA-DR-expressing+transgenic+NOD/Shi-scid/&#947;c+null+mouse.">Induction of human humoral immune responses in a novel HLA-DR-expressing transgenic NOD/Shi-scid/&#947;c null mouse.</a> International Immunology. 24 (4), 243-252 (2012).</li><li>Ali, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenogeneic+Graft-versus-Host-Disease+in+NOD-scid+IL-2R&#947;null+Mice+Display+a+T-Effector+Memory+Phenotype.">Xenogeneic Graft-versus-Host-Disease in NOD-scid IL-2R&#947;null Mice Display a T-Effector Memory Phenotype.</a> PLoS ONE. 7 (8), 1-10 (2012).</li><li>Brehm, M. A., Wiles, M. V., Greiner, D. L., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+improved+humanized+mouse+models+for+human+infectious+diseases.">Generation of improved humanized mouse models for human infectious diseases.</a> Journal of Immunological Methods. 410, 3-17 (2014).</li><li>Hakre, S., Chavez, L., Shirakawa, K., Verdin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+latency:+experimental+systems+and+molecular+models.">HIV latency: experimental systems and molecular models.</a> FEMS Microbiology Reviews. 36 (3), 706-716 (2012).</li><li>Wu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRIM5&#945;+Restriction+Affects+Clinical+Outcome+and+Disease+Progression+in+Simian+Immunodeficiency+Virus-Infected+Rhesus+Macaques.">TRIM5&#945; Restriction Affects Clinical Outcome and Disease Progression in Simian Immunodeficiency Virus-Infected Rhesus Macaques.</a> Journal of Virology. 89 (4), 2233 (2015).</li></ol>

Importanti progressi sono stati raggiunti nello sviluppo di ceppi di topi immunodeficienti per l'umanizzazione, con una serie di diverse opzioni che possono essere utilizzate in base all'interesse della ricerca1. Fornito qui è un protocollo generale per l'umanizzazione dei topinulli NS -catena-catena e ceppi geneticamente simili da impiegare in tre diversi modelli per studiare l'infezione da HIV. Nel primo approccio sperimentale, i topi appena nati irradiati vengono iniettati con CD34 ...

Il modello murino umorizzato NOD/SCID/interleukin (IL)-2 receptor-chainnull (qui di seguito indicato come huNS-chainnull) è stato ampiamente utilizzato per studiare la patogenesi delle infezioni, l'autoimmunità e il cancro, così come per gli studi preclinici di farmaci e terapie basate su cellule umane1,2. Questi topi sono basati su un background non obeso diabetico (NOD), con la mutazione scid e mutazione mirata al locus a catena del recettore IL-2 (comune catena z per IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21), che provocano una grave compromissione nello sviluppo delle cellule T-, B-, naturali e (NK killer)1. Così, essi sostengono l'innesto di tessuto umano, il CD34 umano- cellule staminali ematopoietiche (HSC) e le cellule mononucleari periferiche umane (PBMC)3,4,5. Inoltre, l'espressione transgenica di fattori ematopoietici umani, come il fattore delle cellule staminali (SCF), il fattore di stimolazione della colonia di granulociti/macrofasi (GM-CSF) e IL-3 promuove l'innesto delle popolazioni mieloidi umane6,7,8.
Per gli studi sull'HIV, sono stati descritti diversi modelli di toponull huNS a catena, che differiscono nel ceppo del topo, nel tipo di cellule umane utilizzate, nel tipo di tessuti per l'innesto e nell'origine delle cellule (cioè sane vs. donatore infetto dall'HIV)9,10. Il ceppo originale, tuttavia, è ampiamente utilizzato a causa degli alti livelli di innesto di cellule umane e della replicazione virale a seguito di infezione con un ceppo HIV di riferimento11,12,13. Ceppi di topi immunodeficienti simili con espressione transgenica di fattori ematopoietici umani (ad es. NOG-EXL o NSG-SGM3) o con impianti di fegato e timo umano (topogonico osseo-fegato-fegato [BLT]) sono utili per valutare il ruolo delle popolazioni mieloidi nella risposta immunitaria anti-HIV, gli effetti dell'HIV su questi tessuti e la loro partecipazione come serbatoi virali14,15. Inoltre, alcuni ceppi con espressione transgenica di molecole di antigene leucocito umano (HLA), così come topi BLT, possono essere utilizzati per studiare la risposta delle cellule T all'infezione da HIV16,17.
In generale, in questi topi, l'umanizzazione dipende dall'origine cellulare, dal percorso di consegna (intraperitonetale, intraepatico, endovenoso, intracardiaco) e dall'età del topo al momento dell'innesto18,19,20. Per quanto riguarda l'origine cellulare, l'uomo CD34- HSC derivato dal sangue cordonale, dal fegato fetale o dal sangue periferico mobilitato può essere iniettato nei neonati o nei giovani topi3,21. Inoltre, i topinulli adulti a catena possono essere umanizzati con l'iniezione di PBMC (qui, indicati come hu-PBL-NS-catena zz), permettendo la circolazione temporale di queste cellule nel sangue, organi linfoidi secondari e tessuti infiammati22,23,24.
Descritto qui è un protocollo dettagliato per la creazione di modelli di toponull huNS -catena per lo studio dell'infezione da HIV. Il primo è il modello cronico, in cui i CD34umani - HSC derivati dal sangue cordonale da un donatore sano vengono iniettati nei topi neonati, seguito da infezione con un ceppo HIV di riferimento dopo 14 settimane di ricostituzione del sistema immunitario umano. Questo modello permette il monitoraggio dei topi fino a 36 settimane dopo l'infezione. Il secondo modello è un modello acuto, in cui i PbMC derivati da un donatore sano vengono iniettati in topinull adulti NS , seguiti da infezione con un ceppo HIV di riferimento dopo 3 settimane di espansione delle cellule T umane nel topo. Infine, il terzo modello è il modello di riattivazione, in cui i PMC derivati da un donatore infetto dall'HIV sottoposto a terapia antiretrovirale soppressiva (ART) vengono iniettati nei topinulli adulti NS - catena. In questo caso, un ambiente privo di farmaci consente la riattivazione virale e l'aumento del carico virale. Questi due ultimi modelli consentono il monitoraggio fino a 9 settimane dopo l'innesto.
Nel complesso, questi tre modelli sono utili per studi virologici, studi preclinici su nuovi farmaci e valutazione degli effetti dell'infezione da HIV sulla risposta immunitaria globale. È inoltre importante considerare che l'uso di topi umanizzati affetti da HIV richiede la revisione e l'approvazione da parte del Comitato di Biosicurezza Istituzionale (IBC) e dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali (IACUC) prima di qualsiasi esperimento. Ciò garantisce che lo studio segua tutte le normative istituzionali interne ed esterne per l'uso di materiale biologico pericoloso e la manipolazione umana di animali sperimentali.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0. 5 ml Microcentrifuge tubes</td>
			<td>Neptune</td>
			<td>3735.S.X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1. 5 ml Microcentrifuge tubes</td>
			<td>Neptune</td>
			<td>3745.S.X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml conical tubes</td>
			<td>Stellar scientific</td>
			<td>T15-600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 ml Serologial pipetes</td>
			<td>stellar sceintific</td>
			<td>VL-4090-0005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml conical tubes</td>
			<td>Stellar scientific</td>
			<td>T50-600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK lysis buffer</td>
			<td>Quality biological</td>
			<td>118-156-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pads</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>06-669-62</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD3 clone UCHT1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>300439</td>
			<td>APC conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD4 clone OKT4</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>317420</td>
			<td>AF488 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD45 clone 2D1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>368522</td>
			<td>BV421 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Human CD8 clone SK1</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>344710</td>
			<td>PerCP-Cy5.5 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosafaty cabinet level 2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>If posible connected to an exauste chimeny when handling Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonnet</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-900</td>
			<td>Single use cap for basic protection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cavicide</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>13-1000</td>
			<td>Surface desinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD34+ cells</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>2C-101</td>
			<td>As many vials available from a single donor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>65-6KR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear jar</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>77977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton gauze pad</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>22-415-468</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable lab coats</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>19-472-422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA micro tubes</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>450480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Face Mask</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-897</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS lysing solution</td>
			<td>BD</td>
			<td>340202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS premium HI</td>
			<td>Atlanta biologicals</td>
			<td>S1115OH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll</td>
			<td>GE health one</td>
			<td>17-1440-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>We used FACS Aria II</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometry tubes</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352054</td>
			<td>5 ml polystyrene and round bottom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HIV BaL</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Prepared in our uQUANT core facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human PBMCs</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HIV positive and negative volunteers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared warming pad</td>
			<td>Venet scientific</td>
			<td>DCT-25</td>
			<td>Temporary therapeutic warming pad for small animals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isentress (Raltegravir)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>NSC 0006-0227061</td>
			<td>Antiretroviral medication to treat human immunodeficiency virus (HIV)-Integrase inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mark I irradiator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Equipment belonging to university of Maryland</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse ear tags</td>
			<td>National Band &#38; Tag company</td>
			<td>1005-1L1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Natelson blood collection tubes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>02-668-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOG-EXL</td>
			<td>Taconic</td>
			<td>HSCFTL-13395-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG mice</td>
			<td>Jackson</td>
			<td>5557</td>
			<td>Time pregnant females for CD34 engraftment and Juveniles for PBMCs engraftment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG-SGM3</td>
			<td>Jackson</td>
			<td>13062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde 16%</td>
			<td>Electron microscopy sciences</td>
			<td>15710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 1X pH 7.4</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>100-10-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>08-757-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quantistudio qPCR machine</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>QS3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent reservoirs</td>
			<td>Costar</td>
			<td>4870</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI media 1640 1X</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11875-093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shoe covers</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>17-100-911</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile disposable Gloves</td>
			<td>Microflex</td>
			<td>SUF-524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript II First-Strand Synthesis SuperMix</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10080-400</td>
			<td>cDNA synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 28-G x 1/2</td>
			<td>BD</td>
			<td>329-461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 29-G x 1/2</td>
			<td>BD</td>
			<td>324-702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Truvada (Emtricitabine and Tenofovir</td>
			<td>Gilead</td>
			<td>NDC 61958-0701-1</td>
			<td>Antiretroviral medication to treat human immunodeficiency virus (HIV)-Nicleoside analog-transcriptase inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8154</td>
			<td>Cell count and viability</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vick Vaporub</td>
			<td>School health</td>
			<td>43214</td>
			<td>Ointment based on menthol and eucalyptus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water molecular biology grade</td>
			<td>Quality biological</td>
			<td>351-029-131</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic, acute, and reactivated hiv infection in humanized immunodeficient mouse models

I topinulli umanizzati NOD/SCID/IL-2 ricapitolano alcune caratteristiche dell'immunità umana, che possono essere sfruttate nella ricerca di base e pre-clinica sulle malattie infettive. Qui sono descritti tre modelli di topi immunodeficienti umanizzati per studiare la dinamica dell'infezione da HIV. Il primo si basa sull'iniezione intraepatica di CD34- cellule staminali ematopoietiche nei topi neonati, che consente la ricostituzione di diverse cellule confinate nel sangue e nel linfoide, seguita da infezione con un ceppo HIV di riferimento. Questo modello consente il monitoraggio fino a 36 settimane dopo l'infezione ed è quindi chiamato il modello cronico. Il secondo e il terzo modello sono indicati come modelli acuti e di riattivazione, in cui le cellule mononucleari del sangue periferico vengono iniettate intraperitonealmente nei topi adulti. Nel modello acuto, le cellule di un donatore sano vengono innestate attraverso il percorso intraperitoneale, seguito da infezione con un ceppo HIV di riferimento. Infine, nel modello di riattivazione, le cellule di un donatore infetto dall'HIV sottoposto a terapia antiretrovirale vengono innestate attraverso il percorso intraperitoneale. In questo caso, un ambiente privo di farmaci nel mouse consente la riattivazione del virus e un aumento del carico virale. I protocolli qui forniti descrivono l'approccio sperimentale convenzionale per i modelli murini umanizzati e immunodeficienti dell'infezione da HIV.

Come descritto in precedenza, a 14 settimane dopo l'iniezione HSC (modello cronico) o a 3 settimane dopo l'iniezione pb-POMC (modelli acuti e di riattivazione), i topi vengono dissanguati per lo screening del livello di innesto di cellule umane mediante citometria di flusso. Nella figura 1Aè riportata una strategia rappresentativa di gating per la valutazione di 1) CD45 umano- la ricostituzione delle cellule e 2) di CD4e le celluleT. Tipicam...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models at JoVE.com

Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models

Qui sono descritti tre approcci sperimentali per studiare la dinamica dell'infezione da HIV nei topi umanizzati. Il primo consente lo studio di eventi di infezione cronica, mentre i due ultimi consentono lo studio di eventi acuti dopo l'infezione primaria o la riattivazione virale.

Infezione da HIV cronica, acuta e riattivata in modelli di topo immunodeficienti umanizzati

Humanized NOD/SCID/IL-2 receptor &#947;-chainnull mice recapitulate some features of human immunity, which can be exploited in basic and pre-clinical ...

Questa procedura descrive tre modelli di topi immunodifesa umanizzati per lo studio della dinamica dell'infezione da HIV. I topi umanizzati NSG ricapitolano sulle caratteristiche dell'immunità umana. In questo caso, consentendo lo studio dell'infezione cronica, acuta e riattivata dell'HIV in contesti precli clinici.A dimostrare la procedura di preparazione cellulare sarà Sandra Medina-Moreno, supervisore della ricerca di laboratorio del nostro gruppo. Quando si esegue questa procedura, utilizzare sempre dispositivi di protezione individuale usa e getta tra cui scrub sterili, guanti, scarpe dedicate, copriscarpe, maschera, occhiali, cofani per capelli e barba e un camice da laboratorio sterile. Per il modello cronico, resuspend un milione di cellule staminali umane CD34+ congelate in 10 millilitri di supporti RPMI 1640 con 10%FBS in un armadio di biosicurezza certificato e mantenere condizioni sterili.Utilizzare 10 microlitri della sospensione per contare e controllare la vitalità cellulare mediante la colorazione di esclusione Di Trypan Blue in un emocitometro. Quindi centrifugare la sospensione cellulare a 400 volte g per 15 minuti a temperatura ambiente. Scartare il supernatante e rimescolare le cellule in 1X PBS freddo alla concentrazione richiesta.Tenere le cellule sul ghiaccio fino all'iniezione. Strofina la biancheria da letto pulita tra le mani per mascherare qualsiasi altro odore estraneo sui cuccioli riceventi. Quindi metti i cuccioli in una piastra di Petri sterile di 100 millimetri quadrati insieme a una piccola quantità di materiale da letto dalla gabbia dell'allevatore.Mettere la piastra di Petri in una gabbia di trasporto pulita e quindi posizionare la gabbia in una gabbia di trasporto carboy per proteggere i cuccioli dalla luce diretta e dal rumore. Coprire la gabbia di trasporto con un tampone di copertura per evitare l'esposizione di animali all'ambiente durante il transito verso la sala di irradiazione. Dopo l'anestesia come descritto nel protocollo di testo, prepararsi per l'innesto tramite iniezione epatica.Per ridurre al minimo il tempo di ritenuta del topo, lasciare che uno sperimentatore carichi la siringa con la sospensione delle cellule staminali e che il secondo investigatore tenga il cucciolo e somministra l'iniezione. Caricare 50 microlitri della sospensione delle cellule staminali umane CD34+ nella siringa con un ago attaccato sotto l'armadio di biosicurezza certificato. Trattenere i cuccioli con le dita del pollice e dell'indice e pulire il sito di iniezione con il 70% di alcol.Utilizzare un angolo di ago poco profondo per fornire 50 microlitri di cellule direttamente nel fegato in modo da non perforare completamente il fegato. Prewarm il piatto utilizzando un tampone riscaldante a infrarossi per roditori a 20 gradi Celsius per garantire che i cuccioli non siano troppo riscaldati. Posizionare i cuccioli sulla piastra di Petri ricoperta di garza sterile per uno o cinque minuti per consentire il recupero.Immediatamente prima di restituire i cuccioli ai loro genitori, applicare una piccola quantità di mentolo e unguento a base di eucalipto usando il pollice e le dita indice sul muso di entrambi i genitori per evitare cannibalismo o rifiuto dei cuccioli. Controlla le gabbie ogni giorno, alla ricerca di eventuali segni di innesto rispetto alla malattia dell'ospite nei cuccioli come pelle secca, nessuna alimentazione, eruzione cutanea o alopecia. Svezza i cuccioli a tre settimane di età e ospitali in gabbie diverse.Verificare l'innesto nel sangue periferico mediante citometria a flusso a 14 settimane di età. Viene mostrata una strategia rappresentativa per la valutazione della ricostruzione umana delle cellule CD45+ e della percentuale di cellule CD4+ e CD8+T. Il tasso di successo dell'innesto è compreso tra l'80% e il 100%Utilizzare cellule mononucleari del sangue periferico umano derivate da un donatore sano per il modello acuto o da un paziente infetto da HIV che era sotto terapia antiretrovirale per il modello di riattivazione.Strato 15 millilitri di sangue intero in cinque millilitri di mezzo gradiente di densità sterile in un tubo conico da 50 millilitri. Centrifuga a 400 volte g per 30 minuti a temperatura ambiente senza pause per evitare che il mantello buffy si mescola con il mezzo gradiente di densità. Raccogliere con cura la frazione di cellule mononucleari tra il mezzo gradiente di densità e il supernatante.Trasferire il mantello buffy su un tubo di centrifuga da 15 millilitri contenente 10 millilitri di 1X PBS. Centrifugare a 300 volte g per 10 minuti a temperatura ambiente. Scartare il supernatante e rimuovere i restanti globuli rossi lisciviando con cinque millilitri di tampone di lisi ACK aggiunti alle cellule pellettate.Incubare per quattro minuti a temperatura ambiente. Dopo aver centrifugato di nuovo come prima, scartare il supernatante e resuspend in 10 millilitri di 1X PBS o RPMI 1640 medium. Utilizzare 10 microlitri della sospensione cellulare per contare le cellule e verificare la vitalità della colorazione di esclusione Trypan Blue in un emocitometro.In genere, da uno a due milioni di cellule sono ottenute per ogni millilitro di sangue con una vitalità superiore al 95%. Dopo la centrifugazione come prima, scartare il supernatante e regolare il numero di cella alla concentrazione richiesta. Caricare 3,5 milioni di cellule mononucleari del sangue periferico in 200 microlitri di 1X PBS in una siringa con un ago attaccato sotto un armadietto di biosicurezza certificato.Rimuovere il mouse dalla gabbia e tenerlo per la coda in modo che possa afferrare la rete applicando una leggera trazione all'indietro. Quindi posizionare l'indice e il pollice sulle spalle dell'animale afferrando la pelle sciolta del collo e usando il dito medio per stabilizzare la schiena. Far scorrere la testa del mouse all'indietro in modo che la schiena sia sopra la testa.Ciò consente di spostare i visceri nella cavità addominale all'indietro e riduce il rischio di foratura degli organi interni durante l'iniezione. Pulire il sito di iniezione con il 70% di alcol. Penetrare la siringa preparata attraverso la parete addominale e aspirare prima di iniettare le cellule.Se un materiale è aspirato, rimuovere la siringa e scartarla. Altrimenti, iniettare lentamente le cellule nella cavità intraperitoneale prima di rimuovere la siringa e scartarla. Riportare l'animale nella sua gabbia e verificare l'innesto nel sangue periferico mediante citometria a flusso a tre settimane dopo l'iniezione.Identificare i topi con l'etichetta auricolare. Osservare attentamente i topi utilizzati in questi esperimenti, due volte al giorno dopo ogni procedura per i segni clinici di angoscia. Quindi procedere all'iniezione di HIV come descritto nel protocollo di testo.Dopo l'iniezione di HIV, c'è un rapido aumento della carica virale plasmatica che di solito è rilevabile dopo due o tre settimane dopo l'infezione sia nei modelli cronici che in quello acuto con cinetica simile nel modello di riattivazione. L'aumento della carica virale coincide con una diminuzione del rapporto CD4:CD8. Questi cambiamenti non si osservano nei topi di controllo.Si noti che, nel modello di mouse adulto PBMC NSG umanizzato, viene osservata e ricostituita un'inversione iniziale del rapporto CD4:CD8 lungo il tempo di monitoraggio. Quando la terapia antiretrovirale viene somministrata ai topi infetti da HIV, si è verificata una soppressione della carica virale e il recupero nel rapporto CD4:CD8, come previsto, raggiungendo livelli simili a quelli dei controlli non infetti. Tipicamente, dopo due o tre settimane di trattamento, si osserva una diminuzione della carica virale e un aumento del rapporto CD4:CD8 nei modelli cronici, acuti e di riattivazione.Utilizzare la dose di irradiazione raccomandata per evitare il sovradosaggio letale o il rigetto delle cellule trapiantate. Non perforare completamente il fegato durante l'iniezione e utilizzare biancheria da letto per mascherare gli odori che la diga percepirà come estranei. Questi tre modelli consentono di testare composti antivirali, anticorpi anti-HIV o altre sostanze biologiche che influenzano la replicazione virale.Inoltre, consentono esperimenti di trasferimento adattivo per l'immunoterapia hiv. I topi umanizzati NSG possono essere ricostituiti parzialmente o per intero con cellule umane per rispondere a patogeni o farmaci, imitando la complessità del sistema immunitario umano. Tutte le misure biologiche di base devono essere rigorosamente seguite poiché i topi umanizzati NSG possono essere infettati da agenti patogeni murini e umani, in particolare in questo caso che utilizza la manipolazione del virus HIV.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

Inferenza genotipica del virus HIV-1 Tropismo utilizzo basati sulla popolazione sequenziamento del V3

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

Ricerca

Immunologia e infezioni

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo metodo di imaging per distinguere infiammazione acuta e cronica

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term cronica<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Infezione delle vie aeree nei topi

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

Umanizzato mouse modello per studiare le infezioni batteriche Targeting il microcircolo

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

Rapid Screening of HIV Reverse Transcriptase and Integrase Inhibitors

Screening rapido di HIV trascrittasi inversa e inibitori dell&#39;integrasi

Although a number of anti HIV drugs have been approved, there are still problems with toxicity and drug resistance. This demonstrates a need to identify ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induzione di Murine infiammazione intestinale per trasferimento adottivo di Effector CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Alto</sup&gt; T Cells in topi immunodeficienti

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Mouse Models Of Helicobacter Infection And Gastric Pathologies

Mouse Models Of Helicobacter Infection And Gastric Pathologies

Modelli murini di patologie gastriche e infezione da Helicobacter

Helicobacter pylori is a gastric pathogen that is present in half of the global population and is a significant cause of morbidity and mortality in ...

Humanized NOD/SCID/IL2r&#947;null (hu-NSG) Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

Humanized NOD/SCID/IL2rÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

Umanizzato NOD/SCID/IL2rγnull (hu-NSG) Mouse modello per studi di latenza e di replicazione dell'HIV

Ethical regulations and technical challenges for research in human pathology, immunology, and therapeutic development have placed small animal models in ...

CRISPR-Cas9-based Genome Engineering to Generate Jurkat Reporter Models for HIV-1 Infection with Selected Proviral Integration Sites

Basati su CRISPR-Cas9 genoma ingegneria per generare modelli di Jurkat Reporter per infezione da HIV-1 con integrazione Proviral selezionati siti

Human immunodeficiency virus (HIV) integrates its proviral DNA non-randomly into the host cell genome at recurrent sites and genomic hotspots. Here we ...

Establishment of the Dual Humanized TK-NOG Mouse Model for HIV-associated Liver Pathogenesis

Istituzione del modello murino TK-NOG dualizzato per la patogenesi del fegato associata all'HIV

Despite the increased life expectancy of patients infected with human immunodeficiency virus-1 (HIV-1), liver disease has emerged as a common cause of ...