Name: contusion spinal cord injury via a microsurgical laminectomy in the regenerative axolotl
Uploaded: 2019-10-20T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Contusion Spinal Cord Injury via a Microsurgical Laminectomy in the Regenerative Axolotl at JoVE.com

Michael Pedersen, Università di Aarhus per la sua esperienza e il tempo sullo sviluppo di protocolli di risonanza magnetica e la creazione dell'intero progetto. Peter Agger, Università di Aarhus per la sua esperienza e il tempo sullo sviluppo dei protocolli di risonanza magnetica. Steffen Ringgard, Università di Aarhus per la sua esperienza e il tempo sullo sviluppo dei protocolli di risonanza magnetica. Lo sviluppo del modello SCI nell'axolotl è stato gentilmente sostenuto dalla Fondazione A.P. Maersk, dalla Fondazione Riisfort, dalla Fondazione Linex e dalla Fondazione ELRO.

Nel corso dello studio sono state seguite tutte le normative istituzionali e governative applicabili relative all'uso etico degli animali. Lo studio è stato condotto con l'id di approvazione: 2015-15-0201-0061 dall'Ispettorato danese per gli esperimenti sugli animali. Gli animali erano assolotl messicani (Ambystoma mexicanum, massa corporea media : STD: 12,12 g 1,25 g).
1. Preparazione
<ol><li>
Preparare axolotl per l'anestesia.
	<ol>
<li>Utilizzare acqua del rubin...

<ol>
	<li>Shavelle, R. M., DeVivo, M. J., Brooks, J. C., Strauss, D. J., Paculdo, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvements+in+Long-Term+Survival+After+Spinal+Cord+Injury.">Improvements in Long-Term Survival After Spinal Cord Injury.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 96 (4), 645-651 (2015).</li><li>Hicken, B. L., Putzke, J. D., Richards, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bladder+management+and+quality+of+life+after+spinal+cord+injury.">Bladder management and quality of life after spinal cord injury.</a> American Journal of Physical Medicine &amp; Rehabilitation. 80 (12), 916-922 (2001).</li><li>Levi, R., Hultling, C., Nash, M. S., Seiger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Stockholm+spinal+cord+injury+study:+1.+Medical+problems+in+a+regional+SCI+population.">The Stockholm spinal cord injury study: 1. Medical problems in a regional SCI population.</a> Paraplegia. 33 (6), 308-315 (1995).</li><li>Bjornshave Noe, B., Mikkelsen, E. M., Hansen, R. M., Thygesen, M., Hagen, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+traumatic+spinal+cord+injury+in+Denmark,+1990-2012:+a+hospital-based+study.">Incidence of traumatic spinal cord injury in Denmark, 1990-2012: a hospital-based study.</a> Spinal Cord. 53 (6), 436-440 (2015).</li><li>Singh, A., Tetreault, L., Kalsi-Ryan, S., Nouri, A., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+prevalence+and+incidence+of+traumatic+spinal+cord+injury.">Global prevalence and incidence of traumatic spinal cord injury.</a> Clinical Epidemiology. 6, 309-331 (2014).</li><li>Aguayo, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degenerative+and+regenerative+responses+of+injured+neurons+in+the+central+nervous+system+of+adult+mammals.">Degenerative and regenerative responses of injured neurons in the central nervous system of adult mammals.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. 331 (1261), 337-343 (1991).</li><li>Aguayo, A. J., Bjorklund, A., Stenevi, U., Carlstedt, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+mesencephalic+neurons+survive+and+extend+long+axons+across+peripheral+nervous+system+grafts+inserted+into+the+adult+rat+striatum.">Fetal mesencephalic neurons survive and extend long axons across peripheral nervous system grafts inserted into the adult rat striatum.</a> Neuroscience Letters. 45 (1), 53-58 (1984).</li><li>Richardson, P. M., Issa, V. M., Aguayo, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+long+spinal+axons+in+the+rat.">Regeneration of long spinal axons in the rat.</a> Journal of Neurocytology. 13 (1), 165-182 (1984).</li><li>Butler, E. G., Ward, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+the+spinal+cord+following+ablation+in+urodele+larvae.">Reconstitution of the spinal cord following ablation in urodele larvae.</a> Journal of Experimental Zoology. 160 (1), 47-65 (1965).</li><li>Diaz Quiroz, J. F., Tsai, E., Coyle, M., Sehm, T., Echeverri, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precise+control+of+miR-125b+levels+is+required+to+create+a+regeneration-permissive+environment+after+spinal+cord+injury:+a+cross-species+comparison+between+salamander+and+rat.">Precise control of miR-125b levels is required to create a regeneration-permissive environment after spinal cord injury: a cross-species comparison between salamander and rat.</a> Disease Model Mechanisms. 7 (6), 601-611 (2014).</li><li>Clarke, J. D., Alexander, R., Holder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+descending+axons+in+the+spinal+cord+of+the+axolotl.">Regeneration of descending axons in the spinal cord of the axolotl.</a> Neuroscience Letters. 89 (1), 1-6 (1988).</li><li>McHedlishvili, L., Mazurov, V., Tanaka, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+the+central+nervous+system+during+salamander+tail+regeneration+from+the+implanted+neurospheres.">Reconstitution of the central nervous system during salamander tail regeneration from the implanted neurospheres.</a> Methods of Molecular Biology. 916, 197-202 (2012).</li><li>Thygesen, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+clinically+relevant+blunt+spinal+cord+injury+model+in+the+regeneration+competent+axolotl+(Ambystoma+mexicanum)+tail.">A clinically relevant blunt spinal cord injury model in the regeneration competent axolotl (Ambystoma mexicanum) tail.</a> Experimental Therapeutic Medicine. 17 (3), 2322-2328 (2019).</li><li>Goss, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Principles of Regeneration. , (1969).</li><li>Hutchison, C., Pilote, M., Roy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+axolotl+limb:+a+model+for+bone+development,+regeneration+and+fracture+healing.">The axolotl limb: a model for bone development, regeneration and fracture healing.</a> Bone. 40 (1), 45-56 (2007).</li><li>Thygesen, M. M., Rasmussen, M. M., Madsen, J. G., Pedersen, M., Lauridsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propofol+(2,6-diisopropylphenol)+is+an+applicable+immersion+anesthetic+in+the+axolotl+with+potential+uses+in+hemodynamic+and+neurophysiological+experiments.">Propofol (2,6-diisopropylphenol) is an applicable immersion anesthetic in the axolotl with potential uses in hemodynamic and neurophysiological experiments.</a> Regeneration (Oxford). 4 (3), 124-131 (2017).</li><li>Krogh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Progress+of+Physiology.">The Progress of Physiology.</a> The American Journal of Physiology. 90 (2), 243-251 (1929).</li></ol>

Poiché il rischio di lesioni al midollo spinale è significativo, le fasi critiche del protocollo sono la rimozione dei processi spinosi e l'allargamento dell'accesso osseo al canale spinale, se necessario. Come accennato nel protocollo, si raccomanda vivamente di rimuovere il processo più cranico. Ciò significa che i processi più caudali proteggono il midollo spinale da essere colpiti dalle forbici. Si raccomanda di garantire un accesso chirurgico sufficiente, il che significa non fare troppo piccolo un'incisione pr...

L'obiettivo generale di questo studio era quello di stabilire un metodo microchirurgico controllato e riproducibile per infliggere SCI contundente e tagliente all'axolotl (Ambystoma mexicanum), producendo un modello di lesione del midollo spinale rigenerativo.
La SCI è una condizione grave che, a seconda del livello e dell'estensione, infligge disabilità neurologiche alle estremità insieme a un controllo alterato della vescica e dell'intestino1,2,3. La maggior parte delle SCI sono il risultato di traumi contundenti ad alta energia come incidenti stradali e cadute4,5. Le lesioni taglienti sono molto rare. Pertanto, il tipo di lesione macroscopica più comune è contusioni.
Il sistema nervoso centrale dei mammiferi (CNS) è un tessuto non rigenerativo, quindi nessun ripristino del tessuto neurologico seguito a SCI è visto6,7,8. D'altra parte, alcuni animali hanno un'intrigante capacità di rigenerare i tessuti, tra cui il tessuto CNS. Uno di questi animali è l'axolotl. È ampiamente usato negli studi di biologia rigenerativa ed è di interesse nella rigenerazione del midollo spinale, perché è un vertebrato9,10,11,12.
La maggior parte degli studi SCI nell'axolotl vengono eseguiti come amputazione dell'intera coda o ablazione di una parte più grande del midollo spinale9,10,11,12. Recentemente, è stato pubblicato un nuovo studio sulle lesioni contundenti13 che imitano meglio le situazioni cliniche. Mentre l'amputazione completa dell'appendice nell'axolotl comporta una rigenerazione completa, alcuni fenomeni rigenerativi non basati sull'amputazione dipendono dal difetto di dimensione critica (CSD)14,15. Ciò significa che le lesioni che superano una soglia critica non vengono rigenerate. Per sviluppare un modello rigenerativo con un valore traslazionale clinico più elevato, questo studio ha studiato se un trauma contundente di 2 mm supererebbe il limite di CSD.
Questo metodo è rilevante per i ricercatori che lavorano sulla rigenerazione del midollo spinale in piccoli modelli animali, in particolare nell'axolotl. Inoltre, può essere di interesse più generale, perché presenta un modo di utilizzare attrezzature di laboratorio standard per sviluppare un meccanismo di trauma contundente che è adatto per l'uso in piccoli animali in generale.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>25 g custom falling rod</td>
			<td>custom home made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 mm PVC pipe</td>
			<td>custom home made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>67-64-1</td>
			<td>Propanone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Axolotl (Ambystoma mexicanum)</td>
			<td>Exoterra GmbH</td>
			<td>N/A</td>
			<td>12-22 cm and 10 g - 80 g, All strains (wildtype, melanoid, white, albino, transgenic white with GFP)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benzocain</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>94-09-7</td>
			<td>ethyl 4-aminobenzoate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electromaget</td>
			<td>custom home made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel 2010</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Excel 2010 or newer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td></td>
			<td>ImageJ 1.5e or newer. Rasband, W.S., ImageJ, U. S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA, https://imagej.nih.gov/ij/, 1997-2016.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>kimwipes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microsurgical instruments</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Forceps and scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS550s</td>
			<td>Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>MS550s</td>
			<td>40 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS700</td>
			<td>Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>MS700</td>
			<td>50 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>any maker</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft cloth</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any piece of soft cloth measuring appromixately 70 x 55 cm^2 e.g. a dish towel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100</td>
			<td>Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>Vevo 2100</td>
			<td>High frequency ultrasound system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

contusion spinal cord injury via a microsurgical laminectomy in the regenerative axolotl

Lo scopo di questo studio è quello di stabilire un modello di lesione del midollo spinale smussato rigenerativo standardizzato e riproducibile nell'axolotl (Ambystoma mexicanum). La maggior parte delle lesioni cliniche del midollo spinale si verificano come traumi contundenti ad alta energia, inducendo lesioni da contusione. Tuttavia, la maggior parte degli studi nel midollo spinale axolotl sono stati condotti con traumi acuti. Pertanto, questo studio mira a produrre un modello rigenerativo più rilevante dal punto di vista clinico. A causa della loro impressionante capacità di rigenerare quasi tutti i tessuti, gli axolotl sono ampiamente utilizzati come modelli negli studi rigenerativi e sono stati ampiamente utilizzati negli studi sulle lesioni del midollo spinale (SCI). In questo protocollo, gli assilotls sono anestesizzati da un'immersione in una soluzione di benzocaina. Al microscopio, un'incisione angolare viene fatta bilateralmente ad un livello semplicemente caudale agli arti posteriori. Da questa incisione, è possibile sezionare ed esporre i processi spinosi. Utilizzando pinze e forbici, viene eseguita una laminectomia a due livelli, esponendo il midollo spinale. Viene costruito un dispositivo traumatologico personalizzato costituito da una canna che cade in un cilindro, e questo dispositivo viene utilizzato per indurre una lesione di contusione al midollo spinale. Le incisioni vengono poi suturate e l'animale recupera dall'anestesia. L'approccio chirurgico è riuscito a esporre il midollo spinale. Il meccanismo del trauma può produrre lesioni da contusione al midollo spinale, come confermato da istologia, risonanza magnetica, ed esame neurologico. Infine, il midollo spinale si rigenera dalla lesione. La fase critica del protocollo è la rimozione dei processi spinosi senza infliggere danni al midollo spinale. Questo passaggio richiede una formazione per garantire una procedura sicura. Inoltre, la chiusura delle ferite dipende fortemente dal non infliggere danni inutili alla pelle durante l'incisione. Il protocollo è stato eseguito in uno studio randomizzato di 12 animali.

Lo scopo del protocollo è quello di produrre una SCI che paralizzerà le funzioni motorie e sensoriali caudale alla lesione. Poiché l'axolotl è competente per la rigenerazione, ripristina la funzione in poche settimane, consentendo ai ricercatori di studiare la rigenerazione del SNC per un breve lasso di tempo.
L'anestesia è stata fornita per 45 min a tutti gli animali, e non sono stati sperimentati episodi di recupero pretermine. Tutti gli animali si sono ripresi entro un'ora e non hanno ...

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Contusion Spinal Cord Injury via a Microsurgical Laminectomy in the Regenerative Axolotl

Questo manoscritto presenta protocolli per infliggere chirurgicamente le lesioni del midollo spinale smussate e taglienti controllate ad un axolotl rigenerativo (Ambystoma mexicanum).

Contusione Mitraglio Cavolo spinale con una MicrochirurgicA laminectomia nell'Axolotl Rigenerativo

The purpose of this study is to establish a standardized and reproducible regenerative blunt spinal cord injury model in the axolotl (Ambystoma ...

Questo protocollo è il primo a introdurre una lesione standardizzata di tipo contusione nella ricerca sulla rigenerazione del midollo spinale axolotl. Il vantaggio principale di questa tecnica è che imita il trauma visto nella clinica di tutti i giorni, aumentando la probabilità che una scoperta futura possa essere tradotta. Il dispositivo per lesioni da contusione può essere utilizzato in qualsiasi altro piccolo modello animale di lesione del midollo spinale.La tecnica chirurgica è difficile, specialmente la laminectomia. Pertanto, è consigliabile addestrare la procedura su un gran numero di animali ex vivo prima di progredire nella chirurgia in vivo. Per iniziare, impostare un tavolo chirurgico posizionando una piastra di Petri standard sotto un microscopio stereo, sopra un panno tessile chirurgico.Posizionare l'axolotl anestetizzato nella posizione prona sulla piastra di Petri e avvolgerlo in tovaglioli di carta in modo che la coda sia esposta. Identificare gli arti posteriori e utilizzare un paio di micro forbici per fare la prima incisione solo caudale per loro. Fare l'incisione verticale dalla chiglia fino a quando non si sente la prominenza ossea dei processi spinosi.Estendere il taglio lateralmente, in modo che l'incisione attraversi l'intera larghezza della coda e afferra i processi spinosi con le forcep per garantire una corretta profondità. Quindi estendere l'incisione verticale di un millimetro sotto il processo spinoso su entrambi i lati. Posizionare l'animale su un lato e, partendo dal punto ventrale dell'incisione verticale, fare un'incisione orizzontale di circa 15 millimetri per gli animali che hanno un peso da 10 a 20 grammi.Utilizzare le forbici per sezionare immediatamente attraverso l'incisione orizzontale fino a quando la colonna vertebrale non si sente nella linea mediana. Quindi accendi l'animale dall'altra parte e ripeti il processo. Dopo aver sezionato il piano mediale profondo da entrambi i lati, sezionare attraverso la linea mediana per collegare le due incisioni orizzontali.Quindi, spostare il pezzo libero di coda e chiglia su un lato per esporre i processi spinosi. Posizionare l'animale nella posizione prona con la testa rivolta verso il lato non dominante del chirurgo e utilizzare un paio di forcep per afferrare i processi spinosi, solo caudale agli arti posteriori. Applicare un delicato sollevamento su e verso la testa dell'animale.Posizionare le lame di un paio di micro forbici orizzontali attorno al processo e tagliarla delicatamente, esponendo il midollo spinale. Afferrare il processo spinoso caudale a quello appena rimosso e ripetere il processo. È imperativo mantenere un sollevamento costante sul processo spinoso per assicurarsi che non infligga danni al midollo spinale quando viene rimosso.Se l'area esposta non è abbastanza ampia, utilizzare due paia di forcep per afferrare le laminae su entrambi i lati del midollo spinale e torcerle lateralmente con un movimento delicato. Quando si rimuove il processo spinoso, potrebbe essere necessario farlo in più passaggi. Pertanto, l'esposizione del midollo spinale può richiedere diversi minuti.Per introdurre una lesione di tipo contusione, utilizzare una piastra di Petri per trasferire l'animale all'unità traumatosa e far brillare una torcia sul midollo spinale. Quindi, posizionare il cilindro dell'unità traumatologico di contusione sopra il midollo spinale esposto utilizzando i micro regolatori e abbassare il cilindro fino a quando non è livellato con le laminae. Attaccare l'asta di caduta all'elettromagnete e posizionare il cilindro di regolazione dell'altezza di caduta desiderato sull'unità traumatizzati.Quindi, posizionare l'asta di caduta sul cilindro, spegnere l'elettromagnete per far cadere l'asta sul midollo spinale esposto e utilizzare la vite di regolazione dell'altezza per sollevare l'asta verso l'alto. Se si introduce una lesione acuta, tagliare il midollo spinale in un taglio verticale perfetto, quindi ripetere i tagli di due millimetri sul lato caudale del corpo. Senti le lame delle forbici raschiare lungo la parte ventrale del canale spinale per assicurarti che i tagli siano completi e sollevare il pezzo di midollo spinale dal canale.Per chiudere la ferita chirurgica, posizionare le suture di nylon O da 10 punti dalla parte più caudale dell'incisione orizzontale chiudendo le ferite in uno strato e lavorando verso la parte verticale dell'incisione. Quando si raggiunge un angolo, ruotare la piastra di Petri e suturare l'altra incisione orizzontale, quindi impostare le suture sulle incisioni verticali. Prima di terminare l'anestesia, utilizzare un'ecografia ad alta frequenza per acquisire immagini della lesione.Allineare la punta del trasduttore con l'asse di lunghezza dell'animale e immergerla nella soluzione di benzocaina fino a quando non è solo pochi millimetri sopra la chiglia dietro gli arti posteriori dell'animale. Identificare il sito della lesione e acquisire immagini in base alle indicazioni del manoscritto. Al termine, riportare l'axolotl in soluzione priva di anestetici immergendo la piastra di Petri in acqua dolce profonda cinque centimetri e lasciando scivolare via l'animale.Le lesioni del midollo spinale create utilizzando questo protocollo sono state convalidate utilizzando l'ematossilina e la colorazione dell'eosina sugli asolotl feriti e fittizi. Per confermare la rigenerazione, sono state preparate sezioni istologiche nove settimane dopo l'infortunio. Le immagini mostravano una connessione del midollo spinale ripristinata negli animali feriti.Lesioni e rigenerazione siamo anche seguiti dall'esame della funzione neurologica. La reazione dell'animale alla stimolazione della coda è stata segnata con punteggi più alti che indicano funzioni sensoriali tattili e nocicettive più elevate. Tra gli animali feriti, c'è stata una perdita della funzione neurologica tre settimane dopo la lesione e un graduale ripristino entro nove settimane.La lesione del midollo spinale è stata anche vista utilizzando l'imaging grafico ad ultrasuoni, che ha permesso la visualizzazione dell'arteria dorsale come marcatore dell'integrità del vaso. Le scansioni della risonanza magnetica ad alta campo sono state eseguite immediatamente dopo l'infortunio e a tre, sei e nove settimane. Queste scansioni sono state in grado di visualizzare l'edema e il ripristino dell'integrità del midollo spinale.Le scansioni immediatamente post infortunio, erano inclini al rumore. La chirurgia paziente e meticolosa aprirà la strada a un risultato positivo dopo la laminectomia senza danni prematuri al midollo spinale. Seguendo questa procedura, possono essere applicati diversi metodi in vivo, come l'imaging e le tecniche elettrofisiologiche.

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