Name: contusion spinal cord injury via a microsurgical laminectomy in the regenerative axolotl
Uploaded: 2019-10-20T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Contusion Spinal Cord Injury via a Microsurgical Laminectomy in the Regenerative Axolotl at JoVE.com

Michael Pedersen, Aarhus Üniversitesi'nde mr protokolleri geliştirme ve tüm projekurma konusundaki uzmanlığı ve zamanı için. Peter Agger, Aarhus Üniversitesi'nde mr protokollerini geliştirmek için uzmanlığı ve zamanı için. Steffen Ringgard, Aarhus Üniversitesi'nde mr protokollerini geliştirmek için uzmanlığı ve zamanı için. Axolotl'daki SCI modelinin geliştirilmesi A.P. Møller Maersk Vakfı, Riisfort Vakfı, Linex Vakfı ve ELRO Vakfı tarafından desteklendi.

Bu çalışmada hayvanların etik kullanımına ilişkin tüm geçerli kurumsal ve resmi düzenlemeler izlenmiúve Çalışma, Danimarka Hayvan Deney Ii. Hayvanlar Meksika aksolotllarıydı (Ambystoma mexicanum, ortalama vücut kütlesi ± STD: 12.12 g ± 1.25 g).
1. Hazırlık
<ol><li>
Anestezi için axolotl hazırlayın.
	<ol>
<li>Yüksek kaliteli kimyasal olarak arıtılmayan musluk suyu kullanın. Eğer kullanılamıyorsa, %40 Holtfreter'ın çözeltisini kullan...

<ol>
	<li>Shavelle, R. M., DeVivo, M. J., Brooks, J. C., Strauss, D. J., Paculdo, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvements+in+Long-Term+Survival+After+Spinal+Cord+Injury.">Improvements in Long-Term Survival After Spinal Cord Injury.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 96 (4), 645-651 (2015).</li><li>Hicken, B. L., Putzke, J. D., Richards, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bladder+management+and+quality+of+life+after+spinal+cord+injury.">Bladder management and quality of life after spinal cord injury.</a> American Journal of Physical Medicine &amp; Rehabilitation. 80 (12), 916-922 (2001).</li><li>Levi, R., Hultling, C., Nash, M. S., Seiger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Stockholm+spinal+cord+injury+study:+1.+Medical+problems+in+a+regional+SCI+population.">The Stockholm spinal cord injury study: 1. Medical problems in a regional SCI population.</a> Paraplegia. 33 (6), 308-315 (1995).</li><li>Bjornshave Noe, B., Mikkelsen, E. M., Hansen, R. M., Thygesen, M., Hagen, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+traumatic+spinal+cord+injury+in+Denmark,+1990-2012:+a+hospital-based+study.">Incidence of traumatic spinal cord injury in Denmark, 1990-2012: a hospital-based study.</a> Spinal Cord. 53 (6), 436-440 (2015).</li><li>Singh, A., Tetreault, L., Kalsi-Ryan, S., Nouri, A., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+prevalence+and+incidence+of+traumatic+spinal+cord+injury.">Global prevalence and incidence of traumatic spinal cord injury.</a> Clinical Epidemiology. 6, 309-331 (2014).</li><li>Aguayo, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degenerative+and+regenerative+responses+of+injured+neurons+in+the+central+nervous+system+of+adult+mammals.">Degenerative and regenerative responses of injured neurons in the central nervous system of adult mammals.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. 331 (1261), 337-343 (1991).</li><li>Aguayo, A. J., Bjorklund, A., Stenevi, U., Carlstedt, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+mesencephalic+neurons+survive+and+extend+long+axons+across+peripheral+nervous+system+grafts+inserted+into+the+adult+rat+striatum.">Fetal mesencephalic neurons survive and extend long axons across peripheral nervous system grafts inserted into the adult rat striatum.</a> Neuroscience Letters. 45 (1), 53-58 (1984).</li><li>Richardson, P. M., Issa, V. M., Aguayo, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+long+spinal+axons+in+the+rat.">Regeneration of long spinal axons in the rat.</a> Journal of Neurocytology. 13 (1), 165-182 (1984).</li><li>Butler, E. G., Ward, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+the+spinal+cord+following+ablation+in+urodele+larvae.">Reconstitution of the spinal cord following ablation in urodele larvae.</a> Journal of Experimental Zoology. 160 (1), 47-65 (1965).</li><li>Diaz Quiroz, J. F., Tsai, E., Coyle, M., Sehm, T., Echeverri, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precise+control+of+miR-125b+levels+is+required+to+create+a+regeneration-permissive+environment+after+spinal+cord+injury:+a+cross-species+comparison+between+salamander+and+rat.">Precise control of miR-125b levels is required to create a regeneration-permissive environment after spinal cord injury: a cross-species comparison between salamander and rat.</a> Disease Model Mechanisms. 7 (6), 601-611 (2014).</li><li>Clarke, J. D., Alexander, R., Holder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+descending+axons+in+the+spinal+cord+of+the+axolotl.">Regeneration of descending axons in the spinal cord of the axolotl.</a> Neuroscience Letters. 89 (1), 1-6 (1988).</li><li>McHedlishvili, L., Mazurov, V., Tanaka, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+the+central+nervous+system+during+salamander+tail+regeneration+from+the+implanted+neurospheres.">Reconstitution of the central nervous system during salamander tail regeneration from the implanted neurospheres.</a> Methods of Molecular Biology. 916, 197-202 (2012).</li><li>Thygesen, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+clinically+relevant+blunt+spinal+cord+injury+model+in+the+regeneration+competent+axolotl+(Ambystoma+mexicanum)+tail.">A clinically relevant blunt spinal cord injury model in the regeneration competent axolotl (Ambystoma mexicanum) tail.</a> Experimental Therapeutic Medicine. 17 (3), 2322-2328 (2019).</li><li>Goss, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Principles of Regeneration. , (1969).</li><li>Hutchison, C., Pilote, M., Roy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+axolotl+limb:+a+model+for+bone+development,+regeneration+and+fracture+healing.">The axolotl limb: a model for bone development, regeneration and fracture healing.</a> Bone. 40 (1), 45-56 (2007).</li><li>Thygesen, M. M., Rasmussen, M. M., Madsen, J. G., Pedersen, M., Lauridsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propofol+(2,6-diisopropylphenol)+is+an+applicable+immersion+anesthetic+in+the+axolotl+with+potential+uses+in+hemodynamic+and+neurophysiological+experiments.">Propofol (2,6-diisopropylphenol) is an applicable immersion anesthetic in the axolotl with potential uses in hemodynamic and neurophysiological experiments.</a> Regeneration (Oxford). 4 (3), 124-131 (2017).</li><li>Krogh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Progress+of+Physiology.">The Progress of Physiology.</a> The American Journal of Physiology. 90 (2), 243-251 (1929).</li></ol>

Omurilik yaralanma riski önemli olduğundan, protokolün kritik adımları spinous süreçleri kaldırarak ve gerekirse omurilik kanalına kemik erişimi genişletilmesi. Protokolde belirtildiği gibi, ilk olarak en kafatası işleminin kaldırılması şiddetle tavsiye edilir. Bu daha kaudal süreçler makas tarafından vurulduktan omurilik korumak anlamına gelecektir. Bu yeterli cerrahi erişim sağlamak için tavsiye edilir, çok küçük bir birincil kesi yapmak anlamına gelir. Ayrıca, bir şeyi forceps ile kavra...

Bu çalışmanın genel amacı, yenileyici omurilik yaralanması modeli üreten axolotl(Ambystoma mexicanum)künt ve keskin SCI vermek için kontrollü ve tekrarlanabilir bir mikrocerrahi yöntem oluşturmaktı.
SCI, düzeyi ve ölçüde bağlı olarak, bozulmuş mesane ve bağırsakkontrolü1 ile birlikte ekstremitelere nörolojik sakatlık inflicts ciddi bir durumdur,2,3. En SCI trafik kazaları gibi yüksek enerjik travma sonucu ve düşüyor4,5. Keskin yaralanmalar çok nadirdir. Bu nedenle, en sık görülen makroskopik yaralanma türü çürükler olduğunu.
Memeli merkezi sinir sistemi (CNS) non-rejeneratif doku, sci aşağıdaki nörolojik doku bu nedenle hiçbir restorasyon görülür6,7,8. Öte yandan, bazı hayvanların cns doku da dahil olmak üzere dokuları yenilemek için ilginç bir yeteneği var. Bu hayvanlardan biri axolotl. Bu yaygın rejeneratif biyoloji çalışmalarında kullanılan ve omurilik rejenerasyon ilgi, bir omurgalı olduğu için9,10,11,12.
Aksitotl en SCI çalışmaları ya tüm kuyruk ampütasyon veya omurilik9,10,11,12daha büyük bir bölümünün ablasyon olarak yapılır. Son zamanlarda, klinik durumları daha iyi taklit künt yaralanmalar13 yeni bir çalışma yayınlandı. Axolotl tam aparat amputasyonu tam rejenerasyon sonuçları ise, bazı non-ampütasyon tabanlı rejeneratif olaylar kritik boyut defekti bağlıdır (CSD)14,15. Bu, kritik eşiği aşan yaralanmaların yenilenolmadığı anlamına gelir. Daha yüksek klinik çevirideğerine sahip rejeneratif bir model geliştirmek için, bu çalışmada 2 mm künt travmanın CSD sınırını aşıp aşmayacağı araştırılmıştır.
Bu yöntem, özellikle axolotl küçük hayvan modellerinde omurilik rejenerasyonu üzerinde çalışan araştırmacılar için geçerlidir. Ayrıca, genel olarak küçük hayvanlarda kullanıma uygun bir künt travma mekanizması geliştirmek için standart laboratuvar ekipmanı kullanarak bir yol sergiler, çünkü daha genel ilgi olabilir.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>25 g custom falling rod</td>
			<td>custom home made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 mm PVC pipe</td>
			<td>custom home made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>67-64-1</td>
			<td>Propanone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Axolotl (Ambystoma mexicanum)</td>
			<td>Exoterra GmbH</td>
			<td>N/A</td>
			<td>12-22 cm and 10 g - 80 g, All strains (wildtype, melanoid, white, albino, transgenic white with GFP)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benzocain</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>94-09-7</td>
			<td>ethyl 4-aminobenzoate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electromaget</td>
			<td>custom home made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel 2010</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Excel 2010 or newer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td></td>
			<td>ImageJ 1.5e or newer. Rasband, W.S., ImageJ, U. S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA, https://imagej.nih.gov/ij/, 1997-2016.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>kimwipes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microsurgical instruments</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Forceps and scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS550s</td>
			<td>Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>MS550s</td>
			<td>40 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS700</td>
			<td>Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>MS700</td>
			<td>50 MHz center frequency, transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>any maker</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft cloth</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any piece of soft cloth measuring appromixately 70 x 55 cm^2 e.g. a dish towel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100</td>
			<td>Fujifilm, Visualsonics</td>
			<td>Vevo 2100</td>
			<td>High frequency ultrasound system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

contusion spinal cord injury via a microsurgical laminectomy in the regenerative axolotl

Bu çalışmanın amacı axolotl(Ambystoma mexicanum)standart ve tekrarlanabilir rejeneratif omurilik yaralanması modeli oluşturmaktır. Klinik omurilik yaralanmalarının çoğu yüksek enerjili künt travmalar olarak ortaya çıkar, kontüzyon yaralanmaları indükleyen. Ancak, axolotl omurilik teki çalışmaların çoğu keskin travmalarla yapılmıştır. Bu nedenle, bu çalışma daha klinik olarak ilgili rejeneratif bir model üretmeyi amaçlamaktadır. Hemen hemen her türlü dokuyu yenileme yetenekleri sayesinde, axolotls rejeneratif çalışmalarda model olarak yaygın olarak kullanılır ve omurilik yaralanması (SCI) çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu protokolde, axolotls bir benzocaine çözeltisi daldırma tarafından anestezi edilir. Mikroskop altında, açısal bir kesi sadece arka ekstremitelere kaudal bir düzeyde ikili olarak yapılır. Bu kesiden, spinous süreçleri incelemek ve ortaya çıkarmak mümkündür. Forceps ve makas kullanılarak, iki seviyeli laminektomi yapılır, omurilik açığa. Bir silindir düşen çubuk oluşan özel bir travma cihazı inşa edilir, ve bu cihaz omurilik bir çürük yaralanması neden olmak için kullanılır. Kesikler daha sonra dikilir ve hayvan anesteziden kurtulur. Cerrahi yaklaşım omuriliği ortaya çıkarmada başarılıdır. Travma mekanizması, histoloji, MRG ve nörolojik muayene ile doğrulanan, omurilik kontüzyon yaralanmaları üretebilir. Son olarak, omurilik yaralanma dan yeniler. Protokolün kritik adımı, omurilikte hasar vermeden spinous süreçleri kaldırmaktır. Bu adım, güvenli bir yordam sağlamak için eğitim gerektirir. Ayrıca, yara kapanması son derece kesi sırasında cilde gereksiz hasar vermemebağlıdır. Protokol, 12 hayvan üzerinde yapılan randomize bir çalışmada gerçekleştirildi.

Protokolün amacı, motor ve duyusal fonksiyonları yaralanmak için kaudal felç edecek bir SCI üretmektir. Aksitotl rejenerasyon yetkin olduğu için birkaç hafta içinde işlevini geri yükler ve araştırmacıların kısa bir süre içinde CNS rejenerasyonunu incelemelerine olanak sağlar.
Tüm hayvanlara 45 dakika anestezi sağlandı ve erken iyileşme atakları yaşanmadı. Tüm hayvanlar bir saat içinde kurtarıldı ve sonraki haftalarda anestezi hasar belirtisi gösterdi<sup class="...

Watch this Scientific Journal Video about Contusion Spinal Cord Injury via a Microsurgical Laminectomy in the Regenerative Axolotl at JoVE.com

Contusion Spinal Cord Injury via a Microsurgical Laminectomy in the Regenerative Axolotl

Bu el yazması cerrahi bir rejeneratif aksiyom(Ambystoma mexicanum)kontrollü künt ve keskin omurilik yaralanmaları inflicting için protokoller sunar.

Rejeneratif Axolotl'da Mikrocerrahi Laminektomi Ile Kontüzyon Omurilik Yaralanması

The purpose of this study is to establish a standardized and reproducible regenerative blunt spinal cord injury model in the axolotl (Ambystoma ...

Bu protokol axolotl omurilik rejenerasyon araştırmalarında standart kontüzyon tipi yaralanma tanıtmak için ilk. Bu tekniğin en büyük avantajı, günlük klinikte görülen travmayı taklit ederek gelecekteki bir bulgunun tercüme edilme olasılığını artırmasıdır. Çürük yaralanma cihazı omurilik yaralanması başka bir küçük hayvan modeli nde kullanılabilir.Cerrahi teknik zordur, özellikle laminektomi. Bu nedenle, in vivo cerrahi ilerlemeden önce hayvanların ex vivo çok sayıda prosedürü eğitmek için tavsiye edilir. Başlamak için, bir cerrahi tekstil bezi üstüne, bir stereo mikroskop altında standart bir Petri çanak yerleştirerek bir cerrahi tablo kurmak.Anestezili axolotl'ı Petri kabının üzerine yatkın bir pozisyonda yerleştirin ve kuyruğun açığa olması için kağıt havlulara sarın. Arka ekstremiteleri tanımlayın ve onlara sadece kaudal ilk kesi yapmak için mikro makas bir çift kullanın. Spinous süreçlerin kemik çıkıntısı hissedilene kadar omurgadan dikey kesi yapın.Kesiği yanal olarak genişletin, böylece kesi kuyruğun tüm genişliğini geçer ve uygun derinliği sağlamak için spinous prosesleri çertelerle kavrar. Daha sonra dikey kesiyi her iki taraftaki spinous işleminin bir milimetre altında genişletin. Bir tarafta hayvan yerleştirin ve dikey kesi ventral noktadan başlayarak, ağırlığı 10 ila 20 gram olan hayvanlar için yaklaşık 15 milimetre yatay bir kesi yapmak.Vertebral kolon orta hatta hissedilene kadar yatay kesi ile hemen incelemek için makas kullanın. Sonra diğer tarafa hayvan açın ve işlemi tekrarlayın. Her iki taraftan derin medial düzlemde diseksiyon sonra, iki yatay kesibağlamak için orta hattan inceleyin.Daha sonra, spinous süreçleri ortaya çıkarmak için kuyruk ve omurga serbest parçası bir tarafa taşıyın. Baş cerrahın baskın olmayan tarafına bakacak şekilde hayvanı yatkın bir konuma getirin ve dikenli süreçleri kavramak için bir çift çaksilik kullanın, sadece arka ekstremitelere kaudal. Hayvanın kafasına doğru hafifçe bir asansör uygulayın.Mikro makas bir çift bıçakları sürecin etrafında yatay yerleştirin ve yavaşça kes, omurilik açığa. Az önce kaldırılan ait olana doğru spinous proses kaudal'ı tutun ve işlemi tekrarlayın. Çıkarıldığında omurilik hasar vermez emin olmak için spinous süreci üzerinde sürekli bir asansör tutmak zorunludur.Maruz kalan alan yeterince geniş değilse, omuriliğin her iki tarafındaki laminayı kavramak için iki çift forseps kullanın ve hafif bir hareketle onları yanal olarak bükün. Spinous işlemini kaldırırken, bunu birden çok adımda yapmak gerekebilir. Bu nedenle, omurilik açığa birkaç dakika sürebilir.Bir kontüzyon tipi yaralanma tanıtmak için, travma birimine hayvan transfer ve omurilik üzerinde bir el feneri parlaklık için bir Petri çanak kullanın. Daha sonra, mikro ayarlayıcıları kullanarak maruz kalan omuriliğin üzerine kontüzyon travma ünitesi silindirini yerleştirin ve silindiri lamina ile aynı seviyeye gelene kadar indirin. Düşen çubuğu elektro mıknatısa takın ve istenilen düşen yükseklik ayar silindirini travma ünitesine yerleştirin.Daha sonra, düşen çubuğu silindirin üzerine yerleştirin, elektromıknatısı kapatıp çubuğu açıkta kalan omuriliğe bırakın ve çubuğu yukarı kaldırmak için yükseklik ayarlama vidasını kullanın. Keskin bir yaralanma tanıtıyorsanız, mükemmel bir dikey kesim omurilik kesmek, sonra vücudun kaudal tarafına iki milimetre kesikler tekrarlayın. Kesiklerin tamamlandığından emin olmak için omurilik kanalının ventral kısmı boyunca kazınan makanın bıçaklarını hissedin ve omurilik parçasını kanaldan kaldırın.Cerrahi yarayı kapatmak için, 10 nokta o naylon dikişleri yatay kesinin en kaudal kısmından bir tabaka halinde yaraları kapatArak ve kesiğin dikey kısmına doğru çalışarak yerleştirin. Bir açı yada, Petri kabını çevirin ve diğer yatay kesileri dikin, sonra dikey kesilere dikişler yerleştirin. Anesteziyi sonlandırmadan önce, yaralanmanın görüntülerini elde etmek için yüksek frekanslı ultrason kullanın.Dönüştürücünün ucunu hayvanın uzunluk ekseni ile hizalayın ve hayvanın arka ekstremitelerinin arkasındaki omurganın sadece birkaç milimetre yukarısına kadar benzocaine çözeltisine batırın. Yaralanma bölgesini belirleyin ve el yazması talimatlara göre resimler elde edin. Bittiğinde, petri kabını beş santimetre derin tatlı suya batırarak ve hayvanın kaymasını sağlayarak axolotl'ı anesteziiçermeyen çözeltiye geri döndürün.Bu protokol kullanılarak oluşturulan omurilik yaralanmaları yaralı ve sahte aksokolotllarda hematoksilin ve eozin boyama kullanılarak doğrulandı. Rejenerasyonu doğrulamak için, histolojik bölümler yaralanma dan dokuz hafta sonra hazırlandı. Görüntülerde yaralı hayvanlarda yeniden kurulan omurilik bağlantısı ortaya çıktı.Yaralanma ve yenilenme de nörolojik fonksiyonu inceliyoruz. Kuyruğun uyarılmasıiçin hayvanın tepkisi daha yüksek dokunsal ve nosiseptif duyusal fonksiyonları gösteren daha yüksek puanlar ile puanlandı. Yaralı hayvanlar arasında, nörolojik fonksiyon kaybı üç hafta sonra yaralanma, ve dokuz hafta içinde kademeli bir restorasyon oldu.Omurilik yaralanması da ultrasonik grafik görüntüleme kullanılarak görselleştirilmiş, hangi damar bütünlüğünün bir belirteç olarak dorsal arter görselleştirilmesi için izin. Hi-field MRG taramaları yaralanmadan hemen sonra ve üç, altı ve dokuz hafta uygulandı. Bu taramalar ödem ve omurilik bütünlüğünün restorasyonu görselleştirmek başardık.Taramalar hemen yaralanma sonrası, gürültüeğilimli idi. Hasta ve titiz cerrahi omurilik erken hasar olmadan laminektomi sonrası başarılı bir sonuç için önünü açacaktır. Bu işlemden sonra görüntüleme ve elektrofizyolojik teknikler gibi çeşitli in vivo yöntemler uygulanabilir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Sıçanlarda Spinal Kord Yaralanma sonrası Akut ve Kronik Dokunsal Duyu Testi

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

Sonsuz Horizon Darbeli kullanarak tek taraflı Servikal Spinal Kord Yaralanması bir Contusive Modeli

While the majority of human spinal cord injuries occur in the cervical spinal cord, the vast majority of laboratory research employs animal models of ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Sıçanlarda Şiddetli Spinal Kord Yaralanması bir bere modeli

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Evaluation of Respiratory Muscle Activation Using Respiratory Motor Control Assessment (RMCA) in Individuals with Chronic Spinal Cord Injury

Evaluation of Respiratory Muscle Activation Using Respiratory Motor Control Assessment RMCA in Individuals with Chronic Spinal Cord Injury

Kronik Spinal Kord Yaralanması Bireylerde Solunum Motor Kontrol Değerlendirmesi (RMCA) kullanarak Solunum Kas Aktivasyon Değerlendirilmesi

During breathing, activation of respiratory muscles is coordinated by integrated input from the brain, brainstem, and spinal cord. When this coordination ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

A Radyo-telemetrik Sistemi Omurilik transeksiyonu ve Embriyonik Nöral Hücre Greftler Kök Sıçanlarda Kardiyovasküler Fonksiyonu Monitör

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Contusive Model of Spinal Cord Injury

Omurilik Yaralanması Deneysel Kontuzif Modelinde Sinir Kök Hücre Nakli

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can ...

Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury

Omurilik Sıkıştırma Yaralanma Kalibre Forseps Modeli

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The ...

Contrast Enhanced Ultrasound Imaging for Assessment of Spinal Cord Blood Flow in Experimental Spinal Cord Injury

Deneysel Spinal Kord Yaralanmalarında Omurilik Kan Akımının Değerlendirilmesi için geliştirilmiş Ultrason Görüntüleme Kontrast

Reduced spinal cord blood flow (SCBF) (i.e., ischemia) plays a key role in traumatic spinal cord injury (SCI) pathophysiology and is accordingly an ...

Photothrombosis-induced Focal Ischemia as a Model of Spinal Cord Injury in Mice

Farelerde Omurilik Yaralanma Modeli Olarak Odak iskemisi Fototromboz kaynaklı

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) ...