Name: isolation and characterization of extracellular vesicles produced by iron-limited mycobacteria
Uploaded: 2019-10-31T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles Produced by Iron-limited Mycobacteria at JoVE.com

אנחנו אסירי תודה לרפאל prados-rosales עבור שיתוף anti-mev קטריולוגיה ו navneet dogra לביצוע ניתוח מעקב ננו-חלקיק.

1. הכנת ברזל מוגדר מידי המדיום
<ol><li>להכין 1 L של בינונית מינימלית (MM) על ידי המסת 5 גרם של KH2PO4, 5 g של L-אספרגין, 20 מ ל של גליצרול, ו 2 גרם של דקסטרוז ב 900 ml של מים מוהים במיכל פלסטיק. להימנע זכוכית כדי למנוע זיהום ברזל. כוונן את ה-pH ל 6.8 עם 5 N NaOH ונפח ל 1 L עם מים.</li>
	<li>הוסף 50 g של שרף מתכת הכלף (M...

<ol>
	<li>Prados-Rosales, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycobacteria+release+active+membrane+vesicles+that+modulate+immune+responses+in+a+TLR2-dependent+manner+in+mice.">Mycobacteria release active membrane vesicles that modulate immune responses in a TLR2-dependent manner in mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 121, 1471-1483 (2011).</li><li>Gupta, S., Rodriguez, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycobacterial+extracellular+vesicles+and+host+pathogen+interactions.">Mycobacterial extracellular vesicles and host pathogen interactions.</a> Pathogens and Disease. 76 (4), (2018).</li><li>Athman, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+Membrane+Vesicles+Mediate+the+Release+of+Mycobacterium+tuberculosis+Lipoglycans+and+Lipoproteins+from+Infected+Macrophages.">Bacterial Membrane Vesicles Mediate the Release of Mycobacterium tuberculosis Lipoglycans and Lipoproteins from Infected Macrophages.</a> Journal of Immunology. 195, 1044-1053 (2015).</li><li>Athman, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycobacterium+tuberculosis+Membrane+Vesicles+Inhibit+T+Cell+Activation.">Mycobacterium tuberculosis Membrane Vesicles Inhibit T Cell Activation.</a> Journal of Immunology. 198, 2028-2037 (2017).</li><li>Rath, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+regulation+of+vesiculogenesis+and+immunomodulation+in+Mycobacterium+tuberculosis.">Genetic regulation of vesiculogenesis and immunomodulation in Mycobacterium tuberculosis.</a> Proceedings of the National Academy of Science U.S.A. 110, E4790-E4797 (2013).</li><li>White, D. W., Elliott, S. R., Odean, E., Bemis, L. T., Tischler, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycobacterium+tuberculosis+Pst/SenX3-RegX3+Regulates+Membrane+Vesicle+Production+Independently+of+ESX-5+Activity.">Mycobacterium tuberculosis Pst/SenX3-RegX3 Regulates Membrane Vesicle Production Independently of ESX-5 Activity.</a> mBio. 9, pii 00778 (2018).</li><li>Dauros Singorenko, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+membrane+vesicles+from+prokaryotes:+a+technical+and+biological+comparison+reveals+heterogeneity.">Isolation of membrane vesicles from prokaryotes: a technical and biological comparison reveals heterogeneity.</a> Journal of Extracellular Vesicles. 6, 1324731 (2017).</li><li>Prados-Rosales, R., Brown, L., Casadevall, A., Montalvo-Quiros, S., Luque-Garcia, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+identification+of+membrane+vesicle-associated+proteins+in+Gram-positive+bacteria+and+mycobacteria.">Isolation and identification of membrane vesicle-associated proteins in Gram-positive bacteria and mycobacteria.</a> MethodsX. 1, 124-129 (2014).</li><li>Prados-Rosales, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+for+Mycobacterium+tuberculosis+membrane+vesicles+in+iron+acquistion.">Role for Mycobacterium tuberculosis membrane vesicles in iron acquistion.</a> Journal of Bacteriology. 196, 1250-1256 (2014).</li><li>Sanders, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Laboratory+Techniques:+Plating+Methods.">Aseptic Laboratory Techniques: Plating Methods.</a> Journal of Visualized Experiments. 63, e3064 (2012).</li><li>Harlow, E., Lane, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Antibodies. A laboratory manual. , (1988).</li><li>Lotvall, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimal+experimental+requirements+for+definition+of+extracellular+vesicles+and+their+functions:+a+position+statement+from+the+International+Society+for+Extracellular+Vesicles.">Minimal experimental requirements for definition of extracellular vesicles and their functions: a position statement from the International Society for Extracellular Vesicles.</a> Journal of Extracellular Vesicles. 3, 26913 (2014).</li></ol>

שיטות מרובות כדי לטהר תא איקריוטית הנגזרות המפותחות התפתחו12. לעומת זאת, יש מידע מוגבל על שיטות יעילות כדי לטהר חיידקים נגזר EVs7. בידוד יעיל של Mtb נגזר EVs צריך לשקול את הקשיים הפנימיים בגידול זה פטרת הפתוגני. Mtb יש זמן חלוקה ארוכה (~ 24 שעות) ויש לטפל ברמת בטיחות שלושה (BSL...

מסחטות של פטרת שלפוחיות (MEVs) הם חלקיקים מאוגדים קרום, 60-300 ננומטר בגודל, באופן טבעי שוחרר על ידי מהיר-ו-לאט גדל בקטריה מפטרת1. Mevs שוחרר על ידי חיידקים פתוגניים מהווים מנגנון לאינטראקציה עם המארח באמצעות חלבונים פעילים חיסוני, שומנים, ו גליקולפידים מופרש באופן מרוכז ומוגן2,3,4. כדי לאפיין MEVs ולהבין הביוגנזה שלהם פונקציות, שיטות קפדניות ויעילות של שלפוחית השמש והאימות הם קריטיים. עד כה, mevs מבודדים מן filtrates תרבות של פטרת גדל בינוני עשיר ברזל1,5,6,7,8.
עם זאת, העבודה הקודמת הוכיחה כי מגבלת ברזל מעוררת במידה רבה שחרור שלפוחית ב Mtb, אולי כדי ללכוד ברזל דרך פטרת, siderophore מופרש MEVs9. למרות ההליכים עבור MEVs בידוד מ Mtb תרבותי בינוני ברזל גבוה תוארו, מתודולוגיה יעילה להשיג MEVs מתרבויות ברזל נמוך לא דווחו. לכן, המטרה של שיטה זו היא לבודד, לטהר, ולכמת mevs שהתקבלו מתרבויות ברזל נמוך, כך שהם יכולים לשמש עבור בחני הביוכימי ופונקציונלי לניתוח של דטרמיניזם גנטי של ייצור שלפוחית לפוחית ב בקטריה.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amicon stirred cell Model 108</td>
			<td>EMD Milipore</td>
			<td>UFSC40001</td>
			<td>Cell Ultrafiltration system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Polypropilene 225 ml conical tubes</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>05-538-61</td>
			<td>Conical centrifuge tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomax 100-kDa cut-off ultrafiltration membrane</td>
			<td>EMD Milipore</td>
			<td>PBHK07610</td>
			<td>Ultrafiltration membrane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chelex-100 resin</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>142-2842</td>
			<td>Metal chelating resin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Middlebrook 7H10 Agar</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>262710</td>
			<td>Mycobacterial Agar plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Middlebrook 7H9 Broth</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>271310</td>
			<td>Mycobacterial broth medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitro cellulose blotting membrane</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>10600001</td>
			<td>Blotting Membrane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optiprep</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1556</td>
			<td>Iodixanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate ultra centrifugation tubes 25 x 89 mm</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>355618</td>
			<td>Polycarbonate ultra centrifugation tubes 25 x 89 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene thin walled centrifuge tube 13x15 mm</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>344059</td>
			<td>Polypropylene thin walled centrifuge tube 13x15 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein Assay dye</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>5000006</td>
			<td>Bradford Protein Staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYPRO Ruby</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>S12000</td>
			<td>Ultrasensitive protein stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TMA-DPH</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>T204</td>
			<td>1-(4-Trimethylammoniumphenyl)-6-Phenyl-1,3,5-Hexatriene p-Toluenesulfonate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum filtration flasks</td>
			<td>CellPro</td>
			<td>V50022</td>
			<td>Filter Unit</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and characterization of extracellular vesicles produced by iron-limited mycobacteria

בקטריה, כולל שחפת של פטרת (Mtb), הסוכן סיבתי של שחפת האדם, שחרור באופן טבעי ושלפוחיות (EVs) המכיל מולקולות פעילות חיסונית. ידע בנוגע למנגנון המולקולרי של שלפוחית הביוגנזה, התוכן של שלפוחיות, והתפקודים שלהם בממשק מארח הפתוגן הוא מאוד מוגבל. טיפול בשאלות אלה דורש הליכים קפדניים לבידוד, טיהור ואימות של EVs. בעבר, הפקת שלפוחית הייצור היתה משופרת כאשר M. שחפת נחשף הגבלה ברזל, מצב שנתקל Mtb בסביבה המארחת. מוצג כאן הוא פרוטוקול מלא ומפורט כדי לבודד ולטהר EVs מן הברזל מלקוי של ברזל. שיטות כמותיים ואיכותניות מוחלות על אימות EVs מטוהרים.

MEVs היו מטוהרים על ידי משקעי שיפוע דיפרנציאלי במילוי צפיפות (איור 1, איור 2). תחת התנאים שתוארו, MEVs מופרדים בעיקר השבר הדרגתי 3 (F3), אשר מתאים 25% יודיקסנול. מסקנה זו מבוססת על זיהוי חלבון, השומנים הממברנה, ויזואליזציה מיקרוסקופיים של MEVs שלמים, הת...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles Produced by Iron-limited Mycobacteria at JoVE.com

Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles Produced by Iron-limited Mycobacteria

שחפת של פטרת מראה הפקה מוגברת ושחרור של ושלפוחיות של מסחטות בתגובה לתנאי ברזל נמוך. עבודה זו מפרטת פרוטוקול ליצירת תנאי ברזל נמוך ושיטות לטיהור ואפיון של שלפוחיות ומסחטות בקטריאליים שפורסמו בתגובה למחסור בברזל.

בידוד ואפיון מסחטות ושלפוחיות מתוצרת ברזל-בקטריה מוגבלת

Mycobacteria, including Mycobacterium tuberculosis (Mtb), the causative agent of human tuberculosis, naturally release extracellular vesicles (EVs) ...

שיטה זו מאפשרת culturing שחפת Mycobacterium בתנאי ברזל נמוכים קפדניים וטיהור וריתי קרום מן הסינון תרבות ברזל נמוכה. מכיוון שמגבלת הברזל ידועה כמעוררת ייצור ורירית הממברנה, פרוטוקול זה מניב שפע גבוה של ורי ורי ממברנה טהורים שניתן לנצל לצורך בדיקות ביוכימיות או תפקודיות נוספות. כאשר אנו מדגימים את הפרוטוקול באמצעות Smegmatis Mycobacterium, הזן הלא ארסי, פרוטוקול זה יכול להיות אחריו במתקני BSL-2 באמצעות שחפת Mycobacterium, הזן ארסי.כדי להתחיל, להכין ליטר אחד של מדיום מינימלי על ידי המסת חמישה גרם של מונופוטזיום פוספט, חמישה גרם של L-אספרגן, 20 מיליליטר של גליצרול, ושני גרם של דקסטרוז ב 900 מיליליטר של מים deionized במיכל פלסטיק. כוונן את ה- pH ל- 6.8 עם חמישה נתרן הידרוקסידי רגיל והתאם את הנפח לליטר אחד עם מים לא מיונים. לאחר מכן מוסיפים 50 גרם של שדון כלאט מתכת בעדינות להתסיס באמצעות מוט ערבוב מגנטי במשך 24 שעות בארבע מעלות צלזיוס.למחרת, להפסיק את ערבוב ולתת את המזרק שף במשך כ 30 דקות. לעקר ולהסיר את השדר הנותר מהפתרון על ידי סינון באמצעות יחידת סינון 22 מיקרון עם מקלט פלסטיק. עכשיו, תוספת בינונית מינימלית עם 0.5 מיליגרם לליטר אבץ כלורי, 40 מיליגרם לליטר מגנזיום גופרתי, ו 0.1 מיליגרם לליטר של סולפט מנגן.לחסן מושבה אחת של MTB בשני מיליליטר של מדיום מרק mycobacterial בתוספת העשרה ADN. דגירה עם תסיסה ב 37 מעלות צלזיוס. כאשר יש צמיחה גלויה, לחלץ שני מיליליטר של התרבות ולמדוד את OD 540 על ספקטרופוטומטר.הפסק את הדגירה כאשר OD 540 מגיע ל- 0.8 המציין את השלב הלוגיתמי המאוחר. מורחים 200 מיקרוליטרים של התרבות הלוגאריתמית המאוחרת על לוחות אגר מיקובקטריאליים בתוספת 0.2 גליצרול, 0.5% Tween 80 ו- ADN. לחסן לפחות חמש צלחות.הדגירה את הצלחות ב 37 מעלות צלזיוס. ואחרי שבוע, צמיחת החיידקים נראית כשכבה נוחה. ואז להרטיב צמר גפן סטרילי במדיום מינימאלי ברזל נמוך.השתמש ספוגית זו כדי לאסוף חיידקים מצלחות אגר. לחסן את החיידקים ב 100 מיליליטר של ברזל נמוך מדיה מינימלית בצינור. לאסוף חיידקים מספיק כדי להכין השעיה עם OD 540 של אחד.מדללים את ההשעיה 10 פעמים לליטר אחד עם ברזל נמוך בינוני מינימלי ומחלקים אותו לשני בקבוקי פלסטיק סטריליים. לאחר מכן, להעביר שני מיליליטר של התרבות לצינור תרבות חמישה מיליליטר. הוסף 10 מיקרוליטרים של 10%volume לפי tyloxapol נפח.הדגירה את התרבויות ב 37 מעלות צלזיוס במשך 14 ימים. מעבירים את התרבות לחמישה צינורות צנטריפוגה חרוטיים 225 מיליליטר וצנטריפוגה ב 2, 850 פעמים g במשך שבע דקות ב 20 מעלות צלזיוס. לאסוף את התרבות supernatant עם פיפטה 50 מיליליטר ולסנן לעקר אותו באמצעות מסנן 0.22 מיקרון.כדי לבודד MEVs, להעביר את סינון התרבות לתוך מערכת אולטרה סינון תאים מעורבב ממוקם בארבע מעלות צלזיוס ולסנן את הריכוז בלחץ פחות מ 50 PSI דרך קרום ניתוק 100 קילודלטון. ואז צנטריפוגה התרבות המרוכזת לסינון ב 15, 000 פעמים גרם במשך 15 דקות בארבע מעלות צלזיוס ולאסוף את supernatant בצינורות אולטרה צנטריפוגה פוליקרבונט. צנטריפוגה supernatant ב 100, 000 פעמים גרם במשך שעתיים בארבע מעלות צלזיוס.לאחר מכן, להסיר את supernatant ולתלות מחדש את כדורי קרום בסך הכל מיליליטר אחד של PBS סטרילי על ידי צינורות עדינים. מערבבים 0.5 מיליליטר של ההשעיה גלולה עם 1.5 מיליליטר של 60% פתרון יודיקסנול בחלק התחתון של צינור אולטרה צנטריפוגה דק פוליפרופילן מוקף חומה. שכבת-על זו MVE iodixanol 45%ההשעיה עם מיליליטר אחד של 40%35%30%25%ו 20%iodixanol פתרונות אחד של PBS בחלק העליון.צנטריפוגה ב 100, 000 פעמים g במשך 18 שעות בארבע מעלות צלזיוס. לאחר מכן, השתמש במזרק המילטון מיליליטר אחד כדי לאסוף את שברי שיפוע צפיפות מיליליטר אחד החל מלמעלה. לדלל כל שבר שנאסף ל 20 מיליליטר עם PBS וצנטריפוגה ב 100, 000 פעמים g במשך שעתיים בארבע מעלות צלזיוס.הסר את supernatant ו resuspend ב 0.5 מיליליטר של PBS. אחסן את הצינורות בארבע מעלות צלזיוס. כדי לבצע ניתוח שומנים בקרום, לשלב 10 microliters של כל שבר שיפוע עם בדיקה קרום פלואורסצנטי TMA-DPH בריכוז סופי של מיקרוגרם אחד למיליליטר ב 50 microliters של PBS בכל באר של צלחת שחורה 96 היטב.הדגירה את הצלחות ב 33 מעלות צלזיוס במשך 20 דקות. למדוד את הפלואורסצנטיות ב 360 ננומטר עבור העירור ו 430 ננומטר עבור פליטה. בפרוטוקול זה, MEVs טוהרו על ידי מעים דיפרנציאליים במילוי הדרגתי של צפיפות.תחת התנאים המתוארים, MEVs הופרדו בעיקר בשבר שיפוע שלוש אשר תואם 25%iodixanol. חלבונים הקשורים ל- Vesicle התרכזו בשבריר שלוש המוצג על ידי ניתוח כתמי נקודה. כתמים שליליים אישרו גם את נוכחותם של כלי רכב חשמליים בשבר שלוש וניתוח חלקיקים הראה שגודל ה- MEV היה בסביבות 100 ננומטר.ריכוז החלבון ושומנים מנורמל ליחידות יוצרות המושבה הראה עלייה של כשמונה פעמים של תפוקת MEV בברזל נמוך ביחס לתנאי ברזל גבוהים. ניתוח כתם נקודה הראה אות אינטנסיבי יותר מסמנים הקשורים ל- MEV בשברים הדרגתיים בצפיפות מתרבות MTB מוגבלת מברזל מאשר מתרבויות MTB מספיקות מברזל. בצע את ההוראות להכנת המדיום המינימלי כדי להבטיח תנאים מוגבלים ברזל ולמנוע זיהום של ורידים קרום עם אגרגטים lipoprotein.ורי הווסיקים הממברניים המטוהרים באופן זה יכולים לשמש לאפיון ביוכימי וניתוח תפקודי.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Analysis of the Epithelial Damage Produced by Entamoeba histolytica Infection

Analysis of the Epithelial Damage Produced by Entamoeba histolytica Infection

ניתוח של נזק אפיתל הופק על ידי<em&gt; Histolytica Entamoeba</em&gt; זיהום

Entamoeba histolytica is the causative agent of human amoebiasis, a major cause of diarrhea and hepatic abscess in tropical countries. Infection is ...

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps (NETs) Isolation and Handling

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps NETs Isolation and Handling

פשוטה מלכודות תאיות נויטרופילים אדם בידוד (רשתות) וטיפול

Neutrophil Extracellular Traps (NETs) have been recently identified as part of the neutrophil&#8217;s antimicrobial armamentarium. Apart from their role ...

Isolation and Characterization of Neutrophils with Anti-Tumor Properties

בידוד ואפיון של נויטרופילים עם תכונות אנטי-סרטניים

Neutrophils, the most abundant of all white blood cells in the human circulation, play an important role in the host defense against invading ...

Isolation and Flow Cytometric Characterization of Murine Small Intestinal Lymphocytes

אפיון בידוד תזרים Cytometric של Murine קטנים מעיים לימפוציטים

The intestines &#8212; which contain the largest number of immune cells of any organ in the body &#8212; are constantly exposed to foreign antigens, both ...

Characterization of Human Monocyte-derived Dendritic Cells by Imaging Flow Cytometry: A Comparison between Two Monocyte Isolation Protocols

אפיון של תאי דנדריטים אדם נגזר מונוציטים ידי cytometry זרימת הדמיה: השוואה בין שני פרוטוקולי בידוד מונוציטים

Dendritic cells (DCs) are antigen presenting cells of the immune system that play a crucial role in lymphocyte responses, host defense mechanisms, and ...

Phenotypic Characterization of Macrophages from Rat Kidney by Flow Cytometry

אפיון פנוטיפי של מקרופאגים כליה עכברוש ידי cytometry זרימה

There is increasing evidence suggesting the important role of inflammation and, subsequently, macrophages in the development and progression of renal ...

Flow Virometry to Analyze Antigenic Spectra of Virions and Extracellular Vesicles

זרימה Virometry לנתח אנטיגני ספקטרה של virions ואת תאי שלפוחית

Cells release small extracellular vesicles (EVs) into the surrounding media. Upon virus infection cells also release virions that have the same size of ...

Isolation, Characterization, and Purification of Macrophages from Tissues Affected by Obesity-related Inflammation

בידוד, אפיון, טיהור של מקרופאגים רקמות מושפעות על ידי דלקת הקשורות להשמנת יתר

Obesity promotes a chronic inflammatory state that is largely mediated by tissue-resident macrophages as well as monocyte-derived macrophages. ...

Isolation and Characterization of Neutrophil-derived Microparticles for Functional Studies

בידוד ואפיון של נויטרופילים, נגזר Microparticles ללימודי פונקציונלי

Polymorphonuclear neutrophil-derived microparticles (PMN)-MPs) are lipid bilayer, spherical microvesicles with sizes ranging from 50&#8211;1,000 nm in ...

Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles from Adult Schistosoma japonicum

Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles from Adult Schistosoma japonicum

בידוד ושלפוחיות אפיון של חוץ-תאית מן הבוגרים עלקת הבילהרציה japonicum

Extracellular vesicles (EVs) are membranous vesicles released by a variety of cells into the extracellular microenvironment. EVs represent a population of ...