Name: lab-on-a-cd platform for generating multicellular three-dimensional spheroids
Uploaded: 2019-11-07T12:30:00
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这项研究得到了NRF基础科学研究计划（2016R1D1A1B03934418）和生物与医疗技术发展计划（2018M3A9H1023141）的支持，并由韩国政府MSIT资助。

1. 离心微流体基球体 （CMS） 培养芯片制造
<ol><li>通过数控加工为 CMS 培养芯片的顶层和底层制作 PC 模具。图1给出了芯片的详细尺寸。</li>
	<li>以 10：1 （w/w） 的比例将 PDMS 底座和 PDMS 固化剂混合 5 分钟，并在干燥器中放置 1 小时以去除气泡。</li>
	<li>将 PDMS 混合物倒入 CMS 培养芯片的模具后，再去除气泡 1 小时，并在 80°C 的热室中固化 2 小时。</li>
	<li>将它们放入真空等?...

<ol>
	<li>Ravi, M., Paramesh, V., Kaviya, S. R., Anuradha, E., Paul Solomon, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+cell+culture+systems:+Advantages+and+applications.">3D cell culture systems: Advantages and applications.</a> Journal of Cellular Physiology. 230 (1), 16-26 (2015).</li><li>Tung, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+3D+spheroid+culture+and+drug+testing+using+a+384+hanging+drop+array.">High-throughput 3D spheroid culture and drug testing using a 384 hanging drop array.</a> Analyst. 136 (3), 473-478 (2011).</li><li>Sutherland, R., Carlsson, J., Durand, R., Yuhas, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spheroids+in+Cancer+Research.">Spheroids in Cancer Research.</a> Cancer Research. 41 (7), 2980-2984 (1981).</li><li>Korff, T., Krauss, T., Augustin, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+spheroidal+culture+of+cytotrophoblast+cells+mimics+the+phenotype+and+differentiation+of+cytotrophoblasts+from+normal+and+preeclamptic+pregnancies.">Three-dimensional spheroidal culture of cytotrophoblast cells mimics the phenotype and differentiation of cytotrophoblasts from normal and preeclamptic pregnancies.</a> Experimental Cell Research. 297 (2), 415-423 (2004).</li><li>Yaman, S., Anil-Inevi, M., Ozcivici, E., Tekin, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+force-based+microfluidic+techniques+for+cellular+and+tissue+bioengineering.">Magnetic force-based microfluidic techniques for cellular and tissue bioengineering.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 6, (2018).</li><li>Lin, R. Z., Chang, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+three-dimensional+multicellular+spheroid+culture+for+biomedical+research.">Recent advances in three-dimensional multicellular spheroid culture for biomedical research.</a> Biotechnology Journal. 3 (9-10), 1172-1184 (2008).</li><li>Cesarz, Z., Tamama, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spheroid+Culture+of+Mesenchymal+Stem+Cells.">Spheroid Culture of Mesenchymal Stem Cells.</a> Stem Cells International. 2016, (2016).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+spheroid+culture+of+human+umbilical+cord+mesenchymal+stem+cells+promotes+cell+yield+and+stemness+maintenance.">Three-dimensional spheroid culture of human umbilical cord mesenchymal stem cells promotes cell yield and stemness maintenance.</a> Cell and Tissue Research. 360, 297-307 (2015).</li><li>Yamaguchi, Y., Ohno, J., Sato, A., Kido, H., Fukushima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell+spheroids+exhibit+enhanced+in-vitro+and+in-vivo+osteoregenerative+potential.">Mesenchymal stem cell spheroids exhibit enhanced in-vitro and in-vivo osteoregenerative potential.</a> Bmc Biotechnology. 14 (1), 105 (2014).</li><li>Koh, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Centrifugal+microfluidic+platform+for+ultrasensitive+detection+of+botulinum+toxin.">Centrifugal microfluidic platform for ultrasensitive detection of botulinum toxin.</a> Analytical Chemistry. 87 (2), 922-928 (2015).</li><li>Steigert, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+hemoglobin+measurement+on+a+centrifugal+microfluidic+platform+for+point-of-care+diagnostics.">Direct hemoglobin measurement on a centrifugal microfluidic platform for point-of-care diagnostics.</a> Sensors and Actuators, A: Physical. 130-131, 228-233 (2006).</li><li>Park, Y. -. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fully+automated+centrifugal+microfluidic+device+for+ultrasensitive+protein+detection+from+whole+blood.">Fully automated centrifugal microfluidic device for ultrasensitive protein detection from whole blood.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), e1 (2016).</li><li>Lee, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-in-one+centrifugal+microfluidic+device+for+size-selective+circulating+tumor+cell+isolation+with+high+purity.">All-in-one centrifugal microfluidic device for size-selective circulating tumor cell isolation with high purity.</a> Analytical Chemistry. 86 (22), 11349-11356 (2014).</li><li>Gorkin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Centrifugal+microfluidics+for+biomedical+applications.">Centrifugal microfluidics for biomedical applications.</a> Lab on a Chip. 10 (14), 1758-1773 (2010).</li><li>Park, J., Lee, G. H., Yull Park, J., Lee, J. C., Kim, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypergravity-induced+multicellular+spheroid+generation+with+different+morphological+patterns+precisely+controlled+on+a+centrifugal+microfluidic+platform.">Hypergravity-induced multicellular spheroid generation with different morphological patterns precisely controlled on a centrifugal microfluidic platform.</a> Biofabrication. 9 (4), (2017).</li><li>Rocca, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barium+titanate+nanoparticles+and+hypergravity+stimulation+improve+differentiation+of+mesenchymal+stem+cells+into+osteoblasts.">Barium titanate nanoparticles and hypergravity stimulation improve differentiation of mesenchymal stem cells into osteoblasts.</a> International Journal of Nanomedicine. 10, 433-445 (2015).</li><li>Genchi, G. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypergravity+stimulation+enhances+PC12+neuron-like+cell+differentiation.">Hypergravity stimulation enhances PC12 neuron-like cell differentiation.</a> BioMed Research International. 2015, (2015).</li><li>Bhatia, S. N., Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+organs-on-chips.">Microfluidic organs-on-chips.</a> Nature Biotechnology. 32 (8), 760-772 (2014).</li></ol>

CMS 是一个封闭的系统，所有注入的细胞进入微井时无浪费，使其比传统的基于微井的球形生成方法更高效、更经济。在 CMS 系统中，介质每 12~24 小时通过一个吸孔进行更换，该吸孔设计用于移除芯片中的介质（图 3A）。在介质吸入过程中，由于介质与微井壁之间的表面张力，几乎没有任何介质从微井内部逸出。用户可以通过用手指在芯片的微井区域附近按压，轻松移除被困...

与二维（2D）细胞培养（例如，常规培养皿细胞培养）相比，使用三维（3D）球形细胞培养法在体内微环境中模拟生物更容易，从而产生更生理上逼真的实验结果1.目前可用的球形形成方法包括悬滴技术2、液体覆盖技术3、卡博基甲基纤维素技术4、磁力微流体技术5、使用生物反应器6.尽管每种方法都有其自身的优点，但还需要进一步提高可重复性、生产率和生成共培养球体。例如，虽然基于磁力的微流体技术5相对便宜，但必须仔细考虑强磁场对活细胞的影响。球体培养的好处，特别是在研究中细胞分化和增殖，已经报告在几项研究7，8，9。
离心微流体系统，也称为CD实验室（光盘），可用于轻松控制内部流体和利用基板的旋转，因此已用于生物医学应用，如免疫测定10，用于检测生化标记物11的色度测定、核酸扩增 （PCR） 测定、自动血液分析系统12和一体离心微流体装置13。控制流体的驱动力是旋转产生的向心力。此外，只需在这个单 CD 平台中，即可完成混合、val 和样品拆分的多种功能。然而，与上述生化分析方法相比，将CD平台应用于培养细胞，特别是球体14的试验较少。
在这项研究中，通过单一培养或人类脂肪衍生干细胞（hASC）和人肺成纤维细胞（MRC-5）的单培养或共培养，展示了离心微流体基球体（CMS）系统的性能。本文详细介绍了我们小组的研究方法15。因此，在CD上的球形培养实验室平台可以很容易地复制。介绍了一种CMS生成系统，包括CMS培养芯片、芯片支架、直流电机、电机安装和旋转平台。电机支座为 3D 打印，印有丙烯酰胺苯乙烯 （ABS）。芯片架和旋转平台是数控（计算机数控）与PC（聚碳酸酯）一起加工的。通过编码基于脉冲宽度调制的 PID（比例积分-衍生物）算法，电机的转速从 200 rpm 控制在 200 到 4，500 rpm。其尺寸为 100 mm x 100 mm x 150 mm，重量为 860 g，易于操作。使用CMS系统，可以在1 x g到521 x g的各种重力条件下生成球体，因此在高重力下细胞分化促进的研究可以从2D细胞16、17扩展到3D。球体。各类细胞的共生也是有效模拟体内环境的关键技术。CMS 系统可以轻松生成单一培养球体，以及各种结构类型（例如同心、Janus 和三明治）的共培养球体。CMS系统不仅可用于简单的球形研究，还可用于3D有机体研究，以考虑人体器官结构。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1056px;" width="1056">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">3D printer</td>
			<td style="width:171px;">Cubicon</td>
			<td style="width:124px;">3DP-210F</td>
			<td style="width:416px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Adipose-derived mesenchymal stem cells (hASC)</td>
			<td style="width:171px;">ATCC</td>
			<td style="width:124px;">PCS-500-011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Antibiotic-Antimycotic</td>
			<td style="width:171px;">Gibco</td>
			<td style="width:124px;">15240-062</td>
			<td>Contained 1% of completed medium and buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">CellTracker Green CMFDA</td>
			<td style="width:171px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:124px;">C2925</td>
			<td>10 mM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">CellTracker Red CMTPX</td>
			<td style="width:171px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:124px;">C34552</td>
			<td>10 mM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Computer numerical control (CNC) rotary engraver</td>
			<td style="width:171px;">Roland DGA</td>
			<td style="width:124px;">EGX-350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">DC motor</td>
			<td style="width:171px;">Nurielectricity Inc.</td>
			<td style="width:124px;">MB-4385E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Dimethylsulfoxide (DMSO)</td>
			<td style="width:171px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:124px;">D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Dulbecco&#39;s modified eaggle&#39;s medium (DMEM)</td>
			<td style="width:171px;">ATCC</td>
			<td style="width:124px;">30-2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Dulbecco&#39;s phosphate buffered saline (D-PBS)</td>
			<td style="width:171px;">ATCC</td>
			<td style="width:124px;">30-2200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Fetal bovine serum</td>
			<td style="width:171px;">ATCC</td>
			<td style="width:124px;">30-2020</td>
			<td>Contained 10% of completed medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">human lung fibroblasts (MRC-5)</td>
			<td style="width:171px;">ATCC</td>
			<td style="width:124px;">CCL-171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Inventor 2019</td>
			<td style="width:171px;">Autodesk</td>
			<td style="width:124px;"></td>
			<td>3D computer-aided design program</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Petri dish &#934; 150 mm</td>
			<td style="width:171px;">JetBiofill</td>
			<td style="width:124px;">CAD010150</td>
			<td>Surface Treated</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Plasma cleaner</td>
			<td style="width:171px;">Harrick Plasma</td>
			<td style="width:124px;">PDC-32G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Pluronic F-127</td>
			<td style="width:171px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:124px;">11/6/9003</td>
			<td>Dilute with phosphate buffered saline to 4% (w/v) solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Polycarbonate (PC)</td>
			<td style="width:171px;">Acrylmall</td>
			<td style="width:124px;">AC15PC</td>
			<td>200 x 200 x 15 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Polydimethylsiloxane (PDMS)</td>
			<td style="width:171px;">Dowcorning</td>
			<td style="width:124px;">Sylgard 184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:345px;">Trypsin</td>
			<td style="width:171px;">Gibco</td>
			<td style="width:124px;">12604021</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

lab-on-a-cd platform for generating multicellular three-dimensional spheroids

三维球体细胞培养法在细胞实验中可以获得更有用的结果，因为它比二维细胞培养更好的模拟活体细胞微环境。在这项研究中，我们制造了一个电机驱动的实验室在CD（光盘）平台，称为离心微流体基球体（CMS）培养系统，以创建三维（3D）细胞球体实现高离心力。此设备可改变旋转速度，生成从 1 x g到 521 x g的重力条件。CMS系统直径6厘米，微井100400μm，由计算机数控机在聚碳酸酯模具中用聚二甲基硅氧烷成型。CMS 系统通道入口的屏障墙使用离心力将细胞均匀地分布到芯片内。在通道的末端，有一个滑动区域，允许细胞进入微井。作为证明，球体是由人类脂肪衍生干细胞和人类肺成纤维细胞在高重力条件下使用该系统的单一培养和共同培养产生的。CMS系统使用一个简单的操作方案来生产同心、Janus 和三明治等不同结构的共栽球体。CMS系统将可用于细胞生物学和组织工程研究，需要单细胞或多种细胞类型的球体和有机体培养。

直径为6厘米的CMS培养芯片（图2）按照上述方案成功制造。首先，芯片与顶层和底层分开，然后通过等离子体粘接粘合在一起。通过分离芯片，可以轻松收集生成的球体。CMS 培养芯片的通道包括入口端口和中央、滑动和微井区域（图 3）。细胞、介质和压孔溶液通过直径为 5 mm 的入口孔注入。注射的细胞通过在入口端口区域中重新悬浮3~5倍均匀分布。?...

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Lab-on-a-CD Platform for Generating Multicellular Three-dimensional Spheroids

我们提出了一种运动动力离心微流体装置，可以培养细胞球体。使用该装置，单细胞或多种细胞类型的球体在高重力条件下可以很容易地共同培养。

用于生成多细胞三维球体的 CD 实验室平台

A three-dimensional spheroid cell culture can obtain more useful results in cell experiments because it can better simulate cell microenvironments of the ...

此技术可用于使用实验室对 CD 平台从单个和多个细胞类型生成细胞球体，该平台是快速生成球体的开创性系统。该技术使用离心力将细胞沉积到指定的微井中，允许多种细胞类型连续生长，以生产不同的球体。对于CMS培养芯片的制造，首先通过计算机数控加工为培养芯片的上层和底层制造聚碳酸酯模具。接下来混合PDMS碱基和PDMS固化剂，以10比1的比例处理5分钟，然后将混合物放入干燥器中一小时，以去除气泡。将脱气的 PDMS 混合物倒入 CMS 培养芯片模具中，将模具放入干燥器中再浇注一个小时，以清除任何气泡。在第二次脱气结束时，在80摄氏度下将混合物固化在80摄氏度的热室中两个小时，然后将芯片放入真空等离子清洁剂中，表面朝上粘合。将培养芯片暴露在18瓦的助力等离子体中30秒，并在80摄氏度下将芯片的两层粘合在热室中30分钟，以增加粘附强度。然后在 121 摄氏度的自动下对 CMS 培养芯片进行消毒 15 分钟。为准备球体形成细胞，在36.5摄氏度的水浴中，将含有5至10倍的1毫升小瓶解冻至5个感兴趣的细胞，两分钟后再向细胞中加入1毫升DMEM，然后轻轻混合。接下来，将细胞添加到直径为 150 毫米的 Petri 盘中，该培养皿含有 15 毫升 36.5 摄氏度的培养素，并将该培养皿放在细胞培养培养箱中 24 小时。第二天，用15毫升的新鲜DMEM替换上一代，将细胞返回孵化器。要分离细胞，在36.5摄氏度和5%的二氧化碳下用四毫升的三辛丁，在四分钟内产生培养，当细胞从盘子底部升起时，用新鲜的媒介停止反应。要给细胞贴上标签，在将20微升无水二甲基硫化物加入小瓶以获得一毫摩尔溶液之前，将适当的细胞荧光染料加热到室温。将荧光稀释为DMEM中一微摩尔的最终工作浓度，并将染料加入感兴趣的细胞悬浮液中，轻轻混合。然后将细胞放在细胞培养箱中20分钟。对于单培养球体形成，首先向CMS培养芯片的入口孔添加2.5毫升4%的Pluronic F-127溶液，同时以每分钟500至1000次旋转芯片。添加所有解决方案后，使用 CMS 系统以每分钟 4，000 次旋转速度旋转芯片三分钟。在旋转结束时，在36.5摄氏度的二氧化碳下孵育培养芯片过夜。第二天早上，取出Pluronic溶液，用DMEM清洗培养芯片。在干净的工作台上干燥芯片 12 小时后，向进气口添加 2.5 毫升介质，每分钟旋转 4，000 次，旋转芯片三分钟。在旋转结束时，用100微升的已准备好的电池悬浮液替换进气口的100微升介质，而芯片以每分钟500至1000次旋转的速度旋转。然后以每分钟3000次旋转的芯片旋转3分钟，用离心力将芯片捕获到每个微井中的细胞，然后将芯片放入细胞培养箱中三天，每天刷新所展示的介质。对于同心球形共培养的生成，将100微升介质中的第一组细胞添加到芯片的入口端口，同时芯片以每分钟500至1000次旋转的速度旋转，然后以每分钟3000次旋转的速度旋转3分钟。在旋转结束时，在芯片以每分钟500至1000次旋转的速度旋转时，添加100微升的第二个单元群，以每分钟3000次旋转的速度旋转芯片，再旋转3分钟。当两卷细胞被注射后，将芯片以每分钟1000至2000次旋转的速度放入细胞培养箱，24小时。对于Janus球体形成，在芯片以每分钟500至1000次旋转时，加入100微升的首批细胞群，然后以每分钟3000次旋转的速度旋转3分钟。在旋转结束时，将芯片放在细胞培养箱中，以每分钟1000至2000次旋转的速度旋转3小时。在孵育结束时，加入第二个细胞群的100微升，而芯片以每分钟500至1000次旋转的速度旋转，然后以每分钟3000次旋转的芯片旋转3分钟。然后将细胞在细胞培养培养箱中以每分钟1000至2000次旋转24小时。对于三明治球状形成，首先添加100微升的第一个细胞群，而芯片以每分钟500至1000次旋转，然后以每分钟3000次旋转的速度旋转3分钟。在旋转结束时，将芯片放在细胞培养培养箱中的旋转器上，以每分钟1000至2000次旋转的速度放置芯片两小时，然后加入第二组细胞的100微升，而芯片以每分钟500至1000次旋转的速度旋转。以 3，000 RPM 旋转芯片三分钟，然后将芯片放回孵化器中，进行三小时的旋转孵化。然后再添加第一个细胞群的100微升，而芯片以每分钟500到1000次旋转的速度旋转，然后旋转和培养刚演示的12小时细胞。按照所证明的协议，可以成功制造一个直径为六厘米的CMS培养芯片。CMS 培养芯片的通道包括入口端口以及中央、滑动和微井区域。如所证明，在单个 CMS 芯片内，以每分钟 2，000 次旋转速度拍摄的两种类型的细胞培养的延时图像显示了球体的成功形成。三天培养后对微井的成像表明，球体具有优异的均匀性和球面性。也可以生成具有锥形、Janus 和三明治结构的共培养球体。此外，细胞培养物暴露在高重力下7天，然后是活/死染色，表明大多数细胞在芯片内长期培养。CMS 培养芯片的顶部和底部在粘合时应仔细对齐，否则每个微井中的细胞数可能不相等。本研究可以降低共培养球类研究的进入门面，并可广泛应用于共培养研究，例如筛选感兴趣的新药。

Research

JoVE Journal

Bioengineering

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科研

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Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Polyethylene glycol Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

倒胶体晶体聚（乙二醇）脚手架制作：肝脏组织工程三维细胞培养平台

The ability to maintain hepatocyte function in vitro, for the purpose of testing xenobiotics&#39; cytotoxicity, studying virus infection and developing ...

Fabrication of Three-dimensional Paper-based Microfluidic Devices for Immunoassays

三维纸基微流体装置的制造用于免疫分析

Paper wicks fluids autonomously due to capillary action. By patterning paper with hydrophobic barriers, the transport of fluids can be controlled and ...