Name: stereological estimation of cholinergic fiber length in the nucleus basalis of meynert of the mouse brain
Uploaded: 2020-02-05T12:00:00
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この研究は、医学研究開発サービス、退役軍人省(メリットレビュー1I01 BX001067-01A2)、アルツハイマー病協会(NPSPAD-11-202149)、中西部バイオメディカルからのリソースからのW.Z.S.への助成金によって支えられた研究財団。

これらの動物を使用するためのすべての手順は、カンザスシティ退役軍人医療センター機関動物ケアおよび使用委員会によって承認されています。スウェーデンの突然変異体β-アミロイド前駆体タンパク質(Appswe)とそのC57/BL6 WTリッター類を過剰発現する18ヶ月のマウスが実験に使用された。繁殖とジェノタイピングの詳細は、He et al.8.
1. 灌流および組織処...

<ol>
	<li>Mouton, P. R., Gokhale, A. M., Ward, N. L., West, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereological+length+estimation+using+spherical+probes.">Stereological length estimation using spherical probes.</a> Journal of Microscopy. 206, 54-64 (2002).</li><li>Whitehouse, P. J., Price, D. L., Clark, A. W., Long Coyle, J. T., DeLong, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alzheimer+disease:+evidence+for+selective+loss+of+cholinergic+neurons+in+the+nucleus+basalis.">Alzheimer disease: evidence for selective loss of cholinergic neurons in the nucleus basalis.</a> Annals of Neurology. 10 (2), 122-126 (1981).</li><li>Davies, P., Maloney, A. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+forebrain+degeneration+in+the+APPswe/PS1DeltaE9+transgenic+mouse.">Cholinergic forebrain degeneration in the APPswe/PS1DeltaE9 transgenic mouse.</a> Neurobiology of Disease. 28 (1), 3-15 (2007).</li><li>Stokin, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonopathy+and+transport+deficits+early+in+the+pathogenesis+of+Alzheimer's+disease.">Axonopathy and transport deficits early in the pathogenesis of Alzheimer's disease.</a> Science. 307 (5713), 1282-1288 (2005).</li><li>He, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GRK5+Deficiency+Leads+to+Selective+Basal+Forebrain+Cholinergic+Neuronal+Vulnerability.">GRK5 Deficiency Leads to Selective Basal Forebrain Cholinergic Neuronal Vulnerability.</a> Scientific Reports. 6, 26116 (2016).</li><li>JoVE Science Education Database. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lab+Animal+Research.+Anesthesia+Induction+and+Maintenance.">Lab Animal Research. Anesthesia Induction and Maintenance.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2019).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564 (2012).</li><li>Mouton, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Unbiased Stereology-A Concise Guide. , (2011).</li><li>West, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Getting+started+in+stereology.">Getting started in stereology.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2013 (4), 287-297 (2013).</li><li>West, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Space+Balls+Revisited:+Stereological+Estimates+of+Length+With+Virtual+Isotropic+Surface+Probes.">Space Balls Revisited: Stereological Estimates of Length With Virtual Isotropic Surface Probes.</a> Frontiers in Neuroanatomy. 12, 49 (2018).</li><li>Nikolajsen, G. N., Kotynski, K. A., Jensen, M. S., West, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+the+capillary+network+of+aged+APPswe/PS1dE9+transgenic+mice.">Quantitative analysis of the capillary network of aged APPswe/PS1dE9 transgenic mice.</a> Neurobiology of Aging. 36 (11), 2954-2962 (2015).</li><li>Gutierrez-Jimenez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbances+in+the+control+of+capillary+flow+in+an+aged+APP(swe)/PS1DeltaE9+model+of+Alzheimer's+disease.">Disturbances in the control of capillary flow in an aged APP(swe)/PS1DeltaE9 model of Alzheimer's disease.</a> Neurobiology of Aging. 62, 82-94 (2018).</li><li>Gundersen, H. J., Jensen, E. B., Kieu, K., Nielsen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+efficiency+of+systematic+sampling+in+stereology--reconsidered.">The efficiency of systematic sampling in stereology--reconsidered.</a> Journal of Microscopy. 193, 199-211 (1999).</li><li>Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+study+of+the+capillaries+within+the+white+matter+of+the+Tg2576+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Quantitative study of the capillaries within the white matter of the Tg2576 mouse model of Alzheimer's disease.</a> Brain and Behavior. 9 (4), 01268 (2019).</li><li>McNeal, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unbiased+Stereological+Analysis+of+Reactive+Astrogliosis+to+Estimate+Age-Associated+Cerebral+White+Matter+Injury.">Unbiased Stereological Analysis of Reactive Astrogliosis to Estimate Age-Associated Cerebral White Matter Injury.</a> Journal of Neuropathology Experimental Neurology. 75 (6), 539-554 (2016).</li><li>Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Passive+(amyloid-beta)+immunotherapy+attenuates+monoaminergic+axonal+degeneration+in+the+AbetaPPswe/PS1dE9+mice.">Passive (amyloid-beta) immunotherapy attenuates monoaminergic axonal degeneration in the AbetaPPswe/PS1dE9 mice.</a> Journal of Alzheimer's Disease. 23 (2), 271-279 (2011).</li><li>Gagnon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+Sprouting+of+Dopamine+and+Serotonin+Axons+in+the+Pallidum+of+Parkinsonian+Monkeys.">Evidence for Sprouting of Dopamine and Serotonin Axons in the Pallidum of Parkinsonian Monkeys.</a> Frontiers of Neuroanatomy. 12, 38 (2018).</li><li>Boncristiano, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+changes+in+the+APP23+transgenic+mouse+model+of+cerebral+amyloidosis.">Cholinergic changes in the APP23 transgenic mouse model of cerebral amyloidosis.</a> Journal of Neuroscience. 22 (8), 3234-3243 (2002).</li></ol>

ここでは、スペースボール(球)プローブを用いてNBM中のコリン作動性繊維の密度を推定する方法を示す。このプローブは、対象領域の総繊維長を推定します。全長を領域の体積で割って、繊維密度を取得できます。リージョンのボリュームを推定するには、カバリエリポイント数法を使用しました。カバリエニポイント数法は、任意のリージョンの3D参照ボリュームの公平で効率的な推定値で...

脳内神経線維の長さおよび/または密度の定量的推定は、神経病理学的研究の重要なパラメータである。様々な脳領域におけるコリン作動性、ドーパミン作動性、およびセロトニン作動性軸索の長さは、しばしばその領域の特定の機能と相関する。これらの軸索の分布は一般的に不均一であるため、設計ベースのステレロジーは、サンプリング中のバイアスを回避するために使用されます。ステレロジーの宇宙ボールプローブは、関心のある領域で神経線維などのライン状構造の効率的かつ信頼性の高い対策を提供するように設計されている1.プローブは、組織に体系的に課せられる仮想球を作り、プローブの表面との線の交差を測定する。分析のために球プローブを組織に入れることは不可能であるため、市販のソフトウェアは、基本的には球プローブの表面を表す様々な直径の一連の同心円である仮想3次元(3D)球を提供します。
選択的コリン作動性神経変性は、アルツハイマー病(AD)2、3、4の一貫した特徴の1つである。機能不全のコリン作動性伝達は、ADにおける認知機能低下の原因因子と考えられている。コリン作動性機能不全は、パーキンソン病、中毒、統合失調症などの他の多くの精神障害でも明らかです。コリン作動性神経変性の異なる態様は、動物モデル(例えば、アセチルコリン5の減少、ChATタンパク質6、アミロイドプラーク6付近におけるコリン作動性繊維神経変性、及びコリン作動性繊維およびシナプス変動性の減少7、8)において研究されている。繊維変性は神経細胞の損失よりも早く起こると考えられています, コリン作動性神経細胞の損失は、常に研究で観察されないので、コリン作動性ニューロンのほとんどは基底脳と脳幹にあり、その軸索は皮質や海馬などの様々な脳領域に投影する。NBMは基礎前脳に位置し、ADで一般的に影響を受ける脳領域の1つであることがわかりました。
分数体の分数法は、複数のレベルでの組織の系統的ランダムサンプリングに基づいています。セクションサンプリング分率(SSF)は、フラクテレータ法のステラゲオ法に対する非コンピュータベースの系統的な断面サンプリングである。エリア サンプリング分数(ASF)は、セクション内の対象領域の領域の分数です。厚さサンプリング分率(TSF)は、断面の厚さの分画です。スペースボールプローブを使用すると、分画された位置にある3D球体の関心プロファイルを定量化できます。ここでは、マウス脳のNBMにおけるコリン作動性繊維の全長を推定するスペースボールプローブを用いて、手順を説明する。現在のプロトコルは、組織処理、ステレロジーのサンプリング方法、ChAT抗体を用いた免疫組織化学染色、およびマウス脳のNBMにおけるコリン作動性繊維長と繊維密度を推定する非バイアスステローロジーに関する詳細を提供します。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ABC kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>PK6100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-ChAT Antibody</td>
			<td>Millipore, MA, USA</td>
			<td>AB144P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine anti-goat IgG-B</td>
			<td>Santacruz Biotechnology</td>
			<td>SC-2347</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum, Adult</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>B9433</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Lieca Microsystems, Buffalo Grove, IL, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>D5652</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylene Glycol</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>324558</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>G2025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen Peroxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>H1009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immpact-DAB kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK4105</td>
			<td>Enhanced DAB peroxidase substrate solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Westward Pharmaceuticals, NJ, USA</td>
			<td>0143-9509-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Lieca Microsystems, Buffalo Grove, IL, USA</td>
			<td>AF6000</td>
			<td>Equipped with motorized stage and IMI-tech color digital camera</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optimum cutting temperature (O.C.T.) embedding medium</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences, PA, USA</td>
			<td>62550-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permount mounting medium</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences, PA, USA</td>
			<td>17986-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereologer Software</td>
			<td>Stereology Resource Center, Inc. St. Petersburg, FL, USA</td>
			<td>Stereologer2000</td>
			<td>Installed on a Dell Desktop computer.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizma Base</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>T1503</td>
			<td>Tris base</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizma hydrochloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>T5941</td>
			<td>Tris hydrochloride</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Bayer, Leverkusen, Germany</td>
			<td>Rompun</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylenes, Histological grade</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td>534056</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

stereological estimation of cholinergic fiber length in the nucleus basalis of meynert of the mouse brain

様々な脳領域におけるコリン作動性または他の神経軸索の長さは、しばしば領域の特定の機能と相関している。ステアロジーは、様々な脳構造の神経細胞のプロファイルを定量化するのに有用な方法です。ここでは、基礎前脳のメイナート核(NBM)の基底にあるコリン作動性繊維の全長を推定するソフトウェアベースのステレロジープロトコルを提供します。この方法では、長さの推定にスペース ボール プローブを使用します。コリン作動性繊維は、西洋ワサビペルオキシダーゼ-ジアミノベンジジン(HRP-DAB)検出システムを用いたコリンアセチルトランスファーゼーション酵素(ChAT)免疫染色によって可視化される。染色プロトコルは、ステレロジーソフトウェアを用いた様々な脳領域における繊維および細胞数の推定にも有効である。このステレオロジープロトコルは、絨毛ノセプティブ繊維、ドーパミン作動性/カテコールアミン作動性繊維、セロトニン繊維、アストロサイトプロセス、あるいは血管プロファイルなどの任意の線形プロファイルの推定に使用できます。

代表的な結果を表 1および図 5に示します。APweグループ(APP)としてデコードされたグループCは、野生型(WILD)のリッターメートと比較して、ファイバ長(図5B)およびファイバ長密度(図5C)が有意に低かった。結果は、分析した2つのグループ間でNBMの体積に有意差がないことを示した(<strong class...

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Stereological Estimation of Cholinergic Fiber Length in the Nucleus Basalis of Meynert of the Mouse Brain

脳領域の三次元構造内の神経線維の長さは、特定の神経構造の完全性または変性を定量化する信頼できるパラメータである。本稿では、マウスにおけるマイナート核内のコリン作動性繊維長を測定する立体定量法を例に説明する。

マウス脳のマイナート核基底部におけるコリン作動性繊維長の立体的推定

The length of cholinergic or other neuronal axons in various brain regions are often correlated with the specific function of the region. Stereology is a ...

多くの神経疾患における神経否定は、細胞の身体喪失の前にしばしば神経線維喪失が起こる慢性プロセスである。3次元の神経線維の立体的定量化は、早期の神経変性変化を検出するための敏感で正確な方法を提供する。この技術は、スペースボールの信頼性と効率的なコンピュータベースの公平な分別を利用して、3Dの神経線維のような線状の構造の長さを測定します。この手順のデモンストレーションは、ポストドクでステテロロジーの専門家であるプラバカール・シンと、私の研究室の研究アシスタントであるデビッド・ペンによって行われます。麻酔マウスのペダル反射に対する応答の欠如を確認した後、約50ミリリットルの氷冷0.1モルDPBSを経頭方向に透過し、続いて0.1モルPBSで約25ミリリットルの4%PFAを続ける。灌流の終わりに、摂氏4度で24時間新鮮な4%PFAの容器に脳を後固定する。翌日、洗い込みごとに新鮮なDPBSで3回1〜2分の洗浄で脳を洗い、脳を一晩で0.1 DPBS溶液で15%スクロースに移します。翌朝、脳を30%スクロース溶液に入れ、摂氏4度で48時間0.1モルDPBSを入れます。インキュベーションの最後に、脳を低温室に移し、マイナス20度に設定します。脳は密閉チューブに保管し、マイナス80°Cで保存することができます。切削のために、最適な切断温度埋め込み媒体にティッシュサンプルを埋め込み、試料ディスクにサンプルを取り付ける。その後、クライオトームのコロナ平面で30マイクロメートルの厚さの連続セクションを取得し、マイナス20°Cの貯蔵に備えて、凍結保護剤溶液を含む24ウェル培養プレートの個々の井戸に各セクションを移管する。各脳の最初と最後のセクションを識別するには、標準的なマウス脳アトラスと形態学的特徴を比較します。NBM はブレグマから 0.0 ミリメートルを引いたから始まり、マイナス 1.6 ミリメートルで終了します。8番目のセクションを選択すると、合計6〜7個のセクションが生成され、体積と繊維長の両方の推定に適切な誤差係数が得られます。組織切片の免疫組織化学的標識の場合、トリス緩衝生理食動物中の0.1%トリトンX-100で10%正常ウシ血清による非特異的結合を遮断した後、摂氏4度で48時間対象の一次抗体を切片に標識する。インキュベーションの終わりに、洗浄ごとに新鮮なトリス緩衝生理食動物で3分間セクションを3回洗浄し、続いて室温で1時間適切なビオチン化二次抗体をインキュベートします。インキュベーションの最後に、実証されているように新鮮なトリスバッファー生理食い物で3回セクションを洗浄し、続いてメーカーのプロトコルに従ってアビジンビオチンペルオキシダーゼ複合体およびDABペルオキシダーゼ基質溶液で染色します。洗浄後、1つの脳組織サンプルのすべての切片を1つのゼラチン化スライドに取り付け、サンプルを空気乾燥させます。セクションを脱水するには、示されているように、サンプルを1希釈あたり5分間、順次上昇エタノール溶液に浸し、続いて2回10分間のキシレンを溶解してクリアします。次に、適切な取り付け媒体を使用して、スライド上にカバーリップを配置します。ステレロジーのために、ソフトウェアの新しい研究を開きます。スタディの初期化ダイアログボックスが開きます。スタディ情報を入力し、複数レベルの分数ベースが選択されていることを確認します。ボリュームをダブルクリックして、音量ダイアログボックスを開きます。対象のフィーチャに名前を付け、リージョン ポイント カウント プローブを選択して、[次へ] をクリックします。長さをダブルクリックし、フィーチャーの名前を指定します。球プローブを選択し、[次へ]をクリックします。ケース初期化ボックスで、スタディを開始する前にグループをコーディングするには、対象領域を含む最初のセクションから、対象領域とセクションサンプリング間隔を含む最後のセクションまでのセクションの総数を 8 に設定します。次をクリックしてプローブ初期化ダイアログボックスを開き、リージョンの選択と体積の推定値の最小倍率を自動的に設定し、設定を確認します。[プレビュー]をクリックして、選択した低倍率で対象領域を識別できるかどうかを確認します。領域の体積分率にポイントあたり 50,000 マイクロメートルの立方体を入力し、[プレビュー]をクリックして完了します。[オブジェクトの高倍率]の下で、長さを 63 倍に設定し、ダブルクリックすると、長さの球体ダイアログ ボックスが開きます。この球の直径を10マイクロメートルに設定し、クリックします。フレーム領域、フレームの高さ、ガード ゾーン、およびフレーム間隔に適切な値を設定します。次へをクリックし、ソフトウェアによって提供される指示に従います。最初のセクションを挿入するには、スライドを 5X の目的の下で顕微鏡のステージに配置し、緑色の矢印をクリックして NBM の周囲に任意の境界を描画して対象領域を定義します。緑色の矢印をクリックして、63Xの目標を変更して、現在の分数のファイバー測定値を取得します。セクションの太さダイアログボックスが表示されます。手動z軸フォーカスノブを使用してセクションの実際の厚さを測定するためにセクションの上面と下面を設定し、完了をクリックします。断面のフレーム高さで Z 軸を上から下にゆっくりと移動して、仮想球プローブの表面上のすべての交差するファイバーをマークします。すべてのファイバーがマークされたら、次の位置に進むには、次のボタンをクリックします。すべての分数が完了したら、緑の矢印をクリックします。ソフトウェアは、次のセクションを挿入するように求めます。スライド上の次のサンプルを5Xの目的を使用して焦点を合わせ、ちょうど実証したようにファイバー測定を繰り返します。すべてのセクションが測定されると、エラー値の係数を示すケースの結果が生成されます。誤差係数が許容される場合は、次のケースに進みます。エラー係数が許容されない場合、ソフトウェアは、いくつかのパラメータを変更するための推奨事項を提供します。すべてのケースが完了したら、各ケースとグループの結果を生成します。この代表的な実験では、スウェーデンの変異型βアミロイド前駆体タンパク質群は、野生型のごみ合致物と比較して、繊維長および繊維長密度が有意に低い結果を示した。結果はまた、分析された2つのグループ間のNBMの体積に有意な差がないことを示した。この技術は、適切な方向での取得とインキュベーション期間と良好な染色方法を必要とします。ステレロジープロトコルは、他の神経線維、アストロサイトプロセス、あるいは血管プロファイルなどの線形プロファイルの推定に使用できます。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Live Imaging of Mitosis in the Developing Mouse Embryonic Cortex

発生中のマウス胚性皮質における有糸分裂のライブイメージング

Although of short duration, mitosis is a complex and dynamic multi-step process fundamental for development of organs including the brain. In the ...

Telomerase Activity in the Various Regions of Mouse Brain: Non-Radioactive Telomerase Repeat Amplification Protocol (TRAP) Assay

Telomerase Activity in the Various Regions of Mouse Brain: Non-Radioactive Telomerase Repeat Amplification Protocol TRAP Assay

マウス脳のさまざまな領域におけるテロメラーゼ活性：非放射性テロメラーゼリピート増幅プロトコル（TRAP）アッセイ

Telomerase, a ribonucleoprotein, is responsible for maintaining the telomere length and therefore promoting genomic integrity, proliferation, and ...

Analysis of Gene Expression Changes in the Rat Hippocampus After Deep Brain Stimulation of the Anterior Thalamic Nucleus

視床前核の脳深部刺激後のラット海馬における遺伝子発現の変化の解析

Deep brain stimulation (DBS) surgery, targeting various regions of the brain such as the basal ganglia, thalamus, and subthalamic regions, is an effective ...

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

マウス海馬にオリゴマーアミロイドベータの定位注入

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Live Imaging of the Ependymal Cilia in the Lateral Ventricles of the Mouse Brain

マウスの脳の側脳室における上衣繊毛のライブイメージング

Multiciliated ependymal cells line the ventricles in the adult brain. Abnormal function or structure of ependymal cilia is associated with various ...

Microelectrode Guided Implantation of Electrodes into the Subthalamic Nucleus of Rats for Long-term Deep Brain Stimulation

微小電極は、長期的な脳深部刺激のためのラットの視床下核に電極の移植ガイド付き

Deep brain stimulation (DBS) is a widely used and effective therapy for several neurologic disorders, such as idiopathic Parkinson&#8217;s disease, ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

少量循環、血流 - と水没型チャンバー システムで管理急性海馬スライスにおけるシナプス可塑性を記録

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Stereological Estimation of Dopaminergic Neuron Number in the Mouse Substantia Nigra Using the Optical Fractionator and Standard Microscopy Equipment

光分留と標準的な顕微鏡装置を用いたマウス中脳のドーパミン作動性ニューロン数の薬剤の評価

In pre-clinical Parkinson&#39;s disease research, analysis of the nigrostriatal tract, including quantification of dopaminergic neuron loss within the ...