Name: a reversible silicon oil-induced ocular hypertension model in mice
Uploaded: 2019-11-15T10:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice at JoVE.com

ويدعم هذا العمل من قبل المعاهد القومية للصحة منح EY024932, EY023295, و EY028106 إلى YH.

وقد تمت الموافقة علي جميع الإجراءات من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانية (IACUC) من جامعه ستانفورد.
1. العين ارتفاع ضغط الدم التعريفي عن طريق حقن انتراكاميرال من SO
<ol><li>جهزي الماصة الزجاجية لانتراكاميرال بالحقن بواسطة سحب الشعرية الزجاجية مع ساحبه ماصه لتوليد الم...

<ol>
	<li>Chang, E. E., Goldberg, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glaucoma+2.0:+neuroprotection,+neuroregeneration,+neuroenhancement.">Glaucoma 2.0: neuroprotection, neuroregeneration, neuroenhancement.</a> Ophthalmology. 119 (5), 979-986 (2012).</li><li>Tham, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+prevalence+of+glaucoma+and+projections+of+glaucoma+burden+through+2040:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Global prevalence of glaucoma and projections of glaucoma burden through 2040: a systematic review and meta-analysis.</a> Ophthalmology. 121 (11), 2081-2090 (2014).</li><li>Pang, I. H., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+for+glaucoma+retinopathy+and+optic+neuropathy.">Rodent models for glaucoma retinopathy and optic neuropathy.</a> Journal of Glaucoma. 16 (5), 483-505 (2007).</li><li>Morrison, J. C., Johnson, E., Cepurna, W. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+models+for+glaucoma+research.">Rat models for glaucoma research.</a> Progress in Brain Research. 173, 285-301 (2008).</li><li>McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+retinal+ganglion+cell+death+and+glaucoma.">Mouse models of retinal ganglion cell death and glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 88 (4), 816-824 (2009).</li><li>Chen, S., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Rodent+Model+of+Glaucoma+and+Its+Implications.">The Rodent Model of Glaucoma and Its Implications.</a> Asia Pacific Journal of Ophthalmology (Philadelphia). 4 (4), 236-241 (2015).</li><li>Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+microbead+occlusion+model:+a+paradigm+for+induced+ocular+hypertension+in+rats+and+mice.">The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (1), 207-216 (2010).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optic+neuropathy+due+to+microbead-induced+elevated+intraocular+pressure+in+the+mouse.">Optic neuropathy due to microbead-induced elevated intraocular pressure in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (1), 36-44 (2011).</li><li>Cone, F. E., Gelman, S. E., Son, J. L., Pease, M. E., Quigley, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+susceptibility+to+experimental+glaucoma+among+3+mouse+strains+using+bead+and+viscoelastic+injection.">Differential susceptibility to experimental glaucoma among 3 mouse strains using bead and viscoelastic injection.</a> Experimental Eye Research. 91 (3), 415-424 (2010).</li><li>Samsel, P. A., Kisiswa, L., Erichsen, J. T., Cross, S. D., Morgan, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+the+induction+of+experimental+glaucoma+using+magnetic+microspheres.">A novel method for the induction of experimental glaucoma using magnetic microspheres.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (3), 1671-1675 (2011).</li><li>Ichhpujani, P., Jindal, A., Jay Katz, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil+induced+glaucoma:+a+review.">Silicone oil induced glaucoma: a review.</a> Graefes Archieves for Clinical and Experimental Ophthalmology. 247 (12), 1585-1593 (2009).</li><li>Kornmann, H. L., Gedde, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glaucoma+management+after+vitreoretinal+surgeries.">Glaucoma management after vitreoretinal surgeries.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 27 (2), 125-131 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> Elife. 8, (2019).</li><li>Kwong, J. M., Caprioli, J., Piri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+binding+protein+with+multiple+splicing:+a+new+marker+for+retinal+ganglion+cells.">RNA binding protein with multiple splicing: a new marker for retinal ganglion cells.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (2), 1052-1058 (2010).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Smith, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Systematic evaluation of the mouse eye : anatomy, pathology, and biomethods. , (2002).</li></ol>

هنا نظهر اجراء بسيطه ولكنها فعاله للحث علي ارتفاع IOP المستدامة في العين الماوس عن طريق حقن انتراكاميرال من SO. ويمكن تعلم هذا الاجراء بسرعة من قبل اي شخص لديه خبره في التشريح المجهري تحت المجهر. الخطر المحتمل الرئيسي للفشل هو تسرب SO من شق القرنية. ومع ذلك ، واحده من مزايا استخدام SO هو ان لان ق?...

الفقدان التدريجي للخلايا العقدة الشبكية (RGCs) والمحاور الخاصة بهم هو السمة المميزة للجلوكوما ، وهو مرض عصبي شائع في شبكيه العين1. وسوف تؤثر علي أكثر من 100,000,000 الافراد 40 − 80 سنه من قبل 20402. ولا يزال البرنامج هو عامل الخطر الوحيد القابل للتعديل في تطور الزرق وتطوره. من أجل استكشاف المرض ، والتقدم ، والعلاجات المحتملة من الجلوكوما ، ويمكن الاعتماد عليها ، واستنساخها ، ومحفز العين التجريبية ارتفاع ضغط الدم/الزرق النموذج الذي يتطابق مع السمات الرئيسية للمرضي البشر أمر حتمي.
يعتمد IOP علي تدفق الفكاهة المائية إلى الغرفة الاماميه من الجسم الهالهاري في الغرفة الخلفية والتدفق من خلال العمل المشصي (TM) في زاوية الغرفة الاماميه. عند الوصول إلى حاله مستقره ، يتم الحفاظ علي IOP. وعندما يتجاوز التدفق الوافد أو يقل عن التدفق الوافد ، يرتفع البرنامج أو ينخفض علي التوالي. من خلال خفض تدفق مائي اما عن طريق انسداد زاوية الغرفة الاماميه أو عن طريق اتلاف TM ، وقد أنشئت عده نماذج الجلوكوما3،4،5،6،7،8،9،10. وترتبط هذه النماذج عاده مع تلف انسجه العين لا رجعه فيه ، وارتفاع IOP في الغرفة الاماميه أيضا يسبب مضاعفات غير المرغوب فيها مثل وذمه القرنية والتهاب العين ، مما يجعل التصوير الشبكية والبصريات وظيفة الاختبارات صعبه لأداء وتفسير.
لتطوير نموذج يتغلب علي أوجه القصور هذه ، ركزنا علي الزرق الثانوي الجيد الموثق الناجم عن زيت السيليكون (لذلك) الذي يحدث كمضاعفات ما بعد العملية الجراحية لجراحه الشبكية البشرية11،12. لذلك يتم استخدامها كدك في العمليات الجراحية في الشبكية بسبب التوتر سطحه عاليه. ومع ذلك ، يمكن لذلك جسديا اوككلودي التلميذ لأنه أخف من السوائل المائية والزجاجية ، مما يمنع التدفق المائي إلى الغرفة الاماميه. تسبب العرقلة ارتفاع IOP في الغرفة الخلفية بسبب تراكم الفكاهة المائية. هذا دافع لنا لتطوير وتوصيف نموذج الماوس ارتفاع ضغط الدم العين الجديدة علي أساس الحقن انتراكاميرال SO وكتله حدقة13, مع السمات الرئيسية للجلوكوما الثانوية: كتله العفن فعاله, ارتفاع iop الكبيرة التي يمكن ان تعود إلى وضعها الطبيعي بعد أزاله SO, والضمور العصبي جلوكوكاتوس.
هنا نقدم بروتوكولا مفصلا لارتفاع ضغط الدم العين المستحثة في عينه الماوس ، بما في ذلك حقن وأزاله وقياس IOP.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:915px;" width="915">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">0.5% proparacaine hydrochloride</td>
			<td style="width:232px;">Akorn, Somerset</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:279px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">10mL syinge</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Luer-Lok Tip</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:26px;">18G needle</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>with Regular Bevel, Needle Length:25.4 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)</td>
			<td style="width:232px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:147px;">CAS# 75-80-9</td>
			<td>50g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">32G nano</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;">320122</td>
			<td>BD Nano Ultra Fine Pen Needle-32G 4mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">33G ophalmology needle</td>
			<td style="width:232px;">TSK/ VWR</td>
			<td style="width:147px;">TSK3313/ 10147-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">5mL syinge</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Luer-Lok Tip</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">AnaSed Injection (xylazine)</td>
			<td style="width:232px;">Butler Schein</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>100 mg/ml, 50 ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">artificial tears</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">300651431414</td>
			<td>Systane Ultra Lubricant Eye Drops</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">BSS PLUS Irrigating solution</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">65080050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dual-Stage Glass Micropipette Puller</td>
			<td style="width:232px;">NARISHIGE</td>
			<td style="width:147px;">PC-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:257px;">EZ-7000 Classic System</td>
			<td style="width:232px;">EZ system</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:232px;">VetOne</td>
			<td style="width:147px;">502017</td>
			<td>isoflurane, USP, 250ml/bottle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">IV Administration sets</td>
			<td style="width:232px;">EXELint/ Fisher</td>
			<td style="width:147px;">29081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">KETAMINE HYDROCHLORIDE INJECTION</td>
			<td style="width:232px;">VEDCO</td>
			<td style="width:147px;">50989-996-06</td>
			<td>KETAVED 100mg/ml * 10ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">microgrind bevelling machine</td>
			<td style="width:232px;">NARISHIGE</td>
			<td style="width:147px;">EG-401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Miniature EVA Tubing</td>
			<td style="width:232px;">McMaster-Carr</td>
			<td style="width:147px;">1883T4</td>
			<td>0.05&#34; ID, 0.09&#34; OD, 10 ft. Length</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">silicon oil (SILIKON)</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">8065601185</td>
			<td>1,000 mPa.s</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Standard Glass Capillaries</td>
			<td style="width:232px;">WPI/ Fisher</td>
			<td style="width:147px;">1B150-4</td>
			<td>4 in. (100mm) OD 1.5mm ID 0.84mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TonoLab tonometer</td>
			<td style="width:232px;">Colonial Medical Supply, Finland</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">veterinary antibiotic ointment</td>
			<td style="width:232px;">Dechra Veterinary</td>
			<td style="width:147px;">1223RX</td>
			<td>BNP ophthalmic ointment, Vetropolycin</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a reversible silicon oil-induced ocular hypertension model in mice

ارتفاع ضغط العين (IOP) هو عامل خطر موثقه جيدا لزرق. هنا نحن وصف رواية ، طريقه فعاله للحث باستمرار مستقره IOP الارتفاع في الفئران التي تحاكي مضاعفات ما بعد الجراحة من استخدام زيت السيليكون (SO) كعامل تاموناد في جراحه شبكيه الإنسان. في هذا البروتوكول ، يتم حقن SO في الغرفة الاماميه للعين الماوس لمنع التلميذ والحيلولة دون تدفق الفكاهة المائية. الغرفة الخلفية تتراكم الفكاهة المائية وهذا بدوره يزيد من IOP من الجزء الخلفي. وتنتج حقنه واحده SO الارتفاع الموثوق بها ، وكافيه ، ومستقره IOP ، والتي تؤدي إلى الضمور العصبي جلوكوكاتوس كبيره. هذا النموذج هو تكرار حقيقي من الزرق الثانوي في عيادة العين. لمزيد من تقليد الاعداد السريرية ، SO يمكن ازالتها من الغرفة الاماميه لأعاده فتح مسار الصرف الصحي والسماح تدفق الفكاهة المائية ، والتي يتم تصريفها من خلال العمل المشصي (TM) في زاوية الغرفة الاماميه. لان IOP يعود بسرعة إلى طبيعتها ، ويمكن استخدام النموذج لاختبار تاثير خفض IOP علي الخلايا العقديه الشبكية جلوكوكاتوس. هذا الأسلوب هو واضح ، لا يتطلب معدات خاصه أو تكرار الإجراءات ، يحاكي عن كثب الحالات السريرية ، ويمكن ان تكون قابله للتطبيق علي الأنواع الحيوانية المتنوعة. ومع ذلك ، قد يلزم اجراء تعديلات طفيفه.

بعد فتره وجيزة من الحقن يمكننا بسهوله تحديد الفئران التي لا تنتج ارتفاع ضغط الدم العين مستقره بسبب قطرات SO كونها صغيره جدا (≤ 1.5 mm)13. وتستبعد هذه الكائنات من التجارب اللاحقة. بعد إجراءات الحقن ، أكثر من 80 ٪ من الفئران حقن حتى في نهاية المطاف مع قطرات أكبر من 1.6 مم. قمنا بقياس IOP من ...

Watch this Scientific Journal Video about A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice at JoVE.com

A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice

هنا ، ونحن نقدم بروتوكول للحث علي ارتفاع ضغط الدم العين والضمور العصبي الزرق في عيون الفار عن طريق حقن انتراكاميرال من زيت السيليكون والاجراء لأزاله زيت السيليكون من الغرفة الاماميه للعودة ضغط العين مرتفعه العاديه.

والسيليكون عكسها الناجمة عن النفط العين ارتفاع ضغط الدم النموذج في الفئران

Elevated intraocular pressure (IOP) is a well-documented risk factor for glaucoma. Here we describe a novel, effective method for consistently inducing ...

الجلوكوما هو السبب الرئيسي للعمى لا رجعة فيه، تتميز موت خلية العقدة الشبكية والتنكس العصبي البصري. ارتفاع ضغط العين، وتسمى أيضا ارتفاع ضغط الدم العيني، هو عامل الخطر الأكثر المعترف بها للزرق. نموذج بسيط ولكن فعال لارتفاع ضغط الدم في الحيوانات التجريبية مثل الفئران مهم للتحقيق في الجلوكومتر في التنكس العصبي واختبار العلاج للبروتكشن العصبي.وهكذا، مع النتائج، ونحن تطوير نموذج ارتفاع ضغط الدم الماوس العيني الذي يحاكي عن كثب الزرق الثانوية لوحظ في المرضى الإنسان. هذا النموذج استنساخ بأمانة الزرق الثانوي الناجم عن السيليكون النفط الناجم عن حجب التلميذ. الإجراء بسيط ارتفاع IOP مستقرة، وإذا كان الانعكاس العصبي المرتبطة ارتفاع ضغط الدم العيني شديد في عيون الماوس، والأهم من ذلك، ارتفاع ضغط الدم العيني هو عكس لأنه يمكن إزالة زيت السيليكون بسهولة من عيون الماوس.إثبات الإجراء سيكون الدكتور فانغ فانغ، زميل ما بعد العملية من مختبري. للبدء، وجعل ميكروبيبيت الزجاج لحقن زيت السيليكون داخل المجلس عن طريق سحب الشعيرات الدموية الزجاجية مع سحب ماصة. قطع فتحة في غيض من micropipette وشحذ تلميح باستخدام آلة مقطّع المطحنة الدقيقة لجعل شطبة 35 إلى 40 درجة.تلميع حواف شطبة وغسلها بالماء لإزالة جميع الحطام. أوتوكلاف الميكريبيت قبل الاستخدام. لإعداد إبرة البارسنتسيس لدخول القرنية، قم بإرفاق إبرة قياس 32 بحقنة ذات خمسة ملليلتر على قفل إغراء والمزيد من تأمينها بشريط لاصق.ثني إبرة شطبة رأس، الوجه المتابعة، في 30 درجة. لإعداد حاقن زيت السيليكون، إرفاق وتأمين إبرة قياس نهاية حادة 18 على حقنة 10 ملليلتر. ثم نعلق أنبوب من البلاستيك مع إبرة قياس 18 على نهاية واحدة وملء مع زيت السيليكون حسب الحاجة من خلال الطرف الآخر.بعد تخدير 9 إلى 10 أسابيع من العمر C57 ماوس أسود 6J، تحقق من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم مع عدم وجود حركة شعيرات أو الذيل. ضع الماوس في وضعية شكلية على منصة الجراحة. تطبيق قطرة واحدة من هيدروكلوريد 5٪ بروباراكايين إلى القرنية قبل الحقن للحد من حساسيته أثناء الإجراء.استخدام 32 قياس إبرة البارسنتسيس لإجراء شق دخول في الربع الصدغي السوبر حوالي 5 ملليمترات من limbus. نفق من خلال طبقات من القرنية لحوالي 3 ملليمترات قبل ثقب في الغرفة الأمامية، مع الحرص على عدم لمس العدسة أو قزحية. سحب الإبرة ببطء لاطلاق سراح حوالي واحد إلى اثنين microliters من الفكاهة مائي من الغرفة الأمامية من خلال النفق والانتظار لمدة ثماني دقائق لزيادة خفض ضغط العين.قياس العين السيطرة على الاضلاع لتحديد الضغط. أدخل السطح الزجاجي الصغير المحمل مسبقًا بزيت السيليكون عبر نفق القرنية في الغرفة الأمامية مع شطبة ملوّقة متجهة إلى سطح القزحية. دفع المكبس حقنة ببطء لحقن زيت السيليكون في الغرفة الأمامية حتى قطرات النفط يغطي معظم سطح القزحية، ما يقرب من 2.3 إلى 2.4 ملليمتر في القطر.ترك micropipette في الغرفة الأمامية لمدة 10 ثانية إضافية قبل سحبه ببطء. ادفع الجفن العلوي برفق لإغلاق شق القرنية لتقليل تسرب زيت السيليكون. ثم تطبيق مرهم المضادات الحيوية على سطح العين.إبقاء الماوس على وسادة التدفئة حتى تعافى تماما من التخدير. لإزالة زيت السيليكون من الغرفة الأمامية، تخدير الماوس ومن ثم التحقق من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القار لتحديد قوة التخدير وعدم حركة شعيرات أو الذيل. ضع الماوس على منصة الجراحة وآمنه في الوضع الجانبي مع الشريط.تطبيق قطرة واحدة من هيدروكلوريد 5٪ بروباراكايين إلى القرنية للحد من حساسيتها. باستخدام قبل صنع 32 قياس الإبرة paracentesis، وجعل اثنين من شقوق في الربع الزمني للقرنية بين حوالي الساعة 2 و 5 على حافة قطرات زيت السيليكون. أدخل إبرة ري قياس 33 متصلة بمحلول الري من خلال شق قرني واحد بالسرعة القصوى.إدراج آخر 33 قياس إبرة الصرف تعلق على حقنة دون المكبس من خلال شق القرنية الأخرى للسماح لقططة زيت السيليكون للخروج من الغرفة الأمامية في حين ري مع محلول الري. سحب إبرة الصرف ثم إبرة الري. استخدام ميكروسيبيت الزجاج متصلة حقنة هاملتون لحقن فقاعة الهواء في الغرفة الأمامية للحفاظ على عمقها الطبيعي والصحافة لإغلاق شق القرنية.تطبيق مرهم المضادات الحيوية على كلتا العينين والحفاظ على الماوس على وسادة الانتعاش التدفئة حتى تعافى تماما من التخدير. ضع الماوس في غرفة التعريفي. تخديرها كما هو موضح في المخطوطة والحفاظ على قرنيتها رطبة من خلال تطبيق الدموع الاصطناعية طوال العملية.انتظر حوالي 15 دقيقة للسماح للتلميذ بالتمدد الكامل. قياس IOP من كلتا العينين باستخدام مقياس تونترمتر وفقا لتعليمات المنتج. جلب تونومتر بالقرب من العين الماوس، والحفاظ على المسافة من غيض من المسبار إلى القرنية الماوس في حوالي ثلاثة إلى أربعة ملليمترات.اضغط على زر القياس ست مرات لتوليد قراءة واحدة والحصول على ثلاث قراءات تم إنشاؤها آليا من كل عين للحصول على متوسط IOP. إجراء الكيمياء المناعية من كامل جبل شبكية العين الشبكية ganglia الخلية عد أجزاء العصب البصري شبه رقيقة وتكميم من محاور عصبية على قيد الحياة على الحيوانات التضحية في غضون ثمانية أسابيع بعد حقن زيت السيليكون. تم قياس ضغط العين الداخلية من عيون الماوس مع قطرات زيت السيليكون أكبر من 1.6 ملليمتر مرة واحدة في الأسبوع لمدة ثمانية أسابيع، بعد حقنة زيت سيليكون واحدة.بقي ضغط العين تلقي النفط عالية, في الغالب ضعف ضغط العين السيطرة على الاضلاعية مما يدل على منع التلميذ فعالة. وفي مجموعة أخرى من الفئران، تم مسح زيت السيليكون من الغرفة الأمامية بعد أسبوعين من الحقن. بعد الانتظار لمدة أسبوع للسماح للقرنية بالتعافي ، عاد ضغط العين إلى طبيعته ، وهو نفس العين المسيطرة.لتحديد آثار انخفاض ضغط الدم العيني الناجم عن زيت السيليكون على خلايا العقدة الشبكية ، تم تحديد سوماتا الباقية في المناطق الطرفية من جبل الشبكية بالكامل بواسطة RBPMS التي تلطخ موت خلية العقدة الشبكية المثير بعد حقن زيت السيليكون. تم تحديد المحاور المتبقية في العصب البصري نصف رقيقة المقطع عرضية بواسطة ملطخة PBD ثمانية أسابيع بعد الحقن. كان هناك انحطاط كبير في محور عصبي في ارتفاع ضغط الدم العيني الناجم عن زيت السيليكون.يمكن تصوير الحيوانات مع SLOOCT لتحديد التغيير في شبكية العين. يمكن تحليل الوظيفة البصرية للحيوانات بواسطة نمط ERG و OKR ، وكذلك. هذا النموذج ارتفاع ضغط الدم العيني سوف تسهل التحقيق في التنكس العصبي IOP عالية الناجمة.ويمكن أيضا أن تستخدم لاختبار العلاجات العصبية واعدة قبليا.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Medicine

Unit 1

Cardiovascular Drugs: Antihypertensive Drugs

SCIENTISTS IN ACTION

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

إنشاء عكسية النموذجي الجرذ الركودي

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and ...

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

5/6th استئصال الكلية في تركيبة مع حمية عالية الملح والنيتريك أوكسيد تثبيط سينسيز للحث على مرض الكلى المزمن في الفئران لويس

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

نموذج الفأر الليزر التي يسببها ارتفاع ضغط الدم المزمن المقلة لتوصيف العيوب البصرية

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

الحقن الشريان السباتي لوأضافا الدوائية وتحليل Taxanes في الفئران

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

بسيطة الحرجة الحجم فخذي عيب النموذجي في الفئران

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

A Murine Model of Irreversible and Reversible Unilateral Ureteric Obstruction

وهناك نموذج من الفئران لا رجعة فيه وعكسها من جانب واحد الحالبي إعاقة

Obstruction of the kidney may affect native or transplanted kidneys and results in kidney injury and scarring. Presented here is a model of obstructive ...

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

وميكروبيدات انسداد المغناطيسي نموذج للحث على بصري ارتفاع ضغط الدم التي تعتمد الزرق في الفئران

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

A Repetitive Concussive Head Injury Model in Mice

والمتكرر الارتجاج إصابات الرأس النموذجي في الفئران

Despite the concussion/ mild traumatic brain injury (mTBI) being the most frequent occurrence of traumatic brain injury, there is still a lack of ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

جراحة التحويلة، الحق القلب قسطرة، والأوعية الدموية القياس الشكلي في الفأر نموذج لالناجم عن تدفق-الرئوي الشرياني ارتفاع ضغط الدم

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

سحجه الظهارة القرنية مع لدغ العين كنموذج للقرنية التئام الجروح

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...