Name: a reversible silicon oil-induced ocular hypertension model in mice
Uploaded: 2019-11-15T10:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice at JoVE.com

Dette arbejde understøttes af NIH Grants EY024932, EY023295 og EY028106 til YH.

Alle procedurer er blevet godkendt af det institutionelle udvalg for dyrepasning og-anvendelse (IACUC) på Stanford University.
1. induktion af okulær hypertension ved intracameral injektion af SO
<ol><li>Forbered en glas mikropipette til intracameral så injektion ved at trække et glas kapillær med en pipette aftrækker for at generere en mikropipette. Skær en åbning på spidsen af mikropipetten og yderligere skærpe spidsen med en Micro Grinder-beveling maskine til at lave en 35 ° ?...

<ol>
	<li>Chang, E. E., Goldberg, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glaucoma+2.0:+neuroprotection,+neuroregeneration,+neuroenhancement.">Glaucoma 2.0: neuroprotection, neuroregeneration, neuroenhancement.</a> Ophthalmology. 119 (5), 979-986 (2012).</li><li>Tham, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+prevalence+of+glaucoma+and+projections+of+glaucoma+burden+through+2040:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Global prevalence of glaucoma and projections of glaucoma burden through 2040: a systematic review and meta-analysis.</a> Ophthalmology. 121 (11), 2081-2090 (2014).</li><li>Pang, I. H., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+for+glaucoma+retinopathy+and+optic+neuropathy.">Rodent models for glaucoma retinopathy and optic neuropathy.</a> Journal of Glaucoma. 16 (5), 483-505 (2007).</li><li>Morrison, J. C., Johnson, E., Cepurna, W. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+models+for+glaucoma+research.">Rat models for glaucoma research.</a> Progress in Brain Research. 173, 285-301 (2008).</li><li>McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+retinal+ganglion+cell+death+and+glaucoma.">Mouse models of retinal ganglion cell death and glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 88 (4), 816-824 (2009).</li><li>Chen, S., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Rodent+Model+of+Glaucoma+and+Its+Implications.">The Rodent Model of Glaucoma and Its Implications.</a> Asia Pacific Journal of Ophthalmology (Philadelphia). 4 (4), 236-241 (2015).</li><li>Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+microbead+occlusion+model:+a+paradigm+for+induced+ocular+hypertension+in+rats+and+mice.">The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (1), 207-216 (2010).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optic+neuropathy+due+to+microbead-induced+elevated+intraocular+pressure+in+the+mouse.">Optic neuropathy due to microbead-induced elevated intraocular pressure in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (1), 36-44 (2011).</li><li>Cone, F. E., Gelman, S. E., Son, J. L., Pease, M. E., Quigley, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+susceptibility+to+experimental+glaucoma+among+3+mouse+strains+using+bead+and+viscoelastic+injection.">Differential susceptibility to experimental glaucoma among 3 mouse strains using bead and viscoelastic injection.</a> Experimental Eye Research. 91 (3), 415-424 (2010).</li><li>Samsel, P. A., Kisiswa, L., Erichsen, J. T., Cross, S. D., Morgan, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+the+induction+of+experimental+glaucoma+using+magnetic+microspheres.">A novel method for the induction of experimental glaucoma using magnetic microspheres.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (3), 1671-1675 (2011).</li><li>Ichhpujani, P., Jindal, A., Jay Katz, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil+induced+glaucoma:+a+review.">Silicone oil induced glaucoma: a review.</a> Graefes Archieves for Clinical and Experimental Ophthalmology. 247 (12), 1585-1593 (2009).</li><li>Kornmann, H. L., Gedde, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glaucoma+management+after+vitreoretinal+surgeries.">Glaucoma management after vitreoretinal surgeries.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 27 (2), 125-131 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> Elife. 8, (2019).</li><li>Kwong, J. M., Caprioli, J., Piri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+binding+protein+with+multiple+splicing:+a+new+marker+for+retinal+ganglion+cells.">RNA binding protein with multiple splicing: a new marker for retinal ganglion cells.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (2), 1052-1058 (2010).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Smith, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Systematic evaluation of the mouse eye : anatomy, pathology, and biomethods. , (2002).</li></ol>

Her viser vi en enkel, men effektiv procedure for inducerende vedvarende IOP elevation i muse øjet ved intracameral injektion af SO. Denne procedure kan læres hurtigt af alle med erfaring i microdissection under et mikroskop. Den primære potentielle risiko for fiasko er lækage af så fra cornea incision. Men en af fordelene ved at bruge så er, at fordi olien dråbe er synlig og målbar, kan vi nemt identificere mus, der har modtaget dråber for lille til at fremkalde stabil okulær hypertension kort efter injektion ...

Det progressive tab af retinale ganglion celler (Rgc'er) og deres axoner er kendetegnende for glaukom, en fælles neurodegenerative sygdom i nethinden1. Det vil påvirke mere end 100.000.000 personer 40 − 80 år gammel af 20402. IOP er den eneste modificerbare risikofaktor i udviklingen og progressionen af glaukom. For at udforske patogenesen, progression, og potentielle behandlinger af glaukom, en pålidelig, reproducerbar, og inducerbar eksperimentel hypertension/glaukom model, der replikater centrale elementer af humane patienter er bydende nødvendigt.
IOP afhænger af vandig humor tilstrømningen til det forreste kammer fra det ciliære legeme i det bageste kammer og udstrømning gennem trabekulær meshwork (TM) i vinklen af det forreste kammer. Når en steady state er nået, opretholdes IOP. Når tilstrømning overstiger eller er mindre end udstrømningen, IOP stiger eller falder hhv. Ved at nedsætte den vandige udstrømning enten ved at vælge vinklen på det forreste kammer eller ved at beskadige TM, er der etableret flere glaukom-modeller3,4,5,6,7,8,9,10. Disse modeller er normalt forbundet med irreversibelt okulær vævsskade, og den høje IOP i det forreste kammer forårsager også uønskede komplikationer såsom hornhinde ødem og intraokulær inflammation, som gør nethinde dannelse og visuelle funktionsanalyser svære at udføre og fortolke.
For at udvikle en model, der overvinder disse mangler, fokuserede vi på den godt sudocumented sekundær glaukom forårsaget af silikoneolie (så), der opstår som en postoperative komplikation af humane vitreoretinal kirurgi11,12. SÅ bruges som en tamponade i retinale operationer på grund af sin høje overflade spændinger. Men, så kan fysisk tilflyde eleven, fordi det er lysere end de vandige og glasholdige væsker, som forhindrer vandig strømning i det forreste kammer. Forhindringen forårsager IOP elevation i det bageste kammer på grund af den vandige humor ophobning. Dette motiverede os til at udvikle og karakterisere en roman okulær hypertension musemodel baseret på intracameral så injektion og pupil blok13, med nøglefunktioner i den sekundære glaukom: effektiv pupil blok, signifikant IOP elevation, der kan vende tilbage til normal efter så fjernelse, og og neurodegeneration.
Her præsenterer vi en detaljeret protokol for så-induceret okulær hypertension i muse øjet, herunder så injektion og fjernelse og IOP måling.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:915px;" width="915">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">0.5% proparacaine hydrochloride</td>
			<td style="width:232px;">Akorn, Somerset</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:279px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">10mL syinge</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Luer-Lok Tip</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:26px;">18G needle</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>with Regular Bevel, Needle Length:25.4 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)</td>
			<td style="width:232px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:147px;">CAS# 75-80-9</td>
			<td>50g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">32G nano</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;">320122</td>
			<td>BD Nano Ultra Fine Pen Needle-32G 4mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">33G ophalmology needle</td>
			<td style="width:232px;">TSK/ VWR</td>
			<td style="width:147px;">TSK3313/ 10147-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">5mL syinge</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Luer-Lok Tip</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">AnaSed Injection (xylazine)</td>
			<td style="width:232px;">Butler Schein</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>100 mg/ml, 50 ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">artificial tears</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">300651431414</td>
			<td>Systane Ultra Lubricant Eye Drops</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">BSS PLUS Irrigating solution</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">65080050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dual-Stage Glass Micropipette Puller</td>
			<td style="width:232px;">NARISHIGE</td>
			<td style="width:147px;">PC-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:257px;">EZ-7000 Classic System</td>
			<td style="width:232px;">EZ system</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:232px;">VetOne</td>
			<td style="width:147px;">502017</td>
			<td>isoflurane, USP, 250ml/bottle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">IV Administration sets</td>
			<td style="width:232px;">EXELint/ Fisher</td>
			<td style="width:147px;">29081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">KETAMINE HYDROCHLORIDE INJECTION</td>
			<td style="width:232px;">VEDCO</td>
			<td style="width:147px;">50989-996-06</td>
			<td>KETAVED 100mg/ml * 10ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">microgrind bevelling machine</td>
			<td style="width:232px;">NARISHIGE</td>
			<td style="width:147px;">EG-401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Miniature EVA Tubing</td>
			<td style="width:232px;">McMaster-Carr</td>
			<td style="width:147px;">1883T4</td>
			<td>0.05&#34; ID, 0.09&#34; OD, 10 ft. Length</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">silicon oil (SILIKON)</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">8065601185</td>
			<td>1,000 mPa.s</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Standard Glass Capillaries</td>
			<td style="width:232px;">WPI/ Fisher</td>
			<td style="width:147px;">1B150-4</td>
			<td>4 in. (100mm) OD 1.5mm ID 0.84mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TonoLab tonometer</td>
			<td style="width:232px;">Colonial Medical Supply, Finland</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">veterinary antibiotic ointment</td>
			<td style="width:232px;">Dechra Veterinary</td>
			<td style="width:147px;">1223RX</td>
			<td>BNP ophthalmic ointment, Vetropolycin</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a reversible silicon oil-induced ocular hypertension model in mice

Forhøjet intraokulært tryk (IOP) er en veldokumenteret risikofaktor for glaukom. Her beskriver vi en roman, effektiv metode til konsekvent inducerende stabil IOP elevation i mus, der efterligner postoperative komplikation ved at bruge silikoneolie (så) som en tamponade agent i menneskelig vitreoretinal kirurgi. I denne protokol, så injiceres i det forreste kammer af muse øjet for at blokere eleven og forhindre tilstrømning af vandig humor. Det bageste kammer akkumulerer vandig humor, og dette øger igen IOP af det bageste segment. En enkelt so injektion producerer pålidelig, tilstrækkelig og stabil IOP elevation, som inducerer signifikant og neurodegeneration. Denne model er en sand replikat af sekundær glaukom i Øjenklinikken. For yderligere at efterligne den kliniske indstilling, så kan fjernes fra det forreste kammer for at genåbne afløbs vejen og tillade tilstrømning af vandig humor, som er drænet gennem trabekulær meshwork (TM) i vinklen af det forreste kammer. Fordi IOP hurtigt vender tilbage til normal, kan modellen bruges til at teste effekten af sænkning af IOP på og retinale ganglion celler. Denne metode er ligetil, kræver ikke særligt udstyr eller gentagne procedurer, nøje simulerer kliniske situationer, og kan gælde for forskellige dyrearter. Der kan dog være behov for mindre ændringer.

Kort efter injektionen kan vi nemt identificere mus, der ikke producerer stabil okulær hypertension på grund af de så små dråber er for lille (≤ 1,5 mm)13. Disse dyr er udelukket fra efterfølgende eksperimenter. Efter injektion procedurer, mere end 80% af så injicerede mus ender med dråber større end 1,6 mm. Vi målte IOP af disse mus øjne en gang om ugen i 8 uger efter en enkelt så injektion. Den IOP af øjet, der fik så forblev høj, generelt fordoble IOP af den kontralaterale kont...

Watch this Scientific Journal Video about A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice at JoVE.com

A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice

Her præsenterer vi en protokol til at inducere okulær hypertension og og neurodegeneration i muse øjne ved intracameral injektion af silikoneolie og proceduren for fjernelse af silikoneolie fra det forreste kammer for at returnere forhøjet intraokulært tryk til Normal.

En reversibel silicium olie induceret okulær hypertension model i mus

Elevated intraocular pressure (IOP) is a well-documented risk factor for glaucoma. Here we describe a novel, effective method for consistently inducing ...

Glaukom er den hyppigste årsag til irreversibel blindhed, karakteriseret ved retinale ganglion celledød og opto-neurodegeneration. Elevation af intraokulært tryk, også kaldet okulær hypertension, er den mest anerkendte risikofaktor for grøn stær. En enkel, men effektiv okulær hypertension model i eksperimentelle dyr som mus er vigtigt for at undersøge glaucometer i neurodegeneration og test behandling for neuroprotection.Således, med resultater, vi udvikler en mus okulær hypertension model, der nøje efterligner den sekundære grøn stær observeret hos menneskelige patienter. Denne model trofast kopiere den sekundære grøn stær forårsaget af silikone olie-induceret til pupilar blokering. Proceduren er enkel IOP elevation er stabil, og hvis neurodegeneration forbundet med okulær hypertension er svær i museøjne, endnu vigtigere, den okulære hypertension er reversibel, fordi silikone olie let kan fjernes fra musens øjne.Demonstration af proceduren vil være Dr.Fang Fang, en post-op fyr fra mit laboratorium. Til at begynde, lave et glas mikropipette til intracameral silikone olieindsprøjtning ved at trække et glas kapillær med en pipette puller. Skær en åbning på spidsen af mikropipette og skær spidsen ved hjælp af en mikro-kværn beveling maskine til at gøre en 35 til 40-graders facet.Poler kanterne af facet og vask det med vand for at fjerne alle vragrester. Autoklave mikropipetten før brug. For at forberede paracentesis nålen til hornhinden indrejse, vedhæfte en 32 gauge nål til en fem-milliliter sprøjte på en lokke lås og yderligere sikre det med tape.Bøj nålen facevel spids, med billedsiden op, ved 30 grader. For at forberede silikoneolieinjektoren skal du fastgøre og fastgøre en stump ende 18 gauge nål på en 10-milliliter sprøjte. Derefter vedhæfte et plastrør med 18 gauge nål i den ene ende og fylde op med silikone olie efter behov gennem den anden ende.Efter bedøvelse en ni til 10 uger gamle C57 sort 6J mus, kontrollere for den manglende reaktion på tåen knivspids med den manglende bevægelse af whiskers eller halen. Placer musen i en lateral position på en operation platform. Påfør en dråbe 5% proparacainhydrochlorid på hornhinden før injektionen for at reducere dens følsomhed under proceduren.Brug 32 gauge paracentesis nål til at gøre en indgang snit på super tidsmæssige kvadrant omkring 5 millimeter fra limbus. Tunnel gennem lagene af hornhinden i ca 3 millimeter før piercing ind i det forreste kammer, være omhyggelig med ikke at røre linsen eller iris. Træk nålen langsomt at frigive omkring en til to mikroliter af vandig humor fra det forreste kammer gennem tunnelen og vente i omkring otte minutter for yderligere at reducere det intraokulære tryk.Mål det kontralaterale kontroløje for at bestemme trykket. Sæt glasmikropipette præinstalleret med silikoneolie gennem hornhinden tunnelen ind i det forreste kammer med facet vendt nedad i irisoverfladen. Skub sprøjtestemplet langsomt for at indsprøjte silikoneolie i det forreste kammer, indtil oliedråben dækker det meste af irisoverfladen, ca. 2,3 til 2,4 millimeter i diameter.Lad mikropipetten blive i det forreste kammer i yderligere 10 sekunder, før den trækkes langsomt tilbage. Skub forsigtigt det øverste øjenlåg for at lukke hornhinden snit for at minimere silikone olie lækage. Og derefter anvende antibiotisk salve til øjet overflade.Hold musen på varmepuden, indtil den er helt kommet sig efter bedøvelse. For at fjerne silikone olie fra den forreste kammer, bedøve musen og derefter kontrollere for den manglende reaktion på tåen knivspids at bestemme bedøvelsesstyrke og den manglende bevægelse af whiskers eller halen. Placer musen på en operation platform og fastgør den i den laterale position med tape.Påfør en dråbe 5% proparacainhydrochlorid på hornhinden for at reducere dens følsomhed. Ved hjælp af den færdiglavede 32 gauge paracentesis nål, foretage to indsnit i den tidsmæssige kvadrant af hornhinden mellem ca to og fem klokken på kanten af silikone olie dråbe. Indsæt en 33 gauge kunstvanding nål forbundet til vanding løsning gennem en hornhinde snit ved maksimal hastighed.Indsæt en anden 33 gauge dræning nål fastgjort til sprøjten uden et stempel gennem den anden hornhinde snit til at tillade silikone oliedråbe at forlade den forreste kammer, mens vanding med vandingsopløsning. Træk afløbsnålen tilbage og vandingsnålen tilbage. Brug en glasmikropipette forbundet til en Hamilton sprøjte til at injicere en luftboble ind i det forreste kammer for at opretholde sin normale dybde og tryk for at lukke hornhinden snit.Påfør antibiotisk salve på begge øjne og holde musen på opvarmning opsving pad indtil fuldt tilbagebetalt fra anæstesi. Placer musen i et induktionskammer. Bedøve det som beskrevet i manuskriptet og holde sin hornhinde fugtig ved at anvende kunstige tårer under hele proceduren.Vent ca. 15 minutter for at lade eleven kunne spile helt. Mål IOP for begge øjne ved hjælp af et tonometer i henhold til produktvejledningen. Bring tonometeret nær museøjet, holde afstanden fra spidsen af sonden til musen hornhinden på omkring tre til fire millimeter.Tryk på måleknappen seks gange for at generere en aflæsning og få tre maskingenererede aflæsninger fra hvert øje for at opnå den gennemsnitlige IOP. Udfør immunohistokemi af hele mount retina retina ganglia celle tælle synsnerven semi-tynde sektioner og kvantificering af overlevende axoner på de dyr, der ofres på otte uger efter silikone olie injektion. Intraokulært tryk af museøjne med silikoneoliedråber større end 1,6 millimeter blev målt en gang om ugen i otte uger, efter en enkelt silikone olieindsprøjtning.Trykket i øjet modtager olien forblev høj, for det meste dobbelt så meget tryk fra den kontralaterale kontrol øje angiver effektiv elev blokering. I en anden gruppe mus skyllede silikoneolie fra det forreste kammer to uger efter injektionen. Efter at have ventet en uge til at tillade hornhinden til at inddrive, intraokulært tryk tilbage til normal, det samme som kontrol øjet.For at bestemme virkningerne af silikone olie-induceret okulær hypotension på retinale ganglion celler, de overlevende somata i de perifere regioner af retinale hele mounts blev kvantificeret af RBPMS farvning viser dramatiske retinale ganglion celledød efter silikone olieindsprøjtning. De overlevende axoner i synsnerven semi-tynde tværsnit blev kvantificeret ved PBD farvning otte uger efter injektionen. Der var en stor axon degeneration i silikone olie-induceret okulær hypertension.Dyrene kan afbildes med SLOOCT for at bestemme ændringen i nethinden. Dyrenes visuelle funktion kan også analyseres efter mønster ERG og OKR. Denne okulære hypertension model vil lette undersøgelsen af den høje IOP induceret glaucometers neurodegeneration.Det kan også bruges til at teste lovende neuroprotektive behandlinger præklinisk.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Medicine

Unit 1

Cardiovascular Drugs: Antihypertensive Drugs

SCIENTISTS IN ACTION

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and ...

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

En Laser-induceret musemodel af kronisk okulær hypertension til Karakterisere synsfejl

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Halspulsåren infusioner farmakokinetisk og farmakodynamisk analyse af Taxaner i mus

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

En simpel kritisk størrelse Femoral Defekt Model i mus

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

A Murine Model of Irreversible and Reversible Unilateral Ureteric Obstruction

En murin model af Irreversible og reversibel Ensidig ureteric Obstruktion

Obstruction of the kidney may affect native or transplanted kidneys and results in kidney injury and scarring. Presented here is a model of obstructive ...

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

En magnetisk mikroperle Okklusion Model at inducere okulær hypertension-Dependent Glaukom i mus

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

A Repetitive Concussive Head Injury Model in Mice

Et gentagne Concussive hoved Injury Model i mus

Despite the concussion/ mild traumatic brain injury (mTBI) being the most frequent occurrence of traumatic brain injury, there is still a lack of ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Shunt Surgery, Højre Heart kateterisation, og vaskulær Morfometri i en rotte model for Flow-induceret pulmonal arteriel hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Hornhindens epitel slid med okulær Burr som en Model for hornhinden sårheling

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...