Name: a reversible silicon oil-induced ocular hypertension model in mice
Uploaded: 2019-11-15T10:00:00
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Este trabalho é apoiado por nih concede EY024932, EY023295, e EY028106 para YH.

Todos os procedimentos foram aprovados pelo Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) da Universidade de Stanford.
1. Indução ocular da hipertensão pela injeção intracameral de SO
<ol><li>Prepare uma micropipette de vidro para injeção intracameral SO puxando um capilar de vidro com um puxador de pipeta para gerar uma micropipette. Corte uma abertura na ponta da micropipette e afie ainda mais a ponta com uma máquina de micromoedor para fazer um bisumo de 35°e 40°.</li>
	<l...

<ol>
	<li>Chang, E. E., Goldberg, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glaucoma+2.0:+neuroprotection,+neuroregeneration,+neuroenhancement.">Glaucoma 2.0: neuroprotection, neuroregeneration, neuroenhancement.</a> Ophthalmology. 119 (5), 979-986 (2012).</li><li>Tham, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+prevalence+of+glaucoma+and+projections+of+glaucoma+burden+through+2040:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Global prevalence of glaucoma and projections of glaucoma burden through 2040: a systematic review and meta-analysis.</a> Ophthalmology. 121 (11), 2081-2090 (2014).</li><li>Pang, I. H., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+for+glaucoma+retinopathy+and+optic+neuropathy.">Rodent models for glaucoma retinopathy and optic neuropathy.</a> Journal of Glaucoma. 16 (5), 483-505 (2007).</li><li>Morrison, J. C., Johnson, E., Cepurna, W. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+models+for+glaucoma+research.">Rat models for glaucoma research.</a> Progress in Brain Research. 173, 285-301 (2008).</li><li>McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+retinal+ganglion+cell+death+and+glaucoma.">Mouse models of retinal ganglion cell death and glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 88 (4), 816-824 (2009).</li><li>Chen, S., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Rodent+Model+of+Glaucoma+and+Its+Implications.">The Rodent Model of Glaucoma and Its Implications.</a> Asia Pacific Journal of Ophthalmology (Philadelphia). 4 (4), 236-241 (2015).</li><li>Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+microbead+occlusion+model:+a+paradigm+for+induced+ocular+hypertension+in+rats+and+mice.">The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (1), 207-216 (2010).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optic+neuropathy+due+to+microbead-induced+elevated+intraocular+pressure+in+the+mouse.">Optic neuropathy due to microbead-induced elevated intraocular pressure in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (1), 36-44 (2011).</li><li>Cone, F. E., Gelman, S. E., Son, J. L., Pease, M. E., Quigley, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+susceptibility+to+experimental+glaucoma+among+3+mouse+strains+using+bead+and+viscoelastic+injection.">Differential susceptibility to experimental glaucoma among 3 mouse strains using bead and viscoelastic injection.</a> Experimental Eye Research. 91 (3), 415-424 (2010).</li><li>Samsel, P. A., Kisiswa, L., Erichsen, J. T., Cross, S. D., Morgan, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+the+induction+of+experimental+glaucoma+using+magnetic+microspheres.">A novel method for the induction of experimental glaucoma using magnetic microspheres.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (3), 1671-1675 (2011).</li><li>Ichhpujani, P., Jindal, A., Jay Katz, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil+induced+glaucoma:+a+review.">Silicone oil induced glaucoma: a review.</a> Graefes Archieves for Clinical and Experimental Ophthalmology. 247 (12), 1585-1593 (2009).</li><li>Kornmann, H. L., Gedde, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glaucoma+management+after+vitreoretinal+surgeries.">Glaucoma management after vitreoretinal surgeries.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 27 (2), 125-131 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> Elife. 8, (2019).</li><li>Kwong, J. M., Caprioli, J., Piri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+binding+protein+with+multiple+splicing:+a+new+marker+for+retinal+ganglion+cells.">RNA binding protein with multiple splicing: a new marker for retinal ganglion cells.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (2), 1052-1058 (2010).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Smith, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Systematic evaluation of the mouse eye : anatomy, pathology, and biomethods. , (2002).</li></ol>

Aqui demonstramos um procedimento simples, mas eficaz para induzir a elevação sustentada de OPP no olho do rato por injeção intracameral de SO. Este procedimento pode ser aprendido rapidamente por qualquer pessoa com experiência em microdissecção um microscópio. O principal risco potencial de falha é o vazamento de SO da incisão da córnea. No entanto, uma das vantagens do uso de SO é que, como a gota de óleo é visível e mensurável, podemos facilmente identificar camundongos que receberam gotículas pequen...

A perda progressiva de células ganglionares da retina (RGCs) e seus axônios é a marca registrada do glaucoma, uma doença neurodegenerativa comum na retina1. Afetará mais de 100 milhões de indivíduos de 40 a 80 anos até 20402. O IOP continua a ser o único fator de risco modificável no desenvolvimento e progressão do glaucoma. A fim de explorar a patogênese, progressão e tratamentos potenciais de glaucoma, um modelo de hipertensão ocular experimental/glaucoma confiável, reproduzível e indutor que reproduz as principais características dos pacientes humanos é imperativo.
O IOP depende da entrada aquosa do humor à câmara anterior do corpo ciliary na câmara posterior e da saída através do meshwork trabecular (TM) no ângulo da câmara anterior. Ao chegar a um estado estável, o IOP é mantido. Quando o fluxo excede ou é menor do que a saída, o IOP sobe ou cai respectivamente. Ao diminuir a saída aquosa, quer occluding o ângulo da câmara anterior ou por danificar o TM, vários modelos de glaucoma foram estabelecidos3,4,5,6,7,8,9,10. Esses modelos estão normalmente associados a danos irreversíveis do tecido ocular, e o alto OPE na câmara anterior também causa complicações indesejadas, como edema córnea e inflamação intraocular, que dificultam a realização e interpretação da imagem ocular da retina.
Para desenvolver um modelo que supere essas deficiências, nos concentramos no glaucoma secundário bem sudocumenta causado pelo óleo de silicone (SO) que ocorre como uma complicação pós-operatória da cirurgia vitreoretinal humana11,12. Assim é usado como um tamponade em cirurgias da retina por causa de sua tensão de superfície elevada. No entanto, Assim pode fisicamente ocluir a pupila, porque é mais leve do que os fluidos aquosos e vítreos, o que impede o fluxo aquoso para a câmara anterior. A obstrução causa elevação do IOP na câmara posterior devido à acumulação aquosa do humor. Isso nos motivou a desenvolver e caracterizar um novo modelo de camundongo hipertensão ocular baseado na injeção intracameral SO e no bloco pupilar13,com características-chave do glaucoma secundário: bloco pupillar eficaz, elevação significativa do IOP que pode retornar ao normal após a remoção de SO e neurodegeneração glaucomatous.
Aqui apresentamos um protocolo detalhado para hipertensão ocular induzida por SO no olho do rato, incluindo injeção e remoção de SO e medição de IOP.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:915px;" width="915">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">0.5% proparacaine hydrochloride</td>
			<td style="width:232px;">Akorn, Somerset</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:279px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">10mL syinge</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Luer-Lok Tip</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:26px;">18G needle</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>with Regular Bevel, Needle Length:25.4 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)</td>
			<td style="width:232px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:147px;">CAS# 75-80-9</td>
			<td>50g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">32G nano</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;">320122</td>
			<td>BD Nano Ultra Fine Pen Needle-32G 4mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">33G ophalmology needle</td>
			<td style="width:232px;">TSK/ VWR</td>
			<td style="width:147px;">TSK3313/ 10147-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">5mL syinge</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Luer-Lok Tip</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">AnaSed Injection (xylazine)</td>
			<td style="width:232px;">Butler Schein</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>100 mg/ml, 50 ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">artificial tears</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">300651431414</td>
			<td>Systane Ultra Lubricant Eye Drops</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">BSS PLUS Irrigating solution</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">65080050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dual-Stage Glass Micropipette Puller</td>
			<td style="width:232px;">NARISHIGE</td>
			<td style="width:147px;">PC-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:257px;">EZ-7000 Classic System</td>
			<td style="width:232px;">EZ system</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:232px;">VetOne</td>
			<td style="width:147px;">502017</td>
			<td>isoflurane, USP, 250ml/bottle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">IV Administration sets</td>
			<td style="width:232px;">EXELint/ Fisher</td>
			<td style="width:147px;">29081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">KETAMINE HYDROCHLORIDE INJECTION</td>
			<td style="width:232px;">VEDCO</td>
			<td style="width:147px;">50989-996-06</td>
			<td>KETAVED 100mg/ml * 10ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">microgrind bevelling machine</td>
			<td style="width:232px;">NARISHIGE</td>
			<td style="width:147px;">EG-401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Miniature EVA Tubing</td>
			<td style="width:232px;">McMaster-Carr</td>
			<td style="width:147px;">1883T4</td>
			<td>0.05&#34; ID, 0.09&#34; OD, 10 ft. Length</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">silicon oil (SILIKON)</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">8065601185</td>
			<td>1,000 mPa.s</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Standard Glass Capillaries</td>
			<td style="width:232px;">WPI/ Fisher</td>
			<td style="width:147px;">1B150-4</td>
			<td>4 in. (100mm) OD 1.5mm ID 0.84mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TonoLab tonometer</td>
			<td style="width:232px;">Colonial Medical Supply, Finland</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">veterinary antibiotic ointment</td>
			<td style="width:232px;">Dechra Veterinary</td>
			<td style="width:147px;">1223RX</td>
			<td>BNP ophthalmic ointment, Vetropolycin</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a reversible silicon oil-induced ocular hypertension model in mice

A pressão intraocular elevada (OPP) é um fator de risco bem documentado para glaucoma. Aqui descrevemos um novo método eficaz para induzir consistentemente a elevação estável de IOP em camundongos que imita a complicação pós-operatória do uso de óleo de silicone (SO) como um agente de tamponada na cirurgia de vitreoretinal humana. Neste protocolo, SO é injetado na câmara anterior do olho do rato para bloquear a pupila e evitar o fluxo de humor aquoso. A câmara posterior acumula humor aquoso e isso, por sua vez, aumenta o IOP do segmento posterior. Uma única injeção de SO produz elevação de IOP confiável, suficiente e estável, o que induz neurodegeneração glaucomatous significativa. Este modelo é uma verdadeira réplica do glaucoma secundário na clínica oftalmológica. Para imitar ainda mais o ambiente clínico, assim pode ser removido da câmara anterior para reabrir a via de drenagem e permitir o fluxo de humor aquoso, que é drenado através da malha trabecular (TM) no ângulo da câmara anterior. Como o IOP retorna rapidamente ao normal, o modelo pode ser usado para testar o efeito da redução do IOP nas células ganglionares da retina glaucomatous. Este método é simples, não requer equipamentos especiais ou procedimentos de repetição, simula de perto situações clínicas e pode ser aplicável a diversas espécies animais. No entanto, pequenas modificações podem ser necessárias.

Logo após a injeção, podemos identificar facilmente camundongos que não produzem hipertensão ocular estável por causa das gotículas SO sendo muito pequenas (≤1,5 mm)13. Estes animais são excluídos dos experimentos subsequentes. Após os procedimentos de injeção, mais de 80% dos camundongos injetados SO acabam com gotículas maiores do que 1,6 mm. Medimos o OPP desses olhos de rato uma vez por semana durante 8 semanas após uma única injeção de SO. O OPP do olho que recebe SO perman...

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A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice

Aqui, apresentamos um protocolo para induzir hipertensão ocular e neurodegeneração glaucomatous nos olhos do rato por injeção intracameral de óleo de silicone e o procedimento para a remoção de óleo de silicone da câmara anterior para retornar pressão intraocular elevada para Normal.

Um modelo reversível da hipertensão ocular óleo-induzida do silicone nos ratos

Elevated intraocular pressure (IOP) is a well-documented risk factor for glaucoma. Here we describe a novel, effective method for consistently inducing ...

O glaucoma é a principal causa de cegueira irreversível, caracterizada pela morte celular gânglio da retina e pela opto-neurodegeneração. A elevação da pressão intraocular, também chamada de hipertensão ocular, é o fator de risco mais reconhecido para glaucoma. Um modelo simples, mas eficaz de hipertensão ocular em animais experimentais como camundongos, é importante para investigar glaucometros em neurodegeneração e testar o tratamento para neuroproteção.Assim, com os resultados, desenvolvemos um modelo de hipertensão ocular do camundongo que imita de perto o glaucoma secundário observado em pacientes humanos. Este modelo replica fielmente o glaucoma secundário causado pelo óleo de silicone induzido pelo bloqueio pupilar. O procedimento é simples a elevação do IOP é estável, e se a neurodegeneração associada à hipertensão ocular for grave nos olhos do rato, mais importante, a hipertensão ocular é reversível porque o óleo de silicone pode ser facilmente removido dos olhos do rato.Demonstrando o procedimento será o Dr. Fang Fang, um sujeito pós-operatório do meu laboratório. Para começar, faça uma micropipette de vidro para injeção intracameral de óleo de silicone puxando um capilar de vidro com um puxador de pipeta. Corte uma abertura na ponta da micropipette e afie a ponta usando uma máquina de bipartida micro-moedor para fazer um bisbilhoteiro de 35 a 40 graus.Polir as bordas do bisel e lavá-lo com água para remover todos os detritos. Autoclave a micropipette antes de usar. Para preparar a agulha de paracentese para a entrada da córnea, conecte uma agulha de calibre 32 a uma seringa de cinco mililitros em uma fechadura de isca e fixe-a ainda mais com fita adesiva.Dobre a ponta de bevel agulha, de frente para cima, a 30 graus. Para preparar o injetor de óleo de silicone, conecte e fixe uma agulha de ponta 18 em uma seringa de 10 mililitros. Em seguida, conecte um tubo plástico com a agulha de calibre 18 em uma extremidade e encha com óleo de silicone conforme necessário através da outra extremidade.Depois de anestesiar um rato C57 preto 6J de nove a 10 semanas, verifique se há falta de resposta ao aperto do dedo do dedo com a falta de movimento dos bigodes ou da cauda. Coloque o mouse em posição lateral em uma plataforma de cirurgia. Aplique uma gota de 5% de cloridrato de proparacaina na córnea antes da injeção para reduzir sua sensibilidade durante o procedimento.Use a agulha de paracentese de calibre 32 para fazer uma incisão de entrada no quadrante super temporal a cerca de 5 milímetros do limbus. Túnel através das camadas da córnea por cerca de 3 milímetros antes de perfurar na câmara anterior, tomando cuidado para não tocar na lente ou íris. Retire a agulha lentamente para liberar cerca de um a dois microliters de humor aquoso da câmara anterior através do túnel e espere cerca de oito minutos para diminuir ainda mais a pressão intraocular.Meça o olho de controle contralateral para determinar a pressão. Insira a micropipette de vidro pré-carregada com óleo de silicone através do túnel córnea na câmara anterior com o bisel voltado para baixo na superfície da íris. Empurre o êmbolo da seringa lentamente para injetar óleo de silicone na câmara anterior até que a gota de óleo cubra a maior parte da superfície da íris, aproximadamente 2,3 a 2,4 milímetros de diâmetro.Deixe a micropipette na câmara anterior por mais 10 segundos antes de retirá-la lentamente. Empurre suavemente a pálpebra superior para fechar a incisão da córnea para minimizar o vazamento de óleo de silicone. E então aplique pomada antibiótica na superfície dos olhos.Mantenha o mouse na almofada de aquecimento até se recuperar totalmente da anestesia. Para remover o óleo de silicone da câmara anterior, anestesiar o mouse e, em seguida, verificar a falta de resposta ao aperto do dedo do dedo do dedo para determinar a força anestéstica e a falta de movimento dos bigodes ou da cauda. Coloque o mouse em uma plataforma de cirurgia e fixe-o na posição lateral com fita.Aplique uma gota de 5% de cloridrato de proparacaina na córnea para reduzir sua sensibilidade. Usando a agulha de paracentese de calibre 32 pré-feita, faça duas incisões no quadrante temporal da córnea entre aproximadamente duas e cinco horas na borda da gotícula de óleo de silicone. Insira uma agulha de irrigação de calibre 33 conectada à solução de irrigação através de uma incisão córnea em velocidade máxima.Insira outra agulha de drenagem de calibre 33 presa à seringa sem um êmbolo através da outra incisão córnea para permitir que a gota de óleo de silicone saia da câmara anterior enquanto irriga com solução irrigante. Retire a agulha de drenagem e depois a agulha de irrigação. Use uma micropipette de vidro conectada a uma seringa Hamilton para injetar uma bolha de ar na câmara anterior para manter sua profundidade normal e pressione para fechar a incisão da córnea.Aplique pomada antibiótica em ambos os olhos e mantenha o rato na almofada de recuperação de aquecimento até que esteja totalmente recuperado da anestesia. Coloque o mouse em uma câmara de indução. Anestesia-o como descrito no manuscrito e mantenha sua córnea úmida aplicando lágrimas artificiais durante todo o procedimento.Aguarde cerca de 15 minutos para permitir que o aluno dilatar completamente. Meça o IOP de ambos os olhos usando um tonômetro de acordo com as instruções do produto. Leve o tonômetro perto do olho do rato, mantendo a distância da ponta da sonda até a córnea do rato em cerca de três a quatro milímetros.Pressione o botão de medição seis vezes para gerar uma leitura e obter três leituras geradas por máquina de cada olho para adquirir o IOP médio. Realize a imunohistoquímica de células gânglios de retina de montagem inteira contando seções semifinais do nervo óptico e quantificação de axônios sobreviventes nos animais sacrificados às oito semanas após a injeção de óleo de silicone. A pressão intraocular dos olhos do rato com gotículas de óleo de silicone maiores que 1,6 milímetros foi medida uma vez por semana durante oito semanas, após uma única injeção de óleo de silicone.A pressão do olho que recebeu o óleo permaneceu alta, principalmente o dobro da pressão do olho de controle contralateral indicando um bloqueio efetivo da pupila. Em outro grupo de camundongos, o óleo de silicone foi retirado da câmara anterior duas semanas após a injeção. Depois de esperar uma semana para permitir que a córnea se recuperasse, a pressão intraocular voltou ao normal, o mesmo que o olho de controle.Para determinar os efeitos da hipotensão ocular induzida pelo óleo de silicone nas células gânglios da retina, a somata sobrevivente nas regiões periféricas dos montagems inteiras da retina foi quantificada pela coloração RBPMS mostrando dramática morte celular de gânglio da retina após injeção de óleo de silicone. Os axônios sobreviventes nas seções transversais semi-finas do nervo óptico foram quantificados pela coloração da PBD oito semanas após a injeção. Houve uma grande degeneração de axônio na hipertensão ocular induzida pelo óleo de silicone.Os animais podem ser imagens com SLOOCT para determinar a mudança na retina. A função visual dos animais também pode ser avaliada pelo padrão ERG e OKR. Este modelo de hipertensão ocular facilitará a investigação da neurodegeneração de glaucometros induzidos pelo IOP.Também pode ser usado para testar terapias neuroprotetoras promissoras pré-clínicas.

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The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

A Repetitive Concussive Head Injury Model in Mice

A principal modelo lesões repetitivas Concussive em Ratos

Despite the concussion/ mild traumatic brain injury (mTBI) being the most frequent occurrence of traumatic brain injury, there is still a lack of ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

A cirurgia de derivação, coração direito Cateterismo e Vascular morfometria em um modelo de rato para induzida Fluxo de Hipertensão Arterial Pulmonar

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Cicatrização de feridas abrasão epitelial da córnea com Burr Ocular como um modelo para córnea

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...