Name: a reversible silicon oil-induced ocular hypertension model in mice
Uploaded: 2019-11-15T10:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice at JoVE.com

Bu çalışma NIH'nin YH'ye EY024932, EY023295 ve EY028106 hibeleri ile desteklenmiştir.

Tüm prosedürler Stanford Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır.
1. So intracameral enjeksiyon ile oküler hipertansiyon indüksiyonu
<ol><li>Bir mikropipet oluşturmak için bir pipet puller ile bir cam kılcal çekerek intracameral SO enjeksiyon için bir cam mikropipet hazırlayın. Mikropipetin ucundaki bir açıklığı kesin ve 35°−40° açı yapmak için mikrodeğirmenci-beveling makinesiyle ucu daha da keskinleştirin.</li...

<ol>
	<li>Chang, E. E., Goldberg, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glaucoma+2.0:+neuroprotection,+neuroregeneration,+neuroenhancement.">Glaucoma 2.0: neuroprotection, neuroregeneration, neuroenhancement.</a> Ophthalmology. 119 (5), 979-986 (2012).</li><li>Tham, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+prevalence+of+glaucoma+and+projections+of+glaucoma+burden+through+2040:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Global prevalence of glaucoma and projections of glaucoma burden through 2040: a systematic review and meta-analysis.</a> Ophthalmology. 121 (11), 2081-2090 (2014).</li><li>Pang, I. H., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+for+glaucoma+retinopathy+and+optic+neuropathy.">Rodent models for glaucoma retinopathy and optic neuropathy.</a> Journal of Glaucoma. 16 (5), 483-505 (2007).</li><li>Morrison, J. C., Johnson, E., Cepurna, W. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+models+for+glaucoma+research.">Rat models for glaucoma research.</a> Progress in Brain Research. 173, 285-301 (2008).</li><li>McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+retinal+ganglion+cell+death+and+glaucoma.">Mouse models of retinal ganglion cell death and glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 88 (4), 816-824 (2009).</li><li>Chen, S., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Rodent+Model+of+Glaucoma+and+Its+Implications.">The Rodent Model of Glaucoma and Its Implications.</a> Asia Pacific Journal of Ophthalmology (Philadelphia). 4 (4), 236-241 (2015).</li><li>Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+microbead+occlusion+model:+a+paradigm+for+induced+ocular+hypertension+in+rats+and+mice.">The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (1), 207-216 (2010).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optic+neuropathy+due+to+microbead-induced+elevated+intraocular+pressure+in+the+mouse.">Optic neuropathy due to microbead-induced elevated intraocular pressure in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (1), 36-44 (2011).</li><li>Cone, F. E., Gelman, S. E., Son, J. L., Pease, M. E., Quigley, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+susceptibility+to+experimental+glaucoma+among+3+mouse+strains+using+bead+and+viscoelastic+injection.">Differential susceptibility to experimental glaucoma among 3 mouse strains using bead and viscoelastic injection.</a> Experimental Eye Research. 91 (3), 415-424 (2010).</li><li>Samsel, P. A., Kisiswa, L., Erichsen, J. T., Cross, S. D., Morgan, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+the+induction+of+experimental+glaucoma+using+magnetic+microspheres.">A novel method for the induction of experimental glaucoma using magnetic microspheres.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (3), 1671-1675 (2011).</li><li>Ichhpujani, P., Jindal, A., Jay Katz, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil+induced+glaucoma:+a+review.">Silicone oil induced glaucoma: a review.</a> Graefes Archieves for Clinical and Experimental Ophthalmology. 247 (12), 1585-1593 (2009).</li><li>Kornmann, H. L., Gedde, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glaucoma+management+after+vitreoretinal+surgeries.">Glaucoma management after vitreoretinal surgeries.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 27 (2), 125-131 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> Elife. 8, (2019).</li><li>Kwong, J. M., Caprioli, J., Piri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+binding+protein+with+multiple+splicing:+a+new+marker+for+retinal+ganglion+cells.">RNA binding protein with multiple splicing: a new marker for retinal ganglion cells.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (2), 1052-1058 (2010).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Smith, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Systematic evaluation of the mouse eye : anatomy, pathology, and biomethods. , (2002).</li></ol>

Burada SO intracameral enjeksiyon ile fare gözü sürekli IOP yükseklik indükleyen basit ama etkili bir prosedür göstermektedir. Bu işlem mikroskop altında mikrodiseksiyon deneyimi olan herkes tarafından hızlı bir şekilde öğrenilebilir. Birincil başarısızlık riski kornea kesisinden SO sızıntısıdır. Ancak, SO kullanmanın avantajlarından biri yağ damlacık görünür ve ölçülebilir olduğu için, biz kolayca enjeksiyondan kısa bir süre sonra istikrarlı oküler hipertansiyon neden ve sonraki d...

Retina ganglion hücrelerinin ilerleyici kaybı (RGCs) ve aksonlar glokom, retinada yaygın bir nörodejeneratif hastalık özelliğidir1. 2040 yılına kadar 40−80 yaş ları arasında 100 milyondan fazla kişiyietkileyecektir. IOP glokom gelişimi ve ilerlemesinde tek değiştirilebilir risk faktörü olmaya devam etmektedir. Glokomun patogenezini, progresyonunu ve potansiyel tedavilerini araştırmak için, insan hastalarının temel özelliklerini kopyalayan güvenilir, tekrarlanabilir ve indükedilemez deneysel oküler hipertansiyon/glokom modeli zorunludur.
IOP, arka haznedeki siliyer gövdeden ön odaya sulu mizah girişine ve ön odanın açısında trabeküler meshwork (TM) ile çıkışa bağlıdır. Sabit bir duruma ulaştıktan sonra, IOP korunur. Giriş, çıkış sınırını aştığında veya daha az olduğunda, IOP sırasıyla yükselir veya düşer. Ön odanın açısını tıkararak veya TM'ye zarar vererek sulu çıkışazalarak3,4,5,6,7,8,9,10olmak üzere çeşitli glokom modelleri oluşturulmuştur. Bu modeller normalde geri dönüşümsüz göz dokusu hasarı ile ilişkilidir, ve ön odada yüksek IOP da kornea ödemi ve göz içi iltihabı gibi istenmeyen komplikasyonlara neden olur, hangi retinagörüntüleme ve görsel fonksiyon tahlilleri yapmak ve yorumlamak zor olun.
Bu eksikliklerin üstesinden gelen bir model geliştirmek için, insan vitreoretinal cerrahi nin ameliyat sonrası komplikasyonu olarak ortaya çıkan silikon yağının (SO) neden olduğu iyi belgelenmiş sekonder glokoma odaklandık11,12. SO, yüksek yüzey gerilimi nedeniyle retinal ameliyatlarda tamponad olarak kullanılır. Ancak, SO fiziksel olarak ön odaya sulu akışını önler sulu ve vitreus sıvıları, daha hafif olduğu için gözbebeği tıkayabilirsiniz. Tıkanıklık sulu mizah birikimi nedeniyle arka odada IOP yükselmesine neden olur. Bu geliştirmek ve intracameral SO enjeksiyonu ve pupillary blok13dayalı yeni bir oküler hipertansiyon fare modeli karakterize bizi motive , ikincil glokom temel özellikleri ile: etkili pupillary blok, SO kaldırma sonra normale dönebilirsiniz önemli IOP yüksekliği, ve glokom nörodejenerasyon.
Burada fare gözüne SO enjeksiyonu, çıkarılması ve IOP ölçümü dahil olmak üzere SO'ya bağlı oküler hipertansiyon için ayrıntılı bir protokol sokulduk.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:915px;" width="915">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">0.5% proparacaine hydrochloride</td>
			<td style="width:232px;">Akorn, Somerset</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:279px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">10mL syinge</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Luer-Lok Tip</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:26px;">18G needle</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>with Regular Bevel, Needle Length:25.4 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)</td>
			<td style="width:232px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:147px;">CAS# 75-80-9</td>
			<td>50g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">32G nano</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;">320122</td>
			<td>BD Nano Ultra Fine Pen Needle-32G 4mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">33G ophalmology needle</td>
			<td style="width:232px;">TSK/ VWR</td>
			<td style="width:147px;">TSK3313/ 10147-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">5mL syinge</td>
			<td style="width:232px;">BD</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Luer-Lok Tip</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">AnaSed Injection (xylazine)</td>
			<td style="width:232px;">Butler Schein</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>100 mg/ml, 50 ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">artificial tears</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">300651431414</td>
			<td>Systane Ultra Lubricant Eye Drops</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">BSS PLUS Irrigating solution</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">65080050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dual-Stage Glass Micropipette Puller</td>
			<td style="width:232px;">NARISHIGE</td>
			<td style="width:147px;">PC-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:257px;">EZ-7000 Classic System</td>
			<td style="width:232px;">EZ system</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:232px;">VetOne</td>
			<td style="width:147px;">502017</td>
			<td>isoflurane, USP, 250ml/bottle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">IV Administration sets</td>
			<td style="width:232px;">EXELint/ Fisher</td>
			<td style="width:147px;">29081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">KETAMINE HYDROCHLORIDE INJECTION</td>
			<td style="width:232px;">VEDCO</td>
			<td style="width:147px;">50989-996-06</td>
			<td>KETAVED 100mg/ml * 10ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">microgrind bevelling machine</td>
			<td style="width:232px;">NARISHIGE</td>
			<td style="width:147px;">EG-401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Miniature EVA Tubing</td>
			<td style="width:232px;">McMaster-Carr</td>
			<td style="width:147px;">1883T4</td>
			<td>0.05&#34; ID, 0.09&#34; OD, 10 ft. Length</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">silicon oil (SILIKON)</td>
			<td style="width:232px;">Alcon Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">8065601185</td>
			<td>1,000 mPa.s</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Standard Glass Capillaries</td>
			<td style="width:232px;">WPI/ Fisher</td>
			<td style="width:147px;">1B150-4</td>
			<td>4 in. (100mm) OD 1.5mm ID 0.84mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TonoLab tonometer</td>
			<td style="width:232px;">Colonial Medical Supply, Finland</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">veterinary antibiotic ointment</td>
			<td style="width:232px;">Dechra Veterinary</td>
			<td style="width:147px;">1223RX</td>
			<td>BNP ophthalmic ointment, Vetropolycin</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a reversible silicon oil-induced ocular hypertension model in mice

Yüksek göz içi basıncı (IOP) glokom için iyi belgelenmiş bir risk faktörüdür. Burada, insan vitreoretinal cerrahisinde tamponad ajanı olarak silikon yağı (SO) kullanımının postoperatif komplikasyonu taklit eden farelerde sürekli olarak istikrarlı IOP yükselmesini indükleyen yeni ve etkili bir yöntemi açıklıyoruz. Bu protokolde SO, göz bebeğini engellemek ve sulu mizah girişini önlemek için fare gözünün ön odasına enjekte edilir. Arka oda sulu mizah birikir ve bu da arka segmentin IOP artırır. Tek bir SO enjeksiyonu güvenilir üretir, yeterli, ve istikrarlı IOP yükseklik, hangi önemli glokom nörodejenerasyon indükler. Bu model göz kliniğinde ikincil glokom gerçek bir kopya. Daha fazla klinik ayarı taklit etmek için, SO drenaj yolunu yeniden açmak ve ön oda açısında trabeküler meshwork (TM) ile boşaltılır sulu mizah, girişine izin ön odasından kaldırılabilir. IOP hızlı bir şekilde normale döndüğünden, model glokom retinaganglion hücreleri üzerinde IOP düşürücü etkisini test etmek için kullanılabilir. Bu yöntem basittir, özel ekipman veya tekrar prosedürleri gerektirmez, klinik durumları yakından simüle eder ve çeşitli hayvan türleri için uygulanabilir. Ancak, küçük değişiklikler gerekebilir.

Enjeksiyondan kısa bir süre sonra, SO damlacıklarının çok küçük olması nedeniyle stabil oküler hipertansiyon üretmeyen fareleri kolayca tanımlayabiliriz (≤1.5 mm)13. Bu hayvanlar sonraki deneylerin dışında tutulur. Enjeksiyon prosedürlerini takiben, SO enjekte edilen farelerin %80'inden fazlası 1,6 mm'den daha büyük damlacıklarla sonuçlanır. Biz tek bir SO enjeksiyonsonra 8 hafta boyunca haftada bir kez bu fare gözlerinin IOP ölçüldü. SO alan gözün IOP'su yüksek ka...

Watch this Scientific Journal Video about A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice at JoVE.com

A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice

Burada, silikon yağı intrakalik enjeksiyonu ve ön hazneden silikon yağı kaldırma prosedürü ile fare gözlerinde oküler hipertansiyon ve glokom nörodejenerasyon indüklemek için bir protokol sunmak yüksek göz içi basıncı dönmek için Normal.

Farelerde Geri Dönüşümlü Silikon YağA Bağlı Oküler Hipertansiyon Modeli

Elevated intraocular pressure (IOP) is a well-documented risk factor for glaucoma. Here we describe a novel, effective method for consistently inducing ...

Glokom geri dönüşümsüz körlük önde gelen nedenidir, retinal ganglion hücre ölümü ve opto-nörodejenerasyon ile karakterize. Göz içi basıncının yükselmesi, ayrıca oküler hipertansiyon denir, glokom için en tanınmış risk faktörüdür. Fareler gibi deneysel hayvanlarda basit ama etkili bir oküler hipertansiyon modeli nörodejenerasyon glaucometers araştırmak ve nörokoruma için tedavi test etmek için önemlidir.Bu nedenle, sonuçlarla, insan hastalarda gözlenen sekonder glokomu yakından taklit eden bir fare oküler hipertansiyon modeli geliştiriyoruz. Bu model sadakatle pupilar engelleme için silikon yağı kaynaklı neden ikincil glokom çoğaltmak. İşlem basit IOP yüksekliği istikrarlı, ve göz hipertansiyonu ile ilişkili nörodejenerasyon fare gözlerinde şiddetli ise, daha da önemlisi, silikon yağı kolayca fare gözlerinden kaldırılabilir çünkü oküler hipertansiyon geri dönüşümlüdür.Prosedürü gösteren Dr.Fang Fang, benim laboratuvarımdan ameliyat sonrası bir adam. Başlamak için, bir pipet çekmece ile bir cam kılcal çekerek intracameral silikon yağ enjeksiyonu için bir cam mikropipet olun. Mikropipetin ucundaki bir açıklığı kesin ve 35 ila 40 derecelik bir bükülme yapmak için bir mikro-öğütücü beveling makinesi kullanarak ucu keskinleştirin.Lehçe bevel kenarları ve tüm enkaz kaldırmak için su ile yıkayın. Kullanmadan önce mikropipetok. Kornea girişi için paracentesis iğne hazırlamak için, bir yem kilidi üzerinde beş mililitrelik şırınga bir 32 gauge iğne takın ve daha bant ile güvenli.İğne ucubük, yüz-up, 30 derece. Silikon yağ enjektörü hazırlamak için, 10 mililitrelik bir şırınga üzerine 18 gauge iğneyi takın ve sabitlayın. Sonra bir ucunda 18 gauge iğne ile plastik bir tüp takın ve diğer ucundan gerektiği gibi silikon yağı ile doldurun.Dokuz ila 10 haftalık C57 siyah 6J fare anestezi sonra, bıyık veya kuyruk hareket eksikliği ile parmak çimdik yanıt eksikliği olup olmadığını kontrol edin. Fareyi cerrahi platformda yanal bir konuma yerleştirin. İşlem sırasında hassasiyetini azaltmak için enjeksiyondan önce korneaya %5 proparacaine hidroklorür damlatın.Limbus yaklaşık 5 milimetre süper temporal kadranda bir giriş kesi yapmak için 32 gauge paracentesis iğne kullanın. Ön odaya piercing önce yaklaşık 3 milimetre kornea katmanları ile Tünel, lens veya iris dokunmamaya dikkat ediyor. Tünel den ön odasından sulu mizah yaklaşık bir ila iki mikrolitre serbest bırakmak için yavaş yavaş iğne çekin ve göz içi basıncını azaltmak için yaklaşık sekiz dakika bekleyin.Basıncı belirlemek için kontralateral kontrol gözünü ölçün. Silikon yağı ile önceden yüklenmiş cam mikropipeti kornea tünelinden ön odaya yerleştirin ve dik lik iris yüzeyine bakacak şekilde. Yağ damlacığı yaklaşık 2,3 ila 2,4 milimetre çapında, iris yüzeyinin çoğunu kaplayana kadar ön hazneye silikon yağı enjekte etmek için şırınga pistonlu yavaş yavaş itin.Mikropipeti yavaşça çekmeden önce 10 saniye daha ön haznede bırakın. Silikon yağ sızıntısını en aza indirmek için üst göz kapağını kornea kesisini kapatmak için yavaşça itin. Sonra da göz yüzeyine antibiyotik merhem uygulayın.Anestezi tamamen iyileşene kadar fareyi ısıtma yastığında tutun. Ön hazneden silikon yağı çıkarmak için, fareyi anestezik ve sonra anestezik gücü ve bıyık veya kuyruk hareket eksikliği belirlemek için parmak çimdik yanıt eksikliği olup olmadığını kontrol edin. Fareyi bir ameliyat platformuna yerleştirin ve bantla yanal pozisyonda sabitleyin.Hassasiyetini azaltmak için korneaya %5 proparacaine hidroklorür damlatın. Önceden yapılmış 32 gauge paracentesis iğne kullanarak, silikon yağ damlacık kenarında yaklaşık iki ve beş arasında korneanın temporal çeyreğinde iki kesiler yapmak. Maksimum hızda bir kornea kesisi ile sulama çözeltisine bağlı 33 gauge sulama iğnesi takın.Başka bir 33 gauge drenaj iğnesi diğer kornea kesi ile bir piston olmadan şırınga bağlı eklemek silikon yağ damlacık sulama çözeltisi ile sulama sırasında ön oda çıkmak için izin vermek. Drenaj iğnesini sonra sulama iğnesini geri çekin. Normal derinliğini korumak ve kornea kesisini kapatmak için basın ön odasına bir hava kabarcığı enjekte etmek için bir Hamilton şırınga bağlı bir cam mikropipet kullanın.Her iki göze de antibiyotik merhem uygulayın ve fareyi anesteziden tamamen iyileşene kadar ısıtma kurtarma yastığında tutun. Fareyi bir indüksiyon odasına yerleştirin. El yazmasında açıklandığı gibi anestezi ve işlem boyunca yapay gözyaşı uygulayarak korneasını nemli tutun.Göz bebeğinin tam olarak dilate izin vermek için yaklaşık 15 dakika bekleyin. Ürün talimatlarına göre bir tonometre kullanarak her iki gözün IOP'sini ölçün. Fare gözünün yanına tonometre getirin, yaklaşık üç ila dört milimetre de fare kornea için sonda ucundan mesafetin.Bir okuma oluşturmak ve ortalama IOP'yi elde etmek için her gözden makine tarafından oluşturulan üç okuma elde etmek için ölçüm düğmesine altı kez basın. Optik sinir yarı ince kesitleri sayma ve silikon yağ enjeksiyonundan sekiz hafta sonra kurban hayvanlar üzerinde hayatta kalan aksonlar sayısallaştırma tüm montaj retina retinal ganglia hücre immünohistokimya gerçekleştirin. Fare gözlerinin 1.6 milimetreden daha büyük silikon yağ damlacıkları ile göz içi basıncı, tek bir silikon yağı enjeksiyonundan sonra sekiz hafta boyunca haftada bir kez ölçüldü.Yağı alan gözün basıncı yüksek kaldı, çoğunlukla etkili göz bebeği engelleme gösteren kontralateral kontrol gözünün basıncı iki katına. Farelerin başka bir grubunda, silikon yağı enjeksiyondan iki hafta sonra ön hazneden temizlenir. Korneanın iyileşmesi için bir hafta bekledikten sonra göz içi basıncı kontrol gözüyle aynı şekilde normale döndü.Retinagangli ler üzerinde silikon yağ kaynaklı oküler hipotansiyonun etkilerini belirlemek için, retinal tüm bağlar periferik bölgelerde kalan somata silikon yağ enjeksiyonu sonrası dramatik retina ganglion hücre ölümü gösteren RBPMS boyama ile nicel olarak ölçüldü. Optik sinir yarı ince kesitlerinde kalan aksonlar enjeksiyondan sekiz hafta sonra PBD boyama ile ölçüldü. Silikon yağa bağlı oküler hipertansiyonda büyük bir akson dejenerasyonu vardı.Hayvanlar retinadaki değişimi belirlemek için SLOOCT ile görüntülenebilir. Hayvanların görsel işlevi desen ERG ve OKR tarafından da titretilebilir. Bu oküler hipertansiyon modeli yüksek IOP indüklenen glokomcular nörodejenerasyon araştırma kolaylaştıracaktır.Ayrıca preklinik umut verici nöroprotektif tedavileri test etmek için kullanılabilir.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Medicine

Unit 1

Cardiovascular Drugs: Antihypertensive Drugs

SCIENTISTS IN ACTION

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Tersinir kolestatik Rat Modeli Yaratılış

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and ...

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

Yüksek Tuz Diyet ve Lewis Rat Kronik Böbrek Hastalığı tetikleyebilecek Nitrik Oksit Sentaz inhibisyonu ile bağlantılı 5/6th nefrektomi

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

Görme Kusurları karakterize Kronik Oküler Hipertansiyon bir Lazer-kaynaklı Fare Modeli

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Farelerde Taksanlar Farmakokinetik ve Farmakodinamik Analiz Karotis Arter İnfüzyonlar

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

Farelerde Basit Kritik ölçekli Femoral Hata Modeli

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

A Murine Model of Irreversible and Reversible Unilateral Ureteric Obstruction

Geri dönüşümsüz ve Tersinir Tek taraflı Üreterik Obstrüksiyon bir fare modeli

Obstruction of the kidney may affect native or transplanted kidneys and results in kidney injury and scarring. Presented here is a model of obstructive ...

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

Bir Manyetik microbead Oklüzyon Modeli Farelerde Glokom Oküler Hipertansiyon Bağımlı tetikleyebilecek

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

A Repetitive Concussive Head Injury Model in Mice

Farelerde Bir Tekrarlanan Concussive Kafa Travması Modeli

Despite the concussion/ mild traumatic brain injury (mTBI) being the most frequent occurrence of traumatic brain injury, there is still a lack of ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir Sıçan Modelinde Şant Cerrahisi, Sağ Kalp kateterizasyonu ve Damar Morfometri

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Kornea epitel aşınma oküler Burr ile bir Model olarak kornea için yara iyileşme

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...