Name: measurement of microtubule dynamics by spinning disk microscopy in monopolar mitotic spindles
Uploaded: 2019-11-15T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Microtubule Dynamics by Spinning Disk Microscopy in Monopolar Mitotic Spindles at JoVE.com

Ringraziamo i membri della Light Microscopy Facility, Max-Planck Institute of Experimental Medicine, per la loro consulenza e supporto di esperti.

1. Semina delle cellule HeLa
<ol><li>Preparare 2 mL di 5 soluzione fibronectina a 5 g/mL in salina tampobuffer di fosfato (PBS) e aggiungerne 450 l in ogni pozzetti di un coperchio 4 ben camerato (#1.5). Incubare lo scivolo per 15 min a 37 gradi centigradi e il 5% di CO2.</li>
	<li>Risciacquare le celle HeLa in crescita asincrona con Dulbecco's Phosped Buffered Saline (DPBS) e incubare con trypsin-EDTA (0,05%: 0,02%; w:v) per 5 min a 37 . Fermare la reazione enzimatica con l'aggiunta del Roswell Park Memoria...

Qui, descriviamo una modifica di un metodo stabilito per la prima volta da Ertych et al.44. Insieme a diverse altre modifiche, combiniamo questa tecnica di analisi della dinamica MT con l'imaging confocale a doppio disco rotante. L'uso del doppio disco rotante migliora la risoluzione delle MT in crescita riducendo la fototossicità36. Riduciamo ulteriormente il fotosbiancamento e i danni indotti dalla luce laser delle cellule passando a un reporter fluorescente a lunghezza ...

I microtubuli (MT) sono strutture altamente dinamiche che si trovano praticamente in tutte le cellule eucariotiche e in alcuni batteri1. Insieme ad actin e filamenti intermedi, scolpiscono il citoscheletro2,3. Divisione cellulare4, trasporto molecolare5, flagellir battendo6, la sensazione dell'ambiente circostante attraverso il ciglio primario7, udito (kinocio)8,9, embriogenesi10,11,12, invasione e metastasi13,14, e anche la formazione della memoria15,16,17,18, e molti altri processi si basano principalmente sulle MT. La partecipazione degli MT in tutti questi eventi sarebbe impossibile senza la loro notevole capacità di passare rapidamente dalla crescita (polimerizzazione) al restringimento (depolimerizzazione). Questa proprietà è descritta come instabilità dinamica19. La dinamicità MT è alterata in molte condizioni patologiche20,21,22. Quindi, determinare la natura di questa proprietà può aiutare a comprendere i meccanismi della malattia e successivamente il loro trattamento.
È stata sviluppata una lunga lista di metodi per l'analisi delle dinamiche MT, la maggior parte dei quali si basa noto su tecniche di imaging23. Inizialmente, sono stati utilizzati microscopi a luce a campo largo per osservare la formazione di polimeri di tubulina in vitro24. La scoperta di proteine di legame finale (EB) che si raccolgono a MT plus-end e lo sviluppo di metodi per etichettare fluorescenti proteine ha permesso di osservare il comportamento delle MT direttamente nelle cellule viventi con ampi campi e microscopi a confocalizzazione della confraternita25,26,27. Una proteina EB è la proteina di legame finale 3 (EB3)28; sovraesprimendo e tracciando EB3 fuso a una proteina fluorescente, MT più tassi di assemblaggio end possono essere determinati29,30.
La microscopia a fluorescenza a scansione laser confocale (CLSM) viene spesso utilizzata per seguire la dinamica MT. Tuttavia, questa tecnica di imaging rappresenta un alto rischio di fototossicità e fotosbiancamento, due processi indesiderati per l'imaging campione di cellule vive e dim31. Al fine di ottenere un migliore rapporto segnale-rumore, la potenza del laser e la durata dell'esposizione dovrebbero essere sufficientemente elevate senza danneggiare i campioni, e questo richiede di sacrificare la risoluzione in cambio di velocità. Un'alternativa adatta al CLSM è la microscopia a disco rotante32. Questa modalità di imaging si basa sull'uso di un disco Nipkow33, che consiste in un disco in movimento recante una serie di fori, e funziona in modo equivalente a molti microscopi CLS che immaginino lo stesso campione contemporaneamente34. Pertanto, la luce del laser illuminerà diverse regioni del campione contemporaneamente, ma manterrà la natura confocale. Il disco Nipkow, quindi, permette di ottenere immagini simili a CLSM ma più velocee e utilizzando meno potenza laser. Il disco Nipkow è stato ulteriormente migliorato da Yokogawa Electric, che ha introdotto un secondo disco con una serie di microlenti su di esso che dirigere individualmente la luce in un rispettivo foro stenopeico, riducendo ulteriormente la fototossicità e il fotosbiancamento35. Così, la microscopia a scansione laser su disco rotante è diventata un metodo di scelta per l'imaging delle cellule vive, e permette di ottenere immagini con alto rapporto segnale-rumore ad alta velocità31,36, che è fondamentale per risolvere segnali come quelli provenienti dalle estremità MT in rapida crescita.
Le dinamiche MT differiscono temporaneamente. Ad esempio, gli MT mitotici sono più dinamici di quelli interfase37,38. Analogamente, sono state osservate differenze nel tasso di crescita e nel restringimento anche all'interno della stessa fase del ciclo cellulare, come la mitosi39,40. Pertanto, per evitare la falsa raccolta dei dati, la misurazione delle dinamiche MT dovrebbe essere limitata a una stretta finestra di tempo durante il ciclo cellulare. Ad esempio, la misurazione della dinamica di MT nella prometafase può essere ottenuta trattando le cellule con dimetilnastronastron (DME), un analogo monastrolo che inibisce la cinematosina Eg541 e impedisce la formazione del mandrino mitotico bipolare42. L'inibizione delle cellule alla prometafase con l'inibitore Di Eg5 DME e altri derivati monastrol non influisce sulla dinamica MT43,44,45, che rende DME uno strumento utile per studiare la dinamica MT sia nelle cellule fisse che vive44.
Qui combiniamo il metodo di analisi della dinamica MT nelle cellule prometafase descritto da Ertych et al.44 con doppia imaging del disco rotante. Questo metodo consente di misurazione della dinamica MT nelle cellule prometaphase raccolte da un singolo piano focale con una maggiore frequenza di imaging, ma senza fotosbiancamento e fototossicità minima. Inoltre, come reporter fluorescente, utilizziamo proteine fluorescenti tomato (tdTomato) che hanno migliorato luminosità e fotostabilità rispetto alla proteina fluorescente verde (EGFP) ed è entusiasta di luce a bassa energia46. Pertanto, tdTomato richiede meno potenza laser per l'eccitazione ed è meno fototossico. Complessivamente, miglioriamo ulteriormente il metodo riducendo la fototossicità e migliorando la risoluzione e post-elaborazione necessarie per l'analisi delle dinamiche MT. Inoltre, creiamo una base per le modifiche future del metodo combinandolo con altre tecniche di sincronizzazione.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:849px;" width="849">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Dimethylenastron</td>
			<td style="width:123px;">Merck</td>
			<td style="width:344px;">324622</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DMEM w/o phenol red</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31053-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Fetal bovine serum</td>
			<td>Biochrom</td>
			<td>S0415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Fibronectin Bovine Plasma</td>
			<td>Merck</td>
			<td>F4759</td>
			<td>Sterile powder</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">GlutaMAX</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050-038</td>
			<td>Stable glutamine substitutive</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">jetPRIME</td>
			<td>Polyplus</td>
			<td>114-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">EB3-TdTomato</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>plasmid #50708</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">RPMI 1640</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>61870-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Trypan Blue</td>
			<td>Merck</td>
			<td>T8154-20ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Trypsin/EDTA solution</td>
			<td>Biochrom</td>
			<td>L2143</td>
			<td>0.05% / o.02 % w/o calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">&#181;-slide</td>
			<td>Ibidi</td>
			<td>80426</td>
			<td>4-well slide with #1.5 coverslip</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Eclipse Ti Inverted microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Objective</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>MRD01991</td>
			<td>CFI Apo TIRF 100XC Oil</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">ACAL Laser Excahnger</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>Laser box. 405, 458, 488, 514, 561 and 647nm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Spinning disk module</td>
			<td>Andor</td>
			<td>CSU-W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Camera</td>
			<td>Andor</td>
			<td>iXon Ultra 888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Environmental Chamber</td>
			<td>Okolab</td>
			<td></td>
			<td>Dark chamber equipped with CO2 supply, tmeperature control and humidifier</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HeLa Cells</td>
			<td>DSMZ</td>
			<td>ACC-57</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">NIS Elements v4</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>Spinning disk microscope. Acquisition Software</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">MATLAB</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td>Computing environment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Prism 8</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td></td>
			<td>Statistical analysis and display software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurement of microtubule dynamics by spinning disk microscopy in monopolar mitotic spindles

Descriviamo una modifica di un metodo stabilito per determinare la dinamica dei microtubuli nelle cellule viventi. Il protocollo si basa sull'espressione di un marcatore geneticamente codificato per le estremità positive dei microtubuli (EB3 etichettato con proteina fluorescente tdTomato) e dell'imaging ad alta velocità, ad alta risoluzione e a cellule vive utilizzando la microscopia confocale del disco rotante. La sincronizzazione del ciclo cellulare e l'aumento della densità dei microtubuli si ottengono inibendo la separazione centrosomica nelle cellule mitotiche e l'analisi della crescita viene eseguita utilizzando il software U-Track open-source. L'uso di una proteina fluorescente luminosa e rossa, in combinazione con la minore potenza laser e la riduzione del tempo di esposizione necessaria per la microscopia su disco rotante riduce la fototossicità e la probabilità di artefatti indotti dalla luce. Ciò consente di imaging di un maggior numero di cellule nella stessa preparazione, mantenendo le cellule in un mezzo di crescita in condizioni di coltura standard. Poiché l'analisi viene eseguita in modo automatico supervisionato, i risultati sono statisticamente robusti e riproducibili.

Seguendo il protocollo descritto nella figura 1A, il plasmidp pEB3-tdTomato è stato espresso in modo temporaneo in celle HeLa in crescita asincrona. Le cellule sono state sincronizzate 48 h dopo la trasfezione a prometafase attraverso il trattamento DME(Figura 1B). Questo passaggio ha assicurato che la misurazione della dinamica MT è sempre stata eseguita nella stessa fase del ciclo cellulare. I filmati time-lapse sono stati ulteriormente elaborati e analizzat...

Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Microtubule Dynamics by Spinning Disk Microscopy in Monopolar Mitotic Spindles at JoVE.com

Measurement of Microtubule Dynamics by Spinning Disk Microscopy in Monopolar Mitotic Spindles

Qui presentiamo un metodo robusto e dettagliato di analisi delle dinamiche dei microtubuli nelle cellule sincronizzate nella prometafase utilizzando la microscopia confocale del disco di filatura a cellule vive e l'elaborazione delle immagini basata su MATLAB.

Misurazione della microtubule Dynamics mediante microscopia disco rotante in spindle mitotici monopolari

We describe a modification of an established method to determine microtubule dynamics in living cells. The protocol is based on the expression of a ...

Quello che presentiamo qui è un metodo robusto e semplice per analizzare la dinamica dei microtubuli utilizzando l'imaging confocale del disco rotante a cellule vive nelle cellule sincronizzate in prometafase, e le immagini vengono successivamente analizzate su una piattaforma basata su MATLAB. L'uso di proteine fluorescenti spostate verso il rosso in combinazione con la microscopia a disco rotante riduce la fototossicità. Pertanto, un numero maggiore di celle può essere immaginato all'interno della stessa preparazione.La dinamicità dei microtubuli è alterata in un gran numero di condizioni patologiche. Pertanto, comprendere la regolazione e il comportamento delle dinamiche dei microtubuli in tali processi può aiutarci a comprendere il meccanismo della malattia e, infine, sviluppare terapie per compensarle. E il metodo è anche di lusso, quindi potrebbe potenzialmente essere applicato in uno sforzo di scoperta di farmaci.Il metodo può essere modificato modificando il protocollo di desincronizzazione della fluorescenza e ottenendo cellule da diverse fasi del ciclo cellulare. Questo può essere utile quando si vagliano i farmaci contro i microtubuli e si identificano i difetti sulle cellule divisorie e non divisorie. È necessario ottimizzare il protocollo di trasfezione e la densità di semina per ogni tipo di cella.Il livello di espressione di EB3 dovrebbe essere basso, al fine di rilevare singoli microtubuli in crescita. Iniziare risciacquando le cellule HeLa in crescita asincrona in DPBS, quindi incubarle con tripside-EDTA per cinque minuti, a 37 gradi Celsius. Interrompere la tripsininazione aggiungendo il mezzo RPMI-1640 integrato con FCS inattivato al calore del 10% con un rapporto tre a uno, il trypsin-EDTA aggiunto.Calcola la concentrazione delle cellule secondo le indicazioni manoscritte e semina 50.000 cellule in ogni pozzo di un coverslip preparato e camerato. Restituire il coverslip all'incubatore e far crescere le cellule per 24 ore a 37 gradi Celsius e 5% di anidride carbonica. Il giorno successivo, rimuovere le cellule dall'incubatrice e aggiungere 100 microlitri di miscela di trasfezione in ogni pozzo.Riportare le cellule nell'incubatrice e dopo quattro ore di incubazione integrare le cellule con mezzo fresco e incubare ulteriormente per 20 ore. Preparare una soluzione micromolare da 2,5 di dimetilnatrone, o DME, in DMEM privo di fenolo rosso, integrata con 10%FCS e due l-glutammina millimolare. Sostituire il mezzo di crescita nel coverslip camerato con il mezzo di crescita DME e riportare le cellule nell'incubatore.Dopo 3,5 ore di incubazione, trasferire le cellule al microscopio montando il coverslip camerato in una camera ambientale impostata a 37 gradi Celsius e al 5% di anidride carbonica, con pannelli scuri per l'imaging. Quindi continuare l'incubazione per un totale di quattro ore. Eseguire l'imaging time lapse su un microscopio invertito con un'apertura numerica 100X, 1.49, obiettivo di immersione dell'olio, un sistema confocale a doppio disco e un affidabile sistema di messa a fuoco automatica.Definire i parametri di imaging come descritto nel manoscritto testuale. Trovare una cellula in propase e mettere a fuoco nel piano Z corrispondente al centro del mandrino mitotico monopolare. Quindi acquisire immagini ogni 5 secondi, per un totale di un minuto, senza binning e senza illuminazione tra le esposizioni.Inizia caricando il software di analisi numerica e aggiungendo la cartella U-track V2.2.0 nel percorso di ricerca software, chiamato GUI del selettore di film, dalla finestra di comando. Quindi importare i file non elaborati generati dal software di acquisizione delle immagini. Immettere manualmente l'apertura numerica dell'obiettivo e l'intervallo di tempo utilizzato per l'imaging.Una volta caricate tutte le immagini, salvate la serie time lapse immessa come filmato selezionando Salva come elenco di film e l'opzione traccia u sul lato destro della finestra di dialogo. Selezionate i plus-end dei microtubuli dal menu a comparsa, quindi fate clic su ok, che apre una nuova finestra di dialogo per determinare i parametri dei tre passaggi dell'analisi. Per il primo passaggio, fare clic su Impostazioni e selezionare rilevamento comete dal menu a discesa.Definire i parametri per la differenza tra il filtro gaussiano e la segmentazione dello spartiacque, come descritto nel manoscritto. Quindi selezionare Applica impostazioni a tutti i filmati e fare clic su Applica. Per il secondo passaggio, selezionare la dinamica plus-end del microtubulo e utilizzare le opzioni di impostazione per definire i valori per il collegamento, la chiusura dello spazio, l'unione e la divisione e le funzioni del filtro di Kalman, in base al manoscritto di testo.Per problemi di dimensionalità, scegliete due dal menu a discesa e usate cinque fotogrammi per la chiusura dello spazio massimo e tre fotogrammi per la lunghezza minima dei segmenti di traccia fin dal primo passo. Come in precedenza, selezionare Applica impostazioni a tutti i filmati e fare clic su Applica. Per il terzo passaggio, scegliete la classificazione delle dinamiche dei microtubuli come metodo di analisi della traccia e definite i parametri tramite il pulsante di impostazione.Selezionare le caselle per rimuovere le tracce all'inizio e alla fine del filmato ed effettuare istogrammi statistici. Nell'elenco a discesa, selezionate l'utilizzo di due o tre fotogrammi prima dello spazio in avanti e del 95° percentile della distribuzione della velocità dello spazio avanti, rispettivamente per la riclassificazione avanti e indietro. Una volta definiti tutti i parametri, selezionare applica controllo/deseleziona a tutti i filmati ed eseguire tutte le caselle dei filmati dalla finestra u-track dei riquadri di controllo, quindi premere Esegui.Un messaggio viene visualizzato una volta completata l'elaborazione del filmato. Il pEB3-tdTomato plasmide è stato transiently espresso nelle cellule HeLa. Le cellule sono state sincronizzate con il trattamento DME.Sono stati analizzati i filmati time lapse della crescita dei microtubuli e sono state tracciate la velocità di crescita e la dinamicità risultanti. I parametri descritti per influenzare l'analisi, ad esempio la lunghezza massima dello spazio e il fattore di restringimento massimo, sono stati modificati per lo stesso set di filmati time lapse. Sono stati calcolati i corrispondenti valori di velocità e dinamicità della crescita.Sebbene la velocità di crescita risultante non sia stata influenzata in modo significativo, la dinamicità era diversa quando è stata modificata la lunghezza massima dello spazio. In tutti e tre i casi, il rilevamento di sottotracciati di microtubuli era simile, ma la ricostruzione delle traiettorie mt complete è stata influenzata principalmente quando la lunghezza massima dello spazio è stata impostata su 15. Al fine di valutare se le condizioni di imaging interferivano con il comportamento dei microtubuli, la prima e la seconda metà della serie time lapse sono state analizzate separatamente e la corrispondente velocità di crescita e dinamicità sono state confrontate.Come previsto, non sono state rilevate differenze significative. È importante tenere a mente che poiché le cellule sono sincronizzate in prometafase, la densità del microtubulo è molto alta. Pertanto, è necessario impostare i parametri dell'analisi con molta attenzione, non identificare erroneamente diversi microtubuli.La misurazione della dinamica dei microtubuli con questo metodo può essere confrontata con studi su altri bersagli biologici direttamente, indirettamente, regolando i microtubuli.

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Micro-circulation Measurement in Skeletal Muscle by Intra-vital Microscopy

In vivo micro-circolazione di misura nel muscolo scheletrico da Intra-vitale Microscopia

BACKGROUND: Regulatory factors and detailed physiology of in vivo microcirculation have remained not fully clarified after many different modalities of ...

Ricerca

Biologia

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

Studiare Checkpoint mitotica illustrando un comportamento dinamico delle proteine ​​cinetocoro e Motion cromosoma in Living<em&gt; Drosophila</em&gt; Embrioni sinciziale

The spindle assembly checkpoint (SAC) mechanism is an active signal, which monitors the interaction between chromosome kinetochores and spindle ...

Live Cell Imaging of Primary Rat Neonatal Cardiomyocytes Following Adenoviral and Lentiviral Transduction Using Confocal Spinning Disk Microscopy

Imaging cellulare dal vivo di primaria ratto neonato Cardiomyocytes seguito Adenoviral e lentivirali trasduzione Uso confocale Spinning Disk Microscopia

Primary rat neonatal cardiomyocytes are useful in basic in vitro cardiovascular research because they can be easily isolated in large numbers in a single ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo inseguimento 4-dimensionale di emopoietiche staminali e progenitrici celle di topo adulto cranica di Midollo Osseo

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Using plusTipTracker Software to Measure Microtubule Dynamics in Xenopus laevis Growth Cones

Using plusTipTracker Software to Measure Microtubule Dynamics in Xenopus laevis Growth Cones

Utilizzo plusTipTracker software per misurare Microtubulo Dynamics in<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; coni di crescita

Microtubule (MT) plus-end-tracking proteins (+TIPs) localize to the growing plus-ends of MTs and regulate MT dynamics1,2. One of the most well-known and ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

Ad alta risoluzione Time-lapse imaging e analisi automatizzata dei microtubuli Dynamics in Living ombelicale umano cellule endoteliali Vena

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

Reconstitution of Basic Mitotic Spindles in Spherical Emulsion Droplets

Ricostituzione di base Mitotic mandrini sferici Emulsione goccioline

Mitotic spindle assembly, positioning and orientation depend on the combined forces generated by microtubule dynamics, microtubule motor proteins and ...

Simultaneous Measurement of Mitochondrial Calcium and Mitochondrial Membrane Potential in Live Cells by Fluorescent Microscopy

Misurazione simultanea di mitocondriale calcio e mitocondriale potenziale di membrana in cellule vive di Microscopia fluorescente

Apart from their essential role in generating ATP, mitochondria also act as local calcium (Ca2+) buffers to tightly regulate intracellular Ca2+ ...

High-resolution Imaging and Analysis of Individual Astral Microtubule Dynamics in Budding Yeast

Ad alta risoluzione Imaging e analisi dei singoli microtubuli astrali Dynamics in germogliamento lievito

Dynamic microtubules are fundamental to many cellular processes, and accurate measurements of microtubule dynamics can provide insight into how cells ...

Examination of Mitotic and Meiotic Fission Yeast Nuclear Dynamics by Fluorescence Live-cell Microscopy

Esame della dinamica nucleare del lievito di fissione mitotico e meiotico da fluorescenza microscopia a celle vive

Live-cell imaging is a microscopy technique used to examine cell and protein dynamics in living cells. This imaging method is not toxic, generally does ...